MASARYKOVA UNIVERZITA V BRN Ě PŘÍRODOV ĚDECKÁ FAKULTA

RECETOX

VÝZKUMNÉ CENTRUM PRO CHEMII ŽIVOTNÍHO PROST ŘEDÍ A EKOTOXIKOLOGII

STEROIDNÍ LÁTKY V ODPADNÍCH VODÁCH – VÝSKYT, METODY VZORKOVÁNÍ A ANALYTICKÉHO STANOVENÍ

Lucie Langová

Bakalá řská práce

Brno, Česká republika, rok 2008

MASARYKOVA UNIVERZITA V BRN Ě PŘÍRODOV ĚDECKÁ FAKULTA

RECETOX

VÝZKUMNÉ CENTRUM PRO CHEMII ŽIVOTNÍHO PROST ŘEDÍ A EKOTOXIKOLOGII

STEROIDNÍ LÁTKY V ODPADNÍCH VODÁCH – VÝSKYT, METODY VZORKOVÁNÍ A ANALYTICKÉHO STANOVENÍ

Lucie Langová

Bakalá řská práce

Vedoucí: doc. RNDr. Zden ěk Šimek, CSc.

Brno, Česká republika, rok 2008

2

Prohlášení

Prohlašuji, že jsem tuto bakalářskou práci vypracovala samostatn ě s použitím uvedené literatury.

V Brn ě dne 19.5. 2008 Lucie Langová

Pod ěkování

Cht ěla bych pod ěkovat doc.RNDr. Zdeňku Šimkovi za odborné vedení a cenné rady, dále d ěkuji Mgr. Klá ře Hilscherové, PhD. za laskavé zap ůjčení článk ů.

3 Obsah 1. Úvod ...... 5 2. Seznam zkratek ...... 7 3.Rozd ělení steroidních látek ...... 8 3.1 P řírodní steroidní látky...... 8 3.2 Syntetické steroidní látky...... 15 3.3 Konjugované steroidní látky ...... 29 4. Fyzikáln ě-chemické vlastnosti...... 33 5. Zdroje steroidních látek ...... 34 5.1 Odpad z chovu hospodá řských zví řat...... 34 5.1.1 Vym ěšování hov ězího dobytka...... 35 5.1.2 Vym ěšování prasat...... 35 5.1.3 Vym ěšování dr ůbeže...... 36 5.1.4 Vym ěšování ovcemi...... 36 5.2 Odpad vylu čovaný lidmi...... 37 5.2.1 Vym ěšování lidmi ...... 37 5.3 Papírenský pr ůmysl...... 38 6. Osud v přírod ě...... 39 6.1 Sorpce do pevných částic ...... 40 6.2 Degradace...... 41 7. Toxikologické vlastnosti a d ůsledky kontaminace prost ředí...... 42 8. Analytická metodologie ...... 43 8. Vzorkování a uskladn ění ...... 44 8.1.1 Pevné vzorky...... 44 8.1.2 Kapalné vzorky ...... 44 8.2 Extrakce a čišt ění...... 44 8.3 Instrumentální analýza...... 45 9. Záv ěr ...... 50 10. Použitá literatura ...... 52 11. P říloha...... 55 Příloha č. 1 Jiné názvy a obchodní názvy jednotlivých steroidních látek...... 56

4 1. Úvod V sou časné dob ě vzr ůstá obava z potenciálních ú čink ů endokrinn ě-disruptujících polutant ů na život ve volné p řírod ě a na lidskou populaci, stejn ě tak jako nap ř. zvyšující se výskyt rakoviny prsu u žen, zvýšení abnormalit u lidského reproduk čního systému a rozdílné vyjád ření biologických poruch u zví řat ve volné p řírod ě (nap ř. hermafroditizmus, feminizace a snížená plodnost). Výzkumy na živých organismech prokázaly, že vystavení ryb koncentracím ů 1ng/l E2 ( ) nebo 0,1ng/l EE2 (Ethynylestradiol ) zp ůsobuje u n ěkterých druh ů feminizaci (Sebastian Zuehlke, 2005). Proto jsou steroidní látky polutanty, které se dostávají do pop ředí zájmu práv ě kv ůli velmi nízkým koncentracím, které p ůsobí jako endokrinní disruptory. Nezanedbatelnou a velmi problémovou složkou zne čišt ění životního prost ředí (povrchových i podpovrchových vod a dále p ůd) jsou odpadní vody. Povrchová voda ve vodních tocích (recipientech) i nádržích je zne čiš ťována r ůznými druhy odpadních vod. V nejv ětším množství je zastoupen komunální odpad z lidských sídel (splašky a deš ťové vody), svedený do kanaliza čních sítí a vypoušt ěný do recipientu p řes čistírnu odpadních vod, p řípadn ě bez d ůkladného předčišt ění p řes odleh čovací objekt (při přívalových srážkách pomáhá odleh čit p řepln ěné kanaliza ční sít ě). Dále jsou odpadní vody infek ční (z nemocnic, laboratoří apod.), pr ůmyslové a zem ědělské, které by však do kanaliza čních sítí, resp. recipientu m ěly být vypoušt ěny již p řed čišt ěné. V neposlední řad ě se do odpadních vod po čítají i látky vyplavené z polí, vzniklé p ři zem ědělské výrob ě a chovu hospodá řských zví řat, a ne čistoty splavené srážkami ze zpevn ěných povrch ů (asfaltové a dlážd ěné plochy). Je nutno vzít v potaz i zne čišt ění samotných srážek. Do čistíren odpadních vod je dodáváno velké množství kontaminant ů (endokrinních disruptor ů) a tyto jsou pouze částe čně odbourávány b ěhem čist ění, nejsou však zcela odstran ěny b ěhem konven čního zpracování odpadní vody. Slou čeniny p řidružené k t ěmto ú čink ům zahrnují i steroidní látky, kterými se tato práce bude zabývat a bude sumarizovat dostupné informace o jednotlivých látkách a jejich vlastnostech, vlivu na životní prost ředí a zdrojích zne čišt ění. V příloze jsou pak uvedeny jiné názvy jednotlivých látek, které byly dohledány z důvodu lepší orientace ve vyhledáva čích a v literatu ře, kde je ve v ětšin ě uvedena jedna a táž látka pod r ůznými jmény.

5 Během posledních let bylo vynaloženo zna čné úsilí na vývoj nových analytických metod, a to natolik citlivých, aby umožnily rozlišování r ůzných látek. Analýza ů v životním prost ředí p ředstavuje nelehký úkol kv ůli komplexnosti matric a kv ůli obvykle nízkým koncentracím t ěchto cílových slou čenin. Na základ ě denního vylu čování hormon ů lidmi, faktoru řed ění a p ředešlých m ěř ení z r ůzných výzkum ů se o čekávají hladiny t ěchto hormon ů v ng/l ve vodních vzorcích. (Guang-Guo Ying, Rai S. Kookana, Ying-Jun Ru, 2002) Pro polární slou čeniny je z hlediska detekce zvlášt ě vhodná metoda LC-MS (Liquid chromatography-mass spectrometry). Nedávno zve řejn ěné metody pro ur čování farmaceutik ve vzorcích ze životního prost ředí používají ionizaci pomocí elektro-spreje (ESI) nebo chemickou ionizaci za atmosférického tlaku (APCI). Druhým cílem této práce tedy bude zpracovat informace o metodách odb ěru a p říprav ě vzork ů pro detekci steroid ů v jednotlivých složkách prost ředí a jejich koncovém analytickém stanovení. P ředevším metodami HPLC (High-performance liquid chromatography) a LC-MS, LC-MS-MS.

6 2. Seznam zkratek

APCI Chemická ionizace za atmosférického tlaku DHEA Dehydroepiandrosteron E1 estron E1-3S Estron – 3 sulfát E2 Estradiol E2-3S Estradiol 3-sulphate E2 β 17 β-estradiol E3-3S -3-sulfát EDCs endokrinn ě disruptující slou čeniny EE2 Ethynylestradiol EE2 17-α-ethynylestradiol ESI Elektrosprejová ionizace GC/MS Plynová chromatografie s hmotnostním spektrometrem GCB grafitizovaná uhlíková čer ň HPLC Vysoceú činná kapalinová chromatografie HPLC-DAD Vysoceú činná kapalinová chromatografie s detektorem diodové polem LC-MS Kapalinová chromatografie – hmotnostní spektrometrie LC-MS-MS Kapalinová chromatografie s tandemovou hmotnostní spektrometrií LEV Levonorgestrel LOD detekovatelné limity MeEE2 mestranol NI negativním iontovém módu NOR Norethindron PLE tlakové kapalné extrakce Q-Trap Iontová past SPE Extrakce z pevné fáze TCF Totally-Chlorine Free TOF tzv. pr ůletové analyzéry UPLC-Q-TOF- Ultraú činná kapalinová chromatografie s dvojitým nebo trojitým MS kombinovaným hmotnostním analyzátorem s TOF VTG vitellogenin

7 3.Rozd ělení steroidních látek

Steroidní látky jsou deriváty cyklopentan-o-perhydrofenantrenu. Jedná se o fyziologicky a farmakologicky významné látky. Pat ří mezi n ě nap ř. D-vitamin, žlu čové kyseliny, pohlavní hormony, hormony k ůry nadledvinek, n ěkteré saponiny aj. Vzhledem k výskytu v odpadních vodách bude tato práce pojednávat především o steroidních hormonech, které zp ůsobují environmentální problémy a je o nich nejvíce dostupných informací. Steroidní hormony jsou skupinou biologicky aktivních slou čenin, které jsou syntetizovány z cholesterolu. Jsou to hydrofobní organické slou čeniny s nízkou těkavostí a fugacitou.

3.1 P řírodní steroidní látky

Přírodní steroidy jsou vylu čovány u lidí a zví řat nadledvinkovou k ůrou, varlaty, vaje čníky a placentou. Zahrnují progesterony, glukokortikoidy, mineralokortikoidy, androgeny a estrogeny. Estrogeny (estradiol, estron a estriol) jsou p řevládající ženské hormony, které jsou d ůležité pro udržování zdraví reproduk čních tkání, prsou, k ůže a mozku. Progestogeny (progesteron) mohou být uvažovány jako hormonální vyvážení - konkrétn ě u estrogenu. Androgeny (testosteron, dehydroepiandrosteron a androstenedion) hrají významnou roli v regeneraci tkání, obzvlášt ě u k ůže, sval ů a kostí. Glukokortikoidy (kortison) jsou produkovány nadledvinkami jako odpov ěď „stresor ům“ – emo ční pohnutce, cvi čení, chirurgickému zákroku, nemoci či hladov ění. Všechny ze steroidních hormon ů jsou uplatn ěny po pr ůchodu plasmovou membránou a vazbou na intracelulární receptory. Všichni obratlovci vym ěšují a reagují na estrogenní steroidy. Zatímco řada estrogenních steroid ů v četn ě jejich metabolit ů se mezi obratlovci r ůzní. 17 β-estradiol (E2 β) a estron (E1) se zdají být b ěžné pro všechny. Přírodní estrogenní hormony (E1, E2 a E3) mají vyšší rozpustnost než steroidy syntetické jako jsou 17-α-ethynylestradiol (EE2) a mestranol (MeEE2) o nichž bude pojednáno v další kapitole.

8 Estron (E1) Systematický (IUPAC) název: 3-hydroxy-13-methyl- 6,7,8,9,11,12,13,14,15,16- dekahydrocyklopenta[a]fenantren- 17- one

Vzorec: C 18 H22 O2 Molekulová hmotnost: 270,3661 g/mol CAS registra ční číslo: 53-16-7 Teplota tání: 254-256 °C Polo čas rozpadu: 19 hodin Barva: bílé krystaly Rozpustnost ve vod ě (mg/l p ři 20°C): 13 log K ow : 3,43 pKa: 10,4 Tlak par (mm Hg): 2,3.10 -10

Sorp ční konstanta (K oc ): 4882 Zobrazení struktury:

Estradiol (E2) Systematický (IUPAC) název:(8 S,9 S,13 S,14 S,17 S)–13-methyl- 6,7,8,9,11,12,14,15,16,17- dekahydrocyklopenta[a]fenantren - 3,17 - diol

Vzorec: C 18 H24 O2 Molekulová hmotnost: 272,3820 g/mol CAS registra ční číslo: 50-28-2 Teplota tání: 178-179°C Polo čas rozpadu: ~ 13 hodin Barva: bílá až sv ětle žlutá Rozpustnost ve vod ě (mg/l p ři 20°C): 13

9 log K ow : 3,94 pKa: 10,7 Tlak par (mm Hg): 2,3.10 -10

Sorp ční konstanta (K oc ): 3300 Zobrazení struktury:

Stereoizomery: Estra - 1,3,5(10) – trien - 3,17 α - diol

Estriol (E3) Systematický (IUPAC) název: (8S,9S,13S,14S,16R,17R)-13-methyl- 6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-dekahydrocyklopenta[a]fenantren-3,16,17-triol

Vzorec: C 18 H24 O3 Molekulová hmotnost: 288,3814 g/mol CAS registra ční číslo: 50-27-1 Teplota tání:282°C Polo čas rozpadu: 20-30 minut Barva: bílé krystaly Rozpustnost ve vod ě (mg/l p ři 20°C): 13 log K ow : 2,81 pKa: 10,4 Tlak par (mm Hg): 6,7.10 -15

Sorp ční konstanta (K oc ): 1944 Zobrazení struktury:

10

Stereoizomery: Estra-1,3,5(10)-triene-3,16beta,17beta-triol

Progesteron Systematický (IUPAC) název: pregn-4-ene-3,20-dion

Vzorec: C 21 H30 O2 Molekulová hmotnost: 314,4617 g/mol CAS registra ční číslo: 57-83-0 Teplota tání: 126°C Polo čas rozpadu: 35-55 hodin Barva:bílé krystaly¨ Rozpustnost ve vod ě (mg/l p ři 20°C): 8,81 log K ow : 3,87 Tlak par (mm Hg): 1,3.10 -6 Zobrazení struktury:

11 Testosteron Systematický (IUPAC) název: (8R,9S,10R,13S,14S,17S)-17-hydroxy-10,13-dimethyl- 1,2,6,7,8,9,11,12,14,15,1 6,17-dodekahydrocyklopenta[a]fenantren-3-on

Vzorec: C 19 H28 O2 Molekulová hmotnost: 288,4244 g/mol CAS registra ční číslo: 58-22-0 Teplota tání: 155-156°C Polo čas rozpadu: 35-55 hodin Barva:bílé krystalky Rozpustnost ve vod ě (mg/l p ři 20°C): 23,4 Zobrazení struktury:

Stereoizomery: 17 α-hydroxyandrost-4-en-3-on

Androstenedion Systematický (IUPAC) název : 4-Androsten-3,17-dion

Vzorec: C 19 H26 O2 Molekulová hmotnost: 286,4085 g/mol CAS registra ční číslo: 63-05-8 Teplota tání: 170-173°C Barva: bílé krystaly Rozpustnost ve vod ě (mg/l p ři 20°C): 50 Zobrazení struktury:

12

Dehydroepiandrosteron (DHEA) Systematický (IUPAC) název: 3-hydroxy - 10,13 - dimethyl -1,2,3,4,7,8,9,11,12,14,15,16 - dodekahydrocyklopenta[a]fenantren-17-on

Vzorec: C19 H28 O2 Molekulová hmotnost: 288,4244g/mol CAS registra ční číslo: 53-43-0 Teplota tání: 148,5 °C Polo čas rozpadu: 12 hodin Barva: bílé krystaly Rozpustnost ve vod ě (mg/l p ři 20°C): 63,45 Zobrazení struktury:

Kortison Systematický (IUPAC) název: 17,21-dihydroxypregn- 4-en-3,11,20-trion

Vzorec: C 21 H28 O5 Molekulová hmotnost: 360,4440g/mol CAS registra ční číslo: 53-06-5

13 Teplota tání: 220-224°C Rozpustnost ve vod ě (mg/l p ři 20°C): 7,1 Zobrazení struktury:

Hydrocortisone Systematický (IUPAC) název: 11 β,17 α,21-Trihydroxypregn-4-en-3,20-dion nebo (8S,9S,10R,11S,13S,14S,17R)-11,17-dihydroxy-17-(2-hydroxyacetyl)-10,13-dimethyl- 2, 6,7,8,9,11,12,14,15,16-decahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-3-one

Vzorec: C 21 H30 O5 Molekulová hmotnost: 362,4599 CAS registra ční číslo: 50-23-7 Teplota tání: 211-214°C Polo čas rozpadu: 6-8 hodin Rozpustnost ve vod ě (mg/l p ři 20°C): 32 Zobrazení struktury:

14 Stereoizomery: 11Beta,17alpha,21-trihydroxy-4-pregnene-3,20-dione

Androsteron Systematický (IUPAC) název: 3 α-Hydroxy-5α-Androstan-17-on

Vzorec: C 19 H30 O2 Molekulová hmotnost: 290,4403g/mol CAS registra ční číslo: 53-41-8 Teplota tání: 185°C Rozpustnost ve vod ě (mg/l p ři 20°C): 8,75 Zobrazení struktury:

Stereoizomery: 3 β-hydroxy-5α-androstan-17-on Androstan-17-on, 3-hydroxy-, (3 α,5 β)- 5 β-androstan-17-on, 3 β-hydroxy-

3.2 Syntetické steroidní látky

Při terapii lidí a veterinární praxi jsou převládající v ětšinou použitých steroidních látek syntetické produkty, které se nevyskytují v přírod ě a dokonce i v přírod ě se vyskytující steroidy jsou obvykle syntetizovány farmaceutickým pr ůmyslem. Ze spektra syntetických derivát ů jsou nejd ůležit ější 17 α-ethynyl deriváty (ethynylestradiol a jeho 3-metyleter, mestranol), které jsou hlavn ě použity jako estrogenní prvky oráln ě užívaných kontraceptiv.

