Etiología De La Enfermedad Punta De Cigarro En Plantaciones De
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ETIOLOGÍA DE LA ENFERMEDAD PUNTA DE CIGARRO EN PLANTACIONES DE BANANA EN LAS PROVINCIAS DE SALTA Y JUJUY Claudio Manuel Ortiz Trabajo de tesis para ser presentado como requisito parcial para optar el título de MAGISTER EN CIENCIAS AGRARIAS ORIENTACIÓN EN FITOPATOLOGÍA AREA PRODUCCIÓN VEGETAL FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS UNIVERSIDAD NACIONAL DE MAR DEL PLATA Unidad Integrada Balcarce: Facultad de Ciencias Agrarias, UNMdP- Estación Experimental Agropecuaria Balcarce, INTA Balcarce, Argentina Marzo 2017 ii ETIOLOGÍA DE LA ENFERMEDAD PUNTA DE CIGARRO EN PLANTACIONES DE BANANA EN LAS PROVINCIAS DE SALTA Y JUJUY Claudio Manuel Ortiz Comité Consejero ----------------------------------------------- Ridao, Azucena del Carmen Directora de Tesis ----------------------------------------------- Clemente, Gladys Elena Asesora ------------------------------------------------- Bejarano, Noemí del Valle Asesora iii ETIOLOGÍA DE LA ENFERMEDAD PUNTA DE CIGARRO EN PLANTACIONES DE BANANA EN LAS PROVINCIAS DE SALTA Y JUJUY Claudio Manuel Ortiz Aprobada por ----------------------------------------------- Ridao, Azucena del Carmen Directora de Tesis ----------------------------------------------- Evaluador externo ------------------------------------------------- Evaluador interno ----------------------------------------------- Evaluador externo iv DEDICATORIA Dedico este trabajo de manera muy especial a mi hijo Vicente Manuel Ortiz Bravo, mi señora esposa Fernanda Gabriela Bravo, a mi madre Vicenta Patricia Torres, hermanos Marcelo Javier Ortiz, Jorge Daniel Ortiz, sobrinos y amigos de la localidad de Yuto. Ya que siempre estuvieron presentes en mi formación como persona. v AGRADECIMIENTOS Agradecer en forma especial a mi comité asesor Directora: Dra. Azucena del Carmen Ridao, Consejeros: Gladys Elena Clemente y Noemí del Valle Bejarano. Y a quienes me ayudaron a realizar el trabajo: Ceferino René Flores, Héctor Rubén del Pino, Rosa Elina Rueda, Noelia Mabel Rueda, Alejandro Martin Ismael y a nuestra amiga y compañera Silvia Griselda Bejarano que estará siempre con nosotros. Como también extiendo este agradecimiento al grupo de Patología Vegetal de EEA INTA Balcarce y a la EECT de Yuto por permitirme formar académicamente. No quiero dejar de mencionar a los nuevos amigos que encontré en esta estadía de la carrera, ya que estuvieron en los buenos y malos momentos para brindarme su sincera amistad. vi ÍNDICE Indice de Tablas _____________________________________________ viii Indice de Figuras ______________________________________________ ix Resumen ____________________________________________________ xiii Abstract _____________________________________________________ xv 1. INTRODUCCIÓN ______________________________________________ 1 1.1 Hipótesis _____________________________________________________________ 2 1.2 Objetivo general ______________________________________________________ 2 1.2.1 Objetivos particulares _______________________________________________ 2 2. REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA ____________________________________ 3 2.1 Origen y Taxonomía del banano (Musa spp.) ____________________________ 3 2.2 Importancia mundial del cultivo ________________________________________ 4 2.2.1 Los principales países productores a nivel mundial _____________________________ 5 2.2.2 Principales países Exportadores e Importadores ________________________________ 5 2.2.3 Importancia nacional ________________________________________________________ 7 2.3 Descripción botánica _________________________________________________ 8 2.3.1 Aspectos generales _________________________________________________________ 8 2.3.2 Morfología de las estructuras vegetativas ______________________________________ 9 2.3.2.1 Sistema radical _________________________________________________________ 9 2.3.2.2 Cormo _________________________________________________________________ 9 2.3.2.3 Yemas laterales (brotes, hijos o retoños) _________________________________ 10 2.3.2.4 Sistema foliar __________________________________________________________ 13 2.3.2.5 Inflorescencia _________________________________________________________ 13 2.3.2.6 Desarrollo de las flores _________________________________________________ 15 2.3.2.7 Desarrollo del fruto _____________________________________________________ 16 2.4 Manejo Agronómico _________________________________________________ 18 2.5 La enfermedad punta de cigarro ______________________________________ 19 2.5.1 Síntomas _________________________________________________________________ 19 2.5.2 Agentes causales __________________________________________________________ 19 2.5.2.1 Musicillium theobromae (Truconi) Zare & W. Gams (sinónimo