Méndez Zumba Joaozinho Enmanuel TUTORA: Migdalia Miranda, Phd
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UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS MODALIDAD: INVESTIGACIÓN TEMA: IDENTIFICACIÓN Y CARACTERIZACIÓN GENÉTICA, FARMACOLÓGICA Y QUÍMICA DE LAS HOJAS DE UNA ESPECIE DE LA FAMILIA SAPOTACEAE TRABAJO DE TITULACIÓN PRESENTADO COMO REQUISITO PREVIO PARA OPTAR AL GRADO DE QUÍMICO Y FARMACÉUTICO AUTOR: Méndez Zumba Joaozinho Enmanuel TUTORA: Migdalia Miranda, PhD. GU AY AQUIL – ECUADOR 201 7 - 20 18 I AGRADECIMIENTOS A Dios por ser mi guía y darme la oportunidad de cumplir mis metas. A mi hermana (Andrea), por brindarme su apoyo incondicional durante todos estos años. A mis padres (Tanya y Juan), por darme su confianza y la oportunidad de demostrar mis capacidades. A mi abuelita (Esperanza), por ser la mujer que me enseñó buenos valores éticos y morales y por ser quien me apoyó siempre sin esperar nada a cambio. A mi tutora (Migdalia Miranda PhD) por toda su paciencia, ayuda y colosales aportes en la realización de este trabajo. A mis tías (Maribel y Carmen) por brindarme su mano y compañía todo este tiempo. A mis amigas y compañeras de estudio (Mayra, Sara, Karen y Sandy) por hacer todo este tiempo de estudio más corto y divertido, así como también por su ayuda en el ámbito académico y por alentarme en todos los momentos de tensión. A mi gran amigo (Robert) por darme fuerzas, por todos sus consejos y su ayuda desinteresada. A mí cotutora y gran amiga (Dra. Katherine Bustamante) por su gran colaboración en este trabajo. A todos un millón de gracias… II ÍNDICE CAPÍTULO I: INTRODUCCIÓN ................................................................. 1 I.1 Problema científico: ........................................................................... 3 I.2 Hipótesis: ............................................................................................ 3 I.3 Objetivo general: ................................................................................ 4 I.4 Objetivos específicos: ........................................................................ 4 CAPITULO II: MARCO TEÓRICO ............................................................ 5 II.1 Familia Sapotaceae ........................................................................... 5 II.1.1 Género Manilkara ........................................................................... 5 II.1.1.1 Taxonomía del género Manilkara ............................................... 5 II.1.1.2 Descripción del Género Manilkara ............................................. 6 II.1.1.3 Distribución natural y hábitat ..................................................... 7 II.1.1.4 Usos.............................................................................................. 8 II.1.2 Género Mimusops .......................................................................... 8 II.1.2.1 Taxonomía de la especie Mimusops sp. .................................... 8 II.1.2.2 Descripción del Género Mimosups ............................................ 9 II.1.2.3 Distribución natural y hábitat ................................................... 10 II.1.2.4 Usos............................................................................................ 10 II.1.3 Sinonimia entre los géneros Manilkara y Mimusops ................. 11 II.1.4 Principales compuestos de los géneros Manilkara y Mimusops12 II.1.5 Principales actividades farmacológicas de los géneros Manilkara y Mimusops .......................................................................... 18 CAPÍTULO III: MARCO METODOLÓGICO ............................................ 20 III.1 Metodología de la investigación .................................................... 20 III.2 Estudio farmacognóstico de la especie ........................................ 20 III.2.1 Recolección y selección del material vegetal ............................ 20 III.2.2 Secado y almacenamiento .......................................................... 21 III.2.3 Caracterización botánica de la especie ..................................... 21 III.2.3.1 Evaluación macromorfológica de la hoja................................ 21 III.2.3.2 Evaluación micromorfológica de la hoja................................. 22 III III.2.3.3 Caracterización genética de la hoja ........................................ 23 III.2.4 Determinación de los parámetros fisicoquímicos..................... 26 III.2.4.1 Humedad residual ..................................................................... 26 III.2.4.2 Cenizas totales ......................................................................... 27 III.2.4.3 Cenizas insolubles en ácido clorhídrico ................................. 27 III.2.4.4 Sustancias solubles ................................................................. 