Digital Repository Universitas Jember Digital Repository Universitas Jember
Total Page：16
File Type：pdf, Size：1020Kb
DigitalDigital RepositoryRepository UniversitasUniversitas JemberJember VALIDASI METODE DAN PENETAPAN KADAR GENISTEIN DALAM EKSTRAK EDAMAME (Glycine max L. Merrill) TERFERMENTASI KOMBINASI Aspergillus oryzae DAN Rhizopus oligosprorus DENGAN KLT DENSITOMETRI SKRIPSI oleh Ayu Maulida Fitriah NIM 142210101116 FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS JEMBER 2018 DigitalDigital RepositoryRepository UniversitasUniversitas JemberJember VALIDASI METODE DAN PENETAPAN KADAR GENISTEIN DALAM EKSTRAK EDAMAME (Glycine max L. Merrill) TERFERMENTASI KOMBINASI Aspergillus oryzae DAN Rhizopus oligosprorus DENGAN KLT DENSITOMETRI HALAMAN JUDUL SKRIPSI diajukan guna melengkapi tugas akhir dan memenuhi salah satu syarat untuk menyelesaikan Program Studi Farmasi (S1) dan mencapai gelar Sarjana Farmasi oleh Ayu Maulida Fitriah NIM 142210101116 FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS JEMBER 2018 ii DigitalDigital RepositoryRepository UniversitasUniversitas JemberJember PERSEMBAHAN Skripsi ini saya persembahkan untuk: 1. Allah Subhanahu wa Ta’ala, dengan segala rahmat, hidayah, karunia serta petunjuk- Nya 2. Kedua orang tua tercinta, Ibu Halimatus Sa’Diyah dan Bapak Bambang Purwanto Utomo 3. Dosen, guru dan pendidik Fakultas Farmasi Universitas Jember, SMA Negeri 1 Situbondo, SMP Negeri 1 Banyuglugur, dan SD Negeri 1 Besuki 4. Almamater Fakultas Farmasi Universitas Jember iii DigitalDigital RepositoryRepository UniversitasUniversitas JemberJember MOTTO “Bertaqwalah kepada Allah, maka Dia akan membimbingmu. Sesungguhnya Allah mengetahui segala sesuatu.” (Terjemahan Surat Al Baqarah ayat 282) “Hiduplah seperti pohon kayu yang lebat buahnya; hidup di tepi jalan dan dilempari orang dengan batu, tetapi dibalas dengan buah.” (Abu Bakar Sibli) iv DigitalDigital RepositoryRepository UniversitasUniversitas JemberJember PERNYATAAN Saya yang bertanda tangan di bawah ini: Nama: Ayu Maulida Fitriah NIM: 1422101011116 Menyatakan dengan sungguh-sungguh bahwa karya ilmiah yang berjudul “Validasi Metode dan Penetapan Kadar Genistein dalam Ekstrak Edamame (Glycine max L. Maeeril) Terfermentasi Kombinasi Aspergillus oryzae dan Rhizopus oligosporus dengan metode KLT Densitometri” adalah benar-benar hasil karya sendiri, kecuali kutipan-kutipan yang sudah disebutkan sumbernya, belum pernah diajukan pada institusi manapun dan bukan karya jiplakan. Saya bertanggung jawab atas keabsahan dan kebenaran isinya sesuai dengan sikap ilmiah yang harus dijunjung tinggi. Demikian pernyataan ini saya buat dengan sebenarnya, tanpa ada tekanan dan paksaan dari pihak manapun serta besedia mendapat sanksi akademik jika pernyataan ini tidak benar. Jember, 20 Juli 2018 Yang Menyatakan, (Ayu Maulida Fitriah) NIM. 142210101116 v DigitalDigital RepositoryRepository UniversitasUniversitas JemberJember SKRIPSI VALIDASI METODE DAN PENETAPAN KADAR GENISTEIN DALAM EKSTRAK EDAMAME (Glycine max L. Merrill) TERFERMENTASI KOMBINASI Aspergillus oryzae DAN Rhizopus oligosprorus DENGAN METODE KLT DENSITOMETRI HALAMAN PEMBIMBINGAN Oleh: Ayu Maulida Fitriah 142210101116 Pembimbing Dosen Pembimbing Utama : Endah Puspitasari, S.Farm., M.Sc., Apt. Dosen