DIVERSIDADE GENÉTICA E MORFO-ANATÔMICA DE Acrocomia Spp
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INSTITUTO AGRONÔMICO CURSO DE PÓS-GRADUAÇÃO EM AGRICULTURA TROPICAL E SUBTROPICAL DIVERSIDADE GENÉTICA E MORFO-ANATÔMICA DE Acrocomia spp. (ARECACEAE) SUELEN ALVES VIANNA Orientador: Carlos Augusto Colombo Tese submetida como requisito parcial para a obtenção do grau de Doutor em Agricultura Tropical e Subtropical, área de Concentração em Genética, Melhoramento e Biotecnologia Vegetal. Campinas, SP Julho de 2016 “A dúvida é o princípio da sabedoria.” Aristóteles ii AGRADECIMENTOS “Nenhum dever é mais importante que a gratidão”. As pessoas aqui lembradas são dignas de agradecimentos por sua contribuição de forma direta ou indireta para a realização do presente trabalho. Algumas pela amizade, outras, por seu exemplo, por seu conhecimento e outras ainda pelo carinho e cumplicidade. Assim agradeço: Ao Programa de Pós – Graduação em Agricultura Tropical e Subtropical / Instituto Agronômico de Campinas e ao Dr. Carlos Augusto Colombo pela oportunidade de desenvolver este estudo. À Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) pela concessão da bolsa de estudos e financiamento do presente trabalho. À Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP), em especial à Dra. Sandra Maria Carmello Guerreiro pela orientação dos trabalhos de Anatomia e pelo apoio durante o curso. Aos funcionários e aos colegas do Laboratório de Anatomia Vegetal pelos ensinamentos. Ao Dr. Walter José Siqueira pelos ensinamentos e à todos os funcionários e colegas do Departamento de Genética. Ao Herbário IAC, em especial aos Doutores Roseli Buzanelli Torres e Luís Carlos Bernacci e aos funcionários Carla e “Bene” pelo apoio no recebimento de amostras, pelo apoio e amizade. Ao Jardim Botânico Plantarum, em especial ao MSc. Harri Lorenzi pela permissão da coleta de amostras. Ao Montgomery Botanical Center (MBC) pelo convite, financiamento, permissão de coleta de amostras da coleção de palmeiras e estrutura oferecidos para a realização de parte do trabalho de anatomia foliar. Em especial ao Dr. Larry Ronald Noblick pelos ensinamentos e apoio dados. À Dra. Tracy Monique Magelan pelo apoio e pela amizade durante minha estadia no MBC. Aos demais pesquisadores e funcionários do MBC. Ao Farchild Tropical Botanical Garden, pelo uso do laboratório e pelas amostras cedidas do Herbário. iii Aos Doutores Mónica Moraes (Herbario Nacional de Bolivia), Andrew James Henderson (The New York Botanical Garden), Alex Carneiro Leal (Instituto Agronômico Paraná), Nilton Tadeu Vilela Junqueira (Embrapa Cerrados), Ricardo Soares Pimenta (Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias – Universidade Estadual Paulista), Maria Mercedes Arbo (Instituto de Botánica del Nordeste – UNNE), Francisco Gauberto Barros dos Santos (Instituto Federal de Educação, Ciência e Tecnologia do Ceará), ao MSc. Cristiano Cardoso Gomes e ao Herbario CAY pelo envio de amostras. Aos Doutores Judas Tadeu de Medeiros Costa (Universidade Federal do Pernambuco), Eduardo Ribeiro dos Santos (Herbário Universidade Federal do Tocantins), Carlos Manuel Burelo Ramos (Universidad Juárez Autónoma de Tabasco) pelo apoio durante as coletas. Às minhas queridas estagiárias Bruna Dias e Raissa Franchi por toda a ajuda dada para a realização do trabalho. Ao Dr. Arnildo Pott com quem tanto aprendi. Fica aqui registrado mina grande admiração pelo profissional e pelo ser humano que és. À Dra. Maria Imaculada Zucchi por todos os ensinamentos, pelo apoio e pela pessoa que é, e que tanto me ajudou durante ese período. À MSc. Lúcia Pires Ferreira, pela orientação para realização dos trabalhos de genética e pela amizade. Fica registrada mina gratidão e meu respeito pela grande profissional e pessoa de coração enorme que és. À Dra. Stella Maria Nucci, por todos os ensinamentos e pelo carinho sempre presentes. Aos meus queridos amigos, Renata Kimie, Sara Rovaris, Margarete, Alex Mendonça, Brenda Díaz, Vivian Santos, Denis Bassi, Cema Viel, Bárbara Biazotti, Rosa Helena, Natácia Evangelista e tantos outros queridos amigos que contribuiram para realização deste trabalho e pelo apoio pessoal. À minha querida mãe Rosângela Brusco Loesch, pelo apoio e carinho durante toda a minha vida. iv SUMÁRIO LISTA DE FIGURAS ................................................................................................ viii-xi LISTA DE TABELAS ............................................................................................... xii-xiii RESUMO ................................................................................................................... xiv ABSTRACT ............................................................................................................... xv 1 INTRODUÇÃO GERAL ........................................................................................ 