Análise Citogenética Das Espécies Do Gênero Hypophthalmus (Siluriformes, Pimelodidae) Da Região Do Lago Catalão, Amazonas, Brasil
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INSTITUTO NACIONAL DE PESQUISAS DA AMAZÔNIA PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM GENÉTICA CONSERVAÇÃO E BIOLOGIA EVOLUTIVA Análise citogenética das espécies do gênero Hypophthalmus (Siluriformes, Pimelodidae) da região do Lago Catalão, Amazonas, Brasil LEILA BRAGA RIBEIRO MANAUS – AM 2009 Livros Grátis http://www.livrosgratis.com.br Milhares de livros grátis para download. LEILA BRAGA RIBEIRO Análise citogenética das espécies do gênero Hypophthalmus (Siluriformes, Pimelodidae) da região do Lago Catalão, Amazonas, Brasil ORIENTADOR(A): Eliana Feldberg, Dra. CO-ORIENTADOR: Alberto Akama, Dr. Dissertação apresentada ao Programa de Pós- Graduação em Genética, Conservação e Biologia Evolutiva, como parte dos requisitos para obtenção do título de Mestre em Genética, Conservação e Biologia Evolutiva. MANAUS – AM 2009 ii FICHA CATALOGRÁFICA R484 Ribeiro, Leila Braga Análise citogenética das espécies do gênero Hypophthalmus (Siluriformes, Pimelodidae) da região do Lago Catalão, Amazonas, Brasil / Leila Braga Ribeiro.--- Manaus : [s.n.], 2009. xiii, 72f. : il. color. Dissertação (mestrado)-- INPA/UFAM, Manaus, 2009 Orientador : Eliana Feldberg Co-orientador : Alberto Akama Área de concentração : Genética, Conservação e Biologia Evolutiva 1. Mapará. 2. Hypophthalmus. 3. Cromossomos. 4. Citogenética. I. Título. CDD 19. ed. 597.520415 SINOPSE As espécies do gênero Hypophthalmus que ocorrem na região do lago Catalão foram caracterizadas citogeneticamente e o número diplóide foi igual a 56 cromossomos para todas. Porém, a fórmula cariotípica, o padrão de distribuição de heterocromatina constitutiva e a localização das regiões organizadoras de nucléolo foram espécie-específicas. Os dados cromossômicos obtidos evidenciam que o grupo estudado possui várias características comuns à família Pimelodidae, o que sugere uma macroestrutura cariotípica conservada para as espécies de Hypophthalmus. Palavras-chave: Cariótipo, Mapará, Bacia amazônica. iii À minha família, pelo amor e incentivo a cada desafio. iv “O mundo não deve ser restringido até que seja compreendido... mas a compreensão deve ser expandida até que possa assimilar o mundo.” Francis Bacon “Aprender é a única coisa de que a mente nunca se cansa, nunca tem medo e nunca se arrepende.” Leonardo da Vinci v Apoio Programa de Pós-Graduação em Genética, Conservação e Biologia Evolutiva. Laboratório de Genética Animal INPA/CPBA. MCT/INPA/PPI - Caracterização genética (cromossomos, proteínas e DNA) de vertebrados amazônicos. MCT/CNPq/CT-Amazônia/CT-Energ nº 13/2006, Proc. 554057/2006-9 - Biotecnologia aplicada ao estudo das populações de peixes de importância econômica para a Amazônia sob coordenação da prof. Dra. Izeni Pires Farias. Convênio do Conselho de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) e da Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado do Amazonas (FAPEAM), pela concessão da bolsa de estudo. vi Agradecimentos À minha orientadora, Dra. Eliana Feldberg, por me receber de braços abertos em Manaus, pela confiança depositada, pela atenção e dedicação na realização deste trabalho. Obrigada também pela compreensão, pela paciência, pela amizade e exemplo profissional. Ao meu co-orientador, Dr. Alberto Akama, pelas sugetões, ajuda na escolha do objeto de estudo e identificação dos espécimes. Ao Dr. Jorge Porto, pelo carinho e apoio no dia-a-dia. A todos os companheiros de laboratório, Brenda, Carlos, Claudia, Eduardo, Érica, Leandra e Rodrigo, pela ajuda e companheirismo durante o mestrado. A Carlos Sotero e Mário Picanço, que me acompanharam nos trabalhos de campo e foram fundamentais na busca dos maparás. Ao Dr. Roberto Ferreira Artoni, por me apresentar a citogenética e despertar meu interesse pela pesquisa. A Dr. Mara Cristina de Almeida e ao Dr. Marcelo Ricardo Vicari, pelas aulas de genética e ensinamentos na bancada. A Miguel Airton de Carvalho, Américo Moraes Neto, e demais companheiros de laboratório da UEPG. Ao Programa de Pós-Graduação em curso de Genética, Conservação e Biologia Evolutiva. Especialmente à secretária Alessandra, sempre disposta a atender nossas solicitações. Aos colegas de mestrado Arlisson, Alessandra, Elizabete, Fabíola, Rodrigo e Suzana, pelas boas conversas na hora do almoço e companhia nas disciplinas. A turma do mestrado de 2008, que me “adotou” e me acompanhou em muitos momentos de diversão. À Bárbara, Mariana e Suzana, pela amizade e carinho vii dedicados. Aos amigos Carlos Schneider, Maria Claudia Gross e Maria Leandra Terencio, pela ajuda nas coletas, no laboratório, pelos ensinamentos e pelas risadas no dia-a- dia. Vocês foram essenciais na execução deste trabalho e na minha adaptação em Manaus. Obrigada à Maria Claudia pelas