Pembimbing Anggota : Dewi Dianasari, S.Farm., M.Farm., Apt. vi DigitalDigital RepositoryRepository UniversitasUniversitas JemberJember PENGESAHAN Skripsi berjudul “Validasi Metode dan Penetapan Kadar Genistein dalam Ekstrak Edamame (Glycine max L. Maeeril) Terfermentasi Kombinasi Aspergillus oryzae dan Rhizopus oligosporus dengan KLT Densitometri” telah diuji dan disahkan oleh Fakultas Farmasi Universitas Jember pada: Hari, tanggal : Jumat, 20 Juli 2018 Tempat : Fakultas Farmasi Universitas Jember Tim Penguji, Ketua, Anggota I, Endah Puspitasari, S.Farm., M.Sc., Apt. Indah Yulia Ningsih, S.Farm., M. Farm.,Apt NIP 198107232006042002 NIP 198407122008122002 Anggota II, Anggota III, Dewi Dianasari, S.Farm., M.Farm., Apt. Bawon Triatmoko, S.Farm., M.Sc.,Apt. NIP 198712082014042002 NIP 198201292009121003 Mengesahkan Dekan Fakultas Farmasi Universitas Jember, Lestyo Wulandari, S.Si., M.Farm., Apt. NIP 197604142002122001 vii DigitalDigital RepositoryRepository UniversitasUniversitas JemberJember RINGKASAN Validasi Metode dan Penetapan Kadar Genistein dalam Ekstrak Edamame (Glycine max L. Maeeril) Terfermentasi Kombinasi Aspergillus oryzae dan Rhizopus oligosporus dengan metode KLT Densitometri: Ayu Maulida Fitriah, 142210101116: 2018: 87 halaman; Fakultas Farmasi; Universitas Jember. Kanker adalah penyebab utama kematian dan morbiditas di seluruh dunia, termasuk di Indonesia. Salah satu senyawa alami yang mempunyai aktivitas antikanker adalah genistein, karena kemampuannya dalam menghambat tirosin protein kinase, menginduksi apoptosis pada kanker, dan bersifat antimutagenik. Genistein merupakan bentuk bebas dari senyawa isoflavon, yaitu senyawa fitokimia yang ada pada tumbuhan. Senyawa isoflavon tersebut banyak terdapat pada tanaman kacang-kacangan seperti kedelai dalam jumlah signifikan. Salah satu varietas kedelai yang produksinya di Jember melimpah dan merupakan salah satu komoditas ekspor Indonesia adalah edamame. Kandungan isoflavon dalam kedelai mayoritas masih dalam bentuk glikosida, yang aktivitas biologisnya lebih rendah dibandingkan dalam bentuk aglikonnya. Oleh karena itu, untuk merubah bentuk glikosida ke dalam bentuk aglikon diperlukan suatu proses, salah satunya dengan fermentasi. Proses fermentasi pada penelitian kali ini menggunakan kombinasi kapang Aspergillus oryzae dan Rhizopus oligosporus. Keduanya memiliki enzim β-glukosidase yang dapat mendeglikosilasi isoflavon glikosida menjadi aglikon. Kemudian salah satu senyawa isoflavon aglikon tersebut, yaitu genistein, akan ditetapkan kadarnya menggunakan metode KLT-densitometri. KLT-densitometri memiliki beberapa keuntungan yaitu menggunakan fase gerak yang sedikit, waktu yang relatif singkat dan dapat dilakukan penetapan kadar beberapa sampel secara simultan dengan preparasi yang mudah. Metode KLT-densitometri tersebut sebelumnya akan divalidasi terlebih dahulu dengan beberapa parameter yaitu linieritas, batas deteksi dan batas kuantitasi, presisi, dan akurasi. Optimasi kondisi analisis juga dilakukan untuk mendapatkan kondisi analisis yang optimal. Kondisi optimal untuk analisis genistein dalam sampel ekstrak edamame yaitu eluen menggunakan n-heksan : etil asetat : asam asetat (2:5:0,15), panjang gelombang pada 266 nm, dan konsentrasi uji