01-03 2 REVISÃO DE LITERATURA ............................................................................... 04-36 2.1 Aspectos taxonômicos, botânicos e área de ocorrência de Acrocomia spp. ....... 04-18 2.1.1 Acrocomia aculeata .......................................................................................... 08-10 2.1.2 Acrocomia crispa .............................................................................................. 10-11 2.1.3 Acrocomia emensis ........................................................................................... 11-12 2.1.4 Acrocomia glaucescens .................................................................................... 13 2.1.5 Acrocomia hassleri ........................................................................................... 13-14 2.1.6 Acrocomia intumescens .................................................................................... 14-15 2.1.7 Acrocomia media .............................................................................................. 15-16 2.1.8 Acrocomia totai ................................................................................................ 17-18 2.2 Utilização de Acrocomia spp. .............................................................................. 18-30 2.2.1 Biocombustíveis .............................................................................................. 24-30 2.3 Aspectos da diversidade genética e marcadores moleculares ............................. 30-33 2.4 Caracterização biométrica de frutos ................................................................... 33 2.5 Caracterização morfoanatômica ......................................................................... 34-36 3. REFERÊNCIAS .................................................................................................... 37-51 CAPÍTULO I Caracterização da diversidade molecular de Acrocomia Mart. (Arecaceae) ............ 52-113 RESUMO ................................................................................................................... 53 ABSTRACT .............................................................................................................. 54 1. INTRODUÇÃO ..................................................................................................... 54-58 2. MATERIAL E MÉTODOS ................................................................................... 58-72 2.1 Coleta do material botânico ................................................................................. 58-60 2.2 Seleção das amostras coletadas para utilização no estudo de diversidade .......... 60-67 2.3 Conservação e processamento do material botânico ........................................... 68 2.3.1 Extração de DNA total das folhas .................................................................... 68 2.3.2 Extração de DNA total da amêndoa ................................................................. 69 2.4 Seleção e otimização de iniciadores Inter Simple Sequence Reapts (ISSR) ....... 69-71 v 2.5 Análise dos dados ................................................................................................ 71-72 3 RESULTADOS E DISCUSSÃO ........................................................................... 72-98 3.1 Seleção e otimização dos iniciadores ISSR ......................................................... 72-74 3.2 Diversidade e estrutura genética .......................................................................... 74 3.2.1 Acrocomia spp. ................................................................................................. 74-80 3.2.2 Acrocomia intumescens .................................................................................... 80-85 3.2.3 Acrocomia totai ................................................................................................ 85-90 3.2.4 Acrocomia aculeata .......................................................................................... 91-98 4 CONCLUSÕES ...................................................................................................... 98 5 REFERÊNCIAS ..................................................................................................... 99-107 Anexos ...................................................................................................................... 108-113 CAPÍTULO II Anatomia foliar como subsídio à taxonomia de espécies de Acrocomia Mart. (Arecaceae) ................................................................................................................ 114-149 RESUMO ................................................................................................................... 115 ABSTRACT 116 1 INTRODUÇÃO .....................................................................................................