КАРАНТИН РАСТЕНИЙ ДЕКАБРЬ НАУКА И ПРАКТИКА 4| 14| 2015 РУССКО-АНГЛИЙСКИЙ ЖУРНАЛ

ОПАСНЫЕ КАРАНТИННЫЕ ВИДЫ РОДА AMBROSIA В ВОЛГОГРАДСКОЙ ОБЛАСТИ стр. 4 РЕЖИМЫ ОБЕЗЗАРАЖИВАНИЯ ЛЕСА И ЛЕСОМАТЕРИАЛОВ ОТ ВРЕДИТЕЛЕЙ ДРЕВЕСИНЫ стр. 45 ПРАКТИЧЕСКОЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ФЕРОМОНОВ КАК ГАРАНТИЯ БИОБЕЗОПАСНОСТИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ стр. 54

DANGEROUS QUARANTINE SPECIES OF THE GENUS AMBROSIA IN THE VOLGOGRAD REGION page 6 SCHEDULES OF TIMBER AND TIMBER PRODUCTS DISINFECTING AGAINST WOOD PESTS page 50 USE OF PHEROMONES IN PROTECTING THE BIOLOGICAL SAFETY OF THE RUSSIAN FEDERATION page 56

RUSSIAN-ENGLISH JOURNAL PLANT HEALTH DECEMBER ISSN 2306-9767 ISSN RESEARCH AND PRACTICE 4| 14| 2015 СОДЕРЖАНИЕ CONTENT

«КАРАНТИН РАСТЕНИЙ. НАУКА И ПРАКТИКА» ДВУЯЗЫЧНЫЙ НАУЧНЫЙ ЖУРНАЛ №4 (14) 2015 Г. I. НОВОСТИ I. NEWS

Опасные карантинные виды рода Ambrosia Dangerous Quarantine Species of the Genus Ambrosia в Волгоградской области in the Volgograd Region Главный редактор: Мартин Уорд — РЕДАКЦИЯ: А.Я. Сапожников, Генеральный директор ЕОКЗР 4 6 Волкова Е.М. — заведующая директор ФГБУ «ВНИИКР» лабораторией сорных растений Рингольдс Арнитис — II. НАУЧНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ II. RESEARCH STUDIES Шеф-редактор: Президент ЕОКЗР В ОБЛАСТИ КАРАНТИНА РАСТЕНИЙ IN PLANT QUARANTINE Волков О.Г. — начальник Светлана Зиновьева, отдела биометода начальник отдела по связям Ханну Кукконен — директор Изучение биологических особенностей самшитовой огневки Studies of the Biological Characteristics of Boxwood Moth с общественностью и СМИ подразделения фитосанитарного Кулинич О.А. — доктор в процессе становления ее лабораторной культуры in the Developing of its Laboratory Culture ФГБУ «ВНИИКР» надзора, EVIRA (Финляндия) биологических наук, А.Э. Нестеренкова, младший научный сотрудник отдела лесного A.E. Nesterenkova, Junior Researcher of FGBU VNIIKR’s начальник отдела лесного карантина ФГБУ «ВНИИКР» Department of Forest Quarantine Выпускающие редакторы: Сагитов А.О. — Генеральный карантина Ольга Лесных, директор ТОО «Казахский НИИ 8 11 Юлия Мелано, защиты и карантина растений» Приходько Ю.Н. — начальник Юлиана Бададгулова Вязовый пилильщик-зигзаг Aproceros leucopoda Takeuchi, 1939 Elm Sawfly-ziczag Aproceros Leucopoda Takeuchi, 1939 научно-методического отдела (Hymenoptera, Argidae) — экономически значимый вредитель вяза (Hymenoptera, Argidae) — Economically Significant Pest e-mail: [email protected] Сорока С.В. — директор РУП фитопатологии из Восточной Азии, расширяющий инвазийный ареал of Elm from East Asia, Expanding Invasive Area «Институт защиты растений» в европейской части России in the European Part of Russia Редакционная коллегия НАН Республики Беларусь Скрипка О.В. — заведующая А.Г. Блюммер, научный сотрудник отдела A.G. Blummer, Researcher of FGBU VNIIKR’s журнала «Карантин растений. лесного карантина ФГБУ «ВНИИКР» Department of Forest Quarantine лабораторией микологии Наука и практика»: Джалилов Ф.С. — доктор биологических наук, Потапов С.А. — начальник 13 17 Швабаускене Ю.А. — заместитель профессор, заведующий отдела фитосанитарных рисков Разнообразие и экология зерновок рода Callosobruchus Pic, 1902 Diversity and Ecology of Bean Weevils of Руководителя Россельхознадзора лабораторией защиты растений и международного взаимодействия И.О. Камаев, начальник научно-экспериментального the Genus Callosobruchus Pic, 1902 МСХА им. К.А. Тимирязева (переводчик) отдела ФГБУ «ВНИИКР» I.O. Kamaev, Head of FGBU VNIIKR’s Research and Testing Department Долженко В.И. — академик Н.И. Ершова, старший научный сотрудник N.I. Ershova, Senior Researcher, FGBU VNIIKR’s РАН, заместитель директора Абасов М.М. — доктор лаборатории энтомологии ИЭЦ ФГБУ «ВНИИКР» Laboratory of Entomology, Testing Expertise Centre Вознесенский И.М. — заместитель Всероссийского НИИ биологических наук, Е.А. Соколов, ведущий научный сотрудник E.A. Sokolov, Leading Researcher, FGBU VNIIKR’s начальника отдела фитосанитарных защиты растений заместитель директора научно-методического отдела энтомологии ФГБУ «ВНИИКР» Scientific-Methodological Department of Entomology рисков и международного ФГБУ «ВНИИКР» взаимодействия (переводчик) Надыкта В.Д. — академик РАН, 20 25 директор Всероссийского НИИ Яковлева В.А. — кандидат Шахманова З.Э. — переводчик Диагностика вироида веретеновидности клубней картофеля Detection and Identification of Potato Spindle Tuber Viroid биологической защиты растений биологических наук, заместитель отдела фитосанитарных рисков С.Б. Абросимова, м.н.с. научно-методического Svetlana B. Abrosimova, Junior Researcher at FGBU VNIIKR’s директора ФГБУ «ВНИИКР» отдела фитопатологии ФГБУ «ВНИИКР» Plant Pathology Research and Methodology Department и международного взаимодействия Павлюшин В.А. — академик РАН, Ю.Н. Приходько, начальник научно-методического Yury N. Prikhodko, Chief of FGBU VNIIKR’s директор Всероссийского НИИ Шероколава Н.А. — заместитель отдела фитопатологии ФГБУ «ВНИИКР» Plant Pathology Research and Methodology Department Дизайн и верстка: защиты растений директора ФГБУ «ВНИИКР», Мария Поваляева вице-президент ЕОКЗР 30 38 Санин С.С. — академик РАН, Корректор: Режимы обеззараживания леса и лесоматериалов Schedules of Timber and Timber Products доктор биологических наук, Татьяна Артемьева от вредителей древесины Disinfecting against Wood Pests профессор, заведующий Р.К. Магомедов, ведущий научный сотрудник R.K. Magomedov, Leading Researcher FGBU VNIIKR’s Менеджер по подписке отделом Всероссийского НИИ группы обеззараживания ФГБУ «ВНИИКР» Disinfection Department и дистрибуции: фитопатологии Игорь Алпатов +7 (925) 357 20 61 45 50 Практическое использование феромонов Use of Pheromones in Protecting the Biological Safety как гарантия биобезопасности Российской Федерации of the Russian Federation А.А. Кузин, заместитель начальника Aleksey А. Kuzin, Deputy Head of FGBU VNIIKR’s Журнал «Карантин растений. Наука и практика» зарегистрирован в Федеральной службе по надзору отдела синтеза и применения феромонов ФГБУ «ВНИИКР» Department for Pheromone Synthesis and Use в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор), Н.М. Атанов, ведущий научный сотрудник Nikolay М. Atanov, Leading Researcher of FGBU VNIIKR’s свидетельство о регистрации ПИ № ФС77-52594 от 25 января 2013 г. лаборатории испытания и применения феромонов ФГБУ «ВНИИКР» Department for Pheromone Synthesis and Use В.П. Князева, начальник Valentina P. Knyazeva, Head of FGBU VNIIKR’s Учредитель: ООО «Успех», выпускается по заказу Федерального государственного организационно-аналитического отдела ФГБУ «ВНИИКР» Organization and Analytics Department бюджетного учреждения «Всероссийский центр карантина растений» (ФГБУ «ВНИИКР») Издатель: ООО «Успех» (105122, г. Москва, Щелковское шоссе, д. 13, оф. 402) Адрес редакции: 105122, г. Москва, Щелковское шоссе, д. 13, оф. 402 54 56 Типография: ООО «Юнион Принт», 603022, Нижегородская область, г. Нижний Новгород, Окский Съезд, д. 2, тел.: 8 (831) 439-44-99 Дата выхода 23.12.2015 г. Тираж 2000 экземпляров. КАРАНТИН РАСТЕНИЙ 4| 14| 2015 3 дельная размножается только семе- нами. ОПАСНЫЕ КАРАНТИННЫЕ Как уже говорилось, все виды ам- брозии сильно ухудшают условия жизни населения. Во время цветения ВИДЫ РОДА AMBROSIA амброзий их пыльца разносится ве- тром и вызывает у людей аллергиче- ские реакции. В ВОЛГОГРАДСКОЙ ОБЛАСТИ Но так как виды амброзии еще в достаточной степени не акклима- С.Е. Агеева и М.В. Грузинова, агрономы Волгоградского филиала ФГБУ «ВНИИКР» Fig. 3. Ambrosia psilostachia тизировались в регионе и не распро- (Uryupinsky district, July 2015) странились широко, то возможна эффективная борьба с ними. Со- Рис. 3. Амброзия многолетняя гласно законодательству Российской чается исключительно на пастбищах. ритории Волгограда, Волжского, по (Урюпинский р-н, июль 2015 года) прямой, ветвистый, достигающий Федерации бороться с карантинны- Посевы сельскохозяйственных куль- всему правобережью Дона и Хопра, в высоту 1 м и более. Размножает- ми сорными растениями обязаны тур не засоряет. Из-за вызываемой а также в Михайловском, Кумыл- домное растение. Мужские цветки ся в основном корневой порослью, землепользователи и владельцы тех аллергической реакции на пыль- женском, Новоаннинском и Ново- желтого цвета, собраны в корзинки корневищами и отрезками корней. мест, в которых они обнаружены. цу — поллиноза (чаще всего — аллер- николаевском районах. Амброзия по 5–25 цветков. Последние собра- Корневая поросль располагается Управление Россельхознадзора по гические риниты) — представляет трехраздельная встречается на тер- ны в колосовидное соцветие, ко- мелко: на необрабатываемых зем- Ростовской и Волгоградской обла- опасность для населения. Распро- ритории Урюпинского, Нехаевского, торое располагается на верхушках лях — у самой поверхности, на об- стям и Республике Калмыкия прово- страняется с автомобильным транс- Алексеевского, Новониколаевского веток. Женские корзинки распола- рабатываемых — на глубине пахот- дит обследования земель и дает пред- портом и с сельскохозяйственными и Новоаннинского районов. Амбро- гаются в пазухах листьев или у ос- ного горизонта. Цветение амброзии писания по борьбе с карантинными животными (в пищеварительном зия многолетняя — на территории нования мужских соцветий, по 2-3 многолетней в условиях Волгоград- объектами в случае их выявления. тракте), возможно, с сеном. На паст- Урюпинского, Нехаевского и Алек- вместе. Амброзия полыннолистная ской области отмечается с первой Каждый может внести посильный бищах может доминировать благода- сеевского районов. размножается только семенами, ко- декады июля. Семена созревают во вклад, уничтожив эти сорные расте- ря малой съедобности. Предпочита- Виды амброзии довольно лег- торые образуются в большом коли- второй половине августа. Амброзия ния на своем участке, в палисаднике ет песчаные почвы. В Волгоградской ко отличимы по своему внешнему честве. многолетняя имеет более сжатый или во дворе. области амброзия многолетняя впер- виду. Амброзия полыннолистная В борьбе с амброзиями основным вые была обнаружена в 1957 году имеет рассеченный лист, похожий Все виды амброзии сильно ухудшают методом является эффективный Fig. 1. Ambrosia psilostachia в хозяйствах Нехаевского района. на листья полыни обыкновенной, но условия жизни населения. Во время цветения прием залужения необрабатывае- (Nekhaevsky district, July 2014) В 1952 году в Волгоградской обла- более зеленой окраски, и характер- амброзий их пыльца разносится ветром мых участков земли, полос отчуж- сти были обнаружены два вида рода ную метелку из мужских соцветий дения, обочин дорог и пустырей, Рис. 1. Амброзия многолетняя Амброзия: амброзия полыннолист- на вершине растения. Однолетнее и вызывает у людей аллергические реакции. своевременное уничтожение сор- (Нехаевский р-н, июль 2014 года) ная в Алексеевском районе и амбро- растение. Стебель прямоугольный, няка до наступления фазы цвете- зия трехраздельная в Новоаннин- прямостоячий, ветвящийся. В по- Амброзия многолетняя очень по- цикл развития, чем амброзия по- ния. Наиболее подходящее время — В Российском законодательстве ском районе. Данные карантинные левых условиях растения амброзии хожа на амброзию полыннолистную лыннолистная. Она раньше зацвета- июнь — начало июля. Ликвидация карантинный объект определяет- объекты на территории Волгоград- полыннолистной вырастают в сред- и полынь горькую, но несколько ет и образует семена, и, кроме того, очагов карантинных сорняков про- ся как вид вредителя, возбудителя ской области охотно поселяются нем до 1 м высотой. Корень стерж- мельче и имеет корневище. Много- основной способ ее размножения — изводится методом ручной про- болезни растений или сорного рас- в городах и поселках. Амброзия по- невой, веретеновидный, с мощным летнее корнеотпрысковое растение. вегетативный. Следовательно, она полки со сбором всей выполотой тения, который отсутствует или лыннолистная произрастает на тер- разветвлением, проникает в глу- Стебель у амброзии многолетней располагает возможностями для за- растительности и ее последующим ограниченно распространен на бину до 4 м. Амброзия полынно- нятия большего ареала, чем амбро- уничтожением методом захороне- территории России, но может быть Рис. 2. Амброзия многолетняя листная — преимущественно одно- Рис. 4. Амброзия многолетняя зия полыннолистная. ния на глубину не менее 50 см или занесен или может проникнуть са- (Урюпинский р-н, июль 2015 года) (Урюпинский р-н, июль 2015 года) Амброзия трехраздельная — са- сжигания (при соблюдении всех мостоятельно извне и вызвать зна- мая крупная из них: до 2 метров правил пожарной безопасности). чительные повреждения растений Fig. 2. Ambrosia psilostachia Fig. 4. Ambrosia psilostachia высотой, и ее лист глубоко надрезан Скашивание растений триммером и растительной продукции. (Uryupinsky district, July 2015) (Uryupinsky district, July 2015) на части. Однолетнее растение. По или косой недопустимо, так как Среди карантинных существуют внешнему виду, особенно в началь- при этом само растение не унич- и особенно опасные виды, нанося- ные фазы роста, напоминает сорное тожается, а только укорачивается, щие урон не только сельскому хозяй- растение, не являющееся каран- и продолжает расти, цвести и давать ству, но и непосредственно самому тинным, — Cyclachaena xanthiifolia семена. человеку. (циклахену дурнишниколистную), Крупные очаги целесообразно об- В Волгоградской области рас- которую население часто неверно рабатывать гербицидами, допущен- пространены три вида таких каран- называет амброзией. Но у циклахе- ными для использования на терри- тинных объектов. Это карантин- ны лист цельный, не разделенный тории поселений и частных участков. ные сорные растения — Ambrosia на части, а у настоящей амброзии В настоящее время это препараты на artemisifolia (амброзия полынно- трехраздельной четко глубоко рас- основе глифосата. листная), Ambrosia trifida (амброзия сечен на три-пять частей. Стебель у Внимательность и активность трехраздельная), Ambrosia psilostachia амброзии трехраздельной прямой, граждан позволит успешно ликви- (амброзия многолетняя). бороздчатый, ветвистый, к концу дировать эти опасные сорные каран- Амброзия многолетняя на терри- вегетации деревенеющий. Корень тинные растения в Волгоградской тории Волгоградской области встре- мочковатый. Амброзия трехраз- области.