15 Další možností využití syntetických steroid ů je tzv. doping v oblasti sportu. Především pak u sportovc ů, u kterých výkon závisí na t ělesné váze (nap ř. vrha či disk ů) nebo na vytrvalostní rychlosti (nap ř. cyklisti), protože anabolické steroidy zvyšují svalovou hmotnost až o 5kg za m ěsíc.

Ethynylestradiol (EE2) Systematický (IUPAC) název: 17 – ethynyl - 13-methyl-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17- dekahydro-6H-cyklopenta[a] fenantren- 3,17-diol

Vzorec: C 20 H24 O2 Molekulová hmotnost: 296,4034g/mol CAS registra ční číslo: 57-63-6 Teplota tání: 182-183°C Polo čas rozpadu: 36±13 hodin Rozpustnost ve vod ě (mg/l p ři 20°C): 4,8 logK ow : 4,15 pK a: 10.4 Tlak par (mm Hg): 4,5.10 -11

Sorp ční konstanta (K oc ): 4770 Zobrazení struktury:

Mestranol (MeEE2) Systematický (IUPAC) název: (8S,9S,13S,14S,17S) - 17-ethynyl-3-methoxy- 13-methyl-7,8,9,11,12,14,15,16-oktahydro-6H- cyklopenta[a]fenantren-17-ol

Vzorec: C 21 H26 O2

16 Molekulová hmotnost: 310,4299g/mol CAS registra ční číslo: 72-33-3 Teplota tání: 153-155°C Polo čas rozpadu: 6-20 hodin Rozpustnost ve vod ě (mg/l p ři 20°C): 0,3 log K ow : 4,67 Tlak par (mm Hg): 7,5.10 -10

Sorp ční konstanta (K oc ): 16542 Zobrazení struktury:

Desogestrel Systematický (IUPAC) název: 13-ethyl-17-ethynyl- 11-methylidene- 1,2,3,6,7,8,9,10,12,13,14,15, 16,17- tetradecahydrocyclopenta[a] phenanthren-17-ol

Vzorec: C22 H30 O Molekulová hmotnost: 310,4730 g/mol CAS registra ční číslo: 54024-22-5 Teplota tání: 109,5°C Polo čas rozpadu: 27,8 hodin Rozpustnost ve vod ě (mg/l p ři 20°C): 11,3mg/l Zobrazení struktury:

17 Dienogest Systematický (IUPAC) název: 17 α-cyanomethyl-17 β-hydroxy-estra-4,9-di-ene-3-one

Vzorec: C20 H25 NO2 Molekulová hmotnost: 311,1884 g/mol Teplota tání: 549 °C Hustota: 1,2 g/cm³ Polo čas rozpadu: 6-12 hodin Zobrazení struktury:

Levonorgestrel (LEV) Systematický (IUPAC) název: (8R,9S,10R,13S,14S,17S)-13-ethyl-17-ethynyl-17- hydroxy-1,2,6,7,8,9,10,11,12,14,15,16-dodekahydrocyklopenta[a]fenanthren-3-on

Vzorec: C21 H28 O2 Molekulová hmotnost: 312.446 g/mol CAS registra ční číslo: 797-63-7 Teplota tání: 240°C Polo čas rozpadu: 36 ± 13 hodin Rozpustnost ve vod ě (mg/l p ři 20°C): 12 Zobrazení struktury:

18

Norethindron (NOR) Systematický (IUPAC) název: (8R,9S,10R,13S,14S,17S)-17-ethynyl-17-hydroxy-13- methyl-1,2,6,7,8,9,10,11,12,14,15,16-dodekahydrocyklopenta[a]fenantren-3-on

Vzorec: C 20 H26 O2 Molekulová hmotnost: 298,4192 g/mol CAS registra ční číslo: 68-22-4 Teplota tání: 205-206°C Rozpustnost ve vod ě (mg/l p ři 20°C): 7 log K ow : 2,97 Tlak par (mm Hg): 7,31.10 -9 Zobrazení struktury:

Kortisol Systematický (IUPAC) název: 11,17,21-trihydroxy-,(11 β)-pregn-4-en-3,20-dion

Vzorec: C21 H30 O5 Molekulová hmotnost: 362,4562g/mol CAS registra ční číslo: 50-23-7 Teplota tání: 122-125°C Polo čas rozpadu: 2,5 hodin Zobrazení struktury:

19

Stanolon Systematický (IUPAC) název: 5S,8R,9S,10S,13S,14S,17S) – 17 - hydroxy- 10,13- dimethyl-1,2,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17 - tetradekahydrocyklopenta[a]fenantren-3-on

Vzorec: C 19 H30 O2 Molekulová hmotnost: 290,4403g/mol CAS registra ční číslo: 521-18-6 Teplota tání: 178-183 °C Zobrazení struktury:

Oxymetholone Systematický (IUPAC) název: 17 β – hydroxy – 2 – hydroxymethylene - 17 α-methyl-3-androstanone

Vzorec: C 21 H32 O3 Molekulová hmotnost: 332,4770g/mol CAS registra ční číslo: 434-07-1 Teplota tání: 170-180°C

20 Polo čas rozpadu: 8-9 hodin Barva: smetanov ě-bílé krystaly Rozpustnost ve vod ě (mg/l p ři 20°C): ~0 mg/l Zobrazení struktury:

Methandrostenolone

Vzorec: C 20 H28 O2 Molekulová hmotnost: 300,4351g/mol CAS registra ční číslo: 72-63-9 Teplota tání: 163-167°C Polo čas rozpadu: 3-6 hodin Barva:bílý až tmav ě bílý krystalový prášek Rozpustnost ve vod ě (mg/l p ři 20°C): ~0 Zobrazení struktury:

Stereoizomery: 17-epi-Methandienone

21 Mestanolone

Vzorec: C 20 H32 O2 Molekulová hmotnost: 304,4669g/mol CAS registra ční číslo: 521-11-9 Teplota tání: 189-196°C Barva: bílý až tmav ě bílý krystalový prášek Rozpustnost ve vod ě (mg/l p ři 20°C): ~ 0 Zobrazení struktury:

Stereoizomery: 17-β-Hydroxy-17-α-methyl-5-β-androstan-3-one 17-α-Hydroxy-17-β-methyl-5-β-androstan-3-one 17-epi-Mestanolone

Deoxycorticosterone

Vzorec: C 21 H30 O3 Molekulová hmotnost: 330,4611g/mol CAS registra ční číslo: 64-85-7 Teplota tání: 150-155°C Polo čas rozpadu: 20-25 minut Barva:bílé krystaly Rozpustnost ve vod ě (mg/l p ři 20°C): ~ 0 Zobrazení struktury:

22

17 α-ethynyl-17 β-hydroxy- 5(10)-Estren-3-on (p ředgesta ční hormon)

Vzorec: C 20 H26 O2 Molekulová hmotnost: 298,4192g/mol CAS registra ční číslo: 68-23-5 Zobrazení struktury:

5α-pregnan-3β-ol-20-on

Vzorec: C 21 H34 O2 Molekulová hmotnost: 318,4935 g/mol CAS registra ční číslo: 516-55-2 Teplota tání: 182°C Zobrazení struktury:

23

Stereoizomery: 3Alpha-hydroxy-5beta-pregnan-20-one 3Beta-hydroxy-5beta-pregnan-20-one Allopregnan-3α-ol-20-one

(3 α,5 β)- 3-hydroxy- Androstan-17-on

Vzorec: C 19 H30 O2 Molekulová hmotnost: 290,4403 g/mol CAS registra ční číslo: 53-42-9 Teplota tání: 141-143°C Zobrazení struktury:

Stereoizomery: 3Beta-hydroxy-5alpha-androstan-17-one Androsterone 5Beta-androstan-17-one, 3beta-hydroxy-

24 Chlormadinone acetát

Vzorec: C 23 H29 ClO 4 Molekulová hmotnost: 404,9267 g/mol CAS registra ční číslo: 302-22-7 Teplota tání: 215°C Polo čas rozpadu: ~ 2,6 hodin Zobrazení struktury:

Megestrol acetáte

Vzorec: C 24 H32 O4 Molekulová hmotnost: 384,5085 g/mol CAS registra ční číslo: 595-33-5 Teplota tání: 214-216°C Polo čas rozpadu: 2,5 – 2,8 hodin Zobrazení struktury:

25 17-hydroxy- (5 α,17 β)-Estran-3-on

Vzorec: C 18 H28 O2 Molekulová hmotnost: 276,4137 g/mol CAS registra ční číslo: 1434-85-1 Teplota tání: 215-220°C Polo čas rozpadu: 7-12 hodin Zobrazení struktury:

Stereoizomery: 5B-Estran-3-on-17B-ol

3,20-Allopregnanedion

Vzorec: C 21 H32 O2 Molekulová hmotnost: 316,4776 g/mol CAS registra ční číslo: 566-65-4 Zobrazení struktury:

Stereoizomery: -3,20-dione, (5 β)-

26 Oxymesterone

Vzorec: C 20 H30 O3 Molekulová hmotnost: 318,4504 g/mol CAS registra ční číslo: 145-12-0 Polo čas rozpadu: ~3 hodiny Zobrazení struktury:

Stereoizomery: 4-Androsten-3-one, 4,17beta-dihydroxy-17alpha-methyl- 17-epi-Oxamesterone

Calusteron

Vzorec: C 21 H32 O2 Molekulová hmotnost: 316.4776g/mol CAS registra ční číslo:17021-26-0 Polo čas rozpadu: ~ 2,5 hodin Zobrazení struktury:

Stereoizomery: Bolasterone 17-epi-Bolasterone

27 O-tetramethylen(tert-butyl)silylepiandrosteron

Vzorec: C 27 H46 O2Si Molekulová hmotnost: 430,7384 g/mol CAS registra ční číslo: 64898-16-4 Zobrazení struktury:

Stereoizomery: O-tetramethylene(tert-butyl)silylandrosterone

(5 β)- Pregnan-3,20-dion Systematický (IUPAC) název: (5R,8R,9S,10S,13R,14S,17S)-17-acetyl-10,13-dimethyl- 1,2,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydrocyclopenta[a]phenanthren-3-on

Vzorec: C 21 H32 O2 Molekulová hmotnost: 316,4776 g/mol CAS registra ční číslo: 128-23-4 Zobrazení struktury:

28 Stereoizomery: 3,20-Allopregnanedione

3.3 Konjugované steroidní látky

Aktivní steroidy jsou metabolizovány nasycením jejich dvojné vazby, hydroxylací, redukcí keto skupin, oxidací hydroxy skupiny a tvorbou konjungát ů rozpustných ve vod ě - p ředevším sulfát ů a glukuronid ů a v užším m ěř ítku pak fosfát ů v hydroxyl skupinách.

Estriol-16 α-(β-D-glukuronid) Systematický (IUPAC) název: (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[[(8R,9S,13S,14S,16R,17R)-3,17- dihydroxy-13-methyl-6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-decahydrocyclopenta[a]phenanthren- 16-yl]oxy]-3,4,5-trihydroxyoxane-2-karboxylová kyselina

Vzorec: C24 H32 O9 Molekulová hmotnost: 464,5055 g/mol CAS registra ční číslo: 82356-48-7 Zobrazení struktury:

Estriol-3-sulfát (E3-3S) Systematický (IUPAC) název: [(8R,9S,13S,14S,16R,17R)-16,17-dihydroxy-13-methyl- 6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-decahydrocyclopenta[a]phenanthren-3-yl] hydrogen sulfát

Vzorec: C 18 H24 O6S Molekulová hmotnost: 368,4446

29 CAS registra ční číslo: 481-95-8 Zobrazení struktury:

Estriol 17-glukuronid Systematický (IUPAC) název: (2S,3S,4S,5R)-6-[[(8S,9R,13S,14R,16R,17R)-3,16- dihydroxy-13-methyl-6,7,8,9,11,12,14,15,16,17 - decahydrocyclopenta[a]phenanthren- 17-yl]oxy]-3,4, 5-trihydroxyoxane-2-karboxylová kyselina

Vzorec: C 24 H32 O9 Molekulová hmotnost: 464,5054 g/mol CAS registra ční číslo: 7219-89-8 Zobrazení struktury:

Estron – 3 sulfát (E1-3S) Systematický (IUPAC) název: (8S,9S,13S,14S)-13-methyl-17-oxo-3-sulfooxy- 7,8,9,11,12,14,15,16-octahydro-6H-cyclopenta[a]phenanthrene

Vzorec: C 18 H22 O5S

30 Molekulová hmotnost: 350,4293 g/mol CAS registra ční číslo: 481-97-0 Zobrazení struktury:

Estrone 3-glukuronid Systematický (IUPAC) název: (2S,3S,4S,5R,6S)-3,4,5-trihydroxy-6-[[(8S,9S,13S,14S)- 13-methyl-17-oxo-7,8,9,11,12,14,15,16-octahydro-6H-cyclopenta[a]phenanthren-3- yl]oxy]oxane-2-carboxylic acid

Vzorec: C24 H30 O8 Molekulová hmotnost: 446,4902 g/mol CAS registra ční číslo: 2479-90-5 Zobrazení struktury:

Estradiol – 17 – sulfát Systematický (IUPAC) název: (8S,9S,13S,14S,17S)-3-hydroxy-13-methyl-17-sulfooxy- 6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-decahydrocyclopenta[a]phenanthrene

Vzorec: C 18 H24 O5S Molekulová hmotnost: 352,4452 g/mol

31 CAS registra ční číslo: 3233-69-0 Zobrazení struktury:

Estradiol-3-glukuronid Systematický (IUPAC) název: (2S,3S,4S,5R,6S)-3,4,5-trihydroxy-6-[[(13S,17S)-17- hydroxy-13-methyl-6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-decahydrocyclopenta[a]phenanthren-3- yl]oxy]oxane-2-karboxylová kyselina

Vzorec: C 24 H32 O8 Molekulová hmotnost: 448,5061 g/mol CAS registra ční číslo: 15270-30-1 Zobrazení struktury:

Estradiol 3-sulfát (E2-3S) Systematický (IUPAC) název: (8S,9S,13S,14S,17S)-17-hydroxy-13-methyl-3-sulfooxy- 6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-decahydrocyclopenta[a]phenanthrene

Vzorec: C 18 H24 O5S Molekulová hmotnost: 352,4452 g/mol

32 CAS registra ční číslo: 481-96-9 Zobrazení struktury:

4. Fyzikáln ě-chemické vlastnosti

Většina fyikáln ě-chemických vlastností je uvedena v předešlém p řehledu steroidních látek. Následuje srovnání p řírodních a syntetických látek v prost ředí nej čast ěji sledovaných a analyzovaných estrogen ů. Přírodní estrogeny (zejména estradiol, estriol a estron) mají rozpustnost cca 13 mg/l. Syntetické estrogenní steroidy mají rozpustnost mnohem menší – 4.8mg/l pro EE2 a 0,3mg/L pro mestranol. Všechny tyto steroidy mají velmi nízký tlak par v rozmezích od 2,3x10 -10 do 6,7x10 -15 mm Hg (tab. 1), což nazna čuje nízkou t ěkavost t ěchto slou čenin. Hodnoty logK 0W , jsou u p řírodních steroid ů 2,81 pro E3; 3,43 pro E1; 3,94 pro E2. Syntetické steroidy mají vyšší K 0W a to 4,15 pro EE2 a 4,67 pro mestranol. Z fyzikáln ě-chemických vlastností t ěchto látek m ůžeme pozorovat, že estrogeny jsou hydrofobní organické slou čeniny s nízkou t ěkavostí. O čekává se, že sorpce v půdách či sedimentech bude významným faktorem pro redukci koncentrace ve vodní fázi. (Guang-Guo Ying, Rai S. Kookana, Ying-Jun Ru, 2002)

33 Tab. 1: Fyzikáln ě chemické vlastnosti steroid ů (Guang-Guo Ying, Rai S. Kookana, Ying-Jun Ru, 2002)

Rozpustnost Tlak par b Chemický název Molekulová hmotnost log K ow (mg/l p ři 20°C) (mm Hg) Estron (E1) 270,4 13 2,3x10-10 3,43 17-β-Estradiol (E2) 272,4 13 2,3x10-10 3,94 Estriol (E3) 288,4 13 6,7x10-15 2,81 17 α-Ethynylestradiol (EE2) 296,4 4,8 4,5x10-11 4,15 Mestranol (MeEE2) 310,4 0,3 7,5x10-10 4,67

5. Zdroje steroidních látek

Steroidní látky se do životního prost ředí dostávají p ředevším antropogenním vlivem, proto je d ůležité uvažovat i o jejich odstran ění. Nyní byly zve řejn ěny studie,

které se touto problematikou zabývají. Za použití fotokatalytického TiO 2, který má schopnost za p ůsobení UV-A zá ření rozkládat organické látky. Rychlost rozkladu je

však za stejných vn ějších podmínek (stejná TiO 2 vrstva, intenzita UV-A zá ření...) závislá na struktu ře organické látky. Steroidní hormony jsou strukturou podobné tuk ům a za b ěžných podmínek jsou v p řírod ě t ěžko odbouratelné. Fotokatalýza by mohla hrát důležitou roli v jejich odstran ění ze životního prost ředí. (Ing.P.Hájková, 2007) Novodobý výzkum ukazuje, že zhruba 20% odvedených lidských estrogen ů přečká i čišt ění odpadních vod v ČOV.

