Informe Final Proyecto FODECYT Tillandsias
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“PROPAGACIÓN IN VIVO E IN VITRO DE CINCO ESPECIES DEL GÉNERO Tillandsia EN VÍAS DE EXTINCIÓN Y DE POTENCIAL USO SUSTENTABLE” Guatemala, julio del año 2011 CONSEJO NACIONAL DE CIENCIA Y TECNOLOGÍA (CONCYT) SECRETARÍA NACIONAL DE CIENCIA Y TECNOLOGÍA (SENACYT) FONDO NACIONAL DE CIENCIA Y TECNOLOGÍA (FONACYT FACULTAD DE AGRONOMÍA (FAUSAC) UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA (USAC) INFORME FINAL “PROPAGACIÓN IN VIVO E IN VITRO DE CINCO ESPECIES DEL GÉNERO Tillandsia EN VÍAS DE EXTINCIÓN Y DE POTENCIAL USO SUSTENTABLE” PROYECTO FODECYT No. 04-2006 CARLOS ALFONSO OROZCO CASTILLO, Ph.D. Investigador Principal GUATEMALA, JULIO DEL AÑO 2011 AGRADECIMIENTOS: La realización de este trabajo, ha sido posible gracias al apoyo financiero dentro del Fondo Nacional de Ciencia y Tecnología -FONACYT-, otorgado por La Secretaría Nacional de Ciencia y Tecnología -SENACYT- y el Consejo Nacional de Ciencia y Tecnología -CONCYT-. i INVESTIGADOR PRINCIPAL: Ph.D. Carlos Alfonso Orozco Castillo INVESTIGADOR ASOCIADO: Ing. Agr. MSc. Héctor Alfredo Sagastume Mena INVESTIGADOR ASOCIADO: Ing. Bot. Uwe Martin Herbert Feldhoff Böhm INVESTIGADORA ASOCIADA: Licda. MSc. Aura Elena Suchini Farfán INVESTIGADOR ASOCIADO: Ing. Agr. Mak Mílan Cruz Sic INVESTIGADOR ASOCIADO: Ing. Agr. José Rolando Mansilla Méndez INVESTIGADOR ASOCIADO: Ing. Agr. Erick Estuardo Calderón Oliva INVESTIGADOR ASOCIADO: Biólogo Noé Ariel Castillo ii ÍNDICE GENERAL Página LISTA DE ACRÓNIMOS Y ABREVIATURAS………………........................ v ÍNDICE DE CUADROS……………………………………...…………............ vi ÍNDICE DE IMÁGENES…...…….……………………………………………... ix ÍNDICE DE FOTOGRAFÍAS………………………………………………….... x ÍNDICE DE GRÁFICAS………………………………………………………… xi RESUMEN…………………………………………………............................... xii SUMMARY………………………………………………………………………. xiv PARTE I………………………………………………………………………….. 1 I.1. INTRODUCCIÓN…………………………………………………………… 2 I.2. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA……………………………………. 5 1.2.1 Antecedentes en Guatemala……………………………………………. 5 1.2.2 Justificación del trabajo de investigación…………………………….. 5 I.3. OBJETIVOS E HIPÓTESIS……………………………………………….. 6 I.3.1. Objetivos…………………………………………………................... 6 I.3.1.1. General………………………………………………………. 6 I.3.1.2. Específicos…………………………………………............. 6 I.3.2. Hipótesis………………………………………….............................. 6 I.4. METODOLOGÍA…………………………………….................................. 7 I.4.1. Localización del experimento…………………………………........ 7 I.4.2. Material vegetal……………………………………………..……….. 8 I.4.3. Tratamientos……………….……………………………….………… 9 I.4.4. Diseño experimental……...………………………...…………......... 12 I.4.5. Análisis de la información…………………………………….…….. 12 PARTE II…………………………………………………………………………. 13 II.1. MARCO TEÓRICO………………………………………………………… 14 II.1.1. Usos de las Tillandsias……………………………….................... 14 II.1.2. Clasificación taxonómica de las Tillandsias................................ 14 II.1.3. Comercialización e importancia económica de las Tillandsias... 15 II.1.4. Propagación in vivo de las Tillandsias........................................ 17 II.1.5. Propagación in vitro de las Tillandsias........................................ 