4 4| 14| 2015 КАРАНТИН РАСТЕНИЙ КАРАНТИН РАСТЕНИЙ 4| 14| 2015 5 often incorrectly call ambrosia. But Cy- clachaena xanthiifolia has an entire leaf, DANGEROUS not divided into parts, and the true Am- brosia trifida has a clearly deeply dissect- ed into three to five parts leaf. The stem QUARANTINE SPECIES OF of Ambrosia trifida is straight, grooved, branched, that legnifies by the end of the growing season. The root is fibrous. Am- THE GENUS AMBROSIA brosia trifida reproduces only by seed. As mentioned before, all Ambrosia IN THE VOLGOGRAD REGION species considerably worsen the living conditions of the population. During ragweed flowering wind-born pollen S.E. Ageeva and M.V. Gruzinova, agronomists of FGBU VNIIKR’s Volgograd Branch cause allergic reactions in humans. Since Ambrosia species have not still sufficiently established in the region and have not spread widely, it can effectively According to the Russian legislation Рис. 6. Амброзия полыннолистная Рис. 7. Амброзия полыннолистная be controlled. According to the legisla- a quarantine object is defined as a spe- (Нехаевский р-н, июнь 2014 года) (Нехаевский р-н, июнь 2014 года) tion of the Russian Federation all land cies of pest, pathogen or weed plants users and owners of those places where that are absent from or have a restricted Fig. 6. Ambrosia artemisifolia Fig. 7. Ambrosia artemisifolia quarantine weeds are found are obliged localization in the territory of Russia, (Nekhaevsky district, June 2014) (Nekhaevsky district, June 2014) to control them. but can be entered or may enter on its own from the outside and cause signif- forming plant. Ambrosia psilostachia All Ambrosia species considerably worsen the living icant damage to plants and plant prod- has a straight, branched stem reaching conditions of the population. During ragweed flowering ucts. a height of 1 or more meters. It propa- There are especially dangerous spe- gates mainly by root shoots, rhizomes wind-born pollen cause allergic reactions in humans. cies among the quarantine pests, caus- and root sections. Thecoppice shoot ing damage not only to agriculture, but is located not deep: on uncultivated the main way of its reproduction is veg- The Directorate of Rosselkhoznad- also directly to people. lands – at the surface, and on the cul- etative. Therefore, it is able to occupy a zor of the Rostov and Volgograd re- In the Volgograd region two types of tivated lands at a depth of arable layer. larger area than Ambrosia artemisifolia. gions and the Republic of Kalmykia such quarantine pests are spread. These Flowering of Ambrosia psilostachia in Ambrosia trifida is the largest of them: conducts surveys of lands and gives are quarantine weeds – Ambrosia arte- the Volgograd region is recorded from up to 2 meters high and with leaves orders to control quarantine pests misifolia (ragweed), Ambrosia trifida the first decade of July. Seeds ripen in deeply incised into pieces. It is an annu- when detected. Everyone can make (trifid ambrosia), Ambrosia psilostachia late August. Ambrosia psilostachia has al plant. Its appearance, especially in the a contribution to destroying these (perennial ragweed). a more compressed development cycle initial phase of growth, resembles a weed weeds on his homestead plots, garden In the Volgograd region Ambrosia than Ambrosia artemisifolia. It blooms that is not a quarantine one, Cyclachae- or yard. psilostachia is found exclusively on pas- earlier and forms seeds, and, moreover, na xanthiifolia (sumpfweed) that people The most effective method of con- tures. It does not contaminate agricul- troling ragweeds is the grassing of un- tural crops. Due to allergic reactions Fig. 8. Ambrosia trifida Fig. 9. Ambrosia trifida cultivated land, using bands of aliena- caused by pollen – pollinosis (usually Рис. 5. Амброзия полыннолистная (Rudnyansky district, June 2014) (Rudnyansky district, June 2014) tion, roadsides and wastelands, and the – allergic rhinitis) – it presents a danger (Нехаевский р-н, июнь 2014 года) timely eliminating of the weed prior to to the population. It is spread by auto- Рис. 8. Амброзия трехраздельная Рис. 9. Амброзия трехраздельная the flowering phase. The most favour- mobile transport and farm animals (in Fig. 5. Ambrosia artemisifolia (Руднянский р-н, июнь 2014 года) (Руднянский р-н, июнь 2014 года) able period for it is June and early July. the digestive tract), probably, with hay. (Nekhaevsky district, June 2014) the field Ambrosia artemisifolia grows to Quarantine weed hotspots are eliminat- It can dominate on pastures because of an average height of 1 m. Taproot is fusi- ed by hand-weeding with all the wastes low edibility. It prefers sandy soils. In Novoanninsky and Novonikolayevsky form, with strong branching, penetrates being collected and destructed by bur- the Volgograd region Ambrosia psilos- districts. The Ambrosia trifida is found to a depth of 4 m. Ambrosia artemisifolia ial at a depth of 50 cm or incineration tachia was first detected in 1957 in the on the territory of the Uryupinsk is mostly monoecious plant. Male flow- (in compliance with all fire safety reg- farms of Nekhayevsky region. Nekhaevsky, Alekseevsky, Novon- ers are yellow, collected in anthodia of ulations). Mowing plants by trimmer In 1952, in the Volgograd region ikolayevsk and Novoanninsky regions. 5-25 flowers. The flowers are collected is prohibitive, as the plant itself is not there were found two species of the ge- Ambrosia psilostachia is found on the in spike inflorescence located at the tips destroyed, but only gets shorter, and nus Ambrosia: Ambrosia artemisifolia territory of Uryupinsk, Nekhaevsky and of branches. Pistillate anthodia are lo- continues to grow, flower and produce in Alexeyevskiy district and Ambro- Alekseevsky districts. cated in the leaf axils or at the base of seeds. Large hotspots are advisable to sia trifida in Novoanninsky district. Ambrosia species can be easily dis- male inflorescences by 2 or 3 anthodia. treat with herbicides approved for use These quarantine pests settle settle tinguished by appearance. Ambrosia ar- Ambrosia artemisifolia reproduces only on the territory of settlements and pri- down in towns and cities of the Volg- temisifolia has a dissected leaf, similar by seeds, which are produced in large vate lands. Currently they are glypho- ograd region. Ambrosia artemisifolia to leaves of Artemisia vulgaris, but of a quantities. sate-based drugs. grows on the territory of Volgograd, deep green colour, and a characteristic Ambrosia psilostachia is very similar Awareness and activity of citizens Volga and throughout the right bank panicle of male inflorescences at the top to Ambrosia artemisifolia and Ambrosia can help successfully eliminate these of the Don and Khopyor rivers, as well of the plant. It is an annual plant. The absinthium but slightly smaller and has dangerous quarantine weed plants in as in Mikhailovskoe, Kumylzhensky, stem is square, upright, branching. In a rhizome. It is a perennial offset root the Volgograd region.

6 4| 14| 2015 КАРАНТИН РАСТЕНИЙ КАРАНТИН РАСТЕНИЙ 4| 14| 2015 7 ИЗУЧЕНИЕ БИОЛОГИЧЕСКИХ ОСОБЕННОСТЕЙ САМШИТОВОЙ ОГНЕВКИ в процессе становления ее лабораторной культуры

А.Э. Нестеренкова, младший научный сотрудник отдела лесного карантина ФГБУ «ВНИИКР»

Fig. 3. Climatic chamber for breeding of boxwood moth Fig. 4. A holding cage for imago

Рис. 3. Климатическая камера Рис. 4. Садок для имаго для разведения самшитовой огневки Самшитовая огневка Cydalima (Гниненко и др., 2014). За счет есте- тового вида — самшита колхидского (9.00–17.00 — тень, 17.00–9.00 — свет) замене поилок каждые 2–3 дня мак- perspectalis Walker — агрессивный ственного разлета имаго вредитель (Buxus colchica Pojark.). Защита его пасных мер по борьбе с самшитовой при постоянной температуре 18 оС симальная продолжительность жиз- первичный вредитель леса (рис. 1). активно широко расселяется по югу от огневки является очень острой огневкой. Однако биологические и постоянной относительной влаж- ни вылетающих бабочек составила Гусеницы огневки повреждают раз- России, повсеместно оголяя самшит, проблемой, поскольку большая методы достаточно эффективны ности 80% (рис. 3). 26 дней. личные виды самшита (Buxus sp.), как в искусственных озеленительных часть популяций самшита колхид- лишь при своевременном обнаруже- Кормом для гусениц служили сре- Для откладки яиц в садок ставили причем уничтожают не только ли- посадках, так и в природных лесных ского произрастает на охраняемых нии локальных, недавно обосновав- занные листья и молодые веточки срезанные веточки самшита, поме- стья растения, но начиная с треть- массивах (рис. 2). В настоящее вре- территориях, на которых запрещено шихся, пока еще немногочисленных самшита (разведение на искусствен- щенные в пузырьки с водой (рис. 4). его-четвертого возраста объедают мя огневка отмечена практически по применение каких-либо химических популяций вредителя. Одним из ном корме (ИПС) может оказывать Каждая самка делала более десятка и кору. всему Черноморскому побережью мер борьбы с вредителями. Анало- средств раннего выявления вреди- влияние на соотношение компонен- кладок (преимущественно с нижней Кавказа, а также в Абхазии, Грузии гичная проблема возникает и при стороны листа) по 10-28 яиц (рис. 5). На территории юга и Турции (Карпун и др., 2015), вес- повреждении самшита вечнозеле- Защита его от огневки является очень острой Средняя плодовитость самки при европейской России вид был ной 2015 года официально выявлена ного Buxus sempervirens L., широко проблемой, поскольку большая часть популяций этом составляла 189 яиц, максималь- в Крыму. применяемого в городских озелени- самшита колхидского произрастает на охраняемых ная — до 250. впервые выявлен в районе Особую опасность огневка пред- тельных посадках и рекреационных Гусениц младших возрастов (рис. Большого Сочи осенью ставляет для распространенного зонах. территориях, на которых запрещено применение 6) содержали в стеклянных лабора- 2012 года. в горах Кавказа эндемичного релик- В сложившейся ситуации как ни- каких-либо химических мер борьбы с вредителями. торных цилиндрах (V = 2 л), прикры- когда важно незамедлительно разра- тых сверху легкими пластиковыми На территории юга европейской Рис. 2. Бордюрная посадка самшита, ботать комплекс экологически безо- телей леса являются феромонные тов и даже на состав феромона и по- России вид был впервые выявлен уничтоженная гусеницами огневки ловушки. тому нежелательно при изучении Рис. 6. Гусеницы первого возраста в районе Большого Сочи осенью 2012 С целью разработки эффектив- феромонов насекомых). года. Вероятнее всего, вредитель был Fig. 2. The border planting of boxwood, ного феромонного препарата для Вылетевших бабочек выпускали Fig. 6. Armyworm of first age занесен из питомников Средиземно- destroyed by moth armyworm самшитовой огневки во Всероссий- на спаривание в сетчатый садок (30 × морья с саженцами самшита и, судя ском центре карантина растений 30 × 30 см) и подкармливали 5%-м по тому, что уже в течение следующе- (ФГБУ «ВНИИКР») проводится раствором меда или сахара (Nacambo го, 2013 года, огневка была выявлена работа по созданию устойчивой ла- et al., 2013) на ватных тампонах, по- в Новороссийске, Краснодаре и Гроз- бораторной популяции этого особо мещенных в половинки чашки Петри ном, занос был множественным опасного вредителя. В случае успеха диаметром 40 мм. При регулярной данная культура позволит проводить Рис. 1. Бабочка самшитовой огневки работы по изучению самшитовой Рис. 5. Кладка яиц самшитовой огневки огневки практически круглогодично. Fig. 1. Butterfly of the boxwood moth Исходный биоматериал был полу- Fig. 5. Oviposition of boxwood moth чен из Крыма в конце апреля 2015 г. В соответствии с условиями со- держания гусеницы были разделены на две линии: - гусеницы линии А развивались в помещении лаборатории при есте- ственном освещении и комнатной температуре (25 ± 2 градуса); - гусеницы линии В были по- мещены в климатическую камеру с инвертированным фотопериодом

8 4| 14| 2015 КАРАНТИН РАСТЕНИЙ КАРАНТИН РАСТЕНИЙ 4| 14| 2015 9 по оптимизации состава синтетиче- ского феромона самшитовой огневки (рис. 10–11). STUDIES OF THE BIOLOGICAL Благодарность Выражаем большую благодар- CHARACTERISTICS OF ность сотрудникам Главного Бо- танического сада РАН Л.Г. Се- рой и В.А. Крючковой, аспиранту BOXWOOD MOTH РГАУ МСХА им. К.А. Тимирязева В.В. Чернолиху, а также сотрудни- in the developing of its laboratory culture кам ФГБУ «ВНИИКР» С.А. Федосо- ву и И.К. Шахраманову за помощь в обеспечении подопытных насеко- A.E. Nesterenkova, Junior Researcher of FGBU VNIIKR’s Department of Forest Quarantine мых свежим кормом. Fig. 7. Armyworm of older age Литература 1. Гниненко Ю.И., Ширяева Н.В., крышками. Веточки самшита в этом Рис. 7. Гусеницы старшего возраста Щуров В.И. Самшитовая огнев- Boxwood moth Cydalima perspecta- On the territory of the south of ilar problem arises when evergreen box- случае также ставили в пузырьки ка — новый инвазивный организм lis Walker — is an aggressive primary the European Russia the species wood Buxus sempervirens L. is affected. с водой. Максимальная длина взрослой в лесах российского Кавказа // Ка- forest pest (Fig. 1). Armyworm of the was first detected in the Bolshoi It is widely used in urban landscaping, Гусениц старших возрастов при гусеницы составляла 35 мм (рис. 7). рантин растений. Наука и практика, moth damages various species of box- plantings and recreational areas. достижении ими длины 20-25 мм во Средняя прожорливость гусениц со- 2014, № 1. С. 32–39. wood (Buxus sp.), and destroys not only Sochi region in autumn of 2012. In this situation, it’s more important избежание свойственного данному ставляла приблизительно 70 листьев 2. Карпун Н.Н., Игнатова Е.А., the leaves of the plant, but since the than ever to develop immediately a виду каннибализма рассаживали по самшита (при средней массе листа Журавлева Е.Н. Новые виды вред- third-fourth age it eats around the bark. artificial greenery planting, and in nat- complex of environmentally safe meas- 5 шт. примерно одинакового размера самшита 67,8 мг), что ориентиро- ной энтомофауны на декора- On the territory of the south of the ural forests (Fig. 2). Currently moth is ures to control moth boxwood. Howev- в пластиковые чашки Петри диаме- вочно соответствует 4746 мг зелено- тивных древесных растениях во European Russia the species was first recorded on the entire Black Sea coast as er, the biological methods are effective тром 90 мм. В линии А для сохране- го корма за период жизни гусеницы. влажных субтропиках Краснодар- detected in the Bolshoi Sochi region in well as in Abkhazia, Georgia and Turkey only in the timely detection of local, re- ния более высокой влажности чашки Иными словами, одна гусеница спо- ского края (ФГБНУ ВНИИ цвето- autumn of 2012. Most likely, the pest (Karpun et al., 2015). In spring of 2015 cently estimated and yet not numerous были помещены в пустой прямоу- собна оголить 50-70 см ветвей сам- водства и субтропических культур, was transported from the Mediterrane- it is officially detected in Crimea. pest population. Pheromone traps are гольный аквариум (50 × 25 × 30 см), шита. г. Сочи) // (spbftu.ru>User Files/Image/ an nursery with seedlings of boxwood Moth represents a special danger for means of early detection of forest pests. прикрытый листом пенопласта. По итогам проделанной работы kataev/2015, online published). and, as in the next 2013, the moth was the spread in the Caucasus mountain- In order to develop an effective pher- Куколки в процессе развития ме- можно констатировать, что самый 3. Nacambo S., Leuthard F.L.G., detected in Novorossiysk, Krasnodar ous endemic and relict species — box- omone inputs for boxwood moth the няли цвет с изумрудно-зеленого на трудный и ответственный этап куль- Wan H., Li H., Haye T., Baur B., Weiss and Grozny, and the introduction was wood Colchis (Buxus colchica Pojark.). specialists of the All-Russian Centre for охристо-коричневый (рис. 9). турального процесса — введение R.M., Kenis M. Development charac- multiple (Gninenko et al., 2014). Due Its protection against moth is a very se- Plant Quarantine (FGBU VNIIKR) are Экспериментально определенный вида в культуру — успешно прой- teristic of box-tree moth Cydalima per- to the natural flying-off of pest’s adults rious problem, since most of the popu- working to create a sustainable labora- для гусениц младших возрастов по- ден. В настоящее время насекомые spectalis and its potential distribution in actively distributed widely in the south lation of Colchis boxwood grows in pro- tory population of the dangerous pest. рог развития составил 8 оС. интенсивно используются в опытах Europe // Journ. of Applied Entomol., of Russia, debarking boxwood, both in tected areas, which prohibits the use of If it is success, this culture will allow Насекомые линии А проходили 2013 (online published). any chemical pest management. A sim- researching the boxwood moth almost полный цикл развития за 35-40 дней, Рис. 8. Предкуколка самшитовой огневки Fig. 9. The pupae of different ages year round. у линии В развитие растягивалось до The starting material was achieved 60-64 дней, что соответствует сумме from Crimea in late April 2015. Рис. 9. Куколки разного возраста эффективных температур порядка Fig. 8. Prepupae of boxwood moth In accordance with conditions the 620-630 градусо-дней. armyworms were divided into two lines: Для линии А стадия гусеницы со- - the armyworms of А line in the ставляла около трех недель (20-23 developed in the laboratory room with дня), стадия куколки — 8-14 дней. natural lighting and room temperature Средняя масса гусеницы перед (25 ± 2 °C); окукливанием составляла 304,73 - the armyworms of B line were мг, средняя масса молодой кукол- placed in a climatic chamber with an ки — 182,97 мг. Процент окуклива- inverted photo-period (9.00–17.00 — ния гусениц при отсутствии кан- shadow, 17.00–9.00 — light) at a con- нибализма достигал 87,5, процент stant temperature of 18 °C and a con- выхода имаго из куколок — 100. stant relative humidity of 80% (Fig. 3). Для линии В стадия гусеницы Nutrition for larvae were cut leaves составляла 30-35 дней, стадия ку- and young twigs of boxwood (breeding колки — 19-25 дней. Средняя масса on artificial nutrition (AN) can affect гусеницы перед окукливанием со- the ratio of the components and even ставляла 326,71 мг, средняя масса the composition of the pheromone and молодой куколки — 230,6 мг. Оку- therefore is not recommended at the кливалось без повреждений 68,3% study of insect pheromones). гусениц, все бабочки (100%) успешно The flying moths were released for вылетели из куколок. mating in a mesh tank (30 × 30 × 30 cm)

