Estudio Taxonómico Del Género Rotylenchus Filipjev, 1936 : (Nematoda : Tylenchida)

UNIVERSIDAD COMPLUTENSE DE MADRID FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

TESIS DOCTORAL

Estudio taxonómico del género Rotylenchus Filipjev, 1936 : (Nematoda : Tylenchida)

MEMORIA PARA OPTAR AL GRADO DE DOCTOR PRESENTADA POR

María Cristina Zancada Fernández

DIRECTOR:

Rafael Alvarado Ballester

Madrid, 2015

5306710401

ESTUDIO TAXONOMICO DEL GENERO ROTYLENCHUS FILIPJEV, 1936

(NEMATODA : TYLENCHIDA)

Memoria que présenta

Cristina ZANCADA FERNANDEZ

para optar al Gradode Doctor en Ciencias Bioldgicas.

Enero de 1984

n n i \/ n n n n n D/\iircxcn L/ Il V, V V I , I I V I , L/l « L/ « l\UI UC-I ouïnix/nuv l//'\i_Li_«jii_i\

R 2-^. 2 i2

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLDGICAS. UNIVERSIDAD COMPLUTENSE DE

MADRID ESTUDIO TAXONOMICO DEL GENERO ROTYLENCHUS FILIPJEV, 1936

(NEMATOOA:TYLENCHIDA)

M® Cristina ZANCADA FERNANDEZ La Tienoria que 1 leva por tftû lo "ESTUDIO TAXONOMICO

DEL GENERO ROTYLENCHUS FILIPJEV, 1936 (NEMATODA :TYLENCHI DA) " , que péra cutar al grado de Doctor en Ciencias Bioldgicas pré senta D ^ M^ Cristina zZA\NCA,DA FERNANDEZ, ha si do realizado en la U.E.! de Biologia Amibientai del Institute de Edafologfa y

Biolcgia Vegetal (C.S.I..C.) de Madrid, bajo la direccion del

Prof. Dr. D. Rafael .ALVARADO BALLESTER.

Madrid, Enero de 1984

Cristina Zancada Fernandez

P r of .Dr. D ./af ae 1 Alvaradio Bail ester "Nematode systematics is still in a state of instability. Far too many shifts from one taxon to another occur and specialists differ widely in their views about the diagnostic importance of certain characters, especially at the species and the genus level'V

COOMANS (1983) A Victor, por todo. Deseamos expresar nuestro agradecimiento a:

Prof. Dr. D. Rafael ALVARADO BALLESTER, Catedratico de Zoologfa

de Invertebrados no Artropodos, de la Facultad de Ciencias Biold

gicas, Universidad Complutense de Madrid, por su direccion e indi-

caciones, y al Dr. D. Antonio BELLO PEREZ, Vicedirector del Insti

tute de Edafologfa y Biologfa Vegetal (C.S.I.C.) de Madrid y Je-

fe de la U.E.I. de Biologfa Ambiental, por haber hecho posible la

realizacion de este trabajo.

Dr. D. Manuel B. LIMA, Investigador Principal del Dpto. de Fitopa-

tologfa de la "Estaçao Agrondmica Nacional" de Oeiras

(Portugal), por sus ensenanzas sobre taxonomfa numerica y su di-

reccidn en el tratamiento automatico de datos.

Dra. D^ Marfa ARIAS, Vi cedirectora del Institute Espanol de Ento-

mologfa (C.S.I.C.) de Madrid; Dra. D^M^ Dolores ROMERO, del mis-

mo Institute y Dr. D. Agustfn SANCHEZ del Institute deEdafolo

gfa y Biologfa Vegetal, por su estfmulo y colaboracidn.

Drs. D. Luis ALCALA y D. Gonzalo ALMENDROS, del Institute de Edafo

logfa y Biologfa Vegetal, por su estfmulo y ayuda en la resolu-

cion de diverses problemas relacionados con los analisis numeri-

cos.

Dr. D. José Luis G. REBOLLAR y Lcdo. Alfonso NAVAS, por su colabo

racidn en la pianificacidn de los muestreos realizados. Ing. Agronome D. Luis CARNEIRO, del Dpto. de Mejora de la Vid de la "Estaçâ’o Agrondmica Nacional", de Oeiras, por su ayuda en le reJativo a las graficas de los analisis numéricos.

Drs. P.A.A. LOOF y T. B0N6ERS, del "Laboratorium voor Nematologie

Landbouwhogeschool", de Wageningen (Holanda), por habernos facilitado la consulta de su extensa coleccidn bibliografica sobre

Nematologia.

Dr. J.W. SEINHORST, del "Institut voor PIantenziektenkundig Onder- zoek", de Wageningen, por sus indicaciones.

D^ Visitacidn ALVIRA, D^ Sagrario FERNANDEZ y D^ Ange

les PAEZ, Ayudantes del Laboratorio de Nematologia, por su ayuda en la extraccidn y preparacidn de las muestras; a D^ del

Carmen ROBLES y D^ Trinidad SANZ, Ayudantes de Investigacidn, por la ayuda prestada, y a todos los miembros de la U.E.I. de Bio

logfa Ambiental, donde se ha realizado esta Memoria.

D^ Pilar CARMONA y D^ Rosario SANTOS, Ayudantes de Investiga- cion, por su colaboracion en todo cuanto fué necesario a lo lar

go del présente trabajo.

Institute de Edafologfa y Biologfa Vegetal (C.S.I.C.) de Madrid, y a su Direccion, por haber aceptado que este trabajo se desarro-

llara en el mismo, y por todas las facilidades prestadas para su

consecucion. Consejo Superior de Investigaciones Cientificas, por la conce-

sion de una Beca de Intercambio que ha hecho posible la realiza

cion de todos los analisis numéricos asi como a la " Estaçao

Agrondmica Nacional" de Oeiras (Portugal) por haber aceptado mi

estancia en la misma, y al Centro de Calcule de la "Fundaçao Ca-

1 ouste Gulbenkian de Ciência", por el uso de sus ihstalaciones.

Direccion y miembros del Programa del C.S.I.C. n“ 22009: "Contri-

buciôn espanola al Programade la Fundacion Europea de la Cien-

cia "European survey of plant parasitic nematodes". Investigacio

nes basicas para una mejor gestion de plagas en nuestro pais,

que han inclufdo esta Ifnea entre sus objetivos y han subvenciona-

do la presente Memoria.

Finalmente, a la Direccion General de Pol ft ica Cientffica, por la concesidn de una Beca de Formacidn de Personal Investigador que ha hecho posible la realizacion de este trabajo. RESUMEN - X -

En este trabajo se estudia el género Rotylenchus Filipjev, 1)36, desde el punto de vista taxondmico, valorando al mismo tiempo el interés que pueden tener 1 as técnicas informâticas, a través de 1)S métodos de taxonomfa numérica, en una correcta determinacidn de sus especies. Se trata de un grupo de nematodos fitoparasitos con problemas taxomdmicos importantes, puesto que de un total de sesenta y :res especies que han sido descri tas del mismo, sdlo treinta y siete son validas .actualmente.

Para llevar a cabo nuestro estudio, hemos comenzado por reali- zir un analiisis de todas las publ icaciones existentes sobre dicho gé nero, incluyendo ademas el nénero Orientylus Jairajpuri et Siddiqi, 1977, por presentar éste unas relaciones feneticas muy estrechas con Rptvlenchus. Se ha agrupado la ampli a bibliograffa consultada de a:uerdo con su tematica, en los siquientes aspectos; especies descri bes y cambios taxondmicos de ambos géneros, sistematica, citas en Espaha y en el resto del mundo, asf como otros estudios de tipo morfo- 16g co, biolôgico, de distribucidn, etc. que sobre estos géneros se han realizado.

Paralelamente, se han estudiado treinta y dos poblaciones, pertenecientes a areas representativas de nuestro pafs. Esto nos ha per mit do adquirir una experiencia propi a sobre la morfologfa de este grupo, a la vez que nos ha facilitado uno de nuestrns objetivos que e-a la valoraddn de los caractères que se vienen utilizando en la determinacidn de sus especies.

Se ha realizado un estudio morfoldgico y taxondmico de las pob'aciones encontradas, que se acompanan de détailadas descripciones de las especies, indicandose que dos de ellas son nuevas para la Cien- c a y dos nuev'as para la fauna espanol a.

En el analisis' de la distribucidn geogrâfica de las diferentes especies, se considéra que su escasa representacidn se debe prin- c pclmente a Ha falta de una identificacidn a nivel de especie y a las arandes areas aun no estudiadas.

Se amalizan también los resultados obtenidos en la aplica- cor de cînco métodos diferpntes de tratamiento numérirn, a los que fueron sometidas las poblaciones descri tas por otros autores, las estu- d acas por nosotros y el conjunto de ambas, comparandose con los re sultados de los estudios morfoldgicos y taxondmicos, a la vez que se destaca la correspondencia general ‘entre los resultados obtenidos me- d arte la utilizacidn de uno y otro método. Se confirma la adecua- c dr de los métodos de taxonomfa numérica empleados, asf como su ccntribucidn a una mejor identificacidn de las especies de los nema todes estudiados.

Desde el punto de vista de la fitopatologfa, se subraya la im- pcrtancia de los géneros estudiados, por tratarse de nematodos patd- gencs que pueden causar graves dahos en diversas especies vegetales de gran interés agrfcola.

Por ultimo, se plantea lanecesidad de complementer este tipo de estudios con otros filogenéticos, bioldgicos, ecoldgicos y bio- geograficos, aspectos estos en los que se debera profundizar en un fiturn a fin de conocer mejor los procesos de especiacion en los nematodos del suelo y fitoparasitos. INDICE GENERAL - XII -

INDICE GENERAL

pâg.

RESUMEN ...... IX

INDICE DEL APENDICE ...... XV

INTRODUCCION ...... 1

PLAN DE TRABAJO ...... 7

I . ANTECEDENTES ...... 12

1.1. El género Rotylenchus ...... 14

1.2. Posicion sistematica del géneroRotylenchus ...... 29

1.3. Estudios realizados sobre elgénero Rotylenchus ...... 3 9

I .3.1. Morfologia ...... 40

1.3.2. Biologfa y ecologfa ...... 40

1.3.3. Distribucidn ...... 41

1.3.4. Control y dahos ...... 42

1.4. El género Rotyl enchus en Espaha ...... 45

I I . MATERIAL Y METODOS ...... 50

I I . 1. Recogida de muestras ...... 51

I I . 2 . Extraccidn ...... 52

11.2.1. Preparacidn de la muestra ...... 52

11.2.2. Técnicas de extraccidn a partir del suelo ...... 53

11.2.2.1. Método de centrifugacidn ...... 53

11.2.2.2. Método de filtracidn ...... 56

I I . 3. Métodos de estudio cuantitativo y cualitativo ...... 56

11.3.1. Recuento y aislamiento de nematodos ...... 56

11.3.2. Muerte, fijacidn y montage ...... 57

11.3.3. Conservacidn de las muestras ...... 60

11.3.4. Observaciones microscdpicas ...... 60 - X III -

pag.

.4. Caracteristicas del material utilizado ...... 61

'..4,1. Especies descritas en la bibliografia ...... 62

'.4.2. Muestreos realizados y material recogido por

nosotros ...... 66

.5. Tratamiento automatico de los datos ...... * 67

;.5.1. Seleccion de las unidades taxondmicas operacio-

nales ...... 67

'.,5.2. Seleccidn de caractères ...... 68

!.5.3, Estandardizacidn de la matriz de datos ...... 70

',.5.4. Calculo de los coefici entesdesemejanza ...... 71

:.5.5. Analisis de grupos ...... 74

'.1.5.5.1. Métodos de agregacidn ...... 74

11.5.5.1.1. Ligamiento simple ...... 75

11.5.5.1.2. Ligamiento promedio ...... 76

11.5.5.2. Métodos de ordenacidn ...... 78

I 1.5.5.2.1. Analisis de componentes principales ...... 78

11.5.5.2.2. Analisis de coordenadasprincipales ...... 81

11.5.5.2.3. Comparacidn entre analisis de componentes

principales y analisis de coordenadas prin

cipales ...... 82

III. RESULTADOS ...... 84

II 1.1. Revisldn de los antecedentes ...... 85

111.1.1. Posicidn sistematica y especies validas de los

géneros Rotylenchus y Orientylus ...... 86

111.1.2. El género Rotylenchus en Espaha ...... 90

111.1.3. Distribucidn mundial de las especies de Rotylen

chus y Or i entyl us ...... 91 - XIV - pag.

111.2. Estudio morfoldgico y taxondmico ...... 92

111.2.1. Resultados del muestreo realizado ...... 92

111.2.2. Description de las especiesencontradas ...... 93

111.3. Estudios de taxonomfa numerica ...... 119

111.3.1. Analisis numéricos de las poblaciones descritas

en la bibl iograf fa ...... 121

111.3.2. Analisis numéricos de las poblaciones encontra

das por nosotros ...... 124

111.3.3. Analisis numérico conjunto de todas las poblaci£

nes estud i adas ...... 128

d:s:usion ...... 135

- 5istematica ...... 136

- Revisidn de los antecedentes ...... 145

- \nalisis de los métodos utilizados ...... 148

- Estudio comparativo entre el analisis morfométrico y el

: rat ami en to automatico de las poblaciones estudiadas por

losotros ...... 153

- Relaciones entre las especies de Rotylenchus, segun los

analisis de taxonomfa numérica ...... 173

- /aloracidn de los caractères utilizados en los analisis

luméricos ...... 180

CONCLJSIONES ...... 185

b ;bliografia ...... 190

A péidi ce ...... 223 INDICE DEL APENDICE - XVI -

INDICE DEL APENDICE

pâg.

TAB.A I.- Muestreos realizados ...... 224

TAB^A II.- El género Rotyl enchus en Espaha ...... 237

TAB.A III.- Relac ion de pobl aciones estudiadas ...... 239

TABlA IV.- Caractères estudiados en los analisis numéricos. 243

TABLA V.- Matriz de datos ...... 244

F-g. I.- Esquema del câlculo de los coefici entes de correl_a

cidn cofenética ...... 257

F g. 2.- Esquema de! método de comparacidn entre los anali

sis de coordenadas y componentes principales ...... 258

F gs. 3-6.- Distribucidn geogrâfica de las especies de

Orientai us y Rotylenchus ...... 259

F g. ^. - Rotylenchus magnus sp. n ...... 263

F g. 8.- Rotylenchus mesorobustus sp. n ...... 264

F-g 9.- Fenogramas de las poblaciones de la bibliografia.. 265

F-g. 10.- Especies representativas de los grupos A y B .... 266

F g. _ i . - Red de conexidn mfriima de 1 as pobl aciones de la

bibliografia ...... 267

Fig. 12.- Anâlisis de coordenadas principales de las pobla-

ciones de la bibl iograf fa ...... 268

Fig. 13.- Corre^acîdn entre los anâlisis de coordenadas y

componentes principales de las poblaciones de la

bibliograffa ...... 269

Fig. 14.- Anâlisis de coordenadas principales de las espe

cies de Ta bibl iograf fa ...... 270 - XVII - pag.

F g. 15.- Anâlisis de componentes principales de 1 as pobla-

ciones de la bibl iograf fa ...... 271

F g. 16.- Vectores propi os de las poblaciones de la biblio

graf fa ...... 272

F g, 17.- Anâlisis de componentes principales de las pobla-

ciones de la bibl iograf fa ...... 273

F g, 18.- Fenogramas de las treinta y dos poblaciones espa-

holas ...... 274

F-g, 19.- Red de conexidn mfnima de las 32 poblaciones es-

paholas ...... 275

Fig, 20.- Vectores propios de las 32 poblaciones espanolas. 276

Fig. 21.- Anâlisis de componentes principales de las 32 po

bl aciones espanol as 277

Fig. 22.- Fenogramas de 23 pobl aciones espanol as ...... 278

Fig. 23.- Red de conexidn mfnima de 23 poblaciones espa-

hol as ...... 279

Fig. 24.- Vectores propios de 23 poblaciones espanolas .... 280

Fig. 25.- Anâlisis de componentes principales de 23 pobla-

ciones espanolas ...... 281

Fig. 26.- Fenogramas de todas las pool aciones estudiadas ..282

Fig. 27.- Red de conexidn mfnima de todas 1 as poblaciones

e stud i adas ...... 283

Fig. 28.- Anâlisis de coordenadas principales de todas las

poblaciones estudiadas ...... 284

Fig. 29.- Anâlisis de componentes principales de todas las

poblaciones estudiadas ...... 285

Fig. 30.- Vectores propios de todas las poblaciones estu

diadas 286 - XVIII - pag.

Fig. 31.- Analisis de componentes principales de todas las

poblaciones estudidadas ...... 287

Fig. 32.- Especies de los géneros Or i entylus y Rotylen-

chus ...... 288

Fig. 33.- Rotylenchus unisexus, R. incultus, y R. brevi-

caudatus, segun SHER (1965) ...... 289

Fig. 34.- Rotylenchus uni sexus, R . incultus y R. brevi-

caudatus segun VAN DEN BERG y HEYNS (1974) .. 290

Figs. 35 y 36.- Matrices de correlacion entre caractères.. 291 INTRODUCCION - 2 -

Le taxonomfa de los nematodos del suelo y parâsitos de )lant^s présenta una serie de problemas sobre los que veni- mos investigando desde el aho 1978, fecha en que comenzamos la

MenoMa ce L i cent i a t ur a, con "La révision taxonomica de los nena:oios del suelo en la cuenca al ta del rio Tajo", trabajo que n ) s permit id introducirnos en el conocimiento de las d ifi- cutades que présenta la determinacidn de sus especies. Estas dificultaces son, en primer lugar, las inherentes a un grupo muy njmeroso de organismes de pequeho tamaho y gran diversidad, cuyo estudio se ha iniciado recientemente, y en segundo lugar las qje se derivan del hecho de haber sido estudiados con fre- cuencii desde un punto de vista aplicado, no concediendo a la determ nacidn correcta de las especies la importancia que en recldàd tiene. Asf, encontramos que en numerosas ocasiones las publ icaciones sobre nematodos fitoparasitos no presentan interés en la identificacidn de las especies, hecho que uni- caiïerts conduce a complicar la nomenclatura y a aumar.tar la pro- blemitca de la taxonomfa, ya que ante estas dificultades se termine par infravalorarla, no otorgando la verdadera impor ta ne la que una buena descripcidn y determinacidn tiene para su posterior utilizacidn en el conocimiento y la solucidn de los prcblenas f i toniemato Idg i cos .

Soi pues, las dificultades mencionadas las que nos han

11 evade a emprender este estudio, que tiene como objetivo esta- - 3 -

blecer una metodologfa de trabajo que, basada en el tratamien to autom-atico de los datos, nos permita afrontar los problemas taxondmicos de los nematodos parâsitos de plantas pertenecien tes al or den Tylenchi da, puesto que consider amos que un profon de estudio taxondmico de los mismos ha de ser prioritario a cualquier otro tipo de estudio bioldgico o agroecoldgico que sobre ellos se pretenda realizar.

El empleo de las técnicas de taxonomfa numérica nos va a permitir, ademâs, realizar una valoracidn de los caractè res que se vienen utilizando en la determinacidn de las espe cies de nematodos, ello nos puede servir como punto de partida para establecer unos criterios taxondmicos mâs rigurosos, que nos fa c ilite r un mejor conocimiento de las especies y del grupo a que pertenecen, ya que si la taxonomfa numérica permite es tablecer grupos dentro de los diferentes taxones, creemos que es a nivel de género donde encuentra mayor apiicacidn, pues, al menos en el caso que nos ocupa, las especies se id e n tifican atendiendo casi exc1 usivamente a sus val ores morfométricos, por lo que estas técnicas resultan especial mente indicadas.

Hemos elegido el género Rotylenchus por presentar ade mâs una problemâtica propi a, debido a que han sido descritas en é1 sesenta y très especies, desde que fué citado por prime ra vez por FILIPJEV (1934), de las que veintiséis pertenecen

actualmente a otros géneros. Al analizar toda esta serie de cambios, pudimos comprobar que recientemente JAIRAJPURI y - 4 -

SIDDIQI (1977) habian escindido este género en très: Rotylen

chus , Calvatylus y Orientylus, y que posteriormente FERRAZ

(1980) habfa vuelto a incluir Calvatylus e n Rotylenchus. Asi

pues, al emprender nuestro trabajo, decidimos incluir también

al unico género valido tras la division mencionada, aparté

del propio Rotylenchus, con el fin de estudiar si las relacio-

nes fenéticas de las especies que incluia con respecto a las

del género Rotylenchus justificaba la separacion de ambos.

Una révision de la bibliografia existente sobre los

nematodos del suelo nos permite ver con facilidad que, si bien

dentro del campo de la quimiotaxonomfa existen una serie de

trabajos encaminados especial mente a la separacion de razas de

las especies patogenas, como los de EVANS (1971) y DALMASSO _e_t

a 1. ( 1978 ) entre otros, en el campo de la taxonomfa numérica

solo encontramos en general estudios de géneros ad si ados, co

mo T r i chodorus , BIRD ( 1967 ), Xiphinema, LIMA ( 1968 ), o Tylen

chus , BLACKITH et a l. (1976), siendo una Ifnea que apenas se

ha iniciado en nuestro pafs. De aquf el interés del tema de

trabajo, que adquiere un doble senti do si tenemos en cuenta que

pretendemos al mismo tiempo sentar las bases del empleo de il a

taxonomfa numérica como un complemento de la taxonomfa tradi-

cional, ya que pensamos que si bien la primera es, al menos en

principio, mâs objetiva, no puede prescindirse en modo alguno

de la experiencia ni de los criterios y conocimiento morfologi-

cos, bioldgicos y filogenéticos en los que se apoya la segun-

d a. - 5 -

Es nuestra intencion demostrar el interés de las téc nicas de taxonomfa numérica para una mejor y mâs fundamenta- d a identificacion de las especies en este amplio y complejo grupo que constituyen los nematodos parâsitos de plantas, ya que estamos convencidos que solo tras una correcta determina cidn de sus especies es posible emprender cualquier otro tipo de estudio.

Pretendemos iqualmente con nuestro trabajo contribuir

al conocimiento de la nematofauna espanola, aportando los resul tados de los anâlisis nematoldgicos de una amp 1i a zona sobre

este importante género, re lativamente poco estudiado hast a aho-

r a en nuestro pafs, y de indudable interés, tanto desde el

punto de vista tedrico como aplicado, hast a el punto de que

forma parte de la contribucidn espanola al proyecto "European

Survey of Plant Parasitic Nematodes", patrocinado por la Funda-

cidn Europea de la Ciencia.

Se intenta también sentar 1 as bases para poster lores

trabajos que sobre este grupo se realicen, poniendo a punto las

técnicas informâticas que permitan la caracterizacidn de las

especies a través de los métodos de taxonomfa numérica. Por

otra parte, se sehala la importancia que présenta el género Ro

tylenchus desde el punto de vista fitopatoldgico, y a que inclu-

ye especies ectoparâsitas, algunas de ellas migrator!as, y se

mi endoparâsitas de plantas de interés agrfcola como la vid,

especies hortfcolas, forestales, etc., en las que pueden eau- - 6 -

sar dahos cuantiosos que, segun estimaciones de la Sociedad

Americana de Nematologia pueden alcanzar perdidas de hasta un

20 % en algunos cult i vos.

Por todo ello, consider amos que este estudio présenta

un interés multiple, tanto desde el punto de vista tedrico,

sentando las bases para el empleo de técnicas de tratamiento

automatico y aportando nuevos datos sobre la nematofauna espa-

hola, como pôr su repercusidn en la vertiente fitopatoldgica,

al posibilitar un mejor control de plagas, basado en un conoci miento mâs correcto de las diferentes especies. PLAN DE TRA8AJ0 Una vez establecidos 1 os objeti vos y el interés tanto del tema de trabajo como del grupo de nematodos elegido, por su especial problematica taxondmica y agrfcola, pas amos a expa- ner nuestro plan de trabajo.

Se ha comenzado por realizar un analisis de todas 1 as

publicaciones que desde uno u otro punto de vista hacen alguia

referencia a 1 os generos Roty1enchus y Orienty lus, agrupand)-

1 as de acuerdo con su tematica: especies descritas y cambits

taxondmicos, sistematica, citas en Espaha, asi como otros es-

tudlos de tipo morfoldgico, bioldgico, biogeografico, etc..

De esta revision de la bibliograffa y de todas las descripcio-

n es que de sus especies se.han realizado, se h an obtenido lîs

bases para profundizar en el conocimiento de estos nematodos,

10 que nos ha permitido obtener una serie de datos que van a

constitu ir el eje de buena parte de los estudios posteriores.

Las dificultades que ha entranado la recopilacidn de los nume-

rosos trabajos publicados sobre el tema, h an si do paliadas en

parte por la posibilidad que se nos brindo de consultar laco-

leccion bibliografica del "Laboratorium voor Nematologie Lanc-

bouwhogeschoo1" de Wageningen (Holanda), asi como la de la "Es

ta ça o Agronomica Nacional" de Ce iras (Portugal).

Paraielamente, se ha realizado el estudio de diferer-

t es poblaciones, resultado de un muestreo al azar, de modo que - 9 -

su estudio nos permitiera adquirir u n a experiencia propi a sobre su morfologfa, facilitandonos la valoracion posterior de los caractères que se vienen utilizando en la determinacion de las

diferentes especies de estos géneros.

A continuacion se descri ben en la Memoria los métodos

de trabajo, en los que pueden distinguirse dos aspectos fonda mentales, u no nematologico y otro de tratamiento automatico

de los datos. Los métodos empleados para la extraccion, fi.ia-

cion, mont aje, etc. de los nematodos han si do seleccionados te-

niendo en cuenta las particularidades morfologicas y biologi-

c as del grupo objeto de nuestro estudio, habiéndose preferido

el "nétodo de extraccion median te f il trac ion, por la movili-

d ad que present an estos nematodos, y la fi.lac ion en glicerina,

al oermitir esta u n a mayor clari dad en la observacion de las

di-erentes estructuras. El material utilizado, correspondiente

a preparaciones y muestras conservadas en formol, se encuentra

deposit ado en la coleccion de Nematologfa del Institute de

FrMfnlogfa y Biologfa Vegetal (C.S.I.C.) de Madrid. El trata

miento automatico de datos, realizado en el Centro de Calcule

de la "FundaçêTo Cal ouste Gulbenkian de Ciência", Oeiras (Portu

gal), gracias a u n a Beca de Intercambio concedida por el Conse-

j 0 Suoerior de Investigaciones Cientfficas, ha consistido en

la îplicacion de cinco tipos de analisi s numéricos diferen-

tes a un total de cuatro matrices de datos distintas, obtenidas

a partir de 1 as poblaciones descritas en la bibliograffa y de

las estudiadas por nosotros. - 10 -

En 'os resultaidos se présenta la revision de las diferen:eî citas de los génieros Rotyl enchus y Orientylus de los an técédentes, indicando su posicion sistematica, la relac ion de especies que i ne 1 u^yen y su distribucion mundial. A continua- c on se facilitan Iras, resultados del estudio nematologico, a- compaïado ce las descri pci ones detailadas de las especies encon- trajas. Finalmente, se exponen los resultados obtenidos en los anal is is numéricos, domdie se distinguer très grupos, uno de las poblaciones tomiadais de la bibliograffa, un segundo sobre las Dob lac i ones estucdi adas por nosotros y, por ultimo, un tercero en el que se incliuyen todas ellas.

En 'a discus i 6'n se analiza en primer lugar la posi- c du sistematica del género Rotylenchus, seguido de una revi- sdn de los antecedent tes y del anal i si s de los métodos u tili- zados, para exponer ai continuacion un estudio comparât ivo en tre los resultados memato1dgicos y numéricos de las poblacio nes estudiadas por noso'tros de una parte, y de las descritas en là bibliograffa por o t r a. También se discute la significa- c dn de les caractères que se vienen utilizando en la identifi-

CiC'di de 'as especies, a fin de determinar cuâles son los que aportar mayor informiacidn sobre las mismas.

En la ultima parte se recoge la bibliograffa consulta- dc, isf como un a pen dice que incluye las i 1ustraciones, con u r a serie ce figuras aclaratorias de los procesos automaticos reaizados, mapas de distribucidn mundial de las especies de - 11 -

les géneros estudiados, dibujos diagnosticos de las dos nue- vcs especies encontradas y figuras correspondientes a los ana- l's s numéricos: dendrogramas, redes de conexion minima y provecciones de vectores propi os, coordenadas y componentes principales. Finalimente se incluye una doble hoja en la que se de lî relac ion de todas las poblaciones estudiadas, acompaha- dcs del numéro c on el que figuran en todos los analisi s numé- r cos, con el fin de fa c ilita r su identificacion rapida en

1 es mi snos . I. ANTECEDENTES . 13 -

En este capitulo se recoge un analisi s de todos aquellos trabajos que hacen alguna referencia al género Rotylen chus , desde su primera cita, debida a FILIPJEV (1934), hast a el memento actual, representado por la descripcion de la nueva especie R. microstriatus Siddiqi et Corbett, 1983.

La bibliograffa revisada ha si do pues numerosa, y los trabajos consult ados present an una orientacion muy diversa, en- contrandose entre ellos estudios de enfoque taxonomico, nomen- clatorial, morfoldgico, bioldgico, ecoldgico, de control, etc.. Este hecho nos ha llevado a dividir este capftulo en cua tro apart ados, que consideramos fundamental es, tanto por su contenido como por su orden de presentacidn, para una mejor com- prensidn del plante amiento de nuestro estudio. Asf, en primer lugar, se hace una exposicidn de la serie de cambios taxond- micûs y de nom en datura que ha sufridc el- génère Rotyl enchus, para dar con ello una idea de los problemas que présenta su posicidn sistematica, 1o que se refieja igualmente en el s i- gui ente apart ado donde se recogen las diferentes especies que han si do inclufdas unas veces y exclufdas otras en el mismo.

Posteriormente se indican las citas que se h an realizado en Es paha sobre el género y por ultimo se hace un resumen de los diferentes estudios que sobre el mismo se han realizado. - 14 -

I.l. : 1 gérero Rot/lenchus.

El g é n e r p Rotylencius aparece por primera vez en FI -

(1S3^). qjien, s i n incluir ninguoa descripcion, consi der} Tylerclus rpbustus De Man, 1880 especie tipo. Posterior- mente, FILIPJEV (19 35 a) hace un a descripcion del género Roty-

1 enchus, cardo cpmo espe’ce tipo R. robustu s (De Man, 1880) omp. n, y ccmo ot^as especes las si gui entes nuevas combinaciones: R.cbtusus (Bastiar, 1 865 ), R. multicinctus (Cobb, 1893 ),

R. africarus (Micpletzky, 1916) y R. bradys (Steiner _et Le Hew,

1933), to cas elles con région caudal corta y muy redondeada en li hembra, j P.. similis (Cobb, 1893 ) y R. apapillatus (Imamura,

1931) con region caudal arga, considerandol a s posibles sino- n i mes.

