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Universidad Nacional Mayor De San Marcos Universidad Del Perú

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Universidad Nacional Mayor De San Marcos Universidad Del Perú Universidad Nacional Mayor de San Marcos Universidad del Perú. Decana de América Facultad de Farmacia y Bioquímica Unidad de Posgrado Polifenoles y actividad antioxidante del extracto etanólico de Gentianella dianthoides (Kunth) Fabris y elaboración de una crema dermocosmética TESIS Para optar el Grado Académico de Magíster en Ciencias Farmacéuticas con mención en Ciencia y Tecnología Cosmética AUTOR Miguel Angel VASQUEZ HUAMAN ASESOR Américo Jorge CASTRO LUNA Lima, Perú 2018 i DEDICATORIA: Este trabajo se lo dedico principalmente a JEHOVÁ DIOS, por darnos la vida, guiar nuestro camino, por el amor que nos tiene para los seres humanos y por sus justas normas. A mis padres JOSÉ VASQUEZ CERCADO y GUADALUPE HUAMÁN ZUÑIGA, por su apoyo, confianza y consejos, quienes con su dedicación y sacrificio hicieron posible la culminación de mis estudios de posgrado, por su amor incondicional y protección de padres que han tenido para conmigo. Asimismo, lo dedico a mis hermanos JOHN VASQUEZ y JOSÉ VASQUEZ, por sus consejos y apoyo constante en todo este tiempo que hemos vivido y compartido en familia. Por su gran ejemplo profesional y personal. Finalmente, lo dedico a mis queridos tíos: Marcial Vásquez y su esposa Francisca, quienes me apoyaron en el inicio de este proyecto y por su gran conocimiento en recursos naturales. ii AGRADECIMIENTOS: A mi asesor Dr. AMERICO CASTRO LUNA, por su asesoría en esta investigación y sobre todo por su paciencia y apoyo incondicional durante todo el proceso. Al Lic. Mario Morote y al Lic. Cesar Cabrera, grandes amigos, compañeros de trabajo, por sus consejos en el día a día laboral y orientación en la parte microbiológica. Asimismo, agradezco al laboratorio de control de calidad del IPEN, lugar donde pude realizar una parte de esta investigación. A mí querida Facultad de Farmacia y Bioquímica, por estos años vividos en ella y el conocimiento impartido, para poder realizar esta tesis. Finalmente agradezco a los Dres. Miembros del Jurado Examinador y Calificador: Dr. César Fuertes Ruitón, Dr. Luis Félix Veliz, Mg. Bertran Santiago Trujillo y Mg. Oscar Herrera Calderón por su invaluable aporte académico, revisión y valiosas sugerencias que permitieron la mejora de esta tesis. A mis grandes amigos: Q.F. Fátima, por su enorme apoyo en toda la maestría y a todas las personas que me mostraron su apoyo gracias. iii ÍNDICE GENERAL Pág. LISTA DE TABLAS….…………………..…………...…..….. v LISTA DE FIGURAS…………………...…...….….………… vi ANEXOS…………………………………….…..…………… viii RESUMEN………………………………...…………………. ix SUMMARY…………..………………...….…………………. x CAPÍTULO I: INTRODUCCIÓN……………………………. 1 1.1. Situación problemática………………….……… 1 1.2. Formulación del problema……………..…….… 3 1.3. Justificación teórica………………...…………… 3 1.4. Justificación práctica……………...….....……… 4 1.5. Objetivos………………………………....………. 5 1.5.1. Objetivo general………………..……… 5 1.5.2. Objetivos específicos……….………… 5 CAPÍTULO II: MARCO TEÓRICO………………........…… 6 2.1. Antecedentes de la Investigación……...……… 6 2.2. Bases Teóricas……………………..…...………. 9 2.2.1. Estudio botánico……………....………. 10 2.2.2. Radicales Libres………………….……. 13 2.2.3. Estrés oxidativo..…………...…………. 14 2.2.4. Antioxidante…...…………….…………. 14 2.2.5. Compuesto fenólicos……....……...…. 15 2.2.6. Control de calidad...…….….…………. 16 2.3. Marco conceptual…..……….……….…………. 17 CAPÍTULO III: METODOLOGÍA……………...…………..... 19 3.1. Materiales, equipos y otros…………………….. 19 3.1.1. Muestra vegetal…………….....………. 19 3.1.2. Materiales….……………….…….……. 20 3.1.3. Reactivos…...……………....….………. 20 3.1.4. Equipos…...……………….………….... 22 3.2. Colecta y tratamiento post-cosecha….………. 23 3.3. Clasificación taxonómica……………………….. 23 3.4. Procesamiento del material vegetal………..…. 24 iv 3.5. Obtención del extracto etanólico….….…………..…..… ..… 24 3.6. Composición química….………………………………...…… 25 Determinación de polifenoles totales en el 3.7. extracto..........................................................................…. 25 3.8. Determinación de la actividad antioxidante en el extracto...…………………………………………………….… 26 3.9. Formulación de la crema dermocosmética con el extracto...………………………………….…………………… 27 3.10. Determinación de la actividad antioxidante en la crema dermocosmética...…………….…………………….... 28 3.11. Control de calidad de la crema dermocosmética con el extracto...….………………………………………....... 29 CAPÍTULO IV: RESULTADOS Y DISCUSIÓN……………………...…… 34 4.1. Resultados...………………………..…….…………………… 34 4.1.1. Extracción y rendimiento….....….…………………. 34 4.1.2. Caracterización química…….…….……………….. 34 4.1.3. Determinación de polifenoles totales en el extracto…………..………………….………………..…….. 35 4.1.4. Determinación de la actividad antioxidante en el extracto.….…………………………………………...…. 37 4.1.5. Formulación de la crema dermocosmética con el extracto…....