WO 2012/000070 Al 5 De Janeiro De 2012 (05.01.2012) PCT

(12) PEDIDO INTERNACIONAL PUBLICADO SOB O TRATADO DE COOPERAÇÃO EM MATÉRIA DE PATENTES (PCT) (19) Organização Mundial da Propriedade Intelectual Secretaria Internacional (10) Número de Publicação Internacional (43) Data de Publicação Internacional WO 2012/000070 Al 5 de Janeiro de 2012 (05.01.2012) PCT

(51) Classificação Internacional de Patentes : Zenaldo Porfírio [BR/BR]; Rua Américo Vasco, s/n A61K 36/48 (2006.01) A61K 129/00 (2006.01) Riacho Doce, Maceió- AL (BR). A61P 31/20 (2006.0 1) A61K 135/00 (2006.0 1) (81) Estados Designados (sem indicação contrária, para A61P 15/00 (2006.01) todos os tipos de proteção nacional existentes) : AE, AG, (21) Número do Pedido Internacional : AL, AM, AO, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BH, BR, BW, PCT/BR20 11/000205 BY, BZ, CA, CH, CL, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, DO, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, (22) Data do Depósito Internacional : GM, GT, HN, HR, HU, ID, IL, IN, IS, JP, KE, KG, KM, 28 de Junho de 201 1 (28.06.201 1) KN, KP, KR, KZ, LA, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LY, (25) Língua de Depósito Internacional : Português MA, MD, ME, MG, MK, MN, MW, MX, MY, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PE, PG, PH, PL, PT, RO, RS, RU, (26) Língua de Publicação : Português SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, ST, SV, SY, TH, TJ, TM, (30) Dados Relativos à Prioridade : TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, ZA, ZM, 0001 68 1 de Julho de 2010 (01 .07.2010) BR ZW. (71) Requerente (para todos os Estados designados, exceto (84) Estados Designados (sem indicação contrária, para US) : UNIVERSIDADE FEDERAL DE ALAGOAS- todos os tipos de proteção regional existentes) : ARIPO UFAL [BR/BR]; Endereço: Campus A.C. Simões, s/n (BW, GH, GM, KE, LR, LS, MW, MZ, NA, SD, SL, SZ, Cid. Universitária, Brasil/Maceió-AL CEP: 57072-970 TZ, UG, ZM, ZW), Eurasiático (AM, AZ, BY, KG, KZ, (BR). MD, RU, TJ, TM), Europeu (AL, AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HR, HU, IE, IS, (72) Inventores; e IT, LT, LU, LV, MC, MK, MT, NL, NO, PL, PT, RO, (75) Inventores/Requerentes (para US unicamente) : NETO, RS, SE, SI, SK, SM, TR), OAPI (BF, BJ, CF, CG, Cl, Manoel Alvaro de Freitas Lins [BR/BR]; Rua CM, GA, GN, GQ, GW, ML, MR, NE, SN, TD, TG). Professora Hígia Vasconcelos 18, apt 503, Maceió- AL CEP: 57035-140 (BR). CAETANO, Luiz Carlos Publicado: [BR/BR]; Rua Deputado José Lages, 614 Ponta Verde, — com relatório de pesquisa internacional (Art. 21(3)) Maceió-AL Cep: 57035-330 (BR). NETO, Pedro — antes da expiração do prazo para modificar as Accioly de Sá Peixoto [BR/BR]; Av. Amazonas, 01- Ed. reivindicações e a republicar na eventualidade de Omega Apt 404, Prado, Maceió- AL (BR). DA SILVA, receção de tais modificações (Regra 48.2(h))

(54) Title : PHARMACEUTICAL COMPOSITION USING STRYPHNODENDRON EXTRACTS FOR TREATING HPV INFECTIONS (54) Título : COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA PARA TRATAMENTO DE INFECÇÕES HPV UTILIZANDO EXTRATOS DE BARBATIMÃO (57) Abstract : The present invention relates to the use of extracts, in particular alcoholic, hydroalcoholic and aqueous extracts of the bark, bast, stems and pod shells of the species Abarema cochliocarpos (Gomes) Barneby & Grimes and/or Stryphnodendron ol barbatiman, Stryphnodendron coriaceum Benth., S. diacolor Benth., S. pulcherrimum (Wildd) Hoch., Stryphnodendron o adstríngens (Mart.) CoviUe, Stryphnodendron obovatum Benth., Stryphnodendron polyphyllum M. and Pithecellobium o avaremotemo Mart., which are ali popularly known in Portuguese under the name "barbatimão", used (as an adjuvant) for the o treatment of human papilloma virus-related (HPV) infections and for the prevention of cervical câncer. cl (57) Resumo : A presente invenção refere-se à aplicação de extratos, principalmente alcoólicos, hidroalcoólicos e aquosos das cascas, entrecascas, dos caules e das cascas das vagens de Abarema cochliocarpos (Gomes) Barneby & Grimes e/ou Stryphnodendron barbatiman, Stryphnodendron coriaceum Benth., S. diacolor Benth., S. pulcherrimum (Wildd) Hoch., Stryphnodendron adstríngens (Mart.) CoviUe, Stryphnodendron obovatum Benth., Stryphnodendron polyphyllum M. e Pithecellobium avaremotemo Mart., todas conhecidas com nome popular de barbatimão utilizado para tratamento (como adjuvante) das infecções relacionados aos Papilomavírus humano (HPV) e para profilaxia do câncer cervical. COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA PARA TRATAMENTO DE INFECÇÕES HPV UTILIZANDO EXTRATOS DE BARBATIMÃO"

