Considerações Sobre a Família Asteraceae
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ATIVIDADE BIOLÓGICA E AVALIAÇÃO PRELIMINAR DA FENOLOGIA DE Eupatorium maximilianii SCHRAD. (MATA PASTO) ANA CAROLINA GUZZO MONTEIRO UNIVERSIDADE ESTADUAL DO NORTE FLUMINENSE DARCY RIBEIRO CAMPOS DOS GOYTACAZES – RJ JUNHO – 2015 ATIVIDADE BIOLÓGICA E AVALIAÇÃO PRELIMINAR DA FENOLOGIA DE Eupatorium maximilianii SCHRAD. (MATA PASTO) ANA CAROLINA GUZZO MONTEIRO “Tese de Doutorado apresentada ao Centro de Ciências e Tecnologias Agropecuárias da Universidade Estadual do Norte Fluminense Darcy Ribeiro, como parte das exigências para obtenção do título de Doutor em Produção Vegetal.” Orientador: Prof. Silvério de Paiva Freitas. CAMPOS DOS GOYTACAZES-RJ JUNHO DE 2015 ATIVIDADE BIOLÓGICA E AVALIAÇÃO PRELIMINAR DA FENOLOGIA DE Eupatorium maximilianii SCHRAD. (MATA PASTO) ANA CAROLINA GUZZO MONTEIRO “Tese de Doutorado apresentada ao Centro de Ciências e Tecnologias Agropecuárias da Universidade Estadual do Norte Fluminense Darcy Ribeiro, como parte das exigências para obtenção do título de Doutor em Produção Vegetal.” Aprovada em 03 de junho de 2015 Comissão Examinadora Professora Cristiane da Silva Stabenow (D.Sc. Produção Animal) - IFF Professora Fernanda Antunes (D.Sc. Medicina) – CCTA/UENF Engenheira Agrônoma Glória Cristina da Silva Lemos (D.Sc. Produção Vegetal) – CCTA/UENF Professor Silvério de Paiva Freitas (D.Sc. Fitotecnia) – CCTA/UENF (Orientador) A Deus; Aos meus pais, Osvaldo e Margarete; À minha filha Eduarda; À minha irmã Camilla; Ao meu esposo Carlos Eduardo. DEDICO ESTE TRABALHO ii AGRADECIMENTOS A Deus em primeiro lugar, pela força e pelo amparo ao longo da minha vida; Agradeço a UENF pela oportunidade de realização do curso de doutorado e pela bolsa como suporte financeiro; A FAPERJ pelo financiamento do projeto; Agradeço ao Professor Silvério de Paiva Freitas, pela orientação, pela grande oportunidade e pela confiança; À Doutora Glória Cristina de S. Lemos, por toda amizade, colaboração, dedicação, incentivo e ensinamentos; Agradeço aos professores integrantes da banca examinadora, Cristiane Stabenow, Glória Lemos e Fernanda Antunes, por terem aceitado participar e contribuir com este trabalho; À professora Fernanda Antunes, pela grande ajuda, pelos ensinamentos e pela dedicação para o desenvolvimento do presente trabalho; À professora Maria Cristina Canela, pela colaboração nos ensaios; À professora Daniela Barros pela colaboração; Ao professor Manuel Vazquez pela disponibilização de materiais; À minha amada mãe Margarete, por todo incentivo, amor, sabedoria e confiança; te amo muito! À minha filha Eduarda, que me incentiva a cada dia, amor sem medida; Ao meu marido Carlos Eduardo, pelo carinho e companheirismo; iii À minha família, meu pai Osvaldo, minha irmã Camilla, meus sobrinhos Giovana Vittoria, Giulia e Pablo, por todo carinho; A Mariana por toda ajuda na realização dos experimentos; A Rosana pela colaboração e pelo companheirismo; A todos os amigos e companheiros do laboratório; E a todos aqueles que, direta ou indiretamente, colaboraram na realização deste trabalho. iv SUMÁRIO RESUMO ............................................................................................................. viii ABSTRACT ............................................................................................................. x 1- INTRODUÇÃO .................................................................................................... 1 2- OBJETIVOS ........................................................................................................ 3 2.1- Objetivo geral ................................................................................................... 3 2.2- Objetivos específicos .................................................................................... 3 3- REVISÃO DE LITERATURA ............................................................................... 4 3.1- Família Asteraceae ...................................................................................... 4 3.2- Gênero Eupatorium .......................................................................................... 5 3.3- Eupatorium maximilianii ................................................................................... 6 v 3.4- Química e atividade biológica .......................................................................... 9 3.5- Avaliação das atividades biológicas ............................................................... 11 3.5.1-Atividade antioxidante .................................................................................. 12 3.5.2- Atividade anticolinesterásica ....................................................................... 17 3.5.3- Atividade antinociceptiva ............................................................................. 