Recherche Et Caracterisation D'activités
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REPUBLIQUE ALGERIENNE DEMOCRATIQUE ET POPULAIRE MINISTERE DE L’ENSEIGNEMENT SUPERIEUR ET DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE CENTRE UNIVERSITAIRE BELHADJ BOUCHAIB D’AIN-TEMOUCHENT Institut des Sciences Département des Sciences de la Nature et de la Vie Mémoire Pour l’obtention du Diplôme de Master en Sciences Biologiques Option : Biochimie Présenté par: Melle. BRAHIMI Ferdaous Melle. ABDELOUAHAB Ahlem RECHERCHE ET CARACTERISATION D’ACTIVITÉS AMYLASIQUES, LIPASIQUES ET CATALASIQUES CHEZ DES GOMMES DE L’AMANDIER ET DE L’ACACIA Encadrant M. Sofiane Mourad BENYAMINA Maitre de Conférences « B » au C.U.B.B.A.T Soutenu le 08/09/2020 Devant le jury composé de : Présidente : Dr. Nassima BRIXI GORMAT (MCB) C.U.B.B.A.T Examinateur : Dr. Farid BENNABI (MCB) C.U.B.B.A.T Encadrant : Dr. Sofiane Mourad BENYAMINA (MCB) C.U.B.B.A.T Remerciements Ce travail est l’aboutissement d’un dur labeur et de beaucoup de patience, nos remerciements vont d’abord au Créateur de l’univers qui nous a doté d’intelligence, nous a maintenu en santé, et de nous avoir donné le courage et la force pour réaliser ce modeste travail. On voudrait tout d’abord adresser toute nos gratitudes à l’encadrant de ce mémoire, Monsieur Sofiane Mourad BENYAMINA, pour son aide, son encouragement prodigués tout au long de ce travail de recherche, ainsi que pour son grande disponibilité, son rigueur scientifique, son enthousiasme et son précieux conseils qui nous ont permis de travailler dans les meilleures conditions. Nous les remercie aussi pour sa confiance, sa gentillesse ainsi que pour son regard avisé sur nos travaux. Nos remerciements s’étendent également à qui nous a fait l'honneur de présider le jury Madame Nassima BRIXI GORMAT, ainsi qu’à Monsieur Farid BENNABI, qui a accepté d'examiner notre texte, pour leur lecture attentive du mémoire et pour les remarques qu’ils nous adresseront afin d’améliorer notre travail. On désire aussi remercier les professeurs de l’université d’Ain Temouchent, qui nous ont fourni les outils nécessaires à la réussite de nos études universitaires. Enfin, on peut passer outre notre reconnaissance envers, nos parents, notre famille et nos amis. Leur présence, leur écoute, leur confiance en nous et leur soutien constant nous ’assurent des bases solides nous permettant de persévérer et de nous surpasser. Sommaire Remerciement Liste des abréviations Liste des figures Liste des tableaux Introduction 02 Synthèse Bibliographique 1. Les enzymes 05 1-1.Mode d’action 05 1-2. Classification des enzymes 06 1-2-1. Les enzymes intracellulaires 07 1-2-2. Les enzymes extracellulaires 08 1-3. Importance des enzymes 08 1-3-1. Importance au niveau cellulaire 08 1-3-1-1. Les enzymes des cellules microbiennes 08 1-3-1-2. Les enzymes des cellules animales 09 1-3-1-3. Les enzymes des cellules végétales 09 1-3-2. Importance au niveau industriel 10 1-3-2-1. Les enzymes microbiennes 11 1-3-2-2. Les enzymes animales 11 1-3-2-3. Les enzymes végétales 12 2. Les hydrolases 12 2-1. Classification des hydrolases 13 2-2. Importance des Hydrolases 14 2-2-1. Au niveau cellulaire 14 2-2-1-1. les hydrolases des cellules microbiennes 14 2-2-1-2. Les hydrolases des cellules animales 15 2-2-1-3. Les hydrolases des cellules végétales 15 2-2-2. Au niveau industriel 15 2-2-2-1. les hydrolases des cellules microbiennes 16 2-2-2-2. les hydrolases des cellules animales 16 2-2-2-3. Les hydrolases des cellules végétales 17 3. La Gomme Arabique 17 3-1. Les propriétés de la gomme arabique 18 3-2. Rôle et Importance de la gomme arabique 19 Matériel et Méthodes 1. Collecte des échantillons des gommes 22 2. Caractérisation d’activités enzymatiques chez les gommes 22 2-1. Caractérisation de l'activité amylasique des différentes gommes 22 2-2. Courbe d’étalonnage de l’amidon 23 2-3. Influence du temps sur l’activité amylasique des gommes 23 2-4. Influence de la température sur l’activité amylasique des gommes 24 2-5. Influence du pH sur l’activité amylasique des gommes 24 2-6. Influence du CaCl2 sur l’activité amylasique des gommes 24 3. Effet de différents traitements, thermique, pH et CaCl2 sur la stabilité des 25 amylases des gommes 3-1.Effet du traitement thermique sur la stabilité des amylases 25 3-2. Effet du pH sur la stabilité des amylases 25 3-3. Effet du CaCl2 sur la stabilité des amylases 25 4. Recherche et caractérisation de l'activité lipasique des différentes gommes 26 4-1.Influence du temps sur l’activité lipasique des gommes 26 4-2.Influence de la température sur l’activité lipasique des gommes 27 4-3. Influence du pH sur l’activité lipasique des gommes 