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Development of a Transmission Model of Murid Herpesvirus 4

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Development of a Transmission Model of Murid Herpesvirus 4 Académie Universitaire Wallonie-Europe Université de Liège Faculté de Médecine Vétérinaire Département des maladies infectieuses et parasitaires Service d'Immunologie-Vaccinologie Développement d'un modèle de transmission de l'Herpèsvirus murin 4 Development of a transmission model of Murid herpesvirus 4 FRANCOIS Sylvie Thèse présentée en vue de l'obtention du grade de Docteur en Sciences Vétérinaires Année académique 2012-2013 Académie Universitaire Wallonie-Europe Université de Liège Faculté de Médecine Vétérinaire Département des Maladies Infectieuses et Parasitaires Service d’Immunologie et de vaccinologie Développement d’un modèle de transmission de l’Herpèsvirus murin 4 Development of a transmission model of Murid herpesvirus 4 Promoteur: Dr Laurent Gillet Co-promoteur: Prof. Alain Vanderplasschen Sylvie FRANCOIS Thèse présentée en vue de l’obtention du grade de Docteur en Sciences Vétérinaires Année académique 2012-2013 « Ne vous souciez pas d’être meilleur que vos contemporains ou que vos prédécesseurs. Essayez d’être meilleur que vous-même. » William Faulkner “Don’t bother to be better than your contemporaries or predecessors. Try to be better than yourself.” William Faulkner © Copyright, 2012 Remerciements Remerciements Voici venu le moment qui, pour moi, clôture « vraiment » la thèse, celui des remerciements. Ces quatre années de thèse ont été marquées par des hauts et des bas. Des moments d’enthousiasme inébranlable qui finalement s’avère ne pas être si inébranlable que cela. Poursuivre le travail, ne pas se laisser abattre, continuer à avancer, cela ne se fait pas toujours sans mal. J’ai eu de la chance au cours de ces quatre années, mais j’ai aussi reçu beaucoup de soutien et pour cela, de nombreux remerciements doivent être adressés ! Je tiens tout d’abord à remercier vivement le Professeur Alain Vanderplasschen pour m’avoir acceptée dans son laboratoire et pour m’avoir fait confiance. Ta motivation, ton enthousiasme contagieux et ta passion de la science sont des moteurs pour le labo et tous ses membres. Finalement, je tiens aussi à te remercier pour m’avoir laissé le choix du projet que je voulais débuter… Et voilà comment j’ai commencé à travailler avec le Docteur Laurent Gillet, mon promoteur. Laurent, je te remercie tout particulièrement pour m’avoir confié ce projet, pour m’avoir convaincue en me proposant de chasser le campagnol ! Je te remercie aussi pour ta disponibilité, ton écoute, ta capacité à motiver les troupes et à supporter ton armée de filles (on a compris à quel point c’était difficile quand tu as commencé à renforcer les troupes masculines, oui oui !). Finalement je te remercie pour la liberté que tu m’as accordée au cours de ce projet tout en restant présent ! Ton aide, tes conseils, tes idées et ton soutien ont toujours été précieux et le seront encore à l’avenir j’en suis certaine! Je remercie également le Professeur Daniel Desmecht et le Docteur Pierre Drion pour avoir accepté de constituer les membres extérieurs de mon comité de thèse. Je vous remercie pour votre suivi, vos questions, vos critiques avisées et votre soutien tout au long de ce projet. Merci aussi au Professeur Pawel Koteja de l’Université de Cracovie qui nous a procuré nos petits campagnols, ainsi que son savoir en matière de rongeurs ! Je remercie aussi Johan Michaux, rencontré lors de mon mémoire de fin de licence dans le sud de la France et mis à contribution ensuite à Liège au cours de ce projet. Merci à toi pour avoir partagé toutes tes connaissances et compétences concernant les rongeurs et particulièrement les campagnols ! « Faire une thèse », c’est aussi s’intégrer dans un laboratoire, dans une équipe et… quelle équipe que celle du rez-de-chaussée du B43b! A commencer par la T(echnician)-Team sans qui notre travail quotidien serait beaucoup plus difficile et beaucoup moins drôle ! Charles et Cédric avec qui on a chassé le campagnol en fuite dans les animaleries à quelques reprises. Lorène, la reine des cellules et incomparable optimiste. Nathalie qui nous a rejoints durant cette dernière année avant de retourner étudier ! Antoine et François, nos hommes multifonctions toujours prêts à faire une manip même à la dernière minute et une petite blague à chaque minute ! Christine, qui va et vient entre les différents Remerciements services et Domi, l’ancien mais inoubliable maître de la Taq polymérase ! Merci à vous ! Merci aussi à Christina pour son soutien logistique (je commande sur quel compte ?, C’est quel formulaire encore ?, …) et pour nos très nombreux papotages dehors ! Merci aussi aux membres anciens et actuels de la « viro », nos voisins de bureau et de paillasse ! Le Professeur Etienne