10 4| 14| 2015 КАРАНТИН РАСТЕНИЙ КАРАНТИН РАСТЕНИЙ 4| 14| 2015 11 higher humidity the cups were placed As a result of this work we can say in an empty rectangular tank (50 × 25 × that the most difficult and crucial stage 30 cm), covered with a sheet of foam. of cultural process – the introduction ВЯЗОВЫЙ The pupae in the development pro- of species in culture – was successfully cess changed colour from emerald passed. At present, the insects are used green to ocher-brown (Fig. 9). extensively in experiments on the opti- ПИЛИЛЬЩИК-ЗИГЗАГ The experimentally determined for mization of the synthetic pheromone of larvae of younger age the minimum ef- the boxwood moth (Fig. 10–11). fective temperature was 8 оС. APROCEROS LEUCOPODA Insects of line A passed a full cycle Acknowledgment of 35-40 days development, in the line We express our gratitude to the staff TAKEUCHI, 1939 B development prolonged up to 60-64 of the Main Botanical Garden RAS L.G. days, which corresponds to the sum of Seraya and V.A. Kryuchkova, a graduate (HYMENOPTERA, ARGIDAE) — Its protection against moth is a very serious problem, since most Рис. 10. Фрагмент установки для сбора экономически значимый вредитель вяза летучих компонентов феромона of the population of Colchis boxwood grows in protected areas, which prohibits the use of any chemical pest management. из Восточной Азии, расширяющий инвазийный Fig. 10. A moment of setting for collecting of the volatile components of pheromone effective temperatures of 620-630 de- student of the K.A. Timiryazev Acad- ареал в европейской части России gree-days. emy V.V. Chernolikh, as well as to the and fed with 5% solution of honey or For the line A the armyworm-stage specialists of FGBU VNIIKR S.A. Fed- sugar (Nacambo et al., 2013) on a cotton lasted about three weeks (20–23 days), osov and I.K. Shahramanov for help in А.Г. Блюммер, научный сотрудник отдела лесного карантина ФГБУ «ВНИИКР» swab placed in a Petri dish-halves of 40 pupal-stage — 8–14 days. The average providing fresh food to test insects. mm in diameter. At regular replacing of mass of armyworm before pupation drinkers every 2–3 days the maximum was 304.73 mg, average weight of young References age of life for flying butterflies was 26 pupa — 182.97 mg. The percentage of ar- 1. Gninenko Y.I., Kireeva N.V., days. myworm pupate in the absence of can- Schurov V.I. Boxwood moth – a new in- The cut twigs of boxwood were used nibalism reached 87.5, the percentage of vasive pest in the forests of the Russian for oviposition in the tank, placed in vi- adults released from the pupae was 100. Caucasus // Plant Quarantine. Science als with water (Fig. 4). Each female had For line B in the armyworm-stage and Practice, 2014, № 1. p. 32–39. layed more than a dozen nests (mainly was 30-35 days, the pupa-stage — 19– 2. Karpun N.N., Ignatova E.A., Пилильщики — группа семейств в базы данных нуклеотидные по- Длина тела взрослого насекомо- from the lower side of the sheet) of 10- 25 days. The average mass of armyworm Zhuravleva E.N. New types of harmful подотряда сидячебрюхие (Symphyta) следовательности участка гена СОI го — 5–7 мм. Имеет две пары хо- 28 eggs (Fig. 5). The average fertility of before pupation was 326.71 mg, the av- entomofauna on ornamental woody отряда перепончатокрылых на- (www.barcodinglife.org; www.ncbi...). рошо развитых крыльев. Передне- the females in this case was 189 eggs, erage weight of young pupa — 230.6 mg. plants in the humid subtropics of секомых (Hymenoptera). Широко Род Аproceros включает 9 ви- спинка черно-оранжевого цвета, maximum — up to 250. 68.3% of armyworms pupated undam- Krasnodar region (FGBNU Institute распространены по земному шару. дов, обитающих преимущественно брюшко — черно-зеленое, антен- The armyworms of first ages (Fig. 6) aged, all butterflies (100%) successfully of Floriculture and Subtropical Crops, Наиболее богата их фауна в умерен- в Японии и Китае (Taeger et al., 2010). ны — оранжево-черные, ноги — блед- were contained in glass test cylinders flew from pupae. Sochi) // (spbftu.ru>User Files/Image/ ном и холодном поясах Северного В России, помимо A. leucopoda, два но-зеленые, крылья — дымчато-чер- (V = 2 l), covered on top with light plas- The maximum length of adult army- kataev/2015, online published). полушария. вида (на Дальнем Востоке). ные (рис. 1). Особи, вышедшие из пе- tic caps. The boxwood twigs were also worm was 35 mm (Fig. 7). The average 3. Nacambo S., Leuthard F.L.G., На личиночной стадии большая Одним из наиболее опасных вре- резимовавших куколок, отличаются placed into vials with water. voracity of armyworm was approx- Wan H., Li H., Haye T., Baur B., Weiss часть видов питаются живыми рас- дителей вязов, или ильмов, в Евра- по окраске от незимовавших. У них The armyworms of elder age at length imately 70 leaves of boxwood (with R.M., Kenis M. Development of charac- тительными тканями. зии является пилильщик Aproceros переднеспинка, брюшко и антенны of 20-25 mm were set off by 5 pcs of one an average weight of boxwood leaf teristics of boxwood-tree moth Cydali- Преимущественно олигофаги, leucopoda. В русскоязычной литера- черной окраски, а ноги — бежевые. size into the plastic Petri dish with a di- 67.8 mg), which approximately corre- ma perspectalis and its potential distri- полифагия встречается редко. Сре- туре встречаются несколько его на- Aproceros leucopoda — поливоль- ameter of 90 mm in order to avoid can- sponds to 4746 mg of green forage over bution in Europe // Journ. of Applied ди пилильщиков известны экономи- званий, но, мы будем использовать тинный вид, дающий в природном, nibalism. In line A in order to preserve the life cycle of an armyworm. In other Entomol., 2013 (online published). чески значимые вредители ценных то, что устоялось в практике работы восточноазиатском, ареале четыре words, one armyworm is able to bare декоративных и лесных древесных карантинной фитосанитарной служ- поколения в год. Взрослые особи Fig. 11. Butterflies of boxwood moth 50–70 cm of boxwood branches. Fig. 12. Climatic chamber for moth растений. К вредителям леса, на- бы. летней генерации активны с июня caught in the synthetic pheromone breeding носящим ощутимый ущерб, отно- Вязовый пилильщик-зигзаг вос- по август. сятся живущие на сосне Diprion точноазиатского происхождения. Зимует в стадии эоним- Рис. 11. Бабочки самшитовой огневки, Рис. 12. Климатическая камера pini и Neodiprion sertifer, Acantholyda В Японии он считается вредителем фы — взрослой личиночной формы, пойманные на синтетический феромон для разведения огневки posticalis. Ели и лиственнице суще- вяза (Ulmus spp.). Обитает здесь на закончившей питание. ственный вред могут причинять нескольких островах. Научное опи- Насекомое способно к партено- виды Gilpinia, Cephalcia и некоторые сание вида было сделано Такеучи генетическому размножению, что Nematinae (http://www.zin.ru...). в 1939 г. по экземплярам с острова значительно увеличивает его темп Вязовый пилильщик-зигзаг от- Хоккайдо (Takeuchi, 1939). размножения. носится к семейству Argidae. В мире В начале текущего века этот пи- В европейской части России раз- известно более 900 видов этого се- лильщик был выявлен на востоке витие одной генерации занимает че- мейства, в России — около 100 видов. Китая (Xing-yu, Heng, 2006). Он ука- тыре недели. Лет имаго начинается Среди них много вредителей куль- зан также и для юга Дальнего Восто- в первой декаде мая и продолжает- турных и декоративных растений. ка России (Желоховцев, Зиновьев, ся до конца сентября (Щуров и др., У 14 видов определены и внесены 1995). 2012).

12 4| 14| 2015 КАРАНТИН РАСТЕНИЙ КАРАНТИН РАСТЕНИЙ 4| 14| 2015 13 Так, в Италии его первое обнаруже- году пилильшик-зигзаг встречался ние связано с придорожными на- как на востоке, так и на западе Мо- саждениями вяза у автомобильной сковской области. дороги А23 между городами Удине В 2015 году инвазийный фитофаг в регионе Фриули — Венеция-Джу- существенно расширил свой ареал лия и Тревизо (регион Венето) и расселился уже по многим районам (Zandigiacomo, 2011). Ростовской области и Краснодарско- На территории России первые го края. Здесь он наносит существен- особи Aproceros leucopoda обнаруже- ный вред деревьям вяза нескольких ны в северных и северо-восточных видов, широко представленным районах Краснодарского края, а так- в полезащитных полосах и линейных же в Егорлыкском районе Ростов- насаждениях вдоль автомобильных ской области в 2010 году. Массовое и железных дорог. размножение инвазийного пилиль- По имеющимся в распоряжении щика отмечено в искусственных на- автора сведениям, вязовый пилиль- саждениях вяза Ulmus pumila вдоль щик A. leucopoda уже пересек грани- федеральных автотрасс М4 и М29, цу Воронежской области. а также второстепенных и полевых Таким образом, в настоящее вре- дорог, железнодорожных магистра- мя вязовый пилильщик-зигзаг явля- лей южного направления. ется транспалеарктом с дизъюнктив- Fig. 1. Aproceros leucopoda. Imago of unhibernated generation. In the background — the net cocoon with a pupate false caterpillar Во многих районах Ростовской ным ареалом, состоящим из четырех Fig. 2. Feeding false sawfly caterpillar (photo: Forest protection center of Krasnodar Territory, 2010) области в 2011 году наблюдалась частей: японской, российской даль- (photo S.M. Blank, EPPO PQR Database, 2015) крупная вспышка численности ин- невосточной, китайской и европей- Рис. 1. Aproceros leucopoda. Имаго незимовавшей вазийного вредителя. В июле отме- ской. Рис. 2. Питающаяся ложногусеница пилильщика генерации. На заднем плане — сетчатый кокон чалась сильная дефолиация вяза на В Европе пилильщик-зигзаг пора- (фото S.M. Blank, EPPO PQR Database, 2015) с окукливающейся ложногусеницей протяжении сотен километров поле- жает несколько видов рода Ulmus, как (фото: ЦЗЛ Краснодарского края, 2010) Появление вязового пилиль- защитных и придорожных насажде- местных, так и завезенных из Азии. не только ухудшает эстетическую смысла, поскольку эта муха поража- щика-зигзага на европейском кон- ний от границы области с Красно- К их числу относятся вязы: Давида ценность вязовых насаждений, но ет многие виды пилильщиков и че- Самки откладывают яйца по од- тиненте впервые зафиксировано дарским краем и почти до границы (U. davidiana), горный (U. glabra), раз- и уменьшает устойчивость отдель- шуекрылых. ному в верхнюю часть краевых зуб- в 2003 году в Венгрии и в том же с Воронежской областью. Заселенной резной, или лопастной (U. laciniata), ных деревьев и способствует пора- Возможно, в роли агента биологи- чиков листовой пластинки вяза. году — в Польше (Blank et al., 2010). оказалась вся западная половина водный (U. laevis), полевой (U. minor), жению их патогенной микрофлорой. ческой борьбы могут быть исполь- В Европе личинки вредителя (их на- Вселенец стал активно расселяться Ростовской области (Артохин и др., сибирский, как этот вид называют Химическая борьба с инвазийным зованы патогенные нематоды тех зывают ложногусеницами за внеш- по странам Восточной Европы. Про- 2012). в Европе (U. pumila), а также интроду- фитофагом может осуществляться же видов, что успешно применяют- нее сходство с гусеницами бабо- ник в Румынию (2006) и в том же В 2010 г. впервые ложногусеницы цированный японский (U. japonica). лишь в природных лиственных лесах ся в Республике Корея для борьбы чек) выходят из яиц в середине мая году — на Украину, где в Луганской A. leucopoda отмечены на U. pumila Заселяются как парковые и при- с той или иной долей вяза в древо- с близкими к A. leucopoda видами и начинают питаться тканями листа и Харьковской области приблизился в Ульяновской области (Ленгесова, дорожные насаждения, так и деревья стоях, либо в вязовых насаждениях пилильщиков рода Arge. (рис. 2). Погрызы ими листовой пла- почти к границе с Россией. К 2009 г. Мищенко, 2013). в лесах искусственного происхожде- за пределами населенных пунктов. Какие же выводы можно сделать стинки имеют зигзагообразную фор- из вышесказанного? Вязовый пи- му, за что насекомое и получило свое На территории России первые особи Aproceros leucopoda Повторяющаяся в течение нескольких лет подряд лильщик-зигзаг обладает высоким название (рис. 4). Личинки съедают обнаружены в северных и северо-восточных районах дефолиация не только ухудшает эстетическую ценность потенциалом размножения. На юге лист полностью, оставляя только Краснодарского края, а также в Егорлыкском районе вязовых насаждений, но и уменьшает устойчивость России может давать не менее трех центральную жилку. генераций в год. Его способность Личиночных возрастов шесть. На Ростовской области в 2010 году. отдельных деревьев и способствует поражению их к распространению хорошо видна на их развитие до 6-го возраста уходит патогенной микрофлорой. примере Краснодарского края. Так, 15–18 дней. Ложногусеницы 6-го он уже занял большую часть терри- В 2011 году инвайдер был выяв- если первые локальные вспышки фи- возраста сплетают кокон, либо при- тории Венгрии (Csoka, 2010; Vetek, лен в Ставропольском крае (www. ния и природных лесах. В Красно- Возможно использование таких раз- тофага были зафиксированы здесь крепленный к нижней поверхности 2010) проник в Словакию (2009), old.vniilm). дарском крае нападает на два вида решенных к применению в Россий- в 2010 году, то уже в следующем он листа и имеющий сетчатую структу- Молдову (2011), Чехию (2013). В результате проведенных обсле- вязов: гладкий (U. laevis) и шерша- ской Федерации в 2015 г. инсектици- поразил в соседней Ростовской об- ру (рис. 3), либо более компактный, В Западной Европе известен пока дований в июле 2012 года специали- вый (U. glabra). дов, как децис, КЭ [(25 г/л), 2 мл/10 ласти сотни километров полезащит- плотностенный, который плетется лишь из Австрии (первая наход- стами ВНИИЛМ пилильщик-зигзаг По наблюдениям, проведенным л воды]; карбофос, СП [(100 г/кг), ных и придорожных насаждений. в подстилке или в почве под дере- ка — 2009 г.) и Германии (Kraus et al., был найден в городских озеленитель- в Румынии, в начале июля дефоли- конц. 90 г/10 л воды]; кинмикс, КЭ, При численности ложногусениц од- вом. 2011). ных посадках города Пушкино Мо- ация на отдельных деревьях вяза МЭ [(50 г/л), конц. 2,5 мл/10 л воды]. на-две на лист наблюдалась сплош- Интродукция A. leucopoda в Евро- В Южной Европе впервые выяв- сковской области. Его личинки пи- может достигать 74–98%. У де- Против личинок первого и второго ная дефолиация кроны (Щуров и др., пу произошла, вероятно, в 2000–2001 лен в 2009 году в Италии. В 2010 г. тались здесь листвой вяза U. pumila. ревьев, подвергшихся нападению возрастов эффективны пиретрои- 2012). годах из Китая, с саженцами вяза найден в Сербии, в 2011 г. — в Хорва- При проведении обследований ли- А. leucopoda, в конце лета обычно ды дельтаметрин и тефлубензурон Вяз — ценная древесная порода. и другим посадочным материалом тии и Словении. ственных культур в Пореченском почки распускаются повторно. Од- (www.eppo.int...). В Средней полосе и на юге евро- для декоративных посадок или ле- По странам Европы A. leucopoda участковом лесничестве Бородин- нако вновь образующиеся листья Биологический метод борьбы пейской части России он широко совосстановительных работ. Коко- распространялся, вероятнее всего, ского лесхоза 5 июля на единичных также уничтожаются личинками, с Aproceros leucopoda не разработан. используется в защитных лесонаса- ны насекомого могли быть завезены с наземным транспортом, посколь- деревьях вяза гладкого (U. laevis) что приводит к отмиранию ветвей Установлено паразитирование на ждениях, для залесения мест с экс- с деревянной упаковкой товаров, ку его часто обнаруживали на вязах были обнаружены питающиеся, и побегов (Blank et al., 2010) (рис. 5). ложногусеницах единственной му- тремальными условиями среды. паллетами, катушками для кабеля в линейных насаждениях, примыка- еще немногочисленные личинки Повторяющаяся в течение не- хи-тахины Blondelia nigripes. Одна- К тому же он является здесь едва ли и т.п. ющих к транспортным магистралям. A. leucopoda. Таким образом, в 2012 скольких лет подряд дефолиация ко ее массовое разведение не имеет не основной парковой породой.