17 II.1.6. Cultivo de tejidos vegetales……………………………………...... 18 II.1.6.1 Conceptos del cultivo de tejidos vegetales……………... 18 A. Soluciones stock………………………………………….. 18 B. Medio de cultivo…………………………………………... 19 C. Etapas de la propagación in vitro……………………….. 27 D. Explante…………………………………………………… 28 E. Asepsia…………………………………………………….. 29 F. Condiciones ambientales de incubación……………….. 30 iii PARTE III………………………………………………………………………… 31 III.1. RESULTADOS Y DISCUSIÓN............................................................ 32 III.1.1 Propagación in vivo……………………………………………………… 32 III.1.1.1 Tillandsia magnusiana………………………………………… 33 III.1.1.2 Tillandsia pruinosa……………………………………………... 37 III.1.13 Tillandsia streptophylla…………………………………………. 41 III.1.2 Propagación in vitro……………………………………………………… 45 III.1.2.1 Tillandsia pruinosa……………………………………………... 45 III.1.2.2 Tillandsia streptophylla………………………………………… 47 III.1.2.3 Tillandsia caput-medusae……………………………………... 50 III.1.2.4 Tillandsia magnusiana…………………………………………. 58 III.1.2.5 Tillandsia plagiotropica………………………………………… 62 PARTE IV………………………………………………………………………… 68 IV.1. CONCLUSIONES……………………………………………………….... 69 IV.2. RECOMENDACIONES……………………………………….……......... 71 IV.3. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS…………………………….…........ 72 IV.4. ANEXOS…………………………………………………………………… 74 PARTE V…………………………………………………………………………. 88 V.1. INFORME FINANCIERO…………………………………………………. 89 iv LISTA DE ACRÓNIMOS Y ABREVIATURAS ANDEVA Análisis de varianza BAP Bencilaminopurina Bioq. Bioquímica CITES Convenio Internacional sobre el Comercio de Especies Amenazadas de Flora y Fauna Silvestre cm Centímetros CONAP Consejo Nacional de Áreas Protegidas CONCYT Consejo Nacional de Ciencia y Tecnología et al Y colaboradores F Valor estadístico de Fisher FAO Organización para la Agricultura y la Alimentación FODECYT Fondo para el Desarrollo Científico y Tecnológico FONACYT Fondo Nacional de Ciencia y Tecnología gr. Gramos ICTA Instituto de Ciencia y Tecnología Agrícolas Ing.Agr. Ingeniero Agrónomo Licda. Licenciada m metros MS Medio de cultivo de Murashige y Skoog (1962) msnm Metros sobre el nivel del mar mg/L Miligramos por litro MSc. Magister Scientiae No. Número NS No significativo al 5% de nivel de significancia ONG Organización No Gubernamental PFNM Productos Forestales No Maderables Pr > Fc Probabilidad de encontrar un valor mayor que la F calculada SENACYT Secretaría Nacional de Ciencia y Tecnología T. Tillandsia v ÍNDICE DE CUADROS Página Cuadro 1. Dosis de BAP evaluadas in vivo, según tratamiento…..……. 10 Cuadro 2. Dosis de BAP evaluadas in vitro, según tratamiento………... 11 Cuadro 3. Clasificación taxonómica de las Tillandsias.………………….. 15 Cuadro 4. ANDEVA para la variable número de brotes de la especie Tillandsia magnusiana propagada in vivo……………………….…..……. 34 Cuadro 5. Prueba de Duncan para la variable número de brotes de la especie Tillandsia magnusiana propagada in vivo………………..……… 34 Cuadro 6. ANDEVA para la variable altura de brotes de la especie Tillandsia magnusiana propagada in vivo……………….………..………. 36 Cuadro 7. Prueba de Duncan para la variable altura de brotes de la especie Tillandsia magnusiana propagada in vivo………………..