5.1 Odpad z chovu hospodá řských zví řat

Významnými zdroji steroid ů jsou hospodá řská zví řata, a to jak velkochovy, tak i bodové zdroje jako odpoušt ění fekálií statk ů či dokonce vylu čování zem ědělských zví řat přímo do vodních tok ů, nebo vylu čování do míst velmi blízkých, vedoucích k vyššímu zne čišt ění než bylo p ředpov ězeno pro více rozptýlené vstupy. Množství

34 vylou čených estrogenních hormon ů v exkrementech dojnic je dvakrát v ětší než u člov ěka. U prasat je pak množství p řevyšující jednonásobek. V rámci vym ěšování, kombinovaná zem ědělská populace zví řat (včetn ě ovcí a dr ůbeže) pravd ěpodobn ě generuje asi čty řikrát více estrogen ů než lidská populace. Nejv ětší p řisp ěvatel na zví řecí stran ě je pak relativn ě malá populace dojnic. (A.C.Johnson, R.J.Willians, P.Matthiessen, 2005) Při chovu dobytka jsou hlavn ě použity estrogeny a progesterony jako iniciátory růstu a také jako činidla v akvakultu ře pro chov jednopohlavních populací ryb. Nanešt ěstí, ve srovnání s dostupnými daty o lidském vym ěšování (kde velká část dat pochází z rakovinových studií), jsou sesbíraná data pro hospodá řská zví řata dosti omezená. Velká část výzkumu ohledn ě vym ěšování steroidních hormon ů hospodá řských zví řat byla zam ěř ena na v časné stanovení b řezosti.

5.1.1 Vym ěšování hov ězího dobytka

Pokud typická dojnice produkuje 3,5kg suché váhy fekálií/den, pak lze z fekální cesty o čekávat celkem 462 µg estrogen ů/kráva/den. Jednotlivých estrogen ů pak 51 µg E1/ kráva/den a 148 g E2h/kráva/den. Estrogeny ve fekáliích jsou tém ěř úpln ě dekonjugované, jinými slovy, lze je prezentovat jako volné hormony. . Dominantními steroidními estrogeny v mo či E1-sulfát (48–92%) a E2 α glukuronid (5–36%). St řední hodnota koncentrací estrogen ů vym ěšovaná v mo či jednotlivými dojnicemi je 787 g E1/kráva/den a 236 g E2 β/kráva/den, jsou vylu čovány jako glukuronidy, u kterých je předpokládaná rychlá dekonjugace. Fekální vym ěšování testosteron ů u telat bylo ur čeno na 2–3g na kg až na 28 g/L v mo či 28 dní starých telat. Lze p ředpokládat, že mo č dobytka na maso bude obsahovat 252 g testosteronu za den a 50 g testosteronu za den ve fekáliích. Tato hodnota je podobná, jakou uvádí jiné prameny - 330 g androgen ů za den. (A.C.Johnson, R.J.Willians, P.Matthiessen, 2005)

5.1.2 Vym ěšování prasat

Hodnoty pro nezab řezlá prasata ve fekáliích se pohybují v rozsahu od 4–20 g/prase/den hormonu E1 a až do 3 g/prase/den hormonu E2 β. Hodnoty hormon ů ve

35 fekáliích u b řezích prasnic se pohybují v rozsahu od 16–80 g/prase/den pro E1 a 16–40 g/prase/den pro E2 β. U nezab řezlých prasnic bylo zjišt ěno 64–96 g/den E1 v mo či. B řezí prasnice vylu čují v mo či od 7,04–17,280 g/den E1 až po 105 g/den. Není jasné v jaké slou čené form ě je mo čí vylu čován E1. Nicmén ě, studie dokazuje, že v ětšina E1 v mo či nezab řezlých prasnic je v mono-glukuronidové form ě. Tuto formu lze považovat za snadno p řeměnitelnou k tomu, aby uvolnila volný hormon. Je velmi významné zjišt ění, že E1 byl hlavním vym ěšovaným produktem u prasnic, kterým bylo injektováno E2 β, s pouhými stopami E2 β, a E3 byl nalezen jen jako látka v mo či. Toto znovu dokazuje, že E1 bude nejvýznamn ějším estrogenem v mo či. Kan čí populace je odpov ědná za vym ěšování 27g androgen ů denn ě (10kg androgen ů za rok). Pokud byl sam čím či sami čím prasat ům vpíchnut radiov ě ozna čený testosteron, v ětšinový sm ěr vym ěšování byl mo čí a pouze asi 14% fekáliemi. (A.C.Johnson, R.J.Willians, P.Matthiessen, 2005)

5.1.3 Vym ěšování dr ůbeže

Pro dr ůbež byly publikovány hodnoty koncentrací p řítomné v suché hmotnosti odpadu sam čích i sami čích ku řat mezi 14µg/kg a 65µg/kg estrogen ů (kombinovaný E1 a E2 β). Tudíž, 39 µg/kg estrogen ů v odpadu je pravd ěpodobn ě pr ůměrná hodnota. Z 39 g/kg kombinovaných estrogen ů m ůžeme p ředpokládat, že 12 g na kg bude p řibližn ě hodnota pro E1. Bohužel, dostupná literatura pouze nazna čuje obecné údaje produkce estrogen ů dr ůbeží. Pro oba živo čišné druhy ku řat (samce a samice) byla stanovena koncentrace 133 g na kg testosteronu v čerstvém odpadu suché hmoty. (A.C.Johnson, R.J.Willians, P.Matthiessen, 2005)

5.1.4 Vym ěšování ovcemi

Vym ěšování estrogen ů ve fekáliích (E2 α, E2 β a E1) ovcemi a berany byly odhadnuty na 20–22 g/den. Na základ ě p ředchozích studií je vysoce pravd ěpodobné, že tyto estrogeny by byly dekonjungované. Jedna ze studií tvrdí, že E2 α tvo ří 80% celkového množství produkovaných estrogen ů, následuje E1 15% a E2 β 5%. Stejn ě

36 jako u dr ůbeže, doposud dostupná literatura poskytuje pouze obecné informace ohledn ě vymešování estrogen ů ovcemi. (A.C.Johnson, R.J.Willians, P.Matthiessen, 2005)

5.2 Odpad vylu čovaný lidmi

Dalším zdrojem, který je považován za významn ější a problémov ější než vylu čování zví řat, je vylu čování steroid ů lidmi. Odpad z m ěstských aglomerací je odvád ěn kanalizací do čistíren odpadních vod ( ČOV), které však nedokáží odstranit steroidní látky úpln ě. Část se tak může absorbovat do sedimentu nebo jiných pevných částic, část do odpadního kalu, který m ůže op ět vstoupit do vodní fáze, jestliže je rozpoušt ěn a m ůže být použit ke hnojení p ůdy.

5.2.1 Vym ěšování lidmi

Hormony 17 β-estradiol a estron jsou normáln ě vylu čovány ženami (2-12 a 3- 20 g/osoba/den), stejn ě tak jako muži (5 g/osoba estronu denn ě). Na základ ě pr ůzkumu a p ředešlých m ěř ení vylu čování lidských estrogen ů byla vypo čtena denní dávka vylou čená mužem a ženou (tab. 2). Muži vylu čovali 1,5 g/den E2, 3,9 g/den E1 a 1,5 g/den E3 mo čí. Menstruující ženy vylu čovaly 3,5 g/den E2, 8 g/den E1 a 4,8 g/den E3. Ženy v menopauze vylu čovaly 2,3 g/den E2, 4 g/den E1 a 1 g/den E3. Těhotné ženy pak vylu čovaly 259 g/den E2, 600 g/den E1 a 600 g/den E3. Po posouzení množství EE2 v pilulkách kontraceptiv byla odhadnuta denní exkrece EE2 na 35 g/den. (Guang-Guo Ying, Rai S. Kookana, Ying-Jun Ru, 2002)

37 Tab. 2: Denní vylu čování estrogenních steroid ů lidmi ( g) (Guang-Guo Ying, Rai S. Kookana, Ying-Jun Ru, 2002) Kategorie E2 E1 E3 EE2 Muži 1,6 3,9 1,5 - Menstruující ženy 3,5 8 4,8 - Ženy v menopauze 2,3 4 1 - Těhotné ženy 259 600 6000 - Ženy - - - 35

5.3 Papírenský pr ůmysl

Zdrojem steroidních látek je i papírenský pr ůmysl. V dřevu jsou p řítomny slou čeniny, které se spolu extrahují s celulózou v procesu várky. A práv ě tyto extrahované látky p ůsobí výrobní a environmentální problémy. Steroidy se do odpadních vod dostávají metodou bělení TCF - Totally-Chlorine Free, stejn ě tak dochází nap ř. k usazování škodlivé prysky řice a mastných kyselin. P říklady lipofilních extraktivních látek jsou volné mastné kyseliny, prysky řičné kyseliny; uhlovodíky; vosky nebo sterolové estery; dále mono-, di- a tri-glyceridy; vyšší alkoholy nebo steroly a prom ěnná množství polárn ějších látek.

38 Tab. 3: Koncentrace hormon ů v odpadních vodách ČOV (Guang-Guo Ying, Rai S. Kookana, Ying-Jun Ru, 2002) Datum Č. Koncentrace Místo vzorkování vzorku (ng/l) Estron 17 β-Estradiol Estriol Ethynylestradiol Itálie 10/99 -03/00 30 2.5 -82.1 0.44 -3.3 0.43 -18 < LOD - 1.7 Nizozemí 10/97, 12/97 6 < 0.4-47 < 0.1 -5.0 - <0.2-7.5 Německo 11/97 16 < LOD -70

6. Osud v přírod ě

Steroidní látky mají hydrofobní povahu a vysokou vaznost na částice půdy/sedimentu a bylo prokázáno, že tyto slou čeniny nejsou ve velkém množství přítomny pouze v povrchové vod ě, kde jsou velice často detekovány, ale zárove ň i v podzemních vodách. Ke zjišt ění osudu t ěchto látek v prost ředí je nutné znát jejich fyzikáln ě – chemické vlastnosti a biologické procesy, kterými se tyto chemikálie dostávají do vodního prost ředí. (M.Kuster, M.J.López de Alda, D.Barceló, 2004, Guang-Guo Ying, Rai S. Kookana, Ying-Jun Ru, 2002) D ůležité jsou i podmínky stanovišt ě, ve kterém se vyskytují. Dostupná data ohledn ě jejich výskytu jsou však omezená. A to i v případ ě jejich p řesunu do pevných částic (kalu, p ůdy a sediment ů). Jakmile dosáhnou steroidy vodních tok ů, celá řada proces ů (sorpce, biodegradace aj.) je může eliminovat z vody p řítomné v životním prost ředí.

39 6.1 Sorpce do pevných částic

Jelikož steroidní látky mají relativn ě nízkou polaritu, jako nejvíce pravd ěpodobná se jeví sorpce do koryt řek. Pom ěr mezi koncentrací v sedimentech (ng/kg) a koncentrací ve vod ě (ng/l) nazna čuje, že tyto slou čeniny vykazují obecné sklony k akumulaci v sedimentech. (M.Kuster, M.J.López de Alda, D.Barceló, 2004) Sorpce steroid ů koreluje s přítomností organického uhlíku a je dále zvýšena slaností vody. (M.Kuster, M.J.López de Alda, D.Barceló, 2004, Guang-Guo Ying, Rai S.

Kookana, Ying-Jun Ru, 2002) A čkoliv hodnoty K 0W napovídají jejich hydrofobní povaze a vysoké vaznosti na částice p ůdy/sedimentu, bylo prokázáno, že tyto slou čeniny nejsou p řítomny pouze v povrchové vod ě ale zárove ň i v podzemních vodách. (Guang-Guo Ying, Rai S. Kookana, Ying-Jun Ru, 2002) Studie nazna čily, že k sorpci dochází velmi rychle b ěhem první p ůlhodiny, po další p ůlhodin ě se zpomalí a poté pomalu dále klesá. Syntetické steroidy s vyššími hodnotami K 0W se navíc ukládají do sediment ů ve v ětším rozsahu než je tomu u přírodních steroid ů a vykazují vyšší rezistenci v ůč i procesu čišt ění s aktivovaným kalem. Nap ř. syntetické estrogeny jako ethynylestradiol a mestranol jsou ponechány v aktivovaném kalu nedot čené po dobu více jak 5 dn ů, zatímco progestogeny jsou rozloženy z více jak 50% již po 48 hodinách. (M.Kuster, M.J.López de Alda, D.Barceló,

2004) Tudíž lze nap ř. o čekávat, že E1 (log K ow = 3,43), E2 (log K ow = 3,94) a EE2 (log

Kow = 4,15) budou prokazovat sklony k dělení v pevné fázi. Nicmén ě, nižší log K ow = 2,81 pro E3 vyvozuje, že je mén ě pravd ěpodobné, že bude spojen s pevnými látkami

(rychlost biotransformace se zvyšuje až po log K ow 3-3,5). (A.C.Johnson, R.J.Willians, P.Matthiessen, 2005) Co se tý če podmínek prost ředí, studie prokázaly, že u jílovitých sediment ů dochází ke dvoustup ňové sorpci: rychlé počáte ční sorpci (v řádech sekund) následována pomalejším pohlcováním (n ěkolik dní). U jiného druhu sedimentu (goetit) nebylo po po čáte ční rychlé sorpci pozorováno žádné další pohlcování. Desorp ční pokusy prokázaly, že nejslabší interakce mezi sedimentem a steroidními látkami byly vytvo řeny sorpcí práv ě do goetitu. A čkoliv nejsou k dispozici žádné kone čné mechanismy sorpce, předpokládá se, že sedimenty nebo p ůdy, které jsou bohaté na jíl (jehož charakteristikou je vst řebávání), budou ú činným sorbentem steroid ů. Sedimenty a p ůdy s nízkým obsahem jílu mohou hrát roli jakýchsi „zásobáren“ steroid ů. Umož ňují však zp ětnou desorpci do vodního prost ředí. (M.Kuster, M.J.López de Alda, D.Barceló, 2004)

40

6.2 Degradace

U lidí i zví řat procházejí estrogeny r ůznými p řem ěnami a to hlavn ě v játrech. Jsou nejprve n ěkolikrát oxidovány, hydroxylovány, deoxylovány, methylovány a poté slou čeny s glukuronickou kyselinou či sulfátem. Steroidy jsou tedy vylu čovány hlavn ě jako neaktivní slou čeniny síry a glukuronických kyselin. A čkoliv steroidní slou čeniny nedisponují p římou biologickou aktivitou, mohou ú činkovat jako výchozí prvek zásobáren hormon ů, které mohou být zp ětn ě p řem ěněny na volné steroidy pomocí bakterií v životním prost ředí. Vzhledem k přítomnosti mikroorganism ů v surových stokových vodách a ČOV jsou pak tyto neaktivní slou čeniny steroid ů nej čast ěji ve form ě konjugát ů rozšt ěpeny a jako aktivní steroidy se pak vracejí zp ět do životního prost ředí. (Guang-Guo Ying, Rai S. Kookana, Ying-Jun Ru, 2002) V půdách jde o komplexní mikrobiologický proces řízený koncentrací substrát ů, dostupností živin a existencí stabilních mikrobiálních kolonií. Degradace je rychlejší u metabolit ů steroidních látek nežli u p ůvodních steroid ů. (M.Kuster, M.J.López de Alda, D.Barceló, 2004) Rychlosti biodegradace za anaerobních podmínek jsou u mo řských a vodních sediment ů nízké či nedetekovatelné. Hodnoty polo čas ů rozpadu jsou vyšší u syntetických steroidních látek než u přírodních. Tyto hodnoty polo čas ů rozpadu mohou souhlasit s ideálními podmínkami, - nap ř. teplotami v lét ě. Za zimních podmínek však mohou být tyto látky persistentní až na dvounásobek letních hodnot. (M.Kuster, M.J.López de Alda, D.Barceló, 2004)

Tab. 4: Sorpce a polo časy rozpad ů steroid ů Sorp ční konstanta Polo čas rozpadu v Chemický název (Koc) řekách (dny) Estron (E1) 4882 2-3 17-β-Estradiol (E2) 3300 2-3;0,2-9 Estriol (E3) 1944 neznámé 17 α-Ethynylestradiol (EE2) 4770 4-6 Mestranol (MeEE2) 16542 neznámé