FILIPJEV (193 6 b ], an su estudio "U eber freilebende u id pflanzenparasicische Cattungen der Tylenchinen", cita "R oty-

1 enchjs gen, n., cpn escfago afelencoide y dos ovarios", dando cam) especie t'po "Tyl enchus robustus De Man, 1880" y como ocres especies: R. OPtusus, R. multicinctus, R. africanus y pro- biblenente R. apapillatus.

STEINER describe des njevas especies, em 1 93 7 R. blabe- r us iopre Ci cscoree sp., que considéra proxim.a a R . bradys; y en 1 9 33 R. brach/u"us que encuentra asociada a Lycoris radiata

Herb. - 15 -

T. GOODEY (1940) estàblece los sigulentes sindnimos:

T/lenchus multicinctus Cobb, 1893 de Anguillulina multicincta

(CoDb, 1893); Rotylenchus robustus (De Man, 1876) F ilip jev,

1935 de Anguillulina robusta (De Man, 1876) Goodey, 1932; y R.

0 31j su s (Basti an, 1865) Filipjev, 1936 de Anguillulina obtusa

(Basti an, 1865 ) Goodey, 1932.

0 ^ FILIPJEV y SCHUURMANS STEKHOVEN (1941) hacen la des- 0 ^ c'ipcidn de las diez especies si gui entes: R. robustus (De Man, pF" vO 1875), R. multicinctus (Cobb, 1893), R. pararobustus (Schuur- O ^ mins Stekhoven e_t Teunissen, 1939), R. obtusus (B asti an, 1865),

R ■ blaberus Steiner, 1937, R. bradys (Steiner _et Le Hew, 1933,

R. africanus (Micoletzky, 1915), R. similis (Cobb, 1893), R.

0 ryz ae (van Breda de Haan, 1902 ) y R. apapillatus (Imamura,

1931), siendo R. oryzae y R. pararobustus dos nuevas combina-

cioies. No recogen R. brachyurus Steiner, 1938, cuya publica-

c di tampoco aparece en la bibliograffa, al igual que sucede

con T. GOODEY (1940), por 1o que mantienen R. multicinctus,

R , ootusus y R. robustus s i n h a c e r n i n g u n a a 1u s i o n a d i c h o

au tor.

THORNE ( 1949 ) describe R. robustus (De Man, 1880) F i-

1 pje/, 1934 como especie tipo del género, hace R. similis

(Cobb, 1893) Filipjev, 1936 sindnimo de Radopholus similis y

R. oryzae (van Breda de Haan, 1902) Filipjev _et Schuurmans Stek

hoven, 1941 de Radopholus oryz ae, indicando que Tylenchus apapi-

1' a:u s Imamura, 1931 es probablemente un sindnimo de esta u1 - - 16 -

tima. Igualmente sehala que Tylenchus obtusus Bastian, 1865 parece pertenecer al género Pr atylenchus.

T. GOODEY (1951) describe como especie tipo R. robus tus (De Man, 1880) Filipjev, 1934, dando como sindnimos Tylen chus robustus De Man, 1876/1880 y Anguillulina robusta (De Man,

1876' Goodey, 1932 , y como otras especies R. b1aberus Steiner,

1 9 3 7, R. bradys (Steiner Le Hew, 1933) Filipjev, 1936, R. erythrinae (Zimmermann, 1904) comb, n., R. multicinctus (Cobb,

1893^ Filipjev, 1936 y R. pararobustus (Schuurmans Stekhoven _e_t

Teunissen, 1938) Filipjev _e_t Schuurmans Stekhoven, 1941. En la bibliograffa no recoge a FILIPJEV y SCHUURMANS STEKHOVEN

(1941) ni a STEINER (1938), por 1o que omite las especies R. africanus y R. brachyurus. Por otro lado incluye, aunque con du- das, a Tylenchus obtusus (Bastian, 1865) y Anguillulina obtusa

(Bastian, 1865) Goodey, 1932 y 1940 en Pratylenchus obtusus

(Bastian, 1865) comb. n., y a Tylenchus apapillatus Imamura,

1931 en Radopholus oryz ae (van Breda de Haan, 1902 ) Thorne,

1 949.

J. B. GOODEY (1952) describe una nueva especie, R. cohen i , en rafces de Hippeastrum sp., y la incluye en el grupo de especies de Rotylenchus con fasmidios infundibuliformes o es- feroidales, grupo que incluye ademas las especies: R. blaberus

R. brachyurus y R. bradys. Por otra parte, reune en el grupo de especies con fasmidios pequehos a R. robustus, R. erythr i n ae y R. multicinctus. No incluye en ninguno de los dos grupos R.pa- - 17 -

r arobustus, especie a laque no hace ninguna referencia.

LORDELLO (1955) describe R. melancholichus, una nueva especie que encuentra asociada con rafces de gramfneas, y cu ya hembra se asemeja a las de R. erythrinae y Helicotylenchus nannus.

CARVALHO ( 1956 ) describe una nueva especie R. i pero i- guensis, proxima a H. nannus, habiendo encontrado ambas en suelo de jardfn en Sa'o Paulo (Brasil).

GOLDEN (1956) describe R. buxophilus, nueva especie encontrada en Buxus sempervirens v a r. suffruticos a L. (boj), y transfiere R. erythrinae (Zimmermann, 1904) Goodey, 1951 (pro parte) y R. multicinctus (Cobb, 1893) Filipjev, 1936 al género

Heli cotyl enchus. Ademas incluye una clave de géneros y espe cies de "nematodos en espiral", en la que d a como especies va lidas del género Rotylenchus: R. me 1ancholi eus, R. robustus,

R. buxophilus, R, c h ris tie i, R. brachyurus, R. coheni, R. bra dys y R. b1aberus, y sehala mas adelante como especies dudo- sas: R. pararobustus y R. afric anus.

GOLDEN y TAYLOR (1956) descri ben la nueva especie R. christiei asociada a Cynodon dactyl on (L.) Pers., que se publica en julio en el "Proceedings of the Helminthological Society of Washington" y que y a habfa recogido GOLDEN (1956) en su es tudio sobre la taxonomfa de los nematodos en espiral, public a - 18 -

do en junio del mismo aho en el Boleti'n de la "Agricultural Ex periment Station" de la Universidad de Maryland.

LORDELLO (1957)- en su nota sobre los nematodos parasitos de Anthurium andraeanum Lind., describe una nueva especie,

R . boock i y sehala que esta muy proxima a R. brachyurus Stei ner, 1938.

LOOP y OOSTENBRINK (1958) dan como especie tipo R. ro bustus (De Man, 1876 apud De Man, 1880) Filipjev, 1936 con los si gui entes sindnimos: Tylenchus robustus De Man, 1876 ; Tylen chus robustus apud De Man, 1880, 1884, 1917; Anguillulina robus- t a (/ apud Goodey, 1932 ; Rotyl enchus robustus cT apud Filipjev _et

Schuurmans Stekhoven, 1941: Hoplolaimus uniformis Thorne, 1949;

Rotyl enchus robustus apud Andrassy, 1952 y Hoplolaimus u n i f o_r - mis apud Oostenbrink, 1954. En la misma publicacidn dan el nue-

V 0 nombre de R. g o o d e y i para Angui11u1i n a robusta ^ apud Goodey

1932, Anguillulina robusta apud Goodey, 1940, Rotylenchus robustus ç apud Filipjev et Schuurmans Stekhoven,194^, Rotylenchus - r — ------robustus apud Goodey, 1951 y Rotylenchus robustus apud Golden,

1956.

ANDRASSY (1958 a), en su estudio sobre los géneros de la subfamilia Hoplolaiminae, concuerda con LOOF y OOSTENBRINK

(1958) en 1o que respecta a la especie tipo, R. robustus (D e

Man, 1876) Filipjev, 1936, un ica especie del género que reconoce, y a que transfiere R. buxophilus, R. godeyi y R. pararo- - 19 -

b us tus a Gottholdstei neri a gen. n.; R. afri canus, R. iperoiguen- s i s y R. me 1ancholi eus al género Heli cotylenchus; y R. blabe rus, R. boock i , R. brachyurus, R. bradys, R. christiei y R. co heni a Scutel1onema gen. n.

CARVALHO (1958) describe R. elisensis, nueva especie asociada a rafces de soja, cuya region caudal, tanto en la hembra como en el macho, se asemeja a la de Paratylenchus ma- crophal1 us (De Man, 1880) Goodey, 1934.

SAUER (1958) describe R. gracilidens, nueva especie encontrada en suelo alrededor de rafces de Olearia lepidophylla

Benth. en Australi a.

CARVALHO (1959), siguiendo la clasificacion de ANDRAS

SY ( 1958 a), transfiere R. eli sens i s al género H e1icotylen chus.

PERRY, DARLING y THORNE ( 1959 ) sehalan que .R. pararobus- t us (Schuurmans Stekhoven e_t Teunissen, 1938) Filipjev _et

Schuurmans Stekhoven, 1941 y R. africanus (Micoletzky, 1915) Fi lipjev _et Schuurmans Stekhoven, 1941 deben permanecer en una posicion de status indeterminado hasta que se obtengan descripciones mas adecuadas de especfmenes procedentes de la locali- d ad tipo.

GOODEY y SEINHORST (1960) proponen un neotipo para Roty- - 20 -

1enchus robustus, dan una nueva défi nie ion de R. g o o d e y i Loof e t Oostenbrink, 1958 y discrepan con los autores de esta espe cie en 10 que respecta a que R. robustus (De Man, 1876) y Hoplo laimus uniformis Thorne, 1949 sean la misma especie, por 1o que vuelven a considerar a esta ultima como especie valida.

PERRY (1960), en su estudio de la subfamilia Hoplolaimi- nae, reconoce solamente dos especies dentro del género Rotylen chus: R. robustus y R. gracilidens. ,

SHER (1961), en su revision de la Subfamilia Hoplolai - minae, d a como especie tipo del género Rotylenchus R. robustus

(De Man, 1876) Filipjev, 1936 y como especies validas las seis si gui entes: R. uniformis (Thorne, 1949) Loof _et Oostenbrink,

1 958 , que se trata s i n duda de un error, ya que LOOF y OOSTEN

BRINK (1958) sinonimizan Hoplolaimus uniformis con R. robustus;

R . buxophi1us Golden, 1956 , R. gracilidens (Sauer, 1958 ) Sauer,

1958, R. quartus (Andrassy, 1958) comb, n., R. pumi1 us (Perry,

1 959 )comb. n. y R. g n p d e y i Loof Oostenbrink, 1 958. y como species inquirenda: R. pararobustus (Schuurmans Stekhoven _e_t

Teunissen, 1938) Filipjev _et Schuurmans Stekhoven, 1941.

BAKER ( 1962 ), en su relac ion de los nematodos de la s u- perfamilia Tylencho i dea, solamente recoge:R. robustus, R. e li sensis y R. gracilidens , 1o que se explica al observar la b i- bliografia citada, en la que no figuran los trabajos de CARVAL

HO (1959), y SHER (1961). - 21 -

COLBRAN .( 1962 ) describe una nueva especie, R. brev i- caudatus, e n Citrus auranti urn L. de Queensland (Australia).

J.B. GOODEY (1963), al revisar la obra de T. GOODEY

(1951) ; "Soil and Freshwater Nematodes", da como especie tipo del género R. robustus (De Man, 1876) Filipjev, 1936; describe

R. uniformis (Thorne, 1949) Sher, 1961 syn. Hoplolaimus uniformis Thorne, 1949; y cita como otras especies: R. buxoph il us Gol den, 1956 , R. goodeyi Loof _et Oostenbrink, 1958, R. g ra c ilidens

(Sauer, 1958 ) Sauer, 1958 , R. pumilus (Perry, 1959 ) Sher, 1961 y R. quartus (Andrassy, 1958) Sher, 1961.

JAIRAJPURI ( 1964 ) describe R. sheri , una nueva especie que encuentra en suelo alrededor de rafces de Cedrus libani

V a r. deodor at a en Simla (India), sehalando que esta muy proxima a R. buxophilus.

SIDDIQI (1964) describe una nueva especie, R. eximius, en suelo y rafces de Prunus amigdalus Batsch (almendro) en Tu nic i a, e indica que esta proxima a R. uniformis (Thorne,

1 949 ) Loof _e_t Oostenbrink, 1958. »

SIDDIQI y HUSAIN (1964) describen R. oriental is encontrada en suelo y rafces de Citrus limon (L.) Burm., en el Esta- d0 de Assam (India), sehalando que es diferente a las restantes especies del género por tener el o rificio de la glandula eso- fagica dorsal situado a una distancia del estilete mayor que - 22 -

la mi tad de la longitud de este, y la rama reproductora poste rior considerablemente reducida.

SHER (1965), en su révision del género Rotylenchus, define y redescribe la especie tipo R. robustus, en la que in cluye a R. uniformis. Asimismo, hace una redescripcion de las seis especies si gui entes: R. buxophilus Golden, 1956, de la que d a como nueva sinonimia R. s h e r i Jairajpuri, 1964; R . g ra cili dens (Sauer, 1958) Sauer, 1958; R. quartus (Andrassy, 1958)

Sher, 1961; R. pumilus (Perry, 1959) Sher, 1961; R. goodeyi

Loof _et Oostenbrink, 1958 ; y R. brevi caudatus Col bran, 1962. Da un nombre nuevo, R. f a l l orobustus, para Anguillulina robusta apud T. Goodey, 1932 (pro parte), Rotylenchus robustus apud

Filipjev Scuurmans Stekhoven, 1941 (pro parte) y apud J.B.

Goodey _et Seinhorst, 1960. Finalmente, describe seis nuevas es pecies: R . rugatocuti culatus y R. incul tus, proximas a R. gra cilidens; R. unisexus, proxima a R. incul tus; R. caudaphasmidius, proxima a R. quartus; R. cal vus, proxima a R. brevicau datus ; y R. breviglans, proxima a R. buxophilus. No recoge R. eximius Siddiqi, 1964 y R. orient al is Siddiqi _et Husain, 1964 , cuyas publicaciones no aparec^en en la bibliograffa.

HUSAIN y KHAN (1967) describen R. helieus, nueva espe cie que encuentran en suelo alrededor de rafces de P s i d i um gua- java L., sehalando que esta proxima a R. quartus, R. buxophi lus, R. unisexus, R. incul tus y R. or i entaii s. - 23 -

MAMIYA ( 1968 ) describe R. pi ni de suelo alrededor de rafces de Pi nus dens if lor a Sieb. _e_^ Zucc. en Japon, e indica que esta nueva especie esta proxima a R. breviplans.

SZCZYGIEL (1968) describe una nueva especie, R. agne-

t i s , en suelo alrededor de rafces de fresa en diverses locali-

dades de Polonia, indicando que esta proxima a R. buxophilus

y a R. helieus.

BELLO (1969) cita dos nuevas especies: R. a 1v ar ado i s p.

n. y R. jimenezi sp. n. en las I

cribe, por 1 0 que son actualmente nomine nuda.

RASHID y HUSAIN ( 1972 ) describen R. prun i en suelo al

rededor de rafces de Prunus bukharensis en e1 Distrito de N a i-

ni tel (India), y sehalan que esta nueva especie esta proxima

a R. robustus, R. eximius, y R. f a l l orobustus .

SCOGNAMIGLIO y TALAME ( 1972 ) describen R. 1 eurent inus,

nueva especie que encuentran en terreno arenoso del sotobosque

d e Pi nus halepens i s L., proximo a rafces de hierbas esponta-

neas y palustres, en Pescara (Ita lia ), e indican que esta pro

xima a R. rugatocuticulatus y a R. gracilidens.

JAIRAJPURI y BAQRI (1973), en su primera publicacidn

sobre los nematodos de zonas de g ran altitud de la India, des

criben una nueva especie, R. i ndorobustus, en suelo de helechos - 24 -

y gramineas sin identificar, y la consideran proxima a R. f a-

1 1 orobustus.

RASHID y KHAN (1974) describen R. c itri en suelo alrede dor de rafces de Citrus aurantium, sehalando que esta nueva es pecie se encuentra proxima a R. quartus y R. helieus.

VAN DEN BERG y HEYNS (1974), dedican su tercera publica- ci6n sobre los hoplolaiminos de Africa del Sur al género Roty-

1 enchus, del que describen siete nuevas especies: R. abnormecau- d a:u s, proxima a R. unisexus; R . acuspi caudatus, diferente a todas las especies del género porque los anillos del margen posterior de la bursa del macho terminan en flecos; R. bialaebursus, diferente a las demas especies porque el extremo de la

region caudal del macho présenta dos puntas y los margenes posteroventral es de la bursa se proyectan mas alla del final de la region caudal; R. capensis, proxima a R. c aud aph asm i- dius, R. pumi 1 us y R. quartus; R. catharinae, algo proxima a

R. caoensis, R. pi n i, R. quartus y R . robustus; R . triannula-

tus, con la region labial bien separada, y R. usitatus. En el mismo trabajo dan ademas descripciones de ejemplares sudafri-

canos pertenecientes a las especies: R . brevi caudatus , R . i n-

cu'tus, R. rugatocuticulatus y R. unisexus, asf como unas cla

ves para las once especies sudafricanas del género Rotylen

chus.

BELLO et a l. (1976 ) describen R. eximius de las I si as - 25 -

Canari as y Aimer fa, dando por primera vez la descripcion del macho.

EROSHENKO ( 1976 ) describe una nueva especie, R. al pi- nus, en la rizosfera de Vaccinium uliqinosum L. y Arctous alpi- n a (L.) N. en Kamchatka (URSS), indicando que esta proxima a

R. oriental is.

GERAERT (1976) transfiere R. oriental is al género He-

1i cotylenchus, basandose para ello en que la estructura y el solapamiento de las glandulas esofagicas dorsales correspon- d en mas a las descritas en este género que en Roty1enchus.

MULK y JAIRAJPURI (1976), en su estudio sobre los nema todos de las- leguminosas en India, describen dos nuevas espe cies: R. s i d d i q i i , proxima a R. cal vus; y R . secondus , pro xima a R. pumilus y a R. s id d iq ii.

VAN D E N ■ ü E R G ( 1976 ) describe R. d e v o n e n s i s , nueva espe cie que encuentra en suelo alrededor de Zea mays en Devon (Sud-

âfrica), y sehala que esta muy proxima a R. brevicaudatus.

Incluye también la descripcion de una hembra de R. f a l l orobus tus, encontrada en la provincia de El Cabo.

JAIRAJPURI y SIDDIQI (1977) escinden el género Roty-

1 enchus y crean dos nuevos géneros, Orientylus y Calvatylus que incluyen dentro de la subfamilia Rotylenchoidinae White 2 6

head, 1958, dando como respectivas especies tipo; 0. or i entali s

(Siddiqi ^ Husain, 1964) comb. n. syn. Rotylenchus oriental is

Siddiqi _e_t Husain, 1964; y C. calvus (Sher, 1965) comb. n. syn.

Rotylenchus calvus Sher, 1965.

BOAG (1978), en su descripcion de los hoplolaimidos de las Islas Britanicas, considéra que son treinta y très las especies validas del género Rotylenchus que se han descri to.

KRALL (1978), en su estudio de la familia Hoplolaimi- dae, atribuye treinta y dos especies validas al género R oty-

1enchus, entre las que no incluye R. secondus n i R . siddiqii , ambas descritas por MULK y JAIRAJPURI (1976), cuyo trabajo no recoge en la bibliograffa.

VAN DEN BERG (1978) describe cinco elemplares sudafri- canos pertenecientes a la especie R. caudaphasmidius Sher,

1965, sehalando que uni camente se diferencian de la descrip cion original pur près entar la region labial conica y con seis a n illos, en lugar de semiesférica y con cinco a n illos.

JAIRAJPURI y SIDDIQI (1979) transfieren R. c i t r i , R. he-

1i c u s , R. secondus y R. siddiqii al género Orientylus J a i r a j p u- ri e_t Siddiqi, 1977 , del que ademas describen dos nuevas espe cies: 0. qeraerti y 0. v aru s ; y hacen también la descripcion de una nueva especie del género Calvatylus Jairajpuri £_t Siddi qi, 1977: C . hered i eus. - 27 -

SIDDIQI y PINOCHET (1979) describen una nueva especie,

R. phaliurus, en suelo alrededor de Dioscorea sp. (name) en Cos ta Rica, y la comparan con cinco paratipos de R. caudaphasmi dius.

SULTAN y JAIRAJPURI (1979), en la novena publicacidn sobre los nematodos de zonas de gran altitud de la India, des criben dos nuevas especies del género Rotylenchus: R. d a 1hou-

siensis,, proxima a R. quartus, R. f a l l orobustus, R. c itri y R.

h e1i c u s ; y R. neorobustus proxima a R. i ndorobustus , R . fa llo -

robustus , R . agnetis y R . pruni.

ANTONIOU (1980) describe R. cypriensis, una nueva espe

cie que encuentra en suelo alrededor de rafces de Vitis vinife-

ra L. en seis localidades de Chipre, y la compara con R. brevi-

g1 an s y R. buxophilus.

FERRAZ (1980)describe una nueva especie, R. nexus, en

suelo de bnsnue del Est ado de Minas Gerais (Brasil), y sehala

que présenta algunos caractères comunes con nematodos de los

géneros Rotylenchus, Orientylus y Calvatylus. En este mismo

trabajo, sinonimiza el género Calvatylu s Jairajpuri Siddi

qi, 1977 con Rotylenchus Filipjev, 1936 y por tanto, C. calvus

(Sher, 1965) Jairajpuri e_t Siddiqi, 1977 vuelve a s er R. calvus

Sher, 1965 y C. hered i eus Jairajpuri _e_t Siddiqi, 19 79 pas a a

s er R. heredi eus (Jairajpuri et Siddiqi, 1979) Ferraz, 1980. - 28 -

KANKINA y TEBEN'KOVA (1980) describen, en v i d de Tadzhi- kis:an, dos nuevas especies: R. glabratus, que comparan con R. abnormecaudatus y R. pumilus; y R. ivanovae que comparan con R. robustus y R. f a l l orobustus . Incluyen también descri pci ones de ejemplares pertenecientes a las especies R . al pi nus Eroshenko,

1976 y R. pumilus (Perry, 1959) Sher, 1961.

SULTAN (1980) hace una redescripcion de R. oriental is

Siddiqi e_t Husain, 1964, indicando que la descripcion original es inadecuada, aunque no sehala cuâles son las diferencias en tre sus ejemplares y los descritos por SIDDIQI y HUSAIN (1964),

BALDWIN y BELL (1981) crean el género Pararotylenchus y la subfamilia Pararotylenchinae para incluir a todos los ho

pl olaimi nos en los que las glandulas esofagicas forman un

bulbo basai similar al de la familia Tylenchorhynchidae; y des

criben seis nuevas especies del género Pararotylenchus, al que

transfieren Rotylenchus p i n i Mamiya, 1968.

BOAG y HOOPER (1981) describen una nueva especie del

género Rotylenchus, R. ouensensis, pero en la prueba de impren-

t a ahaden una nota en la que la transfieren al género Pararoty-

1 enchus Baldwin e_t Bell, 1981.

SIDDIQI y CORBETT (1983) describen una nueva especie,

R. microstriatus, en Musa sp. y Citrus reticulata en Bolivia,

sehalando que esta proxima a R. c apens i s y R. catharinae. - 29

1.2. Posicion Sistematica del género Rotylenchus.

Son muchos los cambios que a 1o largo del tiempo se han producido en 1o que se refiere a la posicion sistematica de los nematodos en general, y del género Rotylenchus en particu lar. Tras una revision exhaustiva de los trabajos realizados sobre este tema, hemos hecho una seleccion de aquéllos que nos parecen mas significativos a la hora de establecer una po sicion sistematica determinada para el género Rotylenchus y que pasamos a exponer a continuacion.

FILIPJEV (1934), en su clasificacion de los nematodos libres y su relacion con los parasitos, cita por primera vez el género Rotylenchus, dândolo como "Rotylenchus n. g. (type

T. robustus de Man, 1880)", pero s i n incluir ninguna descrip cion. La posicion sistematica que le asigna es la siguien- t e :

Clase Nematoda

Orden

Familia Tylenchidae

Subfamilia Tylenchinae

Dentro de la subfamilia Tylenchinae incluye ademas otros 21 géneros, dos de ellos dudosos:"? Macroposthon i a de

Man, 1880" y "? Myenchus Schuberg and Schroeder, 1904".

El mismo autor (1936 a), en su clasificacion de la sub familia Tyl ench inae, describe 18 géneros, entre los que indu- 30

ye Rotylenchus F ilip je v ,1934". Seguidamente, FILIPJEV (1936 b), en su "Ueber freilebende und pflanzenparasitische Gattungen der

Tylenchinen", incluye una clave para la determinacion de los generos de la subfamilia Tylench inae, donde cita en primer lu gar Rotylenchus gen. n.

Para FILIPJEV y SCHUURMANS STEKHOVEN (1941) la posicidn sistematica de Rotylenchus es la siguiente:

Phylum Vermes

Subphylum Aschelmi nthes

Clase N ematoda

Orden Anguillulata

Suborden Angui1luloidea

Familia Tylench i dae

Subfamilia Tylenchinae

En la subfamilia Tylenchinae incluyen 17 generos, entre los que figura Rotylenchus Filipjev, 1934.

THORNE (1949) crca el order. Tylenchida (Nematoda, P h as- m i d i a ), dando como superfamilia tipo Tyl encho i dea Chitwood _e_t

Chitwood, 1937, en la que incluye la familia Tylenchidae F ilip jev, 1934, con tres subfami lias: Pratylench i n ae, Tylenchinae y

Hoplolaiminae, reuniendo esta ultima tres géneros solamente:

Hoplolaimus Daday,1905, Rotylenchus Filipjev, 1934 y Helicoty-

1enchus Steiner, 1945.

CHITWOOD y CHITWOOD (1950) crean el suborden Tylenchina. - 31 -

Para T. GOODEY (1951) la posicion sistematica de

Rotylenchus es como sigue:

Subreino Vermes -

Phylum Aschelmintha

Clase Nematoda

Subcl a s e P h a s m i d i a Chitwood _et Chitwood, 1933

Orden Tylench i d a Thorne, 1949

Superfamilia T y 1 encho idea Chitwood e_t Chitwood, 1937

Familia Tylenchidae Filipjev, 19 34

Subfamilia Hoplolaiminae Filipjev, 193 4

En la subfamilia Hoplolaiminae solo se incluyen dos géneros: Hoplolaimus von Daday, 1905 y Rotylenchus Filipjev,

1934, ya que la unica especie del género Helicotylenchus des cri ta hasta entonces, H. nannus, la situa cono sindnimo dudo- s 0 de R. erythrinae.

ANDRASSY (1958 a) incluye dentro de la subfamilia Hoplo-

1 a i m1n a e (que atribuye a Filipjev 193 6 en lunar de a F ilip jev, 1934) el "Rotylenchus Gattunqsgruppe" que comprende tres géneros: Rotylenchus Filipjev, 1936, Helicotylenchus Steiner,

194 5 y Gottholdsteineria gen. n., y el "Hoplolaimus Gattungs- gruppe" con dos: Hoplolaimus Daday, 1905 y Scutel1onema gen. n.

CHITWOOD (1958 a) propone la familia Hoplolaimidae Wie- ser, 1953, en la que incluye las subfamilias: Hoplolaiminae, He- teroderinae, N acobb i nae y Pr atylenchinae. - 32 -

CHITWOOD ■ ( 1958 b) propone el phylum Nemata y la clase

Secernentea von Linstow, 1905.

PERRY, DARLING y THORNE ( 1959 ) hacen el genero Got- tholdsteineria Andrassy, 1958 sinonimo de Helicotylenchus

Steiner, 1945, por 1o que PERRY (1960) incluye dentro de la subfamilia Hoplolaiminae Filipjev, 1936 unicamente cuatro gêner os: Rotylenchus, Hellcotylenchus , Hoplolaimus y Scute-

11onema.

SKARBILOVICH (1959) propone la reclasificacidn del orden Tylenchida Thorne, 1949 como sigue:

Suborden Tyl enchat a Chitwood _e_t Chitwood, 1950

Familia Tylenchidae Micoletzky, 1922

Subfamilia Hoplolaiminae

Dentro de la subfamilia Hoplolaiminae incluye tres gé nères: Hoplolaimus, Rotylenchus y Helicotylenchus.

SHFR (1961), sigiiiendo a CHITWOOD ( 1958 a), incluye dentro de Hoplolaimidae Wieser, 1953 la subfamilia Hoplolaimi- nae Filipjev, 1934, en la que reune cuatro generos: Heli coty-

1enchus , Rotylenchus, Scute 11onema y Hoplolaimus, y hace el gé- nero Gottholdsteineria Andrassy, 1958 sinonimo de Rotylenchus

Filipjev, 1936.

Para THORNE (1961) la posicidn sistematica de Roty-

1enchus es la siguiente: - 33 -

Phylum Nemata

Clase Secernentea (von Linstow, 1905)

Dougherty, 1958

Orden .Tylench i da Thorne, 1949

Su perfamilia Tylenchoidea Chitwood _et Chitwood, 1937

Familia Tylenchidae Oerley, 1880

Subfamilia Hoplolaiminae Filipjev, 1934

Dentro de la subfamilia Hoplolaiminae incluye cuatro generos: Hoplolaimus, Daday, 1905, Scutellonema Andrassy,

19 5 8, Rotylenchus Filipjev, 1936 y Helicotylenchus Steiner,

1945 .

BAKER (1962) situa también al género Rotylenchus den tro de la subfamilia Hoplolaiminae Filipjev, 1934, pero no si gue a CHITWOOD ( 1958 a), y a que la incluye dentro de la familia

Tylenchidae que atribuye a Oerley, 1880, y esta en la superfamilia Tylenchoidea (Oerley, 1880) Chitwood Chitwood, 1937.

E n Hoplolaiminae incluye ademas Hoplolaimus, Helicotylenchus ,

S eu te 11onema y Spyrotylenchus.

