UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO GRANDE DO NORTE CENTRO DE BIOCIÊNCIAS PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM SISTEMÁTICA E EVOLUÇÃO REVISÃO DO GÊNERO LYCOPERDON PERS. (LYCOPERDACEAE, AGARICALES) MEDIANTE ANÁLISES MORFOLÓGICAS E MOLECULARES DÔNIS DA SILVA ALFREDO ________________________________________________ Tese de Doutorado Natal/RN, março de 2017 DÔNIS DA SILVA ALFREDO REVISÃO DO GÊNERO LYCOPERDON PERS. (LYCOPERDACEAE, AGARICALES) MEDIANTE ANÁLISES MORFOLÓGICAS E MOLECULARES Tese de doutorado apresentada ao Programa de Pós-Graduação em Sistemática e Evolução da Universidade Federal do Rio Grande do Norte, em cumprimento às exigências para a obtenção do título de Doutor em Sistemática e Evolução Área de concentração: taxonomia e sistemática Orientador: Dr. Iuri Goulart Baseia Coorientadora: Dra. María Paz Martín Coorientador: Dr. Paulo Marinho NATAL – RN 2017 0 Universidade Federal do Rio Grande do Norte - UFRN Sistema de Bibliotecas - SISBI Catalogação de Publicação na Fonte. UFRN - Biblioteca Setorial Prof. Leopoldo Nelson - •Centro de Biociências - CB Alfredo, Dônis da Silva. Revisão do gênero Lycoperdon Pers. (Lycoperdaceae, Agaricales) mediante análises morfológicas e moleculares / Dônis da Silva Alfredo. - Natal, 2017. 298 f.: il. Tese (Doutorado) - Universidade Federal do Rio Grande do Norte. Centro de Biociências. Programa de Pós-Graduação em Sistemática e Evolução. Orientador: Dr. Iuri Goulart Baseia. Coorientadora: Dra. María Paz Martín. Coorientador: Dr. Paulo Marinho. 1. Basidiomycota - Tese. 2. Fungos gasteroides - Tese. 3. ITS barcode - Tese. 4. Puffballs - Tese. 5. Taxonomia - Tese. I. Baseia, Iuri Goulart. II. Martín, María Paz. III. Marinho, Paulo. IV. Universidade Federal do Rio Grande do Norte. V. Título. RN/UF/BSE-CB CDU 582.284 DÔNIS DA SILVA ALFREDO REVISÃO DO GÊNERO LYCOPERDON PERS. (LYCOPERDACEAE, AGARICALES) MEDIANTE ANÁLISES MORFOLÓGICAS E MOLECULARES Tese de doutorado apresentada ao Programa de Pós-Graduação em Sistemática e Evolução da Universidade Federal do Rio Grande do Norte, em cumprimento às exigências para a obtenção do título de Doutor em Sistemática e Evolução Aprovado em: 30 de março de 2017 Comissão examinadora Dr. Luiz Fernando Pascholati Gusmão, UEFS Examinador Externo à instituição Dra. Tiara Sousa Cabral, INPA Examinadora Externa à Instituição Dr. Bruno Cavalvanti Bellini, UFRN Examinador Interno Dra. Raquel Cordeiro Theodoro, UFRN Examinadora Interna Dr. Iuri Goulart Baseia, UFRN Presidente 2 Dedico aos meus pais José Benedito Alfredo e Isabel S. Alfredo por sempre acreditarem e me incentivarem a chegar até aqui. 3 AGRADECIMENTOS Primeiramente gostaria de agradecer à Universidade Federal do Rio Grande do Norte por oferecer o curso de doutorado no Programa de Pósgraduação em Sistemática e Evolução. Também, devo agradecimentos à Coordenação de Aperfeiçoamente de Pessoa de Nível Superior / CAPES, por proporcionar o apoio financeio de bolsa de estudo no Brasil e estágio sanduíche na Espanha (Programa Ciéncias Sem Fronteiras), que viabilizou diversos resultados e parcerias; ao Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Técnológico / CNPq, pelo suporte financeiro do Projeto Pesquisador Visitante Especial (PVE-MEC/MCTI/CNPq/FAPs nº71/2013), sem o qual as análises moleculares e o intercambio com o/a pesquisador(a) do exterior seria muito difícil de se realizar; também agradecer ao Programa de Pesquisa em Biodiversidade do Semiárido (PPBio/Semiárido) por ter custeado parte das análises em microscópio eletrônico de varredura. Acima de tudo, não conseguiria encontrar palavras para agradecer ao meu orientador Prof. Dr. Iuri G. Baseia. Pois, desde que nossa parceria se formou a confiança mútua foi aumentando e o respeito por este excelente pesquisador tomou grandes proporções. Professor Iuri, sempre esteve disposto a ajudar, escutar e guiar em todas a situações; como um pai sempre se preocupou não somente com a situação acadêmica de seus alunos, mas também com a vida pessoal. Tenho uma profunda gratidão a esse parceiro profissional e amigo. Se hoje eu alcancei uma situação profissional melhor foi porque seis anos atrás ele meu deu um voto de confiança, e desde então, tenho me esforçado todos os dias para corresponder a confiança dada por ele. Professor muitíssimo obrigado! Claro, não poderia me esquecer de sua adorável esposa Tereza Cristina O. Galvão, pelos momentos alegres e descontraídos em nossas confraternizações. À ambos, que são meus padrinhos de casamento, Obrigado! Também quero deixar meu profundo agradecimento a minha coorientadora no exterior Dra. Maria P. Martín, que foi fundamental para o sucesso dos estudos moleculares além das preciosas orientações na construção da tese. Profa. MariPaz, saiba que desejo tudo de bom a ti e muito sucesso em