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Efecto protector de hoja de frijol en el desarrollo de hígado graso no alcohólico Becerril Campos Adriana Araceli1, Ocampo Anguiano Perla Viridiana1, Ahumada Solórzano1* 1 Facultad de Ciencias Naturales, Universidad Autónoma de Querétaro *[email protected] Resumen Abstract La creciente prevalencia de la enfermedad de The increasing prevalence of non-alcoholic fatty hígado graso no alcohólico motiva a buscar liver disease motivates us to constantly search for constantemente herramientas para su prevención tools for its timely prevention. Changes in diet, oportuna. Cambios en la alimentación, en especial especially the inclusion of phytochemicals, have la inclusión de fitoquímicos han sido estudiados been studied as bioactive compounds, to help como compuestos bioactivos, para ayudar a combat oxidative stress, insulin resistance, combatir el estrés oxidativo, resistencia a la inflammation and lipid accumulation; all of the insulina, inflamación y acumulación de lípidos; above are characteristic of nonalcoholic fatty todo lo anterior resultan características propias del liver. Green leaves such as quelites, among which hígado graso no alcohólico. Las hojas verdes the bean leaf is found, have been reported as an como los quelites, dentro de los que se encuentra important source of phytochemicals. The aim of la hoja de frijol han sido reportadas como fuente the present work is to evaluate the effect of the importante de fitoquímicos. El objetivo del bean leaf in the prevention of non-alcoholic fatty presente trabajo es evaluar el efecto de la hoja de liver. 10 % bean leaf was included in the high-fat frijol en la prevención de hígado graso no and fructose diet of male Wistar rats; after 6, 14 alcohólico. Se incluyó en la alimentación alta en and 21 weeks, serum, anthropometric parameters grasa y fructosa de ratas Wistar macho 10 % de and postprandial response to glucose were hoja de frijol; tras 6, 14 y 21 semanas se evaluated. As results, it was obtained that the evaluaron parámetros séricos, antropométricos y inclusion of bean leaf reduced the weight gain by respuesta postprandial a la glucosa. Como 16 %; 11.9 %, the AC / TC ratio; 24.4 %, BMI; resultados se obtuvo que inclusión de hoja de 14 %, postprandial glycemia; 14.3 %, total frijol redujo 16 % la ganancia de peso; 11.9 %, el cholesterol; 10.6 %, LDL; 17.5 %, triglycerides; índice AC/TC; 24.4 %, IMC; 14 %, glucemia 24.1 %, triglycerides / HDL index, and 20.4 %, postprandial; 14.3 %, colesterol total; 10.6 %, leukocytes. With all the above, it was concluded LDL; 17.5 %, triglicéridos; 24.1 %, índice that the consumption of 10 % bean leaf in triglicéridos/HDL, y 20.4 %, leucocitos. Con todo conjunction with a diet high in fat and fructose lo anterior, se concluyó que el consumo de 1 % de can prevent metabolic alterations. hoja de frijol en conjunto con una dieta alta en Key words: NAFLD, fatty liver, obesity, fructose, saturated grasa y fructosa pueden prevenir las alteraciones fat, green leaves, bean, phytochemicals metabólicas Palabras clave: NAFLD, hígado graso, obesidad, fructosa, grasa saturada, hojas verdes, frijol, fitoquímicos 1 | Revista Nthe, Edición especial, julio 2021: pp. 01-11, ISSN: 2007-9079 Efecto protector de hoja de frijol en el desarrollo de hígado graso no alcohólico Introducción desarrollar estrategias para la prevención y La enfermedad por hígado graso no alcohólico tratamiento del NAFLD en las etapas iniciales. ((NAFLD, por sus siglas en inglés) tiene una Los fitoquímicos han sido estudiados como prevalencia mundial del 25.24 % (Younossi et al., compuestos bioactivos para prevenir y tratar 2016). En México, debido al elevado número de enfermedades metabólicas. En la hoja de frijol casos de obesidad, síndrome metabólico, (Phaseolus vulgaris, variedad flor de mayo enfermedades cardiovasculares y diabetes Eugenia) por cada 100 gramos de materia seca se mellitus tipo 2 son factores estrechamente encontraron 2394.9 mg de fenoles totales, 483.7 relacionados con su aparición y evolución; por mg de taninos, 51.5 mg de antocianinas, 982.8 mg ello, la prevalencia sobrepasará el 50 % (Bernal- de flavonoides(Ocampo-Anguiano, s/f). Además Reyes et al., 2019). de 24.04 g de proteína, 46.15 g de hidratos de carbono, 9.3 g de fibra cruda y 1.33 g de lípidos. La NAFLD es una enfermedad metabólica En comunidades del Estado de México, la hoja de hepática, caracterizada por la acumulación de frijol (HF) es comercializada y consumida en grasa macrovesicular en al menos el 5 % de los forma de quelites. Sin embargo, es una tradición hepatocitos; en ausencia de consumo excesivo de que se está perdiendo. Analizar el posible efecto alcohol, medicamentos hepatotóxicos u otras sobre la salud de la HF permitirá revalorizar y enfermedades hepáticas(Bernal-Reyes et al., conservar estas tradiciones (Linares, Bye, Ortega 2019; Younossi et al., 2016). Day y James en & Arce, 2017). 