Para J.B. GOODEY (1963), al revisar a T. GOODEY (1951), la posicidn sistematica de Rotylenchus es la si qui ente:

Clase Nematod a

Orden Tylenchida (Filipjev, 1934) Thorne,

1949

Superfami1i a Tylenchoidea (Filipjev, 1934) Chitwood

et Chitwood, 1937 - 34 -

Familia Hoplolaimidae Filipjev, 1934) Wieser,

1953

Subfamilia Hoplolaiminae Filipjev, 1934

En Hoplolaiminae incluye los mismos géneros que SHER

(1961), quién habfa sinonimizado Spyrotyl enchus Lordel 1 o _e_t.

Cesnik, 1958 con Rotyl enchul us Linford e_t Oliveira, 1940.

GERAERT (1966) incluye la familia Hoplolaimidae (F ilip jev, 1934) Wieser, 1953 dentro de la superfamilia Tylenchoidea

(Filipjev, 1934) Chitwood e_t Chitwood, 1937, para la que, junto a la superfamilia Criconemato i dea (Taylor, 1936 ) grad, n., esta- blece e 1 suborden T.ylenchina (Filipjev, 1934 ) grad. n., dentro del orden Tylenchida (Filipjev, 1934) Thorne, 1949.

ALLEN y SHER (1967) rechazan la propuesta de GERAERT

(1966) y no consider an e 1 suborden T.ylenchina (Chitwood e_^ Chit wood, 1950) Geraert, 1966, dando para e1 género Rotylenchus, que atribuye a Filipjev, 1934, la clasificacidn siguiente:

Orden Tylenchida Thorne, 1949

Superfami lia T y 1 encho idea Chitwood _e_t Chitwood,1937

Familia Tylenchidae Oerley, 1880 * Subfamilia Hoplolaiminae Filipjev, 1934

En Hoplolaiminae incluyen ademas Hoplolaimus Daday,

1905, Helicotylenchus Steiner, 1945, Scutel1onema Andrassy,

1 958 , Pelt amigratus Sher, 1963 y Aorolaimus Sher, 1963.

PARAMONOV (1967), en su revision crftica de 1 subor- - 35 -

den Tylenchina, propone Tas siguientes categorfas:

Orden Tylenchida Thorne, 1949

Suborden Tylenchina (Filipjev, 1934)

Superfamilia Hoplolaimoidea (F ilip je v,1934) superf. n.

Tribu Hoplolaimini grad, n.

Familia Hoplolaimidae (Filipjev, 1934) Wieser,

1953

Subfamilia Hoplolaiminae Filipjev, 19 34

PARAMONOV (1968) considéra la posicidn sistematica de

Rotylenchus como sigue:

Clase Nematoda

Subclase Secernentea (von Linstow, 1905) Dougher

ty ,1958 syn. Phasmidia Chit

wood e_l Chitwood, 1937

Orden Tylenchida Thorne, 1949

Superfamilia Tylenchoidea Chitwood _e_t Chitwood, 1937

Familia Hoplolaimidae (Filipjev, 1941) Wieser,

'9531

Subfamilia Hoplolaiminae Filipjev, 1941

En Hoplolaiminae incluye ademas de Rotylenchus F ilip

jev, 1934 otros diez generos.

GOLDEN (1971) hace Hoplolaimoidea (Filipjev, 1934) Para- monov, 1967 pro parte nueva sinonimi a del suborden Tylenchina

(Oerley, 1880) Geraert, 1966, crea una nueva subfamilia: Roty-

1ench i n ae, con la misma diagnosis que Hoplolaiminae, a excep- - 36 -

cion del tamaho de los fasmidios: pequenos en Rotylenchinae

(generos Rotylenchus y Heli cotylenchus) y grandes (scutellae) en Hoplolaiminae (generos Hoplolaimus, Aorolaimus, Scutel1one- m a y Pelt amigratus), siendo las categorfas super.i ores las si gui entes: familia Hoplolaimidae (Filipjev, 1934) Wieser, 1953; superfamilia Tylenchoidea (Orley, 1880) Chitwood _et Chitwood,

1937; suborden Tylenchina (Orley, 1880) Geraert, 1966; y orden

T y 1ench i da Thorne, 1949 , Secernentea, Nematoda.

SIDDIQI (1971), en su estudio sobre el valor de la estructura del esdfago en la clasificacidn de la superfamilia

Tylenchoidea, hace Hoplolaimoidea (Filipjev, 1934) Paramonov,

1 967 sindnimo de Tylenchoi dea, y propone:

Superfamilia Tylencho idea (Orley, 1880) Chitwood

et Chi twood, 1937

Familia Hoplolaimidae (Filipjev, 1934)

Wieser, 1953

Subfamilia Hoplolaiminae Filipjev, 1934

Qpntro dp Hoplolaiminae incluye los generos: Hoololai mus, Aorolaimus, Rotylenchus, Scutellonema y Pelt amigratus, todos ellos con glandulas esofagicas que se extienden dorsal o dorsolateralmente, por 1o que transfiere Helicotylenchus a la subfamilia Rotylenchoidinae Whitehead, 1958.

DECKER (1972) adopta la misma clasificacidn anterior, si bien incluye Helicotylenchus dentro de Hoplolaiminae. - 37 -

ANDRASSY (1976) situa el género Rotylenchus de! siguiente modo:

Phylum Nemathelmi nthes

Clase Nematoda

Subclase Secernentia Linstow, 1905

Orden Tylenchida Thorne, 1949

S uborden Tylenchina Chitwood, 1933

Superfami1ia Hoplolaimoidea Filipjev, 1934

Familia Hoplolaimidae Filipjev, 1934

Subfamilia Rotylenchinae Golden, 1971

Dentro de Rotylenchinae incluye: Antarctylus Sher,

1973, Helicotylenchus Steiner, 1945 y Rotylenchus Filipjev,

1936.

BRZESKI (1977) incluye sol amente los géneros Rotylen- chus y Helicotylenchus dentro de la subfamilia Hoplolaiminae

(Hoplolaimidae: Tylenchoidea).

JAI RAT PURI y STDDIQI ( 1 977 ) r. rean dos nuevns géneros.

Orient.y lus y Calvatylus, que incluyen dentro de la subfamilia

Rotylenchoidinae, dando como respectivas especies tipo: Cri enty-

lus oriental is Siddiqi e_t Husain, 1964; y Calvatylus cal vus

(Sher, 1965 ) n, comb., syn. Rotylenchus cal vus Sher, 1965.

Para BOAG (1978) la posicidn sistematica del género

Rotylenchus Filipjev, 1936 es la siguiente:

Clase Nematoda - 38 -

Subclase Secernent!a von Linstow, 1905

Orden Tylenchida Thorne, 1949

Suborden Ty1ench i n a Geraert, 1966

Superfamilia Tylenchoidea (Orley, 1880 ) Chitwood _e_t

Chitwood, 1937

Familia Hoplolaimidae (Filipjev, 1934) Wieser,

1953

Subfamilia Rotylench i n ae Golden, 1971

En Rotylenchinae incluye ademas el género Helicotylen chus Steiner, 1945.

KRALL (1978) d a la siguiente posicidn sistematica pa ra el género Rotylenchus Filipjev, 1936:

Clase Nematoda Rudolphi, 1808

Subclase Secernentea (von Linstow, 1905)

Dougherty, 1958

Orden T y 1ench i d a (Filipjev, 1934) Thorne, 1949

Suborden Tylenchina (Filipjev, 1934) Geraert, 1966

Superfamilia Hopl olaimoi dea (Fi.Tipj.ev, 1934 ) Paramonov,

1967

Familia Hoplolaimidae (Filipjev, 1934) Wieser, #

1953

Superfamilia Rotylenchinae Golden, 1971

Dentro de Rotylenchinae incluye también los géneros

H eli cotylenchus Steiner, 1945 y Antarctylus Sher, 1973.

SIDDIQI (1980) reconoce el phylum Nematoda, la clase Se- - 39 -

cernentea, el orden Tylench i da, el suborden Tylench i n a y la su perfamilia Hoplolaimoidea, dentro de la cual se encuentra el género Rotylenchus.

BALDWIN y BELL (1981) crean la subfamilia Pararotylen chinae (Hoplolaimidae) y el género Pararotylenchus, en el que

incluyen nematodos con la mayorfa de los caractères de RotyTen ch i n ae , excepto que las glandulas esofagicas forman un bulbo

basal similar al de Tylenchorhynchidae.

RYSS y KRALL (1981) restablecen la superfami1i a Hoplo-

1aimoidea (Filipjev, 1934), Paramonov, 1967, que SIDDIQI (1971)

habia sinonimizado con Tylenchoidea, e incluyen en el la ocho

fami lias, entre el las Hoplolaimidae (Filipjev, 1934), Wieser,

1 953.

MAGGENTI (1983) propone la division de la clase Secer

nentea en tres subclases: Rhabditia, Spiruria y Diplogasteri a,

i r I c 1 u y e M d 0 esta u 11 i ni ci los o r d e n e s : Diplugaster Ida , A p 1 1 e 1 en -

chi da y Tylenchi da.

I .3 Estudios realizados sobre el género Rotylenchus.

Ademas de los estudios taxondmicos y sistematicos y a

mencionados, se han realizado otros sobre el género Rotylen- - 40 -

chus, entre 1 os que vamos a distinguir: morfologfa, biologfa, distri bue ion, y control y dahos.

1.3.1. Morfoloqia. N o son muy numerosos los trabajos que in cluyen estudios morfologicos de especies del género Rotylen chus , aparté de los indu f dos en las descri pci ones de nuevas especies y revisiones. Entre los trabajos estrictamente morfo logicos, queremos destacar en primer lugar el prof undo estudio de R. qoodeyi por COQMANS (1962 a y b); as f como los estudios de microscopfa electron ica de transmis ion de DE GRISSE

( 1972 ) y DE GRISSE et a l. 1974 ) sobre la estructura del est ile- t e en larvas de Rotylenchus s p. y el si stem a sensorial cefali- c0 de R. robustus, respectivamente. DURNEZ et al (1973) estudian la estructura de la eut feula de R. robustus al microscopio electrdnico; ROSSNER ( 1974 ) y ROSSNER et al . ( 1974 y 1976 ) estudian al microscopio electrdnico de barrido los cambios en la superficie de R. robustus desecados y no desecados y los posibles mecanismos que actuan para reducir la pérdida de agua en suelos secos; VOVLAS et a l. (1980) estudian la morfoloqfa de R. 1aurent inus, con ayuda del microscopio electrdnico de ba rrido; finalmente, GERAERT (1981) estudia la morfologfa celu-

1ar del sistema reproductor femenino de R. robustus y la compa ra con otras especies.

1.3.2. Biologfa y ecologfa. De los escasos trabajos realiza dos sobre la biologfa de las especies del género Rotylenchus, queremos destacar el estudio sobre el oroceso de la muda en R. - 41 -

b uxoph i 1 us de BRZESKI et a l. (1971); el estudio de la embriolo- g 1 a de R. robustus por ROSSNER (1971), as f como el estudio de su distribucidn vertical ' de ROSSNER (1972); y, por ultimo, el estudio so4)r e dinamica de poblaçiones, ci cio bioldgico y eco- logia de R. robustus por BOAG (1982).

1.3.3. Distribucidn. No se incluyen en este apartado las publicaciones que hacen referenda a las descri pciones de las espe cies, si no unicamente aquellos trabajos en los que se cita el género Rotylenchus o alguna de sus especies en una nueva plan ta y/o localidad. En estos trabajos se observa que el mayor nu méro de citas corresponde a R. robustus, y de ellos queremos destacar los si gui entes: ALTHERR (1963) sehala R. robustus como especie dominante en suelo de cuatro localidades en un val le fo rest al subalpino a 2.000 m de altitud en Suiza; ROSSNER

( 1969 ) la cita en Pi nus y P i c e a de Alemania Occidental; SKUODI-

TE-RUDZYAVICHENE (1970) la incluye entre las tres especies mas comunes en plantas decor ativas de los invernaderos del Jardin

Botanico Kaunas de Lituanie; ALI et a l. (1973) ci tan R. robus tus y R. unisexus en Zaire; SCOTTO LA MASSESE (1973) cita por primera vez R. robustus en la rizosfera de Acti nidi a chinensis en Francia; BOAG (1978 a) cita R. robustus y R. goodeyi en vive- r os forestales de Escocia; y BOAG (1978 b) recoge las si gui en tes especies de Rotylenchus citadas en las Islas Britanicas:

R. buxophilus, R. f a l l orobustus, R. goodeyi, R. pumilus y R. robustus. - 42 -

De losrestantes trabajos, queremos destacar los s i- gui entes: CHOI et a l. ( 1972 ) encuentran R. oriental is alrededor de rai cesde pi no en Corea; SZCZYGIEL et a l. (1972) senalan la presencia de R. f a l l orobustus entre 0 y 2 cm de profundidad en suelo de fresal en Polonia; LISKOVA et al . (1974) indican que

R. buxophilus représenta el 40% de los nematodos asociados a las rafces de Vaccinium myrtillus (arandano) a una altitud de

1.700-1.800 m en Checos1ovaquia; MANCINI et a l. (1974) indican la presencia de gran numéro de esta misma especie en Hydrangea hortensia Sieb. de Turin; MORETTI et al . (1977) encuentran den- s as poblaçiones de R. f a l l orobustus en el suelo adherido a las rai'ces de Vitis s p. en el Val le de Aosta; BOAG (1979) sehala la presencia de R. qoodeyi en el 58% de 615 muestras recogidas en 59 cuitivos de zanahoria en Escocia; KATALAN-GATEVA et a l.

( 1979 ) ci tan R. cal vus y R. gracilidens en Rosa damascena de

Bulgaria; SAKA et a l. (1979) encuentran R. unisexus en diferentes cultives de Malawi; finalmente, KATALAN-GATEVA (1980) en cuentra R. f a l l orobustus, R. goodeyi, R. incul tus, R. pumilus, y R . quartus en la rizosfera de Vitis v i n i ^ e r a L. pn Bulgaria.

1.3.4. Control y dahos. De los numerosos trabajos realizados so bre métodos de control del género Rotylenchus y los dahos que este produce, la mayorfa se h an llevado a cabo sobre R. robus tus 0 su sinonimo R. uniform is , entre los que resaltamos: el estudio de HI JINK ( 1969 ), en el que se indica que el tamaho de

1 as plantulas de P i c e a a b i e s es inver s amen te proporcional a la - 43 -

densidad de poblacidn de R. robustus inoculada antes de la plantacidn; LEAR et a l. (1969) encuentra grandes poblaçiones d e R. robustus en lechugas achaparradas con escaso rendimiento y cl orosis; EISSA (1971) sehala que en un suelo esterilizado al

vapor desaparecen en pocas semanas entre el 70 y el 90% de los

individuos de R. robustus inoculados previamente, incluso en

presencia de la planta hospedadora; ahora bien, al desaparecer

las condiciones desfavorables, R. robustus se reprodujo rapidamente; WELCH et a l. (1971) indican que el rendimiento de lechu

gas en suelo infestado con R. robustus aumentd mediante trata-

mi ento con EDB (4 gai ones/acre) y D-D (30 g al ones/acre); FERRAZ

(1973) sehala que los nematicidas Nemacur, D-D, Benlate, DBCP,

Tel one y Vapam, as i" como los tratamientos con vapor, son efec-

tivos contra R. robustus; SIMONS (1973), en su estudio sobre la

supervivencia de diverses nematodos en relac ion con la humedad

del suelo, sehala que en R. robustus, los est ados mas suscepti

bles a la desecacion son en primer lugar las larvas en 2^ fa-

s e, a continuation los machos y las larvas en 3 ^ fase, siendo

1 as hembras y las larvas en 4^ fase 1 as mas resistentes des-

pués del huevo; FERRAZ et al . ( 1976 ) estudian la implicacion

d e R. robustus y otros nematodos en diversas enfermedades del

clavel, sehalando que R. robustus no hizo disminuir el peso de

la planta y que el escaso desarrollo de estos nematodos pare-

c f a deberse a 1 as temperaturas desfavorables en que se re a li

ze el experimento; BOAG (1979), en su estudio sobre los nemato

dos asociados a zanahoria en Escocia, indica que en una zona

con gran abundancia de R. robustus el tratamiento con Aldicarb - 44 -

o • dicl or opropeno aumentd el rendimiento del cultivo en un 17 y

47% respectivamente, a la vez que se redujo el numéro de nema todos considerablemente; BOAG (1980) observa que R. robustus es capaz de aliment arse dentro de un gra^ intervalo de temperaturas, entre 0,5 y 42,5 “C; BOAG (1981) indica que con dicloropro- peno (92% a 207 1/Ha) se reduce el numéro de R. robustus en un

97,9% en Loiium perenne y en un 73% en Brass ica napus, cuyos

rendimientos aumentan por consigui ente; finalmente, ALPHEY

(1982) sehala que el fungicida “quintoceno" reduce las poblacio-

n es de R. robustus.

Entre los trabajos sobre control y dahos que hacen refe

renda a R. uniformis, especie sindnima de R. robustus, desta-

camos los de SEINHORST et a l. (1969) que establecen el Ifmite

de tolerancia de la zanahoria para R. uniformis en unos 30 indi-

viduos/5 gr de suelo; los mismos autores (1971) indican que la

tasa de multiplicacion de R. uniformis en gui santé aumentd

con la presencia de Fusarium oxysporum forma pi si raza 1; SEIN

HORST (1973) sehala que pat a matar un cierto percentaje de hue-

V 0 s de R. uni formis en suelo se requiere una dos is doble de D-D

que la necesaria para matar el mismo porcentaje de juveniles y

adultes, aunque por otro lado, tante los huevos como los nemato

dos actives presentan la misma sensibilidad frente al Dazomet;

finalmente, SEINHORST et a 1 . (1974) indican que para impedir la

éclosion del 50 al 100% de huevos de Heterodera rostochensis

es précise multiplicar por 1,7 la dos is de mezcla de D-D necesa

ria para matar la misma proporcidn de R. uniformis actives. - 45 -

El uni CO estudio realizado sobre otra especie del gé nero Rotylenchus corresponde a VOVLAS et al . (1980), en el que senalan que R. 1aurentinus es semiendoparasito de las peque- n as rai ces latérales de la zanahoria y causa lesiones y cavida- des en los tejidos epidérmicos y corticales.

De los restantes trabajos, en los que no se ha determinado la especie, destacamos el de DEFLOOR (1971), quién indica que con bajas dos is de Dazomet granulado se reduce el numéro de individuos de Rotylenchus y de otros géneros, a la vez que se control an las mal as hierbas y aumenta el rendimiento de di verses cultives; HEIDE (1973) sehala que 50 ml/m de Nematin y

20 gr./m de Basamid son efectivos contra Rotylenchus s p. en pruebas de invernadero; segun KLINGER et al . ( 1978 ) Rotylen chus spp. causan unicamente un leve daho en las raices de fre

sal; por ultime, DEPORTES et a l. (1979) indican que la api ica-

ci on de D-D es el método mas eficaz contra Rotylenchus spp.

en raices de violeta.

1.4. El género Rotylenchus en Espaha

En este apartado se détail an las citas del género Roty-

1enchus realizadas en Espaha, indicando en cada una de ellas

là planta, localidad y autor de la misma. - 46 -

GADEA (1953) cita por primera vez en Espaha el género

Rotylenchus, representado por la especie R. robustus, que en cuentra en la rizosfera de Sedum candollei (Muci zoni a sedoi des actual mente) en Curavacas (Palencia).

Posteriormente, GADEA (1956) encuentra la misma especie en rizosfera de prado de Vilas del Turbdn (Pirineos Aragone ses), citandola también en 1962 en suelo de tapiz de musgo en la I s 1 a d'en Colom y Mahdn (Menorca).

ARIAS et a l. (1963) ci tan R. robustus sobre Opuntia f i cus car ica (chumbera) de EL Arahal (Sevilla), y GUEVARA et al .

(1963 y 1964) la encuentran en remolacha, habas y tabaco de la

V e g a de Granada.

BELLO et a l. (1965), en su estudio de los nematodos de cuitivos de platanera de las Canari as Occidentales, ci tan Roty-

1enchus sp . .

JIMENEZ MILLAN et a l. (1965), en su catalogo de los ne matodos fitoparasitos y peri-radicul ares encontrados en Espa

ha, recogen la cita anterior de GUEVARA et a l. (1963 y 1964), y

aunque dan como propi a la cita de R. robustus en Opuntia sp.

(chumbera) de El Arahal (Sevilla), creeemos que ésta se refie-

re a la mencionada anteriormente de ARIAS et a l. (1963). En el mismo trabajo ci tan por primera vez Rotylenchus spp. en: Acer

sp. (alerce) de Robledo (Segovia); Beta vulgaris L. var. eye 1 a - 4 7 -

(acelga) de Beni sa (Alicante); Capsicum annuum L. (pimiento) de

El Tiemblo (Avila); Cucumis melo L. (melon) de El Arahal (Se v illa ); Ecballium elaterium Rich, (pepinillo del diablo) de Ma drid (capital); L avatera' arborea L. de Mostoles (Madrid); Mgs a cavendishi Lam. (platanera) de Tenerife; Punica granatum L.

(granado) de Crevillente (Alicante); Quercus pyrenai c a Will, de

Arenas de San Pedro (Avila); Urtica sp. (ortiga) de Horna (Gua dalajara); Vinca major L. de Madrid (capital); y Zea mays L .

(mafz) de Sevilla (capital). Por ultimo, ci tan Rotylenchus

cf. buxophilus en Pi sum sativum L. (guis ante) de El Algar (Mur

cia).

TOBAR JIMENEZ et a 1. ( 1966 ) encuentran R. buxoph il us en

Viola odorat a L. (violeta) de Granada.

GOMEZ BARCINA et a l. ( 1967 ) ci tan Rotylenchus spp. en

habas, chirimoyo, aguacate, higuera, tomate, f reson y c ftri-

cos de la zona costera comprendida entre Estepona y Calahonda;

y JIMENEZ MILLAN et al. (1967) en C itrus aurantium Risso (naran-

j 0) de Alora (Malaga), citas ambas recogidas por BELLO et a 1.

( 1973 ).

BELLO (1969), en su estudio de las nematocenosis de las

Islas Canari as, cita R. brevicaudatus, R. breviglans y ^ orien

tal is .

ROMERO et a l. ( 1969 ) recogen 1 as citas de R. robustus 48

en tabaco de la Vega de Granada de GUEVARA et a l. (1963 y 1964)

.y de Rotylenchus sp. en tomate de la costa granadino-malagueha

(de GOMEZ BARCINA et al . ( 1967 ).

ARIAS et a l. (1974) ci tan Rotylenchus spp. en cultives

■de remolacha de Asturias; y ARTERO et a l. (1975) en caha de

azucar de Vêlez Malaga.

BELLO et a l. ( 1976 ) encuentran R. eximius en T am ar i x

gall icaL. de Maspalornas (Gran Canaria) y en I nu 1 a er i thmo i des

L. de Aimer fa, dando por primera vez la descripcion del ma

cho.

JIMENEZ GUIRADO (1976), en su catalogo de los nemato

dos del suelo de la Sierra Nevada granadina, recoge la cita de

TOBAR JIMENEZ (1966) de R. buxophilus en violeta.

BELLO (1977) recoge las citas de JIMENEZ MILLAN et a l.

(1965) en la provincia de Avila de Rotylenchus spp. en Capsicum

annuum L. (pimiento) de El Tiemblo y en Quercus pyrenaica Will,

de Arenas de San Pedro.

GADEA (1977), en su estudio de la nematofauna muscfco

la de Mallorca, cita R. uniformis en musgo de Torrent de Cala

Pi .

JIMENEZ GUIRADO (1978) cita Rotylenchus c f . incul lus en - 49 -

prados con C1rs i urn greg ar i um de Sierra Nevada.

ARIAS et a l. (1979) encuentra R. robustus en cebada de

Martorell (Barcelona); y PALOMO (1979) cita esta misma especie sobre Quercus pyrenaica Will, de la Sierra de Gata, donde en cuentra también R. goodeyi.

VALCARCE et a l. (1980) ci tan Rotylenchus spp. en diver ses viveros de agrios de Castellon.

ZANCADA et a l. (1981), en su estudio de los nematodos encontrados en la provincia de Guadalajara, recogen la cita de

Rotylenchus sp. en Urtica sp. de Horna de JIMENEZ MILLAN et a l.

( 1965 ) .

MONREAL et a l. ( 1982 ) ci tan R.robustus y R. qoodeyi en hayedo, brezales, alerce, helecho y prado de Zuraun (Pirineos

Occidentales) indicando que se encuentran en todos los niveles deprof undid ad,

Finalmente, ZANCADA et a l. ( 1983 ) ci tan una nueva especie del género Rotylenchus que encuentran en la cuenca alt a del r 10 Tajo, pero no la describen. II. MATERIAL Y METODOS - 51 -

Dentro de este capitule se pueden distinguir dos gran des apart ados que reunen por un lado todas las técnicas de muestreo y extraccidn de los nematodos, as f como los métodos para su estudio cuantitativo y cualitativo y las caracterfsti- c as del material utilizado, y otro que incluye los analisi s efectuados en el tratamiento automatico de los datos en el mencionado estudio.

I I . 1. Recogida de muestras.

Las muestras se tomaron en los primeros 20 centfmetros de suelo alrededor de 1 sistema radicular de la planta elegida, cavando con una azadilla hast a la aparicion de 1 as raices secundarias y recogiendo unos 10 gramos de rafz, y la parte de suelo que la rodea (un kilo aproximadamente).

A continuacion se introdujeron las muestras en boisas de plastico con el fin de evitar la pérdida de humedad, eti- * quetandose cada una de ellas con un numéro que corresponde al del cuaderno de campo, en el que igualmente se anotan todos los datos de interés sobre la planta, su ubicacion, estado del terreno, etc..

Una vez transportadas al laboratorio, las muestras se - 52 -

almacenan en camaras a una temperatura de 5° a 10° C para su posterior estudio. La temperatura de almacenaje de 1 as muestras es de gran importancia, ya que si son sometidas a temperaturas superiores o inferiores a 1 as indicadas pueden morir muchos ne matodos, lo que harfa que la poblacidn existente en la muestra no fuera represent ativa de la presente en el momento de la recogida.

II.2. Extraccidn.

Dividimos este apartado en dos partes:

- Preparacidn de la muestra.

- Técnicas de extraccidn a partir del suelo.

I I . 2.1. Preparacidn de la muestra.- Para preparar la muestra para su extraccidn, se col oca ésta sobre un papel de filtr o y se separan las raices del suelo. Una vez homogeneizada la muestra, se torn a una fraccidn del suelo, que se pasa po)^ un tamiz de 2 mm de mal la a fin de eliminar la grava. A continuacidn se pesan 100 gramos de suelo, una vez tamiza- d0 y se ponen en una capsula de porcelana con su étique ta correspondiente, donde se mantienen durante un tiempo de quince minutes como mfnimo, para fa c ilita r su disgregacidn.

Al mismo tiempo que se realizan estas operaciones, se anotan en una hoja de laboratorio, y a preparada al efecto, todas las c a- racterfsticas de la muestra. Posteriormente se comprueba si la - 53 -

rafz pertenece a la planta que se esta estudiando o a otras plantas asociadas, observândose asimismo sus caracterfsticas y estado. A continuacidn se pesan 10 gr de 1 as rafces secun darias seleccionadas y se ponen en una capsula con agua, con el fin de analizar las fracciones péri-radicular y radicular.

El resto del suelo que no se ha utilizado en la extraccidn se guarda en las camaras para posteriores analisi s.

I I . 2.2. Técnicas de extraccidn a partir del suelo.- Los mé todos de extraccidn en Nematologfa tratan de separar los nema todos de las diferentes fracciones del suelo: grava, arena, 1i - mo, arcilla, fi bras vegetal es y agua. Un método de extraccidn se considéra satisfactorio cuando la mayor parte de los nemato dos se recogen en una pequeha suspensidn de agua, conteniendo muy poca cantidad de las demis fracciones.

Con el fin de obtener el mayor numéro posible de indi viduos del g é n e ro Rotylenchus, o b j e t o de n u e s t r u estudiu, b c h an empleado dos métodos de extraccidn, u no basado en la centrifugacidn y otro en la filtracidn.

I I . 2.2.1. Método de centrifugacidn. Este método se ha em pleado siguiendo la redescripcidn realizada por DE GRISSE

( 1969 ) - 54 -

De la fraccidn de muestra tamizada y mantenida en a- gua, se élimina la arena agitando la capsula que la contiene,

a fin de que la arcilla, el limo, las fi bras vegetal es y los ne matodos quedem en suspensidn, e inclinando dicha capsula para

que sedimente la arena. La suspensidn se vierte en un recipien-

te de cristal de cuatro litros de capacidad, repitiéndose el

proceso hasta que el agua quede mas o menos transparente, lo

que indica que en la capsula sdlo hay arena.

El recipiente de cristal donde se ha vertido el agua

con los nematodos, el limo, la arcilla y las fi bras vegetal es

en suspensidn, se compléta con agua hasta el borde y se deja

sedimentar durante un tiempo noinferior a dos horas. Los res

tes vegetal es que quedan flotando se eliminan mediante el verti-

d0 de agua a prèsidn sobre la superficie.

Al cabo de dos horas se coloca dentro del recipiente

un aparatode decantacidn en forma de sifdn con un tamiz de

28 ^m. de mal la, para eliminar parte del agua y la arcilla en

suspensidn. La porcidn que queda s i n decantar, que contiene

el limo, la arcilla y los nematodos, se agita bien y se vierte

en un recipiente graduado, dejandolo sedimentar nuevamente du

rante un perfodo mfnimo de dos horas, transcurrido el cual,

se reduce a unos 300 cc. mediante sifones de filtracidn.

A continuacidn se realizan dos centrifugaciones: - 55

Primera centrifugacidn. El contenido del recipiente se agita y se vierte uniformemente en cada u no de los tubos de la centrffuga y se someten a una centrifugacidn de 1.800 r.p.m. durante 4 minutes; tras lo cual se decant an suavemente los tu bos sobre un tamiz de 28 jum. girandoles ligeramente para elimi nar el agua, quedando el limo, parte de la arcilla y los nemato dos.

