Proximate Biochemical Composition and Mineral Content of Edible Species from the Cystoseira Genus
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CATARINA VIZETTO GUERREIRO DUARTE BIOMEDICAL PROPERTIES OF CYSTOSEIRA SPECIES: INSIGHTS INTO NUTRA- AND PHARMACEUTICAL APPLICATIONS 2016 CATARINA VIZETTO GUERREIRO DUARTE BIOMEDICAL PROPERTIES OF CYSTOSEIRA SPECIES: INSIGHTS INTO NUTRA- AND PHARMACEUTICAL APPLICATIONS PhD in Biological Sciences Specialty in Cellular and Molecular Biology Thesis supervised by Prof. Dr João Varela Prof. Dr Fernando Albericio Prof. Dr Amélia Pilar Rauter UNIVERSIDADE DO ALGARVE FACULDADE DE CIÊNCIAS E TECNOLOGIA 2016 BIOMEDICAL PROPERTIES OF CYSTOSEIRA SPECIES: INSIGHTS INTO NUTRA- AND PHARMACEUTICAL APPLICATIONS Declaração de autoria de trabalho Declaro ser a autora deste trabalho, que é original e inédito. Autores e trabalhos consultados estão devidamente citados no texto e constam na listagem de referências incluída. Copyright – Catarina Vizetto Guerreiro Duarte. Universidade do Algarve. Faculdade de Ciências e Tecnologia. “A Universidade do Algarve tem o direito perpétuo e sem limites geográficos, de arquivar e publicar este trabalho através de exemplares impressos reproduzidos em papel ou de forma digital, ou por qualquer outro meio conhecido ou que venha a ser inventado, de o divulgar através de repositórios científicos e de admitir a sua cópia e distribuição com objetivos educacionais ou de investigação, não comerciais, desde que seja dado crédito ao autor e editor.” iii This work was funded by the Portuguese Foundation for Science and Technology (FCT) through the PhD fellowship (Grant SFRH/BD/81425/2011). v ACKNOWLEDGMENTS Pela primeira vez sentimo-nos desassossegados. As palavras ganham um novo sentido quando não se tornam previsíveis; ganham nova vida quando propõem olhares e despertam perplexidades, quando inquietam o pensamento. E tornam-se sempre insuficientes quando com elas queremos dizer o que nos vai para lá da alma. Como agora. Esta Tese resulta não apenas de extensas horas de estudo, reflexão e trabalho durante as diversas etapas que a constituem. É igualmente o culminar de um objetivo académico a que me propus e que não seria possível sem a ajuda de um vasto número de pessoas. Estou especialmente agradecida ao Prof. Dr. João Varela, orientador principal desta tese, em primeiro lugar por me ter acolhido no grupo MarBiotech e por me ter dado a possibilidade de realizar o presente trabalho. Mas o meu agradecimento vai para muito além disso. Quero agradecer por ser uma pessoa que realmente se preocupa com os alunos, não só a nível académico como a nível pessoal. Toda a sua ajuda, motivação e apoio na superação dos diversos obstáculos foram imprescindíveis na realização deste trabalho. Muito obrigada! Estou também agradecida aos meus orientadores Prof.ª Dra. Amélia Pilar Rauter e Prof. Dr. Fernando Albericio por me terem acolhido nos respetivos grupos de trabalho e me terem proporcionado a oportunidade, as condições necessárias para a elaboração deste trabalho e por terem tempo para se reunirem comigo e estarem interessados em discutir e orientar o trabalho. À vossa hábil direção, instrução e apoio, o meu muito obrigado. Quero igualmente agradecer à Dra. Luísa Custódio e à Prof.ª Dra. Luísa Barreira que, não sendo minhas orientadoras “no papel”, foram exatamente isso na prática sempre discutindo ideias e possibilidades, corrigindo artigos e debatendo resultados e perspectivas futuras. Obrigado por sempre me terem apoiado, muito para além das obrigações profissionais. O vosso apoio, críticas e sugestões foram indispensáveis na construção deste trabalho. vii Cheguei ao grupo MarBiotech no CCMAR, tendo acabado de concluir a minha tese de mestrado no Centro de Patogénese Molecular, no iMed – FFUL (“Reactivity of human fetal and adult immortalized hepatocytes to potentially toxic bilirubin and bile acid species”). Senti como se tivesse sido recebida de braços abertos numa família. Literalmente. Tendo relativamente longe a minha própria família, eles fizeram esse papel, sendo acarinhada e chamada à atenção pelo Professor e Professora como se estivessem no papel dos meus pais e pela Luísa sempre sábia, resolvida e prática como uma irmã mais velha, com a máxima “não existem problemas, só existem soluções”. E assim começou uma bolsa de técnica de investigação (BTI) no projeto SEABIOMED onde obtivemos os resultados preliminares necessários para surgir a ideia de uma tese de doutoramento, a qual ganhei no segundo ano que concorri. No primeiro ano que concorri não ganhei; trabalhei durante esse ano para construir um currículo melhor e voltei a concorrer no ano seguinte depois duma insistência feroz por parte do Hugo Pereira e Luísa Custódio. Eles não me deixaram desistir quando eu estava com receio de voltar a concorrer e “passar a vergonha” de não ganhar outra vez. No final, fiquei em 3º lugar a nível nacional quando concorri nesse ano graças à vossa insistência e, portanto, muito obrigada!! Pouco tempo depois juntou-se ao nosso grupo também com bolsa de doutoramento a Carolina Bruno de Sousa, companheira neste processo todo, desde a colheita das algas (chegámos várias vezes a fazer colheitas às 6 da manhã com a água gelada por ser quando a maré estava mais baixa), até vários dias de escrita em casa da Carolina onde ela me acolheu durante várias noites de trabalho. Obrigada por todo o companheirismo e apoio! Agradeço também aos colegas do grupo MarBiotech, Hugo Pereira, Dr. Katkam, Maria Rodrigues, Catarina Pereira, Ivo e Eunice, Cristina Polo, Eva Resek, Vlad Enache, Luís, Marta, Peter, Tamára, Mariana Cardoso e todos os estudantes que passaram pelo laboratório do MarBiotech. Obrigada pela boa disposição e sentido de entreajuda que fazem do nosso local de trabalho um lugar onde existe prazer em estar. Gostava de deixar aqui uma lembrança especial ao Fernando Soares, um estudante impecável que infelizmente faleceu poucos anos depois de ter realizado a tese de mestrado connosco. viii Aos restantes grupos e colegas do CCMAR gostaria de agradecer a forma acolhedora como me receberam e como sempre ajudaram quando necessário, fosse algum reagente, equipamento ou mesmo espaço de bancada! Obrigada também aos grupos do CBMR pelas mesmas razões, havendo sempre um espírito de entreajuda na Universidade do Algarve, e obrigada em particular ao Prof. Nuno Santos por nos permitir realizar as análises de Western blot no seu laboratório e pela constante disponibilidade. Quero igualmente agradecer aos que contribuíram directamente na identificação e amostragem das algas nomeadamente Javier Cremades Ugarte, Aschwin Engelen, Ricardo Bermejo, Rita Jacinto, Mafalda Tavares e Tânia Pereira. Ao grupo “PharmaMar” e “Combinatorial chemistry for the discovery of new compounds” do IRB – Institute for Research in Biomedicine (Barcelona), em particular ao Gerardo Acosta, José Pastor, Miriam Royo, Carolina, Daniel Pulido do laboratório de Rodolfo Lavilla (Unitat de química combinatória - Laboratori biosyner), Marta Paradís (ANIMOOOO!), Belen, Iván Ramos, Jesús Herraiz, Júlia Pindado e às pessoas que se tornaram amigos mais próximos Carolina Velasco, Alvaro Siano, Brunello Nardone e Salvatore Bongarzone com quem ainda mantenho contacto ativo hoje em dia. Um muito obrigada em especial para o meu co-orientador o Prof. Dr. Fernando Albericio por ter possibilitado o contacto com este instituto incrível. Ao grupo “Cancer Drug Resistance” do IPATIMUP – Instituto de Patologia e Imunologia Molecular da Universidade do Porto, nomeadamente Prof. Helena Vasconcelos, Raquel Lima, Diana Sousa, Vanessa Rodrigues e Filipa Reis por me terem recebido neste grupo, permitido a colaboração com esta instituição e ajudado na realização de mais testes biológicos que enriqueceram este trabalho. Ao “Carbohydrate Chemistry Group” do Centro de Química e Bioquímica (CQB) da Faculdade de Ciências da Universidade de Lisboa (FCUL), em especial à Prof. Amélia Pilar Rauter e à Drª Alice Martins por me terem apoiado não só durante a minha estadia no grupo como em todo o percurso desde que as conheci. Obrigada à Catarina Dias, Ana Marta Matos, Vasco Cachatra, João Pedro Pais, Linda Thaï, Nuno Xavier, Andreia, ix Daniela, Vânia e Rafael por sempre me ajudarem em tudo o que necessitei e pelo bom ambiente que se vive neste grupo de investigação. Um obrigada muito especial ao Prof. João Lago da Universidade de São Paulo no Brasil por me ter auxiliado numa altura que estava a desesperar com a identificação das moléculas a partir do zero e, graças ao seu conhecimento, experiência e disponibilidade, conseguimos avançar neste trabalho. Quero também agradecer a sua constante motivação e boa disposição! Obrigada a todos os co-autores que ajudaram no trabalho experimental, escrita e correcções dos artigos. Obrigada ao repórter Hugo Rodrigues e à revista SUL INFORMAÇÃO pela divulgação na comunicação social de parte do trabalho aqui apresentado. Aos meus amigos de longa data pois sempre me apoiaram e fizeram sorrir nos bons e maus momentos. Não posso nem consigo enumerar todos os que deram tantas diferentes contribuições ao longo deste processo. Muito obrigada! Chegando ao final desta reflexão sobre os últimos anos, não podia deixar de agradecer às pessoas mais importantes da minha vida. À minha família. À minha mana Fernanda, obrigada por partilhares a minha vida desde sempre, me ajudares a crescer e a me tornar no que sou e por me apoiares de forma incondicional. Sem ti, não era eu. Ao meu cunhado Fernando, obrigado pelo apoio e por sempre me fazer ver a vida pelo lado otimista. Aos meus sobrinhos, os meus amores, Tomás e Diogo, um muito obrigada por fazerem-me reviver a infância e darem um novo sentido à minha vida. Aos meus avós, João e Florinda, que faleceram enquanto eu estava no Algarve a realizar esta tese, por sempre me apoiarem e ajudarem em tudo. Adoro-vos e estão sempre presentes no meu coração e na minha memória! x Finalmente, quero agradecer aos meus queridos pais, Rui e Fátima, a quem dedico esta tese, tudo o que sempre fizeram por mim. Por me incutirem o amor ao estudo, à ciência e à realização profissional, entre outros valores que regem a minha vida. Obrigado por toda a vossa ajuda, pelo vosso amor, compreensão e carinho. O meu obrigado vai obviamente para além do que as palavras conseguem exprimir.