Campo da Invenção A presente invenção refere-se à aplicação de extratos, principalmente alcoólicos, hidroalcoólicos e aquosos das cascas, entrecas¬ cas, dos caules e das cascas das vagens de Abarema cochliocarpos (Gomes) Barneby & Grimes e/ou Stryphnodendron barbatiman, Stryphnodendron coriaceum Benth., S. diacolor Benth., S. pulcherrimum (Wildd) Hoch., Stryphnodendron adstringens (Mart.) Coville, Stryphnodendron obovatum Benth., Stryphnodendron polyphyllum M . e Pithecellobium avaremotemo Mart., todas conhecidas com nome popular de barbatimão, isoladamente ou em mistura de diferentes proporções destes produtos e/ou junto o(s) extrato(s) de outras fontes naturais e/ou sintéticas, usado(s) para compor preparação de composições farmacêuticas, em particular nas apresentações para uso em áreas genitais, por vias vaginal, vulvar, perianal, canal anal, peniana, em forma de sabões, tinturas, emulsões A/O e O/A (poma¬ das, cremes e géis), aerossóis, pastas, óvulos, supositórios e similares, utilizadas para tratamento (como adjuvante) das infecções relacionados aos Papilomavírus humano (HPV) e para profilaxia do câncer cervical, compreendendo formulações contendo os mencionados extratos, frações desses materiais e/ou constituinte(s) químico(s), usados como princípios ativos e/ou excipiente farmacológico. O papilomavírus humano é um vírus de DNA da família Papoviridae, com mais de 100 tipos identificados, alguns responsáveis por verrugas vulgares, ou¬ tros por verrugas anogenitais e papilomas da nasofaringe. O HPV não atua isola damente na oncogênese; outros fatores, tais como: estado imunológico do hos- pedeiro, estado nutricional, uso de fumo e álcool atuam em conjunto. O HPV atin¬ ge o núcleo das células basais através de microrrelações do epitélio, e os primei¬ ros sinais de transcrição do genoma virótico aparecem cerca de 4 semanas após a infecção. O período de incubação varia de 3 a 18 meses e a persistência das lesões pode ser avaliada em semanas, meses ou anos. À medida que a célula se diferencia, há maior produção de antígenos e replicação virótica nas células su¬ perficiais, de modo que a quantidade de DNA aumenta em direção à superfície do epitélio. Durante este processo, há acúmulo tanto de proteínas do genoma quanto de proteínas estruturais relacionadas ao capsídeo. A infecção pelo HPV se caracteriza por lesões aparentes, vegetativas, vas- cularizadas, sésseis e com múltiplas projeções papilares, denominadas condiloma acuminado. A maioria destas lesões está relacionada com o HPV 6 (65%) e o 11 (20%), o restante com tipos menos comuns. Ocorrem, mais comumente, em paci entes entre 16 e 25 anos. As lesões vaginais por HPV podem coexistir com verru¬ gas vulvares em 30% das pacientes e mais de 85% delas terão infecção cervical. Sobre o Barbatimão Abarema cochliocarpos, conhecida popularmente como barbatimão, é uma espécie endémica do Brasil pertencente à família Mimosaceae. Trata-se de uma árvore frondosa de pequeno a médio porte, possuindo folhas compostas, inflores- cência em glomérulos globosos, flores ligeiramente amareladas, frutos do tipo legume contorcido e sementes brancas acinzentadas, amplamente utilizada in natura no Brasil como planta medicinal (Santos et al., 2007). Esta planta é deno¬ minada popularmente de barbatimão, babatimão, bordão-de-velho (Braga, 1976: p.89). A etnofarmacologia revela a utilização no combate de processos infeccio¬ sos da pele, como cicatrizante, no combate de leucorréias e de verrugas (Corrêa, 1984; p.199, 200). Vários trabalhos encontrados na literatura descrevem a constituição quími¬ ca dos taninos encontrados em cascas do barbatimão. As protobinetinidinas (Mel¬ lo & Nahrstetd, 1996), a proantocianidina dimérica presente no extrato solúvel em acetona (Mello e cols., 1999) que apresentou atividade antiinflamatória (Lima e cols., 1998). Estado da Técnica Os tratamentos incluem o uso de drogas citotó- xicas, métodos cirúrgicos e usos de terapias imunomoduladoras podem ser reali¬ zados utilizando diferentes drogas apresentadas a seguir: a) Ácidos desseca n- tes: bicloroacético ou tricloroacético são efetivos em lesões úmidas de membra nas mucosas devido ao elevado conteúdo aquoso destes tecidos. Estes ácidos devem ser aplicados diretamente sobre as verrugas, preferencialmente com mag- nificação da pele. Apresenta altos índices de recidiva local em torno de 30%. b) Podofilina cujo efeito biológico deve-se ao efeito antimitótico. Tem efeitos tóxicos sistémicos: toxidade neurológica ou hepatorrenal e supressão da medula óssea. É contra-indicado na gravidez. A aplicação deve ser restrita à área de pele querati- nizada. A taxa de sucesso é de 20-40% em seis meses, e através da c) Destrui¬ ção física focal na qual pode ser empregado o eletrocautério, criocirurgia ou a- blação a laser. Indicada nos casos de lesões cutâneas renitentes em que a quera- tina espessa impede a penetração da medicação tópica. A terapia tópica poderá inicialmente tratar a condilomatose; entretanto, a taxa de falha na terapia primária com recorrência secundária é de aproximadamente 50%. Os tratamentos subse¬ quentes dependem da aparência da lesão. As verrugas grosseiras, recidivantes e queratinizadas são melhores tratadas com métodos de destruição física. O quadro extenso e difuso de verrugas que crescem entre cada sessão de tratamento, res¬ ponde melhor ao tratamento com interferon e uso de terapia tópica contínua. Os interferons α (derivado de leucócito), β (derivado de fibroblasto) e γ (derivado de linfócito) são utilizados no tratamento de lesões virais induzindo efeitos antivirais, antiproliferativos e imunoestimulantes. O interferon intralesional exacerba a res¬ posta podofilina tópica (Douglas et ai, 1990). O interferon sistémico fornece bene¬ fícios complementares na papilomatose laríngea juvenil recidivante (Leventhal et al., 1991) e no tratamento de doença da laringe em pacientes mais velhos. O 5-fluorouracil (5-FU), indicado como coadjuvante no tratamento de condilomatose vaginal, antimetabólico, inibe a produção de ácido ribonucléico e DNA. O tratamento deve ser individualizado para evitar ulcerações vaginais cróni cas. Lesões vaginais queratinizadas e planas não respondem o tratamento, assim como os condilomas clássicos. O uso de 5-FU tem sido descontinuado pela alta taxa de complicações, incluindo ulcerações crónicas, vaginite química, adenose e vestibulite vulvar. A administração pode ser tópica, intralesional e parenteral, os resultados são variados com respostas geralmente dose-dependentes. As maio¬ res limitações são o alto custo e efeitos colaterais. Por outro lado, Imiquimode cremes atuam como modificador da resposta imune induzindo múltiplos subtipos de interferon- α e de algumas citoquinas, entre elas o Fator de Necrose Tumoral (TNF) e interleucinas. Esta cadeia estimula células killer, células T , polimorfonu- cleares e macrófagos, aumentando atividade antitumor. É indicado no tratamento de condilomas acuminados da genitália externa e perianais, podendo ser utilizado na gravidez (classe B). Sua utilização em membrana mucosa ocluída, como vagi- na e cérvix, é proscrita devido à maior absorvição destas mucosas. Efeitos colate¬ rais comuns com interferon são eritema, prurido, descamação e edema. A taxa de cura atinge de 50-56% e raramente - em menos de 5% das pacientes - pode o- correr cefaléia, mialgias e sintomas simulando gripe. Sumário da Invenção Pelo exposto, constata-se a imediata necessida¬ de de disponibilidade de novas drogas para tratamentos de infecções pelo HPV. Para tanto, são apresentados através desse instrumento de propriedade industrial os produtos fitoterápicos que incluem em sua formulação os princípios ativos do Abarema cochliocarpos (Gomes) Barneby & Grimes e/ou outras espécies identifi cadas como barbatimão. Os produtos desenvolvidos foram avaliados em testes pré-clínicos e clínicos, cujos resultados terapêuticos representam uma nova alte r nativa para tratamento de infecções promovidos pelo HPV e para a profilaxia do câncer cervical. Diferente das soluções presentes no estado da técnica o uso da pomada de Bar¬ batimão no tratamento do HPV, traz as seguintes vantagens: ausência de efeitos colaterais, facilidade de auto-aplicação, uso sem restrições para crianças e mu¬ lheres gestantes, baixo índice de recidiva local, em torno de 11%, baixo custo, devido principalmente a matéria prima ser facilmente encontrada na flora nacional, além da vantagem que a mesma pode ser usada internamente, ou seja, na mucosa retal, vaginal, peniana e bucal sem oferecer riscos de efeitos colaterais. Descrição Detalhada da Patente 1. Obtenção dos extratos: (a) Cascas de bar¬

