Rafaela Duarte De Liz CITOMETRIA DE FLUXO, ANÁLISES
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Rafaela Duarte De Liz CITOMETRIA DE FLUXO, ANÁLISES ULTRAESTRUTURAIS E BIOQUÍMICA DE ESTRUTURAS SEMELHANTES A PROTOCORMOS (ESPs) DE Cattleya tigrina A. Richard. Tese submetida ao Programa de Pós- Graduação em Recursos Genéticos Vegetais da Universidade Federal de Santa Catarina para obtenção do grau de Doutora em Ciências; área de concentração: Recursos Genéticos Vegetais. Orientadora: Profª. Drª Rosete Pescador Co-Orientador: Profº. Dr. Paulo César Poeta Fermino Jr Florianópolis 2017 DEDICATÓRIA Dedico aos meus pais Zauri Duarte de Liz (in memoriam) e Maria Leni de Liz, com todo meu amor e gratidão, por tudo que fizeram por mim ao longo de minha vida. Ao meu filho Nicolas Heráclito Liz de Lima pelo apoio e amor incondicional. Amo vocês! AGRADECIMENTOS Agradeço a Deus pelo presente da vida, pelas pessoas que o Senhor tem colocado em meu caminho. Algumas delas me inspiram, me ajudam, me desafiam e me encorajam a ser cada dia melhor. Por todas as oportunidades que me fizeram chegar onde eu cheguei, e me fizeram ser quem eu sou. Foi nesta caminhada de tropeços, vitórias e derrotas, que pude enxergar o verdadeiro significado e beleza da Vida. Aos meus amados pais, Zauri Duarte de Liz (in memoriam) e Maria Leni de Liz, pelo amor incondicional. Gratidão eterna por tudo o que vocês sempre fizeram por mim. Por todo esforço para me dar o melhor, por me ensinar a viver com dignidade, por investirem na minha educação, pelas orações, carinho e dedicação que iluminam os meus caminhos. Amo muito vocês! Ao meu amado filho Nicolas Heráclito Liz de Lima, pelo amor incondicional, por compreender os momentos em que nos privamos de estarmos juntos. Suas palavras firmes e sinceras demonstram todo o seu carinho. Te amo filho! Aos meus queridos irmãos Zauri Duarte de Liz Jr, Nathan de Liz Pereira, Júlio Cesar de Liz, fontes de inspiração que eu carrego sempre comigo. E especialmente a minha querida irmã Raquel Duarte de Liz, minha companheira e protetora desde a infância e até os dias de hoje. Agradeço pelas suas orações, por todo amor, amizade e carinho que vocês sempre tiveram comigo. Aos meus amados sobrinhos Camila de Liz Pereira, Vinícius de Liz Pereira, Victória de Liz Arruda, Lucas Stalbaum de Liz e Julia Stalbaum de Liz que sempre me proporcionam muito orgulho e alegria. Ao querido Prof. Dr. Cassio Renato Montenegro de Lima pelo apoio e palavras de incentivo. Obrigada pela ajuda durante o desenvolvimento do trabalho. Por me ouvir nas horas de angústia e aconselhar nos momentos de decisão. Muito obrigada! A minha orientadora, Profa. Dra. Rosete Pescador, pela confiança em mim depositada e ao meu co-orientador Paulo César Poeta Fermino Jr, pela amizade, pelas oportunidades e as discussões sobre o trabalho de tese. Ao Prof. Dr. Jonny Everson Scherwinski Pereira, pela competência científica, pela dedicação ao desenvolvimento do ensino e pesquisa e pela oportunidade em realizar parte de meu trabalho na EMBRAPA - Cenargen em Brasília – DF e me orientar durante as análises de citometria de fluxo, disponibilizando de seu tempo para contribuir com sugestões construtivas para o meu trabalho. A Prof. Dra. Marisa Santos por toda ajuda desde o mestrado, me acolhendo com carinho nos momentos em que precisei durante o doutorado e sempre me encorajando para mais conquistas. Seu amor pela profissão e dedicação são fontes de inspiração e exemplos a serem seguidos. Ao Prof. Dr. José Marcello Salabert Campos, pela oportunidade em fazer o curso de Citometria de Fluxo, na UFJF-MG, e por não medir esforços em transmitir seu conhecimento sobre citometria de fluxo e contribuir com as discussões do trabalho. Aos professores que aceitaram fazer parte da banca, Prof. Dr. Aparecido Lima da Silva, Prof. Dr. Jonny Everson Scherwinski Pereira, Prof. Dr. Lírio Luiz Dal Vesco, Prof. Dr. Luiz Antônio de Souza, Profa. Dra. Marisa Santos, agradeço pela disponibilidade em avaliar e contribuir com o trabalho. Aos professores do curso de Citogenética Vegetal, no qual eu tive a oportunidade de conviver durante 15 dias, na EMBRAPA-Cenargen, através de muito aprendizado e amizades conquistadas, em especial a Prof. Dra. Ana Claúdia Guerra pelos ensinamentos e pela forma divertida e espontânea de conquistar as pessoas ao seu redor. Ao Prof. Dr. Jose Francisco Montenegro Valls, por todo conhecimento e ensinamentos sobre a citogenética de plantas, a Dra. Adriana Custodio, Dra. Marisa Toniolo Pozzobon e Dr. Artur Fonseca pela contribuição e atenção disponibilizada durante o curso e também aos colegas que tive a oportunidade de conhecer e conviver durante estes dias. Aos professores da disciplina Célula Vegetal, Prof. Dra. Zenilda Laurita Bouzon, Prof. Dra. Luciane Cristina Ouriques, Dr. Eder Carlos Schmidt e Dra. Carmen