Segunda centrifugacidn. Al residue que queda en los tu bos se ahade una solucidn de azucar, mezclandolo bien con un agitador y removiéndolo fuertemente. Se centrifuga a continua cidn, sometiéndolo nuevamente a 1.800 r.p.m. durante un minu te como maxime. Esta operacidn hay que realizarla rapidamen- t e para que los nematodos no se deformen al s er sometidos a la elevada concentracidn de azucar de la disolucidn. Tras la centrifugacidn, se decant an los tubos sobre un tamiz de 28 /im. de mal la, haciëndolos girar suavemente; a continuacidn se la va el tamiz repetidamente para eliminar todos los restes de azucar. El contenido del tamiz se vierte sobre una olaca de Pe tri y se lava, haciendo escurrir el agua sobre la plaça, de for ma que los nematodos queden recogidos en ella, y se i n i c i a el recuento. Con esta centrifugacidn se consigue separar los nematodos de la arcilla y el limo, que sedimentan en el fondo de los tubos, mi entras que los nematodos quedan en suspensidn por su menor densidad. - 5 6 -

I I . 2.2.2. Método de filtra c id n . Hemos empleado el método de

FLEGG (1967), que tiene su fund amento en las técnicas de decantacidn y filtracidn de BAERMAN (1917) y COBB (1918). Es un método que se basa en. la movilidad de los nematodos, actuando por tanto de forma selectiva, puesto que aquellas especies poco mdviles se extraen en menor numéro. Para nosotros ha represen tado un método complementario al de centrifugacidn y nos ha permitido, una vez detectada la presencia de nematodos del gé nero Rotylenchus por centrifugacidn, extraer de las muestras seleccionadas el mayor numéro posible de nematodos, sobre los que se basa nuestro estudio.

I I . 3. Métodos de estudio cuantitativo y cualitativo.

En este apartado figuran todas las técnicas seguidas una vez extrafdos los nematodos hasta su determinacidn.

11 . 3 .1. Recuento y ai si amiento de nematodos.- Se realiza en una plaça de Pétri de fondo piano, en la que se recogen los nemato dos tras su extraccidn, observando, bajo un microscopio este- reoscdpico, la cantidad global de nematodos. Si el numéro es pequeho, se inicia el recuento directamente, con la ayuda de un contador de mano multiple, pero si se observa gran cantidad de ejemplares, se divide la plaça con un lapiz graso en dos o cua tro cuadrantes. Los resultados del recuento se registran en una - 57 -

una hoja de recuento, en la que figuran los géneros mas comunes, anotandose la frecuencia de cada nematodo. De este modo se obtiene la cantidad de nematodos que hay en 100 gr de sue-

lo, y se multiplica por 10 para expresario en kilogramos.

El ai si ami en to de los nematodos se realiza despuésde

la extraccion o como mâximo antes de dos dfas, para que no crezcan micelios de hongos. Se prépara un pocillo con agua des-

tilada para aislar los nematodos que se v an a montar en gliceri-

n a 0 a preparar para microscopfa de "scanning". El pocillo se

étiqueta con e1 numéro de la muestra y e1 aislamiento se re ali

za con un pincel al que se h an dejado unie amente dos fi bras.

Al mismo tiempo, se prépara un portaobjetos de cristal, en e1

que se vierte una gota de agua destilada, donde se colocan los

nematodos ai si ados. Es conveniente que e1 numéro de nematodos

por preparacidn no exceda de 10, de modo que los restantes cu-

y0 estudio se considéré de interés se pasan al pocillo.

II. 3.2. Muerte, fijacidn y montage.- Los nematodos ai si ados en

e1 portaobjetos se mat an calentando este ligeramente a la lla

ma de un mechero de alcohol para que se évaporé la mayor parte

del agua, cuidando de que no 1o haga complet amente, a fin de

que los nematodos no se contraigan. De este modo se consigue

que los nematodos mueran rapidamente y conserven su forma natu

ral. A continuacidn se ahade una gota de azul-lactofenol y se

pone e1 cubreobjetos con unas pinzas, inclinandolo hast a que 5 8

esté en contacte con el azul-lactofenol y dejandolo caer len- t amente.- Se adhiere una étiqueta en la parte derecha de la pre paracidn en la que se indica: numéro de la muestra, fraccidn, planta, variedad, localidad y fecha en que se monta la prepara cidn. Por ultimo, se bordea el cubreobjetos con "glyceel"

(marca comercial), primero en cuatro puntos y una vez secos es tes, en su totalidad, quedando la preparacidn lista para pasar a la fase si gui ente, en la que se hacen los mapas de disposicidn de losnematodos, que nos facilitaran su posterior loca-

1 izacidn.

Los nematodos consider ados de interés, que habiamos ai si ado en el pocillo, se mat an y fijan en el dfa para evitar el crecimiento de micelios de hongos sobre ellos. Para ello, una vez que los nematodos se encuentran en el fondo de 1 poci

llo, se retira la mayor cantidad de agua posible con una pi pet a y acontinuacidn se ahade fijador I, previamente calent ado al bano de Marfa a 70-80" C. El pocillo se tapa para que no éva poré el fijador y se mantiene asf durante varios dfas, al ca- b0 de los cuales, después de destapar, se introduce en un reci-

piente hermético con atmdsfera de alcohol, que se mantiene du rante 12 horas en una es tuf a a 39“ C.; transcurrido este tiem

po, se saca el pocillo de la atmdsfera de alcohol y se deja evaporar lent amente en la estufa. Una vez evaporado el fijador

I, se ahade fijador II y se deja evaporar de nuevo; después se

ahade fijador III y se deja en la estufa, en la que puede perma- - 59 -

necer hasta una semana. Una vez terminado este proceso, se lle-

V a el pocillo a un desecador con cloruro calcico, de donde se retirarâ cuando los nematodos vayan a ser montados.

Los fijadores utilizados segun el metodo de DE GRISSE

(1969) son los siguientes:

Fijador I : Agua destilada ...... 89 ml

Formol 40% ...... 10 ml

Glicerina...... 1 ml

Fijador II : Etanol 96% ...... 95 ml

Glicerina...... 5 ml

Fijador III : Etanol 96% ...... 50 ml

Glicerina...... 50 ml

El monta je se realiza en un portaobjetos de 1 d rj o, so

bre el que se pone una gota de glicerina. Los nematodos y a fija -

dos se pasan de 1 pocillo a la gota de glicerina, colocandolos

en el centro de la misma con el pincel, y poniendo a su alrede-

dor, y en forma radial, très agujas de lana de vidrio de un gro-

sor similar al de los nematodos, que de este modo quedan prote-

gidos de un aplastamiento ocasional. A continuacidn se coloca

el cubreobjetos y se bordea, estando y a la preparacidn dispues-

t a para hacer el "mapa de disposicidn", al igual que se hizo - 60 -

con la preparacidn de azul-lactofenol

I I . 3 . 3 . Conservacidn de las muestras.- Una vez ai si ados los ne matodos para su fijacidn y mont aje, el contenido de la plaça de Petri con los restantes nematodos se pasa a una copa gradua- d a donde se dejan sedimentar; posteriomente, se reduce el agua con ayuda de un frasco lavador. La copa se lava con fijador I, calentado a 70-80* C. a 1 baho de Marfa, vertiendose en el frasco de conservacidn, de modo que los nematodos queden fija - dos. Seguidamen te, se registra y almacena el frasco.

Se conservan también las muestras de suelo para su pos terior analisi s.

I I . 3.4. Observaciones microscdpicas.- Las observaciones se han realizado en un microscopio Reichert con contraste de fases y camara cl ara incorporados y da 400 a 1.200 aumentoc. Mediants

inmersidn y contraste de fases se h an determinado los nemato dos a nivel de género; y por medio del estudio morfométrico de los ejemplares, complet ado con dibujos a camara cl ara, se ha llegado a la determinacidn a nivel de especie, utilizando para ello los fndices somatometricos de DE MAN ( 1880 ), as f como otros fndices utilizados en la determinacidn de las especies del género Rotylenchus; - 61 -

Indices de De Man:

n = Numéro de individuos.

L = Longitud total en ;um.

a = Longitud total / Anchura maxima.

b = Longitud total / Distancia del extremo anterior

hasta la base del esdfago.

b'= Longitud total / Distancia del extremo anterior

hasta el extremo posterior de

las glândulas esofagicas.

c = Longitud total / Longitud de la région caudal.

c'= Longitud de la région caudal / Anchura del

cuerpo anivel del ano o cloaca.

V = Distancia del extremoanterior a la vulva x 100 /

Long i tud to ta l.

Otros fndices utilizados:

M = Longitud de la parte anterior del estilete x 100/

longitud total del estilete.

0 = Distancia del or ific io de la glandula dorsal a

la base del estilete x 100/longitud del estilete.

I I . 4. Caracterfsticas del material utilizado.

Dado que en nuestro estudio hemos empleado dos tipos de material de procedencia y caracterfsticas muy diferentes:espe- - 62 -

Cl es descri tas en la bibliografia y material recogido por noso tros, pasamos a describirlos separadamente en los dos subapartados siguientes.

I I . 4.1. Especies descri tas en la bibliografia.- Ac tuai mente son 37 las especies validas del género Rotylenchus que con las siete pertenecientes al género Orientylus, que hemos i n- cluTdo en nuestro estudio por razones y a mencionadas en la in troduce ion, hacen un total de cuarenta y cuatro especies-de lasque se h an encontrado en la bibliograffa las sesenta y seis descri pci ones si gui entes:

Rotylenchus abnormecaudatus: descripcion original de

VAN DEN BERG y HEYNS ( 1974 ) .

R. acuspicaudatus: descri pci on original de VAN DEN

BERG y HEYNS (1974).

R. agnetis: descripcidn original de SZCZYGIEL (1968).

R , al pi nus : descri pcion or i ,g inal de EROSHENKO (1976) v descripcidn de una poblacidn de KANKINA y TEBENKOVA (1980).

R. b i alaebursus: descripcidn original de VAN DEN BERG y HEYNS (1974).

R. brevicaudatus: descripcidn original de COLBRAN

(1962), descripcidn de topotipos de SHER (1965) y descripcidn de varias poblaciones de VAN DEN BERG y HEYNS (1974).

R. breviglans : descripcidn original de SHER (1965).

R. buxophilus: descripcidn original de GOLDEN (1956) y 5 3

descripcidn de paratipos de SHER (1965). -

R. cal vus: descripcidn original de SHER (1965) •

R. capensis: descripcidn original de VAN DEN BERG y

HEYNS (1974).

R. catharinae: descripcidn original de VAN DEN BERG y

HEYNS (1974).

R. caudaphasmidius: descripcidn original de SHER

(1965) y descripcidn de una poblacidn de VAN DEN BERG (1978).

R. cypr iensis: descripcidn original de ANTONIOU

(1980).

R. dalhousiensis: descripcidn original de SULTAN y

JAIRAJPURI (1979).

R. devonensis : descripcidn original de VAN DEN BERG

( 1976 ).

R. eximius: descripcidn original de SIDDIQI (1964) y descripcidn de dos poblaciones de BELLO et al . ( 19 7 6 ).

R. fall orobustus : descripcidn del holotipo (neotipo de

R. robustus) y otros ejemplares de GOODEY y SEINHORST (1960), descripcidn de una poblacidn de SHER (1965) y descripcidn de

un individuo de VAN DEN BERG (1976).

R. g 1abratus: descripcidn original de KANKINA y TEBEN

KOVA (1980).

R. goodeyi: descripcidn de GOODEY y SEINHORST (1960), basada en T. GOODEY (1951), redescripcidn de COOMANS (1962) y descripcidn de una poblacidn de SHER (1965).

R. gracilidens: descripcidn original de SAUER (1958) y descripcidn de una poblacidn de SHER (1965). - 64 -

R. hered i eus : descripcidn original (Calvatylus heredi- cus) de JAIRAJPURI y SIDDIQI (1979).

R. incul tus : descripcidn original de SHER (1965) y des cripcidn de varias poblaciones de VAN DEN BERG y HEYNS (1974).

R. i ndorobustus : descripcidn original de JAIRAJPURI y

BAQRI (1973).

R. ivanovae: descripcidn original de KANKINA y TEBENKO

VA (1980).

R. laurentinus : descripcidn original de SCOGNAMIGLIO y

TALAME (1972) y descripcidn de una poblacidn de VOVLAS et a l.

(1980).

R. microstriatus: descripcidn original de SIDDIQI y

CORBETT (1983).

R. neorobustus: descripcidn original de SULTAN y JAI

RAJPURI (1979).

R. nexus: descripcidn original de FERRAZ (1980).

R. phaliurus: descripcidn original de SIDDIQI y PINO

CHET (1979).

R, pruni: descripcidn original de RASHID y HUSAIN

(1972).

R. pumilus : descripcidn original de PERRY (1959) j_n PE

RRY, DARLING y THORNE (1959), descripcidn de paratipos de SHER

(1965) y descripcidn de una poblacidn de KANKINA y TEBENKOVA

(1980).

R. quartus: descripcidn original de ANDRASSY (1958 b) y descripcidn de sintipos y otros ejemplares de SHER (1965).

R. robustus: descripcidn del metatipo de LOOF y OOSTEN- - 6 5 -

BRINK (1958) y descripcidn de diversas poblaciones de SHER

(1965).

R. rugatocuti culatus: descripcidn original de SHER

(1965) y descripcidn de un individuo de VAN DEN BERG y HEYNS

(1974).

R . tri annulatus: descripcidn original de VAN DEN BERG y HEYNS ( 1974 ) ,

R. uni sexus: descripcidn original de SHER (1965) y des cripcidn de diversas poblaciones de VAN DEN BERG y HEYNS

(1974).

R. us i t atus: descripcidn original de VAN DEN BERG y

HEYNS (1974).

Orientylus ci t r i : descripcidn original (R otylenchus c i- tri ) de RASHID y KHAN ( 1974 ).

0. geraerti: descripcidn original de JAIRAJPURI y SID

DIQI (1979).

0. helicus:descripcidn original (Rotylenchus helicus)- de HUSAIN y KHAN (1967).

0 . ori entaii s : descripcidn original (Rotylenchus orien ta 1 i s ) de SIDDIQI y HUSAIN (1964), descriocidn de una oobla- cidn (R. oriental is ) de CHOI y GERAERT (1972), medidas de una poblacidn de JAIRAJPURI y SIDDIQI (1979) y redescripcidn de una poblacidn de R. oriental is de SULTAN ( 1980 ).

0. secondus: descripcidn original (Rotylenchus secondus ) de MULK y JAIRAJPURI ( 1976 ).

0. s i dd i g i : descripcidn original (Rotylenchus siddi- q i i ) de MULK y JAIRAJPURI (1976).

0. varus: descripcidn original de JAIRAJPURI Y SIDDIQI

(1979). - 6 6 -

De cada una de ellas se ha recopiladô toda la informacidn existente, es to es, la descripcidn original y, en su c a- s 0, las redescripciones, las descri pci ones de topotipos, met atipos, paratipos y sintipos y las de poblaciones o individuos encontrados en otras local idades o pafses, as f como las simples citas en una determinada planta o localidad, con el fin de se- leccionar las mas adecuadas a nuestro estudio.

I I . 4.2. Muestreos realizados y material recogido por nosotros.-

Se h an estudiado un total de 314 muestras recogidas en diferen- t es plantas y localidades espaholas, durante siete expediciones de muestreo realizadas durante los ahos 1981 y 1982. Todos es- t os datos se recogen en la Tabla I del Apéndice, en la que se ha àsignado a cada muestra un numéro que se corresponde con el numéro de registre del Laboratorio de Nematologfa del Institu te de Edafologia y Biologfa Vegetal (C.S.I.C.) de Madrid, agrupandoias uerilro de cada expedition de mues tr eu c indican- d0 a continuacidn la planta, localidad y coordenadas UTM en I que fueron recogidas. - 5 7

I I . 5. Tratamiento automatico de los datos.

El tratamiento automatico de los datos ha si do posible gracias a una Beca de Intercambio concedida por el Consejo Supe rior de Investigaciones Cientificas, habiendo si do realizado bajo la direccidn del Dr. Ingeniero Agrdnomo D. Manuel BRAVO

LIMA, investigador principal del Depart amento de Fitopatologfa de la Estaçao Agrondmica Nacional de Geiras (Portugal). El sistema de programas de ordenador para taxonomia numerica u t i l i zado ha si do el denominado MINT (miniNTSYS) de ROHLF (1971), y se ha llevado a cabo en el computador I CL 4130 perteneciente al

Centro de Calcule de la Fundaçâo para a Ciência Cal ouste Gul- benkian, si to igualmente en Oeiras.

Los diferentes aspectos que conforman este estudio se recogen en los cinco apartados si gui entes.

I I . 5 .-1 . Seleccidn de las un idades taxondmicas ooeracionales . -

En nuestro estudio se distinguer dos grupos de OTUs, o unidades taxondmicas operacionales ("operational taxonomie units", 30-

KAL y SNEATH (1963)); un grupo es el constituido por aquellas poblaciones descri tas con mayor detalle en la bibliografia, y otro el form ado por las poblaciones estudiadas por nosotros. En ambos casos, cada una de las poblaciones ha si do considerada como un OTU difer ante. - 68 -

I I . 5.2. Seleccidn de caractères.- Los caractères utilizados en nuestros analisi s de taxonomfa numérica h an venido determina- d os por aquéllos que h an si do mas empleados por los diferen tes autores, yâ que los caractères de las especies de Rotylen- chus y Orientylus estudiados por los diferentes autores varfan en gran medida, 1o que hace que de un total de hasta sesenta y seis caractères, solamente sean comunes a todos los trabajos unos veinte. En un intento de obtener la mayor cantidad posible de informacidn para nuestro estudio, hemos indu f do algunos val ores y medidas que hemos tornado a partir de los dibujos de la especie en cuestion y otros que hemos cal cul ado a partir de los fndices dados por los autores de las descri pci ones. Final- mente, cuando no se pudo obtener el valor de algun carâcter de las poblaciones descri tas en la bibliograffa, este se codi fied como NC (no conocido).

Todos los caractères seleccionados para el tratamiento automatico h an si do cuantitativos, si bien hemos de distinguir en principio dos grupos diferentes, que hemos 11 am ado fijos (1) y no fijos (2), dividiéndose estos ultimos a su vez en fndi ces (a) y absolûtes (b).

(1) Caractères f ijo s :

b '

anchura de los "a n illos" - 69 -

n * de "ani11 os" de la region labial"

n * de "ani11 os" que ocupa el bulbo medio

n * de "ani1los" entre los fasmidios y el nivel del ano

•n* de "ani 11 os" de la région caudal

anchura de los nddulos del estilete

altura de los nddulos del estilete

longitud del bulbo medio

anchura del bulbo medio

distancia desde el margen posterior del bulbo medio al

extremo anterior

distancia desde el poro excretor al extremo anterior

(2) Caractères no fijos

(a) Indices ; (b ) Absolûtes:

a anchura maxima del cuerpo

b longitud del esdfago

longitud de la regidn caudal

anchura de la regidn caudal

St longitud del metenchium

0 longitiud del telenchium

M distancia del or i f i c i o de la

glandula dorsal a la base

del estilete

De t a 1 modo que se h an realizado dos analisi s paraie-

los, uno utilizando los caractères fijos mas los fndices, y - 70 -

otro con los caractères fijos mas los absolutos.

Dado que muchos autores solamente dan los valores mfnimo y mâximo de cada carâcter, omitiendo f recuentemente la me dia, hemos utilizado el valor.medio de cada u no de los carac tères (X^. + X / 2) para las especies descri tas en la m i n iïi 3 X bibliografia, en tanto que en el caso de nuestras poblaciones hemos empleado la media aritmética de cada carâcter (X^ +

X2 ••• / n).

I I . 5 . 3 . Estandardizaci6n de la matriz de datos.- Debido a que las unidades en que se expresan los est ados de los diferentes caractères son muy diversas, y al hecho de que los interval os de variaciôn de esos valores eran también muy diferentes en tre u no y otro carâcter, se hizo preciso llevar a cabo una e s- tandardizacidn de la matriz de datos. Esta operacidn consis- tid en caicuicir para cada caracLer ia media y la desviacion tfpica de los valores de sus estados en todas las poblaciones consideradas y en substituir cada valor original por el cocien te entre su desviacion con respecto a la media y la desvia- cidn tfpica. Asf, si es el valor del est ado del carâc ter i en el OTU j, y X'.j es el mismo valor estandardizado, t enemos que : - 71 -

donde para t 'OTUs X^ es la media de los valores del carâcter i y S ^ su desviacion tfpica:

1 2“ - 2 -x.,-r t-1

Se obtiene entonces una nueva matriz, que es la matriz de datos estandardi zados, en la que la media de los valores de cada carâcter es igual a cero, y su varianza igual a uno. Es esta matriz la que va a ser la base de todos los câlculos si- gui entes .

I I . 5.4. Calcule de los coefici entes de semejanza.- La semejan- z a entre dos OTUs suele estimarse median te un coefici ente de se mejanza , que es una cuantificacidn del parecido entre los elementos de las dos columnas de la matriz de datos que repre- - 72 -

sent an los estados de los caractères de los dos OTUs en cues- t ion, SNEATH y SOKAL ( 1973 ) .

Si consideramos que los OTUs se distribuyen en un hiperespacio fenetico de _n dimensiones, una por cada carâcter, el parecido entre un par de OTUs puede expresarse bien por semejan- z a (porcentaje en el que concuerdan) o por desemejanza (porcentaje en el que no concuerdan), SNEATH (1978). Asf pues, con el fin de cuantificar dicha semejanza o desemejanza, hemos emplea do do s coefici entes de semejanza: la distancia euclidiana media y el coefici ente de correlation. Medi ante estos coefici entes de semejanza, se comparan los estados de todos los caractères entre cada par de OTUs. Cuando en lugar del valor del est ado de un carâcter se encuentra un sfmbolo NC para uno o ambos OTUs, no se considéra e s e carâcter y se resta uno (1) del numéro to tal de c aracteres (_n ) .

La distancia euclidiana media o distancia taxonomica, d J viene défi nida oor: J K

n -,1/2 --- 2 ( X,, - X,,, )2 ^jk = ij ■ ^ik 1.1

donde x^ j es el valor del est ado del carâcter i en el - 73 -

OTU j, X. el valor del est ado del mismo carâcter en el OTU k y n es el numéro de caractères en los que se conocen los va

lores de sus estados tanto en el OTU j como en el OTU k. Asf pues, si los dos OTUs son idénticos, dj^=0, no existe distan cia entre ellos, si no 1o son, d j j^O, siendo tanto mayor cuan-

10 mayor sea su diferencia.

El coefici ente de correlacidn. rj^, viene défi ni do por :

1/2

donde X .j j es el valor del est ado del carâcter i en el OTU j , y X- y X, son las médias de los valores de los estados de los J • K caractères del OTU j y k respectivamente.

Para valores estandardizados este coefici ente es aproximadamente igual al coseno del ângulo formado por los vectores representativos de los OTUs en el antedicho hiperespacio. Si e s e ângulo fuera cero, rj^=l y los OTUs serf an idénticos. - 7 4 -

CABRAL et a l. (1977).

Segun ROHLF y SOKAL ( 1965 ), los coefici entes de corre

lation se. pueden interprétât de varios modos, siendo el mas comun como una medida de covarianza. Si dos variables varfan de t al modo que cuando una aumenta de valor, la otra aumenta

también, o por el contrario cuando la primera disminuye la segunda también, estas variables covarfan y se dice que es tan correlacionadas positivamente. En taxonomfa numérica, esto

significa que dos OTUs estan positiva y altamente corre1aciona- dos cuando los cambios en el estado de cada carâcter son para-

lelos en uno y otro OTU.

I I .5.5.- Anâlisis de grupos.- Con el fin de analizar los posibles grupos existentes en nuestro conjunto de OTUs (poblacio

nes), hemos utilizado dos métodos de agregacion y dos de orde-

nacion, que pasamos a describir a continuacidn.

I 1. 5 . 5 .1. Métodos de agregacion. Los métodos de agregacion empleados son del tipo SHAN (Sequential, Agglomerative, Hierar chic, Nonoverlapping Clustering Methods), SNEATH y SOKAL (1973) esto es, secuencial, aglomerativo, jerârquico y de no superpo-

sicidn. En estos métodos se cumplen las siguientes condicio-

n es :

- Hay una recomputacidn del coefici ente de semejanza - 75 -

entre los grupos recién establecidos y los candidatos potencta ies a ser admi t i dos.

Existe un criterio para admitir nuevos miembros en un grupo y a establecido.

Los métodos empleados por nosotros h an si do: de ligamiento simple y de ligarniento promedio.

I I . 5.5.1.1. Ligarniento simple: En este método, también llama- d0 "técnica delvecino mas proximo", un OTU candidato a unir- s e a un grupo existente tiene una semejanza con éste igual a la quetiene con el miembro de 1 grupo mas proximo a é1.

De este modo, se unen en primer lugar los OTUs mas s i- mi lares, esto es, aquéllos que se encuentran a una distancia menor, ya que hemos parti do de una matriz de distancias entre pares de OTUs.

Dentro de este método hemos empleado la red de conexion minima, SON (iniciales en inglés de "shortest connec tion network", PRIM (1957), que recibe ademâs los nombres de

"Prim-network"; "minimum spanning tree", GOWER y ROSS (1969), etc.) que para un con junto de _t OTUs présenta _t-j. conexiones entre pares de OTUs, de t al forma que:

- no existen circuitos cerrados

- cada OTU esta conectado como mfnimo con otro OTU

- la longitud de la red (suma de las distancias corres- 7 6

pond lentes a las _t-_l conexiones empleadas) es 1 o mas pequeha posible.

Ademâs de estas très condici ones que debe cumplir la red de conexidn mfnima, ROHLF (1982) también indica que si se suprime una conexidn, la red se descompone en dos subredes.

I I . 5.5.1.2. Ligarniento promedio: De los anâlisis de grupos que se realizan con distintos tipos de ligamiento promedio, hemos utilizado el de la media aritmética. El método consiste en computar la media aritmética de los coefici entes de semejanza entre un OTU, candidate a entrar en un grupo existente, y los miembros de éste, o entre los miembros de dos grupos que van a unirse. Este método no tiene en cuenta los coeficientes de se mejanza entre los miembros indu i dos en el grupo, de t a 1 modo que la densidad de los puntos que forman dicho grupo estableci do (0 un grupo candidato a unirse con é1) no constituye nin- gün factor en la evaluacion del parecido entre dos enLidades.

Para nuestro anâlisis hemos elegido ademâs el método

UPGMA (iniciales en inglés de "unweighted pair-group method using arithmetic averages"), es decir el método no ponderado de grupo par usando médias aritméticas, mediante el cual se computa la semejanza media de un OTU candidate a entrar en un grupo existente, en el que todos los OTUs tienen el mismo "pe so", independientemente de su subdivision estructural. - 77 -

El proceso es como sigue: la matriz de coeficientes de semejanza (en nuestro caso de distancias taxondmicas y de coe ficientes de correlacidn) se examina en busca de los pares mas semejantes», 1 o que lleva como resultado la fusidn entre ellos, que pasan a formar grupos. A continuacidn se recalcula la semejanza entre esos grupos, se seleccionan los pares de gru pos mas semejantes y se unen entre si, continuando asf hasta la ultima fase que consiste en unir en un unico grupo el par al que se llegd en la penultima.

La representacidn de los resultados obtenidos se ha realizado mediante fenogramas que representan las relaciones fe- néticas entre los distintos OTUs. En estos fenogramas, que se presentan con ramas horizontales, la abscisa esta graduada con la medida de semejanza (coeficientes de distancia y de correla cidn) en la que se ha bas ado el anâlisis, y los puntos de b i- furcacidn entre las ramas a 1o largo de la escala indican que el parecido entre ellas se encuentra a nivel del valor del coefici ente sehalado en la abscisa.

Pbr otro lado, la matriz original de datos se reordend de acuerdo con los resultados del fenograma, de este modo los

OTUs (columnas de la matriz) mâs semejantes se colocan lado a lado, 10 que permite observar cuâles son los caractères mâs utiles en la identificacidn de grupos.

Para cada fenograma se cal culd también el respective - 78 -

que intenta expresar el grado de concordancia entre los valores

de semejanza impif citos en el fenograma y los valores origina

les de semejanza a partir de los cuales se realizd el anâli

sis. Estos valores suelen oscilar entre 0,6 y 0,95, dependiendo

del método empleado para la obtencidn del fenograma, conside-

rândose como valor satisfactorioj^0,8, SNEATH y SOKAL (1973).

En la figura 1 se présenta un esquema de cdmo se ha llevado a

cabo el câlculo de los coeficientes de correlacidn

cofenética.

I I . 5 . 5 .2 . Métodos de ordenacidn. Ordenacidn es la disposi

cidn de _t OTUs en un espacio dado de dimensionalidad variable.

En nuestro estudio hemos empleado el anâlisis de componentes

principales, en el que dicho espacio es _n-dimensional, siendo jn

el numéro de caractères; y el anâlisis de coordenadas princi

pales, en el que el espacio tiene t - 1 dimensiones.

I 1. 5 .5 . 2 .1. Anâlisis de componentes principales : Para obtener

una imagen de la distri bueidn de los puntos representativos de

los OTUs en el espacio de _n dimensiones, se empled el método

de anâlisis de componentes principales, que permite substituir

el sistema de _n ejes iniciales por otro t a 1 que uno de los ejes

(primera componente principal) tenga la direccion en la que se

verifica la mayor dispersion de dichos puntos; otro ej e (segun- - 79 -

da componente principal) presente una direccidn ortogonal a la primera en la que se verifica la segunda mayor dispersion de los mismos puntos, y asf sucesivamente.

Este método de anâlisis consiste en calcular:

1) La matriz R de coeficientes de correlacidn entre caractères (_nx_n ), défi ni da por R =j^/(t-l)J X X' , donde es el numéro de OTUs considerados, X la matriz de datos estan dardi zados y X' la matriz transpues ta de X .

2) Los valores propi os: ...... ,X^, donde r n, que son una serie de valores escalares, positives y dis tintos de cero, cuya suma total es igual al rango de la matriz

R . Cada valor propio es igual a la varianza de su correspondiente eje; asf, la primera componente principal, a la que corresponde el mayor valor propio, es la dimensidn que explica la mayor parte de la varianza, a la segunda componente princi pal le corresponde el segundo mayor valor propiu y cAplIca la mayor parte de la varianza, y asf sucesivamente.

3) Los vectores propi os de la matriz R : v v ^ .

V ^, mediante la ecuacidn: { R - XI ) v =0, siendo I la matriz identidad. Los vectores propi os estân asociados a sus correspondientes valores propi os, son ortogonales y descri ben de forma simplificada las relaciones entre los OTUs; es decir, gran parte de la dispersidn debida a los n caractères de los t 80 -

OTUs puede explicarse con un numéro de dimensiones k< r. Los k vectores normalizados,V , dan las direcciones de una serie de k ejes ortogonales en el espacio fenetico, que se conocen como componentes principales. Las coorden^adas de estos ejes son com bi naci ones lineal es de las variables originales y resumen las principales dimensiones de variacidn. Estudiando las componen tes de los vectores propios (direcciones de cada eje) pueden es- tablecerse cuales ban si do los caractères que mas ban contri- buido a conseguir. la separacidn mostrada por el eje en cues- tidn.

