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Bueno V, Zawadzki CH, Margarido V (2012)

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Bueno V, Zawadzki CH, Margarido V (2012) UNIVERSIDADE ESTADUAL DO OESTE DO PARANÁ CENTRO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS E DA SAÚDE PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO STRICTO SENSU EM CONSERVAÇÃO E MANEJO DE RECURSOS NATURAIS – NÍVEL MESTRADO VANESSA BUENO DA SILVA CARACTERIZAÇÃO CITOGENÉTICA BÁSICA E MOLECULAR EM Hypostomus spp. LACÉPÈDE, 1803 DO RIO PIQUIRI (PR). CASCAVEL-PR Fevereiro/2012 VANESSA BUENO DA SILVA CARACTERIZAÇÃO CITOGENÉTICA BÁSICA E MOLECULAR EM Hypostomus spp. LACÉPÈDE, 1803 DO RIO PIQUIRI (PR). Dissertação apresentada ao Programa de Pós- graduação Stricto Sensu em Conservação e Manejo de Recursos Naturais – Nível Mestrado, do Centro de Ciências Biológicas e da Saúde, da Universidade estadual do Oeste do Paraná, como requisito parcial para a obtenção do título de Mestre em Conservação e Manejo de Recursos Naturais Área de Concentração: Conservação e Manejo de Recursos Naturais CASCAVEL-PR Fevereiro/2012 DADOS INTERNACIONAIS DE CATALOGAÇÃO-NA-PUBLICAÇÃO (CIP) BIBLIOTECA CENTRAL DO CAMPUS DE CASCAVEL – UNIOESTE Ficha catalográfica elaborada por Jeanine da Silva Barros CRB-9/1362 S584c Silva, Vanessa Bueno da Caracterização citogenética básica e molecular em Hypostomus spp. Lacépède, 1803 do Rio Piquiri (PR). / Vanessa Bueno da Silva— Cascavel, PR: UNIOESTE, 2012. 120 p. Orientador: Prof. Dr. Vladimir Pavan Margarido Coorientador: Prof. Dr. Cláudio Henrique Zawadzki Dissertação (Mestrado) – Universidade Estadual do Oeste do Paraná. Programa de Pós-Graduação Stricto Sensu em Conservação e Manejo de Recursos Naturais, Centro de Ciências Biológicas e da Saúde. Bibliografia. 1. Diversidade cariotípica. 2. Evolução cromossômica. 3. AgRONs. 4. Heterocromatina. 5. DNAr 5S. 6. DNAr 18S. 7. Citogenética. I. Universidade Estadual do Oeste do Paraná. II. Título. CDD 21.ed. 572.8 Dedico este trabalho ao meu irmão, Eduardo, e a meus pais, Edson e Bernardete “Nas mãos inspiradas nascem antigas palavras com novo matiz.” Helena Kolody AGRADECIMENTOS À Universidade Estadual do Oeste do Paraná, pela estrutura que permitiu a realização deste trabalho. Ao Programa de Pós-Graduação em Conservação e Manejo de Recursos Naturais e aos professores, pelo suporte e auxílio. À Fundação Araucária e CNPq pelo financiamento de projetos, e à Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES), pela bolsa concedida. Ao Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renováveis pela concessão da licença de coleta. Ao professor Dr. Vladimir Pavan Margarido pelo conhecimento compartilhado, incentivo, (muita) paciência, confiança e orientação, muito obrigado!! O laboratório e a qualidade de nossos trabalhos têm crescido graças aos seus esforços constantes para trazer novas técnicas, equipamento e material de trabalho. À professora Dr.ª Norma Catarina Bueno, pelo grande esforço para garantir o funcionamento do programa e constante auxílio aos discentes. Ao professor Dr. Cláudio Henrique Zawadzki pela coorientação, identificação dos espécimes, e apoio durante a elaboração deste trabalho. À professora Drª. Onildes Maria Taschetto, pelo esforço em relação à estruturação do laboratório de citogenética. Ao professor Dr. Marcelo Ricardo Vicari e à professora Maristela Cavicchioli Makrakis pelas valiosas contribuições ao trabalho. Aos meus pais, pelo apoio e incentivo, mesmo nos momentos complicados e decisões difíceis. Ao meu irmão Eduardo, pelas horas divertidas, pela companhia e apoio. Obrigada por passarem por tudo comigo. À Elis, pela amizade, pelos passeios, pelos desabafos e por estar sempre presente desde a graduação. Ao Lucas Piloto por estar perto mesmo estando longe e pela amizade por todos esses anos, pelos conselhos e por apoiar minhas idéias malucas. Ao Leandro, Ariádine, Íris, Paulo, Giovanna e Simone pela amizade. À professora MSc. Jocicléia Konerat pelas longas conversas, amizade e apoio dentro e fora do laboratório. Ao pessoal que passou ou continua no laboratório de citogenética, Cássia, Raul, Mauricio, Lucas, Leonardo e aos colegas de mestrado. Ao técnico do laboratório de genética, Fernandes João Luzzi, e a secretária do programa de pós-graduação, Antônia Telles pelo auxílio em diversos momentos. A todos aqueles que auxiliaram nas coletas, em especial Prof. Dr. Sérgio Makrakis, Profa. Dra. Maristela Cavicchioli Makrakis, Prof. Dr. Paulo César Vênere, MSc. Rafaela Maria Moresco, Leonardo Marcel Paiz, Adélio Ortiz e Geraldo S. Zientarski. SUMÁRIO LISTA DE FIGURAS ............................................................................................................i LISTA DE TABELAS ......................................................................................................... iv 1. APRESENTAÇÃO E OBJETIVOS.................................................................................. 