batimão (Abarema cochliocarpos) secas e moídas em moinho elétrico ( 1Kg) são extraídas através de maceração com álcool etílico (92,8° GL) (3L x 2) por 72h, (b) e após filtração com papel (Watman no. 2) foi concentrado em evaporador rotató¬ rio a 60°C até o volume de 0,1 L . São obtidos 0,4 Kg do extrato seco, ou seja, ren¬ dimento de 35 a 45% p/p em relação ao peso seco das cascas e entrecascas. Já o extrato aquoso forneceu um rendimento de 33% (p/p) enquanto que o extrato hidroalcoólico (9:1) forneceu rendimento de 38% (p/p) com procedimentos de pre paração idênticos ao do extrato etanólico hidratado (92,8° GL). 2 . Preparação da Pomada: A pomada é preparada aquecendo-se óleo vegetal (canola) 0,4L e parafina comestível (70g) em banho-maria a 60 °C, por 30min. Em seguida, o volume concentrado do extrato alcoólico do barbatimão (0,1 L) obtido no item 1, é adicionado lentamente, enquanto a mistura é homogeneizada manu¬ almente com colher de madeira, fazendo-se movimentos circulares uniformes por 10min. 3 . O recipiente é então retirado do banho-maria e a homogeneização continuada por mais 15min. A pomada obtida, pronta para uso, é então transferida para 05 potes plásticos de 100 mL e deve conter de 20% a 30% (p/p) do principio ativo. Estudos Fitoquímicos Os estudos fitoquímicos, toxicológicos, farmacológicos e clínicos com os

extratos alcoólicos e aquosos hidroalcoólicos do barbatimão são descritos a se¬ guir. Coleta do material botânico Os extratos de barbatimão foram obtidos a partir das cascas e entrecascas vermelhadas do caule e da casca das vagens maduras, contendo no mínimo 20% (p/p) de taninos. Coletaram-se cascas e entrecascas de caules de plantas sadias

de Abarema cochliocarpos em duas localidades: Arboreto do Campus A.C. Si¬ mões, UFAL, Maceió - A L e de plantas da Mata Atlântica da região de Coruripe - AL. As cascas das vagens maduras de coloração avermelhada também contem os princípios ativos estudados. Um exemplar da planta Abarema cochliocarpos encontra-se no herbário do Instituto do Meio Ambiente do Estado de Alagoas (I- MA-AL) sob o registro ac 8830. Testes Biológicos As avaliações das atividades biológicas do extrato alcoólico hidratado (92,8° GL) das cascas e entrecascas foram realizados sobre larvas de Artemia salina, e microbiológico frente a sete espécies de bactérias, 4 espécies de Cândi¬ da (fungos leveduriformes). Os ensaios foram realizados no Laboratório de Quí¬ mica de Produtos Naturais do IQB/UFAL e no Laboratório de Microbiologia Apli¬ cada do ICBS/UFAL. Testes Microbiológicos Os testes microbiológicos foram realizados com o extrato alcoólico de cas¬ cas e entrecascas do caule de barbatimão na concentração de 100 mg.mL ressuspendidos em solução de metanol:água ( 1:2) (v/v). Na determinação da atividade antimicrobiana, foi utilizado o método de di¬ fusão em Agar de Kirby e Bauer modificado (MOURA, 1977). Os microrganismos foram repicados para tubos contendo 2 mL do meio líquido BHI e incubados em estufa a 37°C por 24h. A presença de turvação no meio é o indicativo de cresci- mento bacteriano. Foi então adicionado, 1 mL do BHI (aproximadamente 109 microrganismos/mL) em tubos contendo 12 mL de agar Mueller Hinton a temperatu ra de 45°C e vertido em placas contendo uma base de Agar Bacteriológico com a formação de poços (0,7cm). Fez-se controle para cada microrganismo com anti-

microbiano padrão, cloranfenicol a (30 g mL 1) , tetraciclina (30 g.mL 1) , itraco-

nazol ( 1 1,6 g mL 1) , cetoconazol ( ,6 µg mL 1) fluconazol (700 g mL 1) e nista- µ tina (350 g/MI). Os extratos etanólicos ressuspendidos em MeOH:H 2O ( 1:2) foram adicionados (40 L do extrato etanólico a cada um dos respectivos poços. As pla¬ cas foram incubadas em estufa a 37°C por um período de 24h. Os halos foram medidos com halômetros, sendo considerados halos > 10,0 mm como indicador de atividade antimicrobiana. Todos os testes foram realizados em duplicata e os resultados determinados pela média de inibição, de acordo com LIMA, et al., 2002. Os estudos de avaliação da atividade antimicrobiana dos extratos foram realizados in vitro, utilizando os seguintes microrganismos: Bactérias - Staphylo- coccus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Enterococcus faecalis, Escherichia coli, Alcaligenes faecalis Streptococcus pyogenes e Salmonella enteriditis, e os fungos leveduriformes - Cândida albicans, Cândida tropicalis, Cândida krusei e Cândida guilliermondi, todos oriundos da micoteca do Laboratório de Microbiolo gia Aplicada - L@MA , ICBS-UFAL. Os extratos hidroetanólicos foram ativos contra todos os microrganismos experimentados. Em alguns casos, obtendo melhor resultado do que o antibiótico testado, como, por exemplo, frente a cepas de P. aeruginosa, BAC 57, BAC 101 , BAC 104, BAC 105 e BAC 125. Das 12 cepas de S. aureus testadas com o extrato hidroetanólico, 100% delas apresentaram resultados satisfatórios, principalmente frente a cepas mul- tirresistentes BAC 95 e BAC 97.

Já frente aos fungos leveduriformes do género Cândida as cepas das e s pécies FUN 05 de C. albicans, com 24 mm de halo; FUN 36 de C. tropicalis, com 18 mm de halo; FUN 1 de C. krusei, com 24 mm de halo; e FUN 46 de C. guilliermondi, com halo 23 mm apresentaram os melhores resultados. Todos os extratos testados apresentaram resultados frente a P. aeruginosa, S. aureus e fungos do género Cândida. Os resultados obtidos demonstraram o amplo espectro antimicrobiano das cascas, vagens e sementes de A. cochliocarpos contra microrganismos de interesse clínico. Testes toxicológicos Os testes toxicológicos foram realizados com microlarvas de Artemia salina e camundongos da espécie Mus musculus. A avaliação da atividade tóxica do extrato alcoólico (92,8° GL) foi realizada em meio salino com microlarvas recém eclodidas de Artemia salina Leach, nas concentrações de 10, 100 e 200pg.mL 1 . Para realização dos bioensaios utilizou-se a metodologia de Santos Pimen¬ ta LP, Pinto GB, Takahashi JA, e Silva LG, Boaventura MA. Biological screening of Annonaceous Brazilian Medicinal Plants using Artemia salina (brine shrimp test). Phytomedicine 10 (2-3) 209 - 212. com adaptações. Cada solução foi avali¬ ada nos testes tóxicos em triplicatas, utilizando 10 larvas de A. salina. Essa expe¬ riência foi mantida a temperatura ambiente (26 - 28°C) sob iluminação artificial por um período de 24 horas consecutivas. Um teste controle foi preparado usando-se um volume de 5mL de solução salina com 10 larvas de A . salina, sob as mesmas condições experimentais dos testes descritos anteriormente. Os resultados des¬ ses bioensaios mostraram que o extrato não apresentou toxicidade nas concen¬ trações até 100 g.mL .