……… 36 Cuadro 8. ANDEVA para la variable número de brotes de la especie Tillandsia pruinosa propagada in vivo………………………….……..…... 38 Cuadro 9. Prueba de Duncan para la variable número de brotes de la especie Tillandsia pruinosa propagada in vivo……………..……..……... 38 Cuadro 10. ANDEVA para la variable altura de brotes de la especie Tillandsia pruinosa propagada in vivo…………………………………….. 40 Cuadro 11. Prueba de Duncan para la variable altura de brotes de la especie Tillandsia pruinosa propagada in vivo………………………...…. 40 Cuadro 12. ANDEVA para la variable número de brotes de la especie Tillandsia streptophylla propagada in vivo………………….…………….. 41 Cuadro 13. Prueba de Duncan para la variable número de brotes de la especie Tillandsia streptophylla propagada in vivo………………………. 41 Cuadro 14. ANDEVA para la variable altura de brotes de la especie Tillandsia streptophylla propagada in vivo……………………….……….. 43 Cuadro 15. Prueba de Duncan para la variable altura de brotes de la especie Tillandsia streptophylla propagada in vivo………………………. 44 Cuadro 16. Número de brotes, según tratamiento y repetición, de la especie Tillandsia pruinosa, propagada in vitro….………………………. 45 Cuadro 17. ANDEVA para la variable número de brotes en la especie Tillandsia pruinosa propagada in vitro…………………………………….. 46 vi Página Cuadro 18. Altura de brotes (cm) según tratamiento y repetición, de la especie Tillandsia pruinosa propagada in vitro……………..……………. 46 Cuadro 19. ANDEVA para la variable altura de brote de la especie Tillandsia pruinosa propagada in vitro……………………...……………... 47 Cuadro 20. Número de brotes, según tratamiento y repetición, de la especie Tillandsia streptophylla propagada in vitro………………..…….. 48 Cuadro 21. ANDEVA para la variable número de brotes de la especie Tillandsia streptophylla propagada in vitro…………………………..……. 49 Cuadro 22. Altura de brotes (cm) según tratamiento y repetición, de la especie Tillandsia streptophylla propagada in vitro……………...………. 49 Cuadro 23. ANDEVA para la variable altura de brotes de la especie Tillandsia streptophylla propagada in vitro………………..……………… 50 Cuadro 24. Número de brotes, según tratamiento y repetición, de la especie Tillandsia caput-medusae propagada in vitro………………..…. 51 Cuadro 25. ANDEVA para la variable número de brotes de la especie Tillandsia caput-medusae propagada in vitro………………..…………… 52 Cuadro 26. Prueba de Duncan para la variable número de brotes de la especie Tillandsia caput-medusae propagada in vitro…………………... 52 Cuadro 27. Altura de brotes, según tratamiento y repetición, de la especie Tillandsia caput-medusae propagada in vitro……………..……. 53 Cuadro 28. ANDEVA para la variable altura de brotes de la especie Tillandsia caput-medusae propagada in vitro………………………..…… 54 Cuadro 29. Número de brotes, según repetición y tratamiento, en la especie Tillandsia magnusiana propagada in vitro………………………. 58 Cuadro 30. ANDEVA para la variable número de brotes en la especie Tillandsia magnusiana propagada in vitro………………………………… 59 Cuadro 31. Prueba de Duncan para la variable número de brotes, en la especie Tillandsia magnusiana propagada in vitro……………………. 59 Cuadro 32. Altura de brotes (cm) según tratamiento y repetición, de la especie Tillandsia magnusiana a los seis meses de propagación in vitro ………………………………………………………………………….. 60 Cuadro 33. ANDEVA para