4) La matriz de proyeccidn P , es decir la matriz de las coordenadas de los puntos represent ativos de los OTUs en el nuevo sistema de ejes, mediante la ecuacidn: P = V ' X , donde

V ' es la matriz transpues ta de la matriz de vectores propios

V , convenientemente normalizados.

De este modo se obtiene un nuevo conjunto de ejes no correlacionados entre sf y situados por orden de varianza de cree i ente, con el fin de que unas pocas componentes representen la mayor parte de la varianza total de los datos estudiados.

Mediante las coordenadas de los puntos representati vos de los OTUs en el nuevo sistema de ejes, contenidas en la matriz P , se ha realizado la proyeccidn de dichos puntos en el espacio défini do por las dos primeras componentes principales; asimismo se h an proyectado los vectores propios a - 81

partir del mismo origen.

Se ha comprobado que la configuracidn résultante de la representaci dn de los OTUs en el espacio definido por un redu- cido numéro de componentes principales (dos o très) es una ima gen poco distorsionada de su distribueidn.

I I . 5.5.2.2. Anâlisis de coordenadas principales: Dado que algu- n as de las matrices de nuestros anâlisis presentaban valores no conocidos (NC), hemos empleado el anâlisis de coordenadas principales de GOWER (1966), ya que segun ROLFH (1972) éste se Ve menos afectado por la presencia de dichos NC. Efectivamen te, en este anâlisis se parte de una matriz de distancias D , y la distancia entre cada par de OTUs, dj^, se calcula atendiendo unie amente a aquéllos caractères que no tienen NC ni en el OTU j ni en el OTU k.

En este método la matriz de distancias entre OTUs se transforma de modo que los elementos de los primeros k vectores propios extraidos de ésta puedan interpretarse comolas coor denadas de los puntos P. represent ativos de los OTUs en el es pacio de k dimensiones. Asf, si D es la matriz de distancias euclidianas médias, cuyos elementos djj^ representan las dis tancias entre todos los pares de OTUs, la matriz E se define como aquélla cuyos elementos son: ej^=-l/2 d ^ , y la ma triz transformada F serâ aquélla cuyos elementos: 8 2

fjk=ejk-:j-ek+:

esto es, cada elemento e j se corrige restandole la media de t o d o s Ids e l e m e n t o s de su f i l a y la media de todos les elemen to s de su columna, y sumandole la media de todos 1 os elemen tos de la matriz E .

A continuacion se cal cul an 1 os val ores propi os y 1 os vectores propi os de la matriz F : F X = X A , donde A es la matriz diagonal de val ores propi os y X es la matriz de vectores propi os. Posteriormente se normalizan las columnas de la matriz

X de modo que la suma de los cuadrados de 1 os elementos de la columna i sea X^. , o sea: X ' X = A . Finalmente, los elemen tos de la fila i de la matriz X son las coordenadas de P ^.

II. 5. 5. 2. 3. Comparée ion entre analisi s de componentes princi pales y analisi s de coordenadas principales : Con e1 fin de ob server la semejanza entre la dis tri bue ion de los OTUs obtenida en e1 analisi s de componentes principales y la procedente del analisi s de coordenadas principales, se realizo une comparacidn entre matrices del modo si gui ente:

l)En e1 analisis de componentes principales se extraje- - 83 - ron dos matrices de distancias D ^ Y D ^ ^ partir de las ma trices de proyecciones P ^ y ? 6e dos y très filas res pect ivamente, que corresponden a las coordenadas de los puntos en las dos y très primeras componentes principales.

2) En el analisi s de coordenadas principales se trans- pusieron en primer lugar las matrices de proyecciones W ^ y

W 2) obteniéndose asf dos matrices W ' ^ y W '^ con dos y très filas respectivamente, a partir de las cuales se cal cula- ron las matrices de distancias ^ i ^ ^ 2*

A continuacion se calcularon los coefici entes de correlacidn entre D ^ y G ^ * Y entre y G ^ , y se obtuvieron las proyecciones de cada par comparado de matrices en un eje de coordenadas.

Mediante esta técnica es posible comprobar si las re lac i ones fenéticas exis tentes en una matriz son o no congruen tes con las existentes en otra.

En la figura 2 se présenta un esquema del método seguido para realizar esta comparacion. ^ III. RESULTADOS - 85 -

En el capftulo de resultados se pueden distinguir très grandes apart ados. En e1 primero de ellos se recogen los resul tados obtenidos mediante una mi nueios a revision de todos los antecedentes que se han recopilado sobre los dos géneros obje-

10 de nuestro estudio, Rotylenchus y Orientylus, tanto en 1o referente a su posicidn sistematica como a las citas que de los mismos se han realizado en Espaha y en e1 resto del mundo.

En e1 segundo apart ado se dan los resultados del estu dio nematoldgico, realizado sobre material recogido por nosotros, que incluye las muestras positivas, las poblaciones encontradas, las especies en que estas han si do agrupadas y las des cri pci ones detailadas de las mismas.

Finalmente, en e1 tercer apart ado se exponen los resul tados de los analisi s de taxonomfa numérica que hemos re ali zado, utilizando para ello tanto las poblaciones descri tas en la bibliografia que hemos consider ado mas adecuadas, como las estudiadas por nosotros.

I I I . 1. Révision de los antecedentes.

Incluimos en este apart ado très aspectos diferentes. - 36 -

aunque complementarios, que constituyen el resultado de un ana- lis is exhaustive de la bibliograffa. Estos aspectos pueden re- sumirse en la posicion sistematica compléta de los géneros

Rotylenchus y Orientylus, asf como una relacidn de las espe cies de ambos validas actualmente, una exposicion de las espe cies citadas en nuestro pafs y un analisi s de la distribucion mundial de todas las especies de los dos géneros.

î 11 .1 .1 . Posicion sistematica y especies validas de los gé

neros Rotylenchus y Orientylus.- Iras un prof undo ana- lis is de todos los cambios sistematicos sufridos por e1 géne- r 0 Rotylenchus, hemos crefdo conveniente seguir las propuestas de KRALL (1978), SIDDIQI (1980) y MAGGENTI (1983) fundamentalmente, por considerarlas las mas naturales.

A continuacion damos la posicidn sistematica de los géneros Rotylenchus y Orientylus, acompanada de las especies que actualmente incluye cada une de ellos.

Phylum Nematoda Rudolphi, 1808

Clase Secernentea von Linstow, 1905

Subclase Diplogasteri a M a g g e n t i , 198 3

Orden Tylenchida Thorne, 1949

Suborden Tylenchina Chitwood Chitwood, 1950

Superfamilia Hoplolaimoidea (Filipjev, 1934) Paramo-

nov, 1967 - 8 7 -

F ami lia Hoplolaimidae (Filipjev, 1934) Wieser,

1953

A) Subfami liaRotylench i n ae Golden, 1971

Gënero Rotylenchus Filipjev, 1936

Especie tipo R. robustus (De Man,1876) Filipjev,

1936

Otras especiesiR. abnormecaudatus Van d en Berg _e_t

Heyns, 1974

R. acuspicaudatus Van d en Berg _et

Heyns, 1974

R . a g n e t i s Szczygiel, 1968

R. al pi nus Eroshenko, 1976

R. bialaebursus Van den Berg _e_t Heyns,

1974

R.. brevicaudatus Col bran, 1962

R. breviglans Sher, 1965

R. buxophilus Golden, 1956

R. cal vus Sher, 1965

R . capensis Van den Berg _et Heyns.

1974

R. catharinae Van den Berg e_t Heyns,

1974

R. caudaphasmidius Sher, 1965

R. cypriensis Antoni ou, 1980

R . d a 1 hous iensis Sultan _et Jairajpuri,

1979

R. devonensis Van den Berg, 1975 - 88 -

R. e X i m i u s S i d d i q i , 1964

R. f a l l orobustus Sher, 1965

R . g 1 abratus Kankina e_t Tebenkova,

1980

R . g 0 0 d e y i Loof _et Oostenbrink, 1958

R. gr ac i 1i den s (Sauer, 1958 ) Sauer,

1958

R. heredi'cus (Jairajpuri _et Siddiqi,

1979) Ferraz, 1980

R. incul tus Sher, 1965

R. indorobustus Jairajpuri _et Baqri,

1973

R. ivanovae Kankina _et Tebenkova, 1980

R . 1 auren t i nu s Scogn am i g 1 i o _e_t Talame,

1972

R. microstriatus Siddiqi _et Corbett,

1983

R. neorobustus Sultan _e_t Jairajpuri,

1979

R. nexus Ferraz, 1980

R. phaliurus Siddiqi _et Pinochet, 1979

R. pruni Rashid _et Husain, 1972

R. pumilus (Perry, 1959) Sher, 1961

R. quartus (Andrassy, 1958) Sher,1961

R. rugatocuticulatus Sher 1965

R. triannulatus Van den Berg _e_t Heyns,

1974 - 89 -

R. unisexus Sher, 1965

R . us i t atus Van den Berg _et Heyns,1974

B) Subfamilia Rotylenchoidinae Whitehead, 1958

Género Orientylus Jairajpuri _et Siddiqi, 1977

E specie tipo 0. oriental is (Siddiqi _ejt Husain,

1964) Jairajpuri e_t

Siddiqi, 1977

Otras especies: 0. ci tri (Rashid _et Khan, 1974 )

Jairajpuri £t Siddiqi,

1979

0. geraerti Jairajpuri _et Siddiqi,

1979

0 . helicus (Husain _et, Khan, 1967 )

Jairajpuri _et Siddiqi,

1979

0 . secondus (Mulk e_t Jairajpuri,

1976) Jairajpuri _et

Siddiqi, 1979

0 . siddiqi i (Mulk _et Jairajpuri ,

19 76 ) Jairajpuri _et

Siddiqi, 1979

0 . varus Jairajpuri e_t Siddiqi,

1979 - 90 -

I I I . 1.2. E1 género Rotylenchus en Espaha.- Los problemas taxo- indmicos que plantea e1 género Rotylenchus se ponen de mani- fles to al analizar las citas que de é1 se han realizado en maestro pais. Asf, observamos que en muchos de los trabajos

los autores sol amente han llegado a nivel de género, en dos de

■ellos, JIMENEZ MILLAN et a l. (1965) y JIMENEZ GUIRADO (1978),

solo indican la especie pro xi ma, y en e1 trabajo con mayor mumero de especies determinadas, BELLO (1969), observamos que

(dos de las cinco especies que cita, R. alvaradoi y R. j i menez i ,

'.son actualmente nomine nuda y que R. oriental is fué transferi-

(que es sindnima.

Los resultados obtenidos tras la revision de las citas

(del género Rotylenchus en Espaha se exponen en la Tabla II del capéndice, donde figura la relacidn de especies citadas, indi-

(cando e1 habitat (se pondra (?) cuando e1 autor de la cita no

indique e1 habitat) y la localidad, y codificando los autores cde las citas del modo si gui ente: (1) ARIAS et al . ( 196 3 ); ( 2 )

ARIAS et al .t (19.74) ; (3) ARIAS et al . ( 1979 ); (4) ARTERO et al .

(( 197 5 ); (5) BELLO ( 1969 ); (6) BELLO et al . ( 1965 ); (7) BELLO _et cal . ( 1976 );(8) GADEA ( 1953 ); (9)GADEA ( 1956 ); (10) GADEA

((1962); (11) GADEA (1977); (12) GOMEZ-BARCINA et a l. (1967);

((13) GUEVARA POZO _et ( 1963 y 1964 ); (14) JIMENEZ GUIRADO

((1978); (15) JIMENEZ MILLAN et a l. (1965); (15) JIMENEZ MILLAN e_t ( 1967 ); (17) MONREAL et al . ( 1982 ); (18) PALOMO ( 1979 );

((19) TOBAR JIMENEZ et al. ( 1976 ); y (20) VALCARCE et al . ( 1980) . - 91 -

III . 1. 3 . Distribue ion mundial de las especies de Rotylenchus y

(OrientylusSi exclufmos los trabajos en que se descri ben nuevas especies de los géneros Rotylenchus y Orientylus, encontre- rmos que de las cuarenta y cuatro especies que éstos incluyen, so lamente han si do estudiadas desde otro punto de vista las iquince si gui entes: R. brevicaudatus, R. breviglans, R. buxophi lus, R. cal vus, R. . eximius, R. f a l l orobustus, R. goodeyi, R.

«g r ac i 1 i den s , R . incul tus, R . 1 eurent i nus , R . pumilus, R. quar-

~t u s, R. robustus, R. unisexus y 0. orient al is , esta ultime c i-

^tada como R. oriental is . Efectivamente, en la mayorfa de los

(trabajos solo se indice e1 género y, en los pocos en que se

(determine la especie, ésta suele ser casi exclusivamente R. ro bustus . Por ello, los mapas de distri bue ion geografica a n i- wel mundial de las diferentes especies de Rotylenchus y Or i enty-

11 u s (Figuras 3 a 6) han si do confeccionados teniendo en cuenta sus descri pci ones y todas las citas de u no u otro tipo recogidas, con e1 fin de obtener una panoramica 1o ma s amplio posi ble de como se distribuyen dichas especies geograficamente.

En ellos se observa que R. buxoph i 1 us , R . cal vus, R. p u m i 1us y

R . robustus solo h an si do citados en e1 Hemisferio Norte, donde también se présenta R. goodeyi, que ademas queda res- ttringido a Europa. La especie R. brevicaudatus aparece en Aus tra lia y Sudafrica, habiendo si do citada asimismo en las Islas

Canarias,junto con R. breviglans, que uni camente se habfa

æncontrado en California. En Bulgaria se han citado R. gra- cilid e n s , descri ta en Australia, y R . incul tus, que 1o habfa si do en Africa, donde también se encuentra R. unisexus, que - 92 -

solo se ha citado en este continente y R. f a l l orobustus, am pli am ente distribu 1 do en Europa y en menor grado en America del Norte.

II 1.2. Estudio morfoloqico y taxonomico.

Nuestro trabajo, desde e1 punto de vista nematoldgico, ha consistido en analizar las muestras de suelo y r a f z recogi- d as y en estudiar detenidamente las poblaciones pertenecientes al género Rotylenchus encontradas en ellas. Posteriormente se agruparon estas poblaciones y se determinaron, siempre que fué posible, como algunas de las especies ya descri tas. En los dos apartados si gui entes se exponen los resultados tanto del muestreo realizado como del estudio del material recogido en ellos.

I I I . 2.1. Resultados del muestreo realizado.- De las 314 mues tras rscogidas y analizadas, sol amente 32 han s(do positivas pa ra e1 género Rotylenchus, con un total de 33 poblaciones dife rentes, ya que la muestra n“ 5340 presentaba dos poblaciones pertenecientes a dos especies distintas. El conjunto de pobla ciones, en las que se han seleccionado para su estudio un total de 155 adultos, han resultado pertenecer a siete especies, dos de ellas nuevas para la ciencia, que son las si gui entes:

R. brevicaudatus: se ha encontrado en las cinco muestras - 93 -

si gui entes: 3952 , 4994 , 5340 (a), 5341 y 5344 ;

R . catharinae: se ha encontrado en 1 assi gui entes muestras:

3933, 3977, 3990 y 4072.

R . incul tus: se ha encontrado en las muestras 4992 y 5352 .

R . pumilus: se ha encontrado en très muestras: 3930, 4058 y

5336.

R . uni sexus : se ha encontrado en las nueve muestras si gui entes:

3931, 3945, 3946, 4177, 5248, 5321, 5337, 5339 y

5350.

R . maqnuss p. n.: se ha encontrado en las nueve muestras s i-

guientes: 3824, 3825, 3828, 3829, 3954, 3959,

3987, 3988 y 5340 (b).

R. mesorobustus s p. n.: se ha encontrado en la muestra n" 5343

n I I .2.2. Peseripcidn de las especies encontradas.- En este capartado damos una descri pci on morfologica detallada de cada

LU na de las especies encontradas, en la que inclufmos los valo- r es morfométricos de las distintas poblaciones estudiadas, ssiendo _n e 1 numéro de individuos de cada una de ellas y figurando para cada carâcter en primer lugar la media aritmética die los val ores de toda la poblacidn, y a continuacidn y entre parentes is los val ores mfnimo y maximo de la misma. Se indi- c:a también e1 habitat en que han si do encontradas y se hace uina serie de observaciones sobre su estudio morfométrico, com- parandolo con e1 dado por otros autores o, en e1 caso de las niuevàs especies, una diagnosis diferencial. . 94 -

R. brev icaudatus

Medi das :

- Muestra n° 3952

Hembra (n = 5): L = 748,6 iJm. ( 693 ,2 - 788, 1 ) ; a = 24 ,2 ( 21 ,3 - 25 ,6 ) ;

b = 5,8 (5,4-6,2); b'=4,7 (4,4-4,9); c = 61,3

( 45 ,3-70 , 1 ); c'=0,7 (0,5-0,9); St= 26,9 ,um.

(26,7-27,0); V=61,8 % (61,0-62,6); 0=35,3 %

(32,5-37,0); M=47,9 % (46,9-49,4).

- Muestra n° 4994

Hembra (n = 9): L = 770,8 xim. ( 734 ,7 -820 ,3 );a = 21,9 (19,9-24,8);

b = 6,5 (5,6-7,0); b'=5,8 (4,7-6,1); c = 61,9

( 46,4-80,7 ); c'=0,6 (0,5-0,7); St= 26,0 iim.

(25,3-26,7); V=62,5 % (58,6-64,4); 0=35,0 %

(30,8-38,7); M=49,3 % (48,7-50,0).

- Muestra n ° 5340 ( a)

Hembra (n = 4 ): 1 = 825,2 iim. ( 803 , 4-860 , 2 ) ; a = 23 ,6 ( ? 1 ,8-25 , 4 ) ;

b = 6,9 (6,2-7,5); b'=5,8 (5,3-6,1); c = 81,0

(64,1-92,5); c'=0,5 (0,4-0,6); St= 25,9 wm.

(25,7-26,3); V=60,9 % (60,3-62,0); 0=33,1 %

(30,4-35,9); M=49,0 t (48,1-50,0).

- Muestra n ° 534 1

Hembra (n = l): L = 767 ,8 xim. ; a=25,9; b = 6,0; b'=4,9; c = 76,8

c'=0,5; St= 25,7 jjm.; V = 62,6 %; 0 = 32,5 ï ; - 95 -

M=48,0 %.

- Muestra n" 5344

Hembra (n=l): L=757,6 wm.; a=31,9; b=7,0; b'=5,5; c=57,0

c'=0,9; St= 27,7 AJm.; V = 61,7 %; 0 = 18,1 %;

M=49,4 %.

Descri pci on :

H e m b r a Cuerpo arqueado en espiral una vez muerto, con una

canchura maxima de 33,2 Aim. ( 23 ,7 -38, 1 ). Region labial alta,

semiesferica, no separada o muy ligeramente y con 4, a veces 5

'“ anillos". Porcidn anterior del estilete (metenchium) ligera- miente mas corta o igual a la porcidn posterior (telenchium).

Mddulos del estilete redondeados, a veces con la superficie an

te rio r aplanada, y 5,0 /jm. (4,0-5,7) de anchura y 2,6 Aim, (2,3-

33,5) de altura. Distancia del o rificio de la glandula dorsal a

11a base del estilete de 8,8 Aim. (5,0-10,7). Bui bo esofagico me-

di i 0 de 15,1 -um, (12,7-19,3) de longitud y 10,1 jum. (.9^0-11 B)

die anchura, ocupando de 6 a 10 "anillos". Margen posterior del

b)ulbo medio a 88,9 Aim. (78,7-99,3) del extremo anterior. Longi

tud del esdfago de 121,3 Aim. ( 108,3-136,7). Poro excretor a n i -

v/el de la unidn esdfago-intestino, a 120,6 Aim. (104,7-133,3)

diel extremo anterior. Hemizdnido de 1,5 a 2,5 "anillos" de lon-

gjitud, variando su posicidn de 3 "anillos" anterior a 1 poro ex-

C’.r e to r a frente a este. Anchura de los "anillos" hacia el cen-

t.ro del cuerpo de 1,5 Aim. (1,3-1,8). Fasmidios situados de 8 - 96 -

"anillos" antes del nivel del ano a dos "anillos" por detras del mismo. Region caudal redondeada, con 7-11 "anillos", 12,1

Aim. (8,7-16,0) de longitud y 19,5 Aim. (14,7-22,0) de anchura.

Macho : No se ha encontrado.

Habitat La especie R. brevicaudatus ha si do encontrada en suelo alrededor de las si gui entes plantas: Genista cf. f 1o- rida (muestra n ° 3952) de Brieva de Cameros (Logroho), C i t i s u s

scopar i us (muestra n° 4994 ) de la.Sierra de San Vicente (Tole do), roble (muestra n ° 5340 ) y Juniperus oxycedru s (muestra n °

5341 ) de Mirantes de Luna, y avellano (muestra n“ 5344 ) de Ca- sares de Arbâs, ambas localidades de la provincia de Léon.

Observaciones .- La morfologia y los val ores morfométricos de nuestros individuos de la especie R. brevicaudatus c o i n c i d e n plenamente con las descri pci ones de COLBRAN (1962), SHER (1965) y VAN DEN BERG y HEYNS (1974 ), observandnçp unirampnfp A1 nu- nas pequehas diferencias, que consisten en que se is de los veinte individuos estudiados presentan una longitud total entre

803 ,4 y 860 ,2 Aim. f rente a 800,0 yum. que es e 1 Ifmite superior dado para la especie por VAN DEN BERG y HEYNS (1974); un individuo présenta un indice _a ligeramente superior al Ifmite dado por los mismos autores (31,9 frente a 30,6); un individuo pré senta un estilete 0,7 Aim. superior al Ifmite dado por COLBRAN

( 1962); nueve individuos presentan un fndice V al go superior - 97 - a 1 limite dado por SHER (1965) ( 62 ,6-64 ,4 % frente a 62,0 %); finalmente, siete individuos presentan un indice _0 ligeramente superior al limite dado por VAN DEN BERG y HEYNS (1974) (36,8-

38,7 % frente a 36,4 %). Por otro lado hemos de sehalar que si bien la especie esta descrita con machos, nosotros no hemos encontrado ni nguno.

R. catharinae

M e d i d a s :

- Muestra n° 3933

H e m b r a (n = l): L = 983 ,0 jum.; a=23,2; b = 7,l; b'=5,9; c = 95,4

c ' =0,5 ; St= 34,7 Aim.; V = 58,l % ; 0 = 14,4 %;

M=48,l %.

- Muestra n° 3977

Hembra (n = l): L = 994 ,8 Aim.; a=20,6; b = 8,5; b ' =6,2 ; c = 69,6;

r'=n,6: St= 33,0 Jjm-: V = 54,7 t: n = 15J %:

M=48,5 %.

- Muestra n' 3990

Hembra (n = 4): L = 948,l Aim . ( 89 7 , 4 - 1000 ,0 ) ; a = 2 3 ,8 ( 2 2 , 1 - 2 5 ,8 )

b=7,7 (7,5-7,9); b'=6,l (6,0-6,3); c=79,4

(71,8-85,5) c'=0,5 (0,4-0,5); St= 33,9 Aim.

(32,3-35,3) V=58,0 % (54,1-61,9); 0=14,70 %

(14,1-15,7) M=48,7 % (46,9-50,0). - 98 -

- Muestra n 4072

Hembra (n = 10 ) :L = 951 ,6 ^m.( 833 ,9 -1061 ,0 );a = 24 ,8 ( 23 , 3 -26 , 7 );

b=8,5 (7,4-9,2); b'=6,8 (6,0-7,2); c=75,8

(61,3-107,3); c'=0,6 (0,4-0,7); St= 31,0 Aim.

(28,7-33,0); V=56,2 % (54,6-58,1); 0=16,3 %

(15,2-18,2); M=48,7 % (47,2-50,0).

Macho (n=10): L=842,l Aim. (759,3-946,6);a=27,5(25,0-32,3);

b=7,5 (6,9-8,3); b'=5,9 (5,4-6,4); c=35,9

(31,2-40,6); c'=l,2 (1,0-1,4); St= 28,2 Aim.

(25,7-30,0); 0=21,8 % (18,0-26.2);gubernacu-

1 um=14,4 AJm. (13,0-16,0); espiculas = 35,8^m.

( 32 ,0-37 ,7 ); capitul um = 9 , 4 Aim. (9,0-10,7).

Descripcion :

H embr a. Cuerpo arqueado ventralmente en forma de "C" mas

0 menos cerrada, con una anchura maxima de 39,5 A i m . (35,6-

4 3,2). Region labial muy redondeada, separada y con 5-7 "ani llos". Metenchium ligeramente mas corto o igual al telenchium.

Nodulos del estilete redondeados, de 5,6 A i m . (4,7-6,7) de an chura y 2,6 A i m . (2,3-3,0) de altura. Distancia del orificio de la glandula dorsal a la base del estilete igual a 5,0 Aim. (4,7-

6,0). Bulbo esofagico medio de 17,3 A i m . (14,0-19,0) de longi tud y 12,4 A i m . (10,7-14,3) de anchura, ocupando de 7 a 12 "ani llos". Margen posterior del bulbo medio a 91,8 Aim. (82 ,0-102 ,7) del extremo anterior. Esofago con una longitud de 116,6 A i m . - 99 -

(102,3-137,7). Poro excretor posterior a la union esofago- intestino, a 126,6 Aim. (116,0-137,0) del extremo enter i or. Hemi- zonido de 1,5 a 2,5 "anillos" de longitud, variando su posi cidn de inmediatamerLte anterior a inmediatamente posterior al poro excretor. Anchura de los "anillos" de 1,6 Aim. (1,3-1,8) en la zona media del cuerpo. Fasmidios situados de 2 a 10 "ani llos" por del an te del nivel del ano. Region caudal redondeada con 8-14 "anillos" y 12,3 Aim. (8,3-12,3) de longitud y 23,6

(20 ,0-28 , 3 ) de anchura.

Macho.- Similar a la hembra. Cu6Tpo ligeramente arqueado hacia el lado ventral, con una longitud algo inferior a la de la hembra. Estilete ligeramente mas corto y region caudal mu- c ho mas larga, 23,6 Aim. (18,7-26,7), que en la hembra. Bursa envoiviendo totalmente la region caudal.

Habitat .- La especie R. catharinae ha si do encontrada en sue lo alrededor de las si guientes plantas: Cal'luna vulgaris (mues tra n" 3933) de la Sierra de Carazo (Burgos), esoarceta (mues tra n° 3977 ) de Bezares, Prunus avium (muestra n' 3990 ) de la

Ermita de San Mi 11 an y Erica vagans (muestra n“ 4072 ) de Monte- mediano, perteneciendo estas très ultimas localidades a la provincia de Logroho.

Observaciones . Nuestros individuos de la especie R. cathari nae coinciden totalmente con los descritos por VAN DEN BERG y

HEYNS (1974). Ahora bien, dado que la especie se describid a 100

partir de très individuos (dos hembras y un macho) unicamente y que no exis ten otras poblaciones decritas en la bibliogra-

fi'a, los interval os de variacion son minimos en e 1 caso de

las hembras y nulos en e1 caso del macho. Este hecho hace que

las 16 hembras y los 10 machos estudiados por nosotros no pre-

senten en todos los casos sus val ores morfométricos iguales a

los de la poblacidn original, si bien las diferencias existen

tes son mini mas y se reducen a que en general las hembras estu

diadas por nosotros presentan una regidn caudal mas corta y

un indice _0 al go mayor (14-18 % f rente a 12,2 % ), 1 o que se ex

pli ca ademas por ser 12,2 % e1 unico valor dado por los auto

res. Con respecto al macho, hemos de sehalar que en general los

estudiados por nosotros presentan un tamaho ligeramente infe

rior.

R . incul tus

Medidas

- Muestra n' 4992

H embr a (n = l): L = 805 ,l xjm.; a=31,7; b = 8,3; b'=6,8; c = 58,8

c'=0,8; St= 28,0 Aim.; V = 60,5 %; 0 = 17,8 %;

M=50,0 %.

Macho (n = 2): L = 752 ,5 y 802 ,5 Aim.; a=35,l y 35,5; b = 7,2 y

7,9; b'=5,7 y 6,4; c=39,0 y 40,1; c'=l,4;

St= 25,7 y 26,0 Aim.; 0 = 23,1 % (n = l) ;guberna- - 101 -

c u 1 um = 8,7 y 9,7 Aim.; espîculas=24,7 y 26,3

pm.; capitu1um=5,7 y 6,7 jum..

- Muestra n' 5.352

Hembra (n = 7): L=913,0 A im . ( 857 ,6-990 , 7 ) ; a=30 ,5 ( 25 ,6-33,2 )

b = 8,l (7,8-8,6); b'=6,4 (5,9-6,7); c = 68,9

( 54 ,9 -80 ,5 ); c'=0,9 (0,7-1,1); St= 31,1 Aim .

(28,0-32,7); V=59,2 % (57,1-61,5); 0=30,2 %

(26,5-32,6); M=46,9 % (45,9-47,6).

Descripcion :

H embr a.- Cuerpo arqueado ventralmente en forma de espiral,

con una anchura maxima de 29,5 Aim. ( 25 ,4-33 ,9 ). Region labial

semiesférica, no separada y con 4 o 5 "anillos". Metench i um l i

geramente mas corto o igual que e1 telenchium. Nodulos del es

tilete redondeados, a veces con la superficie anterior algo mas aplanada y 6,0 Aim. (5,7-6,3) de anchura y 2,7 Aim. de altu

ra. Distancia del orificio de la glandula dorsal a la base del

estilete de 8,8 Aim. (5,0-10,0). Bulbo esofagico medio de 16,5

Aim. (15,0-19,3) de longitud y 11,5 Aim. (10,7-13,0) de anchura,

ocupando de 9 a 11 "anillos", y con e1 margen posterior a 90,2

Aim. ( 74 ,0-96 ,3 ) del extremo anterior. Esofago de 109,9 Aim.

(97,3-118,7) de longitud. Poro excretor situado posteriormente

a la unidn esdfago-intestino, a 122,0 Aim. (110,7-131,0) del

extremo anterior. Hemizdnido de 2 a 2,5 "anillos" de longitud,

variando su posicidn de 1 "anillo" anterior al poro excretor a

nivel de este. Anchura de los "anillos" igual a 1,3 Aim. (1,2 - - 102 -

1,5) en la .zona media del cuerpo. Fasmidios en posicidn varia ble, de 6 a 18 "anillos" por del ante del nivel del ano. Regidn caudal cdnico-redondeada con 9-18 "anillos" y 13,5 Aim. (11,7-

16,7) de longitud y 15,4 Aim. (13,7-18,3) de anchura.