Na determinação da CL5o (Concentração Letal) foram utilizados 16 camundongos da espécie Mus musculus, adultos e sadios, machos e fêmeas. Os animais foram pesados em balança semi-analítica (0,001 g) e divididos em 4 grupos. No grupo 1 foi inoculado intraperitonialmente 70 L do extrato hidroetanólico de barbatimão, ressuspendido em água a 0,1g.mL 1 . No 2o grupo foi inoculado 75 L e no grupo 3 , 80 L. No grupo 4 , foi inoculado intraperitonialmente 80 L de água destilada, sendo dessa forma o grupo controle. Foi considerada a dose letal, a concentração que matou 50% dos animais inoculados em 96h. Nos animais mortos foi executada uma autópsia para retirada do fígado e do baço para pesagem em balança semi-analítica. Os vivos restantes receberam anestesia inalatória por éter sulfúrico e segundo procedimento acima descrito, foi realizado a exérese do fígado e do baço para pesagem em balança semi- analítica.

O extrato hidroetanólico das cascas e entrecascas de barbatimão, teve como DI_5o (Dose Letal) a aplicação de 75µ Ι , perfazendo uma dosagem de 250 mg. Kg 1 . Foi observada a diminuição do metabolismo e taquicardia nos animais experimentados. Testes farmacológicos A s avaliações farmacológicas, pré-clinicas e clínicas dos extratos hidroeta- nólicos de barbatimão foram realizados in vitro e in vivo, para as seguintes atividades: irritação primária da pele, irritação ocular aguda, cicatrização e abortiva. Os camundongos, machos e fêmeas da espécie Mus musculus, utilizados nos experimentos foram oriundos do biotério do CCBi/UFAL e do biotério da CCBS/UFS. Os coelhos albinos neozelandeses foram oriundos de criadouros do município de Maceió. Os animais foram tratados contra parasitas (vermifugados) e aclimatados no biotério do CCBi/UFAL. Os testes de irritação primária da pele foram realizados de acordo com BRITO (1994) e consistiram na aplicação da droga sobre a pele íntegra dos animais. Foram utilizados três coelhos albinos neozelandeses adultos. Os animais foram acomodados em gaiolas individuais a temperatura ambiente, em períodos de claro e escuro de 12h, com ração PURINA e água ad libitum. Os animais foram depilados 24 horas antes da aplicação, sendo demarcados quatro sítios de aplicação, dois deles submetidos à abrasão. Cada animal possuía seu próprio controle. Foram aplicados 500 L do extrato bruto etanólico das cascas (0,1g.mL

), numa dose única, sobre a gaze e depois colocadas na pele dos animais. A compressa de gaze foi fixada com esparadrapo hipoalérgico.

Os animais foram colocados em gaiolas separadas em exposição à droga por quatro horas. A o final do período de exposição, a região analisada foi lavada com água. Foram feitas observações por 1 hora, 24 horas e 72 horas após a retirada das compressas. No local de aplicação da droga, buscou-se verificar se houve a formação de eritema, escaras ou edemas, de acordo com o sistema empregado pelo Federal Hazardous Substances dos Estados Unidos da América. Foi observada uma pequena vermelhidão, sem edema, durante os primeiros 60 minutos de experimento na pele que foi escarificada, tendo o mesmo desaparecido antes de completar a leitura de 24h.

De acordo com BRITO (1994), para obtenção do grau de irritação da pele, provocado pela substância, deve-se somar os subtotais e dividir por 4 , que equivale a eritema de pele íntegra e escarificada e eritema e edema de pele íntegra e escarificada, obtendo-se assim o grau de irritabilidade cutânea da substância. Foi obtido o grau de 0,25, que classifica a substância (0-1) como uma substância não-irritante.

O teste de irritação ocular aguda visou analisar alterações reversíveis sobre os olhos de coelhos como consequência da instilação do extrato hidroetanólico das cascas de barbatimão.

Quatro coelhos albinos neozelandeses adultos e sadios foram os animais escolhidos para o teste. Os animais foram acomodados em gaiolas individuais a temperatura ambiente, em períodos de claro e escuro de 12h, com ração PURINA e água ad libitum. Os dois olhos de cada animal foram examinados 24h antes da aplicação da substância teste, evitando-se assim trabalhar com animais com lesão ou defeito ocular pré-existente.

O extrato hidroetanólico do barbatimão foi ressuspendido em água na concentração de 0,1g.mL , sendo instilado 100µ do extrato dentro da bolsa conjuntival do olho direito do animal, após levantar delicadamente a pálpebra inferior do globo ocular. Os olhos dos animais não foram lavados durante as primeiras 24h que se seguiram à instilação da droga. No olho esquerdo de cada animal foi aplicado 100µ Ι_ de água destilada, servindo com controle. No quarto animal foi instilado 100µ Ι_ de HCI a 1% no olho direito, servindo o olho esquerdo como controle.

Os olhos foram examinados após 24, 48 e 72 h após a instilação, com a ajuda de um oftalmoscópio, observando-se lesões macroscópicas na íris, córnea e conjuntiva e comparando-as com o olho controle. A cotação das lesões oculares foi feita de acordo com o guia ilustrado de irritação ocular (BRITO, 1994). De acordo com os testes realizados in vivo, podemos constatar que não houve reação perceptiva na córnea, íris e conjuntiva após instilação de 100 µ Ι_ de extrato de barbatimão a 20%, em comparação com o controle positivo com HCI 1% e controle negativo com água destilada. Nos testes farmacológicos não foram observadas alterações oculares e nem irritação primária da pele. No teste de cicatrização foram utilizados 36 coelhos albinos neozelandeses adultos e sadios, pesando entre 1250 e 1700 Kg. Os animais foram depilados e acomodados em gaiolas individuais a temperatura ambiente, em períodos de claro e escuro de 12h, com ração PURINA e água ad libitum.

Os animais receberam anestesia local com cloridrato de lidocaína e inalatória com éter sulfúrico. Foram feitas quatro incisões na pele de cada animal até atingir o subcutâneo, mantendo uma distância de aproximadamente 3 cm de cada corte.

Os animais foram divididos em 3 grupos: O grupo A , controle, recebeu tratamento durante os 14 dias de experimento de solução salina de NaCI a 0,9%. O grupo B foi tratado com rifamicina e o grupo C recebeu o extrato etanólico das casas de barbatimão, ressuspendidos em água (0,1g/ml_). Os cortes ficaram abertos e os animais receberam o tratamento desde o dia da incisão até o 14° dia de experimento. No 7° de experimento, foi feita a retirada das peças de 1/3 dos animais e parte do fígado para análise histológica, sendo os animais depois sacrificados. No 14° dia de experimento, depois de sacrificados, as peças e parte do fígado foram retiradas dos demais animais e levados para análise histológica.

Foram feitas análises macroscópicas quanto ao grau de retenção cicatricial e microscópica quanto ao grau de epitelização, intensidade da reação inflamatória, tipo de reação inflamatória e presença de neovascularização de acordo com ARAUJO et al. (1998).

Pode-se constatar que as lesões realizadas cirurgicamente e tratadas dia¬ riamente com extrato de barbatimão, rifamicina e salina estéril, apresentaram um perfil diferente no processo de cura. Dessa forma, notamos que o extrato de bar- batimão propiciou uma melhor ação até as 72 h de tratamento, onde não foi ob¬ servada a presença de secreção purulenta. O mesmo não aconteceu com os testes usando rifamicina e solução salina, onde foi evidenciada a presença de secre¬ ção purulenta. O barbatimão apresentou ótima atividade cicatrizante, verificada principal¬ mente nas primeiras 72h, sendo melhor que as tratadas com rifamicina e solução salina. O barbatimão favoreceu o desaparecimento da secreção purulenta, favo¬ receu a hiperemia e aparecimento de tecido de granulação. No teste de atividade abortiva foram utilizados vinte e oito camundongos adultos e sadios, sendo vinte e uma fêmeas e sete machos. Os animais foram acasalados por um período de 96 h , um macho e três fêmeas. Os machos foram desprezados e as fêmeas foram separadas em 3 grupos: no grupo 1 ficaram oito animais, no grupo 2 oito animais e no grupo 3 cinco animais. O grupo 1 recebeu o extrato aquoso a quente das cascas na concentração de 0,5% por um período de 4 dias, alternando 12 h água e 12 h extrato, após desacasalamento. O grupo 2, recebeu o extrato do 5o dia até o 8o dia do experimento, alternando 12 h de água e 12 h de extrato. O grupo 3 foi o controle, recebendo apenas água durante o experimento.