sua vida profissional e pessoal. Saiba que tenho por ti um profundo respeito e carinho. Agradeço pelos momentos vividos na Espanha, e por ter acolhido a mim e minha esposa como membros de sua família. Aprendi muito contigo durantes esses anos, ensinamentos que jamais irei me esquecer. Tu és uma 4 profissional de excelência, uma verdadeira amiga que irei levar no fundo de meu coração. Agradeço também, a Paco, Analí e Eva, todos vocês fizeram a distância e as saudades do Brasil e de nossos familiares ficarem menos perceptíveis. Tenho vocês como parte da família. Ao meu coorientador Prof. Dr. Paulo Marinho, que me confiou o acesso ao seu laboratório de biologia molecular, também por me aceitar como aluno no estágio a docência, meus eternos agradecimentos, foi ótima nossa parceria na ciência e seus ótimos conselhos. Aos Professores Doutores Bruno C. Bellini, Raquel C. Theodoro, Tiara Cabral e Luis Fernando P. Gusmão, fico muito agradecido por aceitarem a participarem da banca avaliadora; aos Professores Doutores Bruno T. Goto e a Vagner G. Cortez, obrigado por se disporem a participarem como suplentes da banca avaliadora. De maneira muito especial, sou eternamente grato aos meus pais José Benedito Alfredo e Isabel da Silva Alfredo, que sempre me incentivaram a continuar meus estudos; por se preocuparem todos os dias pela distância que o desafio de estudar nos impôs; principalmente por terem me ensinado a trabalhar sempre com honestidade e sempre preserverar nos momentos difíceis. Do fundo do meu coração, muito obrigado! Amo vocês! Aproveito para deixar meus agradecimentos aos meus irmãos, pela preocupação e pelo carinho que sempre tivemos um pelo outro. Aos colegas do Laboratório de Biologia de Fungos pela companhia e preciosos momentos de convivência, e em especial a Rafaela Gurgel e Cinta Samara, pelo trabalho em enquipe e aprendizado mútuo. Também, agredeço a T. Accioly por ter cedido gentilmente os espécimes de L. exoelongatum. Aos curadores dos herbários BAFC, CORDC, FH/HUH, LG, VDEMOULIN, MA-Fungi, MCF-Fungi, NY, K. ICN, PACA, UFRN-Fungos, pelos empréstimos das exsicatas. Em especial as pesquisadoras Dra. Laura Domínguez, Dra. María Luciana Hernández-Caffot e Dra. Silvana Longo por me acolherem estupendamente em minha visita ao herbário IMBIV-Museo Botánico (CORD) de Buenos Aires/Argentina. 5 Ao pesquisador Dr. Francisco de Diego Calonge (Paco), que durante meu doutorado sanduíche no Real Jardím Botánico, Marid/Espanha, me proporcionou ótimos momentos de trocas de experiência, ensinamentos e boas conversas. Da mesma forma, a todos do Real Jardín Botánico, em especial: M. Dueñas, M. Tereza Tellería, Ricarda Riina, Vlademir Sandoval, Javier Fernández-Lopez, Kina Gracia, Irene Villa Machio, Emilio Cabeza, Yolanda León e Yurena Arjona, muito obrigado por proporcionarem uma maravilhosa companhia durante os nove meses que convivemos. Um especial agradecimento à Fátima Duran, por to paciência e disposição em ajudar me nas atividades do laboratório. Do mesmo modo, deixo meus agradecimentos às pesquisadoras do Iran, Dr. Farideh Moharrek and Tahmineh Shagholi, pelos momentos felizes e divertidos que passamos na Espanha. Também as pesquisadoras Dra. Laura Martinez-Suz e a curadora assistente Dra. Begoña Aguirre-Hudson, que me deram um especial suporte durante minha rápida visita ao herbário do Kew Botanical Gardens. Bem como, a pesquisadora da Macedonia, Dr. Katerina Rusevska, pelo trabalho em equipe realizado, e pela ótima companhia durante as extrações de DNA e alinhamentos das sequências. Deixo também meus sinceros agradecimentos à Dra. Marian Glenn (Seton Hall University, USA), que exaustivamente realizou as correções da versão em inglês de todos os capítulos da presente tese, um muito obrigado pelo seu tempo e dispocição! Agradeço aos meus sogros Joaci Lavor e Onelia Lavor pelo apoio durante esses anos, vocês são exemplos a serem seguidos. Deixo meu agradecimento em especial a minha amada esposa e compamnheira de pesquisa Pâmela Lavor, que esteve comingo em todos os momentos, nas alegrias e nas frustações que às vezes a pesquisa nos proporciona. Também por ser essa maravilhosa pessoa que sempre sabe como me erguer diante das minhas dificuldades não só na pesquisa quanto na vida pessoal. Muito obrigado! Amo você! Obrigado Deus, por me dar forças para sempre continuar diante das intempéries da vida. 6 Trabalhe duro e em silêncio. Deixe que seu sucesso faça barulho. (Dale Carnegie). 7 RESUMO Em uma estimativa sobre a biodiversidade da terra acredita-se haver entorno de 50 milhões de espécies e para os fungos acredita-se que essa estimativa gira em torno de 5,1 milhões de espécies, o que levaria cerca de 1000 anos para os taxonomistas identificassem todas essas espécies. Os taxonomistas têm empregado muito esforço para identificar essas espécies de