ESTUDIO DE LA RESPUESTA INMUNE Y EXPRESIÓN GÉNICA DEL MEJILLÓN MEDITERRÁNEO, Mytilus Galloprovincialis
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CONSEJO SUPERIOR DE INVESTIGACIONES CIENTÍFICAS INSTITUTO DE INVESTIGACIONES MARINAS UNIVERSIDAD DE VIGO DEPARTAMENTO DE BIOQUÍMICA, GENÉTICA E INMUNOLOGÍA ESTUDIO DE LA RESPUESTA INMUNE Y EXPRESIÓN GÉNICA DEL MEJILLÓN MEDITERRÁNEO, Mytilus galloprovincialis. Memoria presentada por: MARÍA DEL MAR COSTA PORTELA para optar al grado de Doctora en Biología. Dirigida por: Dra. Beatriz Novoa García Dr. Antonio Figueras Huerta VIGO 2008 Dña. BEATRIZ NOVOA GARCÍA, Doctora en Biología e Investigador Científico del Consejo Superior de Investigaciones Científicas junto con D. ANTONIO FIGUERAS HUERTA, Doctor en Biología y Profesor de Investigación del Consejo Superior de Investigaciones Científicas, INFORMAN: Que la presente memoria adjunta, titulada “Estudio de la respuesta inmune y expresión génica del mejillón mediterráneo, Mytilus galloprovincialis”, presentada por Dña. María del Mar Costa Portela para optar al grado de Doctora en Biología en la Universidad de Vigo, ha sido realizada bajo su dirección y, reúne los requisitos necesarios para ser defendida ante el tribunal calificador. Y para que así conste, firmamos la presente en Vigo a 31 de Marzo de 2008. Fdo. Dra. Beatriz Novoa García Fdo. Dr. Antonio Figueras Huerta Dña. ÁFRICA GONZÁLEZ FERNÁNDEZ, Doctora en Medicina y Cirugía, Especialista MIR en Inmunología y Profesora Titular de Inmunología del Departamento de Bioquímica, Genética e Inmunología de la Universidad de Vigo, INFORMA: Que la presente memoria adjunta, titulada “Estudio de la respuesta inmune y expresión génica del mejillón mediterráneo, Mytilus galloprovincialis”, presentada por Dña. María del Mar Costa Portela para optar al grado de Doctora en Biología en la Universidad de Vigo, ha sido realizada bajo su tutela y reúne los requisitos necesarios para ser defendida ante el tribunal calificador. Y para que así conste, firmo la presente en Vigo, a 31 de Marzo de 2008. Fdo. Dra. África González Fernández El trabajo presentado en la presente memoria ha sido posible gracias a la adjudicación de una beca Predoctoral de Formación de Personal Investigador (FPI), asociada al proyecto de investigación del Ministerio de Educación y Ciencia: “Bases moleculares de la respuesta inmune de moluscos bivalvos” (AGL2003- 02454) y a la financiación del proyecto europeo: “Improved immunity of aquacultured animals (IMAQUANIM)” (FOOD-CT-2005-007103). AGRADECIMIENTOS Cuando se llega a un momento como este, en el que la meta se ve ya muy cerca, es inevitable echar la vista atrás y recordar a todas aquellas personas que de un modo u otro han estado a tu lado durante estos últimos cuatro años. Sin ellos, este recorrido se hubiese convertido en un camino fangoso y lleno de piedras. Sin embargo, pese a encontrarme con algún que otro accidente y con mucho tráfico en horas puntas, se puede decir que he estado circulando por una autopista. En primer lugar quería agradecer a la Dra. Beatriz Novoa y al Dr. Antonio Figueras el haberme dado la oportunidad de incorporarme a su grupo y transmitirme la ilusión por la investigación. Sus palabras de ánimo en mis momentos de agobio, su cercanía en mis salidas al extranjero así como sus sugerencias y consejos, han sido claves para continuar adelante. Muchas gracias por todo. Nada hubiese sido lo mismo sin mis compañeros del grupo de Patología, quienes han contribuido a que sean los buenos recuerdos de estos cuatro años los que permanezcan en mi memoria. Gracias a todos los técnicos y personas de prácticas que han pasado por el laboratorio, de todos ellos he aprendido algo y han hecho mi trabajo más llevadero. A Dorita, a María y a Eva por haberme enseñado las primeras técnicas que me sirvieron de base para toda mi tesis. A Monse, Miriam y Vanessa por su ayuda desinteresada y por tantos y tantos aislamientos de RNA que me han ahorrado, siento los callos de las manos y espero que estas líneas los puedan compensar. A Saleta y a Ana Mato, por su alegría, ayuda, disposición y generosidad, y por las múltiples intentonas con la genoteca. El sprint final de mi tesis hubiese sido mucho más costoso sin su ayuda. A José Ramón por sus silbidos y cánticos matutinos. A Bego por su ejemplo de lucha continua diaria, por demostrarme que con tesón y voluntad, hasta las mayores dificultades se pueden superar. A Susana por toda la ayuda prestada en la secuenciación de muestras. A los “aquaman” Nacho, Suso y Rubén por la inestimable ayuda que me han dado en el mantenimiento de acuarios, en la preparación de los tanques, en el arte del sifonado (nunca entenderé la teoría de los vasos comunicantes) y en la costosa puesta del mejillón ¿verdad Rubens? Gracias a los postdoc del grupo que me han guiado en mis dudas experimentales y me han