Macho.- Similar a la hembra. Cuerpo arqueado ventralmente en forma de "C" abierta, con una longitud ligeramente inferior a la de la hembra. Estilete al go menor y regidn caudal mas larga (19,3 y 20,0) que en la hembra. La bursa envuelve total mente la regidn caudal.

Habitat .- La especie R. incul tus ha si do encontrada en suelo alrededor de Genista cinerea (muestra n" 4992) de la Sierra de

San Vicente (Toledo) y en suelo de prado (muestra n* 5352) de

Genicera (Ledn).

Observaciones .- Los individuos estudiados de la especie R. i n- cul tus coinciden con las descripci ones de SHER (1965) y VAN DEN

BFRG y HEYNS ( 1 974 ). siendo las uni cas diferencias observadas las si gui entes: sais de nuestros individuos presentan un estile te ligeramente superior al limite dado (por. VAN DEN BERG y

HEYNS ( 1974 ) ( 29 ,7 -32 ,7 Aim. f rente a 29,4 Aim.) y dos presentan un fndice _V ligeramente superior al Ifmite dado por los mis mos autores (60,5 y 61,5 % frente a 60,0 %). Por otro lado he mos de sehalar que en la poblacidn correspondiente a la mues tra n“ 5352 no se ha encontrado ningun macho. - 103 -

R ■ pumilus

Medidas :

- Muestra n ° 3930

Hembra (n=2); L=562,7 y 659,5 um.; a=26,3 y 27,9; b=6,5 y

6,6; b'=5,2; c=45,5 y 46,3; c'=l,0 y 1,1;

St=23,0 y 24,3 um.; V=59,0 y 50,6 %; 0=20,3

y 20,5 %; M=50,7 y 52,2 %.

Macho (n = 2): L = 543 ,2 y 552 ,5 um. ; a = 27,2 y 32,0; b = 5,8 y

6,1; b'=4,3 y 4,7; c=26,3 y 29,0; c'=l,4 y

1,5; St= 20,7 y 21,0 um.; 0=17,7 y 19,0 %;

qubernacu1um=8,7 um.; espîeu 1as = 21,3 y 22,0

um.; capitulum=6,3 y 6,7 um..

- Muestra n ° 4058

Hembra (n = 9): L = 710,4 um.( 683 ,0-753 ,4 ); a=26 ,8 (24 ,4-27 ,9 )

b = 6,5 (6,4-6,8); b'=5,l (4,9-5,3); c = 45.2

(41,2-43,9); c'=l,l (1,0-1,2); St= 25,2 um.

(24,3-26,0); V=59,5 % (58,6-61,2); 0=18,2 %

(11,7-21,6); M=51,l % (50,6-52,0).

M acho (n = 4 ) : L = 593 ,2 um. (572 ,9-605 , 1 );a = 30 ,7 (28,5 - 35 ,6 ) ;

b = 5,8 (5,3-6,1); b'=4,4 (4,3-4,5); c = 30,2

( 26 ,6-32 ,3 ); c'=l,4 (1,3-1,4); St= 21,8 um.

(20,7-22,3); 0=18,0 % (14,9-21,0);qubernacu-

1um= 8,6 um. (8,0-9,3); espiculas= 23,2um. 104

( 22 ,0-24 ,3 ); capitu1um = 6,2 Aim . (6,0-6,7).

- Muestra n° 5336

Hembra (n = 9): L = 555 ,4 Aim. ( 514 ,4-615 , 2 ) ; a=27 , 3 ( 26 , 1-29 ,0 )

b=6,7 (6,2-7,2); b'=5,6 (5,1-6,0); c=52,9

( 48 , 1-59 ,9 ); c'=0,8 (0,6-0,9); St= 21,5 Aim.

(21,0^22,0); V=60,9 % (59,3-64,3); 0=11,6 %

(9,5-13,8); M=53,9 % (51,6-55,5).

Macho (n = 2): L = 535 ,6 y 547 ,4 Aim.; a=30,l y 32,3; b = 6,0;

b'=5,5; c=34,l y 43,1; c'=l,2 y 1,6; St=19,0

y 19,3 Aim.; 0=10,3 y 14,0 % ; gubern acu 1 um =

8,0 y 8,7 Aim.; espiculas = 23,0 y 23,7 um.;

cap1tu1um=6,3 Aim..

Descripcion :

H embr a.- Cuerpo arqueado hacia el lado ventral en forma de aspirai abierta, con una anchura maxima de 23,5 Aim (18,6-30,5)

Region labial semiesférica, continua con el resto del cuerpo

0 muy ligeramente separada y con 4 "anillos" (3 en una hembra).

Metenchium mas largo que el telenchium. Nodulos del estilete redondeados de 4,2 Aim. (3,7-5,3) de anchura y 2,1 Aim. (1,7-2,7) de altura. Distancia del orificio de la glandula dorsal a la base del estilete igual a 3,7 Aim. (2,0-5,3). Bulbo esofagico medio de 12,2 Aim. (9,7-14,7) de longitud y 8,3 Aim. (7,0-9,0) de anchura, ocupando de 6 a 8 "anillos" (9 en una hembra y 11 en - 105 -

otra), con el margen posterior situado a 72,7 um. (59,3-90,0) del extremo anterior. Esdfago de 96,7 um. (78,7-115,3) de lon

gitud. Poro excretor situado a nivel de la unidn esdfago-

intestino, a 94,3 um. (76,7-107,0) del extremo anterior. Hemi

zdnido de 1,5 a 2,5 "anillos" de longitud y situado o inmedia

tamente anterior al poro excretor o frente a este. Anchura de

los "anillos" en la zona media del cuerpo igual a 1,4 um. (1,2-

1,5). Fasmidios situados a nivel del ano o hasta 5 "anillos"

por detras del mismo. Regidn caudal cdnico-redondeada, con

6-14 "anillos" y 13,3 um. (9,3-18,0) de longitud y 13,5 um.

(12 ,0-15 ,7 ) de anchura.

Macho.- Similar a la hembra, aunque de menor tamaho. La

longitud de la regidn caudal, 17,2 um. (12,7-19,3), es lige

ramente superior a la de la hembra. La bursa envuelve completamente la regidn caudal.

Habitat .- La especie R. pumilus ha si do encontrada en suelo

alrededor de las siguientes plantas; Juniperus thurifera (mues

tra n" 3930 ) de Virgen de Talamanqui11 a (Burgos), boj (muestra

n“ 4058 ) de Torrecilla de Cameros (Logroho) y Erica umbel lata

(muestra n' 5336) de Cabanilias (Ledn).

Observaciones .- Los individuos de la especie R . pumi1 us estu

diados por nosotros encajan perfect amen te dentro de las des

cri pciones dadas por PERRY (1959), SHER (1955) y KANKINA y TE

BENKOVA (1980), exceptuando solamente que dos hembras presentan 106

una longitud ligeramente superior y seis ligeramente in fe rio rs

los limites dados por SHER (1965) (745,8 y 753,4 um. y

514,4-557,6 um. frente a 740,0 um. y 570,0 um. respectivamen

te); siete hemoras presentan un estilete ligeramente inferior

al limite dado por PERRY (1959) (21,0-21,7 um. frente a 22,0 um.); nueve hembras presentan ‘ el fndice ^ inferior al valor

mfnimo dado por SHER (1965) (9,4-12,5 % frente a 13,0 %); y

nueve hembras presentan en fndice ligeramente superior al

Ifmite dado por KANKINA y TEBENKOVA (1980) (52,2-55,5 % frente

a 52,0 %). Con respecto a los machos, debemos indicar que todos

sus caractères se ajustan perfect amente a las descripci ones se-

haladas, con la unica excepcidn de dos individuos que presen

tan un estilete, y uno de ellos un fndice _0, ligeramente infe-

rlores a los Ifmi tes dados por SHER (1965) ( 19 ,0 y 19,3 um.

f rente a 20 ,.0 um., y 10,3 % f rente a 11,0 % respect ivamente).

R. unisexus

Medidas :

- Muestra n° 3931

Hembra (n=4): L=710,4 um.(627,1-761,9); a=23,7(21,9-25,5)

b = 7,0 (6,9-7,2); b'=5,2 (4,5-5,5); c = 67,l

( 54 ,4-79 , 5 ); c'=0,7 (0,6-0,8); St= 25,7 um.

(24,3-28,0); V=59,3 % (59,0-59,8); 0=13,2 %

(12,3-14,3); M=47,9 % (46,6-48,8). - 107 -

- Muestra n* 3945

Membra (n = 4): L = 754,l tim. ( 688 ,1-820 , 3J ; a = 2 7 ,4 ( 2 5 ,4-30 ,0 )

b = 7,l (6,5-7,6); b'=5,5 (5,1-5,8); c = 64,2

(60,9-69,7) c'=0,7 (0,7-0,8); St= 27,8 xjm.

(27,0-28,7) V=60,9 % (50,2-62,0); 0=13,2 %

(12,0-15,5) M=51,5 % (52,3).

- Muestra n° 3946

Membra (n = 3): L = 785 ,3 wm.( 703 ,4-869 , 5 ); a = 30 ,9 (29,8 - 32 ,1 )

b = 7,l (6,7-7,5); b'=5,6 (4,9-6,2); c = 58,9

(58,6-59,1); c'=0,8 (0,8-0,9); St= 28,0

(27,0-28,7); V=58,0 % (57,3-58,5); 0=27,0 %

(23,2-29,6); M=50,4 % (50,0-50,6).

- Muestra n° 4177

Membra (n=8): L=630,8 urn.(591,5-690,7); a=26,9(22,7-29,5)

b = 6,5 (6,2-6,8); b'=5,3 (4,8-5,5); c = 64,5

(54,1-75,4) c'=0,7 (0,6-0,8); St= 27,6 wm.

(26,7-28,7) V = 6 3,3 ■*: (60,0-65,4 ); 0=15,3 t

(15,0-21,7) M=55,9 % (54,9-56,6).

- Muestra n* 5248

Membra (n = 4): L = 685 ,3 urn.( 618 ,6-738 , 1 ); a=25 , 1 (24 ,3-26 ,7 )

b = 6,8 (6,6-7,0); b'=5,6 (5,4-5,9); c = 49,5

(38,2-61,8); c'=0,9 (0,7-1,1); St= 27,3 urn.

(26,0-28,3); V=59,7 % (58,3-61,9); 0=13,2 %

(10,6-15,4); M=52,4 % (51,3-53,5). 108 -

- Muestra n° 5321

Hembra (n = 5): L = 648,4 tim. ( 61 1 ,9-696 ,5 ) ; a=24 ,5 ( 19 ,7-27 ,8 )

b = 6,2 (5,5-6,7); b'=5,3 (4,6-5,9); c = 60,7

( 53 ,6-65 ,9 ); c'=0,8 (0,7-0,9); St= 27,8 nm.

(27,3-28,3); V=62,5 % (61,2-63,8); 0=11,5 %

(10,6-12,0); M=51,l % (50,0-51,8).

- Muestra n° 5337

Hembra (n=2): L=826,3 y 837,3 um.; a=29,5 y 30,0; b=8,3 y

8,5; b'=6,l; c=59,0 y 65,9; c'=0,6 y 0,7;

St=29,7 um.; V=59,8 y 60,5 %);0=25,8 y 28,1%

M=50,6 %.

- Muestra n ° 5339

Hembra (n = 4): L = 744 ,2 wm.( 616 ,9-839,8 ); a=26 ,0 ( 20 ,8-30 ,0 )

b=7,4 (6,5-8,3); b'=6,l (5,3-6,8); c=55,2

( 46,8-60,0); c'=0,8 (0,7-0,8); St= 27,3 wm.

(24,7-29,3); V=62,l % (59,9-65,6); 0=27,2 %

(25,0-29,7); M= 50,0 %.

- Muestra n* 5350

Hembra (n=5): L=701,l wm.(603,4-765,2); a=27,9(25,8-29,9)

b = 6,2 (5,4-6,7); b'=5,5 (4,9-6,0); c = 57,7

( 50 ,3-60 ,3 ); c'=0,9 (0,8-1,0); St= 25,9 tim.

(24,7-26,7); V=59,9 % (56,9-61,9); 0=19,0 %

(15,4-21,2); M=49,4 % (47,5-50,0). - 109 -

Descri pci on :

H embr a Cuerpo arqueado had a el lado ventral en forma de espiral cerrada, con un a anchura maxima de 26,6 iim. (21,2-

34,-7). Region labial de semiesférica a truncada, no separada,

0 muy ligeramente, del resto del cuerpo, y con 4, a veces 3 o 5

"anillos". Metench i um ligeramente mas corto, igual o ligeramen te mas largo que el telenchium. Nodulos del estilete redondeados, de 5,2 >um. (4,3-6,3) de anchura y 2,4 iim. (2,0-3,0) de al - tura. Distancia del o rificio de la glandula dorsal a la base del estilete igual a 4,9 >um. (3,0-8,3). Bui bo esofagico medio de 13,6 iim. (11,7-18,0) de longitud y 9,4 xjm. (8,0-12,0) de an chura, ocupando de 6 a 10 "anillos" y con el mar gen posterior a

77,7 Ajm. (69,3-91,3) del extreme anterior. Esofago de 103,2

AJm. (87,3-120,0) de longitud. Poro excretor si tu ado a nivel de la union esofago-intestino, a 102,8 Ajm. (86,7-118,7) del ex treme anterior. Hemizonido de 1,5 a 2,5 "anillos" de longitud, variando su posicidn desde un "anillo" per del ante del poro ex cretor a inmediat amente posterior a este. Anchura de 1 os "ani llos" igual a 1 , ^ ii m . ( 1 ,1 - 1 > 8 ) h a c i a la zona media del cuerpo.

Fasmidios situados de 1 a 9 "anillos" posteriores al nivel del ano. Region caudal de cdnico-redondeada a semiesférica, con

7-15 "anillos", y 11,9 Ajm. (8,7-19,3) de longitud y 15,3 iim.

(11,7 -20 ,7 ) de anchura.

Macho.- Desconocido. - 110 -

Habitat La especie R. uni sexus ha si do encontrada en suelo alrededor de 1 as si gui entes plantas: Quercus pyrenaica (muestra n“ 3931) de la Sierra de Carazo (Burgos), cervunal (muestra n °

3945) y brezal (muestra n°3946) de Viniegra de Arriba (Logrono), majuelo (muestra n' 4177) de Horna (Guadalajara), Juniperus sa- bina (muestra n ** 5248 ) de Mas de Pina (Teruel), yermo (muestra n“ 5321) de Monteagudo del Castillo (Teruel), robles (muestras n“ 5337 y n° 5339) de Sorribos de Alba y Mora de Luna, respectivamente, y pasto (muestra n ° 5350 ) de Canseco, perteneciendo es tas très ultimas localidades a la provincia de Léon.

Observaciones .- Los individuos estudiados de la especie R. uni sexus coinciden con las descri pci ones de SHER (1965) y VAN

DEN BERG y HEYNS ( 1974 ) si bien hemos de sehalar que cuatro de nuestros individuos present an un estilete con u n a longitud lige ramente superior al Ifmite dado por SHER (1965) (29,3-29,7 >um. trente a 29,0 AJm.), diecisiete individuos present an un l'ndice

_M superior al limite dado por VAN DEM BERG y HEYNS (1971)

(51,2-56,6 % trente a 51,0 %); tinalmente, hemos observado que la mayor ta de nuestras hembras presentan la vulva en u n a posi cidn mas retrasada a la indicada por 1o s autores mencionados,

10 que h ace que e 1 indice _V de 32 de ellas s e a superior al 1 f - mite dado por 1o s mismos (59,2-65,6 % trente a 59,0). - I l l -

R. magnus sp. n.

(Fig. 7)

Med Idas:

H 0 1 0 1 i p 0 (hembra): L = 1939 , 3 >um.; a = 37,0; b= 10,7; b ' =7 , 3 ;

c = 72,6; c'=0,7; St= 65,3 >um.; V= 54,2 %;

0=12,7 %; M= 53,1 %.

P ar at i pos (11 hembras): L = 1795 ,0 jam. ( 1520 ,4-2144 ,5 ); a=34,2

(31,6-36,9); b=9,8 (8,7-11,8); b'= 6,9 (5,9-

8,2); c= 72,8 (61,8-92,0); c'=0,7 (0,6-0,9);

St= 64,1 AJm. ( 59 ,0-70 ,0 ); V= 53,2 % (51,5-

54.7); 0= 10,1 % (6,4-13,3); M=53,2 % (51,0-

54.8).

Descripcion:

Hembr a.- Cuerpo arqueado hacia el lado ventral en forma de

""C" O' en espiral, con un a anchura maxima de 52,4 Aim. (48,2-

650,7 en 1 os par atipos). Region labial redondeada, separada del

iresto del cuerpo y con 6-7 "anillos". Metenchium con una longi-

ttud superior a la del telenchium. Nodulos del estilete con la

superficie posterior redondeada y la anterior mas aplanada,

99,3 /Um. (7,3-9,3) de anchura y 4,3 Aim. (4,0-4,7) de altura. Dis-

ttancia del o rificio de la glandula dorsal a la base del estile-

tte igual a 8,3 Aim. (4,3-9,3). Bui bo esofagico medio de 26,7

Aum. (21,3-27,0) de longitud y 19,0 Aim. (16,7-19,7) de anchura. - 112 -

cocupando de 9 a 11 "anillos" y con el margen posterior a 146,7

juum. ( 128 ,0-154 ,3 ) del extreme anterior. Esofago de 181,7 Aim.

((170,7-193,3) de longitud. Poro excretor de position variable,

canterior o posterior a la union esofago-intestino y a 219,0

Aum. (170,7-227,3) del extreme anterior. Hemizonido de 2 a 2,5

'"anillos" de longitud, variando su position de 2 "anillos" an-

tterior al poro excretor a frente a este. Anchura de les "ani-

'llos" en la zona media del cuerpo de 2,1 Aim. (1,6-2,2). Fasmi-

cdios situados de 1 a 7 "anillos" por del ante del nivel del ano.

FRegidn caudal corta, muy redondeada y general mente hendida en

eel centro, con 14-19 "anillos", y 26,7 Aim. (21,0-28,7) de long.i-

ttud y 38,3 Aim. (30,0-42,0) de anchura.

Macho.- Desconocido.

Material tipo:

Holotipo: Hembra n° 1 de la preparation RoC. 51; Parati-

p os : hembra n“ 2 de la preparation RoC. 51, hembras n“ 1-4 de

11 a preparation RoC. 52, hembras n“ 1 y 2 de la preparation

RloC. 53, hembras n° 1-3 de la preparation RoC. 54 y hembra n"

11 de la preparation RoC. 55; todas ellas pertenecientes a la

col etc ion de Nematologfa del Institute de Edafologfa y Biolo

gie Vegetal (C.S.I.C.) de Madrid.

Habitat tip o ; Suelo alrededor de Betula sp. (abedul), co-

rrespondiente a la muestra n ° 3824 de la col etc ion de Nematolo- - 113 -

çgfa del Institute de Edafologfa y Biolog fa Vegetal(C.S.I.C.)

(de Madrid, recogida en Abril de 1981.

L^calidad tipo : Puerto de Canencia (Madrid).

Diagnosis diferencial:

Rotylenchus magnus sp. n. se diferencia de todas las restantes especies del genero por el tamano del cuerpo, supe r io r en lanueva especie, y por la longitud del estilete, tam- bién mayor al de todas las especies descritas. Se encuentra algo prdxima a R. robustus, especie de la que se diferencia por una mayor longitud del cuerpo (1520,4-2144,5 Aim. f rente a

1L 220- 1870 Aim.), un fndice_c mayor (61,8-^90,2 frente a 48-70 ), estile te mas largo (59,0-70,0 Aim. f rente a 44-50 Aim.), fndice

V/ menor (51,5-54,7 % frente a 54-58 %) y una region caudal imas corta y de diferente forma, ya que R, magnus sp. n. presen ts a generalmente una bendidur a central; por ultimo, hemos de se- m a 1ar que R. robustus esta descri ta con machos y que no se ha encontrado ninguno en la nueva especie. Asimismo queremos indi- c:ar que para la realizacion de esta diagnosis nos hemos basado e?n la descripcion de R. robustus de SHER (1965) por ser la que présenta 1 os interval os de variation mas ampli os. - 114 -

Otras poblaciones:

Muestra n" 3825 de suelo alrededor de Pi nus sylvestris del

Puerto de Canencia (Madrid), recogida en Abril de 1981, en la

que unicamente se ha encontrado una larva de Rotylenchus mag

nus sp. n..

- Muestra n" 3828 de suelo de pi ornai del Puerto de la Morcue-

r a (Madrid), recogida en Abril de 1981.

Hembra (n=5): L=1834,9 wm.(1528,8-2058,6); a=31,5 (27,0-

33,9); b = 9,6 (8,8-10,3); b'=7,8 (7,0-9,1);

c=64,3 (52,2-73,9); c'=0,7 (0,6-0,8); St=

62.8 Aim. ( 59 , 3-65 ,7 ); V = 54,l % ( 50 , 3-55 ,5 );

0= 8,9 % (7,8-9,6); M=53,6 % ( 52 ,6 -54 ,4 ).

- Muestra n° 3829 de suelo de encinar en Cantoblanco (Madrid),

recogida en Abril de 1981.

H embr a (n = l): L = 2064 ,9 A J m . ; a= 32,9; b= 11,4; b'= 8,4; c =

71,9; c'= 0,7; St= 64,0 Aim.; V= 53,9 %; 0 =

7.8 %; M= 55,2 %.

- Muestra n° 3954 de suelo alrededor de encina de Brieva de Ca-

meros (Logrono), recogida en Mayo de 1981.

H embr a (n = l): L = 2171,7 Aim.; a= 35,7; b= 10,6; b'= 8,2; c = - 115 -

110,2; c ' = 0,5; St= 59,0 Aim.; V= 53,1 %; 0 =

13,5 %; M= 55,1 %.

- Muestra n° 3959 de suelo de haya del Monasterio de Valvanera

((Logrono), recogida en Mayo de 1981.

Hembra (n = 4): L = 2073 ,3 Aim. ( 1897 ,4-2521 ,5 ) ; a= 34,0 (31,3-

38,0); b=12,2 (9,8-15,5); b'=9,9 (8,5-13,7);

c = 115,0 (109,7-118,4); c'=0,4); St= 66,1 Aim.

(62,7-68,3); V=54,2 % (51,7-57,0); 0=9,7 %

(7,8-11,9); M= 53,2 % (51,2-54,2).

Muestra n° 3987 de suelo alrededor de haya de la Ermita de

S) an Mi 11 an (Logrono), recogida en Mayo de 1981.

Hembra (n = 2): L = 1855 ,5 y 2056 ,5 Aim.; a= 31,6 y 32,7; b =

9,6 y 10,7; b'= 7,0 y 7,7; c= 83,2 y 99,2;

c ' = 0,5 y 0,6; St= 60,7 y 64,7 Aim.; V= 52,1

y 53,7 %; 0=12,1 y 13,4 %; M=53,6 y 54,4 %,

Muestra n ° 3988 de suelo alrededor de haya de la ermita de s; an Mi 11 an (Logrono), recogida en Mayo de 1981.

H embr a (n = l): L = 2462 ,8 AJm.; a= 36,7; b= 12,1; b ' = 9,5; c =

97,3; c ' = 0,6; St= 67,3 Aim.; V= 53,2 %; 0 =

11,9 %; M= 52,5 %. - 116 -

Muestra n° 5340 de suelo alrededor de roble de Mirantes de

Luna (leon), recogida en Julio de 1982.

H embr a (n = l): L = 2064 ,9 A i m . ; a= 30,8; b= 10,3; b'= 7,7; c =

121,5; c ' = 0,4; St= 72,7 A i m . ; V= 55,4 %; 0 =

12,8 %; M= 55,0 %.

R. mesorobustus sp. n.

(Fig. 8)

MedIdas:

Holotipo ( hembr a ) : L = 1650 ,3 Aim.; a= 28,1; b= 10,8; b'= 8,3;

c= 115,4; c ' = 0,4; St= 52,0 Aim.; V= 54,3 %

0=13,5 %; M= 57,0 %.

Alotipo (macho): L = 1537 , 2 Aim.; a= 33,4; b= 9,8; b'= 8,0; c =

57,6; c ' = 1,1; St= 48,0 Aim.; 0= 18,0 %;

bernacul um= 20,7 Aim.; espiculas= 45.3 Aim.;

c ap i t u 1 um= 12,7 Aim.

Paratipos (3 hembras): L = 1416,4 Aim. ( 1301 ,7 -1478 ,0 ); a = 28,5

(26,5-31,1); b=8,7 (8,0-9,1); b'=6,8 (6,1-

7,1); c=134,0 (94,1-144,6); c'=0,3 (0,2-0,4)

St= 48,1 Aim. (47 , 3-49 , 3 ); V = 57,6 % (56,4-

59,9); 0=16,8 % (14,1-21,0); M=55,4 % (54,5-

5 7,0). - 117 -

Descripcion:

H e m b r a Cuerpo arrollado en espiral cerrada hacia el lado ventral, con una anchura maxima de 58,6 Aim (47,4-52,5 en 1 os paratipos). Region labial redondeada, ligeramente separada del resto del cuerpo y con 6-7 "anillos". Longitud del metench i um superior a la del telench i um. Nodulos del estilete redondeados con la superficie anterior algo mas plana, 9,7 (8,7-10) de anchura y 4,0 /jm. (3,3-4,0) de altura. Distancia del o rificio de la glandula dorsal a la base del estilete igual a 7,0 Aim.

(6,7-10,0). Bui bo esofagico medio de 22,7 Aim. (22 ,3-26 ,3 ) de

longitud y 20,7 Aim. (15,3-18,3) de anchura, ocupando 8 o 9 "ani

llos" y con el margen posterior a 116,0 Aim. (117,0-123,7) del extreme anterior. Esofago de 152,7 Aim. (161,3-164,7) de longi tud. Poro excretor con posicidn variable, anterior o posterior a la union esofago-intestino y a 183,3 Aim. (147,3-149,3) del extreme anterior. Hemizonido de 1,5 a 2 "anillos" de longitud, variando su posicidn de frente al poro excretor a 3 "anillos" por detras de este. Anchura de les "anillos" de 1,^ Aim. (1,5-

1,9) en la zona media del cuerpo. Fasmidios situados de 5 a 8

"ani 1 les*' anteriores al nivel del ano. Regidn caudal muy cor ta, redondeada y con una hendidura central, con 9-10 "anillos" y 14,3 Aim. (9,0-15,7) de longitud y 36,0 Aim. (28,040,3) de an chura.

Macho.- Similar a la hembra. Cuerpo arqueado hacia el lado ventral en forma de "C". Regidn caudal mucho mas larga que en 118

la hembra y completamente envuelta por la burs a.

Material tipo:

Holotipo: Hembra n* 3 y Paratipos: hembras n* 1, 2 y 4 de

la preparation RoC 86, Alotipo: macho n ° 1 de la preparation

RoC 87, ambas pertenecientes a la col etc ion de Nematologfa del Institute de Edafologfa y Biolggfa Vegetal (C.S.I.C.) de

Madrid.

Habitat tip o : Suelo alrededor de Citisus stoparlus, co rrespond i ente a la muestra n“ 5343 de la col etc ion de Nematolo gfa del Instituto de Edafologfa y Biologfa Vegetal (C.S.I.

C.) de Madrid, recogida en Julio de 1982.

Localidad tip o : Cubillas de Arbas (Leon).

Diagnosis diferencial:

Rotylenchus mesorobustus sp. n. se diferencia claramen te de las demas especies del género, si bien se encuentra prdxima a R. robustus segun la description de SHER (1965), fundamentalmente por presenter un fndice _c muy superior

(94,1-163,3 frente a 48-70) y por tanto una regidn caudal mu cho mas corta, que en la nueva especie se présenta con una hen didura central no descri ta en R. robustus, y por presenter un - 119 -

iindice _a bast ante menor (26,5-31,1 f rente a 32-40) que indica

Luna mayor anchura del cuerpo. En cuanto al macho, este se

[diferencia por una longitud mayor (1537,2 /im. frente a 1060-

11300), un indice _a' menor (33,4 frente a 35-42), indice _cma-

>yor (57,6 frente a 33-41), estilete mas largo (48,0 Aim. frente

a 41-44 Aim.) y espiculas de mayor longitud (45,3jjm. frente a

234-40 A*m.). Por otra parte, hemos de senalar que de R. magnus

sp. n. se diferencia en general en 1 os mismos aspectos en que

este se diferenciaba de R. robustus.

II 11.3. Estudios de taxonomfa numérica.

Con el fin de realizar un analisi s 1o mas objetivo po

ssible de las especies pertenecientes a los géneros Rotylenchus y/ Orientylus, se h an realizado cuatro tipos de tratamientos au-

bomaticos: fenogramas de distancia y de correlation, red de

c:nnexidn minima, analisi s de coordenadas principales y ana-

11isi s de componentes principales. Estos tratamientos se h an a-

pilicado tanto a las poblaciones tomadas de la bibliografi'a co- mio a las estudiadas por nosotros, y h an si do realizados en base

ai los dos grupos de caractères estudiados, esto es; fijos + ab

solûtes, y fijos + Indices. Para comparar los result ados obte-

midos con uno y otro grupo de caractères, se realizd un anâ-

l'isis automâtico en el que se obtuvieron val ores de correla-

c:idn muy altos, de 0,97345 a 0,97800, 1o que indica que ambos - 120 -

grupos de caractères expli can de manera casi ident ica las rela- c i ones entre las diferentes poblaciones.

Para exponer nuestros result ados hemos preferido los analisi s basados en los caractères fijos + indices en lugar die los caractères fijos + absolutos, y a que utilizando los In dices se tienen en cuenta siempre los val ores del mismo indivi- diuo al calcular las médias aritméticas o los val ores medios; ssin embargo, al efectuar el mismo cal cul o con los val ores abso- llutos que sirven de base al mismo Indice las médias y los valo- r'es medios se obtienen a partir de individuos distintos.

