Primary Amoebic Meningoencephalitis Amoebic Meningoencephalitis Is Primary Ś

PØEHLEDOVÉ PRÁCE HYGIENA ÈÍSLO 2 ROÈNÍK 53 2008 53

ś Sappi- Bala- a a v životnom ś èloveka a vyvola èloveka ś Trofozoit Naegle- Trofozoit Naegleria fowleri Naegleria fowleri Obr. 1: Obr. (http:// TEM. fowleri, ria www.vcu.edu/micro/marciano.htm) parazitickému spôsobu produce syndromes in man ś Balamuthia mandrillaris Naegleria, Acanthamoeba a druhy Sappinia diploidea Naegleria and a sú pôvodcami závažných ochorení a hoci poèet AROVÁ, CYRIL KLEMENT AROVÁ, Ď Nako¾ko meòavky sú schopné prežíva Zástupcovia rodov rodov Zástupcovia Acanthamoeba muthia všadeprítom- ku vzh¾adom je prípadov zaznamenaných nosti žijúcich vo¾ne meòaviek v prírode nízky, predpo- vyšší, pretože kladá ove¾a infekcií je sa, reálny že dopad ochorenia neboli rozpoznané alebo sú èasto chybne diagnostikované. prostredí ako žijúce vo¾ne organizmy, ale za urèitých prispôsobi môžu sa podmienok života, nazývame ich tiež amfizoické meòavky. Balamuthia mandrillaris and odbor lekárskej mikrobiológie PROBLÉMOM? nastáva obvykle obvykle nastáva , ktorá patrí medzi ś Acanthamoeba , ažko diagnostikovate¾né diagnostikovate¾né ažko ś Naegleria Úvod . Naegleria fowleri Regionálny úrad verejného zdravotníctva so sídlom v Banskej Bystrici, so sídlom v Banskej Bystrici, zdravotníctva verejného Regionálny úrad KATARÍNA TRNKOVÁ, LUCIA MA LUCIA TRNKOVÁ, KATARÍNA , a small, free-living amoeba. Pathogenic free-living amoebae can cause serious illnesses in humans. The amoe- free-living Pathogenic amoeba. , a small, free-living neglerióza, primárna amébová meningoencefalitída, epidemiológia, laboratórna diagnostika meningoencefalitída, neglerióza, primárna amébová je viac ako 95%, smr 95%, ako viac je (NAEGLERIASIS) A PUBLIC HEALTH PROBLEM? A PUBLIC HEALTH (NAEGLERIASIS) IS PRIMARY AMOEBIC MENINGOENCEPHALITIS AMOEBIC MENINGOENCEPHALITIS IS PRIMARY ś . Infekcie spôsobené týmito organizmami vyvolávajú u ¾udí syndrómy v rozsahu od akútnych fatálnych ochorení po ochorení fatálnych syndrómy v rozsahu od akútnych u ¾udí vyvolávajú organizmami spôsobené týmito . Infekcie Naegleria fowleri

transportované vzduchom. ś

Naegleria fowleri K¾úèové slová: K¾úèové Medzi stovkami vo¾ne žijúcich meòaviek sú známe i ïalšie rody, ktorých zástupcovia sú schopní infikova sú schopní zástupcovia ktorých rody, sú známe i ïalšie meòaviek žijúcich vo¾ne Medzi stovkami of CNS caused an acute, often fulminant infection is invariably Naegleriasis or primary amoebic meningoencephalitis (PAM) Neglerióza alebo primárna amébová meningoencefalitída (PAM) je zriedkavé ochorenie CNS, pôvodcom ktorého je vo¾ne žijúca je vo¾ne ktorého CNS, pôvodcom ochorenie je zriedkavé (PAM) meningoencefalitída Neglerióza alebo primárna amébová Key words: primary amoebic meningoencephalitis, naegleriasis, epidemiology, laboratory primary diagnostics of Key words: amoebic meningoencephalitis, naegleriasis, epidemiology, Úmrtnos Pôvodcom je prvok Neglerióza alebo primárna amébová meningoencefali- SUMMARY SOUHRN u neho ochorenie. Za patogény sú považovaní zástupcovia rodov rodov zástupcovia sú považovaní Za patogény u neho ochorenie. nia diploidea negleriózy. laboratórnej diagnostiky a spôsoboch symptomatike aj o patogenéze, ako ekológii chronické, tkanivá napadajúce infekcie s granulomatóznymi prejavmi. Epidemiológia, imunológia, patológia a klinické prejavy a klinické prejavy Epidemiológia, imunológia, patológia s granulomatóznymi prejavmi. tkanivá napadajúce infekcie chronické, cykle, životnom o jeho morfológii, PAM, ochorenia o pôvodcovi preh¾ad podáva líšia. Príspevok sa vzájomne ve¾mi infekcií týchto by the genus bae belonging to meòavka meòavka