14 4| 14| 2015 КАРАНТИН РАСТЕНИЙ КАРАНТИН РАСТЕНИЙ 4| 14| 2015 15 Древесина вяза применяется для и карантин растений, № 9, 2013. blattwespe Aproceros leucopoda Take- производства мебели, строгано- С. 35–39. uchi, 1939 (Hymenoptera: Argidae) in го шпона, в машиностроительном 5. Ленгесова Н.А. Ильмовый Deutschland // Deutsche Gesellschaft ELM SAWFLY-ZICZAG и столярном производстве и др. пилильщик Aproceros leucopoda fur allgemeine und angewandte Ento- Учитывая вышесказанное, можно (Takeuchi, 1939) — новый для терри- mologie, 2011. Hf. 25 (3), s. 117–119. с уверенностью утверждать, что пи- тории Ульяновской области вреди- 12. Seljak G. Six new alien phy- APROCEROS LEUCOPODA лильщик Aproceros leucopoda пред- тель вяза // Природа Симбирского tophagous insect species recorded in ставляет большую угрозу для вяза Поволжья, 2012. 13. С. 136–139. Slovenia in 2011 // Acta Entomologica юга европейской части России. Вяз 6. Ленгесова Н.А., Мищенко Slovenica, 20 (1): 31–44. TAKEUCHI, 1939 может исчезнуть из посадок и при- А.В. Биология, экология и молеку- 13. Taeger A., Blank S.M., Liston родных лесов юга России. лярно-генетическое исследование A.D. World Catalog of Symphyta (Hy- (HYMENOPTERA, ARGIDAE) – Aproceros leucopoda (Takeuchi, 1939) menoptera) // Zootaxa, 2010. V. 2580, Литература (Hymenoptera: Argidae) — вредителя pp. 1–1064. economically significant pest of elm 1. Артохин К.С., Игнатова П.К., вяза в среднем Поволжье // Кавказ- 14. Takeuchi K. A systematic study Терсков Е.Н. Новые для фауны Ро- ский энтомологический бюллетень, on the suborder Symphyta (Hymenop- from East Asia, expanding invasive area стовской области, в том числе инва- 2013. Т. 9 (1). С. 163–167. tera) of the Japanese Empire // Tenthre- зионные, виды насекомых // Кавказ- 7. Масляков В.Ю., Ижевский С.С. do, 1939, V. 2, pp. 393–439. in the European part of Russia ский энтомол. бюллетень, 2012. Т. 8 Инвазии растительноядных насеко- 15. Vetek G., Mikulas J., Csóka G., (2). С. 199–202. мых в европейскую часть России // Blank S. A kanyargos szilleveldarazs 2. Артохин К.С., Игнатова П.К., М.: ИГРАН, 2011. 272 с. (Aproceros leucopoda Takeuchi, 1939) A.G. Blummer, Researcher of FGBU VNIIKR’s Department of Forest Quarantine Колесников С.И., Решетов А.А. 8. Щуров В.И., Гниненко Ю.И., Magyarorszagon // Novenyvedelem, Изменения в фауне перепончато- Ленгесова Н.А., Гниненко М.Ю. Иль- 2010, 46 (11): 519–521. крылых насекомых Ростовской об- мовый пилильщик в европейской 16. Xing-yu W., Heng X. A new ласти и прогноз экологических по- России // Защита и карантин расте- record of the genus Aproceros Malaise следствий // Живые и биокосные ний, 2012. № 2. С. 37–38. (Hymenoptera: Argidae) from China // Sawfly is a group of families of the tureit is known under various names, It hibernates in the eonymph системы, 2013. № 2. http://www.jbks. 9. Blank S.M., Hara H., Mikulas J. Entomotaxonomia, 2006. V. 28, no. 4, suborder of Symphyta (Symphyta), the but we use the name well established stage — adult larval form that already ru/archive/issue-2/article-6. et al. Aprocerus leucopoda (Hymenop- pp. 279–280. order Hymenoptera (Hymenoptera). It in the quarantine phytosanitary service finished nutrition. 3. Желоховцев А.Н., Зиновьев А.Г. tera, Argidae): an East Asia pest of elms 17. Zandigiacomo P., Cargnus E., is widely distributed all over the world practice. The insect is capable of parthenogen- Список пилильщиков и рогохвостов (Ulmus sp.) invading Europe // Eur. J. Villani A. First record of the invasive being prevalent in the temperate and Elm sawfly-ziczag is of East-Asian esis, which greatly increases the rate of (Hymenoptera, Symphyta) фауны Рос- Entomol., 2010. V. 107 (3), pp. 357-367. sawfly Aproceros leucopoda infesting cold zones of the Northern hemisphere. origin. It is known to be an elm pest in reproduction. сии и сопредельных территорий. I. // 10. Csoka G., Mikulas J., Blank S., elms in Italy // Bulletin of Insectolo- In the larval stage most species feed Japan (Ulmus spp.). It inhabits several In the European part of Russia the Энтомол. обозрение, 1995. Т. 74, вып. Vetek G. A canjargos szilleveldarazs gy. Department of Agroenvironmental on living plant tissues. islands there. The scientific description development of one generation takes 2. С. 395–415. (Aproceros leucopoda Takeuchi, 1939) Sciences and Technologies, 2011. V. 64 They are predominantly oligophages, of the species was performed by Take- four weeks. The flying of adults begins 4. Ижевский С.С. Инвазия ази- megjelenese Magyarorszagon // No- (1), pp. 145-149. polyphagy being quite rare. There are uchi in 1939 by the samples from Hok- in the first ten days of May and lasts un- атских насекомых-фитофагов в ев- venjvedelmi Tudomangos Napok 2010, 18. www.barcodinglife.org. economically significant pests of valua- kaido (Takeuchi, 1939). til the end of September (Schurov et al., ропейскую часть России // Защита Budapest, 2010, pp. 19–20. 19. http://www.ncbi.nlm.nih.gov./ ble ornamental and forest woody plants At the beginning of the current cen- 2012). 11. Kraus M., Liston A.D., Taeger genbank. known among sawflies. There are forest tury this sawfly was detected in eastern Females lay eggs one by one into the Рис. 3. Куколки в сетчатых коконах A. Die invasive Zick-Zack-Ulmen- 20. www.old.vniilm.ru›ru/ pests, causing significant damage, and China (Xing-yu, Heng, 2006). It is also upper edge of the elm lamina. In Europe (фото: ЦЗЛ Краснодарского края, 2010) news/287-2012-07-06b. living on the pine Diprion pini and Ne- 21. http://www.Kcc.zag.m.jp/ odiprion sertifer, Acantholyda posticalis. In Russia the first species of Aproceros leucopoda were found athalia/symphyta/argidae.htm. Fig. 3. Pupae in net cocoons Spruce and larch may be significantly in the northern and north-eastern parts of Krasnodar region, 22. http://szmn.sbras.ru/old/Hyme- (photo: Forest protection center of Krasnodar Region, 2010) affected by species Gilpinia, Cephalcia as well as in Egorlyksky district of Rostov region in 2010. noptera/Symphyta/Argidae.htm. and some Nematinae (http://www.zin. 23. www.eppo.int/QUARANTINE/ ru.). Alert_List/insects/aproceros_leucopo- Elm sawfly-ziczag belongs to the reported in the South of the Russian Far the pest larvae (called false caterpillars da.htm. family Argidae. There are more than 900 East (Zhelokhovtsev, Zinoviev, 1995). because of resemblance to moth cater- 24. http://www.zin.ru/labs/insects/ species of that family all over the world, The body length of an adult insect is pillars) come out of eggs in mid-May Hymenopt/projects/Key-FE/pdf-4- and about 100 species in Russia. There of 5–7 mm. It has two pairs of well-de- and begin feeding on leaf tissue (Fig. 2). 5/0909-0961.pdf. are pests of cultural and ornamental veloped wings. Pronotum is black and Bites in lamina have a zigzag shape, for plants among them. In 14 species nu- orange, abdomen is black and green, which the insect got its name (Fig. 4). cleotide sequences of the portion of the antenna — orange and black, legs — pale Larvae eat leaves entirely, leaving only gene СОI have been identified and in- green, wings — smoky black (Fig. 1). the central vein. cluded into database (www.barcoding- Individuals coming from hibernated There are 6 ages of the larvae life cy- life.org; www.ncbi.). pupae differ in colour from the ones cle. It takes 15-18 days for it to develop The genus Аproceros includes 9 spe- not hibernated. They have pronotum, to the 6th age. The false caterpillars of cies, mainly inhabiting Japan and China abdomen and antenna of black colour the 6th age weave a cocoon that either (Taeger et al., 2010). In Russia, besides and legs of beige colour. attaches to the bottom surface of the A. leucopoda, there are two species (in Aproceros leucopoda — is a polyvol- leaf having a mesh structure (Fig. 3), the Far East). tine species giving in the natural East- or a compact one, solidwalled, which is One of the most dangerous pests of Asian areal four generations per year. spun in the litter or soil under the tree. elm-trees or elms in Eurasia is a sawfly Adults of summer generation are active A. leucopoda was introduced into Eu- Aproceros leucopoda. In Russian litera- from June to August. rope probably in 2000-2001 from Chi-