41 7. Toxikologické vlastnosti a d ůsledky kontaminace prost ředí

Steroidní látky jsou významnou p říčinou endokrinní disrupce u lidí i zví řat, hlavn ě u ryb (pozorovány negativní efekty již p ři koncentraci 0,1ng/l). Endokrinní disrupce ovliv ňuje hormonální systém živých organism ů exogenními faktory a vyvolává negativní ú činky (karcinogeneze, sexuální diferenciace, imunotoxicita, embryonální mortalita, vývojové deformity, retardace r ůstu aj.). Tato se stává významným sou časným problémem, kdy p řibývá r ůzných polutant ů, nebo naopak m ůžeme až nyní posoudit vliv n ěkterých persistentních látek, které se hlavn ě antropogenním vlivem dostaly do životního prost ředí (aktuáln ě jsou nejproblémov ější hormonální kontraceptiva). Důkazy ohledn ě endokrinní disrupce v životním prost ředí velkou m ěrou pocházejí ze studií provád ěných na zví řatech žijících ve vodním prost ředí, obzvlášt ě pak u ryb. (S.Halm, N.Pounds, S.Maddix, M.Rand-Weaver, J.P.Sumpter, T.H.Hutchinson, C.R.Tyler, 2002) Vlastní mechanismy endokrinní disrupce však zatím nejsou dostate čně popsány. Endokrinní disrupci ve vodních organismech m ůžeme indikovat pomocí zm ěny hladiny vitellogeninu (VTG). Vitelogenin je prekurzorem vaje čného žloutku. Existují studie o reproduk čních abnormalitách u voln ě žijících pták ů, hlavn ě rybožravých. Byli nalezeni demaskulinovaní samci a n ěkolik defeminizovaných samic divokých ryb žijících v blízkosti oblasti odtoku odpadní vody. Sam čí želvy (ne samci) v rybnících m ěly zvýšenou hladinu vitelogeninu v plazm ě. Byla pozorována vitellogenese a feminizace u sam čích ryb ve vodách, což je p řisuzováno p řítomnosti estrogenních slou čenin. Koncentrace E2 již od 1ng/l vedou k indukci vitellogeninu samce pstruha. Steroidní hormony v životním prost ředí nemusí ovliv ňovat pouze p řírodu a lidskou populaci, ale také rostliny. U vojt ěšky, zasažené stokovou vodou, která obsahovala steroidní hormony, byla pozorována zvýšena hladina fytoestrogen ů. (Guang-Guo Ying, Rai S. Kookana, Ying-Jun Ru, 2002) Ú činek bude omezen na p ůdní biomasu s výjimkou půdní fauny schopné p římo konzumovat a trávit částe čky p ůdy (nap ř. žížaly). (M.Kuster, M.J.López de Alda, D.Barceló, 2004) Zvyšující se expozice humánní populace xenoestrogenními látkami je dávána do souvislosti se stoupajícím výskytem některých abnormalit reproduk čního systému – u muž ů je to benigní hyperplazie prostaty, rakovina varlat, u žen rakovina prsu, adenokarcinom d ělohy, endometrióza. (I.Holoubek, L. Čadová, 2000)

42 Tabulka 5. : Nejnižší pozorované ú činné koncentrace steroid ů p ři studiu ryb (I. Fleming, B. Halling- Sörensen, 2003) Název steroidu Druh ryby LOEC [ng/l] Estron Halan čík japonský ( Oryzias latipes ) 8 17 β-estradiol St řevle tlustonohá ( Pimephales promales ) 0,5 17 α-ethynylestradiol Halan čík japonský ( Oryzias latipes ) 0,03

8. Analytická metodologie

Analýza steroidních látek ve vzorcích ze životního prost ředí vyžaduje metody s požadavkem na nízké detekovatelné limity (LOD). Bylo zve řejn ěno mnoho analytických metod pro detekci steroid ů ve vodních vzorcích. Obvykle zahrnují krok filtrace, extrakce, p řípadné čišt ění, odpa ření a analýzu.

Tabulka č.6: Nejnižší limit detekce (LOD) (T. Guo a kol., 2006)

Steroid LOD (pg/ml) DHEAS 2,0 Aldosteron 10,0 Kortisol 1,5 Kortikosteron 2,0 11-Deoxykortisol 5,0 Androstenedion 1,5 Estradiol 10,0 Testosteron 1,5 17 α-Hydroxyprogesteron 1,5 DHEA 10,0 Progesteron 1,5

Ohledn ě analýzy steroidních látek z pevných vzork ů je k dispozici jen omezené množství materiál ů a aplikované metody jsou velmi často jednoduchými modifikacemi těch použitých u vodních vzork ů.

43 8.1 Vzorkování a uskladn ění

8.1.1 Pevné vzorky

Vzorkování sediment ů je obvykle vykonáváno s drapákovým nástrojem pro nabírání vzork ů. Sesbírané vzorky jsou p řemís ťovány za podmínek ochlazení (+4 až - 20°C) v temnu a z důvodu omezení zm ěn kompozice zájmových analyt ů. P řed uskladn ěním je také velmi často provád ěna lyofilizace (-20°C) sloužící k zakonzervování vzork ů. Skladování vlhkých sediment ů vyžaduje nižší teploty (- 70°C). (M.Kuster, M.J.López de Alda, D.Barcelo, 2004)

8.1.2 Kapalné vzorky

Analyzovaný sesbíraný kal je odebrán p římo z odkalova če a aktivovaný kal je získán filtrací kalu z ČOV. V jedné studii je zmi ňovánao, že po p říjezdu do laborato ře byly vzorky odfiltrovány přes 0,45 m HVLP filtry (USA), aby se vzorky zbavily rozptýlených částic a jiné rozptýlené pevné hmoty. Uchovávání je stejné jako u pevných vzork ů. Další p ředzpracování vzork ů bylo provedeno b ěhem 24 hodin po shromážd ění kvůli minimalizaci mikrobiální degradace. (M.Farré, M.Kuster, R.Brix, F.Rubio, M.J.López de Alda, D.Barcelo, 2007)

8.2 Extrakce a čišt ění

Tento krok musí být vysoce ú činný práv ě kv ůli p řirozen ě se vyskytujícím nízkým koncentracím v ng/l cílových slou čenin. Většina studií zavbývajících se p řítomností a vlivem steroidních látek na životní prost ředí byla zam ěř ena p ředevším na kapalné vzorky (odpadní vody, p řilehlé říční toky). Naproti tomu byly velmi z řídka analyzovány p ůdy a sedimenty. Extrakce steroid ů byla provád ěna extrakcí SPE. Nej čast ěji používaným sorbentem je Oktadecyl (C18), ale byly použity i polymerní sorbenty a grafitizovaná uhlíková čer ň (GCB). I další studie uvádí, že p řed analýzou byly všechny vzorky zpracovány pomocí výše popsaných postup ů extrakce z pevné fáze založené na sériovém použití dvou odlišných SPE kolonek: kolona C18 (15ml, 2g) a Sep-Pak Plus aminopropilová fáze

44 (NH 2). (M. J.López de Alda, D. Barceló, 2001; M.Petrović, E.Eljarrat, M.J.López de Alda, D.Barceló, 2001). Extrakce p řírodních i syntetických steroidních látek z říčních sediment ů byla vždy provád ěna s roztokem aceton-metanol (1:1) využitím ultrazvuku nebo tlakové kapalné extrakce (PLE) a čist ění t ěchto extrakt ů bylo provedeno pomocí SPE s kolonami C18. (M. J. López de Alda, S. Diaz-Cruz, M. Petrovic, D. Baceló, 2003)

8.3 Instrumentální analýza

Byly publikovány r ůzné analytické metody využívající plynovou chromatografii ve spojení s hmotnostním spektrometrem (GC/MS), kapalinovou chromatografii s různými detektory (fluorescen ční, spektrofotometrický - diodové pole, hmotnostní) a LC tandemovou hmotnostní spektrometrii (HPLC-MS/MS). Detekci diodovým polem v kapalinové chromatografii (HPLC-DAD) využilo více studií.

Tabulka č.7: Analytická data odpovídající analýze estrogen ů a ů ve vod ě* (LC-DAD) (M.J.López de Alda a kol., 2000)

Detek ční limity Výt ěžnost Slou čenina t (min) R2 R (ng/l) (%) Estriol 15,5 0,9969 15 103 Estradiol 23,44 0,9962 15 104 Noretindron 24,21 0,9981 15 105 Etynylestradiol 24,44 0,9969 15 111 Estron 25,15 0,9962 10 112 Levonorgestrel 27,02 0,9988 15 101 Progesteron 32,31 0,9995 20 102 Mestranol 33,15 0,9967 20 111

* kalibra ční rozsah, 25ng/l - 10 g/l; detek ční limity S/N=3

Metoda LC-MS získala v posledních letech na popularit ě oproti GC –MS a nyní je považována za nejvíce vhodnou pro stanovení steroidních látek. Hlavní výhodou použití LC je, že konjungáty (glukuronidy, sulfáty atd.) a nekonjungované steroidní látky mohou být detekovány i bez derivatizace, pot řebné pro GC systém.

45 Před detekcí MS byla vždy provád ěna LC separace jak konjungovaných tak i nekonjungovaných steroidních látek na oktadecylových silikagelových stacionárních fázích. Jako mobilní fáze byly pravideln ě použity sm ěsi vody a metanolu a čast ěji pak sm ěsi vody a acetonitrilu s gradientovou elucí. Zlepšení detekce MS byla umožn ěna použitím 0,1% kyseliny octové, 0,2% kyseliny mraven čí, 10mM octanu amonného nebo dodate čným p řídavkem čpavku do mobilní fáze. Tandemová hmotnostní spektrometrie MS je považována za tém ěř nenahraditelnou pro docílení selektivity a nízkých limit ů detekce nezbytné pro spolehlivou analýzu. (M.Kuster, M.J.López de Alda, D.Barceló, 2004) Metody HPLC-MS/MS založené na využití trojitého kvadrupólu (QqQ) nebo analyzátor ů na principu spojení kvadrupólu a iontové pasti (Q-Trap) umož ňují velmi často ur čení endokrinn ě disruptujících slou čenin (EDCs) p řítomných ve vodním prost ředí s dostate čnou citlivostí. Tato informace m ůže být získána v pln ě skenovacím režimu, ovšem p ři snížení citlivosti. Nejnov ější a nejvíce pozoruhodný rozvoj nastal na poli LC-MS/MS p ři vývoji tzv. pr ůletových analyzér ů TOF. Tyto systémy mohou umožnit stanovení hmoty o vysoké p řesnosti (pod 5 ppm). (M.Farré, M.Kuster, R.Brix, F.Rubio, M.J.López de Alda, D.Barcelo, 2007) Kvantitativní analýza steroid ů pomocí HPLC-MS/MS se nej čast ěji provádí v SRM módu s electrosprejovým rozhraním ESI provozovaném v negativním iontovém módu (NI). Na jednu slou čeninu lze použít i dva rozdílné SRM p řechody. (M.Farré, M.Kuster, R.Brix, F.Rubio, M.J.López de Alda, D.Barcelo, 2007) ESI (ionizace elektrospreje) je obzvlášt ě velmi vhodná pro analýzu polárních slou čenin, zatímco APCI (chemická ionizace za atmosférického tlaku) je velmi ú činná při analýze látek o st řední či nízké polarit ě. ESI obecn ě poskytuje nižší limity detekce než je tomu u APCI, ovšem v případ ě komplexních matric jako je odpadní voda můžeme získat falešn ě negativní výsledky vzhledem k efekt ům potla čujícím ionizaci matrice. APCI m ůže v takových p řípadech fungovat jako vhodný nástroj pro citlivou a přesnou kvantifikaci. (S.Zuehlke, 2005)

46 Tabulka č. 8: Pr ůzkum metod LC-MS a LC-MS-MS pro kvantitativní stanovení steroidních pohlavních hormo ů a p říbuzných syntetických slou čenin ve vodním prost ředí (M. J. López de Alda a kol., 2003)

Slou čenina Matrice Extrakce Detek ční metoda LC kolona Mobilní fáze MS systém LOD (ng/l, ng/g) Pitná a E2, E3, E1, EE, DES, povrchová LiChrospher 100 RP-18 SPE (C18 kol.) ESI - MS (SIM) ACN-voda Hewlett-Packard 1100 2-500 PROG, LEV, NOR voda, odtoková (250x4 mm, 5 µm) voda z ČOV On- line SPE E2, E3, E1, EE, DES, LiChrospher 100 RP-18 voda (Hysphere-Resin- ESI - MS (SIM) ACN-voda Hewlett-Packard 1100 <1 PROG, LEV, NOR (250x4 mm, 5 µm) GP kol.) SPE (LiChrolut Odtoková voda EN+C18 kol.) + Betasil C18 (150x2,1 mm, E2,E1 ESI (NI) - MS ACN-voda Platform LCZ (Micromass) 0,07 - 0,18 z ČOV imunoafinitní 3 µm) extrakce SPE (SDB-SC E2, E3, E1 Říční voda ESI (NI) - MS Zorbax C18 (150x2,1 mm) ACN-voda Hewlett-Packard 1100 1 - 50 disk) Purospher STAR RP - 18 M - 800 iontová past, Merck- E2, E3, E1, EE, DES Říční voda SPE (C18 kol.) IS (NI) - MS (SIM) ACN-voda 3,2 - 10,6 (55x2 mm, 3 µm) Hitachi Voda (nádrž, Phenomenex Luna C18 Voda- MeOH -ACN E2, E3, E1, EE, DES SPE (C18 kol.) ESI (NI) - MS (SIM) Hewlett-Packard 1100 200 řeka, ČOV) (150x4,1 mm, 3 µm) (acetát amonný 10 mM) Voda (nádrž, Phenomenex Luna C18 Voda- MeOH -ACN Quatro LC trojný kvadrupól E2, E3, E1, EE, DES SPE (C18 kol.) ESI (NI) - MS- MS 5 řeka, ČOV) (150x4,1 mm, 3 µm) (acetát amonný 10 mM) (Micromass) Říční voda, SPE (Grafitizovaný Alltima C18 (250x4,6 mm, Sciex API 2000 trojný kvadrupól E2, E3, E1, EE ČOV p řítok a ESI (NI) - MS- MS ACN-voda 0,08 - 0,6 uhlík - 4.kol.) 5 µm) (Perkin - Elmer) odtok E2, E3, E1, EE, E3-3G, E2-3G, E1-3G, E3- Odpadní voda a SPE (Grafitizovaný Alltima C18 (250x4,6 mm, Sciex API 2000 trojný kvadrupól ESI (NI) - MS- MS ACN-voda 0,003 - 15 16G, E2-17G, E3-3S, říční voda uhlík - 4.kol.) 5 µm) (Perkin - Elmer) E2-3S, E1-3S Prodigy ODS (150x2 mm, voda-metanol (0,2% E2, EE Akvarijní voda SPE (Sep-Pak C18) APCI (PI) -MS (SIM) G1946A MSD (Agilent) 0,6 - 1 5 µm) kyselina mraven čí) ČOV p řítok a SPE (Envi-Carb Alltima C18 (250x4,6 mm, Sciex API 365 trojný kvadrupól E2, E3, E1, EE APCI (PI) -MS - MS ACN-voda 0,5 - 1 odtok kol.) 5 µm) (Perkin - Elmer) E2, E3, E1, EE, MES, equilin, testosteron, Hypersil ODS (100x4,6 0,1% kyselina octová- Sciex API 365 trojný kvadrupól Říční voda SPE (C18 kol.) APCI (PI) -MS - MS 1 - 10 dihydrotestosteron, mm, 3 µm) metanol (Perkin - Elmer) cyproteron PLE (Aceton - E2, E3, E1, EE, DES, metanol, 1:1), + LiChrospher 100 RP-18 Říční sediment ESI - MS (SIM) ACN-voda (NI) Hewlett-Packard 1100 0,5 - 5 PROG, LEV, NOR SPE (LiChrospher (250x4 mm, 5 µm) ADS C4) UV (Aceton - E2, E3, E1, EE, DES, LiChrospher 100 RP-18 metanol-voda (PI) Říční sediment metanol, 1:1) + ESI - MS (SIM) Hewlett-Packard 1100 0,04 - 1 PROG, LEV, NOR (250x4 mm, 5 µm) ACN-voda SPE (C18 kol.) Tabulka č.9: Kvantifikace a diagnostika iont ů a p řechod ů využitých pro anylýzu LC- MS a LC-MS-MS nejvíce rozší řených estrogen ů a progestogen ů ve vodním prost ředí (M.J.López a kol., 2003; M.S.Díaz-Cruz a kol., 2003)

SIM (m/z) Detek ční ioniza ční Prekurzorový MRM p řechod (m/z) Prekurzorový Slou čenina technika mód ion →Produktový ion →Produktový ion ion - E2 ESI-MS NI 271 [M-H] 271 →183 [M-C5H12 O] - 271 →145 - ESI-MS-MS NI [M-C8H14 O] - 271 →143[M-C8H 16 O] - APCI-MS PI 255 [M+H-H2O] 255 →159 255 →133 APCI-MS-MS PI E3 IS-MS NI 287 [M-H] -