ranging from acute fatal disease to chronic tissue invasion with granulomatous manifestation. The purpose of this report is to is to manifestation. The purpose of this report with granulomatous tissue invasion ranging from acute fatal chronic disease to of laboratory methods pathology and treatment, diagnostic of naegleriasis. describe the clinical history, JE NEGLERIÓZA VEREJNO-ZDRAVOTNÍCKYM VEREJNO-ZDRAVOTNÍCKYM JE NEGLERIÓZA ochorenie centrálneho nervového systému, prejavujúce sa ako akútna hnisavá meningoencefalitída, ktorá nerea- guje na bežnú antibiotickú lieèbu. Fulminantný priebeh ochorenia s nároènou, spolu èasto nesprávnym smerom vedenou diagnostikou poskytujú málo èasu pre terapiu, preto väèšina prípadov konèí fatálne. v priebehu 7 dní po objavení sa prvých príznakov ochorenia. Do roku 2005 je známych len pár prípadov prežitia prièom ojedinelé 61), 53, 4, zvládnutie 8,PAM 49, (3, ochorenia je možné len ve¾mi skorým rozpoznaním pôvodcu ochorenia a následnou dôraznou terapiou. vo¾ne žijúce meòavky. Sú to jednobunkovéorganizmy eukaryotické bežne sa vyskytujúce v rôznych typoch slad- kovodného prostredia, ale i v pôde. Ich rezistentné cysty môžu by tída (PAM) je náhle, prudké a 54 HYGIENA ÈÍSLO 2 ROÈNÍK 53 2008 PØEHLEDOVÉ PRÁCE je sústredený na jediný ¾udský patogén patogén ¾udský jediný na je sústredený záujem (16). Medicínsky druhov 30 než viac novaných (1, 40). Thecamoebidae èe¾. Flabellina: kmeò Acanthamoebidae. bozoa: podríša Lobosea: kmeò Acanthamoebia: èe¾. Vahlkampfiidae. èe¾. Schizopyrena: kmeò to èlenenia umiestnené v ríši Amoebozoa aExcavata: Amoebozoa vríši umiestnené èlenenia to Excavata Chromalveolata, da, Amoebozoa, Opisthokonta, Archaeplasti- Rhizaria, meòaviek. ajnahých atým prvokov do systematiky zmeny podstatné priniesli však komplexov a proteínových kulárnej biológie na základe analýz nukleových kyselín rod lobosea, radu Schizopyrenida, èe¾ade Vahlkamphiidae, Hetero- triedy (Protozoa),prvoky Rhizopoda, kmeòa neglerióza. tiež nazývanej (PAM) meningoencefalitídy purulentnej akútnej pôvodcom je (33). BAE) –GAE, encefalitída amébová (granulomatózna mozgu ložiskového zápalu obrazom (CNS) pod systém nervový centrálny (45) alebo –AK) da keratití- (akantamébová rohovky oko zápalu buï formou morfologicky morfologicky šenú pozornos vyvoláva schopné nové druhy objavia meòavkami dobne medzi pravdepo- sa že indikuje, prípad tento strane, Na druhej predèasné. encefalitíd, meòavkových jepôvodcom druh tento že jezovšeobecnenie, prípad, jediný o doposia¾ (21). vUSA 2001 vroku išlo Keïže zaznamenaný bol druhom spôsobenej amébovej encefalitídy týmto Prípad idea ky v tele arozmnožova vtele ky schopná prijíma štádium. abièíkaté dium) štá- k¾udové (rezistentné cysta štádium), vegetatívne sa fowleri Naegleria myši. pre asúpatogénne podmienkach prežíva súschopné keïže potenciál, tularensis Francisella aeruginosa, Pseudomonas monocytogenes, Listeria avium, Mycobacterium pneumoniae, (napr. klinicky významných patogénnych mikroorganizmov ho nepatogénneho zástupcu rodu rodu zástupcu ho nepatogénneho inklúzií okolo jadra. Endoplazma je jemne granulovaná granulovaná jejemne Endoplazma okolo jadra. inklúzií fologickým znakom je nápadný prstenec kryštalických mor- charakteristickým jadierkom, scentrálnym jadro jedno nachádza sa a endoplazmu, ekto- na rencovaná trofozoitu je 10 až 25 V súèasnosti je pre rod rod jepre V súèasnosti diploidea Sappinia Acanthamoeba Naegleria fowleri Naegleria toh- súvrámci u¾udí infekcie za zodpovedné Meòavky v6ríšach: klasifikované súEukaryota schéme V novej medzi patril organizmus klasifikácie staršej Pod¾a Nákazy vyvolané amfizoickými meòavkami postihujú Ïalší druh bežne sa vyskytujúci v pôde, vpôde, vyskytujúci sa bežne druh Ïalší Trofozoit je aktívna pohybujúca sa forma meòavky, meòavky, forma sa pohybujúca Trofozoit jeaktívna cykle vovývinovom sa podmienkach V prirodzených N. australiensis niektorých rezervoárom prírodným sútiež Meòavky , donedávna nebol považovaný za patogénny pre ¾udí. ¾udí. pre patogénny za považovaný nebol , donedávna Naegleria Cryptococcus neoformans,Legionella ś ochorenia u ¾udí, preto im treba venova treba im preto u¾udí, ochorenia (46). Najnovšie poznatky výskumu mole- výskumu poznatky (46). Najnovšie ś ś ažko odlíšite¾ný od bežne sa vyskytujúce- vyskytujú tri štádiá: trofozoit (množiace (množiace trofozoit štádiá: tri vyskytujú . a ś spolu s potravu, zhromažïova potravu, v ríši Excavata: podríša Heterolobosea: Heterolobosea: podríša Excavata: vríši Balamuthia v ríši Amoebozoa: podríša Lobosea: Lobosea: podríša Amoebozoa: v ríši Životný cyklus μ ś m. V cytoplazme, ktorá jedife- ktorá V cytoplazme, m. sa binárnym delením. Ve¾kos N. italica Naegleria

mandrillaris (40). , vykazujú patogénny patogénny , vykazujú N. gruberi opísaných apome- opísaných ś v endozoických vendozoických Naegleria fowleri Naegleria spp., Naegleria fowleri Naegleria ś v ríši Amoe- vríši Sappinia diplo- Sappinia zásobné lát- ). ). . Chlamydia ś zvý- ś ,

termofilných druhov (32, 30). druhov termofilných nepatogénnych zástupcovia iní prevahu majú kde dím, prostre- s prírodným vporovnaní habitatoch termálnych že sveta. z celého všadeprítomnos aich prostredia sladkovodného typoch avrôznych vpôde predovšetkým Australian Water QualityCentreaCRC forWater QualityResearch) Obr. 2: kmeòoch vo¾ne žijúcich druhov druhov vo¾ne žijúcich kmeòoch ovirulentných záznamov množstvo svedèí oèom druhov, kozmopolitnos sa predpokladá jemálo, rozšírení (7, ogeografickom 15, 29, poznatkov 38). Hoci zariadení aklimatizaèných vzduchu vôd, ných tokov, odpadových otep¾ova- izpriemyselne vody zpitnej bazénov, aèných prírodných prameòov, termálnych lieèebných a rekre- zjazier, izolované Boli špecializácie. stupòa nízkeho mi (16). patogén príležitostný ajako nizmus a množi ži jeschopná ameboflageláta Termofilná vom období. vnepriazni- vpriestore druhu distribúciu zabezpeèuje pohybom. špirálovitým že štádium sa, Predpokladá vým krúži- alebo trhavým pohybujú sa Flageláty sa. a nedelí 14 6až ve¾kosti bièíkmi, sdvoma tvaru Je oválneho bièíkatého kudochádza vzniku (flagelátového) štádia. mi roztokmi solí (46) alebo ve¾mi zriedenými kyselinami, chemických avoèi vplyvu látok. vysychaniu novrstvové, gu¾ovité 7–15 gu¾ovité novrstvové, jed- stav) tvoria trofozoitov,tolerancie iný nepriaznivý vlhkos potravy, znížená štádium. bièíkaté prechodné vytvoria alebo encystujú fozoity –tro- meòavky ktransformácii dochádza zmeny povahe eruptívnym prudkým organizmu. štádium typickým infekèné sa jediné Jeto pohybom. Pohybuje bunky. tela z vybiehajúcu plynulo (pseudopódiu) panôžku lalokovitú bunky. eukaryotickej stavbu pre typické organely všetky vnej sa a nachádzajú Prieskumy druhovej diverzity meòaviek naznaèili, naznaèili, meòaviek diverzity druhovej Prieskumy biotopoch, vnajrozmanitejších súzastúpené Meòavky Pri dostatoènom zriedení prostredia vodou, špeciálny- vodou, prostredia zriedení dostatoènom Pri Pri zhoršení životných podmienok (nedostatok (nedostatok podmienok životných zhoršení Pri na vzávislosti podmienok, vonkajších zmene Pri N. fowleri N. fowleri N.fowleri-trofozoitacysty, 10 mierka ś sa pri teplote nad 40 °C, ako vo¾ne žijúci orga- vo¾ne žijúci ako °C, 40 nad teplote pri sa je monopodiálna meòavka, tvorí jednu ve¾kú ve¾kú jednu tvorí meòavka, monopodiálna je je èastejšie prítomná v umelo vytvorených vytvorených vumelo prítomná jeèastejšie Ekológia arozšírenie ś , zvýšená teplota nad hranicu hranicu nad teplota , zvýšená μ m cysty s pórmi, rezistentné rezistentné spórmi, m cysty ś je dôkazom zjavne ve¾- zjavne jedôkazom Naegleria μ m. (Foto B.Robinson, spp. takmer spp. takmer ś väèšiny väèšiny μ m ś