28 III.2.5 Análisis cualitativo por tamizaje fitoquímico ............................. 29 III.3 Estudios químicos de las hojas..................................................... 29 III.3.1 Extracción y fraccionamiento preliminar. método 1 ................. 29 III.3.1.1 Análisis por cromatografía en capa delgada (CCD) de los extractos ................................................................................................ 30 III.3.2 Extracción y fraccionamiento. método 2 ................................... 31 III.3.2.1 Eliminación del látex por agotamiento .................................... 31 III.3.2.2 Método de extracción y concentración ................................... 31 III.3.2.3 Análisis por cromatografía en capa delgada de los extractos32 III.3.2.4 Fraccionamiento en columna cromatográfica ........................ 32 III.3.2.5 Análisis por cromatografía en capa delgada (CCD) de las fracciones .............................................................................................. 33 III.4 Toxicología aguda dérmica (TAD) y oral (TAO) del extracto acuoso de las hojas .............................................................................. 34 III.4.1 Toxicología Aguda Dérmica (TAD) ............................................. 34 III.4.1.1 Condiciones de tenencia de los animales .............................. 34 III.4.1.2 Desarrollo del ensayo............................................................... 35 III.4.1.3 Modo de aplicación .................................................................. 35 III.4.2 Toxicología aguda oral (TAO) ..................................................... 36 III.4.2.1 Condiciones de tenencia de los animales .............................. 36 III.4.2.2 Desarrollo del ensayo............................................................... 37 III.4.2.3 Modo de aplicación .................................................................. 37 CAPÍTULO IV: RESULTADOS Y DISCUSIÓN ....................................... 39 IV.1 Estudio farmacognóstico y fitoquímico ....................................... 39 IV.1.1 Caracterización botánica de la especie ..................................... 39 IV.1.1.1 Caracterización Taxonómica ................................................... 39 IV IV.1.1.2 Caracterización genética de la hoja ........................................ 39 IV.1.1.3 Evaluación macromorfológica de la hoja ............................... 45 IV.1.1.4 Evaluación micromorfológica de la hoja ................................ 48 IV.1.2 Determinación de los parámetros Fisico-Químicos ................. 52 IV.1.3 Análisis cualitativo de los metabolitos por tamizaje fitoquímico54 IV.2 Estudios químicos preliminares ................................................... 55 IV.2.1 Extracción y fraccionamiento del material vegetal ................... 55 IV.2.2 Análisis por cromatografía en capa delgada de los extractos . 55 IV.3 Estudios químicos ......................................................................... 56 IV.3.1 Eliminación de látex por agotamiento ....................................... 56 IV.3.2 Método de extracción y concentración ..................................... 57 IV.3.3 Análisis por cromatografía en capa delgada (CDD) de los extractos ................................................................................................ 57 IV.3.4 Fraccionamiento en columna cromatográfica .......................... 58 IV.4 Toxicología dérmica (TAD) y aguda oral (TAO) del extracto acuoso de las hojas .............................................................................. 66 IV.4.1 Toxicología Aguda Dérmica (TAD) ............................................. 66 IV.4.2 Toxicología aguda oral (TAO)..................................................... 67 CAPÍTULO V: CONCLUSIONES ............................................................ 70 CAPÍTULO VI: RECOMENDACIONES ................................................... 72 BIBLIOGRAFÍA ...................................................................................... 73 V INDICE DE TABLAS Tabla I Clasificación Taxonómica .......................................................... 6 Tabla II Clasificación Taxonómica ......................................................... 9 Tabla III Sinonimia Entre Especies Mimusops y Manilkara ................ 12 Tabla IV Principales compuestos encontrados en los géneros Manilkara y Mimusops .......................................................................... 13 Tabla V Principales actividades farmacológicas de los géneros Manilkara y Mimusops .......................................................................... 19 Tabla VI Primers .................................................................................... 24 Tabla VII. Disolventes y proporciones utilizadas en el fraccionamiento en columna cromatográfica