- 287 →171 [M-C6H12 O2] 287 →145 [M- ESI-MS-MS NI - - C8H14 O2] 287 →143 [M-C8H16 O2] - APCI-MS-MS PI 287 [M+H-H2O] 271 →133 E1 ESI-MS NI 269 [M-H] - - - ESI-MS-MS NI 269 [M-H] 269 →145 [M-C8H12 O] 269 →143 APCI-MS-MS PI 271 [M+H] + 271 →133 EE ESI-MS NI 295 [M-H] -

- 295 →159 [M-C9H12 O] 295 →145 [M- ESI-MS NI - C10 H14 O] - APCI-MS PI 279 [M+H-H2O] APCI-MS-MS PI 279 →133 DES ESI-MS NI 267 [M-H] - E3-3G ESI-MS-MS NI 463 [M+H] + 463 →287 463 →113 E3-3S ESI-MS-MS NI 367 [M+H] + 367 →287 367 →80 E3-16G ESI-MS-MS NI 463 [M+H] + 463 →287 463 →85 E2-3G ESI-MS-MS NI 447 [M+H] + 447 →271 447 →113 E2-3S ESI-MS-MS NI 351,1 [M+H] + 351 →271 351 →80 E2-17G ESI-MS-MS NI 447,2 [M+H] + 447,2 →271,2 447 →85 E1-3G ESI-MS-MS NI 445,2 [M+H] + 445 →269 445 →113 E1-3S ESI-MS-MS NI 349,01 [M+H] + 349 →269 349 →145 NOR ESI-MS PI 321 [M+Na] + APCI-MS PI 299 [M+H] + LEV ESI-MS PI 335 [M+Na] + APCI-MS PI 313 [M+H] + PROG ESI-MS PI 337 [M+Na] + APCI-MS PI 315 [M+H] +

Krom ě tohoto byla použita i nová metoda pro kvantifikaci a potvrzení cílových steroid ů nalezených ve vzorcích využívající spojení ultraú činé kapalinové chromatografie s dvojitým nebo trojitým kombinovaným hmotnostním analyzátorem typu kvadrupól a TOF, UPLC-Q-TOF-MS a UPLC-Q-TOF-MS/MS. Metoda UPLC-Q- TOF-MS nabízí n ěkteré výhody proti metod ě HPLC-MS/MS jako jsou kratší doby analýzy a vylšší selektivita. (M.Farré, M.Kuster, R.Brix, F.Rubio, M.J.López de Alda, D.Barcelo, 2007) Metoda UPLC-Q-TOF-MS byla použita k analýze steroidů ve vod ě. Jedná o první práci, kde je kombinována semi-kvantitativní analýza ELISA s analýzou využitím HPLC-MS/MS (QqQ) a UPLC-Q-TOF-MS.

Tabulka č.10: Reten ční časy, prekurzorové ionty a hlavní produktové ionty získané experimentáln ě využitím UPLC-Q-TOF-MS/MS (M. Farré a kol., 2007)

Slou čenina Reten ční čas Prekurzorový Produkt 1 (m/z) Produkt 2 (m/z) Produkt 3 (m/z) NI mód (min) ion (m/z) Teoretická Experimentální Teoretická Experimentální Teoretická Experimentální

Estron 4,96 269,1563 145,0653 145,0252 Estradiol 4,47 271,1698 145,0653 145,0650 183,0810 183,0819 Estriol 2,81 287,1619 145,0653 145,0618 171,0810 171,0812 183,0810 183,0818 Etynylestradiol 4,86 295,1698 145,0653 145,0652 159,0810 159,0797 199,1123 199,1144

49 9. Záv ěr

Objev toxikologických efekt ů steroidních látek na život ve volné p řírod ě a nedostatek informací ohledn ě jejich potenciálních dopad ů na ekosystém či lidské zdraví vyvolal širší zájem ve řejnosti ohledn ě jejich výskytu v životním prost ředí. Mnoho z těchto látek či jejich metabolit ů vzhledem ke svým fyzikáln ě- chemickým vlastnostem kon čí v životním prost ředí, kde mohou p ůsobit nep řízniv ě na r ůzné organismy. Dokonce i za velmi nízkých koncentrací cca.1 ng/l jsou steroidním látkám přisuzovány endokrinn ě disruptující ú činky jako snížená plodnost, feminizace a hermafroditizmus vodních organism ů. Poslední studie ukazují, že všechny vykazují mírnou sorpci v sedimentech a krátké polo časy rozpadu v půdách a ve vod ě. Tyto p řírodní a syntetické steroidy procházejí v čistírnách odpadních vod rychlými p řem ěnami. Míra jejich odstran ění je závislá na typu jednotlivých čistíren a také na množství zpracovávaného odpadu.

Novou nad ějí mohou být výzkumy fotokatalýzy TiO 2, umož ňující odstranit steroidní látky z prost ředí kvantitativn ěji či úpln ě. 24-hodinové vzorky p řitékající a odtékající vody z čistíren odpadních vod byly sbírány a extrahovány prost řednictvím SPE, použitím silikagelu, nej čast ěji kolonou C18. V analýze steroidních látek se dostávají do pop ředí dv ě metody: LC-MS a LC- MS-MS. LC s jednoduchou hmotnostní spektrometrickou analýzou nabízí velmi dobrou citlivost, ovšem v případ ě velmi komplexních matric (jako nap ř. odpadní voda) nedostate čnou míru selektivity, což obvykle zhoršuje jednoznačnost identifikace analyt ů. LC s detekcí tandemovým hmotnostním spektrometrem (LC-MS/MS) slibuje jak vysokou citlivost, tak i mnohem lepší selektivitu pro jednozna čnou identifikaci a kvantifikaci kontaminant ů životního prost ředí v koncentracích o stopovém množství. Nedávno zve řejn ěné metody pro ur čování farmaceutik ve vzorcích ze životního prost ředí používají ionizaci pomocí elektro-spreje (ESI) nebo chemickou ionizaci za atmosférického tlaku (APCI). Ačkoliv byly dokázáno, že steroidy mají tendenci se za laboratorních podmínek v půdách a vodách odbourávat, je zapot řebí rozsáhlejšího výzkumu ke zjišt ění rozptýlení a transportu t ěchto steroid ů v různých médiích jako jsou říční vody, mo řská voda, podzemní voda, sedimenty a p ůdy. Je t řeba také více prozkoumat faktory (biotické a abiotické) ovliv ňující jejich rozklad. Informace o stabilit ě steroidních látek

50 v životním prost ředí a jejich možné d ůsledky na zví řata ve volné p řírod ě a člov ěka jsou stále nedostate čné.

51 10. Použitá literatura

Céspedes R., Petrovic M., Raldúa D., Saura Ú., Pi ňa B., Lacorte S., Viana P., Barceló D. Integrated procedure for determination of endocrine-disrupting activity in surface waters and sediments by use of the biological technique recombinant yeast assay and chemical analysis by LC-ESI-MS. Anal Bioanal Chem 2004; 378; 697- 708 Díaz-Cruz M. S., López de Alda M. J., López R., Barceló D. Determination of and progestogens by mass spectrometric techniques (GC/MS, LC/MS and LC/MS/MS). Journal of Mass Spectrometry 2003; 38;917-923 Farré M., Kuster M., Brix R., Rubio F., López de Alda M. J., Barceló D. Comparative study of an estradiol enzyme-linked immunosorbent assay kit, liquid chromatography-tandem mass spectrometry, and ultra performance liquid chromatography-quadrupole time of flight mass spectrometry for part-per-trillion analysis of estrogens in water samples. Journal of Chromatography A 2007; 1160; 166-175 Farré M., Klöter G., Petrovic M., Alonso M. C., López de Alda M. J., Barceló D. Identification of toxic compounds in wastewater treatment plants during a field experiment. Analytica Chimica Acta 2002; 456; 19-30 Fleming I., Halling- Sörensen B. Evaluation of analytical chemical methods for detection of estrogens in the environment. Working Report 2003; No. 44 Giese R. W. Measurement of endogenous estrogens: analytical challenges and recent advances. Journal of Chromatography A 2003; 1000; 401-412 Guo T., Taylor R. L., Singh R. J., Soldin S. J. Simultaneous determincation of 12 by isotope dilution liquid chromatography-photospray ionization tandem mass spectrometry. Clinica Chimica Acta 2006; 372;76-82 Google. http://www.google.cz/ Görög S. Quantitative analysis of steroids. Akadémiai Kiadó, Budapest 1983 Halm S., Pounds N., Maddix S., Rand-Weaver M., Sumpter J.P., Hutchinson T.H., Tyler C.R. Exposure to endogenous 17 β-oestradiol disrupts P450aromB mRNA expression in the brain and gonad of adult fathead minnows ( Pimephales promelas ). Aquatic Toxicology 2002; 60; 285-299

52 Hájková K., Pulkrabová J., Sch ůrek J., Hajšlová J., Poustka J., Nápravníková M., Kocourek V. Novel approaches to the analysis of steroid estrogens in river sediments. Anal Bioanal Chem 2007; 387; 1351-1363 Holoubek I., Čadová L. Estrogen v životním prost ředí. Klinická onkologie 2000; 25-30 Churá ček J., Jandera P. Separace látek. Kapalinová vysokoú činná kolonová chromatografie. VŠCHT v Pardubicích. Katedra analytické chemie. SNTL – nakladatelství technické literatury. 140 s., Praha 1981 Jelinek I. Kapalinová chromatografie – hmotnostní spektrometrie (LC-MS). Univerzita Karlova v Praze, P řírodov ědecká fakulta, katedra analytické chemie Jing. G. G., Kookana R. S., Ru Y. J. Occurrence and fate of steroids in the environment. Environment International 2002; 28; 545-551 Johnson A. C., Wiliams R. J., Matthiessen P. The potential contribution of farm animals to freshwaters, the United Kingdom as a case study. Science of the Total Enviton. 2006; 362; 166-178 Kuster M., López de Alda M. J., Barceló D. Analysis and distribution of estrogens and progestogens in sewage sludge, soils and sediments. Trends in Analytical Chemistry 2004; Vol. 23; No. 10-11 Laboratorní pr ůvodce. http://www.labo.cz/mft/vl.php López de Alda M. J ., Barceló D. Determination of steroid and related synthetic compounds considered as endocrine disrupters in water by fully automated on-line solid-phase extraction-liquid chromatography-diode array detection. Journal of Chromatography A 2001; 911; 203-210 López de Alda M. J., Díaz-Cruz S., Petrovic M., Barceló D. Liquid chromatography- (tandem) mass spectrometry of selected emerging pollutans (steroid sex hormones, drugs and alkylphenolic surfactants) in the aquatic environment. Journal of Chromatography A 2003; 1000; 503-526 López de Alda M. J., Barceló D. Use of solid-phase extraction in various of it’s modalities for sample preparation in the determination of estrogens and progestogens in sediment and water. Journal of Chromatography A 2001; 938; 145-153 Petrovic M., Eljarrat E., López de Alda M. J., Barceló D. Analysis and enviromnmetal levels of endocrinne-disrupting compunds in fresh water sediments. Trends in Analytical Chemistry 2001; Vol. 20; No. 11

53 Reemtsma T. Liquid chromatography-mass spectrometry and strategies for trace-level analysis of polar organic pollutants. Jornal of Chromatography A 2003; 1000; 477-501 Ternes T. A. Analytical methods for the determination of pharmaceuticals in aqueous environmental samples. Trends in Analytical Chemistry 2001; Vol. 20; No. 8

Vřeš ťál J. a kol. Hmotnostní spektrometrie. Masarykova Univerzita v Brn ě, fakulta Přírodov ědecká. 114 s., Brno 2000 Yamamoto A., Kakutani N., Yamamoto K., Kamiura T., Miyakoda H. Steroid hormone profiles of urban and tidal rivers using LC/MS/MS equipped with electrospray ionization and atmospheric pressure photoionization sources. Environ. Sci. Technol. 2006; 40; 4132-4137 Zavitsanos P., Miller Ch. Identification of steroids in water by ion trap LC/MS/MS. Agilent technologies Zuehlke S. LC-MS in environmetal trace analyses – a challenge for reliable data monitoring. Institute of Environmental Research, University of Dortmund Zwiener Ch., Frimmel F. H. LC-MS analysis in the aquatic environment and in water treatment-a critical review. Anal Bioanal Chem 2004; 378; 862-864

54 11. P říloha

Příloha č. 1 Jiné názvy a obchodní názvy jednotlivých steroidních látek

55 Příloha č. 1 Jiné názvy a obchodní názvy jednotlivých steroidních látek

Estron (E1) Jiné názvy: Estra-1,3,5(10)-trien-17-on, Destrone; Esterone; Estrol; Estron;; Kestrone; Ketodestrin; Ketohydroxyestrin; Oestrin; Oestroform; Oestrone; 1,3,5(10)-Estratrien-3- ol-17-one; δ-1,3,5-Estratrien-3β-ol-17-one; δ-1,3,5-Oestratrien-3β-ol-17-one; Estrona; -A; ; Ketohydroxy-Estratriene;; 1,3,5(10)-Oestratrien-3-ol-17-one; 3-Hydroxy- oestra-1,3,5(10)-trien-17-one; 3-Hydroxy- ,3,5(10)-oestratrien-17-one; 3-Hydroxy-17- ketoestra-1,3,5-triene; 3-Hydroxy-17-ketooestra- ,3,5-triene; E(sub 1); 1,3,5-Estratrien- 3-ol-17-one; ; Folliculine benzoate; Ketohydroxyoestrin; 3-Hydroxyestra- 1,3,5(10)-triene-17-one; Penncap M; Sinafid M-48;; 3-Hydroxyestra-1,3,5(10)-17-one; Ketophydroxyestrin; 3-Hydroxyestra- (10),2,4-trien-17-one

Obchodní názvy (preparáty): Aquacrine; Crinovaryl; Cristallovar; Crystogen;; Disynformon; Endofolliculina; Estrovarin; Estrugenone; Estrusol; Femestrone inj.; Femidyn; Folikrin; Folipex; Folisan; Follestrine; Follestrol; Follicular hormone; Folliculin; Follicunodis; Follidrin; Glandubolin; Hiestrone; Hormofollin; Hormovarine; Menformon A; Mestronaq; WynestronPencap M; Femestrone inj.; Ovifollin; Perlatan; Solliculin; Theelin; Thelykinin; Oestroperos; Unden (pharmaceutical); Kolpon; Menagen; Menformon; Di-Genik - složka; Di-Met - složka; Duogen - složka; Mal-O- Fem - složka; Spanestrin-P - složka; Thelestrin; Wynestron; Fem-O-Gen; Hormestrin; Fermidyn; Follidrin (tablety)

Estradiol (E2) Jiné názvy: Estra-1,3,5(10)-trien-3,17-diol (17 β)-; β-Estradiol;; D-3,17 β-Estradiol; Estra-1,3,5(10)-trien-3,17 β-diol; Oestra-1,3,5(10)-trien-3,17 β-diol; Oestradiol; dihydro- 17 β-Estradiol; 17 β- Oestradiol; 3,17 β-Dihydroxyestra-1,3,5(10)-triene; 3,17 β- Dihydroxyestra-1,3,5-triene; 3,17 β- Estradiol; 3,17-Epidihydroxyestratriene; 1,3,5,(10)- Estratrien-3,17 β-diol; α-Estradiol; α-Oestradiol; β-Oestradiol; cis-Estradiol; cis- Oestradiol; D-Estradiol; D-Oestradiol; D-3,17 β-Oestradiol; Estradiol-17 β; Estradiol, β-; Oestradiol-17 β; 1,3,5-Estratriene-3,17 β-diol; 17 β-Estra-1,3,5(10)-triene-3,17-diol; 17 β- Oestra-1,3,5(10)-triene-3,17-diol; 17 β-OH-estradiol; 17 β-OH-oestradiol; 3,17 β- Dihydroxy-1,3,5(10)-estratriene; 3,17 β-Dihydroxy-1,3,5(10)-oestratriene; 3,17 β- Dihydroxyoestra-1,3,5-triene; 3,17-Epidihydroxyoestratriene; 3,17-β-Oestradiol; 3,17- Estra-1(10),2,4-triene-3,17-diol; 5A-Estran-3B,17B-diol

Obchodní názvy (preparáty): Altrad; Aquadiol; Bardiol; Corpagen; Dihydrofollicular hormon; Dihydrofolliculin; Dihydromenformon; Dihydrotheelin; Dihydroxyestrin; Dimenformon; Diogyn; Diogynets; Estraldine; Estrovite; Femestral; Femogen;

56 Follicyclin; Ginosedol; Gynergon; Gynoestryl; Lamdiol; Macrodiol; Nordicol; Oestergon; Oestroglandol; Ovahormon; Ovasterol; Ovastevol; Ovocyclin; Perlatanol; Primofol; Profoliol; Progynon; Progynon-DH; Syndiol; Theelin, Menrium - složka; Amnestrogen; Dihydroxyesterin; Dihydroxyoestrin; Dimenformon prolongatum; Estrace; Estrol; Evex; Femestrol; Menest; NSC-9895; SK-Estrogens; Trocosone; Ovocycline; Ovocylin; Gynestrel; Macrol; Microdiol; Oestradiol R; Oestrogynal; Ovociclina; Estraderm TTS; Agofollin; Soldep; Ricifon; Sotipox; Ritsifon; Epidihydroxyestratrienelor; Climara; Estraderm; Estring vaginal ring; Estroclim; Evorel; Menorest; NSC-20293; Oestrogel; Profoliol B; Systen; Vagifem; Vivelle; Zumenon

