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Daniella Mota Silva

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Daniella Mota Silva 1 DANIELLA MOTA SILVA CULTIVO IN VITRO E CITOGENÉTICA DE Cyrtopodium saintlegerianum Rchb. f. (ORCHIDACEAE: Cyrtopodiinae) Dissertação apresentada ao Programa de Pós- Graduação de Genética e Melhoramento de Plantas, da Universidade Federal de Goiás, como requisito parcial à obtenção do título de Mestre em Genética e Melhoramento de Plantas, área de concentração: Conservação e melhoramento de espécies do Cerrado. Orientador: Prof. Dr. Sérgio Tadeu Sibov Coorientadora: Profa. Dra. Daniela Melo Silva Goiânia, GO - Brasil 2012 2 “Que os vossos esforços desafiem as impossibilidades, lembrai-vos de que as grandes coisas do homem foram conquistadas do que parecia impossível”. (Charles Chaplin) Ao meu pai, João Batista da Silva (in memorian) pelo exemplo de amor incondicional, honestidade e determinação, a minha mãe, Maria José Mota Silva pelo seu amor, simplicidade, meu ancoradouro seguro em todos os momentos da vida. Aos meus irmãos Diego e Virginia pelo apoio e incentivo de sempre. DEDICO Ao meu amor Luciano presente em todos os 3 momentos de minha vida, e parte fundamental desse trabalho. OFEREÇO Amo todos vocês! 4 AGRADECIMENTOS A Deus, primeiramente por proporcionar em minha vida grandes realizações. À Universidade Federal de Goiás pela oportunidade concedida para a realização desse curso de mestrado e a CAPES pela concessão da bolsa de estudo. Ao Programa de Pós-Graduação de Genética e Melhoramento de Plantas e Programa de Pós-Graduação em Agronomia, a Coordenação, professores, funcionários e alunos (colegas de aula), sobretudo pelas pessoas que cruzaram meu caminho, seja por curtos ou longos momentos, porém com a certeza das lições compartilhadas. Ao Professor Orientador Dr. Sérgio Tadeu Sibov meus sinceros agradecimentos pela enorme paciência, dedicação, amizade e, sobretudo confiança, apoio e credibilidade que me deu em todo curso de mestrado, obrigada. Ao Luciano, meu querido amor, que sempre esteve nos bons e maus momentos, pelo companheirismo, apoio, incentivo, paciência, pelas sugestões que enriqueceram este trabalho, pela ajuda na elaboração da estatística, e principalmente por todo seu amor. Ao Laboratório de Anatomia Vegetal e professoras Maria Helena, Maria Tereza e Letícia pela disposição, atenção e uso dos equipamentos do laboratório. À professora Doutora Daniela Melo pelo auxílio, sugestões, apoio e contribuição com reagentes para a citogenética e principalmente pela amizade e simpatia de sempre. Ao Professor Doutor Aparecido Divino da Cruz (Peixoto) por disponibilizar as instalações do Laboratório Replicon (PUC-Goiás) para tentativas com a citogenética. Ao Professor Doutor Cláudio Carlos pelas sugestões e auxílio sobre a citogenética. Ao Alex do Laboratório Replicon (PUC-Goiás) pelo auxílio e dúvidas sobre o experimento de citogenética. Às professoras e amigas Maurízia e Iraídes pelo apoio e incentivo na área de cultura de tecidos, pelas divertidas viagens a congressos e principalmente pela amizade. À professora Doutora Leila Garcês pelo auxílio e sugestões e uso de equipamentos do laboratório de Microorganismos. Às seguranças Selma e Vaneide, pela amizade e boas conversas na frente do ICB. À todos do Laboratório de Cultura de Tecidos Vegetais, os novos e os antigos, Talita, Fernanda, Marina, Diego, Lívia, Paulo, Marcos I, Marcos II, as minhas ex- estagiárias Juliana e Barbara, Catherine, Nicholas, Diego II, Gabriel, Gessika, Lílian, 5 Daniella pelo auxílio,ótimo convívio, pela amizade e alegria em muitos momentos de descontração e divertidas horas de confraternização, que são essenciais nesse trajeto. À todos do Laboratório de Microorganismos em especial, Kellen, Jacque, Carlos, Alini, Acássio pelo apoio e auxílio em muitos momentos, pela amizade e brincadeiras pelo corredor do ICB e pelas divertidas horas de confraternização. A minha querida Mãe pela paciência, compreensão, apoio, dedicação, amor incondicional e por fornecer todas as condições para que eu me dedicasse ao mestrado, e por acreditar em mim. Ao meu querido irmão Diego pela atenção, auxílio na montagem de figuras e tabelas, por todo seu apoio, generosidade e fraternidade. A todos meus amigos que, mesmo sem muito compreender o que acontecia comigo, me apoiaram neste período, e compreenderam a minha ausência em muitos momentos. A todos que contribuíram direta ou indiretamente para a realização desse trabalho, mesmo que não foram citados, meu muito obrigado. 6 SUMÁRIO LISTA DE TABELAS ........................................................................................................... 8 LISTA DE FIGURAS ............................................................................................................ 9 LISTA DE SÍMBOLOS E SIGLAS ................................................................................... 