PØEHLEDOVÉ PRÁCE HYGIENA ÈÍSLO 2 ROÈNÍK 53 2008 55 ou, ś Acan- ovaní , ś a tuh- Naegle- ś . ou hlavy ś meòaviek. ś N. australiensis Naegleria N. fowleri

ś . bol zistený v 7.3 % izolátov, bol zistený v 7.3 . Dva druhy , ale v jednom z bazénov bola bola izolovaná z 1 vzorky ami hlavy, diskomfortom hor- Naegleria ś obvykle 3–6 dní od objavenia sa r. ś (24). ś Naegleria . Z nich 20 kmeòov patrilo do rodu N. fowleri , ktoré boli determinované, môžeme N. lovaniensis . Rod Hartmannella a N. fowleri nebola zaznamenaná v žiadnejzo vzoriek. Willaertia za dobré indikaèné organizmy pri zis ś a Prepuknutie a symptómy ochorenia PAM ochorenia nebola zaznamenaná, nebola ochorenia žiadny prenos ś N. fowleri PAM je charakterizovaná obojstrannou boles Ako klinická tak i epidemiologická anamnéza vyka- Vstupnou bránou infekcie je nosná dutina. Vdýchnu- Pernin and Riany vo svojej (48) štúdii 9 plaveckých Gogate and Deodhar predstavili (22) štúdiu 12 pla- De Jonckheere (18) skúmal 1 vonkajší a 15 vnútorných Wellings et al. (62) zistili,že viac ako 60 % Floridských spp., 2 ako spp., N. lovaniensis Acanthamoeba nutie šije, kàèe až 36). kóma (23, v oblasti èelovej a spánkovej, horúèkami, nevo¾nos zvracaním, rýchlym nástupom meningeálnych prízna- signalizujúcichkov postihnutie èuchového, ale i èelného a spánkového mozgového laloka, prípadne mozoèka. Nasleduje kóma a smr prvých príznakov ochorenia. V anamnéze je významný kontakt vodou, s najmä s oteplenou – bazény, termálne výtokyvody, z elektrární a pod. Klinický obraz je podob- akútnejný bakteriálnej meningitíde, nauzea, s nešpecifickými horúèka, cefalea, progredujúca symptómami: zvracanie, faryngitída, konvulzie, meningeálne prízna- z èloveka na èloveka alebo prostredníctvom vektorov doposia¾ nebol zistený (63). zujú charakteristické, nie však špecifické klinicképrízna- ky PAM. Hyperakútny priebeh je sprevádzaný v prvotnej fáze narastajúcimi boles ciestných dýchacích, príležitostne sa objavujú problémy bolesti tiež zahàòa fáza Akútna ústrojenstva. èuchového v krku, horúèkovité stavy, zvracanie. Postupne ako sym- pretrvávajúptómy nastupuje letargia, zmätenos prítomnosti tie vody obsahujúcej dostatoènú koncentráciu meòaviek umožní ich preniknutie cez sliznicu nosa a prichytenie na èuchový neuroepitel,prenikajú do mozgu. Sú známe prípady, keï sa ochore- odkia¾ pozdåžnie objavilo po vdýchnutí èuchového infekèných cýst prítomných nervu 2–7 je Inkubaènádoba èasticiach prachových (39). v dní. Nie sú známe žiadne faktory predispozície, ktoré by boli potrebné k prepuknutiu infekcie u ¾udí. Infekcia je pravdepodobne nadobudnutá priamo kontaktom so Infekè- pôdou). vodou, prostredím s (kontakt životným nos ria a považova Naegleria a z tých klasifikovaných bolo 16 ako bazénov v Lyone (Francúzsko) zistili, že 90 % zo 44 44 zo % 90 že zistili, (Francúzsko) Lyone v bazénov vzoriek vody odobratých z bazénov bolo kontamino- vaných meòavkami. Väèšina izolátov patrila rodov do Acanthamoeba ale ale thamoeba Z izolátov získaných bazénov z 13 43.6 % patrilo do r. veckých bazénov, 6 malých rybníkov, nádrží a 3 jazier v Bombai, India. plaveckého bazénu. Rivera vyšetroval et al. (52) vzorky troch termálnych kúpe¾ných bazénov v Mexiku a získal skupinu kmeòov 33 FLA patriacich do r. plaveckých bazénov v Belgicku na prítomnos potvrdená prítomnos jazier pozitívnych bolo na prítomnos