aconsejado en la redacción de los artículos. A Camino Ordás y a Raquel, por nuestras temporadas compartiendo despacho y por las confidencias allí vividas. A Pépicus (“el catalán del perro”) por todos los consejos que me ha dado y porque las comidas han tomado un cambio radical desde su llegada. ¡Cuánto voy a echar de menos esos pitidos interminables del timer! A Camino Gestal por toda la ayuda prestada en los experimentos, por nuestras largas horas sangrando mejillones y homogenizando tejidos, por sus sugerencias y sobre todo por sus palabras de ánimo que me han motivado tantas y tantas veces en momentos duros. Un gran pedazo de esta tesis es también suya. A Sonia, por su celtismo, por ser compañera, amiga y una de las mejores personas que he conocido. Porque siempre ha estado dispuesta a ayudar aún cuando su carga de trabajo fuese más grande que la mía propia. Porque cualquier experimento se tornaba más divertido con un poco de “derroche de amor, cuanta locura”. Ahora por fin parece que: “…xa vai, xa vai….”. ¡Gracias por todo Soniare! No me puedo olvidar de nombrar a los doctores más noveles del grupo: Álex y Pablito (Dr. Romero y Dr. Balseiro ¡qué fuerte suena!). Al maño-extraño por todo el apoyo logístico de esta tesis, por su minuciosidad en el trabajo (¡esos ciclos de PCR escritos con regla! ¡Míticos!), por sus imitaciones, onomatopeyas y representaciones. Las historias no serían lo mismo sin su narración (… ¡y EX-PLO-TÓ!). A Pablo, por toda la ayuda proporcionada desde el primer día de mi entrada en este laboratorio. Gracias a él pude superar las adversidades de los primeros meses, siempre duros. Aprendí a “estar flipando”, a apreciar la belleza de una fabada congelada, a comer un mango hasta por los codos y a conocer la verdadera importancia de El Ferrol de Balseiro. A todos los habitantes de nuestro pequeño gran zulo de los predocs, a los constantes y a los exiliados (Iván, esto va por ti), porque el encontrarnos en la misma situación nos ha hecho comprendernos y compaginarnos muy bien. A Lauriña por nuestras aventuras de Thelma y Louise (nunca supe quien era Susan Sarandon y quien Geena Davis) y por haberme hecho descubrir las nueces chocolateadas (¡mis michelines te saludan!). A Jorch, Yorgisan, Xurxil…por haberme hecho descubrir el maravilloso mundo de la DGGE y la isla de Ons. Por todos los buenos momentos que hemos compartido sobre todo con la Dra. Xur (a ver si un día me explicáis quien es Xur y quien Xur, nunca me quedó muy claro) que espero que se mantengan por muchos años. A Ariana, por tantos y tantos cotilleos vividos en nuestro despacho y sobre todo por sus cánticos magistrales (creo que el próximo casting de OT está cerca). A Iván (¡Vaniiiii!), por su sonrisa y alegría constantes, por su transmisión de buen rollo continua y por… ¡cómo no! ser el auténtico chuli-boy del grupo. A María, amiga y confidente, por todos los momentos compartidos dentro y fuera del laboratorio, por sus múltiples consejos y apoyos en momentos de bajón. Por nuestras sesiones de Gran Hermano acompañadas de pizzas y palmeritas y sobre todo por nuestras ganas de leria (¡Juaaaaaaaan!) que tan bien sientan en determinados momentos. A Mafalda, por descubrirme una nueva imagen de Portugal, sobre todo a Quim Barrerios. ¡Qué sería de nosotros sin “os peitos da cabritinha”! No me quiero olvidar de Elvira, Erica, Paola e Isa que aunque no fue demasiado el tiempo que compartimos, de todas ellas he aprendido algo. Quisiera dar las gracias al Dr. Víctor Mulero y a todo su equipo porque han hecho que Murcia tenga un rinconcito en mi corazón. A los Drs. Stewart Johnson y Laura Brown así como a todo el equipo de Canadá, por su maravillosa acogida y por hacerme sentir una más de su grupo desde el primer día. A la Dra. Paola Venier, a Laura, Ilaria y Martina, al Dr. Alberto Pallavicini, a René, a Deborah, a María... y a todas las personas que he conocido en Italia, por su cariño, hospitalidad y por haber hecho que mi estancia haya sido maravillosa. Al Dr. Philippe Roch y a los miembros de su equipo por toda la ayuda y consejos prestados en este trabajo y por haberme permitido descubrir el Montpellier navideño. Al Dr. Juanjo Pasantes y a Cuca por toda su ayuda con el costoso FISH y por el trato tan maravilloso que me han dado. A la Dra. Paloma Morán por la ayuda prestada con en el Southern. A la Dra. África González por su inestimable ayuda, siempre dispuesta a dar ánimos para continuar en la carrera investigadora. Gracias a todo el personal del IIM (dirección, administración, almacén, centralita, limpieza, mantenimiento…) por hacerme la estancia en el centro más fácil y agradable. A Juan Luis y a Bea por su ayuda, siempre con una sonrisa, con mis problemas informáticos. A Marigel, Cristina y Julia, por su ayuda infinita en la búsqueda de referencias bibliográficas y por su paciencia con mis dudas tan repetitivas.