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Estudio De La Utilidad De Las Proteínas P22, P30 Y P35 De Toxoplasma Gondii Para El Diagnóstico De Fase Aguda De La Toxoplasmosis

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Estudio De La Utilidad De Las Proteínas P22, P30 Y P35 De Toxoplasma Gondii Para El Diagnóstico De Fase Aguda De La Toxoplasmosis Costa, Juan Gabriel - 2014 - Universidad Nacional del Litoral Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas Tesis para acceder al grado de Doctor en Ciencias Biológicas Estudio de la utilidad de las proteínas P22, P30 y P35 de Toxoplasma gondii para el diagnóstico de fase aguda de la toxoplasmosis Autor: Lic. Juan Gabriel Costa Laboratorio de Tecnología Inmunológica Director: Dr. Iván Sergio Marcipar Co-Directora: Dra. Claudia Marina Lagier - 2014 - i Costa, Juan Gabriel - 2014 - Se agradece a la Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas de la Universidad Nacional del Litoral y al CONICET, instituciones que permitieron el desarrollo de la investigación para esta tesis doctoral. i Costa, Juan Gabriel - 2014 - A partir de los resultados de esta tesis, se presentaron los siguientes resúmenes de trabajos en congresos o revistas científicas: Costa, J. G.; Sferco, S. J. y Marcipar, I. Programas Actuales para la Predicción de Antigenicidad: Evaluación de su efectividad. XXXVII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Biofísica. La Plata, Buenos Aires, Argentina. año 2008. Costa, J. G.; Lagier, C. M y Marcipar, I. S. Modelado de la Proteína P35 de Toxoplasma Gondii y Predicción de sus Epitopes. Primer Congreso Argentino de Bioinformática y Biología Computacional. Quilmes, Buenos Aires, Argentina, año 2010. Costa, J. G.; Faccendini, P.; Carral, L.; Kaupfer, F.; Lagier, C. M y Marcipar, I. S. Evaluación de dos regiones de la proteína P35 de Toxoplasma Gondii para el diagnostico de fase aguda de la toxoplasmosis. XXIV Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología. Ascochinga, Córdoba, Argentina, año 2010. Costa, J. G.; Faccendini, P.; Lagier, C. M y Marcipar, I. S. Modelado y Predicción de los Epitopes del Antígeno P22 de Toxoplasma gondii. Segundo Congreso Argentino de Bioinformática y Biología Computacional. Córdoba, Córdoba, Argentina, año 2011. Costa, J. G.; Faccendini, P.; Lagier, C. M y Marcipar, I. S. Desarrollo de una Técnica de Lectura Visual para Detectar Toxoplasmosis Aguda. IX Congreso de Protozoología y Enfermedades Parasitarias. Mar del Plata, Buenos Aires, Argentina, año 2011. Peretti, L.; Gonzalez, V.; Costa, J. G. y Marcipar, I. S Synthesis of Carboxylated Latexes and Sensitization with a Recombinant Protein to Detect Toxoplasmosis. IX Simposio Argentino de Polímero. Bahía Blanca, Buenos Aires, Argentina, año 2011. Cardona, P.; Costa, J. G.; Carral, L.; Kaupfer, F.; Lagier, C. M y Marcipar, I. S. Clonado, Purificación y Evaluación de Dos Regiones del Antígeno P30 para Discriminación entre la Fase Aguda y Crónica de la Infección de Toxoplasmosis. VII Jornada de Comunicación de Producciones Académicas y Científicas en Biología. Parana, Entre Ríos, Argentina, año 2011. Costa, J. G.; Perotti, J.; Faccendini, P.; Lagier, C. M. y Marcipar, I. S. Optimization of the acute toxoplasmosis immunodiagnostic during the pregnancy. Workshop “Frontiers in Biosciencie”, Ciudad Autónoma de Buenos Aires, Buenos Aires, Argentina, año 2012. Costa, J. G.; Perotti, J.; Faccendini, P.; Dure, A.; Carral, L.; Kaupfer, F.; Lagier, C. M y Marcipar, I. S. Evaluación de diferentes regiones de las proteínas P22, P30 y P35 para diagnóstico de la fase aguda de la toxoplasmosis. XXV Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología y Enfermedades Parasitarias, Ciudad Autónoma de Buenos Aires, Buenos Aires, Argentina, año 2012. ii Costa, Juan Gabriel - 2014 - Costa, J. G.; Faccendini, P.; Sferco, J. S.; Lagier, C. M. y Marcipar, I. S. Comparison of the ability to predict true linear B-cell epitopes by on-line available prediction programs. 3er Congreso Argentina de Bioinformática y Biología Computacional, Oro Verde, Entre Ríos, Argentina, año 2012. Peretti, L.; Gonzalez, V.; Costa, J. G.; Marcipar, I. S. y Gugliota, L. Síntesis de Partículas tipo "core-shell" y sensibilización con una proteína recombinante del Toxoplasma gondii. XIII Simposio Latinoamericano de Polímeros y XI Congreso Iberoamericano de Polímeros, Bogotá D.C., Bogotá, Colombia, año 2012. Costa, J. G.; Faccendini P.; Sferco, S. Lagier, C. y Marcipar, I. (2013) Evaluation and comparison of the ability of online available prediction programs to predict true linear B- cell epitopes. Protein and Pept. Lett. 20: 724-730. Peretti, L.; Gonzalez, V.; Costa, J. G.; Marcipar, I. S. y Gugliota, L. Síntesis, Caracterización y Sensibilización de Látex Carboxilados de Diferentes Tamaños para la Detección de Toxoplasmosis. XVIII Congreso Argentino de Fisicoquímica y Química Inorgánica, Rosario, Argentina, 2013. Faccendini, P.; Costa, J. G.; Ribone, É.; Marcipar, I. y Lagier, C. Desarrollo de un sistema electroquímico para evaluar infección toxoplásmica. VII Congreso Argentino de Química Analítica, Mendoza, Argentina, 2013. Peretti, L.; Gonzalez, V.; Costa, J. G.; Marcipar, I. S. y Gugliota, L. Obtención de complejos látex-proteína para detección diferencial de infección aguda por Toxoplasma gondii mediante inmunoaglutinación. XXVI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología, Rosario, Argentina, 2013. iii Costa, Juan Gabriel - 2014 - Índice Introducción ................................................................................................................................... 