ś spp. spp. spp. spp. , ktorá zaèa- ś Naegleria Naegleria . . Najväèšiu svetovú ś vo vodovodnej sieti nachádzala vo vyso- vo nachádzala vyskytla aj vo verejnej verejnej vo aj vyskytla acieho ž¾abu a následne ś N. fowleri signálom, že nastali pod- ś a publikova N. fowleri ś a ïalšie termofilné Epidemiológia Naegleria fowleri Naegleria fowleri N. fowleri , ktorá je bežne rozšírená. Jej prítomnos spp. má vyššiu toleranciu na ve¾ký rozsah rozsah ve¾ký na toleranciu vyššiu má spp. ahy) (25). ahy) ś v termálnych vodách, doposia¾ sa urobilo len , ktorých patogenita bola potvrdená testom na bola izolovaná z vody poèas bežnej hygienickej Vo vodáchVo na kúpanie bola zdrojom nákazy prí- v 16 PAM je pomerne zriedkavo sa vyskytujúce ochorenie, ale Ochorenie sa vyskytuje prevažne u zdravých detí Po prvý krát zaznamenali prípady PAM u ¾udí v roku Pod¾a údajov CDC (Centers Disease for Control and Naegleria V Južnej Austrálii sa padoch PAM súvisel s dvoma prípadmi PAM (2). vodovodnej sieti, kde bol preukázaný vplyv teploty a bak- teriologického osídlenia. Podobný prípad zaznamenali v Arizone, kde nález v životnom prostredí môže by je zrejmé, že súvisí s využívaním vôd na kúpanie. Väèšina pacientov s PAM v anamnéze uvádza pár dní pred prepuk- nutím ochorenia kontakt s vodou pri aktivitách umožòuj- úcich vniknutie vody do nosovej ktorá dutiny, je vstupnou bránouinfekcie do ¾udského organizmu 26, 39). (19, obraz Hoci a mladých a vo väèšine ¾udí príznakov. prípadov súvisí s kúpaním prvých sa a potápaním v jazerách, nádržiach, riekach objavením alebo bazé- pred noch ochorenia a spôsob prenosu je dostatoène známy, ani zïaleka nie sú známe všetky rizikové faktory, ktoré roz- voj ochorenia ovplyvòujú. Nie sú známe štúdie, ktoré by potvrdili, èi zvýšený výskyt ochorenia u mladých ¾udí súvisí s ich správaním sa pri kúpaní a potápaní alebo s fyziologickými faktormi (hormonálne hladiny, imuno- logické vz 1965 Fowler a Carter v Austrálii na a Butt Floride. v r.1966 Záujem neobišiel ani našu odbornú verejnos stenou bazéna (28). Hoci sa ve¾a písalo o prítomnosti prítomnosti o písalo ve¾a sa Hoci (28). boli nájdené poète v hojnom v pukline za poškodenou bazéna stenou N. fowleri málo výskumov v súvislosti s výskytom v nich. Prvá termofilná Naegleria bola spp. opísaná ako N. lovaniensis mienky vhodné pre množenie Prevention) sa priemerne v USA vyskytne infekcie 1–3 za 2006 Do r. takmer bolo z celého (11). rok sveta oznáme- ných približne 200 prípadov, prièom Austrália, Èeskoslo- vensko a USA patria medzi krajiny, kde sa vyskytlo % 75 všetkých zaznamenaných prípadov ochorení. la v tejto oblasti pracova epidémiu amébovej meningoencefalitídy 1962– z rokov 1965 v Ústí nad Labem opísal Èerva V decembri (12). 1977 N. fowleri vnútorná z ïalších že miest plaveckého komplexu (schodíky, sedi- zistené, bolo menty z dna bazénu skúmaním a z povrchu filtrov recirkulaèného Ïalším systému). èelná stena v håbke bola prasknutá a vytvorila sa za òou dutina, v ktorej sa kontroly plaveckého bazénu, ktorý bol zdrojom pôvodcu infekcie v prípade tejto epidémie. Dva virulentné kmene N. fowleri myšiach, boli izolované z vypúš teplôt, èo je pravdepodobne príèinou jej bohatého výskytu v termálnych vodách ako geotermálne sú pramene alebo priemyselné chladiace okruhyelektrární. kých koncentráciách, teplota vody tu °C bola 27–30 okolo a bola relatívne chránená voèi vplyvu dezinfekcie. 56 HYGIENA ÈÍSLO 2 ROÈNÍK 53 2008 PØEHLEDOVÉ PRÁCE hladina glukózy je v norme až znížená, prítomnos znížená, až jevnorme glukózy hladina leukocytov, polymorfonukleárnych hlavne proteínov, hladinu zvýšenú vykazuje punkcia Lumbálna prítomné. by môžu ktoré leukocytom, pohybujúcim sa kpomaly jevprotiklade pohyb eruptívny typický prièom trofozoitov rocytov, pleocytóza s prevahou neutrofilov, prítomnos hova obsa- môže moku mozgovomiechovom odobratom stvo vèer- meòaviek nález Mikroskopický preparát. natívny tomnosti tiváciou. N. fowleri prítomnosti adôkaz moku mozgovomiechového ného nechlade- odobratého, èerstvo pozorovanie skopické základnými diagnostickými nástrojmi priame mikro- meòaviek. dôkaz na zamerané vyšetrenie špeciálne alebo súvnorme. a biochémia obraz Krvný edém. difúzny súnešpecifické: PAM na ní podozre- pri vmozgu nálezy CT prièom zobrazovaním, aMR CT potvrdené súneskôr meningitídy a symptómy znaky Nejasné záchvaty. parciálne èi generalizované tlaku, intrakraniálneho zvýšeného príznaky fotofóbia, ataxia, aèuchu, šije), chuti poruchy opozícia (hlavne ky destilovanej vody a suspenziu pravidelne sleduje vovlh- sleduje pravidelne asuspenziu vody destilovanej množstve vmalom zriedime Vzorku likvoru. vo vzorke štádií bièíkatých prítomnosti dôkaz na slúži ktorý test, test Flagelátový imunoflourescenciou. nepriamou identifikácia a ich mortem Post (53). médiách kultivaèných vtekutých alebo pevných karmínovoèervené. jadro vezikulárne belasé, –trofozoity trichromom bení Kultivácia (mozgovomiechovéhomoku,vzoriektkanív Medzi základné mikroskopické metódy dôkazu prí- dôkazu metódy mikroskopické základné Medzi sú (symptómy +anamnéza) PAM na podozrení Pri už èi negleriózy, identifikácii K správnej Pomocnou identifikaènou metódou je flagelátový flagelátový je metódou identifikaènou Pomocnou materiáli sekènom vhistologickom meòaviek Nález °C na 42 °C 37 a teplote pri vykonávaná je Kultivácia ś pohyblivé trofozoity v mikroskopickom obraze, obraze, vmikroskopickom trofozoity pohyblivé post mortem Spôsoby laboratórnejdiagnostikynegleriózy vo vzorkách mozgovomiechového moku kul- moku mozgovomiechového vovzorkách N. fowleri N. fowleri diagnostika z biopsiealeboautopsie) , je potrebné na òu na myslie , jepotrebné vo vyšetrovaných vzorkách patrí , absencia baktérií a fungi. Pozafar- afungi. baktérií , absencia Mikroskopia

(Foto K.Trnková) trichrom. Obr. 3: ś aindikova intra vitam intra ś v likvore vlikvore N.fowleri, ś eryt- ś ś

