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ESTUDIO DE LA COMPOSICIÓN QUÍMICA Y ACTIVIDAD ANTIBACTERIANA DEL ACEITE ESENCIAL DE LA ESPECIE Chromolaena meridensis(B.L. Rob.) R.M. King&H. Rob., sinonimia: Eupatorium meridenseRobinson. (ASTERACEAE). UNIVERSIDAD DE LOS ANDES FACULTAD DE FARMACIA Y BIOANÁLISIS ESCUELA DE BIOANÁLISIS INSTITUTO DE INVESTIGACIONES ESTUDIO DE LA COMPOSICIÓN QUÍMICA Y ACTIVIDAD ANTIBACTERIANA DEL ACEITE ESENCIAL DE LA ESPECIE Chromolaena meridensis (B.L. Rob.) R.M. King & H. Rob., sinonimia: Eupatorium meridense Robinson. (ASTERACEAE). BACHILLERES: NOVOA P. YOMAIRA. GUÉDEZ C. MARY A. TUTORA: DIOLIMAR BUITRAGO. MÉRIDA, JULIO DEL 2012. Estudio de la Composición Química y Actividad Antibacteriana del Aceite Esencial de la Especie Chromolaena meridensis. AGRADECIMIENTOS. En primer lugar el agradecimiento más grande a Dios por acompañarnos todos los días durante este largo trayecto de nuestras vidas, por haber consolado nuestros corazones cuando tuvimos que pasar situaciones difíciles, ahora gracias a él culminamos un escalón más en nuestras vidas para empezar uno nuevo. A nuestros padres trabajadores incansables, gracias por el apoyo tan grande que desde niñas nos brindaron, hoy logramos cumplir con éxito uno de nuestros propósitos más grandes, por sus consejos tan valiosos que definitivamente nos han conducido por el camino correcto, por habernos animado constantemente a seguir adelante. A ustedes dedicamos estas palabras y todos los éxitos que podamos alcanzar. Los amamos. A la profesora Diolimar Buitrago en calidad de Directora de tesis y a la profesora María Eugenia Lucena por compartirnos sus experiencias y conocimientos, y sobre todo por haber confiado en nosotras para llevar a cabo la realización de este proyecto. MIL GRACIAS. A todo el personal del Instituto de Investigaciones de la Facultad de Farmacia y Bioanálisis por habernos dado la oportunidad y brindaros todos los medios para realizar nuestro proyecto de Grado. A la Ilustre Universidad de los Andes, por abrirnos sus puertas y permitirnos formar parte de esta gran casa de estudio. i Estudio de la Composición Química y Actividad Antibacteriana del Aceite Esencial de la Especie Chromolaena meridensis. DEDICATORIA. Nuestro Proyecto de Grado la dedicamos con todo nuestro amor a Dios por estar a nuestro lado siempre, por darnos valor y brindarnos la fortaleza que tanto necesitamos y por habernos regalado una familia tan maravillosa. A nuestros padres que nos dieron la oportunidad de formarnos como profesionales, por el inmenso apoyo que nos dieron, por haber confiado en nosotras porque siempre me dieron aliento para seguir luchando. ii Estudio de la Composición Química y Actividad Antibacteriana del Aceite Esencial de la Especie Chromolaena meridensis. RESUMEN En el presente trabajo se determinó los componentes químicos del aceite esencial de Chromolaena meridensis (B.L. Rob.) R.M. King & H. Rob. y se evaluó la actividad antibacteriana del aceite esencial extraído de las partes aéreas frescas contra cepas de referencia grampositivas: Staphylococcus aureus ATCC 25923 y Enterococcus faecalis ATCC29212; y gramnegativas: Escherichia coli ATCC 25922, Pseudomona aeruginosa ATCC27853 y Klebsiella pneumoniae ATCC 23357. El aceite se obtuvo por el método de hidrodestilación empleando la trampa de Clevenger con un rendimiento de 0,063 %. Su composición química se determinó por Cromatografía de Gases Acoplada a Espectrometría de Masas, identificándose 11 compuestos que corresponden en su mayoría a sesquiterpenos monociclicos que constituyen el 97,75% del total de compuestos, seguido de monoterpenos con un 0,28%, aldehído 0,54% y alqueno 0,87%. Los componentes mayoritarios resultaron ser los sesquiterpenos: α – zingibereno (65,26%), α – curcumeno (13,74%), α - humuleno (8,20), β – sesquifelandreno (4,06%) y β - cariofileno (2,93%). La actividad antibacteriana se realizó por el Método de Difusión en Agar con Discos y se determinó la Concentración Inhibitoria Mínima (CIM), el aceite esencial fue activo contra las cepas de Staphylococcus aureusATCC 25923, Streptococcus faecalisATCC 29212 y Klebsiella pneumoniaeATCC 23357, con halos que oscilan entre 6 a 11 mm de diámetro y una Concentración Inhibitoria Mínima de 10 μg/mL. iii Estudio de la Composición Química y Actividad Antibacteriana del Aceite Esencial de la Especie Chromolaena meridensis. ÍNDICE DE CONTENIDO Pág I. INTRODUCCIÓN……………………………………………………….………. 1 II. ANTECEDENTES……………………………………………………….…….. 5 A. Antecedentes del género……………………………………………….……. 5 A.1. Descripción del género Chromolaena……………………………….…….. 10 A.1.1. Descripción de la especie Chromolaena meridensis (B. L. Rob.) R.M. King & H. Rob., sinonimia: Eupatorium meridense Robinson………… 11 A.1.2. Distribución de la especie Chromolaena meridensis (B. L. Rob.) 12 R.M. King & H. Rob., en Venezuela…………………………………………… A.2. Química del género Chromolaena……………………………………….... 