111 RESUMO ............................................................................................................................. 13 ABSTRACT ......................................................................................................................... 14 1 INTRODUÇÃO. .............................................................................................. 17 2.1 FAMÍLIA ORCHIDACEAE ............................................................................. 17 2.1.2 Importância econômica e mercado mundial de orquídeas .......................... 20 2.2 O GÊNERO Cyrtopodium R. Br. ...................................................................... 22 2.3 A ESPÉCIE Cyrtopodium saintlegerianum Rchb. f. ......................................... 23 2.4 PROPAGAÇÃO IN VITRO DE ORQUÍDEAS ................................................ 25 2.4.1 Cultura de tecidos vegetais ............................................................................. 25 2.4.2 Reguladores de Crescimento .......................................................................... 27 2.4.2.1 Auxinas .................................................................................................................... 27 2.4.2.2 Citocininas ............................................................................................................... 29 2.4.3 Germinação assimbiótica ................................................................................ 30 2.4.3.1 Teste de viabilidade de sementes............................................................................. 30 2.4.3.2 Germinação assimbiótica de orquídeas ................................................................... 31 2.5 CITOGENÉTICA DE ORQUÍDEAS ............................................................... 33 2.7 REFERÊNCIAS ................................................................................................ 35 3 MICROPROPAGAÇÃO DE Cyrtopodium saintlegerianum Rchb. f. (ORCHIDACEAE: Cyrtopodiinae) RESUMO ............................................................................................................................. 43 ABSTRACT ......................................................................................................................... 44 3.1 INTRODUÇÃO ................................................................................................. 44 3.2 MATERIAL E MÉTODOS ............................................................................... 46 3.2.1 Teste de viabilidade das sementes .................................................................. 46 3.2.2 Germinação assimbiótica in vitro ................................................................... 47 3.2.3 Desenvolvimento de protocormos de Cyrtopodium saintlegerianum ........... 48 3.3 RESULTADOS E DISCUSSÃO ...................................................................... 50 3.3.1 Teste de viabilidade das sementes .................................................................. 50 7 3.3.2 Germinação assimbiótica in vitro ................................................................... 51 3.3.3 Desenvolvimento de protocormos de Cyrtopodium saintlegerianum ........... 55 3.3.3.1 Altura ................................................................................................................. 55 3.3.3.2 Número de brotos .............................................................................................. 57 3.3.3.3 Número de folhas .............................................................................................. 59 3.3.3.4 Número de raízes e comprimento da maior raiz ................................................ 60 3.3.3.5 Formação de calos ............................................................................................. 62 3.4 CONCLUSÕES ................................................................................................. 63 3.5 REFERÊNCIAS ................................................................................................ 64 4 CITOGENÉTICA DE Cyrtopodium saintlegerianum Rchb. f. (ORCHIDACEAE: Cyrtopodiinae) RESUMO ............................................................................................................................. 70 ABSTRACT ......................................................................................................................... 70 4.1 INTRODUÇÃO .............................................................................................. ...71 4.2 MATERIAL E MÉTODOS ............................................................................... 72 4.2.1 Material Vegetal .............................................................................................. 72 4.2.2 Germinação assimbiótica in vitro ..................................................................
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