16 4| 14| 2015 КАРАНТИН РАСТЕНИЙ КАРАНТИН РАСТЕНИЙ 4| 14| 2015 17 na, with elm seedlings and other plant- affects many fly species of sawflies and fauna of Rostov region, including in- (Ulmus sp.) invading Europe // Eur. J. ing material for ornamental planting Lepidoptera. vasive // Caucasian Entomol. Bulletin, Entomol., 2010. V. 107 (3), pp. 357-367. or reforestation. Insect cocoons could As a biological control agent one can 2012. V. 8 (2). p. 199-202. 10. Csoka G., Mikulas J., Blank S., be transferred with wooden packaging use the pathogenic nematode of the 2. Artokhin K.S., Ignatova P.K., Vetek G. A canjargos szilleveldarazs products, pallets, cable reels, etc. same species as the ones successfully Kolesnikov S.I., Reshetov A.A. Changes (Aproceros leucopoda Takeuchi, 1939) The emergence of Elm Sawfly-zig- used in the Republic of Korea for con- in the fauna of Hymenoptera in Rostov megjelenese Magyarorszagon // No- zag on the European continent for the trol of the related to A. leucopoda spe- region and forecast of environmental venjvedelmi Tudomangos Napok 2010, first time is recorded in 2003 in Hun- cies of sawflies of the genus Arge. consequences // Living and stagnant Budapest, 2010, pp. 19-20. gary and in the same year — in Poland What conclusions can be made from systems, 2013. № 2. http://www.jbks. 11. Kraus M., Liston A.D., Taeger (Blank et al., 2010). The insect intruder the above? Elm sawfly-zigzag has a high ru/archive/issue-2/article-6. A. Die invasive Zick-Zack-Ulmen- started spreading actively into the East- reproductive potential. It can give at 3. Zhelokhovtsev A.N., Zinoviev blattwespe Aproceros leucopoda Take- ern Europe countries. It penetrated into Рис. 4. Типичные зигзагообразные погрызы листовых пластинок вяза least three generations per year in the A.G. List of sawflies and horntails (Hy- uchi, 1939 (Hymenoptera: Argidae) in Romania (2006) and the same year into (фото: E. Altenhofer, EPPO PQR Database, 2015) south of Russia. Its ability to spread eas- menoptera, Symphyta) of the Russian Deutschland // Deutsche Gesellschaft Ukraine, where it came close to the Rus- ily is obvious on the example of Kras- fauna and adjacent territories. I. // En- fur allgemeine und angewandte Ento- sian border in the Lugansk and Khark- Fig. 4. Typical zigzag bites in elm lamina nodar Region. Thus, if the first local tomol. review, 1995. V. 74, adit. 2. p. mologie, 2011. Hf. 25 (3), s. 117-119. ov regions. By 2009 it has spread in the (photo: E. Altenhofer, The insect inhabits parks and road- outbreaks of the phytophage were re- 395-415. 12. Seljak G. Six new alien phy- large part of Hungary (Csoka, 2010; EPPO PQR Database, 2015) side plantings, trees in artificial and corded here in 2010, the next year it af- 4. Izhevsky S.S. Invasion of Asian tophagous insect species recorded in Vetek, 2010), penetrated into Slovakia natural forests. In Krasnodar Region it fected in the neighboring Rostov region phytophagous insects in the European Slovenia in 2011 // Acta Entomologica (2009), Moldova (2011), and the Czech In 2011 the invader was detected in attacks two types of elms: smooth elm hundreds of kilometers of shelterbelts part of Russia // Plant Protection and Slovenica, 20 (1): 31-44. Republic (2013). Stavropol Region (www.old.vniilm). (U. laevis) and rough elm (U. glabra). and roadside plantings. With only one Quarantine, № 9, 2013. p. 35-39. 13. Taeger A., Blank S.M., Liston In Western Europe it is known to As a result of surveys conducted in According to observations carried or two false sawfly caterpillars per leaf 5. Lengesova N.A. Elm sawfly Aproc- A.D. World Catalog of Symphyta (Hy- occur only in Austria (the first re- July 2012 the VNIILM specialists found out in Romania, in early July defoliation total crown defoliation was observed eros leucopoda (Takeuchi, 1939) — new menoptera) // Zootaxa, 2010. V. 2580, cord — 2009) and Germany (Kraus et sawfly-zigzag in urban landscaping on individual elm trees can reach 74– (Schurov et al., 2012). elm pest for the territory of Ulyanovsk pp. 1-1064. al., 2011). plantings in Pushkino, Moscow Region. 98%. The trees attacked by A. leucopoda, Elm is a valuable tree species. In the region // Nature of Simbirsk Volga Area, 14. Takeuchi K. A systematic study In Southern Europe it was first de- Its larvae fed on the foliage of elm U. usually bud bloom again in late sum- Central part of Russia and the south of 2012. 13. p. 136-139. on the suborder Symphyta (Hymenop- tected in 2009 in Italy. In 2010, it is pumila. In surveys of deciduous trees in mer. However, the newly formed leaves the European part of Russia, it is widely 6. Lengesova N.A., Mishchenko A.V. tera) of the Japanese Empire // Tenthre- found in Serbia, in 2011 — in Croatia Porechensky forestry area of Borodino are repeatedly destroyed by larvae, thus used in protective forests, for affores- Biology, ecology and molecular-genetic do, 1939, V. 2, pp. 393-439. and Slovenia. forestry farm on the 5th of July at trees leading to the dieback of branches and tation of places with extreme environ- study of Aproceros leucopoda (Takeuchi, 15. Vetek G., Mikulas J., Csóka G., Most probably, A. leucopoda spread of U. laevis, there were found few feed- shoots (Blank et al., 2010) (Fig. 5). mental conditions. Besides, it is vitrual- 1939) (Hymenoptera: Argidae) — elm Blank S. A kanyargos szilleveldarazs over the European countries by the ing larvae of A. leucopoda. Thus, in 2012 The repeated for several consecutive ly the main park tree species. pest in the Middle Volga // Caucasian (Aproceros leucopoda Takeuchi, 1939) ground transportation, as it was often sawfly-zigzag occurred both in the east years defoliation deteriorates the aes- Elm wood is used for furniture, entomological Bulletin, 2013. V. 9 (1). Magyarorszagon // Novenyvedelem, found at the elms in linear plantations and west of Moscow region. thetic value of elm plants, but also re- sliced veneer, in machine-building and p. 163-167. 2010, 46 (11): 519-521. adjacent to highways. Thus, in Italy its In 2015 the invasive phytophage con- duces the resistance of individual trees woodworking, etc. 7. Maslyakov V.Y., Izhevsky S.S. In- 16. Xing-yu W., Heng X. A new first detection is related to roadside elm siderably extended its areal and inhabited and facilitates the spread of pathogens. Given the above, we can confidently vasions of herbivorous insects in the record of the genus Aproceros Malaise plantingsalong along the A23 motorway many districts of Rostov and Krasnodar Chemical control of invasive phy- assert that Aproceros leucopoda repre- European part of Russia // M.: ISRAS, (Hymenoptera: Argidae) from China // between the cities of Udine in the Friu- Regions. It causes significant damage to tophagous insects can only be carried sents major threat to elm in the south 2011. 272 p. Entomotaxonomia, 2006. V. 28, no. 4, li — Venezia Giulia and Treviso (Veneto elm trees of several species, widely rep- out in natural hardwood forests with of the European part of Russia. Elm may 8. Schurov V.I., Gninenko Y.I., Leng- pp. 279-280. Region) (Zandigiacomo, 2011). resented in hedgerows and linear plan- varying percentage of elm in the stands disappear from plantations and natural esova N.A., Gninenko M.Y. Elm sawfly 17. Zandigiacomo P., Cargnus E., In Russia the first species of Aprocer- tations along roads and railways. or in the elm plantings outside settle- forests of southern Russia. in European Russia // Plant Protection Villani A. First record of the invasive os leucopoda were found in the northern According to data available to the au- ment areas. In the Russian Federation in and Quarantine, 2012. № 2. p. 37-38. sawfly Aproceros leucopoda infesting and north-eastern parts of Krasnodar thor, elm sawfly A. leucopoda has already 2015 such authorized insecticides may References 9. Blank S.M., Hara H., Mikulas J. elms in Italy // Bulletin of Insectolo- region, as well as in Egorlyksky district crossed the Voronezh region border. be used as decis, emulsion concentrate 1. Artokhin K.S., Ignatova P.K., Ter- et al. Aprocerus leucopoda (Hymenop- gy. Department of Agroenvironmental of Rostov region in 2010. Mass repro- skov E.N. New species of insects for the tera, Argidae): an East Asia pest of elms Sciences and Technologies, 2011. V. 64 duction of invasive sawfly is recorded in The repeated for several consecutive years defoliation deteriorates (1), pp. 145-149. artificial plantings of elm Ulmus pumila the aesthetic value of elm plants, but also reduces the resistance Fig. 5. Defoliation of elm crown due to feeding of false sawfly caterpillars 18. www.barcodinglife.org. along federal highways M4 and M29, as (photo: J. Mikulas, EPPO PQR Database, 2015) 19. http://www.ncbi.nlm.nih.gov./ well as on the secondary and field roads, of individual trees and facilitates the spread of pathogens. genbank. southbound railways. Рис. 5. Дефолиация кроны вяза вследствие питания ложногусениц пилильщика 20. www.old.vniilm.ru›ru/ There was a large outbreak of inva- Thus, at present elm sawfly-zigzag [(25 g/l), 2 ml/10 l of water]; carbophos, (фото: J. Mikulas, EPPO PQR Database, 2015) news/287-2012-07-06b. sive pest observed in many areas of Ros- is a trans-palearctic with a disjunctive wettable powder [(100 g/kg), concentr. 21. http://www.Kcc.zag.m.jp/ tov region in 2011. In July, there was a habitat, consisting of four parts: Jap- 90 g/10 l of water]; kinmix, emulsion athalia/symphyta/argidae.htm. heavy defoliation of elm for hundreds of anese, Russian Far East, Chinese and concentrate, microemulsion [(50 g/l), 22. http://szmn.sbras.ru/old/Hyme- kilometers of shelterbelts and roadside European. concentr. 2.5 ml/10 l of water]. The most noptera/Symphyta/Argidae.htm. plantings from the border with Kras- Sawfly-zigzag affects several species effective against larvae of the first and 23. ww.eppo.int/QUARANTINE/ nodar region, and almost to the border of the genus Ulmus in Europe, both lo- second ages are pyrethroids deltame- Alert_List/insects/aproceros_leucopo- with Voronezh region. The whole west- cal and imported from Asia. They are thrin and teflubenzuron (www.eppo. da.htm. ern part of Rostov region turned out to elms: David (U. davidiana), montana int.). 24. http://www.zin.ru/labs/insects/ be infested (Artokhin et al., 2012). (U. glabra), U. laciniata, water elm (U. Biological control of Aproceros leu- Hymenopt/projects/Key-FE/pdf-4- In 2010 false caterpillars of A. leuco- laevis), field elm U.( minor), Siberian copoda is not developed yet. The only 5/0909-0961.pdf. poda were first reported on U. pumila elm, as it is called in Europe (U. pumila), confrmed parasite of false larvae is in Ulyanovsk Region (Lengesova, Mish- as well as the one introduced from Japan fly-tachina Blondelia nigripes. Howev- chenko, 2013). (U. japonica). er, its mass breeding is of no use, as it

18 4| 14| 2015 КАРАНТИН РАСТЕНИЙ КАРАНТИН РАСТЕНИЙ 4| 14| 2015 19 Callosobruchus semigriseus (Motschulsky, 1874) РАЗНООБРАЗИЕ И ЭКОЛОГИЯ Callosobruchus somalicus Decelle, 1979 Callosobruchus subinnotatus (Pic, ЗЕРНОВОК РОДА 1914) Callosobruchus theobromae (Linnaeus, 1767) CALLOSOBRUCHUS PIC, 1902 =Callosobruchus cajanus Arora, 1977* И.О. Камаев, начальник научно-экспериментального отдела ФГБУ «ВНИИКР» =Callosobruchus madurensis (Pic, Н.И. Ершова, старший научный сотрудник лаборатории 1927)* =Callosobruchus taiwanensis Chujo, энтомологии ИЭЦ ФГБУ «ВНИИКР» 1937* Callosobruchus utidai Tuda, 2003 Рис. 1. Китайская зерновка (Callosobruchus chinensis): дорсальный вид (a) и вид Е.А. Соколов, ведущий научный сотрудник научно-методического отдела сбоку (b), показан характерный признак вида — пятно из белых щетинок Символом «*» обозначены виды, энтомологии ФГБУ «ВНИИКР» (a из Kingsolver, 2004; b фото Н.И. Ершовой) которые рассматриваются некото- рыми авторами в качестве самосто- Fig. 1. Chinese bruchid weevil (Callosobruchus chinensis): dorsal view (a) ятельных видов. and a side view (b), characteristic feature of the speecies — a spot of white setae (a from Kingsolver, 2004; b photo by N.I. Ershova) Виды зерновок, Зерновки рода Callosobruchus от- тивных и лекарственных растений Callosobruchus antennifer Singal & ранее относившиеся сравнительно хорошо различаются 0 до 6, экзофаллическая вальва треу- носятся к отсутствующим каран- из стран распространения видов Pajni, 1990 к роду Callosobruchus между собой по морфологическим гольная (рис. 6, 9). тинным вредным организмам для Callosobruchus. Callosobruchus bhutanicus Decelle, и упоминающиеся признакам, прежде всего по строе- В целом такое деление под- территории Российской Федерации В настоящее время в литературе 1977 в работе Г.С. Саплиной нию гениталий (табл. 2; рис. 5, 6). тверждается данными молекуляр- (Вредные организмы…, 2009). Ос- нет единого мнения относительно Callosobruchus bicalcaratus Decelle, и Л.М. Никритина (1985) Группе chinensis свойственны гре- но-генетических исследований, све- новными способами распростране- объема рода Callosobruchus, кроме 1975 Callosobruchus ademptus (Sharp, бенчатые усики у самцов (но не у всех дениями о распространении видов ния и переноса зерновок данного того, существующие определитель- Callosobruchus cherenensis (Pic, 1886) перенесен в Borowiecius (Anton, видов, рис. 5) и следующие особен- и предпочитаемых кормовых расте- рода являются следующие: 1) с семе- ные ключи охватывают лишь огра- 1939) 1999). нами различных бобовых культур; ниченное число видов данного рода, =Callosobruchus omanicus Anton, Callosobruchus dorsalis (Fеhraeus, Виды второй группы являются серьезными вредителями, 2) с продовольственным и фураж- относящихся преимущественно 1994* 1839) перенесен в род Megabruchidius зачастую имеющими карантинный статус во многих ным зерном бобовых культур; 3) к вредителям запасов (Лукьянович, Callosobruchus chinensis (Linnaeus, (по Базе данных…, 2014). странах мира, т.к. способны размножаться в хранилищах с тарой, торговым оборудованием Тер-Минасян, 1957; Arora, 1977, 1978; 1758) Callosobruchus maindroni (Pic, и транспортом; 4) активным разле- Haines, 1989; Справочник-определи- Callosobruchus dolichosi (Gyllenhal, 1914) перенесен в род Specularius (по запасов бобовых и на всех стадиях развития том жуков в пределах склада, поме- тель…, 1999). 1839) Базе данных…, 2014); по данным распространяться с соответствующей продукцией. щения, предприятия, населенного Данная работа посвящена обзору Callosobruchus gibbicollis Borowiec, Каталога палеарктических жуков пункта. Следует отметить, что виды видового разнообразия, предвари- 1984 (Catalogue…, 2010) является синони- ности строения гениталий — эдеагус ниях (Tuda et al., 2006). В то же время рода Callosobruchus наносят вред не тельной оценке объема и системе Callosobruchus eremitus Anton, 2000 мом Callosobruchus theobromae. тонкий, две пластинки эндофаллуса, система рода Callosobruchus нуждает- только хранящимся семенам бобо- рода Callosobruchus, имеющего ка- Callosobruchus imitator Kingsolver, Callosobruchus tonkiniensis — в на- экзофаллическая вальва заостренная ся в уточнении, поскольку комплекс- вых культур, но и вегетирующим рантинное значение для Российской 1999 стоящее время рассматривается в ка- (рис. 7–8). но изучены далеко не все виды этого дикорастущим и культурным расте- Федерации, a также характеристике Callosobruchus indica Pajni & Ghosh, честве Megabruchidius tonkinea (Pic, Для группы maculatus характерно рода (табл. 1, рис. 10). ниям данного семейства. Известен экологических групп видов обсужда- 1976 1904) (Catalogue…, 2010). наличие пильчатых усиков (особен- случай успешной акклиматизации емого рода. Callosobruchus latealbus (Pic, 1926) Следует также отметить, что но выражено у самцов), эдеагус не- Экологические группы видов вредителя гледичии Megabruchidius =Callosobruchus albobasalis Chujo, в работе Г.С. Саплиной и Л.М. Ни- сколько укорочен, не тонкий, число рода Callosobruchus tonkinea (Pic, 1904) (ранее относив- Видовое разнообразие 1937* критина (1985) приводятся виды, пластинок эндофаллуса варьирует от Виды рода Callosobruchus можно шегося к Callosobruchus) из Вьетнама зерновок рода Callosobruchus Callosobruchus latitarsis Decelle, в настоящее время являющиеся сино- подразделить на две экологические и Японии в Краснодарском крае, Гер- Нижеследующий список видов при- 1969 нимами других видов Callosobruchus Таблица 1 мании и Венгрии (Korotyaev, 2011). водится на основе Каталога палеар- Callosobruchus maculatus (Fabricius, (Catalogue…, 2010). Например, Система рода Callosobruchus с примерами видов Этот факт позволяет предполагать ктических жуков (Catalogue…, 2010), 1775) Callosobruchus glaber Allibert, 1847 возможность акклиматизации ви- Базы данных Техаского сельско-хо- Callosobruchus montanus Anton, и Callosobruchus jekeli Allibert, Группа видов Примеры видов дов Callosobruchus, не являющихся зяйственного университета (2014) 2000 1847 — синонимы Callosobruchus maculatus С. analis, С. maculatus, С. rhodesianus, С. subinnotatus вредителями запасов, в южных ре- и статьи K.W. Anton (2000). Внешний Callosobruchus multinigrus Singal & analis (Fabricius, 1781), Callosobruchus chinensis C. antennatus, C. chinensis, C. eremitus, C. montanus, C. гионах РФ. вид и рисунок надкрылий некоторых Pajni, 1990 albocallosus (Pic, 1932) — синоним nigritus, C. orientalis, C. pulcher, C. theobromae, С. gibbicol- В последние годы в связи с расши- видов представлен на рис. 1–4. Callosobruchus nigripennis (Allard, Callosobruchus dolichosi (Gyllenhal, lis, С. utidai рением торговых связей со страна- Callosobruchus aethiopicus Decelle, 1895) 1839), Callosobruchus marshalli (Pic, ? C. cajanis ми Юго-Восточной Азии, Африки, 1971 Callosobruchus nigritus Anton, 2000 1902) — синоним Callosobruchus C. imitator* Южной Америки значительно из- Callosobruchus analis (Fabricius, Callosobruchus orientalis Anton, rhodesianus (Pic, 1902). C. latealbus менилась номенклатура ввозимой 1781) 2000 C. omanicus продукции, в частности, увеличи- Callosobruchus anjaliae Singal & Callosobruchus phaseoli (Gyllenhal, Система рода Callosobruchus C. phaseoli лись объемы ввоза свежих бобовых, Pajni, 1990 1833) Основная часть видов зерно- Примечание: ? — положение данных видов в системе рода неясно; a также семян новых бобовых про- Callosobruchus antennatus Anton, Callosobruchus pulcher (Pic, 1922) вок подразделяется на две группы: * — ранее C. imitator относился к группе chinensis, однако молекулярно-генетические данные довольственных культур, декора- 2000 Callosobruchus rhodesianus (Pic, 1902) chinensis и maculatus (табл. 1), которые и сведения о его экологии свидетельствуют против этого (Tuda et al., 2006).