zový prostriedok, práve pre možnos pre práve prostriedok, zový (5). nástrojom identifikaèným spo¾ahlivým N. fowleri kmene patogénne všetky nie že fakt, na poukazujú ale práce Mnohé štádiá. bièíkaté objavujú sa 2hodinách až min. 30 po Približne mikroskopom. pod kom preparáte doplnená o ïalšie dôkazové metódy (flagelátový test). (flagelátový metódy dôkazové oïalšie doplnená by musí ktorá identifikáciu, nedostatoènú resp. ELISA), (kultivácia, identifikáciu aneskorú dodatoènú len tujú aposky- (test patogenity) manipuláciu zložitú vyžadujú (RFLP), nákladné finanène (kultivácia), nároèné èasovo prítomnos toènos (17,endonukleázami 42). metódy Výhodou jesku- tejto restrikènými DNA štiepení apo DNA celkovej izolácii hov rodu dru- jednotlivých profiloch restrikèných rozdielnych na jezaložená Táto metóda RFLP. metódou taktiež sekvencii vo vzorke (31). vovzorke sekvencii komplementárnej ku hybridizuje ktorá sonda, DNA ako aslúži vektora dovhodného sa naklonuje druh, ve tento nájs musí sa DNA Vgenomickej zprostredia. izolácii predošlej po detegova jemožné ktorej pomocou du, metó- dôkazovú orýchlu sa 1995. Jedná vroku a Beeching Kilvington 1993 ataktiež vroku Sparagano opísali prežíva organizmov schopnos prostredia životného zo vzorkách Vo kmene. opatogénne ide že jejednoznaèné, vzoriek, zväèša diagnózy potvrdenie len teda priebeh a podáva ELISA testom u¾udí séra zo protilátok Dôkaz prepuknutie rýchle na ochorenia, protilátky vzh¾adom vykazujú nízke alebo žiadne titre. významu, bez PAM jevprípade Serológia negatívny. bol test flagelátový livých druhov rodu jednot- profiloch restrikèných rozdielnych na založená metóda (dôkazová (RFLP) Polymorphism Lengh ment Frag- sondy, DNA Restriction zvierati, na patogenity test by musí rodu druhov rodu nevyužíva. Slovensku na sa praxi diagnostickej laboratórnej avbežnej nároèné kmeòov. Toto pomerne jednotlivých je však vyšetrenie myšiach na sa virulencie od vzávislosti týždòoch, 1–4 po k usmrteniu Dokazuje kmeòov zvierati. na po predchádzajúcej jednotlivých patogenity test patogenity slúži inokulácii determináciu Na (14,génne. 25), kedy nepato- testu dochádza aflagelátovému termotolerancii i napriek by môžu vzorkách vtýchto izolované Meòavky by môžu že predpokladom, Nako¾ko ani flagelátový test nie je dostatoèný dôka- jedostatoèný nie test flagelátový ani Nako¾ko Pomocou PCR je možné nielen stanovi nielen jemožné PCR Pomocou Všetky vyššie spomínané metódy sú však pomerne Prítomnos sond DNA pomocou identifikácie metódu Dôkazovú zklinických získané meòaviek súizoláty Pokia¾ Naegleria ś , že je možné pomocou nej súèasne nielen stanovi nielen súèasne nej pomocou jemožné , že ś vytvárajú bièíkaté štádiá, preto tento test nie je nie test tento preto štádiá, bièíkaté vytvárajú doplnený o ïalšie dôkazové metódy: ELISA, ELISA, metódy: dôkazové oïalšie doplnený ś Naegleria unikátna sekvencia, ktorá charakterizuje prá- charakterizuje ktorá sekvencia, unikátna ś Molekulárno-biologická diagnostika

N. fowleri Naegleria ś vo vyšetrovaných vzorkách ale tiež odlíši tiež ale vzorkách vovyšetrovaných

Test patogenitynazvierati N. fowleri , ktoré vznikajú po predchádzajúcej predchádzajúcej po vznikajú , ktoré Naegleria ś , ale taktiež urèi taktiež , ale pri teplotách 37°C a vyšších je 37°C avyšších teplotách pri . vo vzorke je možné dokáza jemožné vovzorke ś ), èi PCR a to i v prípade, že že ivprípade, ato PCR ), èi patogénne aj pre èloveka. èloveka. ajpre patogénne ś falošnej negativity, negativity, falošnej ś post mortem prítomnos ś

Naegleria fowleri fowleri Naegleria ś prítomnos ś týchto . ś ś iných však však ś ś ś ś ś

PØEHLEDOVÉ PRÁCE HYGIENA ÈÍSLO 2 ROÈNÍK 53 2008 57

N. fowleri hygienic- ś vyvolávajú vyvolávajú Naegleria fowle- Naegleria fowleri . do skupiny mož- sa na skvalitnenie ś ś použitý v biologickej ś ako možné biologické a efektívnos ś ś N. fowleri

ś zdroj týchto infekcií, predovšet- infekcií, týchto zdroj ś nové biotopy adaptáciou na zme- Naegleria australiensis ś Diskusia a záver v epidemiologických štúdiách izo- a na bezpeènos na vzduchom nesenej infekcie Aj 54). (13, ś ś oportúnnej patogénnej meòavky meòavky patogénnej oportúnnej ś Naegleria ou osíd¾ova ś epidemiologicky významné výsledky (identifikácia (identifikácia výsledky významné epidemiologicky Súvislos Tento dodatok poskytujeTento informácie o jednotlivých Naegleria fowleri V roku 2001 na zasadnutí Ad hoc pracovnej skupiny Regionálne úrady verejného zdravotníctva v Slovenskej Predpoklady, že ide o evoluène aktívnu skupinu so Analýzy vzoriek zo životného prostredia môžu poskyt- môžu prostredia životného zo vzoriek Analýzy ś pritom vyvoláva hemoragický typ menigoencefalitídy jedincov akoby náhodne, prevažne po kontakte s vodou, vdýchnutím vody cez dutinu nosa. Poèetné nálezy meòa- rodu viek s rekreaènými vodami je zjavná. Prírodné i umelé vodné predstavova môžu telesá kým s oh¾adom na predpoklady rozvinutia ochorenia PAM, ktoré je v priamej súvislosti s kúpaním a potápaním sa, preto másledovanie výskytu virulentných kmeòov význam ako úèinný preventívny prostriedok. Všeobecné preventívne opatrenia z poh¾adu verejného zdravotníctva by sa mali zamera primárnu amébovú menigoencefalitídu. ri s letalitou 97 %. bránou Vstupnou nákazy je sliznica nosovej Agens dutiny. by by mohol vojne vo forme aerosólu (43). a ochorenie B60.2 neglerióza. pôvodcoch infekcií vymenovaných v tabu¾ke, ktorá obsahuje reprezentatívne skupiny pôvodcov ochorení vyvolávajúcich prirodzene sa vyskytujúce ¾udské ochorenia, hlavne v endemických regiónoch a v populáciách bez prístupu k primeraným hygienickým podmienkam, vhodným potravinovým zdrojom, veterinárnym a medi- cínskym komplexom, bez rozvinutého manažmentu verejného zdravotníctva. tento fakt predurèil zaradi ných biologických agens. k Dohovoru o zákaze, vývoji, výrobehromadení a bak- teriologických (biologických)a toxínových zbraní HOC a o ich BWC/AD materiál pracovný predložený bol nièení, V tabu¾keGROUP/56-2. A3.1 Najèastejšie citované biolo- gické agens, ktoré možno zneuži zbrane,je v èasti zaradená PROTOZOA lované z nosohltanových výterov u zdravých jedincov jedincov zdravých u výterov nosohltanových z lované možnos indikujú nené životné podmienky v rôznych typoch prostredia po celomsvete naznaèujú, že význam týchto prvokov ako pôvodcov ochorení bude ešte narasta republike sa problematikou termotolerantných améb z terénneho a laboratórneho h¾adiska dlhodobo zaobera- jú. Do budúcnosti je žiadúce zamera zdroja nedávnej infekcie, predvídanie rizika vzniku 37). (10, ochorenia) schopnos kého režimu na kúpaliskách urèených širokej verejnosti: primeraná a nepretržitá dezinfekcia, filtrácia a/alebo recirkulácia vody bazénov a ich vyhovujúci technický stav sú hlavnou podporou bezpeènej prevádzky plavec- Praktickékých komplexov. opatrenia na zníženie rizika infekcií vyvolaných žijúcimi vo¾ne meòavkami zahàòajú okrem technických opatrení informovanie aj verejnosti o zdravotných rizikách spojených s kúpaním a pobytom na kúpaliskách. nú