27 4-4. Influence de CaCl2 sur l’activité lipasique des gommes 27 5. Effet de différents traitements, thermique, pH et CaCl2 sur la stabilité des 28 lipases des gommes 5-1.Effet du traitement thermique sur la stabilité des lipases 28 5-2. Effet du pH sur la stabilité des lipases 28 5-3. Effet du CaCl2 sur la stabilité des lipases 28 6. Caractérisation de l’activité catalasique des différentes gommes 28 6-1.Courbe étalonnage de l’H2O2 29 6-2. Influence du temps sur l’activité catalasique des gommes 29 6-3. Influence de la température sur l’activité catalasique des gommes 30 6-4. Influence du pH sur l’activité catalasique des gommes 30 6-5. Influence du CaCl2 sur l’activité catalasique des gommes 30 7. Effet de traitements, thermique, pH et CaCl2 sur la stabilité des catalases des 30 gommes 7-1. Effet du traitement thermique sur la stabilité des catalases 30 7-2. Effet du traitement du pH sur la stabilité des catalases 31 7-3. Effet du traitement du CaCl2 sur la stabilité des catalases 31 Résultats et discussions 1. Caractérisation de l’activité enzymatique chez les gommes 33 1-1. Caractérisation de l'activité amylasique des différentes gommes 33 1-2. Influence du temps sur l’activité amylasique des gommes 34 1-3. Influence de la température sur l’activité amylasique des gommes 35 1-4 Influence de pH sur l’activité amylasique des gommes 37 1-5. Influence du CaCl2 sur l’activité amylasique des gommes 38 2. Effet de différents traitements, thermique, pH et CaCl2 sur la stabilité des 39 amylases des gommes 2-1. Effet du traitement thermique sur la stabilité des amylases 39 2-2. Effet du pH sur la stabilité des amylases 40 2-3. Effet du CaCl2 sur la stabilité des amylases 41 3. Discussion générale de l’activité amylasique 42 4. Caractérisation de l'activité lipasique des différentes gommes 44 4-1. Influence du temps sur l’activité lipasique des gommes 45 4-2. Influence de la température sur l’activité lipasique des gommes 46 4-3. Influence de pH sur l’activité lipasique des gommes 47 4-4. Influence de CaCl2 sur l’activité lipasique des gommes 48 5. Effet de différents traitements, thermique, pH et CaCl2 sur la stabilité des lipases 49 des gommes 5-1. Effet du traitement thermique sur la stabilité des lipases 49 5-2. Effet du pH sur la stabilité des lipases 50 5-3. Effet du CaCl2 sur la stabilité des lipases 51 6. Discussion générale de l’activité lipasique 52 7. Caractérisation de l’activité catalasique des différentes gommes 54 7-1. Influence du temps sur l’activité catalasique des gommes 55 7-2. Influence de la température sur l’activité catalasique des gommes 56 7-3. Influence du pH sur l’activité catalasique des gommes 57 7-4. Influence de CaCl2 sur l’activité catalasique des gommes 58 8. Effet de traitements, thermique, pH et CaCl2 sur la stabilité des catalases des 59 gommes 8-1. Effet du traitement thermique sur la stabilité des catalases 59 8-2. Effet du pH sur la stabilité des catalases 60 8-3. Effet du traitement du CaCl2 sur la stabilité des catalases 61 9. Discussion générale de l’activité catalasique 62 Conclusion et perspectives 66 Références bibliographiques 70 Résumé Abstract LISTE DES ABREVIATIONS CaCl2 : Chlorure de calcium DO : Densité Optique EC : classe d’enzyme h : heure HCl : Acide Chlorhydrique H2O2 : Peroxyde d'hydrogène mL : Millilitre Mg : Milligramme mM :Millimolaire min : Minute M : Molaire nm : Nanomètre NaOH : Hydroxyde de sodium pH : Potentiel d’Hydrogène R : Réactif v/v: volume/volume μL : Microlitre % : pourcentage °C : Degré Celsius LISTE DES TABLEAUX Tableau 1 : Classification des enzymes et leur mode d’action 06 Tableau 2 : Différentes concentrations utilisées pour la préparation de la courbe étalon de 23 l’amidon . Tableau3 : Différentes concentrations utilisées pour la préparation de la courbe étalon de 29 l’H2O2. Tableau 4 : Tableau récapitulatif des résultats de la caractérisation de l’activité et de la 44 stabilité des amylases des 2 solutions des gommes. Tableau 5 : Tableau récapitulatif des résultats de la caractérisation de l’activité et de la 54 stabilité des lipases des 2 solutions des gommes. Tableau 6 : Tableau récapitulatif des résultats de la caractérisation de l’activité et de la 65 stabilité des catalases des 2 solutions des gommes. LISTE DES FIGURES Figure 1 : Utilisation des enzymes dans les différents secteurs d’industrie 10 Figure 2 : Exsudat sous forme de gomme arabique récolté sur le tronc d’arbuste forestier 18 de la famille des Acacia. Figure 3 : Courbe étalon de l’amidon. 33 Figure 4 : Influence du temps sur l’activité amylasique des 2 solutions des gommes 35 Figure 5 : Influence de la température sur l’activité amylasique des 2 solutions des 36 gommes.