Thiry, Alexandra, Julien, Angélique, Axel, Damien, Ana, Mélanie, William, bien sûr Elizabeth qui fût une de mes compagnes de pause (devant le bâtiment, on s’entend !) et Benoît, qui a toujours de bonnes questions… Je tiens également à remercier tous les membres du labo d’immuno et ils sont nombreux ! Commençons donc par les « immuno bis et ter »…. Benjamin (toujours de bon conseil), Françoise, Léonore, Océane, Maxime, Ping, Kris, Anca (un renfort chez les souris !), Maygane (qu’est-ce que tu m’auras fait rire !) et Robert (ouf un autre biochimiste !). Je n’oublie pas non plus les anciennes et anciens qui ont été de bon conseil lorsque je suis arrivée au labo et qui ont pris ensuite d’autres directions : Sophie, Benjamin, Muriel, Béré, Hélène, Stalin et Guillaume. Et finalement, l’équipe immuno (la meilleure ? bien sûr !), avec les « petits nouveaux », Bilal et Mike, venus soutenir Laurent et renforcer la composante masculine du bureau, et les anciennes : Céline, Béné, Sarah et Bérengère. Merci à vous toutes qui avez été présentes au quotidien. Nous avons partagé beaucoup de bons moments, de fous rires et de délires qui ont fait que chaque jour passé au labo, même les plus mauvais, les plus durs, les plus démoralisants, étaient tout de même sympas au bout de compte ! Et puis n’oublions pas tous les moments en dehors du labo : barbecues, mariages, vacances (Spécialement pour Sarah : Welcome to LAX !), déménagements, … Merci pour votre amitié ! Je remercie aussi Léa Morvan qui est venue au labo pour voir comment fonctionne la recherche à la fac et qui s’est retrouvée embauchée pour la relecture et la correction de ce manuscrit en anglais… Avantage pour toi, mon anglais t’a parfois bien fait rire ! Merci pour ces corrections et ton efficacité ! Un grand merci aussi à Gautier, stagiaire efficace s’il en est et dorénavant pro du McConkey ! C’est aussi et enfin l’occasion de remercier sur le papier les amis qui ont fait le chemin à mes côtés, à commencer par celles qui sont dans la même « galère », Nancy et Caro. Nancy avec qui on s’est lancées dans l’aventure de la licence en biochimie après le graduat puis dans la thèse ! Merci pour le soutien réciproque pendant nos 6 ans d’études en commun et pour toutes les discussions que nous avons pu avoir, parfois très philosophiques ! Puis bien sûr, Caro (pas ma sœur !!!), merci pour ton amitié, nos conversations scientifiques et beaucoup moins scientifiques à la terrasse de la Danish Tavern ou ailleurs et merci d’avoir toujours été présente pour moi depuis toutes ces années et peut-être à bientôt en Californie ! Merci aussi à Gaby qui n’a pas besoin d’explication quand je lui parle d’ATB ou de PDS (antibiotique et prise de sang !), merci pour ton humour, ta capacité à toujours trouver une solution (bon pas toujours réalisable certes…) à chaque problème et finalement pour avoir fabriqué Remerciements mon petit « neveu » Hugo ! Et enfin, merci à Greg, qui n’est jamais loin et ce, depuis 16 ans maintenant. Enfin, je tiens à vivement remercier ma famille pour m’avoir aidée, motivée et supportée…. Papa et maman, merci de m’avoir toujours laissée libre de mes choix, de m’avoir soutenue dans ces choix et m’avoir même toujours poussée à aller plus loin ! Et puis aussi pour vous être intéressés à mon travail ! Merci à mes grands parents d’avoir aussi toujours cru en moi. Je sais que papy aurait aimé pouvoir être là maintenant et me demander « Et donc tu as fini tes analyses sur tes souris? », tout comme tonton Roger qui aurait, je crois, été fier de la petite contribution de sa nièce à la recherche contre le cancer (même si c’est de très loin…) ! Merci aussi à tous les autres membres de ma famille qui sont toujours présents : Lolo et Marc, Maggy et Jacques, Caro (ma sœur !) et Phil et enfin Mélissa et Maël ma grande filleule et mon petit filleul ! Et puis tous les autres qui se reconnaîtront et j’espère ne m’en voudront pas de ne pas les avoir cités ! Enfin, ce travail a été réalisé grâce au mandat que m’a accordé le Fonds pour la formation à la Recherche dans l’Industrie et l’Agriculture (F.R.I.A.) géré par le Fonds National de la Recherche Scientifique (F.N.R.S.). Je remercie tout particulièrement ces sources de financement pour la confiance accordée et la possibilité de réaliser des travaux de recherche. A tous, Merci ! Abbreviations Abbreviations AIDS Aquired ImmunoDeficiency Syndrome AlHV-1 Alcelaphine herpesvirus 1 BAC Bacterial Artificial Chromosome BHK-21 Baby Hamster Kidney 21 BL Burkitt's Lymphoma BoHV-1 Bovine herpesvirus 1 BoHV-4 Bovine herpesvirus 4 CBP Chemokine Binding Protein CCD Charged Couple Device cdk6 Cyclin Dependent Kinase 6 CMC CarboxyMethylCellulose CMV Cytomegalovirus DC Dendritic Cell DMEM Dubelcco's Modified Eagle's Medium DNA DesoxyriboNucleic Acid dsDNA double strand DesoxyNibonucleic Acid E gene Early gene E. coli Escherichia coli EBNA Epstein Barr nuclear antigen
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