اقیانوسشناسی/ سال دهم/ شماره 38/ تابستان 1398/8/36ـ29

اثر ضد باکتریایی عصاره های استحصالی از شکم پای Peronia verrculata در سواحل استان بوشهر ) خلیجفارس(

5 4 3 *2 1 نجمه جهانی ، سید محمدباقر نبوی ، بیتا ارچنگی ، ابراهیم رجبزاده قطرمی ، رحیم عبدی

1- دانشکده علوم دریایی و اقیانوسی، گروه زیست شناسی دریا، دانشگاه علوم و فنون دریایی خرمشهر، پست الکترونیکی: [email protected] 2- دانشکده علوم دریایی و اقیانوسی، گروه زیست شناسی دریا، دانشگاه علوم و فنون دریایی خرمشهر 3- دانشکده علوم دریایی و اقیانوسی، گروه زیست شناسی دریا، دانشگاه علوم و فنون دریایی خرمشهر 4- دانشکده منابع طبیعی ،گروه شیالت، دانشگاه علوم و فنون دریایی خرمشهر 5- دانشکده علوم دریایی و اقیانوسی، گروه زیست شناسی دریا، دانشگاه علوم و فنون دریایی خرمشهر

تاریخ دریافت: 02/4/97 * نویسنده مسوول تاریخ پذیرش: 97/9/21

چکیده امروزه در اثر تکامل مداوم میکروبهای بیماریزا و مقاومت آنها نسبت به آنتی بیوتیکها، تقاضا برای ایجاد ترکیبـات جدید و مؤثر ضد میکروبی وجود دارد. به همین دلیل عصارههای بوتانولی، متانولی و استونی گونه Peronia verruculata تهیه و با استفاده از روشهای MIC و MBC اثرات ضد باکتریایی دو باکتری گرم مثبت Staphylococcus aureous و گرم منفی Escherichi بر روی عصارههای گرفته شده تعیین شد. بررسی کدورت و شفافیت میکروتیوبهای حاوی مقادیر مختلف عصاره بوتانولی نشان داد که حداقل غلظت ممانعت کنندگی از رشد )MBC( باکتری E.coli برابر با µg/µl 600 و باکتری استافیلوکوکوس اورئوس µg/µl 800 بود. وضعیت رشد باکتری E.coli در پلیتهای حاوی محیط کشت مولر هینتون آگار در غلظتهای مختلف عصاره بوتانولی حداقل غلظت کشندگی )MBC( این باکتری را 800µg/µl و باکتری استافیلوکوکوس اورئوس را 1000µg/µl نشان داد. عصارههای استونی و متانولی حلزون Peronia verrculata تا غلظت µg/µl 1000 اثری بر روی ممانعت از رشد باکتری نداشتند.

کلمات کلیدی: شکم پای Peronia verrculata، فعالیت ضد باکتری، MBC ،MIC.

1. مقدمه آمدهاند )Yasoda, et al., 2006(. بیمهرگان دریایی اغلب به عنوان یکی از منابع مهم پتانسیل داروهای دریایی عنوان می- محیط دریاها و اقیانوسها به عنوان یک منبع غنی از شوند )Proksch, et al., 2002(. مطالعه درمورد ترکیبات ضد متابولیتها و ترکیبات فعال زیستی با پتانسیل ضد قارچی و باکتری بیمهرگان دریایی اطالعات مفیدی در زمینه کشف ضد باکتریایی شناخته شده است )James, 2001(. ترکیبات آنتی بیوتیکهای جدید به ما میدهد و بینش جدیدی درمورد فعال زیستی از گروههای مختلف جانوری نظیر مرجانها، ترکیبات فعال زیستی ایجاد میکند )Baze, et al,. 2009(. خرچنگها، خارپوستان، ماهیها، اسفنجها و نرم تنان به دست شاخه نرمتنان دریایی متنوعترین گروه از بیمهرگان دریایی 29 Peronia verrculata جهانی و همکاران / اثر ضد باکتریایی عصارههای استحصالی از شکم پای در سواحل استان بوشهر ) خلیجفارس(