V. theobromae Turconi E.W. Mason & S. J. Hughes – Stachylidiun theobromae Turconi) ____________ 19 2.5.2.2 Fusarium spp. _________________________________________________________ 21 2.5.2.3 Deightoniella torulosa (Syd) Ellis _________________________________________ 22 2.5.2.4 Trachysphaera fructigena Tabor and Bunting ______________________________ 22 2.5.3 Epidemiologia y ciclo de la enfermedad _______________________________________ 23 2.5.4 Manejo de la enfermedad ___________________________________________________ 24 3. MATERIALES y MÉTODOS ____________________________________ 25 3.1 Área de Muestreo ____________________________________________________ 25 vii 3.1.1 Método de muestreo _______________________________________________________ 25 3.1.2 Recolección de Frutas ______________________________________________________ 26 3.2 Aislamiento de hongos a partir de frutas con síntomas _________________ 27 3.3 Pruebas de Patogenicidad ____________________________________________ 28 3.4 Crecimiento in vitro y caracterización morfológica de los aislamientos fúngicos ________________________________________________________________ 30 3.4.1 Crecimiento in vitro a distintas temperaturas y caracterización morfológica macroscópica __________________________________________________________________ 30 3.4.2 Caracterización micromorfológica de Fusarium y Musicillium ____________________ 31 3.4.3 Caracterización molecular de Musicillium _____________________________________ 31 3.4.3.1 Extracción de ADN _____________________________________________________ 32 3.4.3.2 PCR con primers específico para V. dahliae _______________________________ 32 3.4.3.3 PCR con ITS1/ITS4 y digestión con las enzimas Hae III e Hinf I _____________ 33 3.4.3.4 PCR para la detección del gen β-tubulina con Bt1a/Bt1b y digestión con las enzimas Alu I, Hinf I y Cfo I ____________________________________________________ 34 3.4.3.5 Digestión con la enzima Hae III para el mDNA_____________________________ 34 3.4.3.6 Análisis multivariado de los resultados de las pruebas moleculares __________ 34 4. RESULTADOS ______________________________________________ 35 4.1 Área y método de muestreo: Prevalencia e Incidencia de la enfermedad _ 35 4.1.1 Aislamientos de hongos a partir de frutas con síntomas ________________________ 36 4.1.2 Pruebas de Patogenicidad __________________________________________________ 37 4.2 Crecimiento in vitro y caracterización de los aislamientos fúngicos _____ 41 4.2.1 Crecimiento in vitro a distintas temperaturas y caracterización macro y micromorfológica de Fusarium y Musicillium ________________________________________ 41 4.2.2 Caracterización molecular de Musicillium _____________________________________ 46 4.2.2.1 Extracción de ADN _____________________________________________________ 46 4.2.2.2 PCR con primers específicos para V. dahliae ______________________________ 47 4.2.2.3 PCR con ITS1/ITS4 y digestión con las enzimas Hae III e Hinf I _____________ 48 4.2.2.4 PCR para la detección del gen β-tubulina con Bt1a/Bt1b y digestión con las enzimas Alu I, Hinf I y Cfo I ____________________________________________________ 50 4.2.2.5 Digestión con la enzima Hae III para el mDNA_____________________________ 50 4.2.2.6 Análisis Multivariado ___________________________________________________ 51 5. DISCUSIÓN _________________________________________________ 52 6. CONCLUSIONES ____________________________________________ 56 7. BIBLIOGRAFÍA ______________________________________________ 57 8. APÉNDICE _________________________________________________ 64 ANEXO I ________________________________________________________________ 64 ANEXO II _______________________________________________________________ 75 ANEXO III _______________________________________________________________ 76 ANEXO IV ______________________________________________________________ 77 viii ÍNDICE DE TABLAS Tabla 1: Incidencia (%) de punta de cigarro en nueve lotes de seis fincas de Jujuy y Salta donde apareció punta de cigarro (diciembre 2014/enero de 2015). _____________________________________________________________ 36 Tabla 2: Código y origen de los aislamientos de Fusarium, Musicillium, Colletotrichum y Alternaria, usados en la primera prueba de patogenicidad. __ 37 ix ÍNDICE DE FIGURAS Figura 1: Estadística de producción mundial de bananas entre 2012/2014. Fuente: FAOSTAT (2015). Organización para la Agricultura y la Alimentación de las Naciones Unidas. División de Estadística._ ____________________________________________________________________ 5 Figura 2: Principales países exportadores de banana en el periodo 2000/2013. Fuente: FAOSTAT (2016). Organización para la Agricultura y la Alimentación de las Naciones Unidas. División de Estadística. ____________________________ 6 Figura 3: Principales países importadores de banana en el periodo 2000/2013.