Universidade Federal Do Amazonas – Ufam Programa Multi-Institucional De Pós-Graduação Em Biotecnologia
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1 UNIVERSIDADE FEDERAL DO AMAZONAS – UFAM PROGRAMA MULTI-INSTITUCIONAL DE PÓS-GRADUAÇÃO EM BIOTECNOLOGIA EFEITOS ANTIMICROBIANOS, ANTIÁCIDOS E REMOVEDORES DE BIOFILME DE ALGUMAS ESPÉCIES VEGETAIS AMAZÔNICAS SOBRE O STREPTOCOCCUS MUTANS RENILTO FROTA CORRÊA MANAUS 2007 2 UNIVERSIDADE FEDERAL DO AMAZONAS – UFAM PROGRAMA MULTI-INSTITUCIONAL DE PÓS-GRADUAÇÃO EM BIOTECNOLOGIA EFEITOS ANTIMICROBIANOS, ANTIÁCIDOS E REMOVEDORES DE BIOFILME DE ALGUMAS ESPÉCIES VEGETAIS AMAZÔNICAS SOBRE O STREPTOCOCCUS MUTANS RENILTO FROTA CORRÊA ORIENTADOR: PROFa.DRa. Maria Lúcia Belém Pinheiro CO-ORIENTADOR: PROFo.DRo. Luiz Antonio de Oliveira (PhD) Dissertação apresentada ao Programa Multi- institucional de Pós-graduação em Biotecnologia da Universidade Federal do Amazonas, como parte dos requisitos para obtenção do título de Mestre em BIOTECNOLOGIA, área de concentração em BIOTECNOLOGIA PARA SAÚDE. MANAUS 2007 3 Corrêa, Renilto Frota Efeitos antimicrobianos, antiácidos e removedores de biofilme de algumas espécies vegetais amazônicas sobre o Streptococcus mutans / Renilto Frota Corrêa. – Manaus, 2007 138p.: il. Dissertação – UFAM. 1.Streptococcus mutans 2.Cárie dentária 3.Óleos vegetais 4.Extratos vegetais CDD.ed Sinopse: O microrganismo Streptococcus mutans é a principal bactéria causadora da cárie dentária. A pesquisa foi direcionada a substâncias que evitem a aderência das bactérias nos dentes. Os óleos e extratos para pesquisa foram obtidos de espécies da flora amazônica, como a andiroba (Carapa guianensis Aubl.), a copaíba (Copaifera multijuga Hayne), a castanha do Brasil (Betholletia excelsa Humb & Bonpl.), a jaca (Artocarpus integrifolia L.F.), a tiririca (Cyperus rotundus L.), o cipó-cravo (Tynanthus elegans Miers), o breu-branco (Protium heptaphyllum March), o pau rosa (Aniba roseodora Ducke), a sacaca (Croton Cajucara Benth) e a laranjinha (Guatteria citriodora Ducke). Foram analisadas as características antimicrobianas, antiácidas e removedoras de biofilme das amostras. Palavras–chave: Streptococcus mutans, biofilme, extratos e óleos. iii Mesmo vivendo em um país de terceiro mundo, onde a corrupção esta instalada em todos os níveis, como promotora das dificuldades e deficiências nas instituições de pesquisa e ensino. Em uma verdadeira inversão de valores morais e éticos... ...continuar lutando pela justiça social no uso da ciência como instrumento, com responsabilidade e dedicação pelo que existe de melhor no mundo, o amor. Espero no transcorrer da minha vida buscar a sabedoria e principalmente a capacidade de exercê-la. Dessa forma valerá a pena ter vivido se o meu exemplo for motivo de orgulho para os meus filhos. Renilto Frota Corrêa. Ao papai Renê Corrêa com muita saudade da sua companhia ao longo da minha caminhada. A mamãe Rita Frota Corrêa pelo seu intenso amor e dedicação sem fim, nos momentos difíceis por longos anos. OFEREÇO. iv Aos meus filhos, em especial ao Gabriel Paolucci Sales Frota Corrêa, nascido no decorrer dessa pesquisa, vocês são a razão e o estimulo constante para lutar o bom combate... DEDICO. v AGRADECIMENTOS A Deus, meu pai celestial pela vida, proteção e por conduzir os meus passos em todos os momentos. Agradeço pelo amor constante. Ao meu pai René Corrêa in memorian, pelo exemplo de dignidade, humildade e honestidade. Minha eterna admiração e reconhecimento. Agradeço pelo amor presente. A minha mãe Rita Frota Corrêa, pela presença constante, zelo e apoio em todos os momentos. Agradeço pelo seu amor sem fim. Ao meu filho Gabriel Paolucci Sales Frota Corrêa, agradeço pela sua existência e por todos os seus sorrisos que alegram a minha vida. A minha amiga e mãe do nosso filho Janaina Paolucci Sales, pelo apoio, incentivo, ajuda e presença ao longo de nossa convivência. Meu profundo agradecimento. Aos meus amigos e irmãos Herbert e Bill pelo apoio, preocupação e presença nos momentos difíceis e alegres da minha vida. Agradeço eternamente pela nossa amizade. Aos amigos de mestrado Diego e Jaqueline pela ajuda substancial e constante, dedicação a essa pesquisa. Meu respeito e admiração. Sinceramente agradeço. Aos colegas e servidores dos laboratórios da UFAM e do INPA meus agradecimentos. Aos colegas da sala de mestrado em química de produtos naturais Adriane, Alex, Aline, Ana Cristina, Ana Karolina, André, Cleuton, Daniel, Darlene, Daling, Denny, Diego, Dominique,Dorian, Élson, Ecila, Geone, Giese, Izandina, Jaqueline, Junior, Lívia, Lorena, Lyege, Madson, Marcondes, Maria de Fátima, Marycleuma, Najara Orivaldo, Radamés, Suniá, Vera Lúcia,Verônica e Zuanny. Pela convivência saudável e produtiva. Agradeço por permitirem essa experiência. Ao mateiro e amigo Silo da UFAM pelas horas de coleta, conselhos e observações meus sinceros