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Aguilardominguezm.Pdf (1.171Mb) UNIVERSIDAD VERACRUZANA DOCTORADO EN CIENCIAS AGROPECUARIAS “DISTRIBUCIÓN ESPACIAL E IDENTIFICACIÓN MORFOLÓGICA DEL COMPLEJO TAXONÓMICO Amblyomma cajennense (sensu lato) EN LAS 10 REGIONES DEL ESTADO DE VERACRUZ, MÉXICO” TESIS PRESENTADA COMO REQUISITO PARA OBTENER EL GRADO DE: DOCTORA EN CIENCIAS AGROPECUARIAS POR: MCA. MARIEL AGUILAR DOMÍNGUEZ DIRECTOR: DRA. DORA ROMERO SALAS DIRECTOR EXTERNO: DR. ADALBERTO PÉREZ DE LEÓN. H. VERACRUZ, VER. NOVIEMBRE, 2018 DEDICATORIAS A mis padres Por su comprensión, paciencia, apoyo y ayuda en los buenos y malos momentos. Ellos han sido pilares fundamentales para que yo llegara hasta aquí. A mi hermana Por siempre mostrar una cara positiva en todo momento, por tus consejos y sonrisa en cualquier comento a cualquier hora. ¡Te quiero! A mi esposo Por tu apoyo incondicional en todo momento, por tus consejos y por no dejar que me rindiera. Por nunca soltar mi mamo y caminar juntos este difícil pero satisfactorio camino. ¡Te amo! A todas las personas que creyeron en mi para finalizar este proyecto. i AGRADECIMIENTOS En estas líneas quiero expresar mi más sincero agradecimiento a todas las personas que con su soporte científico y humano han colaborado en la realización de esta investigación. Al Consejo Nacional de Ciencia y Tecnología (CONACYT) por la aportación de Beca a lo largo de este proyecto. A la Universidad Veracruzana por abrirme las puertas para realizar mis estudios de Doctorado. Agradezco a mi directora y tutora la Dra. Dora Romero Salas, quien me ha guiado por este difícil camino de la investigación por más de 10 años. Agradezco sus sabios consejos, regaños, paciencia y sobre todo por su ayuda en este increíble proyecto. Siempre estaré agradecida por sus enseñanazas, ayuda y sobre todo por su sincera amistad. ¡Gracias por ser como una segunda madre para mi! Al Departamento de Agricultura de los Estados Unidos (USDA-ARS), principalmente al Laboratorio de Investigación “Knipling-Bushland U.S. Livestock Insects Research Laboratory” por la significativa aportación a este proyecto. Agradezco al Dr. Adalberto Pérez de León, director de este laboratorio y asesor externo por compartir sus conocimientos, por sus acertadas aportaciones sí como críticas constructivas, ayuda y disponibilidad para contribuir para finalizar este proyecto en tiempo y forma. A los integrantes de mi Comité Tutorial por la paciencia, el esfuerzo, dedicación y el apoyo que me brindaron a lo largo de estos años, pero, sobre todo, por estar siempre pendientes de mis avances y guiarme para concluir este proyecto. A la Universidad de Texas A&A, en particular a la Dra. María Esteve Gassent por sus aportaciones desde el inicio de este proyecto y por sus sabios consejos. Al Instituto de Ecología A. C., a la Red de Estudios Moleculares Avanzados y al Laboratorio de Microscopía Avanzada por abrirme las puertas para realizar una estancia académica y brindarme todo el apoyo y facilidades para concluir con los ii objetivos planteados. Agradezco a la Bióloga Greta Hanako por todas sus enseñanzas y compartir generosamente todo su conocimiento, así como por la paciencia y labor de enseñanza. Al Centro de Medicina Tropical por la oportunidad de realizar parte de mi investigación. A la Dra. Ingeborg Becker por aceptarme para realizar una estancia académica. Agradezco muy sinceramente al Dr. Daniel Sokani Sánchez Montes por la paciencia y labor de enseñanza, así como por su impecable contribución a este proyecto. A la Universidad del Valle de Texas Valle del Río Grande por brindarme la oportunidad de realizar una estancia académica. Agradezco a la Dra. Anabel Cruz Romero y a la Dra. Nelly Ibarra Priego por su ayuda y apoyo a lo largo de este camino. Agradezco al Dr. Zeferino García Vázquez (Q.E.P.D) porque gracias a él comenzó mi interés por el maravilloso camino de la ciencia. ¡Un abrazo hasta el cielo! A mis compañeros del laboratorio de parasitología, estudiantes, servicio social y demás por el apoyo y colaboración en las salidas a campo y en el diagnóstico. A los productores que colaboraron en las salidas a campo para la colecta de garrapatas, por su disponibilidad y tiempo dedicado. iii RESUMEN Amblyomma mixtum anteriormente considerada como A. cajennense es una garrapata neotropical que se distribuye ampliamente desde el sur de Texas hasta la parte occidental de Ecuador. Esta garrapata parasita una gran variedad de animales, como el ganado, los caballos incluido el hombre, también es un vector competente de varios patógenos zoonóticos. El objetivo de este estudio fue describir mediante microscopía electrónica la(s) especie(s) encontrada(s) en el estado de Veracruz, México, así como determinar la distribución potencial y analizar la estructura genética de las poblaciones de A. mixtum. Se colectaron garrapatas