1 2. INTRODUÇÃO................................................................................................................. 3 2.1 Bacia do rio Tocantins-Araguaia................................................................................. 3 2.2 Bacia do rio Paraná...................................................................................................... 4 2.3 Considerações sobre Hypostominae e Hypostomus .................................................... 5 2.4 Citogenética de Hypostomus ....................................................................................... 8 3. MATERIAL E MÉTODOS............................................................................................. 11 3.1 Material e locais de coleta ......................................................................................... 11 3.2 Preparação de cromossomos mitóticos...................................................................... 15 3.3 Preparo de lâminas..................................................................................................... 16 3.4 Detecção de regiões organizadoras de nucléolos ...................................................... 16 3.5 Determinação de heterocromatina............................................................................. 16 3.6 Estudos cariotípicos................................................................................................... 17 3.7 Dupla coloração CMA 3/DAPI................................................................................... 18 3.8 Hibridização in situ com sondas fluorescentes.......................................................... 18 4. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS ............................................................................ 22 5. CAPÍTULO 1 - Tendências na evolução cromossômica no gênero Hypostomus Lacépède, 1803 (Osteichthyes, Loricariidae): uma nova perspectiva sobre a correlação entre número diplóide e tipos cromossômicos .................................................................... 30 Resumo............................................................................................................................ 31 Abstract............................................................................................................................ 32 Introdução........................................................................................................................ 33 Material e Métodos.......................................................................................................... 34 Resultados........................................................................................................................ 35 Discussão......................................................................................................................... 36 Agradecimentos............................................................................................................... 39 Referências Bibliográficas............................................................................................... 39 6. CAPÍTULO 2 - Diversificação cariotípica em Hypostomus Lacépède, 1803 (Siluriformes, Loricariidae): perspectivas biogeográficas e filogenéticas .......................... 48 Resumo............................................................................................................................ 52 Abstract............................................................................................................................ 53 Introdução........................................................................................................................ 54 Material e Métodos.......................................................................................................... 55 Resultados........................................................................................................................ 55 Discussão......................................................................................................................... 57 Agradecimentos............................................................................................................... 61 Referências Bibliográficas............................................................................................... 62 7. CAPÍTULO 3 - Composição e distribuição da heterocromatina em Hypostomus Lacépède, 1803 (Siluriformes, Loricariidae), com implicações para a diversificação cromossômica no gênero ..................................................................................................... 71 Resumo............................................................................................................................ 75 Abstract...........................................................................................................................
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