پس از بند پایان هستند که صدهزار گونه را شامل میشوند. از Biskupiak and Ireland, 1983, Dolashka, et al.,2015,، Bano این تعداد هشتاد هزار گونه متعلق به شکم پایان میباشند که از ,and Ayub, 2012, Dakhil Degiam ; Tahar Abas, 2010 مناطق ساحلی تا اعماق اقیانوسها پراکنش دارند ,Sivaprakasam Ramya, et. al., 2014, Giftson and Patterson )Haszprunar, (2001. استفاده بی رویه از ترکیبات آنتی .Ulagesan and Kim, 2018 ,2016 بیوتیکی دارای معایبی همچون ایجاد مقاومت دارویی در پتانسیل نرمتنان دریایی به عنوان یک منبع از ترکیبات فعال باکتریها، ایجاد مشکالت زیست محیطی، گران بودن و به زیستی در ایران ناشناخته مانده است. ضرورت تحقیق حاضر صرفه نبودن، وجود بقایای دارویی در گوشت آبزی و انتقال به تعیین اثر ضد باکتریایی عصارههای استخراجی از حلزون دریایی مصرف کننده را دارد )Thanikachalam et al., 2010(. در Peronia verrculata میباشد. دهههای اخیر تقاضا برای کشف ترکیبات ضد میکروبی موثر و غیر سمی با افزایش مقاومت پاتوژنها در برابر آنتی بیوتیکها 2. مواد و روشها افزایش یافته است )Chellaram, et al., 2004(. حلزونهای دریایی به عنوان یک منبع غنی از متابولیتهای ثانویه و نمونههای حلزون Peronia verrculata )شکل 1( از مناطق پتانسیل باال در زمینه زیست پزشکی، بیشترین مطالعات را در بین جزرومدی سواحل صخرهای استان بوشهر از سواحل اولی گروه نرمتنان در زمینه محصوالت طبیعی دریا نشان میدهند شمالی و جنوبی به تعداد 10 نمونه از هر منطقه مطالعاتی جمع )Faulkner, 1996(. آوری گردید )شکل 2(. سپس نمونهها به صورت زنده به Peronia verruculata حلزون دریایی فاقد صدف با تنفس آزمایشگاه منتقل شدند. هوازی )Hoffman, 1929( از رده شکم پایان، راسته Pulmonata، خانواده Onchidiidae و جنس Peronia میباشد ) ; Chan Caley, 2003(. بیضی شکل و کمی در سمت پشتی- شکمی پهن و اندازه آنها در حدود 6 سانتی متر است. دارای بدنی نرم هستند و آهسته حرکت میکنند. حلزونهای دریایی به طور مداوم در معرض غلظت نسبتا باالیی از باکتریها و ویروسها و قارچها هستند که بسیاری از آنها مضر هستند. از این رو اگر انواع شیوه- های دفاعی را نداشته باشند، در برابر شکارچیان بسیار آسیبپذیر Wagele and Klussmann-Kolb, 2000 هستند ) (. بقا این موجودات وابسته به مکانیسمهای ضدمیکروبی موثر برای حمایت شکل 1: شکم پای Peronia verrculata جمع آوری شده در سواحل استان از آنها در برابر عفونتهای میکروبی است، که شامل رفتارهای بوشهر تغییر رنگ، تغییرسایز، توانایی تولید موکوس و مهمترین آنها تولید متابولیتهای شیمیایی است )-Wagele and Klussmann برای تهیه عصاره، گونههای جمع آوری شده جهت بررسی Kolb, 2005( . پتانسیل ضد باکتری در آزمایشگاه با آب مقطر شستشو داده شدند اولین تالشها برای یافتن فعالیتهای آنتی میکروبی و در یک مخلوط کن هموژن شده و برای عصارهگیری آماده موجودات دریایی در دهه 1950 آغاز شد. بعد از آن زمان شدند. به این منظور نمونهها به سه قسمت تقسیم شدند و در 3 ارگانیسمهای دریایی زیادی با شاخههای متعدد برای بررسی حالل قرار گرفتند. حاللها به نسبت 1:3 به اجزای جاندار اضافه فعالیتهای ضد میکروبی بررسی شدند )Shaw et. al., 1976(. گردید. نمونهها طی 72 ساعت در ارلنهای بسته شده با پارافین و مطالعات اندکی روی فعالیتهای ضد باکتری عصارههای شکم- ورقههای آلومینیومی در دمای آزمایشگاه و محیط فاقد نور پایان انجام شده است مانند: قرارگرفتند.