. ś ś ter- ś ň Naegleria využívajú využívajú prítomnos ś sledova ś Zákon NR SR SR NR Zákon ś monitorova ś Naegleria fowleri ako možná biologická zbra kontroly kvality Pre bazény vody. ś Verejné zdravotníctvo od ostatných druhov ostatných od rodu nadobudol úèinnos vstúpila do platnosti Vyhláška MZ SR è. è. SR MZ Vyhláška platnosti do vstúpila vstúpila do platnosti Vyhláška MZ SR SR MZ Vyhláška platnosti do vstúpila v rámci Hlavných úloh hlavného hygienika vstúpila do platnosti Vyhláška MZ SR è. 30 30 è. SR MZ Vyhláška platnosti do vstúpila Naegleria fowleri (34). PCR (34). metodiky sú nenároèné na manipuláciu ś V Slovenskej republike požiadavky na kvalitu vôd na R. 1986: R. 2002 R. 1. 9. 20071. 9. R. 2004 R. 1. 6. 2006 Nevieme presne èo napomáha rozvinutiu ochorenia ochorenia rozvinutiu napomáha èo presne Nevieme kúpanie ustanovujú povinnos ustanovujú kúpanie a poskytujú spo¾ahlivé výsledky už za nieko¾ko hodín. hodín. nieko¾ko za už výsledky spo¾ahlivé poskytujú a V súèasnosti sa v diagnostike priamo z klinického materiálu, èi vyšetrovanej z vody bez predošlejkultivácie, èím sa znaène zníži èasovánároè- nos nested 30), najmä 56, 31, konvenèné PCR metódy (41, multiplex 34), PCR metódy (47) 37, PCR metódy (51, a real-time PCR 6). (5, žijúcichvo¾ne meòaviek vo vodách na kúpanie. Monito- ring a vývoj legislatívy SR z h¾adiska sledovania prítom- nosti žijúcich vo¾ne meòaviek v plaveckých komplexoch vývojom. nasledovným prešiel Slovenskej republiky bola vykonaná Analýza hygienic- kvality kýchpodmienok rekreácie kúpaliskách na verejných kontrolu v SSR sledovanie kúpanie, výskytu améb na skupiny limax. vodu na požiadavkách o na kúpanievody na a kúpaliská, stanovila ktorá uka- zovatele kvality vody na kúpanie, ich medzné hodnoty a rozsah a poèetnos 252/2006 Z.z. o podrobnostiach o prevádzke kúpalísk a podrobnostiach o požiadavkách na kvalitu vody kú- palísk, vody na kúpanie a jej kontrolu, v ktorej ako bio- logické indikátory kvality vodypre sú bazény umelých kúpalísk stanovené améby kultivovate¾né pri 36 °C a améby kultivovate¾né pri 40 °C. umelých kúpalísk sa stanovuje povinnos è.146/2004 ktorou sa mení a dopåòa Vyhláška MZ SR SR MZ Vyhláška dopåòa a mení sa ktorou è.146/2004 è. 30/2002Z.z. kde medzi biologické indikátory kvality vody sú pre bazény umelých kúpalísk zaradené termotole- améby. rantné Navyše PCR metodikyaplikovate¾né sú tak na vyšetrenie klinických vzoriek ako aj environmentálnych vzoriek. Nespornou výhodou je fakt, že DNA je možné izolova motolerantné améby (TTA) s medznou hodnotou „neprí- mltomné“ v 10 s frekvenciou sledovania 1x za 2 mesia- ce. Améby sa vyšetrujú z vody a zo sedimentov bazénu a sterov zo stien bazénu. EU. è. Z.z. 355/2007 o ochrane, podpore a rozvoji verejného zdravia legislatívou a o zmene a doplnení s niektorých zákonov, ktorý upravuje aj podmienky zosúladená kontroly kvality je vôd. Problema- tika monitorovania kvality oblastiach vôd na kúpanie v prírodných kúpacích Monitorovanie kvality vôd bazénov umelých kúpalísk budú riešené osobitne novým vykonávacím predpisom, vôd kvalitu na kladené požiadavky aj zoh¾adní ktorý pod¾a predpisov Európskej únie. Naegleria fowleri u ¾udí, aké sú predpoklady nadobudnutia infekcie. Je známe, že ochorenie sa rozvinie aj u celkom zdravých 58 HYGIENA ÈÍSLO 2 ROÈNÍK 53 2008 PØEHLEDOVÉ PRÁCE 16. De Jonckheere JF. A century of research on the amoeboflagellate amoeboflagellate onthe ofresearch Acentury JF. Jonckheere De 16. 8 De Jonckheere JF. of Occurrence 18. of Characterization JF. Jonckheere De 17. 15.Èerva L, Kasprzak W, Mazur T. meningoen- amoebic ofprimary diagnosis Laboratory L. Èerva 14. from amoebae oflimax V. Isolation Skoèil C, Serbus L, Èerva 13. fata- sixteen meningoencephalitis: Amoebic K. Novák L, Èerva 12. for Centers Atlanta: Internet]. onthe [homepage CDC.gov 11. 10. Cabanes PA, Wallet F, Pringuez E, Pernin P. Assessing the risk risk the P. Assessing Pernin E, F, Pringuez Wallet PA, Cabanes 10. JMed. NEngl meningoencephalitis. amebic Primary CG. Butt 9. menin- amebic ofprimary treatment Successful RL. Brown 8. oc- The M. Miles M, Marks EA, Keys RTM, Cursons TJ, Brown 7. Behets J, Declerck P, Delaedt Y, Verelst Ollevier L, F. A6. duplex Damme Van L, Duvivier L, Verelst P, Declerck F, Seghi J, Behets 5. et B, Silk G, Saygi SA, AP, Sandry Roome SK, Clarke J, Apley 4. meningoencepha- amoebic Primary A. Jamieson K, Anderson 3. system: water adrinking in fowleri Naegleria al. et J, Amann 2. OR, Anderson RA, Andersen MA, Farmer AG, Simpson SM, Adl 1. LITERATÚRA hygienikov. regionálnych procesom vacím èo by diagnostika, napomohlosa zefektívnila rozhodo- diagnostiky molekulárno-biologickými metódami, aby 21. Gelman BB, Popov V, Chaljub G, Nader R, Rauf SJ, Nauta HW, Nauta SJ, Rauf R, Nader G, V, Popov BB, Chaljub Gelman 21. due probably meningitis pyogenic Acute RF. Carter M, Fowler 20. epidemiology The BS. Robinson AS, Cameron MM, Dorsch 19. genus 1982 26(2):152-61.1982 Immunol. Microbiol Epidemiol JHyg plants. ofpower waters Biochem Parasitol. 1987 May;24(1):55-66. 1987 Parasitol. Biochem Mol DNA. of whole-cell digestion endonuclease restriction the environment. Folia Parasitol. 