Os animais foram pesados durante o experimento e , no 20° dia após desacasalamento, as grávidas foram anestesiadas com éter sulfúrico e colocadas na mesa cirúrgica em decúbito dorsal, para facilitar a incisão cirúrgica. Foi realizada uma laparotomia longitudinal mediana infra-umbilical. Após a incisão, com o auxílio de tesoura e pinças de dissecação, foram levantados a pele e o músculo da parede abdominal e posteriormente a abertura do peritônio, permitindo visualização de toda cavidade abdominal. Dessa forma foi realizada a contagem de implantes uterinos e reabsorções.

A ingestão de barbatimão por ratas grávidas não alterou seu índice de ferti¬ lidade nem o índice de implantação, significando que a planta não altera os me¬ canismos das primeiras divisões celulares e também não interfere nos processos de implantação. Testes pré-clínicos O gel ou a pomada contendo o extrato de barbatimão foi testado no globo ocular de animais de experimentação, seguindo o método de Draize JH (1956) The skin game. International Record of Medicine and General Practice Clinics, 169 (1), p.37-39. demonstrando índice de irritação zero, o que corresponde a produto não irritante. A ação antiedematosa foi evidenciada, quando usado o modelo de pata de rato induzido por carragenina, demonstrando efeito similar ao da dexametasona, sem os inconvenientes desta. A ação cicatrizante dos extratos hidroetanólicos de barbatimão, quando em formulação apresentada na forma de creme e comparada à substância padrão (fibrinolisina+desoxirribonuclease+cloranfenicol), mostrou-se evidente ao se reali¬ zar o teste cicatrizante em Modelo de ferida aberta. Nestes testes com a pomada observou-se uma espessa crosta, que contribuiu para reduzir a irritabilidade, a dor, e estancar pequenos sangramentos. Avaliação Clínica dos extratos de Barbatimão Os estudos clínicos com os extratos de barbatimão demonstravam sua a- ção antinflamatória e cicatrizante em mulheres com cervicite e cervicovaginites. Essa ação farmacológica foi comprovada na prática clínica através do uso popular. Estudos recentes quanto aos aspectos, clínico e biofarmacêutico, demonstra¬ ram a ação eficaz do barbatimão comparado às substâncias padrão, quando em¬ pregado nas vaginites, cervicites e cervicovaginites, levando ao desaparecimento do corrimento, odor desagradável, prurido e dor em número significante de paci¬ entes portadores dessas enfermidades ginecológicas. A pomada contendo 20% (p/p) do extrato hidroetanólico do barbatimão, o- ferecida gratuitamente, foi aplicada topicamente duas vezes ao dia durante 60 dias. Os pacientes foram analisados quinzenalmente (total de 2 visitas por indiví¬ duo da pesquisa) para avaliação macroscópica e constatação do possível efeito terapêutico sobre as lesões perianais, vulvares e penianas. Este trabalho teve um estudo prospectivo, sendo sido selecionados 50 pa¬ cientes dos sexos masculino e feminino com diagnóstico clínico para o condiloma acuminatum (HPV), na faixa etária de 2 1 a 50 anos, atendidos no ambulatório de Proctologia do Hospital Universitário da UFAL, no período de outubro de 2002 a setembro de 2009. Todas as lesões foram fotografadas no início, durante e após o prazo proposto do tratamento. Esses indivíduos da pesquisa foram devidamente esclarecidos e aceitaram participar do trabalho. Realizamos o seguimento de to dos os pacientes havendo desaparecimento das lesões em 45 pacientes os ou¬ tros desistiram do tratamento e não retornaram para o ambulatório. Houve regres- são total das lesões nos 45 pacientes e não foi evidenciada recidiva das lesões. Na avaliação clinica geral do fitoterápico, concluiu-se que o produto apresenta resultados clínicos altamente significativos nos tratamentos decorrentes das in fecções por HPV. REIVINDICAÇÕES 1. "COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA PARA TRATAMENTO DE INFECÇÕES HPV", caracterizado por compreender extratos alcoólicos, hidroetanólicos e aquosos das cascas, entrecascas, do caule, dos galhos e da vagem de Abarema cochliocarpos e sinonímias de barbatimão;

2 . "COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA PARA TRATAMENTO DE INFECÇÕES HPV UTILIZANDO EXTRATOS DE BARBATIMÃO", de acordo com a reivindicação de 1, caracterizado por ser composição farmacêutica para tratamento das infecções e profilaxia do câncer cervical promovidas pelo Papilomavirus Humano (HPV);

3 . "COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA PARA TRATAMENTO DE INFECÇÕES HPV UTILIZANDO EXTRATOS DE BARBATIMÃO", de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 2 caracterizado por ser aplicado em adultos, crianças e gestantes;

4 . "APLICAÇÃO DE COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA PARA TRATAMENTO DE INFECÇÕES HPV UTILIZANDO EXTRATOS DE BARBATIMÃO", de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 3 , caracterizada para ser aplicada sobre as infecções promovidas pelo HPV em todo o corpo humano;

5 . "APLICAÇÃO DE COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA PARA TRATAMENTO DE INFECÇÕES HPV UTILIZANDO EXTRATOS DE BARBATIMÃO", de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 4 , caracterizada para ser aplicada sobre as infecções promovidas pelo HPV na mucosa bucal, intravaginal, vulvar, intraretal, canal anal, margem anal, peniana;

6 . "COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA PARA TRATAMENTO DE INFECÇÕES HPV UTILIZANDO EXTRATOS DE BARBATIMÃO", de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 5 , caracterizada para a preparação de composições farmacêuticas em forma de sabões;

7 . "COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA PARA TRATAMENTO DE INFECÇÕES HPV UTILIZANDO EXTRATOS DE BARBATIMÃO", de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 6 , caracterizada para a preparação de composições farmacêuticas em forma de tinturas;

8. "COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA PARA TRATAMENTO DE INFECÇÕES HPV UTILIZANDO EXTRATOS DE BARBATIMAO", de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 7 , caracterizada para a preparação de composições farmacêuticas em forma de aerossóis;

9 . "COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA PARA TRATAMENTO DE INFECÇÕES HPV UTILIZANDO EXTRATOS DE BARBATIMAO", de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 8 , caracterizada para a preparação de composições farmacêuticas em forma de óvulos;

10. "COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA PARA TRATAMENTO DE INFECÇÕES HPV UTILIZANDO EXTRATOS DE BARBATIMAO", de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 9 , caracterizada para a preparação de composições farmacêuticas em forma de supositórios;

11."COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA PARA TRATAMENTO DE INFECÇÕES HPV UTILIZANDO EXTRATOS DE BARBATIMAO", de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 10, caracterizada para a preparação de composições farmacêuticas em forma de pomadas, cremes, géis e emulsões A/O e O/A;

