UUU NNN III VVV EEE RRR SSS III TTT EEE D ’D ’ AAA NNN TTT AAA NNN AAA NNN AAA RRR III VVV OOO EEE CCC OOO LLL E NNN OOO RRR MMM AAA LLL E SSS UUU PPP EEE RRR III EEE UUU RRR EEE DEPARTEMENT FORMATION INITIALE SCIENTIFIQUE CENTRE D’ETUDE ET DE RECHERCHES SCIENCES NATURELLES MEMOIRE EN VUE DE L’OBTENTION DU CERTIFICAT D’APTITUDE PEDAGOGIQUE DE L’ECOLE NORMALE (CAPEN) CAPTURES, ELEVAGE ET TESTS DE SENSIBILITE DES ADULTES D’ANOPHELES AUX INSECTICIDES Présenté par ::: RAFENOARISOA Felaniaina Date de Soutenance : 06 Décembre 2013 i Les membres du jury de Mademoiselle RAFENOARISOA Felaniaina Président: Monsieur RASOANINDRAINY Jean Marc Ph D in Biology Maître de conférences Université d’Antananarivo – Ecole Normale Supérieure(ENS) Juge: Madame RAHARIMANGA RAKOTOSON D.E.A. d’Entomologie Programme National de Lutte contre le Paludisme Ministère de la santé publique Rapporteur: Monsieur ANDRIANASOLO RAVOAVY Jaonarivony Doctorat d’Etat-es-Sciences Naturelles Professeur titulaire Université d’Antananarivo- Ecole Normale Supérieure(ENS) ii ⁄⁄⁄ TÄÉÜá Öâ|vÉÇÖâx |ÇäÉÖâxÜt Äx ÇÉÅ wâ fx|zÇxâÜ áxÜt átâä° ÓÓÓ Tvàxá ETvàxá E N EDN ED iii DédicacesDédicacesDédicaces Au bon DIEU tout puissant, à mes parents, mes deux sœurs, mes amis, mes relations et à mes enseignants pour leurs aides et leurs soutiens spirituels, matériels et financiers au cours de mes études primaire, secondaire et universitaire iv REMERCIEMENTS Je tiens à exprimer ma profonde reconnaissance à tous ceux qui de près ou de loin ont contribué à la réalisation de ce mémoire. Des remerciements pleins de reconnaissance sont destinés à Monsieur ANDRIANASOLO RAVOAVY JaonarivonyJaonarivony.... Je ne saurai dire combien votre gentillesse, votre sens de partage, votre disponibilité ainsi que vos qualités sociales m’ont marquée. Merci du plus profond de mon cœur pour votre aide. A Monsieur RASOANINDRAINY Jean Marc qui m’a fait un grand honneur en acceptant de présider ce mémoire malgré vos multiples occupations. Trouvez ici toute mes admirations ainsi que mes profonds respects A Madame RAHARIMANGA RAKOTOSON,,, je ne vous remercierai jamais assez pour votre sympathie, tolérance et votre disponibilité tout au long de mon stage au sein de votre équipe au PNLP. Votre expérience et votre sagesse vous permettraient de juger ce modeste travail. Aux entomologistes et personnels du PNLP, je suis très honoré par l’aide inestimable que vous m’avez apporté au cours de mon stage et je vous en suis reconnaissante. Je n’oublie surtout pas de remercier et d’admirer mes parents et mes deux sœurs pour leur encouragement, leurs soutiens moraux et matériels, leur croyance et leur amour dans tous les moments difficiles. Enfin, j’accorde à mes amis et mes relations mes remerciements les plus chers pour leur aide et encouragement. Veuillez recevoir ici mes sentiments les plus respectueux v LISTE DES ABREVIATIONS An.: Anopheles CAID: Campagne d’Aspersion Intra Domiciliaire ELISA: Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay KD: Knock down L1: Larve au stade I L2: Larve au stade II L3: Larve au stade III L4 : Larve au stade IV ODM: Objectif Du Millénaire OMS : Organisation Mondiale de la Santé IRD : Institut de Recherche pour le Développement PNLP : Programme National de Lutte contre le Paludisme sl: sens large sp: espèce WHO: World Health Organization vi LISTE DES FIGURES Figure 1: Cycle biologique d'anophèle………………………………………………………………...............4 Figure 2: Aspect de l'abdomen au cours de la digestion sanguin………………………………………..….5 Figure 3: Œufs des moustiques…………………………………………………………………………………..6 Figure 4: Photo d'une larve de moustique…………………………………………………………………..….7 Figure 5: Une nymphe……………………………………………………………………………………….….…7 Figure 6: Un adulte d'anophèle…………………………………………………………………………………..9 Figure 7: Principales caractéristiques morphologiques des Anophelinés et des Culicinés...................11 Figure 8: Cycle simplifié des Plasmodies……………………………………………………………….…….12 Figure 9: Cycle biologique du Plasmodium falciparum………………………………………………….....13 Figure 10: Localisation des sites d'études…………..…………………………………………………….…..17 Figure 11: Deux tubes à hémolyses…………………………………………………………………………....19 Figure 12: Un aspirateur à bouche………………………………………………………………………...…..20 Figure 13: Identification des moustiques à la loupe…………………………………………………………24 Figure 14: Un pondoir à œufs…………………………………………………………………………...……...25 Figure 15: Cage d'élevage avec un pondoir et boule de coton imbibée d'eau sucrée…………….….….25 Figure 16: Lavage des œufs à l'eau de Javel……………………………………………………………….…27 Figure 17: Rinçage des œufs à l'eau de source…………………………………………………………….…27 Figure 18: Mise en bac des œufs………………………………………………………………………….…....28 Figure 19: Collecte des nymphes……………………………………………………………………………….29 Figure 20: Bout à tamis……………………………………………………………………………………….