En la Tabla III presentamos la relation de especies y poblaciones estudiadas, con el numéro que les ha si do asignado ein los analisi s e indicando el autor o autores de la descrip tio n original, y en su caso, de los demas tipos de descripcio- nies. En la Tabla IV se recogen los caractères estudiados, acom- pianados también por el numéro utilizado enlos analisi s. F i- ni almente, en la Tabla V se présenta la matriz de datos. en la qiue se h an incluido todas las poblaciones estudiadas, las co- r respondientes a la bibliografla (1-59) y las encontradas por nosotros (60-91), figurando estas en columnas y los caractè res en llneas. - 121 -

II 11.3.1. Analisis numericos de las poblaciones descritas en

I a bibliografla.- Con el fin de conocer las posibles rela-. cciones feneticas de las 59 poblaciones de los géneros Ro- ttylenchus y Ori entylus descritas en la bibliografla, se ha ssometido a las mismas a cuatro tipos de analisis: fenogramas cde distancia y de correlation, red de conexion minima, ana-

II i s i s de coordenadas principales y analisi s de componentes p r i ne ipal es .

Los fenogramas dedistancia y de correlation (Fig. 9) ssugieren la existentia de dos grandes grupos de especies, A y B

((Fig. 10), formados en ambos fenogramas por las mismas pobla ciones a exception de la especie R. bi alaebursus (5), que en

æl fenograma de correlation esta incluido en el grupo A y en

æl de distancia en el B, y R. g o o d e y i (26, 27 y 28) y la des cription original de R. unisexus (50), que en el fenograma de distancia se incluyen en A y en el de correlation en B. El he- c:ho de que los valnres de correlation cofenética para ambos fenogramas sean relativamente bajos, 0,66075 para el de distan

çai a y 0,70400 para el de correlation, indica que la informa- c:i6n perdida en su confection ha si do apreciable, de modo que lias matrices reordenadas de los dos fenogramas muestran en gene- r'al una ordenacion ascendente para los val ores de los diferen- t:es estados de los caractères, y en especial para los correspon du i entes a la longitud total (1), anchura de 1 bulbo esofagico miedio (12) y longitud del estilete (19); a la vez que se - 122 -

encuentra una ordenacion descendente para . los val ores del

TÎndice _V (3). De las cinco poblaciones que cambian de grupo en

LU no y otro fenograma, la 5 y la 50 presentan algunos val ores altos y otrosbajos respecto a los caractères 1, 12 y 19, en tanto que las poblaciones 26, 27 y 28 presentan val ores inter- rmedios, 1o que explica su inclusion o exclusion en uno u otro grupo.

En la red de conexidn minima (Fig. 11) los grupos de poblaciones A y B sugeridos en los fenogramas no solo se mantienen, si no que adquieren mayor nitidez, de t a 1 manera que las poblaciones de una misma especie se presentan siempre dentro diel mismo grupo, a la vez que se distinguer ciertos subgrupos, como el formado dentro de A en torno a la poblacion de R. u n i- s exus (51) descri ta por VAN DEN BERG y HEYNS (1974), que esta compuesto por las poblaciones- correspondientes a R. acuspicauda- t us (2), R . brevic audatus (6), R. incul tus (32 y 33) y R. t r i- annulatus (49). Dentro del grupo B se distingue un subgrupo for mado por todas 1 as poblaciones de R. goodeyi ( 26. 27 y 28), que parece seguir actuando como intermedio entre A y B.

Dado que algunas de las poblaciones descritas en la bibliogra fla careclan de datos para algunos de los caractères utiliza- d os en nuestro estudio, se real izaron analisi s de coordenadas principales, cuya proyeccion en el piano formado por la prime ra y segunda coordenada principal se présenta en la figura 12 - 123 -

EE Stas dos coordenadas principales arrojan unos va lores propios cde 21,648 y 7,720 respectivamente, que expresados en percentage cde varianza total representan el 36,69 % y 13,08 %, o 1o que es

110 mismo, estas dos coordenadas expli can el 49,76 % de la infor- rmacidn contenida en las 58 dimensiones.

Con el fin de cuantificar la influencia de los valores mo conocidos en nuestro estudio, se realizd un tratamiento com parative entre los anal Isis de coordenadas principales y de componentes principales, que arrojd unos valores de correlacidn muy altos, entre 0 ,94437 y 0,99131 (Fig. 13), 1o que i n- diica que en el caso que nos ocupa dicha influencia es minima, hiecho que se comprueba al superponer las proyecciones de las po- b) laciones en el piano de las dos primeras coordenadas con las proyecciones de las mismas en el piano formado por las dos pri- mieras componentes principales (Figs. 14 y 15). Al efectuar esta s.uperposicidn se observa que en el analisi s de coordenadas principales las poblaciones se aproximan mas al centro, pero

1 a disposicidn relativa de todas ellas es muy semejante en am- b as proyecciones, a excepcidn de las poblaciones de R. goodeyi

( 28) y R. quartus (45), descritas por SHER (1965), 1o que se#de- b e a que estas dos poblaciones son las que presentan el mayor numéro de valores no conocidos, 7 y 8 respectivamente. AsI pues, y debido a que en los analisi s de nuestras poblaciones no ha si do necesario u tilizar los analisi s de coordenadas prin cipales, vamos a exponer nuestros resultados basândonos en el ainalisis de componentes principales. - 124 -

En la figura 17 presentamos las proyecciones de las po blaciones en el piano formado por la primera (X^) y segunda

(Xp) componente principal, cuyos valores propios de 8,062 y

2 ,699 respectiV amen te , expresados en percentage de varianza to tal representan 38,39 % y 12,85 %, o 1o que es igual, estas dos primeras componentes expli can el 51,24 % de la informacion con tenida en las 21 dimensiones. En la mencionada figura se obser va que los grupos A y B se disponen a derecha e izquierda de la segunda componente (Xg), estando el grupo A determinado funda ment almente por los vectores propios 3, 20, 7 y 17 (Fig. 16), que corresponden a los caractères _V, _0, numéro de "anillos" en tre los fasmidios y el nivel del ano, y _c. Los subgrupos, tanto de A como de B, son ahora mas netos y se observa que en gene ral las diferentes poblaciones de una misma especie entran den tro del mismo subgrupo, a excepcidn de la descripcion o rig i nal de R. uni sexus (50), que se sépara del subgrupo por la fuer- z a ejercida en especial por los vectores propios que represen tan a los caractères 1, 14, 4 y 13, en los que esta poblacion présenta valores notablemente mas altos, a la vez que para el carâcter _c, representado por el vector 17, su valor es infe rior.

I I I . 3.2. Analisi s numéricos de las poblaciones encontradas por nosotros.- Iras un détail ado estudio nematoldgico de todas las muestras recogidas, se h an obtenido un total de 32 poblacio nes pertenecientes a siete especies del género Rotylenchus con - 125 -

un total de 134 hembras y 21 machos. Al igual que para las po blaciones descritas en la bibliografla, se h an aplicado los analisi s numéricos unicamente a las hembras.

Los fenogramas de distancia y de correlacidn (Fig.

18), con valores de correlacidn cofenética bast ante altos,

0,93346 y 0,89800 respectivamente, indican la existencia de dos grupos C y D bien défi ni dos, que finalmente se unen a la poblacidn de R. mesorobustus sp. n. (88). El grupo C esta formado por todas las poblaciones pertenecientes a las especies R. bre vi caudatus (60, 61, 62, 63 y 89), R. incul tus (68 y 69), R. pumilus (70, 71 y 72) y R. unisexus (73-79, 90 y 91), y el grupo

D por R. maqnus sp. n. (81-87). Las poblaciones pertenecientes a la especie R. catharinae (64-67) entran dentro del grupo C en el fenograma de distancias y dentro del grupo 0 en el de corre lacidn, 10 que se explica al observar que presentan valores i n- termedios entre los de ambos grupos, especialmente en 1o que respecta a los caractères L (1), St (19), longitud del bulbo me dio (11) y a 11 c h u r a del bulbo m e d i o (12).

En la red de conexidn minima (Fig. 19) se observa una situacidn similar, si bien al go mas concreta. Los grupos C y

D se unen nuevamente mediante la poblacidn de R. mesorobustus sp. n. (88), haciéndolo el C por medio de la poblacidn 67 de

R. catharinae. Asimismo, estan mas delimit ados los grupos de poblaciones pertenecientes a las especies R. pumilus (70-72) - 126 -

y R. brevi caudatus (60-63 y 89), del que la poblacidn 61 se distancia ligeramente.

E A la figura 21 présentâmes la proyeccidn de las 32 poblaciones en el piano formado por la primera y segunda compo nentes, cuyos valores propios son 14,110 y 2,043 respectivamen te y representan el 67,19 % y 9,72 % del percentage de varianza total, le que indica que ambas componentes expli can el 76,91 % de la informacidn contenida en las 21 dimensiones. Las pobla ciones se distribuyen netamente en los dos grupos C y D a le largo de la primera componente (X^) Y a derecha e izquierda de la segunda (Xp), apareciendo la poblacidn de R. mesorobustus sp. n. (88) en una posicidn claramente intermedia. Dentro del grupo C, défi ni do por los caractères: numéro de "anillos" en tre los fasmidios y el nivel del ano, _0, _V, y^_c‘, representados por los vectores propios 7, 20, 3 y 18 respectivamente (Fig.

20), se distinguen cuatro subgrupos correspondientes a las po blaciones de las especies R. catharinae (64-67 ), R. brevicauda- t u s ( 60-63 y 8Q), R . uni sexus ( 73-79 ,. 90 y 91) y R . pumi 1 us

(70-72). Los subgrupos de R. brevicaudatus y R. unisexus se pre sentan solapados, y dentro de este ultimo se situa la pobla cidn n“ 69, correspondiente a R. incul tus y distanciada de la n“ 68 de la misma especie, porque esta ultima esta mas fuertemente influida por el vector propio n“ 7 que représenta el numéro de "anillos" comprendido entre los fasmidios y el nivel del ano, que en la poblacidn n° 69 es igual a 6,0 y en la n"

68 es de 15,8. - 127 -

Con el fin de evitar la posible distorsion ejercida poor las do s nuevas especies que constituyen los grupos D e i n- ttermedio, se repitieron los mismos analisis eliminando ambas, een un intento de apreciar con mas detalle la ordenacion y ddisposicion de las poblaciones restantes entre si, con los r^esultados que exponemos a continuacion.

Los fenogramas de distancia y de correlacidn (Fig 22) diieron valores de correlacidn cofenética de 0,76498 y 0,73415 r-espectivamente, apareciendo en este ultimo un unico grupo boien défini do, el correspondiente a la especie R. c at h ar i an ae

((64-67), siendo ademas el unico en el que no se introduce a 1 - g;una poblacidn de R. unisexus, especie cuyas poblaciones (73-

7'9, 90 y 91) aparecen repartidas por todo el dendrograma. Ei el fenograma de distancias las poblaciones de una misma especie se uinen en todos los casos, excepto en la n° 61 de R. brev icaida- t: us, que se une antes a las poblaciones de R. unisexus q j e a liasde su misma especie (60, 62, 63 y 89), y la poblacidi n“

7'0 de R.pumilus, que se une antes a la n“ 91, también de R. ui nisexus, que a las de su misma especie (71 y 72).

En la red de conexidn minima (Fig. 23) se observa fâ- c;ilmente cdmo las diferentes poblaciones de R. unisexus son qiuienes se unen a todas las demas, e incluso sirven de punto die unidn entre las poblaciones de otra especie, como ocurre en

R. brevicaudatus, en la que la poblacidn n" 61 se une a las r-estantes de la especie (60, 62, 63 y 89) por mediode la pobla- 128

Cl on n“ 73 de R. uni sexus, y en R. incul tus, cuyas pobla ciones 68 y 69 se unen a través de la n“ 74, también de R. wnisexus.

En la figura 25 se présenta la proyeccidn de las 23 poblacio- mes en el piano formado por la primera y segunda componentes porincipales, que arrojaron sendos valores propios de 10,617 y

33,154, que suponen el 50,55 % y 15,01 % del porcentaje total de lia varianza, esto es, en conjunto expli can el 65,58 % de toda lia informacidn contenida en las 21 dimensiones. Esta proyec- c:idn muestra la existencia de cinco grupos bien défi ni dos, que corresponden a las cinco especies en que hemos reuni do a nues- t:ras poblaciones; solamente sepresentan dos excepciones: la pjoblacidn n ° 61, que pertenece a la especie R. brevicaudatus, eîstâ separada de las demas por present ar un valor de_a, repre-

Sientado por el vector propio 15 (Fig. 24), superior al de aqué-

II las, quienes a su vez tienen valores muy superiores para el ca- r'âcter _0 (vector propio 20); y la poblacidn n ° 74, que se s e- pnara. de las restantes pnblaciones de R. unisexus debido a que présenta valores superiores en los caractères numéro de "ani-

1 los" de la regidn labial, _b y _SJt, representados respect iv am en- t.e por los vectores propios 5, 16 y 19.

I 11 . 3 . 3 . Analisi s numérico conjunto de todas las poblaciones e:studiadas.- Con el fin de estudiar la clasificacidn de nues- - 129 -

t:-ras poblaciones con respecto a las descritas en la bibliogra f l a , as f como la reordenacion de estas ultimas debida a la puosible distorsion ejercida por las primeras, se ban realizado c:on todas ellas los cuatro tipos de analisis numéricos emplea- dios anteriormente en ambos grupos de poblaciones por separado: fenogramas de distancia y correlacidn, red de conexidn mlni- mia, analisis de coordenadas principales y analisi s de compo- nientes principales.

En los fenogramas de distancia y de correlacidn (Fig.

2!6), cuyos valores de correlacidn cofenética no pudieron ser c: al cul ados por incapacidad material del ordenador, pueden dis- t: inguirse très grupos de poblaciones: A y B, que se correspon- dlen con los formados por las poblaciones de la bibliografla, y

6il grupo D, compuesto por las dos nuevas especies. La composi ez ion de estos grupos en uno y otro fenograma es la misma en gieneral, si bien existen ciertas diferencias. Asf, la descrip- c: ion original de R. unisexus (50) pertenece al grupo A en el fenograma de distancias y al B en el de correlacidn, en tanto qiue las especies R. acuspicaudatus (2), R. b i alaebursus (5), R. bireviglans (9), R. gracilidensi(2 9 y 30), R. neorobustus (38),

R.. quartus (44 y 45), la poblacidn de paratipos de R. buxophi-

1 u s (11), nuestras dos poblaciones de R. incul tus (68 y 69) y

1 as siete especies del género Orientylus (53-59) se encuentran dientro del grupo B en el fenograma de distancias y dentro del A eIn el de correlacidn. El grupo D présenta la misma composi- c i d n en los dos fenogramas, pero mi entras que en el de distan- - 130 -

c;ias- se une al bloque formado por las restantes especies por miedio de la especie tipo R. robustus (46), en el de correla cidn 10 hace mediante la descri pcidn original de R. rugatocu- t: i c u 1 a t u s (47).

En 10 que respecta a la agrupacidn de las distintas po blaciones de una misma especie, encontramos que en ambos feno- giramas la descripcidn original (10) y la poblacidn de parati-

P'os (11) de R. buxophilus aparecen muy distanciadas, pertene- c iendo incluso a dos grupos diferentes en el de correlacidn.

Las dos poblaciones de R. quartus (44 y 45) se presentan unidas en los dos fenogramas, si bien en el de distancias se incluyen en el grupo B y en el de correlacidn en el A. La poblacidn 26 d e R. goodeyi, que esta muy prdxima a las otras dos (27 y 28) en el fenograma de distancias, aparece muy separada de las mis mas en el de correlacidn, al igual que ocurre con las dos po- b laciones de R. caudaphasmidius (15 y 16). S i n embargo, en el caso de las dos poblaciones de R. gracilidens (29 y 30) y R. eximius (20 y 21) sucede 1o contrario, se presentan unidas en el fenograma de correlacidn y separadas en el de distancias.

La descripcidn original de R. incul tus (32) y la pobla cidn descri ta por VAN DEN BERG y HEYNS ( 1974 ) ( 33 ) estan sepa radas entre si y de nuestras dos poblaciones (68 y 69), que aparecen unidas, en tanto que en el de correlacidn se separan d e modo que la poblacidn n ° 68 aparece mas prdxima al grupo en el que se encuentra la poblacidn n“ 33 que a la n° 69. - 131 -

En cuanto a 1 as poblaciones de R. uni sexus ( 50 , 51 , 73-

79, 90 y 91) aparecen diseminadasdentro del grupo A en ambos fenogramas, a excepcidn de la descripcidn original (50) que se présenta en el grupo B en el fenograma de correlacidn, como hemos senalado anteriormente.

Las . demas especies que incluyen poblaciones estudiadas por nosotros se comportan de modo similar-en ambos fenogramas.

A S I, las diferentes poblaciones de R. brevicaudatus se agrupan de la misma forma, por una parte la descripcidn original (5) y las dos poblaciones de la bibliografla (7 y 8), y por otra nuestras poblaciones 60, 62, 63 y 89, quedando la n“ 61 en una posicidn intermedia. Tanto en el fenograma de distancias como en el de correlacidn, la poblacidn de R. pumilus descri ta por

SIHER (1965) (43) se une antes a las poblaciones de esta especie estudiadaspor nosotros (70-72) que a la descripcidn original d.e PERRY ( 1959 ) ( 42 ).

Finalmente, en ambos fenogramas nuestras poblaciones de

1 ,a especie R. cathariane (64-67) forman un grupo bastante com pta cto y prdximo a la descripcidn original (14), 1o que se po- næ au n mas de manifiesto en el fenograma de distancias, donde fa poblacidn n“ 64 se distancia un poco de las demas para umirse a la descripcidn original.

En la red de conexidn minima (Fig. 27) se observa una düstribucidn de 1 as distintas poblaciones bastante similar - 132 -

a la obtenida en 1 os fenogramas de distancia y de correlacion.

Los grupos A, B y D se mantienen, si bien e1 A y e1 B no se se- p aran claramente. Las poblaciones de R. brev1caudatus, R. incul- t us y R. unisexus se agrupan de forma parecida y se presentan entremezcladas de nuevo, interponiéndose incluso entre las po blaciones de R. buxoph i 1 us (10 y 11), R. goodeyi (26-28 ), R .

1 aurentinus (36 y 37) y R. rugatocuticulatus (47 y 48). Por otro lado, se presentan unidas las dos poblaciones de R. cauda- p hasmidius (15 y 16), de R. gracilidens (2 9 y 3 0) y R_^ quartus

(44 y 45), as 1 como las dos de R. incul tus pertenecientes a la bibliografia (32 y 33), en tanto que nuestras dos poblaciones de esta especie (68 y 69), si bien estân muy prdximas entre si', se encuentran separadas de ellas. T am bien estân unidas las dos poblaciones de R. pumilus procedentes de la bibliogra f ia (42 y 43) y muy prdximas a las nuestras de la misma espe cie (70-72). Las très poblaciones de la bibliografi'a pertene ci entes a la especie R. brevicaudatus (6, 7 y 8) se encuentran miuyprdximas entre sf y bastante distanciadas del grupo forma- d 10 por nuestras poblaciones ( 60 , 62 , 53 y 89), quedando la n"

61 en una posicidn intermedia. La descri pcidn original de R. c.atharinae (14) y nuestras poblaciones (64-67) forman un grupo miuy compacto. También aparecen muy prdximas las poblaciones dæ R. eximius (20 y 21) y las de R. f a l l orobustus (22-24). Las dos nuevas especies, R. magnus s p. jn. (80-87) y R. mesorobustus s p . _n. (88), vuelven a separarse notablemente de las demâs, a

1 as que se unen por medio de la especie tipo R. robustus (46). - 133 -

Debi do a que algunas de 1 as poblaciones de la bibliogra f ia carecian de diverses val ores para determ inados caractè re es, se realizaron analisi s de coordenadas principales, al i gual que se hizo al estudiar estas poblaciones ais 1 ad amen te .

E'. n la figura 28 se présenta la proyeccion de las 91 poblacio- nies en e1 piano formado por la primera (X^) y segunda (X.) coordenadas principales, cuyos val ores propi os, 44 ,677 y 8,596 respectivamente, representan e1 40,65 % y 7,82 % de la varianza to ta l, esto es, ambas coordenadas expli can el 48,47 % de la i nformacidn contenida en las 90 dimensiones.

Aunque por fa it a de capacidad del ordenador no se pudo realizar un tratamiento comparative entre los analisi s de coor denadas y de componentes principales para el total de 91 pobla- c iones, se superpusieron sus correspondientes proyecciones

(Figs. 28 y 29), comprobandose en ambas una distribucion de

1 as poblaciones muy similar, concordante con los resultados obtenidos en las comparaciones anteriores entre estos mismos ana-

1 isis, por 1 0 que se ha preferido utilizar en este estudîo ias proyecciones obtenidas a partir del analisis de componentes principales, ya que al hacerlo asf conseguimos ademâs una ma yor hoinogene i dad en la expos ic ion de nuestros resultados.

En la figura 31 present amos las proyecciones de las 91 poblaciones en el piano formado por la primera (X^) y segunda

(iX^) componentes principales, con unos val ores propi os de

1(0,774 y 1,957 respectivamente, que representan el 51,3 y el - 134 -

9),3% de la varianza total, esto es, ambas componentes principa-

1 es expli can el 60,6 % de la information contenida en las 21 dlimensiones. De los grupos establecidos en los analisis anteriores se observa q.ue el grupo A vendrfa défi ni do por los ca ractères numéro de "a n illos" entre los fasmidios y el nivel dlel ano, _V, _0 y_ç', representados por los vectores propi os 7,

3 , 20 y 18 respectivamente (Fi g. 30). El grupo B estarfa deli- miitado por el resto de los caractères que quedan comprendidos entre los vectores propi os 7 y 18. El grupo D constituido, por

1 as ocho poblaciones (80-87 ) de R. magnus s p. n. se sépara neta- m en te de la poblacion perteneciente a la especie R. mesorobus- t us sp. n. (88), estando ambas muy separadas del resto de las especies, de 1 as que la especie tipo R. robustus (46) es la mas proxima. Tanto dentro del grupo A como del B se observa que en general las distintas poblaciones de una misma especie forman grupos bastante bien défi ni dos. No obstante, dentro del grupo A se puede apreciar que las poblaciones pertenecientes a

1 as especies R. brevi caudatus ( 6-8 , 60-63 y 89), R. incul tus

(32 y 33) y R. unisexus (50, 51, 73-79,90 y 91) se rnmnnrtan ciomo si se tratara de un grupo bastante homogéneo. Finalmente, d.entro del grupo A se observa que las siete especies pertene- c ientes al género Orientylus (53-59) no forman un grupo bien défini do. DISCUS I ON - 136 -

En la discus ion se realiza un anal isis de los resultados obtenidos que nos va a permitir conocer cuâles son

1 as aportaciones de nuestro estudio a un mejor conocimiento de los nematodos en general y del género Roty1enchus en particular. Con este fin hemos dividido dicho analisis en los se is apart ados si gui entes:

- S i stemâtica

- Révision de 1 os antecedent es

- Anal isis de los métodos utilizados

- Estudio comparâtivo entre el analisis morfométri-

c0 y el tratamiento automâtico de 1 as poblaciones

estudiadas por nosotros

- Relaciones entre 1 as especies de Rotylenchus, segun

los anâlisis de taxonomfa numérica.

- Valoracion de los caractères utilizados en los

anâlisis numéricos.

S i stemât i ca.

La dificultad para establecer la posicidn sistemâtica de los diferentes grupos de nematodos del suelo, especialmente de los pertenecientes al género Rotylenchus, se ha puesto de man ifiesto a 1o largo de todo este trabajo, en el que hemos recogido la serie de cambios que ha sufrido este género desde su - 137 -

diescripcidn original. Asf, son mas de treinta los trabajos qiue hemos comentado por considerar que aportaban algun njevo aispecto tendente a esclarecer su posicidn s istemâtica, ha- bn'dndose realizado una revisidn exhaustiva de toda la biblio- g;raff a desde el aho 1934, en que fué creado el género Rd ty-

11enchus, hasta el momento actual. Dicha revisidn nos ha pe^mi- t:ido realizar un estudio comparâtivo encaminado a establecer

II os criterios en que hemos basado la posicidn s istemâtica del ggénero Rotylenchus que considérâmes mâs natural.

Son varies los criterios ex is tentes sobre el range que lies nematodos ocupan dentro del reino animal. Por un lado, CHIT-

WÜOOD y CHITWOOD (1950), THORNE (1961), SIDDIQI (1980) y MAGSEN-

T'l ( 1983 ) los consider an como un phylum aparte: Nematoda o N em a- t c a, en tanto que para GOODEY ( 1963 ) constituyen una clase, que seegun HYMANN (1951) pertenecerfa a 1 phylum Nemathelmintha y stegun STEINER (1917) estarfan dentro del phylum Aschelminiha.

Es St a diversidad de opiniones se recoge fundamentalmente en el trrabaio de CHITWOOD (1958 b), quién indica que el nombre co- rrrecto debe ser Nemato i dea o Nemat a, éste ultimo segun el s'istema de PEARSE (1936), aceptado por THORNE (1961) y MAGGENTI

(11983). Ahora bien, el nombre mâs empleado en Nematologfd es

N eematod a, que sigue también el sistema de PEARSE (1936) al te nser la terminacidn en -a; por todo ello, al igual que SIDEIQI

(11980), hemos elegido el phylum Nematoda Rudolphi, 1808.

CHITWOOD (1958 b) reconoce la clase Secernentea, que - 138 -

V/ON LINSTOW (1905) habfa descrito como orden en base al siste- mna excretor constituido por canal es latérales que vierten en lia parte anterior por medio de un poro ventral, y que se corres- poonde con la clase Phasmidia propues ta por CHITWOOD ( 1933 ). La c : 1 a s e Secernentea Von Linstow, 1905 es aceptada en general por t'odos los nematologos, entre los que destacamos a THORNE

('1961) por ser el primero en hacerlo y MAGGENTI (1983) por ser eîl mâs reciente, senalando que las clasificaciones actual es de

A\NDRASSY (1976), DE CONINCK (1965), GOODEY (1963), MAGGENTI

(1963), etc,, se basan en una combinacion de las propuestas p)or FILIPJEV (1934) y CHITWOOD y CHITWOOD (1937). La propuesta dlel primero se basaba en un origen mari no de los nematodos y s;ugerfa como ancestro un nematodo de tipo 1etposomâtido.

CIHITWOOD y CHITWOOD (1937) proponfan que el ancestro era una forma de 1 tipo Rhabditis/ Plectus. Cuando se comb inan estas dos piropuestas (MAGGENTI, 1963) emerge una teorfa filogenética qiue indica dos Ifneas principales de évolueidn, una represen- t.ada por Adenophorea (mari nos, dulceacufcolas y terrestres) y

0 tra por Secernentea (casi exclusivamente terrestres y dulcea- ciuicolas).

Por otro lado, MAGGENTI (1983) divide la clase Secernen- ttea en très subclases: Rhabditia, Spiruria y Diplogasteria. Con- sideramos perfect amente admisible esta division, donde la cla- see Diplogasteria viene definida por una armadura bucal mdvil y urn esdfago con corpus muscular dividido en procorpus casi c i- liindrico y metacorpus muscular casi siempre con val vas, que va - 139 -

sseguido de un istmo, y un postcorpus glandular sin apenas mus cu ll atura.

El orden Ty1ench i d a ha si do aceptado por todos 1 os au- ttores desde su creacion por THORNE (1949), quién did la s i- gguiente diagnosis: "N ematod a, Phasmi di a. Est orna armado coi un

æstilete protrusible (excepto en machos degenerados de unas po- c:as especies). Porcidn basai del esdfago a modo de bulbo o 1 o- boulada y s i n aparato valvar esclerotizado".

Asimismo, siguiendo a SIDDIQI (1980), aceptamos el sub- corden Tylenchina, del que CHITWOOD y CHITWOOD (1950) ofrecen ujna buena diagnosis basada en la estructura del esdfago, del iintestino y del sistema excretor, anadiendo que los nematodos poertenecientes a este grupo se aliment an del contenido de célu-

1 as vivas cuando son parasitos de plantas, existiendo también eîspecies carnfvoras o endoparâsitas de vertebrados.

Con respecte al rango de superfamilia spguimnq m kpam

( 1978) y a SIDDIQI (1980), al aceptar Hoplolaimoidea (Fi ip- j ev, 1934) Paramonov, 1967; si bien hemos de senalar que PARA-

MIONOV (1968) no admite esta superfamilia que é1 mismo habfa e»lev ado de rango un ano antes; SIDDIQI (1971) hace Hop 1o1 ai no i- d ea (Filipjev, 1934 ) Paramonov, 1967 sindnimo de Ty 1encho dea

('Orley, 1880) Chitwood y Chitwood, 1937 ; ANDRASSY ( 1976 ) acepta esta superfamilia, aunque no concede la autorfa a PARAMONOV

( 1967), si no que s impiemente indica Hoplolaimoidea (Filipjev, - 140 -

I L 934 ); KRALL ( 1978 ) y SIDDIQI ( 1980) la admiten, si bien es so il o posteriormente cuando RYSS y KRALL (1981) 1 a restablecei al ainular la sinonimia de SIDDIQI (1971) y dar como diagnosis en- mnendada: "Bulbo esofâgico medio no hipertrofiado, con aparato v/alvar. Esfinter del cardias ausente. En adultos y juven les lias très glândulas esofagicas subventrales se extienden mâs ai lia del intestine y forman u no o dos lobulos en la parte an- t:erior del mismo. Canaltriangular cuticularizado por derrâs diel istmo entre las glândulas esofâgicas general mente au;en- t:e. Parte anterior del intestine desplazada hacia del ante y s i- t:uada cerca del poro excretor. Parâsitos de plantas. Muchas es- puecies con hembras engrosadas y sedentari as" .

La fami lia Hoplolaimidae (Filipjev, 1934) Wieser, :953 p>uede considerarse aceptada en la totalidad de los trabajos si biien queremos senalar que hasta 1976 exist fan algunas discre-

P'ancias en le que a su autorfa se refiere. Asf, CHIT 10OD

( 1958 a) propone esta familia como Hoplolaimidae Wieser, 1<53, aceptado por SHER (1961); el caso contrario esta 'êp’êse^'âdo por ANDRASSY (1976), quién indica sol amente Hoplolaimidae F i -

1 ipjev, 1934. Nosotros, siguiendo a la mayorfa de los autores, entre los que destacamos BOAG (1978), KRALL (1978) y RIES y

KRALL (1981) por ser los mâs recientes, hemos aceptadc la f amilia como Hoplolaimidae (Filipjev, 1934) Wieser, 1953, que segun RYSS y KRALL (1981) reune nematodos que no presertan

1 a glândula esofâgica dorsal mâs extendida que las Eub-

V entrai es, région labialsemiesférica o conica y hemtras - 141 -

adult as vermiformes, a veces moderad amente arrolladas, siendo ecto y semiendoparasitos de 1 as rafces vegetal es.