20 4| 14| 2015 КАРАНТИН РАСТЕНИЙ КАРАНТИН РАСТЕНИЙ 4| 14| 2015 21 с растением-хозяином на террито- России имеется подходящая кормо- рию РФ при международной торгов- вая база и, вероятно, подходящие ле крайне мала. климатические условия для аккли- Возможность интродукции и ак- матизации Callosobruchus pulcher, климатизации на территории РФ C. theobromae и др. видов C. theobromae, C. pulcher, 2. Группа видов, развивающих- C. nigripennis, C. dolichosi и др., являю- ся на сухих созревших бобах. Это щихся серьезными, хотя ограничен- в основном виды группы maculatus: но распространенными, вредителя- Callosobruchus maculatus, С. ми сельского хозяйства, полностью rhodesiensis, C. subinnotatus, C. analis, исключить нельзя. Эти виды спо- a также C. chinensis и С. phaseoli. Сам- собны заселять семена экономи- ки откладывают яйца как на разви- чески значимых бобовых культур вающиеся, так и на созревшие бобы исключительно в период вегетации преимущественно видов Phaseolinae. и не являются вредителями запасов. Створки созревших бобов и оболоч- В настоящее время на территорию ки семян Phaseolinae относительно Рис. 4. Рисунок надкрылий зерновок рода Callosobruchus Российской Федерации часто и в зна- тонкие, личинки заселяют семе- (a из Tuda, 2003; c из Kingsolver, 1999; d из Borowiec, 1984): Рис. 2. Вариации окраски надкрылий самок четырехпятнистой зерновки чительных объемах ввозят свежие на и развиваются в них. Эти виды a) C. utidai, b) C. imitator, c) C. gibbicollis (Callosobruchus maculatus) (из Камаева и Кузина, 2013) растения овощных и зеленных куль- устойчивы к низкой влажности тур, относящихся к семейству бобо- и способны распространятся в зна- Fig. 4. Wing pattern of elytral of bruchid weevil of the genus Callosobruchus Fig. 2. Variations in colour of elytral of cowpea bruchid weevil вые, из стран Юго-Восточной Азии чительно более обширных географи- (a from Tuda, 2003; c from Kingsolver, 1999; d from Borowiec, 1984): (Callosobruchus maculatus), female (from Kamaev and Kuzin, 2013) и Африки. В этом случае личинки ческих регионах, чем виды первой a) C. utidai, b) C. imitator, c) C. gibbicollis Callosobruchus не успевают завер- группы. группы, которые согласуются с их и др., не имеющие экономического шить свое развитие в семенах. При Виды второй группы являются та, М.И. Маслова, У.Ш. Магомедова, портной подкарантинной продук- филогенией и морфологической значения в странах распростране- этом исключить возможность слу- серьезными вредителями, зачастую Я.Б. Мордковича. Воронеж: Научная ции. Москва, 1985. 18 с. дифференциацией (Tuda et al., 2005, ния. Они обитают на дикорастущих чайного завоза имаго Callosobruchus имеющими карантинный статус во книга, 2009. 449 с. 5. Спирина Т.С. Сравнительная 2006): или неиспользуемых в пищу бобо- данной экологической группы с та- многих странах мира, т.к. способны 2. Камаев И.О., Кузин А.А. морфология гениталий самца и сам- 1. Комплекс видов, развиваю- вых, преимущественно из родов рой, транспортом и т.п. и после- размножаться в хранилищах запасов Полифенизм и половой димор- ки двух форм четырехпятнистой щихся на вегетирующих бобовых, Rhynchosia, Dunbaria, Cajanus. Веро- дующую их акклиматизацию не бобовых и на всех стадиях развития физм четырехпятнистой зерновки зерновки Callosobruchus maculatus // преимущественно подсемейства ятность завоза этих видов зерновок представляется возможным. На юге распространяться с соответствую- Callosobruchus maculatus // Карантин Энтомологическое обозр., 1974. Т. III. Cajaninae (табл. 3). Это виды груп- щей продукцией. растений. Наука и практика, 2013. Вып. 4. С. 752–76. пы chinensis. Они в основном рас- Рис. 3. Внешний вид некоторых видов зерновок рода Callosobruchus № 4. С. 41–44. 6. Справочник-определитель пространены во влажных тропиках (a-b из Kingsolver, 2004; c-е из Delobel, Tran, 1993; f фото Ю.А. Ловцовой): Литература 3. Лукьянович Ф.К., Тер-Минасян карантинных и других опасных с коротким засушливым сезоном a) C. phaseoli, b) C. pulcher, c) C. rhodesianus, d) C. subbinotatus, 1. Вредные организмы, имеющие М.Е. Жуки-зерновки (Bruchidae) // вредителей сырья, продуктов за- и, как правило, имеют локальное e) C. theobromae, f) C. analis карантинное фитосанитарное зна- Фауна СССР. Жесткокрылые. Т. 24, паса и посевного материала / Сост. географическое распространение. чение для Российской Федерации: вып. 1. М.-Л.: Изд-во АН СССР, 1957. Я.Б. Мордкович и Е.А. Соколов. М.: Fig. 3. Appearance of some species of bruchid weevil of genus Callosobruchus В большинстве случаев эти виды справочник / под ред. С.А. Данквер- 209 с. Колос, 1999. 384 с. (a-b from Kingsolver, 2004; c-е from Delobel, Tran, 1993; f photo by Y.A. Lovtsova): обитают в горной местности выше a) C. phaseoli, b) C. pulcher, c) C. rhodesianus, d) C. subbinotatus, 4. Саплина Г.С., Никритин Л.М. 7. Anton K.W. The Bruchidae 800–1000 м над уровнем моря, где e) C. theobromae, f) C. analis Таблица 2 Инструктивные указания по опреде- (Coleoptera) of Oman with description of возможны периоды относительно Морфология гениталий самцов лению зерновок рода Callosobruchus, a new genus and two new species // Fauna низких температур в ночное время некоторых видов Callosobruchus встречающихся при досмотре им- of Saudi Arabia. 1994. Vol. 14. P. 105–112. (Tuda, 2006). Для данной группы ви- (по Tuda et al., 2006, с изм.) дов имагинальная диапауза является Группа Пластинки Экзофаллическая обязательной. Самки откладывают Вид Парамеры яйца исключительно на развиваю- видов эндофаллуса вальва щиеся бобы вегетирующих расте- C. chinensis ний. Основными предпочитаемыми C. pulcher С. utudai Y-образные, растениями для зерновок данной 2 заостренная группы являются виды подсемей- C. dolichosi расширяются на вершине chinensis ства Cajaninae, но виды зерновок C. nigripennis этого комплекса могут развиваться C. theobromae на свежих бобах видов Phaseolinae. C. analis 2 Созревшие семена Cajaninae облада- V-образные, C. maculatus широкие на вершине 0–2 ют очень толстой и прочной оболоч- C. subinnotatus 2 треугольная

кой, затрудняющей проникновение maculatus V-образные, C. rhodesianus 6 в них личинок Callosobruchus (Singh узкие на вершине & Jackai, 1985). V-образные, C. imitator 2 заостренная Некоторые виды, живущие на узкие на вершине V-образные, вегетирующих растениях, не пред- C. latealbus 2 треугольная ставляют фитосанитарного риска широкие на вершине V-образные, для территории РФ. Это, вероятно, C. phaseoli 6 треугольная C. utidai, C. latealbus, C. semigriseus широкие на вершине

22 4| 14| 2015 КАРАНТИН РАСТЕНИЙ КАРАНТИН РАСТЕНИЙ 4| 14| 2015 23 16. Kingsolver J.M. A new species of Callosobruchus (Coleoptera: Bruchidae) from Thailand and China DIVERSITY AND ECOLOGY OF // Entomological News. 1999. Vol. 110. P. 209–213. 17. Kingsolver J.M. Handbook of BEAN WEEVILS OF THE GENUS the Bruchidae of the United States and Canada (Insecta, Coleoptera). 2004. Vol. I & II. CALLOSOBRUCHUS PIC, 1902 18. Korotyaev B.A. On invasion of an east asian seed beetle, Megabruchidius I.O. Kamaev, Head of FGBU VNIIKR’s Research and Testing Department tonkineus (Pic) (Coleoptera, Bruchidae), N.I. Ershova, Senior Researcher, FGBU VNIIKR’s Laboratory of Entomology, developing in Gleditsia Seeds, in the Northwest Caucasus // Entomological Testing Expertise Centre Review. 2011. Vol. 91. №. 9. P. 1167– E.A. Sokolov, Leading Researcher, FGBU VNIIKR’s Scientific-Methodological 1169. Department of Entomology 19. Singh S.R., Jackai L.E.N. Insect pests of cowpea in Africa; their life cycle, economic importance, and potential Рис. 5. Форма усиков видов рода Callosobruchus for control // Cowpea Research, (a, e-h из Kingsolver, 2004; b-d из Anton, 2000): a) C. chinensis, b) C. orientalis, Production, and Utilization. Chichester, c) C. nigritus, d) C. antennatus, e) C. pulcher, f) С. maculatus, h) C. phaseoli. 1985. P. 217–231. a, e-f – усики самцов слева, самок справа, b-d — представлены усики самцов 20. Tuda M. A new species of Fig. 5. Antennae form of species of the genus Callosobruchus Callosobruchus (Coleoptera: Bruchidae) The bruchid weevils in the genus food grains and forage grains of pulses; vegetative wild and cultivated plants (a, e-h from Kingsolver, 2004; b-d from Anton, 2000): a) C. chinensis, b) C. orientalis, feeding on seeds of Dunbaria Callosobruchus are absent quarantine 3) packaging, commercial equipment of this family. There is known a case of c) C. nigritus, d) C. antennatus, e) C. pulcher, f) С. maculatus, h) C. phaseoli. (Fabaceae), a closely related species to a pests on the territory of the Russian and vehicles; 4) active flying of beetles successful acclimatization of honey lo- a, e-f – antennae of males on the left, females antennae on the right, stored-bean pest, C. chinensis // Journal Federation (Pests, 2009). The main within warehouses, premises, facility, cust pest Megabruchidius tonkinea (Pic, b-d – male antennae presented Applied Entomology and Zoology. pathways for distribution and trans- village. It should be noted, that spe- 1904) (earlier related to Callosobruchus) 2003. Vol. 38. № 2. P. 197–201. porting of bruchid weevils of this ge- cies of genus Callosobruchus affect not from Vietnam and Japan in Krasnodar 8. Anton K.W. Notes on Borowiecius 12. Borowiec L. A new species Cal- 21. Tuda M., Choub L.-Y., nus are: 1) seeds of various pulses; 2) only the stored seeds of pulses, but also region, Germany and Hungary (Korot- Anton, with the description of a new spe- losobruchus Pic from Ceylon (Coleop- Niyomdhamc C., Buranapanichpand S., yaev, 2011). This fact suggests the pos- cies (Coleoptera: Bruchidae: Bruchinae) tera, Bruchidae) // Pol. Pismo Ent. 1984. Tateishie Y. Ecological factors associated Fig. 6. Genitalia of two types of Callosobruchus maculatus sibility of acclimatization of species Cal- // Genus. 1999. Vol. 10. № 1. P. 65–72. T. 54. P. 303–307. with pest status in Callosobruchus (from Spirina, 1974): aed — aedeagus; b.pl. — main plate; losobruchus, which are not known to be 9. Anton K.W. Five new species 13. Catalogue of Palaearctic Coleop- (Coleoptera: Bruchidae): high host o — vertex opening in the exophallic valva; ed — ejaculatory duct; pest of storage in the southern regions of the Callosobruchus chinensis group tera. Vol. 6: Chrysomeloidea / ed. I. Lobl specificity of non-pests to Cajaninae en.ar. — reinforcement of the interior bag; exp — exophallus; prm — parameres; of the Russian Federation. from the Oriental Region and Australia & A. Smetana. Apollo Books, 2010. 924 p. (Fabaceae) // Journal of stored products I–VI — chitin formation of the inner wall endophallus, V — endophallus plate In recent years, due to the expansion (Coleoptera: Bruchidae: Bruchinae) // 14. Delobel A., Tran M. Les research. 2005. Vol. 41. № 1. P. 31–45. Рис. 6. Гениталии двух форм Callosobruchus maculatus of trade relations with the countries of Genus. 2000. Vol. 10. № 1. P. 65-72. Coléoptères des denrées alimentaires 22. Tuda M., Ronn J., (из Спириной, 1974): aed — эдеагус; b.pl. — основная пластинка; South-East Asia, Africa, South America 10. Arora G.L. Taxonomy of the entreposées dans les régions chaudes. Buranapanichpan S., Wasano N., o — вершинное отверстие в основании экзофаллической вальвы; the nomenclature of imported products Bruchidae of North West India. Part I. CTA, 1993. 424 p. Arnqvist G. Evolutionary diversification ed — семяизвергательный канал; en.ar. — арматура внутреннего мешка; has significantly evolved, in particular, Adults // Orient Insects. 1977. Vol. 7. 15. Haines C.P. Observations of the bean beetle genus Callosobruchus exp — экзофаллус; prm — парамеры; I–VI — хитиновые образования внутренней increased volumes of import of fresh P. 1–132. on Callosobruchus analis (F.) in (Coleoptera: Bruchidae): traits стенки эндофаллуса, V — пластинки эндофаллуса pulses and seeds of new food pulses, 11. Arora G.L. Taxonomy of the Indonesia, including a key to storage associated with stored-product pest ornamentals and medicinal plants from Bruchidae of North West India. Parts Callosobruchus spp. (Col., Bruchidae) // status // Molecular Ecology. 2006. Vol. the countries where Callosobruchus spe- II. Larvae // Orient Insects. 1978. Vol. 8. Journal of Stored Products Research. 15. P. 3541–3551. cies are spread. P. 1–30. 1989. Vol. 25. № 1. P. 9–16. 23. База данных Texas A&M Currently, there is no consen- University: https://insects.tamu.edu. sus in the scientific literature on the Таблица 3 Онлайн-доступ на 20.10.2014 г. amount of the genus Callosobruchus, Пищевые предпочтения видов рода Callosobruchus besides, the Identification keys cover (по Tuda et al., 2006) only a limited number of species of this genus, mainly related to pests of Таксономическая Таксономическая storage (Lukyanovich, Ter-Minassian, Виды, развивающиеся на принадлежность принадлежность Виды — вредители запасов вегетирующих бобах предпочитаемых видов предпочитаемых видов 1957; Arora, 1977, 1978; Haines, 1989; растений растений Handbook-range, 1999). The present work is dedicated to an C. pulcher С. phaseoli overview of species diversity, a prelimi- C. teobromae C. imitator nary assessment of the amount and the C. dolichosi Cajaninae, C. subinnotatus system of the genus Callosobruchus, C. semigriseus а также вегетирующие C. maculatus Phaseolinae which is of quarantine significance for Phaseolinae C. utidai C. rodesianus the Russian Federation, as well as the C. latealbus C. analis characteristics of ecological groups of C. chinensis the considered species.