1 1. La infección de toxoplasmosis .................................................................................................... 2 1.1. ¿Qué es la toxoplasmosis? .................................................................................................... 2 1.2. Agente etiológico .................................................................................................................. 3 1.2.1. Genotipos de T. gondii ................................................................................................... 5 1.3. Ciclo de vida de Toxoplasma gondii .................................................................................... 5 1.4. Invasión celular y proteínas involucradas ............................................................................ 8 1.5. Respuesta inmune ante la infección .................................................................................... 10 1.6. Prevalencia de la infección en el mundo, Argentina y Santa Fe ........................................ 11 1.7. Infección en la embarazada y el feto .................................................................................. 12 1.8. Tratamiento de la infección en embarazadas ...................................................................... 13 1.9. Técnicas actuales para el diagnóstico ................................................................................. 14 1.9.1. Ensayo de Sabin-Feldman ............................................................................................ 14 1.9.2. IFI ................................................................................................................................. 14 1.9.3. ISAGA ......................................................................................................................... 14 1.9.4. HAI .............................................................................................................................. 14 1.9.5. ELISA .......................................................................................................................... 15 1.9.6. Ensayo de avidez .......................................................................................................... 15 1.10. Técnicas actuales para el diagnóstico de fase aguda de la infección ................................ 16 2. Optimización del diagnóstico de la fase aguda de toxoplasmosis ............................................ 19 2.1. Técnicas experimentales ..................................................................................................... 19 2.2. Antígenos para diagnóstico ................................................................................................ 19 2.3. Antígenos usados para diferenciar las fases de la infección ............................................... 20 2.4. Complicaciones para comparar los antígenos evaluados ................................................... 25 2.5. ¿Qué antígeno emplear? ..................................................................................................... 28 2.5.1. Antígeno P22 ............................................................................................................... 29 2.5.2. Antígeno P30 ............................................................................................................... 30 2.5.3. Antígeno P35 ............................................................................................................... 32 3. Bioinformática ........................................................................................................................... 34 3.1. Bioinformática en la selección de antígenos ...................................................................... 34 iv Costa, Juan Gabriel - 2014 - 3.2. Bases de datos ..................................................................................................................... 35 3.3. Programas de búsqueda de dominios proteicos .................................................................. 35 3.4. Modelado molecular ........................................................................................................... 36 3.4.1. Etapas del modelado molecular: .................................................................................. 37 3.5. Predicciones de epitopes ....................................................................................................
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