yang digunakan pada konsetrasi 5,6; 6; 15,6; 17,8; dan 42 µg/ml dengan 6 µl penotolan. Metode analisis penetapan kadar genistein dalam ekstrak edamame non-fermentasi dan terfermentasi menggunakan metode KLT-densitometri memberikan viii DigitalDigital RepositoryRepository UniversitasUniversitas JemberJember analisis yang linier dengan nilai koefisien korelasi (r) = 0,9989; Vx0 = 3,51%; dan Xp = 26,745 ng; peka dalam nilai batas deteksi 24,932 ng dan batas kuantitasi 74,798 ng; kurang selektif karena Rs salah satu puncak genistein dengan puncak unknown < 1,5 yaitu sebesar 1,33, namun spesifik karena menghasilkan nilai korelasi spektra pada uji purity dan uji identity lebih dari 0,99; uji presisi menunjukkan hasil yang memenuhi syarat RSD (< 5,3%) dengan RSD presisi repeatabilitas = 1,93% dan RSD presisi antara = 2,36%; dan akurat dengan mean recovery = 101,661± 0,23 %. Metode yang telah tervalidasi digunakan untuk menentukan kadar genistein dalam sampel ekstrak edamame H0, H1, H2, H3, dan H4 secara berurutan adalah sebesar 0,0213 ± 1,49x10-3; 0,0047 ± 1,42 x10-4; 0,0062 ± 2,19 x10-4; 0,0106 ± 2,38 x10-4; dan 0,0183 ± 2,08 x10-4 %b/b. Hasil menunjukkan adanya perbedaan kadar yang bermakna antar sampel, kecuali pada H1 dan H2. Dapat disimpulkan bahwa kadar genistein pada edamame non-fermentasi lebih tinggi daripada edamame terfermentasi, namun belum dapat dipastikan jika waktu fermentasi dilanjutkan, kadar genistein dapat meningkat melebihi sampel non-fermentasi atau malah menurun. ix DigitalDigital RepositoryRepository UniversitasUniversitas JemberJember PRAKATA Puji syukur penulis panjatkan kepada Allah Subhanahu wa Ta’ala atas rahmat dan hidahnya penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul “Validasi Metode dan Penetapan Kadar Genistein dalam Ekstrak Edamame (Glycine max L. Maeeril) Terfermentasi Kombinasi Aspergillus oryzae dan Rhizopus oligosporus dengan KLT Densitometri”. Skripsi ini disusun untuk memenuhi salah satu syarat menyelesaikan pendidikan strata satu (S1) di Fakultas Farmasi Universitas Jember. Penyusunan ini tidak lepas dari bantuan berbagai pihak. Oleh karena itu, penulis menyampaikan terima kasih kepada: 1. Ibu Lestyo Wulandari, S.Si., Apt., M.Farm selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Jember; 2. Ibu Endah Puspitasari, S.Farm., M.Sc., Apt selaku Dosen Pembimbing Utama dan Ibu Dewi Dianasari, S.Farm., M.Farm., Apt selaku Dosen Pembimbing Anggota yang telah meluangkan waktu, pikiran dan perhatian serta dengan sabar membimbing penulis untuk menyelesaikan penelitian ini; 3. Ibu Indah Yulia Ningsih, S.Farm., M. Farm.,Apt selaku Dosen Penguji I dan Bapak Bawon Triatmoko, S.Farm., M.Sc.,Apt selaku Dosen Penguji II yang dengan sabar memberikan saran terhadap penelitian ini; 4. Bapak Dwi Nurahmanto, S.Farm.,M.Sc., Apt dan Bapak Dian Agung P, S.Farm., M. Farm., Apt selaku Dosen Pembimbing Akademik yang telah membimbing saya selama menjadi mahasiswa Fakultas Farmasi Universitas Jember; 5. Seluruh dosen maupun tenaga pengajar di Fakultas Farmasi Universitas Jember yang telah memberikan ilmunya, berbagi pengalaman selama menjadi mahasiswa Fakultas Farmasi Universitas Jember; 6. Mbak Parka dan Ibu Widi selaku teknisi Laboratorium Biologi Farmasi Universitas Jember yang selalu