agradecimentos. Aos colegas da botânica pelos conselhos e orientação, agradeço. vi A FAPEAM pelo apoio financeiro ao projeto, meu agradecimento. Aos professores e doutores Ângela Garrido Bittencourt (UEA), Jéferson Andrade Rocha da Silva (UFAM), Maria da Paz Lima (INPA), membros da banca do exame de qualificação pelas sugestões e comentários oportunos, sinceramente agradeço. Aos professores e doutores Adilson dos Santos Hara (UFAM), Maria da Paz Lima (INPA), Maria Lúcia Belém Pinheiro (UFAM), membros da banca julgadora da defesa de dissertação, pelos conselhos pertinentes para o enriquecimento desse documento, sinceramente agradeço. Ao meu co-orientador Profº. Dr. Luiz Antonio de Oliveira agradeço por acreditar no projeto com suas orientações, amizade, preocupações, sugestões de valor inestimável pelo rigor científico ao longo de nossa pesquisa. A minha orientadora Profª. Dra. Maria Lúcia Belém Pinheiro agradeço as orientações, conselhos, e paciência que proporcionaram a finalização esse trabalho. vii SUMÁRIO ÍNDICE DE FIGURAS................................................................................................ ix ÍNDICE DE TABELAS................................................................................................ xi RESUMO....................................................................................................................... 01 ABSTRACT................................................................................................................... 02 1. INTRODUÇÃO......................................................................................................... 03 2. OBJETIVOS DO ESTUDO..................................................................................... 05 2.1 Objetivo geral........................................................................................................... 05 2.2 Objetivos específicos................................................................................................ 05 3 REVISÃO BIBLIOGRÁFICA................................................................................. 06 3.1 Biofilme.................................................................................................................... 06 3.2 Epidemiologia da cárie dentária............................................................................... 07 3.2.1 Etiologia da cárie dentária..................................................................................... 11 3.2.2 Os microrganismos formadores da cárie dentária................................................. 11 3.3 O microrganismo cariogênico: Streptococcus mutans............................................. 12 3.3.1 O biofilme e a importância do Streptococcus mutans........................................... 17 3.3.2 Fatores de Virulência do Streptococcus mutans.................................................... 19 3.3.3 Colonização por Streptococcus mutans................................................................. 21 3.4 Aderência “in vitro”.................................................................................................. 23 3.4.1 A importância do isolamento das culturas microbiológicas.................................. 24 3.5 A origem do conhecimento tradicional relacionado à etnobotânica......................... 25 3.5.1 As espécies vegetais da Amazônia........................................................................ 26 3.5.1.1 ANDIROBA - Carapa guianensis...................................................................... 26 3.5.1.2 BREU-BRANCO – Protium heptaphyllum........................................................ 31 3.5.1.3 CASTANHA DO BRASIL - Betholletia excelsa............................................... 35 3.5.1.4 CIPÓ CRAVO - Tynanthus elegans................................................................... 38 3.5.1.5 COPAÍBA - Copaifera multijuga....................................................................... 40 3.5.1.6 JACA - Artocarpus integrifolia.......................................................................... 45 3.5.1.7 LARANJINHA – Guatteria citriodora.............................................................. 48 3.5.1.8 PAU ROSA - Aniba roseodora ducke................................................................ 49 3.5.1.9 SACACA – Croton Cajucara Benth.................................................................. 54 3.5.1.10 TIRIRICA - Cyperus rotundus......................................................................... 57 3.6 Óleos e extratos......................................................................................................... 60 viii 4 MATERIAL E MÉTODOS...................................................................................... 62 4.1 Coleta do material botânico.....................................................................................