30 اقیانوسشناسی/ سال دهم/ شماره 38/ تابستان 1398/8/36ـ29

شکل 2: موقعیت جغرافیایی روستاهای اولی شمالی و جنوبی در خلیج فارس

به منظور کاهش خطا و افزایش دقت در روند کار، عصاره استفاده گردید. برای تعیین MIC هر یک از عصارههای مورد گیری از هر کدام از اجزای بدن حلزونهای بدون صدف دو بار بررسی یک سری 9 تایی از لولههای آزمایش مورد استفاده قرار دیگر تکرار شد. به این منظور پس از هر 72 ساعت محتوای گرفت 7 لوله برای آزمایش رقتهای مختلف عصاره و یک لوله ارلنها با استفاده از قیف و کاغذ صافی، صاف شده و اجزای به عنوان کنترل مثبت )محیط کشت + باکتری( و یک لوله نیز به جاندار برای عصارهگیری بعدی وارد حالل تازه گردید. سپس عنوان کنترل منفی )محیط کشت( به کار رفت. ابتدا باکتریهای محتوای ارلنها با استفاده از کاغذ صافی و قیف صاف و اجزای Staphylococcus aureous و Escherichi coli در محیط کشت جاندار از حالل جداسازی شد )بیگی نصیری، 1396(. حاللهای (Tryptic Soy Broth(TSB کشت داده شده، به محیط کشت سه مرحله عصـارهگیری با هم مخلوط شده و برای تغلیظ آنها از مولر هینتون براث Mueller Hinton Broth در لوله های آزمایش روتاری Heidorph مدل 0r0612119 استفاده شد. برای حفظ اضافه و میزان کدورت حاصل از باکتری با استاندارد 5/0 مک ساختـار ترکیبات عصارهها دمای روتاری 37 درجه سانتیگراد فارلند( cfu/ml 108*5/1) تنظیم گردید سپس به لولههای حاوی تنظیم گردید. پس از تغلیظ عصارهها به منظور جداسازی کامل محیط کشت مـولر هینتون براث همراه بـا ـباکتری عصاره حالل از عصارهها، از دستگـاه فریز درایر)Freeze drier( استفاده حلزونهای دریایی با غلظت های 100، 200، 300، 400، 600، گردید. عصـارهها در پلیتهای شیشهای از قبل وزن شده ریخته 800، 1000 میکروگرم بر میکرولیتر اضافه شد. سپس لولههای o و در فـریزر با دمـای C 20- درجه سانتیگراد برای انجـام مذکور به مدت 24 ساعت در دمای 37 درجه سانتیگراد در آزمایشهای میکروبی بعدی نگهداری شدند )بیگی نصیری، انکوباسیون نگهداری و بعد از سپری شدن زمان کدورت آنها 1396(. بررسی و غلظت اولین لولهای که در مقایسه با شاهد شفاف بود دو باکتری گرم مثبت Staphylococcus aureous )کد ATCC) به عنوان MIC در نظر گرفته شد. برای تعیین حداقل غلظت 9011 و گرم منفی Escherichi coli )کد ATCC 2207( از کشندگی Minimum Bactericidal Concentration باکتریهای بیمارستان دامپزشکی دانشگاه شهید چمران اهواز بصورت خالص Staphylococcus aureous و Escherichi coli توسط عصارههای تهیه شدند. باکتریها ابتدا در محیط کشت Tryptic Soy Broth استخراج شده از حلزون دریـایی، از محتویات آن دسته از (TSB) کشت و بعد از 24 ساعت توسط سرم فیزیولوژی شستشو غلظتهایی از عصارههای مذکور که در محیط کشت مولر هینتون داده شده و در یخچال در دمای 4 درجه سانتی گراد به مدت 3 براث در آزمایش تعیین MIC فاقد کدورت بودند، به میزان 100 روز برای انجام مطالعات مورد نظر نگهداری شدند. میکرو لیتر برداشت و در پلیت های محتوی مولر هینتون آگار برای تعیین حداقل غلظت بازدارندگی رشد Muller Hinton Agar( Minimum( به روش خطی کشت داده شد. سپس MIC( Inhibotory Concentration( باکتریهای مورد استفاده پلیتها در انکوباتور 37 درجه سانتی گراد به مدت 24 ساعت توسط عصارههای استونی، بوتانولی و متانولی از روش رقت نگهداری شدند، پس از اتمام مدت زمان انکوباسیون کمترین لولهای )Vanden et al., 1991; Sindambiwe et al., 1999( غلظتی از عصارههای مورد بررسی را که باکتری در آنها رشد