12. "PROCESSO DE PREPARAÇÃO DE POMADA PARA TRATAMENTO EXTERNO DE HPV", de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 11, caracterizada por conter de 20% a 30% (p/p) do principio ativo na preparação de medicamentos;

13. "COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA PARA TRATAMENTO DE INFECÇÕES HPV UTILIZANDO EXTRATOS DE BARBATIMAO", segundo qualquer uma das reivindicações de 1 a 12, caracterizada por compreender formulações contendo extratos: hidroetanólicos, etanólicos e aquosos, associados a extratos e excipientes provenientes de outras fontes naturais, nas apresentações contendo percentuais de até 80% em peso dos respectivos extratos; 14. "COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA PARA TRATAMENTO DE INFECÇÕES HPV UTILIZANDO EXTRATOS DE BARBATIMÃO", segundo qualquer uma das reivindicações de 1 a 13, caracterizada por compreender formulações contendo extratos: hidroetanólicos, etanólicos e aquosos, associados a extratos e excipientes provenientes de outras fontes sintéticas, nas apresentações contendo percentuais de até 80% em peso dos respectivos extratos;

15. "COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA PARA TRATAMENTO DE INFECÇÕES HPV UTILIZANDO EXTRATOS DE BARBATIMÃO", segundo qualquer uma das reivindicações de 1 a 14, caracterizada por compreender formulações farmacêuticas com constituinte(s) químico(s), fração(ões) de extratos, sumos da referida planta, contendo porcentuais de até 50% em peso da soma dos respectivos produtos;

16. "COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA PARA TRATAMENTO DE INFECÇÕES HPV UTILIZANDO EXTRATOS DE BARBATIMÃO", segundo qualquer uma das reivindicações de 1 a 15, caracterizada por compreender formulações farmacêuticas com os componentes tanínicos e seus derivados funcionais (ésteres e amidas) extraídos de barbatimão Abarema cochliocarpos contendo até 50% em peso da soma dos respectivos produtos;

17. "COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA PARA TRATAMENTO DE INFECÇÕES HPV UTILIZANDO EXTRATOS DE BARBATIMÃO", segundo qualquer uma das reivindicações de 1 a 16, caracterizada por compreender formulações farmacêuticas de forma associada a fármaco(s) vitamina(s), sal(is), açúcar(es) e outros excipientes, adequados á tratamento de infecções por HPV e suas manifestações;

18. "PROCESSO DE PREPARAÇÃO DE EXTRATO ETANÓLICO DE BARBATIMÃO", de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 17, caracterizado pelo processo que segue as seguintes etapas (a) compreende cascas de barbatimão {Abarema cochliocarpos) secas e moídas em moinho elétrico, (b) extraídas através de maceração com álcool, (c) e após filtração, (d) concentra em evaporador rotatório até 60°C; 19. "PROCESSO DE PREPARAÇÃO DE EXTRATO ETANÓLICO DE BARBATIMÃO", de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 18, caracterizado por o álcool utilizado na etapa (b) é o etanólico;

20. "PROCESSO DE PREPARAÇÃO DE EXTRATO DE BARBATIMÃO", de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 17, caracterizada por compreender extratos aquosos de barbatimão (Abarema cochliocarpos), com procedimento de preparação idêntica ao do extrato etanólico hidratado descrito na reivindicação 18;

2 1."PROCESSO DE PREPARAÇÃO DE EXTRATO DE BARBATIMÃO", de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 17, caracterizada por compreender extratos hidroalcoólicos (9:1) de barbatimão {Abarema cochliocarpos), com procedimento de preparação idêntica ao do extrato etanólico hidratado descrito na reivindicação 18. . PCT/BR201 1/000205

A . CLASSIFICATION OF SUBJECT MATTER A61 K36/48 (2006.01), A61 P31/20 (2006.01), A61 P15/00 (2006.01), A61 K129/00 (2006.01), A61 K 35/00 (2006.01)

According to International Patent Classifícation (IPC) or to both national classification and IPC B . FIELDS SEARCHED Minimum documentation searched (classifícation system followed by classification. symbols)

(IPC 2006.01) A61 K

Docunientation searched other than minimum documentation to the extent that such documents are included in the fields searched

Banco de patentes brasileiro-INPI-BR

Electronic data base consulted during the international search (name of data base and, where practicable, search terms used)

EPODOC, MEDLINE, NPL, Derwent WPI 1963-201 0, Derwent Biotech Res. 1982-2010

C. DOCUMENTS CONSIDERED TO BE RELEVANT

Category* Citation of document, with indication, where appropriate, of the relevant passages Relevant to claim No.

SANTOS SC ET AL. Atividade antimicrobiana in vitro do extrato de Abarema 1, 2, 3, 6-11, 18-19 cochliocarpos (Gomes) Barneby & Grimes. Revista Brasileira de Farmacognosia, (2007), 17(2) Abr./Jun: 215-219 abstract; page 2 6 column 2, 2nd paragraph; page 2 7, column 2, st paragraph

WO 03066013 A l (LECLERE JACQUES [FR]) 1, 2, 3, 6-11, 13-14 14 August 2003 claims 1, 2 ; page 4, lines 3-5

X WO 05044288 A l 1, 2, 3, 6-11 14 May 2005 page 10, lines 24-27

|_xj Further documents are listed in the continuation of Box C. x j See patent family annex.

Special categories of cited documents: "T" .later document published after the international filing date or priority " document definingthe general state of the artwhich is not considered date and not in conflict with the application but cited to understand to be of particular relevance the principie or theory únderlying the invention " earlier application or patent but published on or afterthe international "X" document of particular relevance; the claimed invention cannot be filing date considered novel or cannot be considered to involve an inventive 'L" document which may throw doubts on priority claim(s) or which is step when the document is taken alone cited to establish the publication date of another citation or other "Y document of particular relevance; the claimed invention cannot be special reason (as specified) considered to involve an inventive step when the document is Ό " document referring to an oral disclosure, use, exhibition or other combined with one or more other such documents, such combination means being obvious to a person skilled in the art 'P" document published prior to the international filing date but laterthan "&" document member of the sarhe patent family the priority date claimed Date of the actual completion of the international Date of mailing of the international search report 15 Sep 2011 31 Oct 2011

Name and mailing address of the ISA/ Authorized officer INSTITUTO NACIONAL DA PROPRIEDADE INDUSTRIAL Vânia Lúcia Ferreira Linhares da Silva Rua ayrin Veiga n 9, 18s andar Facsimile No. cep: 20090-050, Centra - Rio de Janeiro/RJ Telephone No. Form PCT/ISA/210 (second sheet) (July 2009) . PCT/BR201 1/000205

C (Continuation). DOCUMENTS CONSIDERED TO BE RELEVANT

Category* Citation of document, with indication, where appropriate of the relevant passages Relevant to claim No. .