Simioni pelas sugestões e ensinamentos durante a disciplina, que contribuíram muito para a elaboração da tese. Meu agradecimento aos professores e colaboradores da disciplina Ecofisiologia Vegetal, Prof. Dr. Aparecido Lima da Silva, Prof. Dr. José Afonso Voltolini e Dr. Alberto Fontanella Brighenti pelos conhecimentos que foram transmitidos, desde a utilização dos aparelhos fotossintéticos até a degustação dos vinhos. Aos colegas com quem eu tive a oportunidade de participar da disciplina e conhece-los um pouco mais, uma experiência incrível e enriquecedora ao lado de vocês, queridos Anyela Rojas Molina, Marcia Regina Faita, Marcos Leandro dos Santos, Tamara Cristina Campos, Tiago Camponogara Tomazetti, Tomás Pellizzaro Pereira, Vivian Almeida, obrigada por compartilhar os momentos de aprendizado e diversão. Ao Prof. Dr. Marcelo Maraschin pela disponibilidade do uso dos aparelhos do Laboratório de Morfogênese e Bioquímica Vegetal e a querida Eva Regina de Oliveira Rodrigues, pelo carinho e atenção disponibilizada durante as análises bioquímicas. Aos professores do programa de Pós-Graduação em Recursos Genéticos Vegetais, em especial ao Prof. Dr. Rubens Onofre Nodari e Prof. Dr. Miguel Pedro Guerra, pelos ensinamentos passados durante os anos em que fiz parte do PPG RGV. E a secretária do programa, Bernadete Ribas, pela ajuda e disponibilidade em resolver dúvidas e questões burocráticas. Aos organizadores e palestrantes do Curso de Criopreservação em Recursos Genéticos Vegetais realizado na UFLA-MG, no qual obtive aprendizado e excelentes discussões, especialmente ao Prof. Dr. Diogo Pedrosa Corrêa da Silva pela atenção disponibilizada, ao Prof. Dr. Renato Paiva, Prof. Dr. Maurizio Lambardi, Prof. Dr. Bart Panis, Dr. Renato Fernandes Galdiano Júnior, pelas palestras proferidas e conhecimentos adquiridos, muito obrigada! E tambem aos colegas que conheci durante o curso, Jean Carlos Betoni, Juliana Aparecida Souza, Naiana Dinato e Kamila Antunes pela troca de experiencias, aprendizado e descontração durante os intervalos. À querida Gabriela Ferreira Nogueira, pela amizade e ajuda durante as análises de citometria de fluxo e durante as discussões do trabalho, muito obrigada Gabi! A querida Jennifer Nogueira, minha colega de apartamento, durante o tempo em que estive em Brasília, pela disponibilidade de me acolher e me situar em Brasília. E a todos os colegas do Laboratório de Cultura de Tecidos II da EMBRAPA - Cenargen, por me receber com tanto carinho durante os dias em que estive trabalhando e utilizando o laboratório. E especial ao técnico André Luís Xavier de Souza, pela atenção e ajuda disponibilizada. Às queridas Aline Cristina Velho, Marília Shibata e Pâmela Dall'Asta, meus primeiros contatos quando entrei no PPG em Recursos Genéticos Vegetais, e desde então permaneceu uma grande amizade. O quarteto "Meninas do RGV" que pouco tempo dispõem para os encontros, mas graças a tecnologia, conseguimos manter as conversas em dia. À querida Daniela De Conti, que ocupa um espaço no meu coração, te agradeço pelas discussões, parceria nas viagens a congressos e por compartilhar das informações e dificuldades do cultivo in vitro da Cattleya tigrina. E por sempre tem um tempo na sua agenda de professora, para me ouvir e me ajudar. Aos meus queridos estagiários voluntários, que tive a oportunidade conviver durante estes 4 anos de doutorado, Jessica Podeleski sempre determinada e confiante, Guilherme Sebold prestativo e dedicado, foram grandes parceiros na fase inicial de subcultivo das culturas das orquídeas. Agradeço por toda ajuda dedicada durante o tempo em que vocês estiveram comigo. Ao meu querido Rubens Cândido Zimmermann, pelas horas intermináveis na câmara de fluxo, que foi durante muito tempo, nossa câmara anti recalque, pelos feriados ensolarados no laboratório, almoçando pastel do Rosa e bebendo cajuína, mas que no final valeu a pena, pois "você supriu as minhas carências". Meus momentos de diversão, foram por conta de sua simplicidade e simpatia. Muito obrigada! À queridíssima Ana Paula Florindo, que aos poucos foi demonstrando interesse pelo trabalho. Obrigada pela companhia nas madrugadas no laboratório e por você ser a minha estagiária "ryca". Sempre disposta a aprender e ajudar no que foi preciso. Ao querido Stefano Gomes Kretzer pela ajuda disponibilizada nos experimentos de aclimatação de orquídeas, pelas conversas e discussões a respeito das orquídeas e ao Diogo Klock Ferreira, pelas conversas sobre Cattleya e pela cápsula de Cattleya tigrina, meu muito obrigada. Aos colegas do laboratório de Fisiologia do Metabolismo, Daniel Rosa, Jenny Paola Corredor Prado, Julia Zappelini, Lara Ribeiro de Carvalho, Luiza Giacomolli Polesi, Marcia Rossarola, Sebastian Montoya, Willian Goldoni Jr e aos IC's Bruno Bacheiga Navarro, Djalma Roecker Jr, pela amizade conquistada,