20 3.5.4- Avaliação da toxicidade .............................................................................. 24 3.6- Fenologia ....................................................................................................... 25 4. MATERIAL E MÉTODOS ............................................................................ 28 4.1- Material vegetal .............................................................................................. 28 4.2- Extração do óleo volátil ................................................................................. 29 4.3- Identificação dos constituintes dos óleos voláteis .......................................... 29 4.4- Preparo do extrato hidroalcoólico .................................................................. 30 4.5- Atividades Biológicas ..................................................................................... 30 4.5.1- Atividade antioxidante ................................................................................. 30 4.5.1.1- Avaliação qualitativa ................................................................................ 30 4.5.1.2- Avaliação quantitativa .............................................................................. 30 4.5.2- Atividade anticolinesterásica ....................................................................... 31 4.5.2.1- Avaliação quantitativa .............................................................................. 31 4.5.3- Atividade antinociceptiva ............................................................................. 33 4.5.3.1- Teste de pressão crescente na pata (Von Frey) ...................................... 33 4.5.3.2- Teste da placa quente.............................................................................. 34 4.5.4 Teste da locomoção forçada em cilindro giratório (rota rod) 35 4.5.5- Avaliação da toxicidade sobre Artemia salina Leach .................................. 36 4.6- Fenologia ....................................................................................................... 37 5. RESULTADOS E DISCUSSÃO ................................................................... 39 5.1- Extração do óleo volátil .................................................................................. 39 5.2- Extrato hidroalcoólico bruto ............................................................................ 40 vi 5.3- Atividade antioxidante .................................................................................... 40 5.4- Atividade anticolinesterasica .......................................................................... 43 5.5- Atividade antinociceptiva................................................................................ 45 5.5.1- Avaliação da pressão crescente na pata .................................................... 45 5.5.2- Avaliação do teste da placa quente (hot plate) 46 5.6- Avaliação da locomoção forçada em cilindro giratório (rota rod) 50 5.7- Toxicidade aguda com Artemia salina Leach ................................................. 51 5.8- Fenologia ....................................................................................................... 52 6. CONCLUSÕES ........................................................................................... 58 REFERÊNCIAS ..................................................................................................... 60 vii RESUMO MONTEIRO, Ana Carolina Guzzo; D.Sc.; Universidade Estadual do Norte Fluminense Darcy Ribeiro. junho de 2015. Atividade biológica e avaliação preliminar da fenologia de Eupatorium maximilianii SCHRAD (mata pasto). Orientador: Silvério de Paiva Freitas. A espécie Eupatorium maximilianii Schrader pertence à família Asteraceae, nativa do continente americano. No Brasil esta espécie é encontrada principalmente nas regiões Centro-Oeste, Sul e Sudeste. Entre as plantas daninhas, esta espécie é conhecida como mata pasto, por colonizar amplamente área abertas e/ou degradadas, causando sérios prejuízos econômicos à atividade pecuária. Na região Norte Fluminense a E. maximilianii é conhecida como arnica, arnica branca e arnica campista, sendo utilizada na medicina popular, apresentando diversas aplicações, desde o uso para diminuir colesterol, como depurativo do sangue, para tratamento de corrimento vaginal, até em torções e pancadas em geral. Apesar do grande uso popular da espécie, não há estudos que caracterizam e comprovem suas atividades biológicas. Neste sentido, objetivou-se com este trabalho verificar a atividade antioxidante, anticolinesterásica, antinociceptiva e a toxicidade, presente nos extratos e/ou óleos essenciais da espécie E. maximilianii e verificar as fenofases da espécie vegetal ao longo de três anos. A avaliação da atividade antioxidante foi realizada