31 Peronia verrculata جهانی و همکاران / اثر ضد باکتریایی عصارههای استحصالی از شکم پای در سواحل استان بوشهر ) خلیجفارس(

نکرده بود به عنوان حداقل غلظت کشندگی )MBC( در نظر Hemifusus pugilinus نیز بیشترین اثر ضد باکتری را در برابر گرفته شد (Vanden et al., 1991; Sindambiwe et al., 1999(. باکتری E.coli نشان داد )Srinivasan G., 2008(.

جدول 3: مقایسه حداقل غلظت ممانعت کنندگی از رشد )MIC( باکتری 3. نتایج و بحث استافیلوکوکوس اورئوس توسط عصاره های مختلف

در این مطالعه تاثیرات ضد باکتریایی عصارههای بوتانولی، غلظت عصاره C - C+ 1000 800 600 400 300 200 100 متانولی و استونی در آزمایشگاه مورد بررسی قرار گرفت. بررسی µg/µl کدورت و شفافیت میکروتیوبهای حاوی مقادیر مختلف عصاره بوتانول + + + + + - - + - متانول + + + + + + + + - بوتانولی نشان داد که حداقل غلظت ممانعت کنندگی از رشد استون + + + + + + + + - باکتری E.coli برابر با µg/µl 600 )جدول 1( و برای باکتری + رشد باکتری - عدم رشد باکتری استافیلوکوکوس اورئوس µg/µl 800 میباشد )جدول 3(. جدول 4: مقایسه حداقل غلظت کشندگی )MBC( باکتری استافیلوکوکوس اورئوس همچنین بررسی وضعیت رشد باکتری E.coli در پلیتهای حاوی توسط عصاره های مختلف محیط کشت مولر هینتون آگار در غلظتهای مختلف عصاره غلظت عصاره µg/µl 400 600 800 1000 MBC بوتانولی نشان داد حداقل غلظت کشندگی ) ( این باکتری بوتانول + + + - µg/µl متانول + + + + 800 )جدول 2( و برای باکتری استافیلوکوکوس اورئوس استون + + + + - µg/µl 1000 میبـاشد )جدول 4(. براساس نتایج مذکور عصاره + رشد باکتری - عدم رشد باکتری

های استونی و متانولی تا غلظت µg/µl 1000 اثری بر روی در مطالعات انجام شده توسط Sivaprakasam Ramya و ممانعت از رشد باکتری نداشتند )جدول 1(. همکاران در سال 2014 که بر روی حلزون دریایی Armina babai جدول 1: مقایسه حداقل غلظت ممانعتکنندگی از رشد )MIC( باکتری E.coli توسط انجام شد، بیشترین اثر ضدباکتریایی در بین حاللهای عصارههای مختلف بوتانولی، استونی، اتانولی، متانولی و هگزان، به وسیله حالل غلظت بوتانول ثبت شد. همچنین در همین مطالعات عصاره بوتانولی اثر C - C+ عصاره E.coli 1000 800 600 400 300 200 100 µg/µl ضدباکتری بیشتری بر روی باکتری نسبت به