Estriol (E3)

Jiné názvy: Estra-1,3,5(10)-triene-3,16,17-triol, (16 α,17 β)-; Estra-1,3,5(10)-trien- 3,16 α,17 β-triol; Estra-1,3,5(10)-triene-3,16 α,17 β-triol; 1,3,5(10)-Estratriene-3,16 α,17 β- Triol; 16 α-Estriol; 16 α-Hydroxy-17 β-estradiol; 16 α,17 β-Estriol; 3,16 α,17 β-Estriol; 3,16 α,17 β-Trihydroxyestra-1,3,5(10)-triene; 1,3,5(10)-Estratrien- ,16 α,17 β-triol; (16 α,17 β)-Estra-1,3,5(10)-triene-3,16,17-triol; (16 α,17 β)-Oestra-1,3,5(10)- riene- 3,16,17-triol; oestra-1,3,5(10)-triene-3,16 α, 17 β-triol; 1,3,5- stratriene-3β,16-α,17-β- triol; 1,3,5-Oestratriene-3-β,16 α,17 β-triol; 16 α-Hydroxyestradiol; 16 α- Hydroxyoestradiol; 16 α,17 β-Oestriol; 3,16 α,17 β-Trihydroxy-δ-1,3,5-estratriene; 3,16 α,17 β-Trihydroxy-δ-1,3,5-oestratriene; 3,16 α,17 β-Trihydroxy-1,3,5(10)-estratriene; Colpovister; Estra-1,3,5(10)-triene-3,16-α, l7-β-triol; Klimoral;3,16-α,17-β-Oestriol; 3,16-α,17-β-Trihydroxyoestra-1,3,5(10)-triene; Estra-1(10),2,4-triene-3,16,17-triol

Obchodní názvy (preparáty): Destriol; Estratriol; Follicular hormone hydrate; NSC- 12169; Orestin; Ovestin; OE3; Theelol;Tridestrin; Trihydroxyestrin; Oestriol; A 13610; Aacifemine; Deuslon A; Folicular hormone; Oestratriol; Ortho-Gynest; Overstin; Ovestrion;Thulol; Estriolo; Gynaesan; Hemostyptanon; Holin; Hormomed; Hormonin; Orgastyptin; Ovesterin; Ovestinon; Stiptanon; Synapause; Trihydroxyoestrin; Triodurin; Triovex; Colpogyn; Gynasan; Klimax E; Oekolp; Ovo-vinces;

Progesteron

Jiné názvy: δ(Sup4)-pregnene-3,20-dione; 4-Pregnen-3,20-dione; δ-Pregnene- ,20- dione; β-; δ4-Pregnene-3,20-dione; Pregn-4-ene-3,20-dione, 17 α-hydroxy- 6α- ethyl-; Pregnene-3,20-dione; 17 α-Hydroxy-6α-methylpregn- -ene-3,20-dione; 17 α-

57 Progesterone; 3,20-Pregnene-4; 4-Pregnene-3,20-dione; 6 α- ethylpregn-4-en-17 α-ol- 3,20-dione; Pregn-4-en-3,20-dione

Obchodní názvy (preparáty): Agolutin; Bio-luton; Corlutin; Corlutina; Corluvite; Corporin; Corpus luteum hormone; Flavolutan; Fologenon; Gesterol; Gestone; Gestormone; Gestron; Glanducorpin; Gynlutin; Gynolutone; Hormoflaveine; Hormoluton; Lipo-lutin; Lucorteum sol; Luteal hormone; Luteinique; Luteocrin normale; Luteodyn; Luteogan; Luteohormone; Luteol; Luteopur; Luteosan; Luteostab; Luteovis; Lutex; Lutidon; Lutin; Lutociclina; Lutocyclin; Lutocyclin m; Lutocylin; Lutoform; Lutogyl; Lutren; Lutromone; Nalutron; Percutacrine luteinique; Piaponon; Primolut; Progekan; Progesterol; Progestin; Progestone; Progestron; Prolets; Prolidon; Proluton; Protormone; synGestrets; synTolutan; Cyclogesterin - složka; Colprosterone; Cyclogest; Lingusorbs; Lucorteum; Luteine; Lutocylol; Membrettes; Methylpregnone; MPA; NSC-9704; Pranone; ; Progestasert; Progesteronum; Progestosol; Progestronol; Prolutin; Syngesterone; Synovex S; Utrogestan; Depo-provera; Gesterol 100; Percutacrine; Prolutone; Gesterol 50; Thiuram E; Thiuranide; Gestiron; Lutocuclin M; Progestogel; Progestol; Progeston; Pregnene

Testosteron Jiné názvy: Androst-4-en-3-one, 17-hydroxy-, (17 β)-; δ(Sup4)-Androsten-17 β-ol-3-one; 4-Androsten-17 β-ol-3-one; δ(4)-Androsten-17 β- l-3-one; trans-; Androst- 4-en-17 β-ol-3-one; Androst-4-en-3-one, 17 β-hydroxy- Malerone; 17 β-Hydroxy- δ(sup4)-androsten-3-one; 17 β-Hydroxy-4-androsten-3-one; 17 β-hydroxyandrost-4-en-3- one; 17-Hydroxy-(17 β)-androst-4-en-3-one; 7-β-hydroxyandrost-4-en-3-one; 17- hydroxyandrost-4-en-3-one; 17Beta-hydroxyandrost-n-3-one; Androst-4-en-3-on-17 β- ol

Obchodní názvy (preparáty): Androlin; Andronaq; Andrusol; Cristerona T; Geno- cristaux Gremy; Homosteron; Homosterone; Mertestate; Neotestis; Orquisteron; Perandren; Percutacrine androgenique; Primotest; Primoteston; Sustanon; Sustanone; Teslen; Testandrone; esticulosterone; Testobase; Testopropon; Testosteroid; Testosteron; Testoviron Schering; Testoviron T; Testrone; Testryl; Virormone; Virosterone; Di-Genik - složka; Di-Met - složka; Duogen - složka; al-O-Fem - složka;

58 Malogen, vod. rozt. inj.; Neo-Hombreol F; Oreton; Oreton F; Synandrol ;Testoviron; Cristerone T; Malestrone; Andro 100; Dofsol; Testoderm; Testolin; Testro AQ;

Androstenedion Jiné názvy: δ(Sup4)-Androstene-3,17-dione; SKF 2170; 3,17-Dioxoandrost-4-Ene; 4- Androstene-3,17-dione; δ-4-Androstene-3,17-dione; δ4-androsten-3,17-dione; 4- Androsten-3,17-dione; δ-(sup4)-Androsten-3,17-dione;

Dehydroepiandrosteron (DHEA) Jiné názvy: Androst-5-en-17-one, 3-hydroxy-, (3 β)-; Androst-5-en-17-one, 3 β-hydroxy- ; trans-Dehydroandrosterone; 17-Chetovis; 17-Hormoforin; 5-; 5,6-Dehydroisoandrostorone; 5,6- Didehydroisoandrosterone; 3-β-hydroxyandrost-5-en- 17-one; 5-Androsten-3-β-ol-17-one; 5-dehydro-; 5,6-Dehydroisoandrosterone; DHA; 3- β-hydroxy-5-androsten- 17-one; -Androsten-3β-ol-17-one; DHEA; 3-Hydroxyandrost- 5-en-17-one; 5-Androsten-3B-ol-17-one; "trans-Dehydroandrosterone"

Obchodní názvy (preparáty): Astenile; Prastera; Giselin; Prasterone; Dehydroepiandrosterone; Androstenolone; Dehydroisoandrosterone; Diandron; Diandrone; Psicosterone; Epiandrosterone; Dehydroandrosterone; Astenile; Deandros

Kortison Jiné názvy: Pregn-4-ene-3,11,20-trione, 17,21-dihydroxy-; Kendallova slou čenina E; KE; Reichsteinova látka FA; Wintersteinerova slou čenina F; 11-dehydro-17- hydroxycorticosterone; 17 α-hydroxy-11-dehydrocorticosterone; 17-hydroxy-11- dehydrocorticosterone; δ(sup4)-pregnene-17 α,21-diol-3,11,20-trione; Pregn-4-en- 17 α,21-diol-3,11,20-trione; 17 α,21-dihydroxy-4-pregnene-3,11,20-trione; 17 α,21- dihydroxypregn-4-ene-3,11,20-trione; 4-Pregnene-17 α,21-diol-3,11,20-trione; 17,21- dihydroxypregn-4-ene-3,11,20-trione

Obchodní názvy (preparáty): Adrenalex; Adreson; Corlin; Cortadren; Cortisate; Cortivite; Cortogen; Cortone; Incortin; Scheroson; Andreson; Cortandren; Cortisal; Cortison;

59 Hydrocortisone Jiné názvy: Hydroxycortisone; Pregn-4-ene-3,20-dione, 11,17,21-trihydroxy-, (11 β)-; anti-vyrážkový hormon; Kendallova slou čenina F; Reichsteinova látka M; 11 β- Hydroxycortisone; 17 α-Hydroxycorticosterone; 17-Hydroxycorticosterone; 4-Pregnen-11 β,17 α,21-triol-3,20-dione; Pregn-4-ene-3,20-dione, 11 β,17,21-trihydroxy-; Proctocort; Rectoid; 11 β-Hydrocortisone; 11 β,17 α,21-Trihydroxy-4-pregnene-3,20- dione; 11 β,17 α,21-Trihydroxypregn-4-ene-3,20-dione; 11 β,17,21-Trihydroxypregn-4- ene-3,20-dione; 4-Pregnene-11 β,17 α,21-triol 3,20-dione; 11,17,21-Trihydroxypregn-4- ene-3,20-dione; 11 β,17,21-trihydroxy progesterone

Obchodní názvy (preparáty): Cortisol; Cobadex; Cort-Dome; Cortanal; Cortef; Cortenema; Corticreme; Cortifan; Cortiment; Cortispray; Cortonema; Cortril; Dihydrocostisone; Domolene-HC; Efcorbin; Epiderm H; Esiderm H; Ficortril; Genacort; Heb-Cort; Hidro-Colisona; Hycort; Hycortol; Hycortole; Hydrasson; Hydro- Adreson; Hydrocorticosterone; Hydrocortisone alcohol; Hydrocortisyl; Hydrocortone; Hytone lotion; HC; Incortin-H; NSC 10483; Optef; Otosone-F; Permicort; Polcort H; Scheroson F; Signef; Tarcortin; Texacort lotion 25; Topicort; Traumaide; Cort-Quin - složka; Heb-Cort MC - složka; Lubricort - složka; Neo-Cort-Dome - složka; Otalgine - složka; Pantho-F - složka; Vioform-Hydrocortisone - složka; Aeroseb-HC; Ala-Scalp; Alacort; Barseb HC; Cetacort; Cleiton; slou čenina F; slou čenina F (Kendall); Cortifoam; Cortisol alcohol; Cortolotion; Cortoxide; Cremesone; Delacort; Dermacort; Dermolate; Efcorlin; Efcortelan; Efcortelin; Eldecort; Eldercort; Epicort; Fiocortril; H- Cort; Hydro-colisona; Hydrocortisone volný alkohol; Hydrocortistab; Hysone; Hytone; Incortin-hydrogen; Komed HC; Maintasone; Acticort; Alphaderm; CaldeCORT Spray; Lacticare-HC; Nutracort; Penecort; Prepcort; Thyrotropic-releasing factor; Cor-tar-quin - složka; Cort-quin cortisporin - složka; Drotic - složka; Nystaform-hc - složka; Otic- neo-cort-dome - složka; Otobiotic - složka; Otocort - složka; Pediotický roztok - složka; Racet - složka; Vosol hc - složka; Vytone; 11-Hydrocortisone - složka;

Androsteron Jiné názvy: Androstan-17-one, 3-hydroxy-, (3 α,5 α)-; 3α-Hydroxy-17-androstanone; 3 α- Hydroxyetioallocholan-17-ne; 3-Epihydroxyetioallocholan-17-one; 5 α-Androsterone; cis-Androsterone; U 6036; 5 α-Androstan-17-one, 3 α-hydroxy-; 5 α--3α-ol-

60 17-one; Androstanon-3-α-ol-17-one; 5-α-Androstan-3-α-ol-17-one; 3-α-Hydroxy-5-α- androstan-17-one; 3-Hydroxyandrostan-17-one

Obchodní názvy (preparáty): Androkinine; Androtine; Atromide ICI; Androsterone

Ethynylestradiol (EE2) Jiné názvy: 19-Norpregna-1,3,5(10)-trien-20-yne-3,17-diol, (17 α)-; 19-Nor-17 α-pregna- 1,3,5(10)-trien-20-yne-3,17-diol; 17-ethynyl-; 17 α-Ethinyl-17 β-estradiol; 17 α- Ethinylestradiol; 17 α-Ethynylestradiol; 17-Ethinyl-3,17-estradiol; 17-Ethinylestradiol; 17-Ethynylestradiol; Estra-1,3,5(10)-triene-3,17 β-diol, 17 α-ethynyl-; Estra-1,3,5(10)- triene-3,17 β-diol, 17-ethynyl-; 17 α-ethinyl-δ(sup1,3,5(10))oestratriene-3,17-β -diol; 17 α-ethinyl-3,17-dihydroxy- δ(sup1,3,5)oestratriene; 17 α-ethinylestra-1,3,5(10)-triene- 3,17 β-diol; 17 α-ethinyloestra-1,3,5(10)-triene-3,17 β-diol; 17 α-ethinyl-3,17-dihydroxy- δ(sup1,3,5)-estratriene; 17 α-ethynyl-1,3,5-estratriene-3,17 β-diol; 17 α-ethynyl-1,3,5- oestratriene-3,17 β-diol; 17 α-ethynyl-17 β-oestradiol; 17 α-ethynylestra-1,3,5(10)-triene- 3,17 β-diol; 17 α-ethynylestradiol-l7 β; 17 α-ethynyloestra-1,3,5(10)-triene-3,17 β- diol;17 α-ethynyloestradiol; 17 α-ethynyloestradiol-17 β; 17 β-estradiol, 17-ethynyl-; 17- ethinyl-3,17-oestradiol; 17-ethynyl-3-17-dihydroxy-1,3,5-oestratriene; 17- ethynyloestradiol; 3,17 β-Dihydroxy-17 α-ethynyl-1,3,5(10)-estratriene; 3,17 β- Dihydroxy-17 α-ethynyl-1,3,5(10)-oestratriene; 17-Ethynylestradiol ram; 19-Nor-17 α- pregna-1,3,5(10)-trien-20-yn-3,17-diol; 17-Ethynylestra-1(10),2,4-triene-3,17-diol

Obchodní názvy (preparáty): Amenoron; Chee-O-Gen; Chee-O-Genf; Diogyn-E; Dyloform; Esteed; Estigyn; Estinyl;Eston-E; Estoral; Estorals; Estradiol, Ethidol; Ethinoral; Ethinylestriol; Ethinyloestradiol; Eticyclin; Eticyclol; Etinestrol; Etinestryl; Etinoestryl; Etistradiol; Follicoral;Ginestrene; Inestra; Linoral; Lynoral; Menolyn; Neo- Estrone; Nogest-S; Novestrol; Oradiol; Orestralyn; Palonyl; Perovex; Primogyn; Primogyn C; Primogyn M; Progynon C; Spanestrin; Brevicon - složka; Demulen - složka; Estopherol - složka; Gynetone - složka; Halodrin - složka; Modicon - složka; Neocon - složka; Norlestrin - složka; Oracon - složka; Ortrel - složka; Ovcon - složka; Ovral - složka; Zorane - složka; Anovlar; Diognat-E; Ertonyl; Estoral (orion); Estrogen; Eticylol; EE; Feminone; Orestrayln; Ovex; Ylestrol; Thiuram E; Thiuranide; Desogen - složka; Estostep - složka; Estrostep - složka; Ethy 11; Etivex; Gynolett; Kolpolyn;

61 Levlen - složka; Lo/ovral - složka; Loestrin – složka ; Nolestrin - složka; Nordette - složka; Norethin 1/35e - složka; NSC-10973; Ortho-cyclen - složka; Ortho-novum - složka; Progynon M; Tri-evlen - složka; Triphasil - složka