24 4| 14| 2015 КАРАНТИН РАСТЕНИЙ КАРАНТИН РАСТЕНИЙ 4| 14| 2015 25 Species diversity of bruchid weevils Callosobruchus subinnotatus (Pic, 1914) Callosobruchus tonkiniensis — at Table 1 the imaginal diapause is obligatory. of the genus Callosobruchus Callosobruchus theobromae (Linnae- present is considered as Megabruchid- The system of the genus Callosobruchus with examples of species Females lay eggs exclusively on devel- The following list of species is based us, 1767) ius tonkinea (Pic, 1904) (Catalogue..., oping pods of vegetating plants. Mostly on the Catalogue of Palaearctic Coleop- =Callosobruchus cajanus Arora, 2010). The group of species Examples of species preferred plants for bruchid weevils of tera (Catalogue, 2010), Database of Tex- 1977* It also should be noted, that accord- maculatus С. analis, С. maculatus, С. rhodesianus, С. subinnotatus this group are species of the subfamily as Agricultural University (2014) and =Callosobruchus madurensis (Pic, ing to G.S. Saplina and L.M. Nikritin chinensis C. antennatus, C. chinensis, C. eremitus, C. montanus, C. Cajaninae, but the species of bruchid the article of K.W. Anton (2000). The 1927)* (1985), there are mentioned species nigritus, C. orientalis, C. pulcher, C. theobromae, С. gibbicol- weevils of this complex may develop on appearance and elytra pattern of some =Callosobruchus taiwanensis Chujo, that are currently synonymous to oth- lis, С. utidai fresh pods of the Phaseolinae species. species is given in Figures 1–4. 1937* er species Callosobruchus (Catalogue..., ? C. cajanis Ripe seeds of Cajaninae have very thick Callosobruchus aethiopicus Decelle, Callosobruchus utidai Tuda, 2003 2010). For example, Callosobruchus C. imitator* and hard shell that impedes penetration 1971 The symbol «*» stands for species glaber Allibert, 1847 and Callosobru- C. latealbus of the Callosobruchus larvae (Singh & Callosobruchus analis (Fabricius, considered by some authors as separate chus jekeli Allibert, 1847 — a synonym C. omanicus Jackai, 1985). 1781) species. to Callosobruchus analis (Fabricius, C. phaseoli Some species living in the vegetat- Callosobruchus anjaliae Singal & Pa- 1781), Callosobruchus albocallosus (Pic, Note: ? — position of these species in the system of the genus is unclear; ing plants do not pose phytosanitary * — earlier C. imitator used to be related to the chinensis group, but molecular-genetic data jni, 1990 Species of bruchid weevils, earlier 1932) — a synonym to Callosobruchus and information about its ecology do not confirm this (Tuda et al., 2006). risk for the territory of the Russian Callosobruchus antennatus Anton, related to the genus Callosobruchus dolichosi (Gyllenhal, 1839), Calloso- Federation. Probably these are C. utid- 2000 and mentioned in the G.S. Saplina bruchus marshalli (Pic, 1902) — a syn- ai, C. latealbus, C. semigriseus and oth- Callosobruchus antennifer Singal & and L.M. Nikritin (1985) onym to Callosobruchus rhodesianus (but not in all species, Fig. 5) and the Ecological groups of species ers, having no economic importance Pajni, 1990 Callosobruchus ademptus (Sharp, (Pic, 1902). following structural features of the gen- of the genus Callosobruchus in the countries of distribution. They Callosobruchus bhutanicus Decelle, 1886) transferred to Borowiecius (An- italia — aedeagus is thin, two plates of The species of the genus Calloso- inhabit wild and inedible beans, pref- 1977 ton, 1999). The system of the genus endophallus, exo-phallic valves is point- bruchus could be divided into two erably of the genus Rhynchosia, Dun- Callosobruchus bicalcaratus Decelle, Callosobruchus dorsalis (Fеhraeus, Callosobruchus ed (Fig. 7–8). ecological groups, which are consist- baria, Cajanus. There is quite a little 1975 1839) transferred to the genus Megabru- The major part of the bruchid weevil Themaculatus group is characterized ent with their phylogeny and mor- probability of bringing of these species Callosobruchus cherenensis (Pic, 1939) chidius (according to Database, 2014). species is divided into two groups: chin- by presence of ringed antennae (espe- phological differentiation (Tuda et al., of bruchid weevils with a host plant =Callosobruchus omanicus Anton, Callosobruchus maindroni (Pic, 1914) ensis and maculatus (Table 1), which cially in males), aedeagus is a bit short- 2005, 2006): into the Russian Federation in inter- 1994* transferred to the genus Specularius (ac- relatively well differ in morphological er, not thin, the number of endophal- 1. Complex of species developing national trade. Callosobruchus chinensis (Linnaeus, lus plates varies from 0 to 6, exophallic on vegetating pulses, mainly of the Possibility of introduction and ac- 1758) The species of the second group are dangerous pests often valves is triangle (Fig. 6, 9). subfamily Cajaninae (Table 3). These climatization in Russia of species C. Callosobruchus dolichosi (Gyllenhal, having a quarantine status in many countries, as they are able In general, this division is confirmed are species of the chinensis group. They theobromae, C. pulcher, C. nigripennis, 1839) to reproduce in the storage reserves of pulses and to spread by molecular genetic studies and data are mainly distributed in the humid C. dolichosi, etc., which are dangerous Callosobruchus gibbicollis Borowiec, on the distribution of species and pref- tropics with a short dry season and as agricultural pests, though of limited dis- 1984 with the products at all stages of development. erence in forage plants (Tuda et al., a rule have local geographic distribu- tribution, cannot be completely exclud- Callosobruchus eremitus Anton, 2000 2006). At the same time, the system of tion. In most cases, these species inhab- ed. These species are able to colonize the Callosobruchus imitator Kingsolver, cording to Database, 2014); according features, especially in the structure of the genus Callosobruchus needs to be it the highlands of 800–1000 m above seeds of economically important pulses 1999 to the Catalogue of Palaearctic Coleop- their genitalia (Table 2; Fig. 5, 6). precised, as not all species of this genus sea level, where there may be periods during the vegetation season only and Callosobruchus indica Pajni & Ghosh, tera (Catalogue, 2010) and is a synonym The chinensis group is characterized are comprehensively studied (Table 1, of relatively low night temperatures are not pests of storage. 1976 to Callosobruchus theobromae. by peculiar comb antennae in male Fig. 10). (Tuda, 2006). For this group of species At present, large volumes of fresh Callosobruchus latealbus (Pic, 1926) vegetables and herbs are often import- =Callosobruchus albobasalis Chujo, ed, belonging to the family Fabaceae Fig. 7. Genitalia of species Callosobruchus of the chinensis group Fig. 8. Genitalia of species Callosobruchus of the chinensis group 1937* onto the territory of the Russian Feder- (a from Kingsolver, 2004; b from Borowiec, 1984; c-d from Anton, 2000): (a-b from Anton, 2000; с from Kingsolver, 1999): Callosobruchus latitarsis Decelle, a)-b) C. chinensis, c) C. antennatus; d) C. nigritus a) C. eremitus, b) C. montanus, с) C. imitator ation from South-East Asia and Africa. 1969 In such cases the Callosobruchus larvae Callosobruchus maculatus (Fabricius, Рис. 7. Гениталии видов Callosobruchus группы chinensis Рис. 8. Гениталии видов Callosobruchus группы chinensis do not complete their development in 1775) (a из Kingsolver, 2004; b из Borowiec, 1984; c-d из Anton, 2000): (a-b из Anton, 2000; с из Kingsolver, 1999): seeds. At the same time the possibility of Callosobruchus montanus Anton, a)-b) C. chinensis, c) C. antennatus; d) C. nigritus a) C. eremitus, b) C. montanus, с) C. imitator accidental introduction of Callosobru- 2000 chus adults of this environmental group Callosobruchus multinigrus Singal & with packaging, transport, etc. and fur- Pajni, 1990 ther establishment cannot be excluded. Callosobruchus nigripennis (Allard, In the south of Russia there are suitable 1895) food reserves and probably suitable cli- Callosobruchus nigritus Anton, 2000 matic conditions for establishment of Callosobruchus orientalis Anton, Callosobruchus pulcher, C. theobromae, 2000 etc. Callosobruchus phaseoli (Gyllenhal, 2. The group of species growing on 1833) dry ripened beans. It is basically a type Callosobruchus pulcher (Pic, 1922) of group maculatus: Callosobruchus Callosobruchus rhodesianus (Pic, maculatus, С. rhodesiensis, C. subinno- 1902) tatus, C. analis, and also C. chinensis Callosobruchus semigriseus and С. phaseoli. Females lay eggs both (Motschulsky, 1874) on developing and mature beans most- Callosobruchus somalicus Decelle, ly of the Phaseolinae species. Folds of 1979 the ripe beans and tegmen of Phase-

26 4| 14| 2015 КАРАНТИН РАСТЕНИЙ КАРАНТИН РАСТЕНИЙ 4| 14| 2015 27 Table 2 Table 3 The morphology of the male genitalia of some species of Callosobruchus Food preferences of species of the Callosobruchus (Tuda et al., 2006) (Tuda et al., 2006, with amendments) Species developing on Taxonomy of preferred Species – pests of storage Taxonomy of preferred A group of vegetating beans plant species plant species species Species Parameres Plates of endophallus Exo-phallic valve C. pulcher С. phaseoli C. chinensis C. teobromae C. imitator C. pulcher C. dolichosi Cajaninae, C. subinnotatus С. utudai Y-shaped, expanded at the and also vegetating 2 Sharpened C. semigriseus C. maculatus Phaseolinae C. dolichosi apex Phaseolinae chinensis C. nigripennis C. utidai C. rodesianus C. theobromae C. analis C. latealbus C. analis 2 C. chinensis C. maculatus V-shaped, wide at apex 0–2 Triangular species (Coleoptera: Bruchidae: Bruchi- tera, Bruchidae) // Pol. Pismo Ent. 1984. from Thailand and China // Entomolog- C. subinnotatus 2

maculatus nae) // Genus. 1999. Vol. 10. № 1. P. 65– T. 54. P. 303–307. ical News. 1999. Vol. 110. P. 209–213. C. rhodesianus V-shaped, narrow at apex 6 72. 13. Catalogue of Palaearctic Coleop- 17. Kingsolver J.M. Handbook of C. imitator V-shaped, narrow at apex 2 Sharpened 9. Anton K.W. Five new species tera. Vol. 6: Chrysomeloidea / ed. I. Lobl the Bruchidae of the United States and of the Callosobruchus chinensis group & A. Smetana. Apollo Books, 2010. Canada (Insecta, Coleoptera). 2004. C. latealbus V-shaped, wide at apex 2 Triangular from the Oriental Region and Australia 924 p. Vol. I & II. C. phaseoli V-shaped, wide at apex 6 Triangular (Coleoptera: Bruchidae: Bruchinae) // 14. Delobel A., Tran M. Les 18. Korotyaev B.A. On invasion of Genus. 2000. Vol. 10. № 1. P. 65–72. Coléoptères des denrées alimentaires an east-asian seed beetle, Megabruchid- 10. Arora G.L. Taxonomy of the entreposées dans les régions chaudes. ius tonkineus (Pic) (Coleoptera, Bruchi- olinae seeds are relatively thin, larvae able to reproduce in the storage reserves kovich. Voronezh: Scientific book, 2009. Bruchidae of North West India. Part I. CTA, 1993. 424 p. dae), developing in Gleditsia Seeds, in inhabit seeds and develop on them. of pulses and to spread with the prod- 449 p. Adults // Orient Insects. 1977. Vol. 7. 15. Haines C.P. Observations on the Northwest Caucasus // Entomologi- These species are resistant to high hu- ucts at all stages of development. 2. Kamaev I.O., Kuzin A.A. P. 1–132. Callosobruchus analis (F.) in Indonesia, cal Review. 2011. Vol. 91. №. 9. P. 1167– midity and may also spread in wider Polyphenizm and sexual dimorphism of 11. Arora G.L. Taxonomy of the including a key to storage Callosobru- 1169. geographic regions than the species of References four-spotted bruchid weevil Callosobru- Bruchidae of North West India. Parts chus spp. (Col., Bruchidae) // Journal of 19. Singh S.R., Jackai L.E.N. Insect the first group. 1. Pests of quarantine phytosanitary chus maculatus // Plant Quarantine. Sci- II. Larvae // Orient Insects. 1978. Vol. 8. Stored Products Research. 1989. Vol. 25. pests of cowpea in Africa; their life cy- The species of the second group are importance for the Russian Federation: ence and Practice, 2013. № 4. p. 41–44. P. 1–30. № 1. P. 9–16. cle, economic importance, and potential dangerous pests often having a quaran- a handbook / ed. S.A. Dankvert, M.I. 3. Lukyanovich F.K., Ter-Minasyan 12. Borowiec L. A new species Cal- 16. Kingsolver J.M. A new species of for control // Cowpea Research, Pro- tine status in many countries, as they are Maslov, U.Sh. Magomedov, Y.B. Mord- M.E. Weevil beetles (Bruchidae) // Fau- losobruchus Pic from Ceylon (Coleop- Callosobruchus (Coleoptera: Bruchidae) duction, and Utilization. Chichester, na of the USSR. Coleoptera. V. 24, No. 1985. P. 217–231. 1. M.-L.: Publishing House of the Acad- 20. Tuda M. A new species of Cal- Fig. 9. Genitalia of species Callosobruchus of the maculatus group Fig. 10. Genitalia of some species of the genus Callosobruchus (a, с from Delobel, Tran, 1993; b from Kingsolver, 1999): emy of Sciences of USSR, 1957. 209 p. (a from Kingsolver, 2004; b from Anton, 1994): a) C. phaseoli, b) C. omanicus losobruchus (Coleoptera: Bruchidae) a) С. analis, b) C. rhodesianus, c) C. subinnotatus 4. Saplina G.S., Nikitin L.M. Guid- feeding on seeds of Dunbaria (Fabace- ance on the identification of bruchid Рис. 10. Гениталии некоторых видов рода Callosobruchus ae), a closely related species to a stored- Рис. 9. Гениталии видов Callosobruchus группы maculatus weevils of genus Callosobruchus, (a из Kingsolver, 2004; b из Anton, 1994): a) C. phaseoli, b) C. omanicus bean pest, C. chinensis // Journal Ap- (a, с из Delobel, Tran, 1993; b из Kingsolver, 1999): found during the inspection of im- plied Entomology and Zoology. 2003. a) С. analis, b) C. rhodesianus, c) C. subinnotatus ported regulated products. Moscow, Vol. 38. № 2. P. 197–201. 1985. 18 p. 21. Tuda M., Choub L.-Y., Ni- 5. Spirina T.S. Comparative mor- yomdhamc C., Buranapanichpand S., phology of genitalia of male and female Tateishie Y. Ecological factors associ- of two forms of four-spotted bruchid ated with pest status in Callosobruchus weevil Callosobruchus maculatus // En- (Coleoptera: Bruchidae): high host tomological review, 1974. V. III. Ed. 4. specificity of non-pests to Cajaninae p. 752–76. (Fabaceae) // Journal of stored products 6. A handbook-range of quarantine research. 2005. Vol. 41. № 1. P. 31–45. and other dangerous pests of raw mate- 22. Tuda M., Ronn J., Buranapan- rials, storage products and seed materi- ichpan S., Wasano N., Arnqvist G. als / Comp. Y.B. Mordkovich and E.A. Evolutionary diversification of the Sokolov. M.: Kolos, 1999. 384 p. bean beetle genus Callosobruchus 7. Anton K.W. The Bruchidae (Coleoptera: Bruchidae): traits associ- (Coleoptera) of Oman with description ated with stored-product pest status // of a new genus and two new species // Molecular Ecology. 2006. Vol. 15. Fauna of Saudi Arabia. 1994. Vol. 14. P. P. 3541–3551. 105–112. 23. Database Texas A&M Univer- 8. Anton K.W. Notes on Borowiecius sity: https://insects.tamu.edu. Online Anton, with the description of a new access on the 20.10.2014.