بوتانول + + + + - - - + - استافیلوکوکوس اورئوس داشت. در بررسی فعالیت ضد باکتری متانول + + + + + + + + - Helix استون + + + + + + + + - پپتید های جدا شده از همولنف حلزون خشکی زی + رشد باکتری - عدم رشد باکتری lucorum توسط Dolashka و همکاران در سال 2015، بیشترین E.coli جدول 2: مقایسه حداقل غلظت کشندگی )MBC( باکتری E.coli توسط عصاره های اثر ممانعت کنندگی بر روی باکتریهای ، استافیلو کوکوس

مختلف اورئوس و استافیلوکوکوس اپیدرمیدیس مشخص شد. شکلهای OD غلظت عصاره µg/µl 400 600 800 1000 3 و 4 میـزان قرائت غلظتهای مختلف عصاره را در بوتانول + + - - باکتریهای استافیلوکوکوس اورئوس و E.coli نشان میدهند. متانول + + + + استون + + + + در اولین مطالعات ضدباکتری انجام شده بر روی شکم پایان + رشد باکتری - عدم رشد باکتری Ireland Biskupiak و در سال 1983 در پوست شکم پای Siphonaria pectinata یک آنتی بیوتیک جدید به نام عصارههای استونی و متانولی اثر کمتری نسبت به عصاره Pectinatone استخراج کردند که در برابر باکتریهای گرم مثبت بوتانولی در مهار رشد باکتری و باکتریکشی داشتهاند. باکتری Staphlycoccus aureus ،Bacillus subtilis و مخمرهای E.coli در عصاره بوتانولی رشد کمتری نسبت به باکتری Saccromyces cerevisiae و Candida albicans فعالیت می- استافیلوکوکوس اورئوس داشته است و تاثیر مهارکنندگی رشد بر کرد. در مطالعات انجام شده توسط Dakhil Degiam و Taher روی باکتری E.coli بیشتر بوده است. عصاره متانولی شکم پای Abas در سال 2010 بر روی سه نرمتن دریایی ) Sepia 32 اقیانوسشناسی/ سال دهم/ شماره 38/ تابستان 1398/8/36ـ29

.Loligo sp.،sp و حلزون دریایی Tibia ، )Tibia بیشترین فعالیت یک آنتی بیوتیک در زیست پزشکی معرفی کردند. فعالیت ضد ضدباکتری را نسبت به باکتریهای ,Escherichia coli میکروبی معموال در عصاره گونههای مختلف شکم پایان مشاهده Pseudomonas aeruginosa , Klebsiella oxytoca , Proteus میشود ) Ramasamy and Morugan, 2005; Prem and mirablis ,Serratia liquefaciens نشان داد. Patterson, 2002(. حلزونهای دریایی قادر به ترشح موکوسی هستند که حاوی موادی با طعم غیر مطبوع است و مانع شکار شدن آنها توسط سایر موجودات میگردد) McFarlane, 1979(. این مواد از سلولهای تخصص یافته موجود در پوست به نام غدد رپوگناتوریال )Repugnatorial( ترشح میشوند که به غدد دفاعی نیز مشهور هستند )Pinchuck and Hodgson, 2010( و حاوی ایزومرهای پلی پروپیونات )Polypropionate( و مواد اسیدی هستند که نقش دفاعی و بد مزه شدن موجود را دارند و فعالیت ضد باکتری نیز دارند )Darias et Al., 2006(.