X Página da Web: HPV eu tenho! Pomada de barbatimão. 2 Available on 13 Dec 2008 URL:http://hpveutenho.bloespot.com/2008/12/nossa-hoie-fui-passar-pomada- de.html The whole document Key words searched barbatimão hpv

Y P ET AL. Antiviral e ect of Guazuma ulmifolia and Stryphnodendron 1-3, 6-21 adslringens on poliovirus and bovine herpesvirus. Biol. Pharm. Buli. (2006), 29(6): 1092-1095. abstract, page 1053, column 1, paragraph 4

Y HERNANDES L ET AL. Wound-healing evaluation of ointmént fro 1 Stryphnodendron adstringens (barbatimão) in rat skin. Braz. Jour. Pharm. Scien. (2010) volume 46, n. 3, jul/set: 431-436. abstract, page 432, column 1, paragraphs 2 and 3

Y LOPES ET AL. Influence of extracts of Stryphnodendron polyphyllum Mart. and 1, 18 Stryphnodendron obovatum Benth. on the cicatrisation of cutaneous wou ds in rats. Journal of Ethnopharmacology (2005) 99: 265-272. abstract

A SILVA ET AL. Anti-inflammatory intestinal activity of Abarema cochliacarpos 1, 18 (Gomes) Barneby & Grimes in TNBS colitis model. Journal of Ethnophannacology 128 (2010): 467-475. abstract

A SILVA ET AL. Antinociceptive effects of Abarema cochliacarpos (B.A. Gomes) 1, 18 Barneby & J.W.Grimes (Mimosaceae). Revista Brasileira de Farmacognosia (2009) 19(1A) Jan./Mar: 46-50.

A SOARES DE JESUS ET AL. Ação antibacteriana e antiaderente de Pithecellobium 1, 18 cochliocarpum (gomez) macbr s

A MELO ET AL. Effect of Stryphnodendron adstringens (barbatimão) bark n animal 1, 18 models of nociception. Revista Brasileira de Ciências Farmacêuticas (2007) vol. 43, n. 3, jul./set.: 465-469. A BR 97057444 1 25 May 1999

A BR 06001025 1 02 October 2007

A BR 01059688 A 1 19 August 2003

Forni PCT/ISA/210 (continuation of second sheet) (July 2009) . PCT/BR201 1/000205

Box No. II Observations here certain claims were found unsearchable (Continuation of item 2 of fírst sheet)

This intemational search report has not been established in respect of certain claims under Articlé 17(2)(a).for the following reasons:

1. Claims Nos.: - 5 because they relate to subject matter not required to be searched by this Authority, namely:

These claims relate to subject matter (method by therapy) for which this Authority is not required to perform a search, pursuant to PCT Articlé 17(2)(a)(i) and Rule 39.1 (iv).

□ Claims Nos.: because they relate to parts of the intemational application that do not comply with the prescribed requirements to such an extent that no meaningful intemational search can be carried out, specifically:

Claims Nos.: because they are dependent claims and are not drafted in accordance with the second and third sentences of Rule 6.4(a).

Box No. Ι Π Observations where unity of invention is lacking (Continuation of item 3 of fírst sheet)

This Intemational Searching Authority found multiple inventions in this intemational application, as follows:

□ As ali required additional search fees were timely paid by the applicant, this intemational search report covers ali searchable claims.

□ As ali searchable claims could be searched without effort justifying additional fees, this Authority did not invite payment of additional fees.

□ As only some of the required additional search fees were timely paid by the applicant, this intemational search report covers only those claims for which fees were paid, specifically claims Nos.:

No required additional search fees were timely paid by the applicant. Consequently, this intemational search report is restricted to the invention first mentioned in the claims; it is covered by claims Nos.:

The additional search fees were accompanied by the applicanfs protest and, where applicable, the payment of a protest fee. □ The additional search fees were accompanied by the applicanfs protest but the applicable protest fee was not paid within the time lirnit specified in the invitation. □ No protest accompanied the payment of additional search fees. Form PCT/ SA 2 0 (continuation of first sheet (2)) (July 2009) n r n . Information on patent family members PCT/BR201 1/000205

BR 01059688 A 19/08/03 None

WO 03066013 Al 14/08/03 AU 2003222874 A l 02/09/03 EP 1471882 A l 03/11/04 FR 2835427 A 08/08/03

WO 05044288 Al 19/05/05 AR056904 A 1 07/11/07 AU2004286729 Al 19/05/05 AU201 1201 112A1 07/04/11 BR0305535 A 12/07/05 CA2537118 A l 19/05/05 CN1 878560 A 13/12/06 ECSP066560A 29/12/06 EP1684773 A 1 02/08/06 HK1072152A2 12/08/05 HK1098707A1 06/05/11 JP20075 10673 A 26/04/07 KR20060119708A 24/11/06 MXPA06005275 A 15/12/06 NZ547803 A 28/05/10 PE05802005 Al 15/08/05 US20062 16364 A l 28/09/06 US2010267841 A l 21/10/10 UY28613 A 1 31/12/04 ZA200604443 A 26/09/07

BR 97057444 25/05/99 None

BR 0600 1025 02/10/07 None

Forni PCT/ISA/210 (patent family annex) (July 2009) RELATÓRIO DE PESQUISA INTERNACIONAL internacional N° PCT/BR201 1/000205

A . CLASSIFICAÇÃO DO OBJETO A61 K36/48 (2006.01), A61 P31/20 (2006.01), A61 P15/00 (2006.01), A61 K129/00 (2006.01), A61 K 35/00 (2006.01)

De acordo com a Classificação Internacional de Patentes (IPC) ou conforme a classificação nacional e IPC B. DOMÍNIOS ABRANGIDOS PELA PESQUISA Documentação mínima pesquisada (sistema de classificação seguido pelo símbolo da classificação)

(IPC 2006.01) A61 K

Documentação adicional pesquisada, além da mínima, na medida em que tais documentos estão incluídos nos domínios pesquisados

Banco de patentes brasileiro-INPI-BR

Base de dados eletrônica consultada durante a pesquisa internacional (nome da base de dados e, se necessário, termos usados na pesquisa)

EPODOC, MEDLINE, NPL, Derwent WPI 1963-201 0, Derwent Biotech Res. 1982-2010

C. DOCUMENTOS CONSIDERADOS RELEVANTES Relevante para as Categoria* Documentos citados, com indicação de partes relevantes, se apropriado reivindicações N°

SANTOS SC ET AL. Atividade antimicrobiana in vitro do extrato de Abarema 1, 2, 3, 6-11, 18-19 cochliocarpos (Gomes) Barneby & Grimes. Revista Brasileira de Farmacognosia, (2007), 17(2) Abr./Jun: 215-219 resumo; página 216 coluna 2, 2° parágrafo; página 217, coluna 2, I o parágrafo

WO 03066013 A l (LECLERE JACQUES [FR]) 1, 2, 3, 6-11, 13-14 4 agosto 2003 reivindicaç(")cs 1. 2 página 4, linhas 3-5

X WO 05044288 A l 1, 2, 3, 6-11 14 maio 2005 página 10, linhas 24-27

Documentos adicionais estão listados na continuação do quadro C Ver o anexo de famílias das patentes