1980;27(1):1-9. Parasitol. Folia environment. the in amoebae oflimax detection forthe methods and cephalitis 1973;20(1):97-103. Parasitol. Folia ofman. mucosa nasal the 5;160(8323):92. Apr 1968 Science. lities. from: www.cdc.gov. Available 12]. Dec 2007 [cited Prevention and Control Disease Microbiol. 2001 Jul;67(7):2927-31. 2001 Microbiol. the presence of environmental of primary amoebic meningoencephalitis from swimming in 30;274(26):1473-6. Jun 1966 1991 Jun;151(6):1201-2. Med. Intern Arch goencephalitis. 1983;17:59-69. Res. Freshwater JMar NZ Zealand. ofNew Island North ofthe areas thermal in amoebae free-living ofpathogenic distribution and currence Jan;41(1):118-26. 2007 Res. Water samples. water in fowleri ofNaegleria detection quantitative forthe assay PCR real-time 2003;47(3):117-22. Technol. Sci Water PCR. and ELISA tests, offlagellation comparison a fowleri: Naegleria and spp. ofNaegleria Detection al. et A, 7;1(5696):596-9. Mar 1970 J. Med Br Britain. in meningoencephalitis amoebic Primary al. 19;2(7773):379. Aug 1972 Lancet. litis. 2005. Prevention; and Control for Disease Centers Atlanta: diseases. vector-borne and Parasitic In: zona. -Ari- meningoencephalitis amebic ofprimary cases fatal two Sep-Oct;52(5):399-451. 2005 biol. Micro- JEukaryot ofprotists. taxonomy onthe emphasis with ofeukaryotes classification level higher new The al. et JR, Barta et al. Neuropathological and ultrastructural features of amo- features ultrastructural and Neuropathological al. et 25;2(5464):740-2. to Hyg. 1983;77(3):372-7. Trop Med RSoc Trans Australia. South to reference particular with meningoencephalitis amoebic ofprimary control and aquaria. Appl Environ Microbiol. 1979 Oct;38(4):590-3. 1979 Microbiol. Environ Appl aquaria. Acanthamoeba Naegleria . Acta Protozool. 2002;41(4):309-42. Protozool. . Acta sp.: a preliminary report. Br Med J. 1965 Sep Sep 1965 J. Med Br report. apreliminary sp.: Naegleria fowleri Naegleria Naegleria Naegleria fowleri Naegleria and Naegleria Acanthamoeba . Appl Environ Environ . Appl in cooling species by species in 33. Kodet R, Nohýnková E, Tichý M, Soukup J, Visvesvara GS. GS. Visvesvara J, Soukup M, Tichý E, Nohýnková R, Kodet 33. Pathogenic DC. Warhurst PG, Mann S, Kilvington 32. 36. Marciano-Cabral F, Cabral G. G. F, Cabral Marciano-Cabral 36. molekulárno-biologických Využitie C. Klement L, Maïarová 35. Marciano-Cabral R, LePardo DJ, Richardson RC, MacLean 34. 37. Marciano-Cabral F, Marciano-Cabral Mensah R, 37. MacLean A, LaPat-Polasko L. 41. McLaughlin GL, Vodkin MH, Huizinga HW. Amplification of HW. Amplification Huizinga MH, Vodkin GL, McLaughlin 41. K. Hensel Z, Feriancová-Masárová E, D, Tirjaková 40. Matis oppor- and amphizoic Free-living, GS. Visvesvara AJ, Martinez 39. of F. Biology Marciano-Cabral 38. 31. Kilvington S, Beeching JR. Development of a PCR foridentifi- ofaPCR Development JR. Beeching S, Kilvington 31. frag- restriction ofanovel Detection JR. Beeching S, Kilvington 30. thermally in fowleri Naegleria L. T, Èerva W, Mazur Kasprzak 29. Kadlec28. V, Èerva L, Škvárová J. Virulent D. Virulent Nebáznivá L, Èerva J, V, Škvárová Kadlec 27. bio- the and meningoencephalitis amoebic DT. Primary John 26. in amoebae free-living pathogenic DT. Opportunistically John 25. menin- amebic offatal Risk GR. HW, Brenniman Hallenbeck 24. with infections ofparasitic pathology Y. Diagnostic Gutierrez 23. ofpathoge- identification and Isolation L. Deodhar A, Gogate 22. 43. Mezencev R. Biologické zbrane - technológia, výroba, úèinky úèinky výroba, -technológia, zbrane Biologické R. Mezencev 43. Restriction GS. Visvesvara FH, Brandt GL, 42. McLaughlin Amebic encephalitis caused by 1991. p.89-96. Council; City Bath Bath: ofBath. Hotsprings editor. GA, Kellaway In: amoebae Microbiol. 1995 Oct;61(10):3764-7. níctva I. Hygiena. 2006;51(3-4):110-5. Hygiena. I. níctva zdravot- verejného laboratóriách vmikrobiologických metód Jun;93(3):211-7. 2004 Res. Parasitol PCR. nested by samples F. The identification of Pract. 1998;194(6):423-9. Res Pathol Europe. from case first ofthe description child: Identification of Apr;16(2):273-307. 2003 Rev. Microbiol Clin humans. in disease ebic encephalitis caused by caused ebic encephalitis repetitive DNA for the specific detection of detection specific forthe DNA repetitive 2007. PFUK; zoológie Katedra Bratislava: 11. vyd. systému. zoologického Preh¾ad Jan;7(1):583-98. 1997 Pathol. Brain amoebas. tunistic Mar;52(1):114-33. 1988 Oct;69(10):5864-9. 2003 Microbiol. Environ Appl PCR. nested cation of 1997;33:186-91. JProtistol. Eur France. and England in stations power electricity from isolates amoeba) ment length polymorphism in type 1982;29:211-8. Parasitol. Folia waters. polluted 15;201(4360):1025. Sep 1978 Science pool. swimming indoor 17. fowleri of logy p.143-246. 1993. Press; Academic Diego: San ed. 2nd tozoa. pro- Parasitic editors. JR, P, Baker Kreier In: protozoa. parasitic Manage. 1989;13(2):227-32. from waterborne goencephalitis 1990. Febiger; and Lea Philadelphia: correlations. clinical Trop1985;79(1):134. Hyg. Med RSoc Trans nic Oct;62(10):990-8. 2003 Neurol. Exp Slovenská zdravotnícka univerzita; 2007. s. 509. 2007. s. univerzita; zdravotnícka Slovenská Bratislava: I. zbraní biologických aspekty no-zdravotnícke Verej- editors. R, Mezencev C, Klement In: použitia. a spôsoby Sep;26(9):1655-8. Naegleria ofselected DNA ofthe polymorphisms length fragment 1991 Feb;29(2):227-30. Microbiol. Clin Naegleria fowleri Naegleria in indoor swimming pool. Folia Parasitol. 