شکل 3: مقایسه OD در غلظتهای مختلف و عصارههای مختلف مورد در ایران در مطالعات بیتعب و همکاران در سال 2015 که بر استفاده در باکتری E.coli روی اثر ضد باکتری پپتیدهای استخراجی از حلزون دریایی Peronia peroneii سواحل قشم بر روی باکتریهای Bacillus Serratia marcescens ،Staphylococcus aureus ،subtilis، Klebsiella ،Escherichia coli ،Pseudomonas aeruginosa pneumonia و Proteu mirabilis انجام شد، اثر ضد باکتری قوی پپتیدهای استخراجی بر روی باکتریهای ذکر شده مشخص گردید.

4. نتیجه گیری

شکل 4: مقایسه OD در غلظتهای مختلف و عصارههای مختلف مورد استفاده در باکتری استافیلوکوکوس اورئوس بررسی و مقایسه نتایج حاصل از این مطالعه با نتایج سایر مطالعات صورت گرفته در ارتباط با شکم پایان نشان میدهد که Bano و Ayub در سال 2012، با بررسی سه گونه از شکم عصارههای بوتانولی، استونی و متانولی گرفته شده از شکم پای peronia verrculata پای Siphonaria، عصاره های متانول خالص و کلروفرم- متانول خاصیت ضد باکتری متوسط را در دو E.coli بهترین و هگزان خالص ضعیف ترین حالل معرفی کردند. در باکتری و استافیلوکوکوس اورئوس نشان میدهند و به مطالعات Giftson و Patterson (2016) بر روی اثر ضدباکتری غلظتهای باالیی از این عصاره نیاز برای تاثیرات ضد باکتری عصاره های استونی، بوتانولی و اتانولی گونه شکم پای Harpa نیاز است. به نظر میرسد در حال حاضر از نظر اقتصادی davidis بیشترین هاله عدم رشد در عصاره متانولی و کمترین در استخراج عصاره از این گونه با غلظت باالی باکتری کشی مقرون عصاره اتانولی روی پاتوژنهای انسانی و ماهی ثابت شد. به صرفه نمیباشد. Ulagesan و Kim در سال 2018 که بر روی فعالیت ضد باکتری و ضد قارچی 7 حلزون مختلف آب شیرین و خشکی مطالعاتی 5. سپاسگزاری انجام دادند که حلزون Cryptozona bistrialis بیشترین فعالیت ضدباکتری را نشان داد و پروتئین های آن بیشترین ممانعت را در از پژوهشکده آبزیپروری جنوب کشور خصوصا ریاست برابر فعالیت پاتوژن های باکتریایی نشان دادند و آن را به عنوان محترم پژوهشکده سرکار خانم دکتر سیمین دهقان مدیسه و

33 Peronia verrculata جهانی و همکاران / اثر ضد باکتریایی عصارههای استحصالی از شکم پای در سواحل استان بوشهر ) خلیجفارس(

معاون محترم تحقیقاتی پژوهشکده آقای دکتر حسین هوشمند و .Bitaab, M.A. S.O. Siadat,R , Pazooki1, J. Sefidbakht, Y سرکار خانم دکتر مینا آهنگرزاده مسئول بخش بهداشت و Antibacterial and molecular dynamics study of .2015 بیماریهای آبزیان و خانم دکتر سمیرا ناظم الرعایا به دلیل فراهم the Dolabellanin B2 isolated from sea slug, Peronia نمودن شرایط انجام این تحقیق و مساعدت فراوان کمال تشکر را peronii .BIOSCIENCES BIOTECHNOLOGY دارم. .RESEARCH ASIA, Vol. 12(3), 2023-2035 https://doi.org/10.13005/bbra/1870

منابع Chan, B. K. K.; Caley, K. J. 2003. Hong Kong Field Guides 69: Sandy Shores. Hong Kong: Wan Li Book