* Categorias especiais dos docurrentos citados: "T' documento publicado depois da data de depósito internacional, ou de " A" documento que define o estado geral da técnica, mas não é considerado de prioridade e que não conflita como depósito, porémcitado para entender o particular relevância. princípio ou teoria na qual se baseia a invenção. "E" pedido ou patente anterior, mas publicada após ou na data do depósito "X" documento de particular relevância; a invenção reivindicada não pode ser internacional considerada nova e não pode ser considerada envolver uma atividade "L" documento que pode lançar dúvida na(s) reivindicação(ões) de prioridade ou inventiva quando o documento é considerado isoladamente. na qual é citado para determinara data de outra citação ou por outra razão "Y" documento de particular relevância; a invenção reivindicada não pode ser especial considerada envolver atividade inventiva quando o documento é combinado mais um, tal para " O" documento referente a uma divulgação oral, uso, exibição ou por outros meios. comum outro documento.ou de combinação sendo óbvia umtécnico no assunto. . " P"documento publicado antes do depósito internacional, porém posterior a data de prioridade reivindicada. "&" documento membro da mesma i m ia de patentes. Data da conclusão da pesquisa internacional Data do envio do relatório de pesquisa internacional: 15 setembro 2011 3 1 ! Nome e endereço postal da ISA/BR Funcionário autorizado . INSTITUTO NACIONAL DA PROPRIEDADE INDUSTRIAL ¥ Rua Mayrink Veiga n 9, 18s andar Vânia Luçia Ferreira Linhares da Silva cep: 20090-050, Centro - Rio de Janeiro/RJ N° de fax: +55 2 1 3037-3663 N° de telefone: +55 2 1 3037-3493/3742 Formulário PCT ISA 210 (segunda página) (Julho 2009) RELATÓRIO DE PESQUISA INTERNACIONAL Depósito internacional N° PCT/BR201 1/000205 C. DOCUMENTOS CONSIDERADOS RELEVANTES Relevante para as Categoria* Documentos citados, com indicação de partes relevantes, se apropriado reivindicações N° X Página da Web: HPV eu tenho! Pomada de barbatimão. Disponível em dezembro de 2008. URL:http://hpveutenho.blogspot.com/2008/12/nossa-hoie-fui-passar-pomada- de.html todo documento Palavras chave buscadas: barbatimão hpv

FELIPE ET AL. Antiviral effect of Guazuma ulmifolia and Stryphnodendron adstringens on poliovirus and bovine herpesvirus. Biol. Pl rm. Buli. £2006), 29(6): 1-3, 6-21 1092-1095.

resumo, página 1053, coluna 1, parágrafo 4

HERNANDES L ET AL. Wound-healing evaluation of ointmént from Stryphnodendron adstringens (barbatimão) in rat skin. Braz. Jour. Pharm. Scien. (2010) volume 46, n. 3, jul/set: 431-436.

resumo,página 432, coluna 1, parágrafos 2 e 3

Y LOPES ET AL. Influence of extracts of Stryphnodendron polyphyllum Mart. and Stryphnodendron obovatum Benth. on the cicatrisation of cutaneous wourids in rats. 1, 18 Journal of Ethnopharmacology (2005) 99: 265-272.

SILVA ET AL. Anti-inflammatory intestinal activity of Abarema cochliacarpos (Gomes) Barneby & Grimes in TNBS colitis model. Journal of Ethnophannacology 1, 18 128 (2010): 467-475.

SILVA ET AL. Antinociceptive effects of Abarema cochliacarpos (B.A. Gomes) Barneby & J.W.Grimes (Mimosaceae). Revista Brasileira de Farmacognosia (2009) 1, 18 19(1A) Jan./Mar: 46-50.

SOARES DE JESUS ET AL. Ação antibacteriana e antiaderente de Pithecellobium cochliocarpum (gomez) macbr s 1, 18

MELO ET AL. Effect of Stryphnodendron adstringens (barbatimão) bark n animal models of nociception. Revista Brasileira de Ciências Farmacêuticas (2007) vol. 43, 1, 18 n. 3, jul./set.: 465-469. BR 97057444 25 maio 1999

BR 06001025 02 outubro 2007

BR 01059688 A 19 agosto 2003

Formulário PCT/ISA/210 (continuação da segunda página) (Julho 2009) RELATÓRIO DE PESQUISA INTERNACIONAL internacional N° PCT/BR201 1/000205

Ouadro Π Observações quando certas reivindicações não puderam ser objeto de pesquisa (Continuação do ponto 2 da primeira página)

Este relatório de pesquisa internacional não foi formulado em relação a certas reivindicações, sob Artigo 17.2).a), pelas seguintes razões:

1. I Reivindicações: 4-5 porque estas se referem a matéria na qual esta Autoridade não está obrigada a realizar a pesquisa, a saber:

As referidas reivindicações referem-se a matéria (método terapêutico) sobre a qual esta Autoridade não é obrigada a realizar busca de acordo com os Artigos 17 (2) (a) (i) e Regra 39 l(iv) do PCT.

2. □ Reivindicações: porque estas se referem a partes do pedido internacional que não estão de acordo com os requisitos estabelecidos, de tal forma que não foi possível realizar uma pesquisa significativa, especificamente:

3. □ Reivindicações: porque estas são reivindicações dependentes e não estão redigidas de acordo com os parágrafos segundo e terceiro da Regra 6.4.a).

Quadro ΙΠ Observações por falta de unidade de invenção (Continuação do ponto 3 da primeira página)

Esta Autoridade de pesquisa internacional encontrou múltiplas invenções neste depósito internacional, a saber:

1. como todas as taxas requeridas para pesquisas adicionais foram pagas pelo depositante dentro do prazo, este relatório de pesquisa cobre todas as reivindicações pesquisáveis. 2. como a pesquisa em todas as reivindicações pesquisáveis pode ser feita sem esforço que justifique pagamento adicional, esta Autoridade não solicitou o pagamento de taxas adicionais. 3. como somente algumas das taxas requeridas para pesquisas adicionais foram pagas pelo depositante dentro do prazo, este relatório de pesquisa internacional cobre somente aquelas reivindicações cujas taxas foram pagas, especificamente as reivindicações:

4. as taxas de pesquisas adicionais requeridas não foram pagas dentro do prazo pelo depositante. Consequentemente, este relatório de pesquisa internacional se limita à invenção mencionada primeiramente nas reivindicações, na qual é coberta pelas reivindicações:

Observações da reclamação as taxas adicionais para pesquisas foram acompanhadas pela reclamação do depositante e, se for o caso, pelo pagamento da taxa de reclamação.

as taxas adicionais para pesquisa foram acompanhadas pela reclamação do depositante mas a taxa de reclamação não foi paga dentro do prazo especificado pela solicitação. I I o pagamento de pesquisas adicionais não acompanha nenhuma reclamação.

Formulário PCT/ISA/210 (continuação da primeira página(2)) (Julho 2009) RELATÓRIO DE PESQUISA INTERNACIONAL Depósito internacional N° Informação relativa a membros da família da patentes PCT/BR201 1/000205

Documentos de patente Data de publicação Membro(s) da família de patentes Data de publicação citados no relatório de pesquisa

BR 01059688 A 19/08/03 Nenhum

WO 03066013 Al 14/08/03 AU 2003222874 A l 02/09/03 EP 1471 882 Al 03/11/04 FR 2835427 Al 08/08/03

WO 05044288 Al 19/05/05 AR056904A1 07/11/07 AU2004286729 Al /05/05 AU20112011Í2A1 07/04/11 BR0305535 A 12/07/05 CA2537118 A l 19/05/05 CN1 878560 A 13/12/06 ECSP066560A 29/12/06 EP1684773 A l 02/08/06 HK1072152A2 12/08/05 HK1098707 A l 06/05/11 JP20075 10673 A 26/04/07 KR200601 19708 A 24/11/06 MXPA06005275 A 15/12/06 NZ547803 A 28/05/10 PE05802005 A 15/08/05 US20062 16364 A l 28/09/06 US2010267841 A l 21/10/10 UY28613 A 1 31/12/04 ZA200604443 A 26/09/07

BR 97057444 25/05/99 Nenhum

BR 06001025 02/10/07 Nenhum

Formulário PCT/ISA/210 (anexo da família de patentes) (Julho 2009)