de las diez regiones naturales de Veracruz, México, un estado endémico de esta garrapata. Fueron 40 machos y 40 hembras los que se sometieron a un análisis de microscopía electrónica, las mediciones obtenidas se analizaron para determinar la especie. Para cada variable analizada, se determinaron las estadísticas descriptivas básicas y, posteriormente, se realizó un análisis de los componentes principales para hembras y machos, dando como resultado de acuerdo con las mediciones que la especie encontrada a lo largo del estado es A. mixtum. El modelado de distribución potencial se realizó utilizando las 19 capas climáticas usando Maxent v. 3.4.1. El modelo indicó una amplia distribución para A. mixtum, con mayor probabilidad de ocurrencia a lo largo del Golfo de México y en una menor proporción de los estados del Pacíficos en México. También mostró un hábitat adecuado en varios países de América Central, como Honduras, Guatemala y Belice. Estos hallazgos se discuten en el contexto de los aspectos geográficos y ecológicos de A. mixtum desde México hasta Ecuador. Por otro lado, para probar la variabilidad intraespecífica de los fragmentos de A. mixtum se amplificó el gen mitocondrial 16s-rRNA y la subunidad 1 del Citocromo Oxidasa (COI). Noventa y seis secuencias se amplificaron a partir de las 50 muestras analizadas (96% de éxito de amplificación). Se detectaron once haplotipos en el gen 16S-rRNA y 10 más para COI. No se detectó diferenciación genética significativa en las poblaciones de A. mixtum muestreadas en el estado de Veracruz, México. iv ABSTRACT Amblyomma mixtum formerly considered as A. cajennense is a Neotropical tick that is widely distributed from South Texas to the western part of Ecuador. This generalistic tick parasitizes several hosts taxa, such as cattle, horses, and humans also, is a competent vector of several zoonotic pathogens. For this reason, the aim of this study was to describe by electron microscopy the species found in the state of Veracruz, Mexico, also to determine the potential distribution of A. mixtum to establish potential risk areas for tick-borne pathogen transmission and to analyze the genetic structure of A. mixtum populations. We collected ticks from the ten natural regions of Veracruz, México an endemic state of A. mixtum. 40 males and 40 females were subjected to an electron microscopy analysis, the measurements obtained were analyzed to determine the species. For each variable analyzed, the basic descriptive statistics were determined and subsequently, an analysis of main components for females and males was carried out. Species distribution modelling was done using the 19 climatic layers using Maxent v. 3.4.1. Our model indicated a wide distribution for A. mixtum, with higher probability of occurrence along the Gulf of Mexico, and in a less proportion of the pacific states of Oaxaca and Chiapas in Mexico. It also showed a suitable habitat in several countries of Central America such as Honduras, Guatemala and Belize in which there are scatered records of this tick. Our findings are discussed in the context of geographic and ecological aspects of A. mixtum from Mexico to Ecuador as a member of the A. cajennense species complex. On the other hand, to test the intra-specific variability of A. mixtum fragments of the mitochondrial gene 16s-rRNA and cytochrome oxidase subunit 1 (COI) were amplified. Ninety-six sequences were amplified from the 50 specimens analyzed (96% amplification success). Eleven haplotypes were detected in 16S- rRNA gene and 10 more for COI. Significant genetic differentiation was not detected in the A. mixtum populations sampled in the state of Veracruz, Mexico. v ÍNDICE GENERAL DEDICATORIAS...................................................................................................... i AGRADECIMIENTOS ............................................................................................ ii RESUMEN ............................................................................................................ iv ÍNDICE GENERAL ................................................................................................ vi ÍNDICE DE CUADROS ....................................................................................... viii ÍNDICE DE FIGURAS ........................................................................................... ix CAPÍTULO I ........................................................................................................ 10 1. INTRODUCCIÓN ......................................................................................... 10 2. REVISIÓN DE LITERATURA ....................................................................... 12 2.1 Las garrapatas .......................................................................................
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