بیگی نصیری، منصوره. 1396. بررسی فعالیتهای ضد میکروبی .Co عصارههای آلی توتیای دریایی Chellaram C, Gnanambal KM, Edward JK. 2004. Echinometra mathaei خلیجفارس )سواحل بوشهر(. پایان نامه دوره دکتری رشته Antibacterial activity of the winged oyster Pteria داروسازی، دانشگاه علوم پزشکی جندی شاپور اهواز، 74 صفحه. chinensis (Pterioida: Pteridae). Indian Journal of Marine Science; 33(4):369-72. Akhil Degiam , Z. and Tahar Abas,A. 2010. Darias, J., Cueto, M., Diaz-Marrero, A.R. 2006. The Antimicrobial activity of some crude marine Mollusca Chemistry of Marine Pulmonate Gastropods. Article in extracts against some human pathogenic bacteria, Thi- Progress in molecular and subcellular biology. Progress Qar Medical Journal (TQMJ): Vol(4) No(3): p(142- in Molecular and Subcellular Biology , Subseries 147).

Marine Molecular Biotechnology . p: 105-131. Avila, C., 1995. Natural products from opisthobranch https://doi.org/10.1007/978-3-540-30880-5_5 mollusks. A biological review. Oceanography Marine De Vries DJ and Hall MR. 1994. Marine biodiversity as a Biology. Annu. Rev., 33: 487-559. source of chemical diversity. Drug Development bacteria. Journal of Shellfish Research. 24: 243-251. Research. 33: 161-173. Bano,A. and Ayub, Z. 2012. Antibacterial and Antifungal

https://doi.org/10.1002/ddr.430330213 Activity in Three Species of Siphonaria (Gastropoda: Dolashka, P., Dolashki, A., Voelter,W., Van Beeumen, J., Pulmonata) Collected From Rocky Ledge of Mubarak Stevanovic, S. 2015. Antimicrobial activity of peptides Village, Karachi. Pakistan Journal of Zoology. vol. from the hemolymph of Helix lucorum snails. 44(6), pp. 1493-1497. Internatinal Journal of Current Microbiology and Bazes A, Silkina A, Douzenel P, Fay F, Kervarec N, Applied Science. 4, 1061–1071. Morin D. 2009. Investigation of the antifouling Faulkner, J. 1996. Marine natural products. Natural constituents from the brown alga Sargassum muticum Product Reports. 13: p. 75-125. (Yendo) Fensholt. Journal of Applied

https://doi.org/10.1039/np9961300075 Phycology;21:395-403. Giftson, H. and Patterson, J. 2016 . Evaluation of https://doi.org/10.1007/s10811-008-9382-9 Antibacterial activity of crude extracts of Gastropod, Biskupiak, J.E , Ireland C.M, 1983. Pectinaton. A new Harpa Davidis, Roding 1798, from Kanyakumari coast antibiotic from the mollusk Siphonaria pectinata. against isolated human and fish pathogens.. Vol 9, Tettrahedron let t ,24:3055-3058. Issue 3. https://doi.org/10.1016/S0040-4039(00)88093-4

34 اقیانوسشناسی/ سال دهم/ شماره 38/ تابستان 1398/8/36ـ29

Screening of seven selected Rwandan medicinal plants for Haszprunar, G. 2001. "Mollusca (Molluscs)". antimicrobial and antiviral activites. J Ethnopharmacol, Encyclopedia of Life Sciences. John Wiley & Sons, 65(1), 71-77. Ltd.doi:10.1038/npg.els.0001598.