Siguiendo a ANDRASSY (1976), BOAG (1978) y KRALL (1978) hemos aceptado la subfamilia Rotylenchinae Golden, 1971, cuya diagnosis segun su autor es la siguiente: "Hoplolaimidae. D i- morfismo sexual fundamentalmente en la forma de la region la bial, que en ambos sexos présenta una estructura fuertemente esclerotizada. Estilete bien desarrollado, con nodulos basa- les. Glândulas esofâgicas lobuladas que solapan la porcion anterior del intestine. Campos latérales con incisuras, tfpi- camente cuatro. Fasmidios pequenos a modo de poro, situados en la zona posterior del cuerpo, comunmente en la region anal.

Ovarios anfidelficos. Region caudal de la hembra con una longitud igual a dos veces la anchura del cuerpo a nivel del ano o menor. Cuando existen, machos con un testicule alargado y con una bursa que envuelve la region caudal. Género tipo; Rotylen chus Filipjev, 1936".

El género Rotylenchus fué creado por FILIPJEV (1934), quién did Tylenchus robustus De Man, 1880 como especie tipo, aunque no da ninguna descripcidn. Posteriormente, FILIPJEV

(1936 a) describe el género con "esdfago afelencoide" y dos ovarios. Trece ahos mâs tarde, THORNE (1949) da la primera diagnosis enmendada del género, que va a ser seguida por la ma yorfa de los autores; nosotros recogemos aquf la ultima diag nosis enmendada, debida a SHER (1965):"Regidn labial con o sin - 142 -

a.nillacidn o estriacidn. Glândulas esofâgicas solapando el

i ntestino, sobre todo dorsal o lateralmente. Fasmidios pequenos

en la zona posterior del cuerpo. Campos latérales con cuatro i n-

c isuras. Terminus de la hembra semiesférico, en general ligera- miente mâs convexo en el lado dorsal y a veces con una pequena

proyeccidn ventral redondeada".

Cuando FILIPJEV ( 1936 a) describe el género, d a como

e specie tipo R. robustus De Man, 1880, y como otras especies

1 as si gui entes nuevas combinaciones: R. obtusus (Basti an,

11865 ), R. multicinctus (Cobb, 1893 ), R. africanus (Mi coletzky,

1(916), R. bradys (Steiner e_t Le Hew, 1933), R. similis (Cobb,

18893) y R. apapillatus (Imamura, 1931), indicando que estas d(os ultimas son posiblemente sindnimas. De todas las especies mtencionadas no permanece hoy en d f a como vâlida mas que la e s-

pæcie tipo, queha si do profundamente estudiada por diversos au-

t cores y cuya nomenclatura fué es tabléeida por LOOF y OOSTEN-

BFRINK (1958) como R. robustus (De Man, 1876) Filipjev, 1936.

Pcor otra parte, se observa que de un total de sesenta y très es-

pœcies que h an si do descri tas como pertenecientes al género R o- tyyl en^chus-, veintiocho h an sufrido cambios a otros géneros.

A ss f , R. similis fué transfer ida al género R adophol us por

T WORN E (1949); cinco especies h an si do incluidas en el género

H æli cotylenchus: R. erytrinae y R. multicinctus por GOLDEN

( Il 9 5 6 ) y R . afr i canus , R. iperoiguensis y R. melancholicus por

ANIDRASSY (1958), autor que transfiere al género Scutel1onema

R.. blaberus, R . boocki, R . brachyurus , R . bradys , R . c h r i s t i e i - 143 -

y/ R. cohen i . Las especies R. obtusus (Basti an, 1865 ) Filipjev,

IL 936 y R. obtusus apud Filipjev _et Schuurmans Stekhoven, 1941 frueron transferidas a Pratylenchoides crenicauda por WINSLOW

((1958); R. un if ormi s fué sinonimizada con R. robustus por LOOF y/ OOSTENBRINK ( 1958 ); R. elisensis fué incluida en el género

Hielicotylenchus por CARVALHO (1959), siendo posteriormente sino-

mimizada con Rotylenchulus reniformis por SHER (1961); la espe- c : i e R . pararobustus, que fué transferida al género Gotthold -

s ~> t e i n e r i a por ANDRASSY ( 1958 ) es considerada como species inqui-

rrend a por SHER (1961); R. apapillatus y R. oryzae fueron sinoni- miizados con Hirshcmanniella oryzae por LUC y GOODEY (1964); R.

skheri fué hecha sinonima de R. buxophilus por SHER ( 1965 ); R.

c : i t r i , R. helicus, R. oriental is , R. secondu s , y R. siddiqi h an

siido transferidas al género Orientylus por JAIRAJPURI y SID-

DIIQI ( 1977 ), y la especie R. cal vus al género C a 1vatylus por

le os mismos autores; posteriormente, Calvatylus cal vus y C. here- diicus h an si do transferidas al género Rotylenchus por FERRAZ

( 11980 ) y R. p i n i al género Pararotylenchus por BALDWIN y BELL

(11981); finalmente, BOAG et al (1981) transfieren la esoecie

R .. ouensens i s al género P ararotylenchus, en una nota anadida

a la prueba de imprenta de la descripcidn de la misma.

Desde nuestro punto de vista, considérâmes que el génè re o Orientylus deberfa hacerse sindnimo de Rotylenchus, vo1 - viiendo con ello 0. ci t r i , 0. helicus, 0. orient al is , 0. secon- duus y 0. siddiqi i a ser R. ci t r i , R. helicus, R. oriental is , R. seecondus y R. s i d d i q i i , tal como fueron descri tas por primera - 144 -

vez, y 0. geraerti y 0. varus pasarfan a ser R. geraerti (Jai-

rajpuri e_t Siddiqi, 1979 ) comb, n. y R. varus (Jairajpuri e_t

Siddiqi, 1979) comb. n.. Esta opinion se apoya en que 1 as diag

nosis del género Orientylus dadas por JAIRAJPURI y SIDDIQI

(1977 y 1979) son fundamentalmente iguales a la empleada por

SHER (1965) para définir al género Rotylenchus, aunque mas dé

ta il adas. La diferencia entre Rotylenchus y Orientylus, tal co mo senalan los autores en 1979, consiste en que el primero tie-

n e una région labial pequena y estrecha (Fi g. 32), défi nieidn

que considérâmes ambigua, y una posicidn mas retrasada del

o rific io de la glândula dorsal, que en la diagnosis del géne

ro establecen como: "orifice of the dorsal oesophageal gland at

about half or more of spear length behind spear base" s i c.. Es

te hecho supone que el indice _0 présenta un valor en torno al

50 %, y as 1 observâmes que las especies de Ori entylus presen

tan valores de dicho indice entre 45 y 70 %; ahora bien, esto

no nos parece sufici ente para considerable un género aparte, y a que teniendo en cuenta las especies de Rotylenchus descri-

tas, encontramos que el mencionado fndice _0 puede tomar todos

los valores posibles entre 5,8 % en R. devonensis y 40 % en R.

dalhousiensis, le que représenta un intervale de variacidn en

este género muy superior al existente en Orientylus, que pensâ mes es arbitrable. Por otra parte, los resultados obtenidos en

nuestros anâlisis de taxonomfa numérica con ambos géneros

sugieren que se trata de un género uni ce, como se discutirâ mâs ade1 an te . - 145 -

Rievision de los antecedentes.

Ademâs de 1 os trabajos sobre sistemâtica y nomenclatu- r , a, son muchos otros los que h-acen referenda al género Ro ty-

1 «enchus relacionados con su biologfa, ecologfa, distribucion

e interés agrfcola, sobre los que a continuation vamos a rea-

1 izar algunas observaciones.

Se encuentra que de los treinta trabajos que hacen algu-

n ( a referencia al género Rotylenchus en Espaha, algunos son c a-

t(âlogos 0 revisiones, por 1o que las citas no son siempre nue-

Vcas, si no que en muchas ocasiones son recogidas de trabajos an-

t teriores. Esto hace que sean solamente treinta y se is las c i-

ttas originales, de las que uni camente en quince se ha determi-

ntado la especie y en dos se d a la especie proxima, no indicân-

dcose en las diecinueve restantes mâs que el género. Creemos

qiue este hecho se debe mâs a la orientation faunfstica y

açgrfcola de la mayorfa de los trabajos consult ados que solo

a la dificultad que entran a ia determinarinn Hp pqpAriPs

dee este género, dificultad que por otra parte podrfa dilatar

enn buena medida eu al quier tipo de estudio.

Por otro lado hemos de senalar que ninguna de las espe- ciies del género Rotylenchus vâlidas actualmente ha si do des- crrita en Espaha, si exceptuamos la descripcidn por primera vez

deal macho de R. eximius por BELLO et a l. (1976),ya que R. alva- raadoi y R. j i menez i de BELLO ( 1969 ) son actualmente nom i ne nuda. - 146 -

P(’or otra parte, de “ acuerdo con nuestra propuesta de hacer el ggenero Orientylus sindnimo de Rotylenchus, considérâmes va il ida la cita de R.oriental is en las I si as Canari as de BELLO

(L1969), con 1o que las especies del género c itadas en Espaha

SGon las siete siguientes: R. brevi caudatus , R. breviglans, R. oprientalis y R. eximius en las I si as Canari as, habiéndose en- ccontrado esta ultima también en Aimer fa; R. buxophilus, que scdlo se ha citado en Granada; R. goodeyi, cuyas citas se loca- lizan unicamente en sistemas montahosos; y R. robustus, que es

1(a especie mas representada en toda la Penfnsula.

En 10 que respecta a las citas del género Rotylenchus ern el resto del mundo, se observa i gualmente que en muy pocas occasiones se détermina la especie, 1o que tiene como consecuen- ciia que las especies citadas con otro motivo que su descrip- ciidn sean unicamente doce, repartidas segun el tipo de estu- diio realizado en morfoldgicos: R. goodeyi, R. 1aurentinus y R. rcobustus; dahos y control: R. 1aurentinus y R. robustus; distri- büucion y nuevas citas: R. b u x o p h i 11u s, R. cal vus, R. falloro- biustus , R . goodeyi, R. gracilidens, R. incul tus, R. oriental is,

R.. pumilus, R. quartus, R. robustus y R. unisexus. Creemos que esste hecho se debe a que la mayorfa de los trabajos que hacen reeferencia al género Rotylenchus estân bas ados en expérimen tons de control y supervivencia de nematodos a diferentes trata- mi ientos, por 1 0 que los autores dan mâs importancia a los re- suultados obtenidos desde el punto de vista de rendimiento de loos cultives que a la determinacion de las especies, por 1o - 147 -

qque solo adquiere interés cuando se trata de dar una nueva c i- tta de una determinada especie con respecto a la planta, locali- ddad 0 pais en que ha si do encontrada. Nosotros consider amos qque en todos los tipos de trabajos, incluidos los de lucha con- ttra los nematodos, deberfa determinarse la especie, ya que los rresultados obtenidos sobre una de ellas en una determinada

âârea no pueden ser los mismos que si se trata de otra especie yy diferente area.

Los motiVOS expuestos explican que en los mapas de dis- ttribucidn mundial, que se presentan en el capftulo de resulta- ddos, aparezcan las especies muy escasamente representadas. Efec- ttivamente, creemos que en general 1 as especies estân mâs ex- tcendidas de 1o que se deduce de los mapas, y que son la escasa frrecuencia de determination de las especies ya comentada y las ggrandes zonas sin estudiar, exceptuando Europa, las que contri- bouyen a que frecuentemente solo aparezcan especies de Rotylen- cthus en 1 as areas en que se encuentran nematologos interesa- ddcs en este grupo, siendo los cases mâs notories ios de Sudâ- ffrica y la India. Aun asf, puede observarse que algunas espe- c : i e s como R. breviglans, R. buxoph i 1 us, R. c alvu s, R. goodeyi,

Ri. pumilus y R. robustus se encuentran unicamente en el Hemis- ff'erio Norte, otras como R . brev i c audatus y R . uni sexus muestran uiina marcada tendencia a distribuirse en el Hemisferio Sur, y f i - nnalmente, existen especies igualmente representadas en ambos, ccomo R. f a l l orobustus, R. gracilidens y R. incul tus. 148

A\nâlisis de 1 os métodos .uti1izados.

Dentro de este apart ado vamos a distinguir dos aspec- tcos, por un lado los métodos empleados en el estudio morfomé- tirico y por otro los utilizados en el tratamiento automâtico d(e los datos.

Con respecto a los métodos empleados en el estudio mor- fcométrico hemos de indicar en primer lugar que dado el objeti-

vco fundamentalmente taxonomico de nuestro estudio, el muestreo

nco ha si do planificado atendiendo a un aspecto concreto, si no

qiue nuestra finalidad ha si do obtener un numéro de poblaciones

r represent ativas de diferentes especies pertenecientes al géne- rco Rotylenchus, s i n tener en cuenta otros aspectos, ya que era

neecesario estudiar material recogido y tratado por nosotros a trravés de todas sus etapas para poder tener criterios propi os

soobre la problemâtica existente en torno a la taxonomfa de

laas especies de este género. Por ello, tras la extracciôn de

loos nematodos, nue en la mayorfa de las ocasiones se realize meediante los métodos de centrifugacion y filtra cio n, se se-

leeccionaron los individuos pertenecientes al género iRotylen- chhus y se procedio a su fijacion en glicerina, segun el mé-

toodo de DE GRISSE ( 1969 ), por proporcionar éste una mayor n i t i- deez a las estructuras internas, 1o que tiene una gran importan- ciia para el estudio de la morfologfa de las diferentes espe- ciies, con vistas a fa c ilita r su determinacion. - 149 -

El resto del material utilizado corresponde a diferen tes poblaciones que h an si do estudiadas por otros autores y que se h an seleccion ado atendiendo a dos criterios: la calidad de

la descripcidn y la variacidn intraespecffica. Por calidad de descripcidn hemos entendido que esta debfa ser el resulta- d 0 del estudio de un numéro al menos cercano a los ventiocho caractères que hemos consider ado en nuestro tratamiento automâ- tico. Por este motivo se elimimaron las si gui entes descripcio- n tes : metatipo de R. robustus segun LOOF y OOSTENBRINK ( 1958 ), pcoblacidn de R . oriental is (descri ta como 0 . oriental is ) d e

J/AIRAJPURI y SIDDIQI (1979) y poblaciones de R. al pi nus y R. pu milus de KANKINA y TEBENKOVA (1980). Siguiendo a SNEATH y SOKAL

(11973): "The OTUs should be chosen to represent appropriately title variation to be studied", se eliminaron las poblaciones de

R.. oriental is de CHOI et al . ( 1972 ) y de SULTAN ( 1980 ), quién hemos de indicar cita R. oriental is y no 0. oriental is por el

umico motivo de que su trabajo fué aceptado para publicacion e 11 17-12-1975, esto es, dos ahos antes de que JAIRAJPURI y SID-

DÏÏQI le transfiricran al génère Orientylus. Per otro lado, no pudimos incluir en nuestro estudio la especie R. microstriatus

S ii d d i q i _e_t Corbett, 1983, debido a*su fecha de publicacion, no obstante su posible situacion con respecto a las demis espe- ciies descri tas se discute en el apart ado de taxonomfa numé- r ii c a .

En cuanto a los métodos seguidos para el tratamiento auitomâtico, hemos de indicar en primer lugar que la seleccion - 150 -

de los caractères se basé en la objetividad de los mismos.

Asf, aunque estudiados, no se incluyeron los caractères que se consideran comunes a todas las especies como es la presencia de

4 incisuras en los campos latérales, ni aquéllos que son subjç- tivos y pueden variar con el observador, 1o que no es facilmen- te cuantificable, como son la forma de la region labial y su continuidad o separacion mâs o menos marcada con el resto del cuerpo, 0 la forma de la region caudal o de los nodulos del estile te. Tampoco se incluyeron los machos, ni si qui era se indi- c d si exist fan o no, porque esto hubi era representado una d i- cotomfa demasiado brusca, disonante con el resto de los carac tères, y porque en la bibliograffa, asf como en nuestro estu dio, se encuentran a veces unicamente las hembras pertenecien tes a especies que h an si do descri tas con machos.

Con respecto a los ventiocho caractères empleados, es tes se dividieron en fijos y no fijo s, y estos ultimos a su vez en fndices y absolutos, de tal modo que todos los anâli sis numéricos fueron dobles,ya que se realizaron tanto para los caractères fijos + fndices como para los caractères fijos

+ absolutos, Esto es, los caractères fijos fueron inclufdos en todos los anâlisis por ser independientes, en tanto que en el caso de los no fijo s, formados por fndices y absolutos, no po- difa utilizarse mâs que u no de los dos tipos, ya que el empleo de ambos habrfa si do redondante al ser los fndices combinacio- n es lineal es de los absolutos. - 151 -

También queremos indicar que, debido a que en muchas dœ 1 as descri pci ones de. poblaciones de la bibliografia los au- t cores unicamente d an los valores mfnimo y mâximo de cada c a- rcacter, omitiendo la media aritmética, para cuyo calcule no piublican datos sufici entes, hemos utilizado el valor medio en t codas ellas con el fin de hacer un anâlisis mâs homogéneo de

1 cas mismas. S i n embargo, en el caso de las poblaciones estudia- dcas por nosotros, hemos crefdo preferible utilizar la media arritmética, porque considérâmes que ésta se acerca mâs al va-

Icor real de cada carâcter dentro de una poblacion.

Los tra tamientos automâtices realizados pueden dividir- sæ endos grupos; métodos de agregacion y métodos de ordena- ciion. Dentro del primer grupo se ha utilizado el método de 1i - gaamiento simple, concret amente la red de conexiôn minima, que paara un conjunto de t OTUs realiza t - 1 conexiones entre pares dee OTUs, cumpliendo, como indica ROHLF (1982), las condiciones dæ que no existen circuitos cerrados, cada OTU estâ conectado a 11 menos con otro OTU y la longitud de la red es la menor poci bile. También dentro del primer grupo se ha utilizado el méto- doD de ligamiento promedio, en el que hemos empleado la media arritmética y cuyos resultados se h an representado mediante fe- noogramas basados en dos tipos de coeficientes de semejanza: dis- taincia taxonomica y coefici ente de correlacion. En cuanto a loos métodos de ordenacion, se basan en la disposicion de los

_t OTUs en un espacio dado de dimensionalidad variable. En nues- tr'o estudio hemos empleado el anâlisis de componentes principa- - 152 -

lies, en el que el refer i do espacio es _n-dimensional, siendo _n eîl numéro de caractères inclufdos, y el anâlisis de coorde- niadas principales, donde el espacio tiene t - 1 dimensiones.

La aplicacion de estos métodos a un género de nemato-

dios parâsitos de plantas nos va a permitir no solo confirmar

0 ), en su caso, modi fi car la validez de los criterios seguidos

poor los diferentes autores, si no también observar cuâles de

Il os distintos métodos de anâlisis utilizados résulta mâs a-

poropiado a este grupo de nematodos. Asf, si bien creemos que

Il os tra tamientos empleados son complementarios, pens amos que en

gqeneral aquéllos en los que la pérdida de information es me-

ncor son los mâs adecuados, ya que segun ROHLF y SOKAL (1981)

urn método de clasificacion es tanto mâs deseable cuanto me- jcor refieje la matriz de semejanza en que se ha basado. Efecti-

vcamente, hemos podido comprobar que u no de los anâlisis en los

qiue se pierde mayor cantidad de informacion es el de ligamien-

tco promedio, representado por dendrogramas fenéticos o fenogra- mcds, en los que el coeficiente de correlacion cofenética sola- meente en dos ocasiones fué superior a 0,8, valor sen al ado como

SLuficiente por SNEATH y SOKAL (1973). Por el contrario, los mé-

tcodos de ordenacion son los que h an dado resultados mâs satis-

faactorios en nuestro estudio, y a que en el anâlisis de coorde-

naadas principales se consiguio expli car el 48 , 47 y el 49 ,78 %

dee la information contenida en el espacio de dimensiones, y en losanâlisis de componentes principales se explico entre e 11 51,24 y 76,91 % de la information contenida en las n dimen - - 153 -

s iones. Ademâs, para establecer el grado de congruencia entre estos dos métodos de ordenacion, se realizo un tratamiento comparâtivo, cuyo result ado arrojo valores muy altos, de

0,94437 y 0,99131, 1o que indica ademâs su gran fiabilidad al obtenerse los mismos resultados con los dos tipos de anâlisis.

Estudio comparative entre el anâlisis morfométrico y el trata miento automation de las poblaciones estudiadas por nosotros.

Em este apartado vamos a analizar las relaciones de cada una de

apartado en siete subapartados, correspondientes a cada una de

1 cas especies encontradas. Para todas aquellas especies de las

q Lue se ha estudiado mâs de una poblacion se van a discutir en

primer lugar los aspectos morfométrico y numérise de dichas

poblaciones entre sf. A continuas ion, y en todos los casos,

se tratarân los mismos aspectos con respecto a las poblaciones

descri tas en la bibliograffa.

En el aspecto numérico se ha preferido analizar los re-

sujltados segun el orden decreeien te de pérdida de informa-

ciion, esto es, fenogramas, red de conexion mfnima y por u l

timo componentes principales, precedido en su caso del anâli- - 154 -

sis de coordenadas principales. Las poblaciones estudiadas por nosotros intervienen en très tipos de anâlisis: u no en el que s ce incluyeron todas ellas, otro en el que se excluyeron las dos especies nuevas, y un tercero realizado con todas ellas y todas lias tomadas de la bibliograffa, de modo que en los casos perti nentes se van a discutir los dos primeros conjuntamente, con el fin de mantener el orden an teriormente sehalado.

- R. brevicaudatus ,

En el estudio nematologico se observa que las cinco po blaciones encontradas son muy homogéneas, tanto en sus valores morfométricos como en su morfologfa. Del anâlisis de sus me- diidas se desprende que la mayor diferencia existente entre los vesinte individuos estudiados estâ representada por la longitud t cotai que, con un mfnimo de 693,2 /jm. y un mâximo de 860,2 jum supone una diferencia de 167,0 pm, que, si en principio podrfa resultar llamativa. no se refieia s i n embargo en aquellas otras medidas en que interviene la longitud total, como son los fndi- ceîs _a, _b, _b' y V_, 1 o que indica una gran uniformidad en las pro- porciones. Este hecho nos lleva a creer que la diferencia seha- laida es solo debida a la variacidn individual présente en todo) tipo de organismes, que ademâs en este caso puede venir a- centuada por el hecho de que los individuos proceden de hâbi- tats y âreas diferentes. - 155 -

Para el tratamiento numérico se asignaron a las pobla- c iones de R. brev i caudatus los si gui entes numéros: 60(muestra n'“ 5340 a), 61(n° 5344), 62(n" 5341), 63(n° 3952) y 89(n°4994).

(Figs. 18 y 22) las poblaciones 60, 62, 63 y 89 aparecen fuer- tæmente unidas, en tanto que la n“ 61 se une siempre antes a a 1 - giuna poblacion de R. unisexus (73 y 74 en el fenograma de dis- t (ancia y 75 en el de correlacion para el primer anâlisis; 73 em el de distancia y 76 en el de correlacion para el segundo).

Essto mismo ocurre en las dos redes de conexion mfnima (Figs.

19 y 23) y en las proyecciones de los anâlisis de componentes prrincipales (Figs. 21 y 25). De la observation de los valores morfométricos de las cinco poblaciones se desprende que la n“

611 présenta los valores mâs altos para los fndices _a y£', y e 11 mâs bajo para el fndice ^ , 1 o que se manifiesta al superpo- n er los vectores propi os a los respectivos anâlisis de compo nentes principales, siendo los vectores 15, 18 y 20, correspon- d ii en tes a los mencionados fndices los que hacen que la poblacion 61 se aie,je del resto de 1 as poblaciones de R. brev icauda t u s , de modo mâs notable en el segundo anâlisis, hecho que pa- reice deberse a que en éste las poblaciones disponen de mâs es- patio para dispersarse, 1o que no ocurre al estar présentes las dos nuevas especies (poblaciones 80-87 y 88), que parecen res- trin g irla s a una zona mâs pequena del espacio. Por otro lado, heimos de tener en cuenta que la poblacion 61 cons ta de un uni- c0 individuo, de tal modo que su variacidn individual no ha po dido ser absorbida por otros individuos, como probab1emente - 156 -

h mb 1 era ocurrido de haberse encontrado una poblacion mâs n u- mterosa y que de hecho ha tenido lugar en el caso de los indivi- diuos con longitud mâxima y mfnima que hemos comentado ante- r iormente y que pertenecen a las poblaciones 60 y 63, que se piresentan siempre dentro del grupo.

Con respecto a las poblaciones de la bibliograffa, que-

rlemos indicar que nuestras poblaciones se ajustan a las descrip-

c iones dadas por COLBRAN (1962), SHER (1965) y VAN DEN BERG y

HEEYNS (1974), y segun nuestra opinion en gran medida, ya que d(e los doseientos valores tornados solo en veinticuatro se sepa-

rcan de los indie ados por los autores mencionados, siendo ade- m(âs las diferencias tan pequehas que no justificarfan el no

acdmitirlas como debidas a la variabilidad individual ya comenta- d ca.

Para el tratamiento numérico de las poblaciones de R.

bmevicaudatus tomadas de la bibliograffa se les asignaron los

numéros 6, 7 y 8. En los fenogramas de distancia y correla- ciidn (Fi g. 26) se observa que las poblaciones 6 y 7 se unen fuertemente, quedando en ambos casos separadas de la n° 8. Por ottro lado las poblaciones 60, 62, 63 y 89 se siguen uniendo en

tre sf pero aiejadas de la bibliograffa, y la n" 61 queda en uma posicidn intermedia entre los dos grupos. Esta situacidn

se manifiesta también en la red de conexidn mfnima (Fi g. 27)

aunque en ésta ambos grupos se acercan mâs entre sf y a la - 157 -

poblacidn 51. Tan to en la proyeccion del analisis de coordenadas principales (Fig. 28) como en la de componentes principa les (Fig. 31) las poblaciones de R. brev icaudatus de la bibliograffa, asf como las estudiadas pqr nosotros se agrupan con las de R. incultus (32 y 33) y R. uni sexus ( 50 , 51 , 73-79 , 90 y 91) formando un grupo bas tante homogéneo, 1o que se debe a que las très especies present an valores muy prdximos para 1 os diferentes caractères e Indices, en especial los si gui entes:

V_, numéro de "ani 11 os" entre los fasmidios y e 1 nivel del ano, c_' y _0, represent ados por los vectores propi os 3, 7, 18 y 20 respectivamente.

- R. catharinae.

Desde e1 punto de vista morfomëtrico, las cuatro pobla ciones de R. ■ catharinae estudiadas por nosotros son not.ablemen te iguales, no existiendo mas diferencia digna de mène ion que e1 hecho de que solo se h an encontrado machos en una de ellas.

Ahora bien, si tenemos en cuenta la baja frecuencia que presen- t an los machos en la mayorfa de las especies de nematodos y que la poblacion en la que h an aparecido escon mucho la mas numerosa, creemos que esto no puede considerarse como una caren- cia de homogeneidad, si no como un hecho que se viene comproban- do ampliamente en e1 campo de la Nematologla. - 158 -

En el tratamiento automatico, estas poblaciones fueron numeradas del modo si gui ente: 64 (muestra n' 4072),65 (n°3933 ),

6(6 (n* 3977) y 67 (n“ 3990). En los fenogramas de distancia y ciorrelacidn (Figs. 18 y 22) se manifiesta claramente la uni for- mi d ad comentada, al disponerse las poblaciones de R. catharinae s iempre juntas y bastante separadas de las demas, hecho que se olbserva con mayor claridad en las redes de conexion minima

(fFigs. 19 y 23) y en las proyecciones de los analisi s de compo- n «entes principales (Figs. 21 y 25), donde constituyen un grupo bien défini do y delimitado, que en e1 primer caso (Fi g. 21) ad- qiuiere una posicidn intermedia determinada por e1 tamaho de es- t

Con respecto a la unica poblacidn de la especie R. c a- thiari n a e descri ta en la bibliografla, y a se indicd en e 1 ca- pl'tulo de result ados que, a pesar de que dicha descri pcidn se reîalizd con dos hembras y un macho unicamente, nuestros indi- vfduos se ajustan perfectamente a la misma, tanto en lo que se - 159 -

refiere a la morfologfa como a sus valores morfometricos.

Que las poblaciones estudiadas por nosotros pertenecen a la especie R. catharinae se confirma ademas mediante los tratamientos numericos,en los que la poblacion original figura con el numéro 14.Asf, en el fenograma (Fig. 26) de correlacidn nuestras poblaciones (64-67) siguen formando un grupo compacto y bastante proximo a la poblacidn original (14), y en el de distancias lapoblacidn 64 se sépara ligeramente de las demas para unirse a el la. En la red de conexidn minima (Fig.

27) las cinco poblaciones permanecen uni das formando un grupo, que se mantiene en las proyecciones de los analisis de coordenadas principales (Fig. 28) y de componentes principales (Fig.

31), mostrando la posicidn intermedia anteriormente comentada

- R. incultus.

Las dos poblaciones estudiadas que hemos incluldo en

la especie R. incultus present an una morfologla y unos valores morfometricos muy semejantes, diferenciandose unicamente en que en una de ellas no se h an encontrado machos y en que esta misma poblacidn présenta un Indice _0 mayor (26,5-32,6 tren te a 18,8 %) y un Indice menor (45,9-47,6 trente a 50 %).

En los analisis numéricos estas poblaciones se numera - 160

r on como 68 (muestra n** 5352 ) y 69 (n“ 4992 ). En los fenogramas

(Fi g. 18) ambas poblaciones no se unen directamente, si no a tra- vés de poblaciones de R. unisexus, R. pumilus y R. catharinae en e1 fenograma de distancia y mediante poblaciones de R. unise xus en e1 de correlation. En e1 segundo fenograma de distan cia (Fi g. 22) las dos poblaciones se unen una a otra y se sepa- r an de las demas; y en e1 segundo fenograma de correlation se unen por medio de la poblacidn 74 de R. unisexus, al igual que en la primera red de.conexidn minima (Fig 19). En la segunda red de conexidn minima (Fig. 23) las poblaciones 68 y 69 de

R. incultus se unen a travës de las poblaciones 61 de R. brevicaudatus y 75 , 73 y 74 de R. uni sexus. En la proyeccidn del analisis de componentes principales (Fi g. 21) la poblacidn 68 esta mas prdxima a las poblaciones de R. brevicaudatus que a la n “ 69, que a su vez esta mas prdxima a las poblaciones de