sugestões, pelo apoio, pelo esclarecimento de dúvidas e por atuar como “orientadora” diversas vezes. Aos amigos Edson e Eduardo, pelas risadas, pelas conversas, pela paciência que tiveram comigo e por cuidarem de mim quando precisei. Minha estadia em Manaus se tornou mais agradável depois que os conheci. Adoro vocês meninos! Às velhas amigas de Iguape, Deborah, Edinah e Glauce, que apesar da distância continuam presentes em minha vida e compartilham comigo cada conquista. Aos colegas da universidade, com os quais dividi quatro anos de muito esforço e diversão, em especial ao Neto, amigo e companheiro de citogenética. Aos meus pais Dália e Antônio (In memorian), que além de me concederem a vida deram sentido a ela. Obrigada pelos ensinamentos, pelo amor e pela estrutura familiar que me deram. Às minhas “irmães” Cátia e Leidi, pela dedicação, pelo carinho e incentivo, vocês foram fundamentais na minha formação. Ao meu irmão Pedro, ao meu cunhado Paulo, aos meus primos Cristiane, João Carlos e Nilson, por desejarem o meu bem e torcerem pelo meu sucesso a cada desafio. Aos meus sobrinhos Miguel e Raquel, que tornam minha vida mais feliz simplesmente por existirem. Amo todos vocês! Agradeço a todos, que de alguma maneira, contribuiram para a realização deste trabalho. viii Resumo O gênero Hypophthalmus é constituído por peixes de couro e de hábito pelágico, incluindo quatro espécies válidas, três das quais (H. edentatus, H.fimbriatus e H. marginatus) ocorrem na bacia amazônica. Esse grupo apresenta uma taxonomia baseada apenas em dados morfológicos que é ainda bastante confusa. Dados citogenéticos do gênero são escassos, não existindo nenhuma informação sobre as espécies amazônicas. Com base nisso os objetivos desse trabalho foram otimizar técnicas para obtenção de cromossomos mitóticos em Hypophthalmus spp., caracterizar citogeneticamente as espécies do gênero e seus morfotipos que ocorrem no lago Catalão e buscar marcadores citogenéticos espécie-específicos que auxiliassem na elucidação taxonômica do grupo. Para isso foram capturados 167 indivíduos, pertencentes às três espécies e testadas três metodologias de obtenção de preparações cromossômicas. Desse total foi possível obter preparações cromossômicas de boa qualidade de 43 exemplares, totalizando 1192 metáfases analisadas. O número diplóide obtido para todos os indivíduos foi 56 cromossomos, sem heteromorfismo de cromossomos sexuais e sem diferença entre as espécies e seus morfotipos. Entretanto, diferenças interespecíficas foram vistas com relação à fórmula cariotípica, número fundamental e localização das RONs. As RONs foram simples e sempre localizadas na porção terminal de braços curtos de cromossomos submetacêntricos, que variaram quanto à posição no cariótipo, mostrando-se um bom marcador. Blocos heterocromáticos foram observados nas regiões centroméricas e teloméricas de vários cromossomos do complemento, porém, de uma maneira geral, foram difusos e fracamente corados com apenas alguns blocos mais conspícuos, sendo que as RONs foram positivas para banda C. A caracterização citogenética realizada nesse trabalho permite afirmar que as espécies do gênero Hypophthalmus apresentam uma macroestrutura cariotípica conservada dentro da família Pimelodidae, porém a presença de rearranjos não robertsonianos foram evidentes na diferenciação das espécies. Pode-se sugerir também que houve uma heterocromatinização, uma vez que alguns cromossomos apresentaram os braços curtos totalmente heterocromáticos. ix Abstract The genus Hypophthalmus includes pelagic catfishes and is composed by four valid species, with three of them (H. edentatus, H. fimbriatus e H. marginatus) distributed throughout Amazon basin. The species of the group are not well established and present a taxonomy based only in morphological features. The objectives of this work are: to improve cytogenetic analyses on Hypophthalmus spp. testing some methods; and to describe the karyotypic results of the genus. To undertake the study, 167 specimens from Catalão Lake representing the three species were collected and three methods were applied to obtain karyotypes. From these, 43 specimens were analyzed cytogenetically. The diploid number 2n=56 was observed in all the individuals, without evidences of sex chromosome heteromorphism or supernumerary chromosomes. Inter-specific differences were detected in karyotype formula, fundamental number and NOR localization. The constitutive heterochromatin was detected at telomeric and centromeric positions in several chromosomal pairs in all the species. The nucleolus organizer regions (Ag-NORs) were located at terminal position on short arms of the submetacentric chromosomal pairs, suggesting a positive association with heterochromatic regions. The karyotypic analysis of Hypophthalmus spp. allowed the identification of various characters common to other members of Pimelodidae, indicating