https://doi.org/10.1016/S0378-8741(98)00154-8 https://doi.org/10.1038/npg.els.0001598 Shaw PD, McClure WO, Van Blaricom G, Sims J, Fenical Hoffman H. 1929. Zur Kenntnis der Oncidiiden (Gastrop. W, Rude J., 1976. Antimicrobial activities from marine pulmon.) ii. Phylogenie und verbreitung. Zoo. Jb., Syst. organisms. In: Webber HH, Ruggieri GD. (eds.) 57: 253-302. Fooddrugs from the sea. Washington DC: Marine James, DB. 2001. Twenty sea cucumber from seasaround Technology Society; p. 55-60. Indian. Naga, the ICLARM Quartely. 24: 4-8 Sindambiwe, J.B., Calomme, M., Cos, P., Totte, J., Mcfarlane, I,D. 1979. Behaviour and ecology of the inter- Pieters, L., Vlietinck, A., 1999. tidal Pulmonata mollusk, Onchidium peronei, in Sivaprakasam Ramya, M., Sivasubramanian, K., Kuwait. Kuwait journal of science. Ravichandran, S., Anbuchezhian, R., 2014. Screening Pinchuck, S,C, Hodgson, A,H. 2010. The ultrastructureand of antimicrobial compound from the sea slug Armina histology of the perinatal epidermis and defensive Babai. A Journal of the Bangladesh Pharmacological glandsof two species of Onchidella (Gastropoda: Society (BDPS) A Journal of the Bangladesh Pulmonata). Tissue and cell, 19(2); 110-115.

Pharmacological Society (BDPS). 9: 268-274. https://doi.org/10.1016/j.tice.2010.02.001 https://doi.org/10.3329/bjp.v9i3.18483 Prem, A.T. and Patterson, E.J.K., 2002. Antimicrobial Srinivasan G., 2008. Studies on antimicrobial properties of activity in the tissue extracts of five species of cowries a gastropod Hemifusus pugilinus and a bivalve Cypraea spp. (Mollusca: Gastropoda) and an ascidian Anadara granosa (M.Sc Thesis). Parangipettai: Didemnum psammathodes (Tunicata:Didemnidae). Annamalai University, p. 27. Indian Journal of marine Science. 31: 239-242 Thanikachalam, K., Kasi, M., Rathinam, X., 2010 .Effect Ramasamy, M.S. and Morugan, A., 2005. Potential of garlic peel on growth, hematological parameters and antimicrobial activity of marine mollusks from disease resistance against Aeromonas hydrophila in tuticorin, southeast coast of India against 40 biofilm African catfish Clarias gariepinus (Bloch) fingerlings Rinehart, K.L., Shaw, P.D., Shield, L.S., Gloer, J.B., Asian Pacific Journal of Tropical Medicine. 3 (8) , pp. Harbour,G.C., Koker, M.E.S. , Samain,D., Schwartz, 614-618. R.E., Tymiak, A.A., Swynenberg, E.G., Stringfellow,

https://doi.org/10.1016/S1995-7645(10)60149-6 D.A., Vavva, J.J., Coasts, J.H., Zurenko, G.E., Kuentel, Ulagesan,S. and Jun Kim, H, 2018. Antibacterial and S.L., Li,L.H., Bakus, G.J., Brasca, R.C., Craft, I.I., Antifungal Activities of Proteins Extracted from Seven Young,D.N. & Connot,.L.J., 1981. Marine natural Different Snails. Applied Science .8, 1362 products as a source of antiviral, antimicrobial and Vanden, D.A., Vlietinck, A.J., 1991. In: Dey PM, antineoplastic agents, Pure and Applied Chemistry. 53: Harborne JB. (Eds.), Methods in plant biochemistry: 795-817.

screening medthods for antibacterial and antiviral https://doi.org/10.1351/pac198153040795 agents from higher plants. London, Academic Press, 47-69.

35 Peronia verrculata جهانی و همکاران / اثر ضد باکتریایی عصارههای استحصالی از شکم پای در سواحل استان بوشهر ) خلیجفارس(

foraging. Front Zoology, 2(1):3. Wägele, H., Klussmann-Kolb, A.,2005. Opisthobranchia Yasoda, HN., Chi, Z., Zhu, K. 2006. Probiotics and sea (Mollusca, Gastropoda)more than just slimy slugs.

cucumber farming. SPC Bech Info Bull; 24: 458-9. Shell reduction and its implications on defence and

جهانی و همکاران / اثر ضد باکتریایی عصارههای استحصالی از شکم پای Peronia verrculata در سواحل استان بوشهر ) خلیجفارس( اقیانوسشناسی/ سال دهم/ شماره 38/ تابستان 1398/8/36ـ29

36