1980;27(1):11- Naegleria fowleri Naegleria in the waters of Bath: a fatality and its consequences. consequences. its and afatality ofBath: waters the in and Naegleria fowleri Naegleria Acanthamoeba amebae Naegleria fowleri Naegleria (aerobia) from a swimming pool in Bombay. Bombay. in pool aswimming from (aerobia) . Annu Rev Microbiol. 1982;36:101-23. Microbiol. Rev . Annu Naegleria fowleri Naegleria from the Appl environment. Environ Sappinia diploidea Balamuthia mandrillaris Balamuthia Acanthamoeba spp in domestic water sources by by sources water domestic in Naegleria spp Naegleria Naegleria fowleri Naegleria Naegleria fowleri Naegleria . J Clin Microbiol. 1988 1988 Microbiol. . JClin Naegleria fowleri Naegleria from water and soil soil and water from Naegleria fowleri Naegleria . Microbiol Rev. Rev. . Microbiol . J Neuropathol . JNeuropathol . as agents of of agents . as (free-living (free-living . Environ . Environ in Czech Naegleria Naegleria Naegleria Naegleria in an . J PØEHLEDOVÉ PRÁCE HYGIENA ÈÍSLO 2 ROÈNÍK 53 2008 59 and other Naeg- cysts in environ- in cysts Cesta k nemocnici 1 Acanthamoeba castellanii Acanthamoeba Ing. KatarínaIng. Trnková from Florida lakes. Appl Appl lakes. Florida from 975 56 Banská 56 975 Bystrica so sídlom v Banskej Bystrici Naegleria fowleri Odbor lekárskej mikrobiológie Naegleria fowleri E-mail: [email protected] chain reaction and hybridization methods. Regionálny úrad verejného zdravotníctva mental samples by using a DNA probe. FEMS Microbiol Lett. 1993 Sep 15;112(3):349-51. Martinez AJ. Isolation of two strains of from human tissue and their pathogenicity and isoenzyme profiles. J Clin Microbiol. 1983 Dec;18(6):1405-12. nie, kontrolu kvality vody na kúpanie a na kúpaliská. Zbierka zákonov. 2002 Jan 9;èiastka 15:253-60. MZ SR è.30/2002 Z.z. o požiadavkáchtrolu kvality vody na kúpanie a na kúpaliská. Zbierka zákonov. na vodu na2004 Jan kúpanie, 26;èiastka 69:1670-5. kon- ebic meningoencephalitis in a Chinese living in Hong Kong. Sep;95(3):249-252. 1993 Neurosurg. Neurol Clin Naegleria pathogenic of identification Environ Microbiol. 1977 Dec;34(6):661-7. infections. ID Wkly Highlights. 2000 Nov;47:29-31. ho zdravia a o zmene a doplnení niektorých zákonov. Zbierka zákonov. 2007 Jun 21;èiastka 154:2402-75. leriae by polymerase by leriae FEMS Microbiol Lett. 1993 Jul 1;110(3):325-30. 56. Sparagano Differentiation O. of 58. Visvesvara GS, Mirra SS,Brandt FH, Moss DM, Mathews HM, 59. Vyhláška MZ SR è. 30/2002 o požiadavkách na vodu na kúpa- 60. Vyhláška MZ SR è.146/2004 ktorou sa mení a dopåòa Vyhláška 61. Wang A, Kay R, Poon WS, HK. Ng Successful treatment of amo- 62. Wellings FM, Amuso PT, Chang SL, Lewis AL. Isolation and 63. Wiser Drug MF. design strategiesfor the control of parasitic 64. Zákon NR è.355/2007 SR o ochrane, podpore a rozvoji verejné- 57. Sparagano Detection O. of . Amble- in the environ- the in in Slovakia. Ann Slovakia. in Gymnamoebae Naegleria new subspecies, and the purepecha Acanthamoeba keratitis Acanthamoeba . Parasitol Res. 2002 May;88(5):443-50. kúpalísk a podrobnostiach o požiadavkách na kvalitu vody kúpalísk, vody na kúpanie a jej kontrolu. Zbierka zákonov. 2006 Apr 5;èiastka 90:1518-27. kováE. First cases of Agric Envirom Med. 2004;11(2):335-41. side (UK): Freshwater Biological Association; 1988. riction enzyme analysis for detection and exploration of the variability in the free-living amoeba ment. Appl Environ Microbiol. 2002 Apr;68(4):2061-5. in theswimming-pools of Lyon. Ann Parasitol Hum Comp. 1978 Jul-Aug;53(4):333-44. (In French.) ry amoebic meningoencephalitis. J Med Assoc Thai. 1991 Feb;74(2):112-5. ment, Production and Stockpiling of Bacteriological (Biologi- cal) and Toxin Weapons and on Their Destruction, BWC/AD HOC GROUP/56-2, Annex B, 2001a. Bradford: Bradford Disar- mament Research Centre; 2001. a nested PCR assay to detect the pathogenic free-living amoeba Naegleria fowleri tarasca lovaniensis Naegleria strain, a morphological variant of N. l. lovaniensis, isolated from natural thermal waters in Mexico. J Protozool. 1990 Jul- Aug;37(4):301-10. J. Successful treatment of primary amebic meningoencephalitis. N Engl J Med. 1982 Feb 11;306(6):346-8. an J Parasitol. 2004 Sep;42(3):93-119. living amebas. Clin Microbiol Rev. 2002 Jul;15(3):342-54. 44. Nariadenie vlády SR è.252/2006 o podrobnostiach o prevádzke prevádzke o podrobnostiach o 44. è.252/2006 SR vlády Nariadenie 45. Ondriska F, Mrva M, Lichvár M, Žiak P, Murgašová Z,Nohýn- 46. Page FC. A new key to freshwater and soil 47. Pélandakis M, Pernin Use of multiplex P. PCR and PCR rest- 48. Pernin P, Riany A. Study on the presence of free-living amoebae49. Poungvarin N, Jariya The fifth P. nonlethal caseprima- of 50. Protocol to the Convention on the Prohibition of the Develop- 51. Réveiller FL, Cabanes PA, Marciano-Cabral Development F. of 52. Rivera F, Cerva L, Martinez J, Keleti G, Lares F, Ramirez E, et al. 53. Seidel JS, Harmatz Visvesvara P, GS, Cohen A, Edwards J, Turner 54. Shin HJ, Im KI. Pathogenic free-living amoebae in Korea. Kore- 55. Schuster FL. Cultivation of pathogenic and opportunistic free-