12 A.3. Usos del género Chromolaena…………………………………………..… 20 A.4. Actividad biológica………………………………………………...………… 21 A.4.1. Actividad antibacteriana de especies del género Chromolaena…….. 21 A.4.2. Otras actividades biológicas…………………………………………….. 22 III. MARCO TEÓRICO................................................................................... 23 A. Aceites esenciales…………………………………………………………...… 23 A.1. Definición…………………………………………………………………..… 23 A.2. Distribución y localización………………………………………………….. 23 A.3. Propiedades físicas................................................................................ 24 A.4. Composición........................................................................................... 24 A.4.1. Terpenoides......................................................................................... 25 A.4.1.1. Monoterpenos................................................................................... 25 A.4.1.2. Sesquiterpenos................................................................................. 26 A.4.1.3. Biosíntesis de terpenos.................................................................... 26 iv Estudio de la Composición Química y Actividad Antibacteriana del Aceite Esencial de la Especie Chromolaena meridensis. A.5. Propiedades farmacológicas de los aceites esenciales......................... 28 . Poder antiséptico...................................................................................... 28 . Propiedades espasmolíticas y sedantes.................................................. 28 . Propiedades irritantes............................................................................... 28 A.6. Algunos usos de los Aceites esenciales................................................. 29 A.7. Procedimientos de obtención de los aceites esenciales........................ 30 A.7.1. Por arrastre en vapor de agua............................................................. 30 A.7.2. Por expresión...................................................................................... 31 A.7.3. Por extracción con solventes orgánicos.............................................. 31 A.8. Métodos de análisis de los aceites esenciales....................................... 32 A.8.1. Cromatografía de Gases Acoplada a Espectrometría de Masas 32 (CG/EM)......................................................................................................... B. Determinación de la actividad antibacteriana de los aceites esenciales... 35 B.1. Bacteria.................................................................................................. 35 B.1.1. Bacterias grampositivas...................................................................... 37 a. Staphylococcus aureus.............................................................................. 37 b. Streptococcus faecalis (Enterococos)....................................................... 37 B.1.2. Bacterias gramnegativas..................................................................... 38 a. Escherichia coli.......................................................................................... 38 b. Pseudomona aeruginosa........................................................................... 39 c. Klebsiella pneumoniae............................................................................... 39 B.2. Antibiótico............................................................................................... 40 B.3. Métodos para evaluar la actividad antimicrobiana de aceites 43 esenciales...................................................................................................... v Estudio de la Composición Química y Actividad Antibacteriana del Aceite Esencial de la Especie Chromolaena meridensis. B.3.1. Método de Difusión en Agar................................................................ 44 B.3.1.1. Método de Kirby-Bauer..................................................................... 45 B.3.2. Método de dilución.............................................................................. 46 B.3.2.1. Concentración inhibitoria mínima (CIM)........................................... 47 IV. PROBLEMA.............................................................................................. 48 V. HIPÓTESIS............................................................................................... 49 VI. OBJETIVOS............................................................................................. 50 A. Objetivo general........................................................................................ 50 A.1. Objetivos específicos.............................................................................
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