1998 propusieron la teoría de los dos hits para explicar su fisiopatología. El primer hit o En un modelo in vivo expuesto a dieta alta en esteatosis consiste en la acumulación de grasa sin grasa saturada de origen animal y fructosa evidencia de daño hepatocelular (Chalasani et al., (consumo de alimento durante período luz, 2018). Sin embargo, esta acumulación incrementa 8h/16h ayuno) se evalúo el efecto de la inclusión las demandas energéticas lo que sobrepasa la de 10 % de HF. Los individuos mostraron una capacidad de las enzimas antioxidantes (estrés disminución en resistencia a la insulina (índice oxidativo). Con lo anterior, se presentan efectos HOMA-IR), hipertrigliceridemia y acumulación negativos asociados a la acumulación de grasa de lípidos hepática (28 %, 22 % y 20 %, hepática (lipotoxicidad) (Engin, 2017) y al respectivamente) (Becerril-Campos, Luna- segundo hit. En la esteatohepatitis (segundo hit) Moreno, Wischin-Fuentes, García-Gasca & hay evidencia de daño hepatocelular, inflamación, Ahumada Solórzano, 2017). Sin embargo, se resistencia a la insulina, endotoxemia e incluso desconoce el efecto de la HF a largo plazo y en fibrosis (Yu, Marsh, Hu, Feng & Wu, 2016). La ausencia de restricción de alimento. Por lo que el lipotoxicidad juega un papel importante en la presente proyecto busca evaluar el efecto del progresión de la enfermedad y el riesgo de consumo de la hoja de frijol en la prevención de presentar cirrosis o hepatocarcinoma (Mendez- NAFLD. Sanchez et al., 2018). Materiales y métodos La esteatosis es asintomática y curable, pero la Obtención de la hoja de frijol esteatohepatitis es refractaria a los tratamientos La HF de Phaseolus vulgaris (variedad flor de (Yan et al., 2020), por lo que es importante mayo Eugenia) se obtuvo a los 65 días en el 2 | Revista Nthe, Edición especial, julio 2021: pp. 01-11, ISSN: 2007-9079 Adriana Araceli Becerril Campos, et al. Nthe, Edición especial, pp. 01-11, 2021 campo experimental Amazcala. Una vez limpias circunferencia abdominal/circunferencia torácica las hojas (5.5-10 cm ancho x 7.5-10.5 cm (AC/TC) y la ingesta en kcal/día (Novelli et al., longitud), se secaron en el horno a 40°C hasta 2007). Durante la IPGTT se administró 2 g/kg de obtener peso constante. La materia seca se molió peso de glucosa al 20 % por vía intraperitoneal y tamizó (2 mm de espesor) para obtener una harina de HF. Permanece a temperatura ambiente (Ghezzi et al., 2012), la glucemia se midió con el y oscuridad hasta su utilización. glucómetro Accu-Check Active® en los tiempos 0, 30, 60, 90 y 120 min. Modelo animal Se utilizaron 11 ratas Wistar macho por grupo de Tras la eutanasia, el suero fue almacenado a - 190 ± 20 g. Los animales se obtuvieron del 80°C hasta su análisis. Se determinaron las bioterio del INB-UNAM campus Juriquilla, luego concentraciones de glucosa, colesterol total, se mantuvieron en la Facultad de Ciencias lipoproteínas de alta densidad (HDL), Naturales (UAQ), en condiciones controladas de lipoproteína de baja densidad (LDL), temperatura (22 ± 3°C), humedad relativa (60 ± 5 triglicéridos, proteínas totales, albúmina, %), ciclo regulado de 12 h de luz/oscuridad. La globulinas en el analizador clínico Mindray® bs- alimentación y el agua fueron ad libitum. Este 120 con reactivos Spinreact® mediante ensayos proyecto cuenta con aprobación por el comité de colorimétricos-enzimáticos. La biometría bioética de la Facultad de Ciencias Naturales hemática se analizó mediante citometría de flujo. 77FCN2019. Se calcularon las lipoproteínas de muy baja densidad (VLDL) e índice Después de una semana de aclimatación se triglicéridos/HDL(Becerril-Campos et al., 2017). dividieron en 4 grupos experimentales (Figura 1): Y 1) Control (C): 3.4 kcal/g; 2) C+ HF: 3.5 kcal/g; 3) Dieta alta en grasa y fructosa (HFFD, por sus Análisis estadístico siglas en inglés): 4.4 kcal/g; 4) HFFD+ HF: 4.4 Los resultados se presentarán como media ± kcal/g (Tabla 1). La eutanasia mediante desviación estándar. Las variables que se decapitación se llevó a cabo en la semana 6 y evaluaron periódicamente (peso, consumo de semana 14, para 4 sujetos por grupo y en la agua, consumo alimento, IPGTT) se compararán semana 21, para 3 sujetos por grupo (HFFD, 2 mediante ANOVA post hoc de Tukey animales). (significancia, p ≤0.05). Se utilizó el paquete estadístico IBM SPSS versión 25. Determinación de glucosa, perfil de lípidos y hepático Resultados y discusión El peso y el consumo de alimento fueron Al inicio del experimento el peso promedio de las registrados semanalmente durante todo el ratas fue de 195.7±14.9 g, de la semana (S) 15 a experimento, la glucemia se evaluó a partir de la la S17 en HFFD se observa una disminución en la tercera semana, de forma semanal. En las ganancia de peso (Figura 2), relacionada a la disminución en el consumo energético de 20.6 %, semanas 6, 14 y 21 se hicieron evaluaciones 40.8 % y 36.8 % en las semanas 15, 16 y 17, finales: curva de tolerancia intraperitoneal a la respectivamente (Figura 3).