Mestranol (MeEE2) Jiné názvy: 19-Norpregna-1,3,5(10)-trien-20-yn-17-ol, 3-methoxy-, (17 α)-; 19-Nor-17 α-pregna-1,3,5(10)-trien-20-yn-17-ol, 3-methoxy-; δ-MVE; Ethinylestradiol 3-Methyl ether; Ethynylestradiol methyl ether; EE3ME; 17 α-Ethinylestradiol 3-methyl ether; 17 α-Ethynylestradiol methyl ether; 17 α-Ethynylestradiol 3-methyl ether; 17- Ethynylestradiol 3-methyl ether; 3-Methoxy-17 α-ethinylestradiol; 3-Methoxy-17 α- thynylestradiol; 3-Methoxyethynylestradiol; 3-Methylethynylestradiol; 3-O- ethylethynylestradiol; (+)-17 α-Ethynyl-17 β-hydroxy-3-methoxy-1,3,5(10)-estratriene; (+)-17 α-Ethynyl-17 β-hydroxy-3-methoxy-1,3,5(10)-oestratriene; Estra-1,3,5(10)-trien- 17 β-ol, 17-ethynyl-3-methoxy-; Ethinyloestradiol 3-methyl ether; Ethynyloestradiol 3- methyl ther; EE(sub3)ME; 17 α-Ethinyl oestradiol 3-methyl ether; 17 α-Ethynyl-3- methoxy-17 β-hydroxy-δ-1,3,5(10)-estratriene;17 α-Ethynyl-3-methoxy-17 β-hydroxy-δ- 1,3,5(10)-oestratriene; 17 α-19-Norpregna-1,3,5(10)-trien-20-yn-17-ol, 3-methoxy-; 17 β-Estradiol, 17-ethynyl-, 3-(methyl ether); 17-Ethynyl-3-methoxy-1,3,5(10)- estratrien-17 β-ol; 17-Ethynyl-3-methoxy-1,3,5(10)-oestratien-17 β-ol;3-Methoxy-17 α- ethinyloestradiol; 3-Methoxy-17 α-ethynyl-1,3,5(10)-estratrien-17 β-ol; 3-Methoxy-17 α- ethynyl-1,3,5(10)-oestratrien-17 β-ol; 3-Methoxy-17 α-ethynyloestradiol; 3-Methoxy-19- nor-17 α-pregna-1,3,5(10)-trien-20-yn-17-ol; 3,17-β-Dihydroxy-17-α-ethynyl-1,3,5(10)- estratriene-3-methyl ether; Estra-1,3,5(10)-trien-17-β-ol, 17-α-ethynyl-3-methoxy-; 17- α-Ethynyl-3-methoxy-1,3,5(10)-estratrien-17-β-ol; 3- Methoxyethynyloestradiol; 3- Methoxy-17-ethynyloestradiol-17-β; 3-Methoxy-17-α-19-norpregna-1,3,5(10)-trien-20- yn-17-ol; (17-α)-3-METHOXY-19-NORPREGNA-1,3,5(10)- TRIEN-20-YN-17-OL; 3-Methylethynyloestradiol; 3-Methoxy-19-norpregna- 1,3,5(10)-trien-20-yn-17 β-ol; Enovid - složka; Menophase; Norethrin 1/50m - složka; 17-Ethynyl-3-methoxyestra- 1,3,5(10)-trien-17-ol

Obchodní názvy (preparáty): Devocin; Inostral; Norquen; Ovastol; SC 4725; 33355; 8027 C. B.; C-Quens - složka; Enovid - složka; Norinyl - složka; orquen - složka; Ortho-Novum - složka; Ovulen - složka; 33355 - složka; Mestrenol; Ticinil

62

Desogestrel Jiné názvy: Cerazette; Cyclessa; Desogen; Kariva; Mircette

Dienogest

Levonorgestrel Jiné názvy: (+-)-13-Ethyl-17-hydroxy-18,19-dinor-17alpha-pregn-4-en-20-yn-3-one; (- )-13-Ethyl-17-hydroxy-18,19-dinor-17alpha-pregn-4-en-20-yn-3-one; (-)-Norgestrel; 121714-72-5; 13-β-ethyl-17-α-ethynyl-17-β-hydroxygon-4-en-3-one; 13-Ehyl- 17alpha-ethynyl-17-hydroxygon-4-en-3-one; 13-Ethyl-17-alpha-ethynyl-17-beta- hydroxy-4-gonen-3-one; 13-Ethyl-17-alpha-ethynylgon-4-en-17-beta-ol-3-one; 13- Ethyl-17-hydroxy-18,19-dinor-17alpha-pregn-4-en-20-yn-3-one; 13-Ethyl-17alpha- ethynylgon-4-en-17beta-ol-3-one; 13beta-Ethyl-17alpha-ethynyl-17beta-hydroxygon- 4-en-3-one; 17-alpha-Ethinyl-13-beta-ethyl-17-beta-hydroxy-4-estren-3-one; 17-beta- Hydroxy-18-methyl-19-nor-17-alpha-pregn-4-en-20-yn-3-one; 17-Ethynyl-18-methyl- 19-nortestosterone; 17alpha-Ethynyl-13-ethyl-19-nortestosterone; 17alpha-Ethynyl- 13beta-ethyl-3-oxo-4-estren-17beta-ol; 17alpha-Ethynyl-17-hydroxy-18-methylestr-4- en-3-one; 17alpha-Ethynyl-18-homo-19-nortestosterone; 18,19-Dinor-17-alpha- pregn-4-en-20-yn-3-one; 13-ethyl-17-hydroxy-; 18,19-Dinor-17-alpha-pregn-4-en-20- yn-3-one; 13-ethyl-17-hydroxy-; 18,19-Dinorpregn-4-en-20-yn-3-one, 13-ethyl-17- hydroxy-, 17alpha-18,19-Dinorpregn-4-en-20-yn-3-one, 13-ethyl-17-hydroxy-, 18- Methyl-17-alpha-ethynyl-19-nortestosterone; 18-Methylnorethisterone; 19-17- ethynyl-18-methyl-; dl-13-beta-Ethyl-17-alpha-ethynyl-17-beta-hydroxygon-4-en-3- one; dl-13-beta-Ethyl-17-alpha-ethynyl-19-nortestosterone;

Obchodní názvy (preparáty): Nortestosterone; 4222-79-1; 6533-00-2; 797-62-6; 797-63-7; BRN 2391114; C08149; C08153; CCRIS 6525; Climara Pro; D-(-)- Norgestrel; D-Norgestrel; D00950; D00954; E-Gen-C; EINECS 212-349-8; EINECS 229-433-5; FH 122-A; Follistrel; HSDB 3595; HSDB 6483; Jadelle; LD norgestrel [French]; Levlen; Levlen ED; Levonorgestrel; Levonorgestrel implants; Levonorgestrel [USAN:BAN:INN]; Levonorgestrelum [INN-Latin]; Levonova; Levora-21; Levora-28; Lo/Ovral; Logynon ED; Methylnorethindrone;

63 Microgest ED; Microgyn; Microgynon 21; Microgynon 28; Microgynon 30 ED; Microgynon CD; Microlution; Microval; Minivlar 30; Mirena; MLS000069491; Norgestrel [Progestins]; Norgestrel [USAN:BAN:INN:JAN]; Norgestrel-(-)-D; Norgestrelum [INN-Latin]; NORPLANT; Norplant 2; Norplant II; Norplant II (TN); Ovoplex 30-150; Ovral; Ovral-Lo; Ovranette; Ovrette; Ovrette (TN); Postinor; Prestwick0_000773; Prestwick1_000773; Prestwick_109; Preven; Rigevidon 21+7; SH 70850; SH 850; SMR000059117; SPBio_002785; Stediril 30; Tri-Levlen; Tri-Levlen 21; Triagynon; Triciclor; Trifeme 28; Trigoa; Trinordiol 21; Trinordiol 28; Triphasil; Triphasil 21; Triphasil 28; Triquilar ED; Trivora; Wy 3707; Wy-5104; Monofeme 28; Monovar; Neogest; Neogynon 21; NOG; Nordet; Nordette; Nordette 21; Nordette 28; Norgestrel; Norgestrel

Norethindron Jiné názvy: 19-Norpregn-4-en-20-yn-3-one, 17-hydroxy-, (17 α)-; 19-Nor-17 α-pregn-4-en-20-yn-3-one, 17-hydroxy-; 17 α-Ethinyl-19-Nortestosterone; 17 α-Ethynyl-19-nortestosterone; 19-Nor-17 α-ethynyltestosterone; 19-Nortestosterone, 17-ethynyl-; 4-Estren-17 α-ethynyl-17 β-ol-3-one; Estr-4-en-3-one, 17 α-ethynyl-17- hydroxy-; 17 α-Ethinyl-17 β- hydroxy-δ(sup:4)-estren-3-one; 17 α-Ethinylestra-4-en-17 β- ol-3-one; 17 α-Ethynyl-17 β-hydroxy-19-norandrost-4-en-3-one; 17 α-Ethynyl-17 β- hydroxyestr-4-en-3-one; 17α-Ethynyl-17-hydroxy-4-estren-3-one; 17 α-Ethynyl-19-nor- 4-androsten-17 β-ol-3-one; 17 α-Ethynyl-19-norandrost-4-en-17 β-ol-3-one; 17 α-Ethynyl- 4-estren-17-ol-3-one; 17 β-Hydroxy-19-norpregn-4-en-20-yn-3-one; 17-Hydroxy-19- nor-17 α-pregn-4-en-20-yn-3-one; 19-nor-17 α-Ethynyl-17 β-hydroxy-4-androsten-3-one; 19-nor-17 α-Ethynylandrosten-17 β-ol-3-one; 19-; Ethinyl-19- nortestosterone; 17-Ethinyl-19-nortestosterone; 17-α-Ethynyl-17-β-hydroxy-4-estren-3- one; (17-α)-17-Hydroxy-19-norpregn-4-en-20-yn-3-one; 17-Hydroxy-17-α-19- norpregn-4-en-20-yn-3-one; NET; 19-Nor-ethindrone; 19-Norethinyltestosterone; 19- Nor-ethinyl--4,5-testosterone; 19-Nor-17-ethinyltestosterone; 17-α-19-Norpregn-4-en- 20-yn-3-one, 17-hydroxy-; Utovlan; 17-Ethynyl-17-hydroxyestr-4-en-3-one

Obchodní názvy (preparáty): Anovule; Conludaf; Ethinylnortestosterone; Ethynylnortestosterone; Gestest; Micronett; Micronor; Micronovum; Mini-Pe; Noralutin; Norethisteron; Norethisterone; Norethynodrone; Norfor; Norgestin;

64 Norluten; Norlutin; Norluton; Norpregneninolone; NSC-9564; Primolut N; Proluteasi; SC 4640; Brevicon - složka; Modicon - složka; Neocon - složka; Noriday - složka; Norinyl - složka; Ortho-Novum - složka; Ovcon - složka; Anhydrohydroxynorprogesterone; Conludag; Minovlar; Nor-Q.D.; Noresthisterone; Norethyndron; Noriday; Norlutate; Norpregneninlone; Utovlar; ENT; Perovex; Palonyl; Binovum - složka; Brevinor - složka; Conceplan - složka; Menzol; Mini-pill; Modicomn - složka; Neocon 1/35 - složka; Nor-QD; Norcolut; Norimin - složka; Norinyl-1 - složka; Norinyl 1+35 - složka; Norquentiel - složka; Ortho-novin 1/50 - složka; Ortho- novum 1/35 - složka; Ortho-novum 7/7/7 - složka; Ovysmen - složka; Synphase - složka; Tri-norinyl - složka; Trinovum - složka

Kortisol Jiné názvy: (11beta)-11,17,21-Trihydroxy-pregn-4-ene-3,20-dione, 11-beta- Hydrocortisone, 11-beta-Hydroxycortisone, 11.beta.,17, 21-Trihydroxypregn-4-ene- 3,20-dione, 11.beta.,17.alpha., 21-Trihydroxy-4-pregnene-3,20-dione, 11.beta.,17.alpha., 21-Trihydroxypregn-4-ene-3,20-dione, 11.beta.-Hydrocortisone, 11.beta.-Hydroxycortisone, 11beta,17,21-Trihydroxypregn-4-ene-3,20-dione, 11beta,17,21-Trihydroxyprogesterone, 11beta,17alpha,21-Trihydroxy-4-pregnene- 3,20-dione, 11beta,17alpha,21-Trihydroxypregn-4-ene-3,20-dione, 11beta- Hydroxycortisone, 17-Hydroxycorticosterone, 17.alpha.-Hydroxycorticosterone, 17alpha-Hydroxycorticosterone, 4-Pregnene-11.beta.,17.alpha.,21-triol 3,20-dione, 4- Pregnene-11beta,17alpha,21-triol-3,20-dione, 50-23-7, 8056-08-4, 80562-38-5, 8063-42-1, Pregn-4-ene-3, 20-dione, 11,17,21-trihydroxy-, (11.beta.)-, Pregn-4-ene- 3,20-dione, 11,17,21-trihydroxy-, (11-beta)-, Pregn-4-ene-3,20-dione, 11,17,21- trihydroxy-, (11beta)-, Pregn-4-ene-3,20-dione, 11.beta.,17,21-trihydroxy-, Pregn-4- ene-3,20-dione, 11beta,17,21-trihydroxy-,

Obchodní názvy (preparáty): Acticort, Acticort (TN), Aeroseb HC, Aeroseb-HC, AI3-25006, Ala-Cort, Ala-Scalp, Alacort, Algicirtis, Alphaderm, Amberin, Anflam, Anti-inflammatory hormone, Aquacort, Aquanil HC, Barseb HC, Basan- Corti, C00735, CaldeCort Spray, CCRIS 5854, Cetacort, CHEBI:17650, Chronocort, Clear aid, Cleiton, Cobadex, component of Cort-Quin, component of Heb-Cort MC, component of Lubricort, component of Neo-Cort-Dome, component of Otalgine, component of Pantho-F, component of Vioform-Hydrocortisone, Compound F, Compound F (Kendall), Cor-Tar-Quin, Cort-Dome, Cort-Quin,

65 Cortanal, Cortef, Cortenema, Cortesal, Corticreme, Cortifan, Cortifoam, Cortiment, Cortisol, Cortisol alcohol, Cortisolonum, Cortisporin, Cortisporin Otico, Cortispray, Cortolotion, Cortonema, Cortoxide, Cortril, Cremesone, Cremicort-H, Cutisol, D00088, Delacort, Derm-Aid, Dermacort, Dermaspray, Dermil, Dermocortal, Dermolate, Dihydrocostisone, Dioderm, Dome-cort, Domolene-HC, Drotic, Ef corlin, Efcorbin, Efcortelan, Efcortelin, EINECS 200- 020-1, Eldecort, Eldercort, Epicort, Epiderm H, Esiderm H, Evacort, Ficortril, Fiocortril, Foille Insetti, Genacort, Genacort (lotion), Gyno-Cortisone, H-Cort, HC, Heb Cort, Heb-Cort, Hidalone, Hidro-Colisona, Hidrocortisona [INN- Spanish], HSDB 3339, Hycort, Hycortol, Hycortole, Hydracort, Hydrasson, Hydro-Adreson, Hydro-Colisona, Hydrocort, Hydrocortal, Hydrocorticosterone, Hydrocortisone, Hydrocortisone (JP14/USP), Hydrocortisone alcohol, Hydrocortisone base, Hydrocortisone free alcohol, Hydrocortisone [BAN:INN:JAN], Hydrocortisonum [INN-Latin], Hydrocortistab, Hydrocortisyl, Hydrocortone, Hydroskin, Hydroxycortisone, Hysone, Hytisone, Hytone, Hytone lotion, Idrocortisone [DCIT], Incortin-H, Incortin-hydrogen, Kendall's compound F, Komed HC, Kyypakkaus, Lacticare HC, Lacticare-HC, Lactisona, LMST02030001, Lubricort, Maintasone, Medicort, Meusicort, Mildison, Milliderm, MLS000069609, NCI60_000118, Neo-Cort-Dome, Neosporin-H Ear, NSC 10483, NSC-10483, NSC10483, Nutracort, Nystaform-HC, Optef, Otalgine, Otic-Neo-Cort-Dome, Otobiotic, Otocort, Otosone-F, Pediotic Suspension, Penecort, Permicort, Polcort H, Preparation H Hydrocortisone Cream, Prestwick0_000447, Prestwick1_000447, Prestwick_265, Prevex HC, Proctocort, Proctofoam, Protocort, Racet, Rectoid, Reichstein's substance M, Remederm HC, Sanatison, Scalpicin Capilar, Schericur, Scheroson F, Sigmacort, Signef, SMR000059022, SPBio_002433, Stiefcorcil, Synacort, Systral Hydrocort, Tarcortin, Texacort, Texacort lotion 25, Timocort, Topicort, Transderma H, Traumaide, Uniderm, Vioform-Hydrocortisone, VoSol HC, Vytone, Zenoxone, ZINC03978058

Stanolon Jiné názvy: Androstan-3-one, 17-hydroxy-, (5 α,17 β)-; 5 α-Androstan-3-one, 17 β- hydroxy-; dihydro-; 17 β-Hydroxy-3-androstanone; 4- Dihydrotestosterone; 4,5 α- Dihydrotestosterone; 5 α-Dihydrotestosterone; 5 α,17 β-Hydroxyandrostan-3-one; 5a- Androstan-17b-ol-3-one; 5 α-Androstan-17 β-ol-3-one; 5-α-; DHT; 17- β-Hydroxy-5-α-androstan-3-one; (5 α,17 β)-17-Hydroxy-androstan-3-one; 5a-Androstan- 3-one, 17 β-hydroxy-; 17-Hydroxyandrostan-3-one; 17Beta-hydroxy-5alpha-androstan- 3-one; 5A-Androstan-3-on-17B-ol; 5B-Androstan-3-on-17B-ol