…30 Figure 21: Trois plaques coulissantes………………………………………………………………………....31 Figure 22: Tube d'observation fixé à la plaque coulissante………………………………………………...32 Figure 23: Tubes inclinés pour transférer les moustiques………………………………………….…...….33 Figure 24: Introduction des moustiques dans le tube d'observation……………………………….…..….33 Figure 25: Tube d'exposition et tube d'observation liés à la plaque coulissante…………………..…....34 Figure 26: Transfère des anophèles du tube d'observation vers le tube d'exposition………………......35 Figure 27: Mise en observation à l'insectarium……………………………………………………….…......36 Figure 28 : Cycles d’agressivité d’An.gambiae sl dans le district de BORIZINY……………..……..….44 Figure 29 : Cycles d’agressivité d’An.funestus dans le district de BORIZINY…………………………..44 Figure 30: Cycles d'agressivité d'An.gambiae sl dans le district d'AMBANJA…………………………..49 Figure 31: Cycles d'agressivité d'An.funestus dans le district d'AMBANJA…………………………..….50 Figure 32 : Cycles d’agressivités d’An.mascarensis dans le district d'AMBANJA…………….………..50 Figure 33: Représentation graphique des individus évanouis (KD) sur du papier de probabilité log……………………………………………………………………………………………………………...…...57 vii LISTE DES TABLEAUX Tableau 1: Inventaire des anophèles capturés à BORIZINY………………………………………………..38 Tableau 2: Moustiques capturés dans dix maisons à BORIZINY ………………………………..……….39 Tableau 3: Les moustiques capturés dans les gîtes extérieurs de Tsarahasina…………………………..39 Tableau 4: Résultats des chasses de nuit à l'intérieur et à l’extérieur des maisons dans le district de BORIZINY le 23 au 24 Mars 2013………………………………………………………………………..……41 Tableau 5: Densités agressives des anophèles capturés dans le district de BORIZINY………..……….42 Tableau 6 : Taux d’endophagie des anophèles capturés dans le district de BORIZINY………..……...43 Tableau 7: Inventaire des anophèles capturés à AMBANJA………………………………………………..45 Tableau 8: Moustiques capturés dans dix maisons à AMBANJA……………………………………..…...45 Tableau 9: Les moustiques capturés dans les gîtes extérieurs d’Ambodimanga Ramena…………..…..46 Tableau 10: Résultats des chasses de nuit à l'intérieur et à l’extérieur des maisons dans le district d'AMBANJA…………………………………………………………………………………………………...…..47 Tableau 11: Densités agressive des Anophèles capturés dans le district d'AMBANJA…..……………..48 Tableau 12: Taux d’endophagie des anophèles capturés dans le district d’AMBANJA………..……...49 Tableau 13: Températures et humidités relative enregistrées au cours du test à la deltamethrine…...53 Tableau 14: Nombre de moustiques morts et vivants et taux de mortalité après 24 heures d’observation………………………………………………………………………………………………….…..54 Tableau 15: Température et humidité relative enregistrés au cours du test de confirmation à la deltamethrine………………………………………………………………………………………………….…..54 Tableau 16: Taux de mortalité des moustiques sauvage après 24heures………………………………....55 Tableau 17: Taux de mortalité des jeunes femelles (F1) après 24heures………………………….……...55 Tableau 18: Temps KD50 et KD95 pour An.gambiae sl testé à la deltamethrine……………..………...56 Tableau 19: Températures et humidités relatives enregistrées au cours du test au fenitrothion….…...58 Tableau 20: Résultat du test de sensibilité d’An.gambiae sl d’Ankatso au fénitrothion……………...…58 Tableau 21: Tableau récapitulatif des tests de sensibilité effectués sur les femelles d'An.gambiae sl capturées à Ankatso…………………………………………………………………………………………..…..59 viii SOMMAIRE INTRODUCTION……………………………………………………………..…....1 CHAPITRE I : GENERALITES………………………………………………….…..3 1. Le Paludisme………………………………………………………………………………3 1.1.Le vecteur………………………………………………………………………..…3 1.1.1. Systématique de l’Anophèle……………………………………………………3 1.1.2. Cycle biologique de l’anophèle ……………………………………………..…4 1.1.3. Morphologie générale des moustiques : œufs, larves, nymphe, adulte………...6 1.1.4. Distinction des Anophelinés des Culicinés…………………………………...10 1.2.Agent causal du paludisme………………………………………………………..12 1.2.1. Systématique……………………………………………………………....….12 1.2.2. Le cycle biologique du Plasmodium falciparum…………………………...…12 2. Lutte contre le paludisme …………………………………………………..………...14 2.1. Symptômes et traitements de la maladie…………………………………………14 2.2.Prévention du paludisme………………………………………………………….15 2.2.1. Lutte anti vectorielle…………………………………………………......……15 2.2.2. Chimio prophylaxie…………………………………………………..…...…..15 CHAPITRE II : MATERIELS ET METHODES………………………………..16 1. Sites d’études……………………………………………………………………………16 2. Captures d’adultes de moustiques 2.1. Captures matinales de la faune culicidienne endophile……………………….....19 2.2. Recherche de moustiques dans les gîtes extérieurs……………………………....20 2.3. Capture nocturne de la faune agressive…………………………….………….…21 2.4. Identification des anophèles……………………………………….. ……………22 3. Elevage d’anophèles…………………………………………………………………...23