……….………………………………...... 39 4.1.6. Determinación de la actividad antioxidante en la crema dermocosmética……………………………...… 41 4.1.7. Control de Calidad de la crema dermocosmética con el extracto…..………………..….................................... 42 4.2. Discusión……………...…………………………….…………. 46 CAPÍTULO V: CONCLUSIONES………….……...……………..………… 50 REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS….…………...………………...…….. 51 ANEXOS…………………………...……….……...…………………...……... 58 v LISTA DE TABLAS Pág. Tabla 1. Clasificación taxonómica….…….…..…….…..…....… 24 Tabla 2. Protocolo de liofilización….……………….…...…...… 25 Tabla 3. Preparación de tubos por la determinación de polifenoles totales….………………..……………….….…...…… 26 Tabla 4. Preparación de tubos por el método de DPPH.…..... 27 Tabla 5. Formulación de la crema………...…………..…...…… 28 Tabla 6. Articulo 2.- Incorporar como Anexo I de la Resolución 797 los siguientes cuadros: (CAN, 2012)…..……. 33 Tabla 7. Porcentaje de rendimiento del Extracto Et/OH de Gentianella dianthoides………………………………………….. 34 Tabla 8. Marcha fitoquímica del extracto metabólico…..…...... 35 Tabla 9. Absorbancias del estándar de ácido gálico a 765 nm…..…......................................................................… 35 Tabla 10. Contenido de polifenoles totales (CPT) del extracto Et/OH de Gentianella dianthoides............................................ 37 Tabla 11. Porcentaje de inhibición de DPPH del estándar Trolox®.….............................................................................… 37 Tabla 12. Porcentaje de inhibición de DPPH del extracto Et/OH de Gentianella dianthoides (Kunth) Fabris.................... 38 Tabla 13. Porcentaje de inhibición de DPPH de la crema dermocosmética al 0,5%; 1,5% y 3,0%.................................... 41 Tabla 14. Porcentaje de inhibición de DPPH de la crema dermocosmética al 3,0%.......................................................... 41 Tabla 15. Resultados de las propiedades organolépticas y fisicoquímicas de las cremas dermocosméticas a base de extracto de Gentianella dianthoides (Kunth) Fabris................. 44 Tabla 16. Resultados del análisis microbiológico de las cremas dermocosméticas a base de extracto de Gentianella dianthoides (Kunth) Fabris....................................................... 45 Tabla 17. Análisis de regresión……………….………..….....… 47 vi LISTA DE FIGURAS Pág. Figura 1. Gentianella dianthoides. Recolección. Mayo 2017…………………………………………………..........…… 11 Figura 2. Gentianella dianthoides "Lirambo"…..………...… 19 Figura 3. Gentianella dianthoides. Recolección. Mayo 2017.....…………………………………………………………. 23 Figura 4. Soluciones buffer pH 4; 7 y 10............................ 30 Figura 5. Dilución de muestra de crema............................. 31 Figura 6. Preparación de placas petri para cada medio por cada nivel de dilución………………............................... 33 Figura 7. Curva de calibración del estándar Ácido Gálico.. 36 Figura 8. Curva de calibración del estándar Trolox®…….. 38 Figura 9. Curva de calibración del extracto etanólico de Gentianella dianthoides....................................................... 39 Figura 10. Pesaje de los extractos de Gentianella dianthoides (Kunth) Fabris……………………….…………... 39 Figura 11. Incorporación del extracto de Gentianella dianthoides (Kunth) Fabris……………………….……….….. 40 Figura 12. Formulación de 03 cremas dermocosméticas... 40 Figura 13. Curva de calibración de la crema al 3,0% con extracto Gentianella dianthoides......................................... 42 Figura 14. Determinación de pH de las cremas…………... 43 Figura 15. Análisis microbiológico de las cremas dermocosméticas………………………………………....…… 45 Figura 16. Departamento de Cajamarca a 3000 m.s.n.m... 59 Figura 17. Recolección de la planta Gentianella dianthoides (Kunth) Fabris................................................... 59 Figura 18. Maceración x 14 días del extrácto etanólico de Gentianella dianthoides (Kunth) Fabris................................ 60 Figura 19. Proceso de filtración.......................................... 60 Figura 20. Extracto seco de Gentianella dianthoides (Kunth) Fabris……………………………………….…………. 61 Figura 21. Tamizaje fitoquímico de Gentianella dianthoides (Kunth) Fabris………………………..…............. 61 vii Figura 22. Espectrofotómetro UV-Vis..………………..… 62 Figura 23. Determinación de la capacidad antioxidante del extracto……………………………………………..…… 62 Figura 24. Elaboración de la crema dermocosmética…. 63 Figura 25. Balanza analítica………………………………. 63 Figura 26. Pesaje del extracto…………………………..... 63 Figura 27. Baño termostático…….………...…………….. 63 Figura 28. Disolución en propilenglicol del extracto……. 64 Figura 29. Producto terminado de crema dermocosmética…………………………………………….. 64 Figura 30. Determinación de la actividad antioxidante en la crema dermocosmética……………………………… 64 Figura 31. Potenciómetro…………………....………….…
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