66 Obchodní názvy (preparáty): Anaboleen; Anabolex; Androlone; Androstalone; Cristerona MB; Neodrol; Proteina; Protona; Stanaprol; Stanorone; Testosterone, Dihydrotestosterone; Andractim; Androstanolone

Oxymetholone Jiné názvy: Androstan-3-one, 17-hydroxy-2-(hydroxymethylene)-17-methyl-, (5 α,17 β)-; 5-α,17-β-Androstan-3-one, 17-hydroxy-2-(hydroxymethylene)-17-methyl-; 5-α- Androstan-3-one, 17-β-hydroxy-2-(hydroxymethylene)-17-methyl-; Androstano(2,3- c)(1,2,5)oxadiazol-17-ol, 17-methyl-, (5-α,17-β)-; 4,5-Dihydro-2- hydroxymethylene- 17-α-methyltestosterone; 17-Hydroxy-2-(hydroxymethylene)-17-methyl-5-α-17-β- androst-3-one; 17-β-Hydroxy-2-hydroxymethylene- 17-α-methyl-3-androstanone; 17-β- Hydroxy-2-(hydroxymethylene)-17-α-methyl-5-α-androstan-3-one; 17-β-Hydroxy-2- (hydroxymethylene)-17-methyl-5-α-androstan-3-one; 2-Hydroxymethylene-17-α- methyl-5-α-androstan-17-β-ol-3-one; 2-Hydroxymethylene-17-α-methyl- dihydrotestosterone; 2-Hydroxymethylene-17-α-methyl-17-β-hydroxy-3-androstanone; 17-α-Methyl-2-hydroxymethylene-17-hydroxy-5-α-androstan-3-one; 17-Hydroxy-2-(hydroxymethylene)-17-methylandrostan-3-one

Obchodní názvy (preparáty): Adroidin; Adroyd; Anadrol; Anadroyd; Anapolon; Anasteron; Anasteronal; Anasterone; Becorel; CI-406; Dynasten; HMD; Methabol; Nastenon; NSC-26,198; Oximetholonum; Oximetolona; Oxitosona-50; Oxymethalone; Oxymethenolone; Pavisoid; Plenastril; Protanabol; Roboral; Synasteron; Zenalosyn; Oximetholone; Pardroyd;

Methandrostenolone Jiné názvy: Androsta-1,4-dien-3-one, 17-hydroxy-17-methyl-, (17 β)-; Androsta-1,4- dien-3-one, 17 β-hydroxy-17-methyl-; δ(Sup1)-17 α-Methyltestosterone; 1-Dehydro-17 α- Methyltestosterone; 1-Dehydromethyltestosterone; 1,2-Dehydro- 17- methyltestosterone; 17 α-Methyl-1-dehydrotestosterone; δ-1,17-α-Methyltestosterone; δ'- 17-Methyltestosterone; Androsta-1,4-dien-3-one, 17 β- hydroxy-17 α-methyl-; Testosterone, 1-dehydro-17-methyl-; 1-Dehydro-17-methyltestosterone; 17-β-hydroxy-17-methyl-androsta-1,4-dien-3-one; 17-β-Hydroxy-17-α-methylandrostra-1,4-dien-3-one; Androsta-1,4-diene-3-one, 17-

67 hydroxy-17-methyl-, (17 β)-; 17 β-Hydroxy-17 α-methylandrosta-1,4-dien-3-one; Nabolin; Sterolon; 17-Hydroxy-17-methylandrosta-1,4-dien-3-one

Obchodní názvy (preparáty): Abirol; Anabolin; Ciba 17309-Ba; Compound 17309; Crein; Danabol; Dehydromethyltestosterone; Dianabol; Dianabole; Geabol; Metanabol; Metandienon; Metandienone; Metandienonum; Metandrostenolon; Metandrostenolone; Metastenol; Methandienone; Methandrolone; Methylandrostenolone; MA; Nerobol; Nerobolettes; NSC-42722; Protobolin; Stenolon; Stenolone; Anabolicum Medivet; Andoredan; Encephan; Naposim;

Mestanolone Jiné názvy: 17 β-Hydroxy-17 α-methyl-5α-androstan-3-one; 17-α-Methylandrostan-17-β- ol-3-one; Androstan-3-one, 17-hydroxy-17-methyl-, (5 α,17 β)-; 17 α-Methyl-17 β- hydroxy-5α-androstan-3-one; 17 α-Methyl-5α-dihydrotestosterone; 17 α- 17 β-Hydroxy- 17-methyl-5α-androstan-3-one; 17-Methyldihydrotestosterone; 5 α-Androstan-3-one, 17 β- hydroxy-17-methyl-; 5 α-Androstane-17 α-methyl-17 β-ol-3-one; 17-Hydroxy-17- methylandrostan-3-one; 5A-Androstan-3-on-17B-ol, 17A-methyl

Obchodní názvy (preparáty): Andoron; Androstalone; Assimil; Ermalone; Mesanolon; Mestalone; Methybol; Methylantalon; Methyldihydrotestosterone; Preroide; Tantarone; Methyldihydrotestosterone;

Deoxycorticosterone Jiné názvy: Pregn-4-ene-3,20-dione, 21-hydroxy-; 11-Deoxycorticosterone; 11-deoxy-; Deoxycortone; Desoxycorticosterone; Desoxycortone; Kendall's Desoxy compound B; Reichstein's substance Q; 11-Dehydroxycorticosterone; 11-Desoxycorticosterone; 21-Hydroxyprogesterone; 4-Pregnen-21-ol-3,20-dione; Doca; Progesterone, 21-hydroxy-; 21-Hydroxypregn-4-ene-3,20-dione; "21- Hydroxyprogesterone"

Obchodní názvy (preparáty): Cortexone; Corticosterone

68

17 α-ethynyl-17 β-hydroxy- 5(10)-Estren-3-on (p ředgesta ční hormon) Jiné názvy: 19-Norpregn-5(10)-en-20-yn-3-one, 17-hydroxy-, (17 α)-; Estr-5(10)-en-3- one, 17 α-ethynyl-17-hydroxy-; SC-4642; 17 α-Ethinyl-δ(sup)-5,10-19-nortestosterone; 17 α-Ethinyl-estra(5,10)eneolone; 17 α-Ethinyl-17 β-hydroxy-δ5(10)-estren-3-one; 17 α- Ethinyl-5,10-estrenolone; 17 α-Ethynyl-estr-5(10)-en-3-on-17 β-ol; 17 α-Ethynyl-17 β- hydroxy-δ5(10)-estren-3-one; 17 α-Ethynyl-17 β-hydroxy-3-oxo-δ5(10)-estrene; 17 α- Ethynyl-17 β-hydroxyestr-5(10)-en-3-one; 17 α-Ethynyl-17-hydroxy-5(10)-estren-3-one; 17 α-Ethynyl-19-nor-5(10)-androsten-17 β-ol-3-one; 17 α-Ethynyl-5(10)-estren-17-ol-3- one; 17 α-Ethynylestr-5(10)-en-17 β-ol-3-one; 17-Hydroxy(17 α)-19-norpregn-5(10)-en- 20-yn-3-one; 17-Hydroxy-19-nor-17 α-pregn-5(10)-en-20-yn-3-one; 19-nor-17 α-Pregn- 5(10)-en-20-yn-3-one, 17-hydroxy-; 19-Norethynodrel; 17-α-Ethinyl-δ(super)-5,10-19- nortestosterone; 17-Ethinyl-5(10)-estraeneolone; 17-α-Ethynyl-17-hydroxyestr-5(10)- en-3-one; 17-α-Ethynyl-17-β-hydroxy-5(10)-estren-3-one; 17-α-Ethynyl-17-β-hydroxy- δ(sup. 5(10))-estren-3-one; (17-α)-17-Hydroxy-19-norpregn-5(10)-en-20-yn-3-one; 17- β-Hydroxy-17-α-ethinyl-5(10)-estren-3-one; 19-Nor-ethinyl-5,10-testosterone; 17 α- Hydroxy-19-norpregn-5(10)-en-20-yn-3-one; 17-Ethynyl-17-hydroxyestr-5(10)-en-3- one

Obchodní názvy (preparáty): Norethynodrel; component of Enovid; Enidrel; Infecundin; Norethinodrel; Norethinynodrel; Norethynodral; Lynestrol; NSC-15432; ; component of Conovid e; Enavid; Enovid;

5α-pregnan-3β-ol-20-on Jiné názvy: α-Pregnane-3β-ol-20-one; 3 β-Hydroxy-5α-pregnan-20-one; Pregnan-20- one, 3-hydroxy-, (3 β,5 α)-; Allopregnan-3β-ol-20-one; ; 3 β-Hydroxy- 5α-tetrahydroprogesterone; 5 α-Pregnan-20-one, 3 β-hydroxy-; 5 α-Pregnan-3β-ol-20-one; -3β-ol-20-one; 3-Hydroxypregnan-20-one

(3 α,5 β)- 3-hydroxy- Androstan-17-on Jiné názvy: 5 β-Androstan-17-one, 3 α-hydroxy-; Etiocholan-3α-ol-17-one; 3α- Etiocholanolone; 5 β-Androsterone; 5-Isoandrosterone; Androstan-3α-ol-17-one; 3 α- Hydroxy-5β-androstan-17-one; 5 β-Androstan-3α-ol-17-one; 3-Hydroxyandrostan-17-

69 one; 5B-Androstan-3A-ol-17-one; Ethiocholan-3.alpha.-ol-17-one; "Ethiocholan- 3.alpha.-ol-17-one"; "Androstan-17-one, 3-hydroxy-, (3.alpha.,5.beta.)-"

Obchodní názvy (preparáty): Etiocholanolone;

Chlormadinone acetát Jiné názvy: Pregna-4,6-diene-3,20-dione, 17-(acetyloxy)-6-chloro-; δ6-6-Chloro-17 α- acetoxyprogesterone; Pregna-4,6-diene-3,20-dione, 6-chloro-17-hydroxy-, acetate; Progesterone, 6-chloro-6-dehydro-17-hydroxy-, acetate; 17 α-Acetoxy-6-chloro-4,6- pregnadiene-3,20-dione; 17 α-Acetoxy-6-chloro-6-dehydroprogesterone; 17 α-Acetoxy- 6-chloropregna-4,6-diene-3,20-dione; 17-Acetoxy-6-chloro-6-dehydroprogesterone; 6- Chloro-δ4,6-pregnadiene-17 α-ol-3,20-dione 17-acetate; 6-Chloro-δ6-dehydro-17- acetoxyprogesterone; 6-Chloro-δ6-17-acetoxyprogesterone; 6-Chloro-δ-6-17 α- hydroxyprogesterone acetate; 6-Chloro-δ6-(17 α)acetoxyprogesterone; 6-Chloro-pregna- 4,6-dien-17 α-ol-3,20-dione acetate; 6-Chloro-17 α-acetoxy-4,6-pregnadiene-3,20-dione; 6-Chloro-17 α-hydroxy-δ6-progesterone acetate; 6-Chloro-17 α-hydroxypregna-4,6- diene-3,20-dione acetate; 6-Chloro-17-hydroxypregna-4,6-diene-3,20-dione acetate; 6- Chloro-6-dehydro-17 α-acetoxyprogesterone; 6-Chloro-6-dehydro-17 α- hydroxyprogesterone acetate; 17-α-Acetoxy-6-chloro-6,7-dehydroprogesterone; 17- (Acetyloxy)-6-chloropregna-4,6-diene-3,20-dione; Chlormadinonu; CMA; 6-Dehydro- 6-chloro-17-α-acetoxyprogesterone; Pregna-4,6-diene-3,20-dione, 17-(acetoxy)-6- chloro-; 6-Chloro-3,20-dioxopregna-4,6-dien-17-yl acetáte

Obchodní názvy (preparáty): component of C-Quens; Ay 13390-6; Bovisynchron; C- Quens; Cero; Chloramdinone acetate; Chlordion; Chlormadinon acetate; Chlormadinone; Chloromadinone acetate; Clordion; CAP; Fertiletten; Gestafortin; Lormin; Luteran; Lutinyl; Lutoral (Syntex); Matrol; Menstridyl; Minipill; Normenon; Retex; RS 1280; Skedule; Skedule TM; Synchrosyn P; ST 155; Traslan; Verton; NSC- 92338; component of Amenyl; Chronosyn; Cyclonorm; component of Gestamestrol; component of Lutestral; Lutoral; component of Menova; Natrol; Prostal; component of Sequens;

70 Megestrol acetáte Jiné názvy: Pregna-4,6-diene-3,20-dione, 17-(acetyloxy)-6-methyl-; Pregna-4,6-diene- 3,20-dione, 17-hydroxy-6-methyl-, acetate; Progesterone, 6-dehydro-17-hydroxy-6- methyl-, acetate; 17 α-Acetoxy-6-dehydro-6-methylprogesterone; 17 α-Acetoxy-6- methyl-4,6-pregnadiene-3,20- dione; 17 α-Acetoxy-6-methylpregna-4,6-diene-3,20- dione; 17-Acetoxy-6-methylpregna-4,6-diene-3,20-dione; 17-Hydroxy-6-methylpregna- 4,6-diene-3,20-dione acetate; 5071; 6-Dehydro-6-methyl-17 α-acetoxyprogesterone; 6- Methyl-17 α-hydroxy-δ6-progesterone acetate; 6-Methyl-6-dehydro-17 α- acetoxyprogesterone; 6-Methyl-6-dehydro-17 α-acetylprogesterone; 6-Methyl-17-α- acetoxypregna-4,6-diene-3,20-dione; 6-Methyl-δ6-dehydro-17-α-acetoxyprogesterone; 6-Methyl-δ4,6-pregnadien-17-α-ol-3,20-dione acetate; 6-Methyl-3,20-dioxopregna-4,6- dien-17-yl acetáte

Obchodní názvy (preparáty): BDH 1298; DMAP; Ethinyl estradiol; Magestin; Megace; Megeron; Megestryl acetate; Nia; Niagestin; Ovaban; Ovarid; SC 10363; S4; Volidan; NSC-71423; Megestrol; component of Co-ervonum; component of Delpregnin; component of Kombiquens; Maygace; Megestat; Megestil; component of Noval; component of Nuvacon; component of Planovin; component of Triu-ervonum; component of Volidan; component of Weradys;

17-hydroxy- (5 α,17 β)-Estran-3-on Jiné názvy: 5 α-Estran-3-one, 17 β-hydroxy-; 19-Nor-5α-dihydrotestosterone; 17- Hydroxyestran-3-one; 5A-Estran-3-on-17B-ol

3,20-Allopregnanedion Jiné názvy: Pregnane-3,20-dione, (5 α)-; 5 α-Pregnane-3,20-dione; 3,20-Dioxo-5α- pregnane; 5 α-Dihydroprogesterone; 5 α-Pregnan-3,20-dione; Allopregnan-3,20-dione; Pregnane-3,20-dione; 5A-Pregnan-3,10-dione

Oxymesterone Jiné názvy: Androst-4-en-3-one, 4,17-dihydroxy-17-methyl-, (17 β)-; Androst-4-en-3- one, 4,17 β-dihydroxy-17-methyl-; Testosterone, 4-hydroxy-17-methyl-; 4-Hydroxy-

71 17 α-methyltestosterone; 4-Hydroxy-17-methyltestosterone; 4,17 β-Dihydroxy-17- methylandrost-4-en-3-one; 4,17 β-Dihydroxy-17 α-methylandrost-4-en-3-one; 4,17- Dihydroxy-17-methylandrost-4-en-3-one

Obchodní názvy (preparáty): Aranabol; Oranabol; Anamidol; Oxymestrone; Theranabol

Calusterone Jiné názvy: Androst-4-en-3-one, 17-hydroxy-7,17-dimethyl-, (7 β,17 β)-; Androst-4-en- 3-one, 17 β-hydroxy-7β,17-dimethyl-; 7β, 17 α- Dimethyltestosterone; 7 β,17- Dimethyltestosterone; Androst-4-en-3-one, 7 β,17 α-dimethyl-17 β-hydroxy-; Dimethyltestosterone; 17 β-Hydroxy-7β,17 α- imethylandrost-4-ene-3-one; 17 β- Hydroxy-7β,17-dimethylandrost-4-en-3-one; NSC-88536; 17-Hydroxy-7,17- dimethylandrost-4-en-3-one

Obchodní názvy (preparáty): Calusteron; Methosarb; U-22,550; CLS; U 22550;

O-tetramethylen(tert-butyl)silylepiandrosterone Jiné názvy: 3-[(1-tert-Butyl-1-silolanyl)oxy]androstan-17-one; Epiandrosterone, TMTBSi (3-O)

(5 β)- Pregnan-3,20-dion Jiné názvy: 5 β-Dihydroprogesterone; 5 β-Pregnan-3,20-dione; Pregnane-3,20-dione; 5B-Pregnan-3,20-dione

Estriol 17-glucuronide Jiné názvy: (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[[(8R,9S,13S,14S,16R,17S)-3,16-dihydroxy-13- methyl-6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-decahydrocyclopenta[a]phenanthren-17-yl]oxy]- 3,4,5-trihydroxy-oxane-2-carboxylate; 16alpha,17beta-Estriol 17-(beta-D-glucuronide)

72