28 4| 14| 2015 КАРАНТИН РАСТЕНИЙ КАРАНТИН РАСТЕНИЙ 4| 14| 2015 29 новые обычно протекает в латентной детекцией результатов (RT-PCR) или подтверждающий тест методом ПЦР форме (Verhoeven et al., 2008 a, b). ПЦР в режиме «реального времени» с другой парой праймеров, секвени- ДИАГНОСТИКА ВИРОИДА Визуальная идентификация ин- (TaqMan RT-PCR). При получении рование продуктов амплификации. фицированных вироидом растений положительных результатов вы- 3. Проведение биотеста на травя- и клубней картофеля, как правило, явление вироида необходимо под- нистых растениях-индикаторах, при ВЕРЕТЕНОВИДНОСТИ возможна лишь при заражении су- твердить одним из перечисленных наличии симптомов – подтвержда- ровым штаммом и на более поздних методов, но не использовавшимся ющий тест методом ПЦР, секвени- стадиях развития болезни. Не все в скрининговом тесте. При исполь- рование продуктов амплификации КЛУБНЕЙ КАРТОФЕЛЯ клубни зараженных растений прояв- зовании в качестве скринингового (ISPM, 2006). ляют все или даже любой из выше- теста метода R-PAGE, который не Таким образом, основными ме- С.Б. Абросимова, м.н.с. научно-методического отдела перечисленных симптомов. В то же является видоспецифичным, в ка- тодами выявления PSTVd являются фитопатологии ФГБУ «ВНИИКР» время здоровые клубни ряда сортов честве подтверждающего теста не- биотесты на растениях-индикаторах, картофеля могут приобретать вере- обходимо использовать метод ПЦР. электрофорез в полиакриламидном Ю.Н. Приходько, начальник научно-методического отдела теновидную форму. Известны также При первом выявлении вироида, геле, гибридизация нуклеиновых кис- фитопатологии ФГБУ «ВНИИКР» случаи проявления различных ано- a также в других особо важных си- лот и полимеразная цепная реакция. малий на клубнях при размножении туациях (например, при выявлении картофеля в тепличных условиях в импортном семенном материале) Биотесты на растениях- Окончание. Начало статьи — в журнале «Карантин растений. Наука и практика» №3 (13). (Кастальева и др., 1992; Яковлева, рекомендуется проведение секвени- индикаторах 2001; EPPO/CABI, 1997). рования полученных продуктов ам- Для проведения биотестов обыч- Вследствие вышеназванных фак- плификации. но используют здоровые растения торов визуальная диагностика сим- Согласно стандарту МСФМ № 27 томата сорта Rutgers. Рекомендо- птомов PSTVd имеет лишь вспо- для выявления и идентификации вано использовать также растения могательное значение, a выявление PSTVd можно использовать три раз- томата сортов Allerfruheste-Freiland, и идентификация вироида должны личных варианта: Sheyenne (Fernow et al., 1969), Доход- осуществляться с использованием 1. Скрининговый тест методом ный, Перемога (Берлинчик, 1997). Визуальная диагностика лежат на земле. Растения заметно «бровями». Вокруг чечевичек часто лабораторных методов (OEPP/EPPO, R-PAGE либо методами гибридиза- При проведении стандартного те- симптомов отстают в росте (EPPO/CABI, 1997; появляются некротические пятна. 2004). ции нуклеиновых кислот или ПЦР ста молодые листья растений томата Проявление симптомов на рас- OEPP/EPPO, 2004). Может наблюдаться некротизация Согласно действующему стандар- с универсальными праймерами механически инокулируют соком тениях картофеля зависит от сорта, У зараженных PSTVd расте- тканей клубней. Прорастание зара- ту ЕОКЗР РМ 7/33 (1) (OEPP/EPPO, и зондами к роду Pospiviroid, под- анализируемых образцов. Растения штамма PSTVd, окружающих усло- ний картофеля сортов Луговской, женных клубней по сравнению со 2004) для выявления PSTVd в каче- тверждающий тест методом ПЦР, содержат в теплице при высокой вий и способа заражения. Невский, Прибрежный и Утенок здоровыми растениями происходит стве отборочных (скрининговых) секвенирование продуктов ампли- интенсивности света и температуре Существуют штаммы PSTVd раз- раньше заканчивался рост стеблей медленнее (Яковлева, 2001; EPPO/ тестов рекомендуется использовать фикации. не ниже 30 ºС. Через 2–4 недели на личной агрессивности, симптомы и листьев, быстрее проходили фазы CABI, 1997; OEPP/EPPO, 2004). один из следующих методов: элек- 2. Скрининговый тест методом растениях проявляются характер- заражения которыми растений кар- трофорез в полиакриламидном геле ПЦР с электрофоретической детек- ные симптомы: искривление побега тофеля варьируют от слабых до силь- Основными методами выявления PSTVd являются (R-PAGE), гибридизацию нуклеино- цией результатов или ПЦР в режиме в нижней его части, морщинистость ных. биотесты на растениях-индикаторах, электрофорез вых кислот (DIG probe), стандарт- «реального времени» с праймерами и складчатость листьев, карлико- ную ПЦР с электрофоретической и зондами, специфичными к PSTVd, вость, некрозы жилок. Эти симпто- При заражении слабым штаммом в полиакриламидном геле, гибридизация нуклеиновых кислот на растениях иногда не проявляются мы наблюдаются только в случае и полимеразная цепная реакция. никакие очевидные симптомы. При Рис. 6. Симптомы мозаики на растении Nicotiana tabacum, инокулированном заражения суровым штаммом. При заражении агрессивным штаммом изолятом PSTVd MT-08 (2) c растения томата сорта Мона Лиза инфицировании мягким штаммом интенсивность проявления сим- бутонизации, цветения и, как след- На зараженных растениях томата (карантинная теплица ФГБУ «ВНИИКР», апрель 2015 г., фото авторов) больные растения трудно отличить птомов часто зависит от условий ствие, отмечалось более раннее первыми проявляются симптомы, от здоровых. При проведении биотеста в моди- окружающей среды. Как правило, отмирание ботвы. У сильно зара- выражающиеся в задержке роста Fig. 6. Mosaic symptoms on Nicotiana tabacum plants inoculated with PSTVd MT-08 (2) симптомы наиболее сильно проявля- женных растений может вообще не и искривлении растений, вызван- isolate from a tomato plant of the Mona Lisa variety фикации Yang и Hooker (CIP, 1993) ются в жарких условиях. Симптомы образовываться репродуктивных ных сокращением длины междоуз- (FGBU VNIIKR Quarantine greenhouse, механически инокулированные рас- могут быть умеренными при началь- органов. Инфицированные виро- лий. Верхушечные листья становятся 2015, photo by the authors) тения томата содержат при темпера- ной степени заражения, но усилива- идом клубни сильнее поражались желтыми, красноватыми или фиоле- туре 24–30 ºС и непрерывном осве- ются в следующих генерациях. различными видами гнилей и хуже товыми и часто скручиваются. Про- щении в пределах 1 клк. Зараженные При заражении агрессивными хранились (Гирсова, 2003). исходит некроз нижних и средних вироидом растения томата прояв- штаммами у растений картофеля Клубни зараженных растений листьев, a верхние листья хотя и не ляют альбинизм с изгибом листьев. развиваются прямостоячие тонкие картофеля обычно уменьшаются погибают, но уменьшаются в разме- В случае сурового штамма дополни- побеги, верхушечные почки побегов в размере, может происходить их рах (рис. 4). Цветение и образование тельно развивается некроз жилок. могут пролиферировать, образуя удлинение, деформация, растрески- плодов прекращаются. Плоды стано- В качестве индикатора PSTVd симптомы типа «ведьминых метел». вание, скручивание и они могут при- вятся жесткими, мелкими, темно-зе- с местной реакцией рекомендованы Листья более мелкие, с волнистыми обретать гантелевидную форму (рис. леного цвета (Mackie et al., 2002). также растения скополии (Scopolia краями и тенденцией загибаться 2-3). На поверхности клубней трещи- Зараженные PSTVd растения sinensis) (Можаева и др., 1989), кото- внутрь, их цвет может изменяться ны располагаются параллельно глав- перца обычно не проявляют интен- рые содержат в теплице при умерен- до темно-зеленого (рис. 1). У зара- ной оси. Сетчатая кожура клубней сивных симптомов; чаще всего раз- ном освещении в пределах 3–4 клк, женных растений нижние листья становится гладкой, красная — розо- вивается лишь деформация листьев температуре 18–23 ºС и влажности не заметно короче и прямостоячие по вой, фиолетовая — бледно-лиловой. на верхушках побегов (Lebas et al., ниже 60%. Через 8–14 дней на ино- сравнению со здоровыми растения- Глазки зараженных клубней более 2005). Инфекция PSTVd на декора- кулированных листьях скополии ми, нижние листья которых обычно многочисленные, с выступающими тивных растениях семейства Пасле- развиваются местные некрозы.

30 4| 14| 2015 КАРАНТИН РАСТЕНИЙ КАРАНТИН РАСТЕНИЙ 4| 14| 2015 31 Были выявлены растения-инди- 1 г тестируемой растительной ткани Полимеразная цепная реакция культуру из поспивироидов заража- роида достигается наборами для ванных клубней картофеля с 190-195 каторы с коротким инкубационным (Schumacher et al., 1986), осуществлять (ПЦР) ет лишь PSTVd. Однако на томате выделения нуклеиновых кислот от- аналогичными срезами со здоровых периодом инфекции PSTVd: пету- выявление вироида в единичных на- Для диагностики PSTVd в настоя- выявлен целый комплекс поспиви- ечественных фирм-производителей: клубней картофеля. ния, топинамбур, томат сортов Сли- стоящих семенах картофеля (Singh et щее время наиболее широко исполь- роидов, что обуславливает необхо- «Проба-НК», «Проба-ГС» (АгроДиа- Аналитическая воспроизводи- вовидный и Агата. Разработана тех- al., 1988) и диагностировать штаммы зуются молекулярные методы на ос- димость обязательного секвениро- гностика) и «НК-М-Сорб» (Синтол) мость и повторяемость результатов нология диагностического процесса вироида (Singh, Boucher, 1987). нове ПЦР. вания продуктов амплификации. при проведении очистки вручную, при проведении тестов набором для на этих индикаторах: температура Для широкого применения реко- В диагностическом протоколе Праймеры для классической a также набором «М-Сорб-Туб-Ав- FLASH-PCR к PSTVd составляла 24–27 °С, 16-часовой световой день, мендован упрощенный вариант те- ЕОКЗР PM 7/33 (1) (EPPO/OEPP ОТ-ПЦР к отдельным участкам ге- томат» (Синтол) – на автоматиче- 100%. интенсивность света 5000–7000 лк ста, разработанный M. Schroeder, H. 2004) и стандарте МСФМ № 27 (ISPM, нома или к полному геному PSTVd ской станции для выделения нукле- Установлена возможность ис- для получения реакции на 7-10-й Weidemann (1989). 2006) для выявления PSTVd в форма- разработаны также целым рядом иновых кислот Freedom Evo (Тecan, пользования препаратов нуклеи- день (Краснова, 2000). Однако РНК PSTVd и других по- те классической ОТ-ПЦР рекомен- других авторов (Querci et al., 1995, Швейцария). новых кислот, подготовленных для Было показано также, что сорт то- спивироидов практически идентич- дуется использовать специфические 1997; Behjatnia et al., 1996; Nakahara Установлено также, что для бактериологической экспертизы мата Волгоградский 5/95 может быть на по молекулярной массе, поэтому праймеры 3H1-F/2H1-R (Shamloul et et al., 1998; Weidemann, Buchta, 1998; FLASH-ПЦР синтез кДНК вироида (шейкирование образцов клубней использован в качестве растения-ин- данный метод не позволяет прово- al., 1997; Weidemann, Buchta, 1998) со- Di Serio et al., 2007; Khan et al., 2009; может осуществляться набором ре- в буфере, центрифугирование су- дикатора, поскольку симптомы по- дить их идентификацию до видо- вместно с праймерами PLANT-UNI/ Vassilakos et al., 2012 и другие). агентов для обратной транскрипции спензии, выделение нуклеиновых ражения на нем появляются раньше, вого уровня и должен сочетаться PLANT-UN2 (Kolchinsky et al., 1991) В диагностическом протоколе фирмы АгроДиагностика, содержа- кислот наборами «Проба-ГС» или a отставание в росте более выражено, с подтверждающим анализом мето- для внутреннего контроля. Данные ЕОКЗР PM 7/33 (1) для диагностики щим праймер Random, MMLV RT «М-Сорб-Туб-Автомат»), также чем на томате сорта Rutgers, тради- дом ПЦР. праймеры позволяют получать про- PSTVd рекомендуется использовать Kit (Евроген, Россия), содержащим и для выявления PSTVd. В несколь-

ционно используемом как растени- дукт величиной 359 п.о., что соответ- также метод ПЦР в режиме «реаль- праймеры Oligo (dT)17 и Random dN10 ких экспериментах выявление виро- е-индикатор PSTVd (Гирсова, 2003). Гибридизация ствует полному геному PSTVd. ного времени», разработанный R. и набором Maxima First Strand cDNA ида было достигнуто без выделения Нами был успешно осущест- нуклеиновых кислот Праймеры 3H1-F/2H1-R прошли Mumford et al. (2000). Synthesis Kit (ThermoScientific, США), нуклеиновых кислот непосредствен-

влен перенос изолята PSTVd с за- Метод основан на способности международную межлабораторную В качестве последней разработ- содержащим праймеры Oligo (dT)18 но в отцентрифугированной суспен-

раженного растения картофеля на кДНК вироида образовывать гибрид проверку и широко используются ки следует упомянуть метод сред- и Random (dN)6. зии, однако воспроизводимость этих растения томата сортов Мона Лиза с его нативной молекулой, иммоби- в настоящее время для экспертизы нециклической изотермической Набор для FLASH-PCR к PSTVd результатов была недостаточно вы- и Малиновка, которые проявили лизованной на жидкой или твердой подкарантинной продукции, сер- амплификации (LAMP), адапти- фирмы АгроДиагностика позво- сокой. типичные симптомы заражения мембранах. Образовавшийся ком- тификации семенного материала рованный для диагностики PSTVd лял выявлять все изоляты вироида (рис. 5), a с инокулированных расте- плекс выявляется зондами с радио- пасленовых культур и в научных ис- (Lenarcic et al., 2013). в свежих и замороженных при -80 ºС Валидация диагностического ний томата — на растения дурмана активной, ферментной или флуорес- следованиях. Недостатком данных В Российской Федерации в на- листьях и клубнях растений карто- набора к PSTVd для ПЦР (Datura stramonium) и нескольких центной метками (Salazar et al., 1983; праймеров является их неполная стоящее время имеется надежная феля и листьях томата. Ложнополо- в режиме реального времени видов Nicotiana — N. tabacum, N. Lakshman et al., 1986; Bernardy et al., видоспецифичность, так как наряду база для диагностики PSTVd. Ди- жительной реакции с аналогичными фирмы Синтол tabacum (сорт Xanthii) и N. rustica. 1987; McInnes et al., 1989; Candresse et с PSTVd они реагируют также с тремя органами здоровых растений карто- В наборе фирмы Синтол обратная Инокулюм готовили в калийно-фос- al., 1990; Khan et al., 2009). Разработан другими поспивироидами — Mexican Для диагностики PSTVd феля и томата не наблюдалось. транскрипции совмещена в одной фатном буфере (PBS), pH 7,4. также зонд с использованием в каче- papita viroid (MPVd), Tomato chlorotic в настоящее время наиболее С использованием испытуемо- пробирке с полимеразной цепной ре- На инокулированных растениях стве метки диен-платины, позволя- dwarf viroid (TCDVd) и Tomato planta широко используются го набора установлено, что PSTVd акцией, что уменьшает возможность D. stramonium развивались местные ющий выявлять 0,3 пг РНК вироида Macho viroid (TPMVd) (ISPM, 2006). локализуется в различных тканях контаминации и сокращает продол- некрозы и системный хлороз ли- (Дрыгин и др., 1996; Кондакова, Дры- Для картофеля это не является суще- молекулярные методы зараженных клубней картофеля: жительность тестов. стьев, a на инокулированных расте- гин, 1999). ственной проблемой, поскольку эту на основе ПЦР. глазках, кожице на столонной части При проведении валидации не ниях Nicotiana — системное пожел- клубня, в мякоти, прилегающей к со- наблюдалось неспецифической реак- тение жилок, межжилковый хлороз Рис. 7. Симптомы пожелтения жилок на растении Nicotiana tabacum, инокулиро- агностические наборы для выяв- судистым кольцам, и в сердцевине ции используемых в наборе прайме- и реже — светло-зеленая мозаика ванном изолятом PSTVd MT-08 (2) c растения томата сорта Мона Лиза ления PSTVd производят отече- клубней. Все эти ткани клубней мо- ров с различными вирусами, заража- (рис. 6–8). Наличие вироида в ино- (карантинная теплица ФГБУ «ВНИИКР», апрель 2015 г., фото авторов) ственные фирмы АгроДиагностика гут быть использованы для детекции ющими картофель: PVY, PVS, PVM, кулированных растениях было под- (в форматах FLASH-ПЦР и real- вироида. PMTV, APMoV, APLV, PYDV, PAMV тверждено методом ПЦР. time ПЦР) и Синтол (в формате Установлена высокая специфич- и PBRSV. Fig. 7. Vein yellowing symptoms on Nicotiana tabacum plants inoculated with PSTVd MT-08 (2) isolate from a tomato plant of the Mona Lisa variety real-time ПЦР). ность данного набора, так как не Аналитическая чувствительность Электрофорез (FGBU VNIIKR Quarantine greenhouse, 2015, photo by the authors) В научно-методическом отделе было отмечено перекрестной реак- данного набора находится в пределах в полиакриламидном геле фитопатологии ФГБУ «ВНИИКР» ции с близкородственным поспи- шестого разведения инфекционного Электрофоретическое выявление проведена отработка комплекса во- вироидом карликовости хризантем сока растений томата и седьмого раз- низкомолекулярной вироидной РНК просов по выявлению PSTVd метода- (CSVd), a также с различными ви- ведения очищенной РНК вироида. в экстракте тотальных нуклеиновых ми классической ПЦР, FLASH-ПЦР русами, заражающими картофель: Аналитическая воспроизводи- кислот анализируемого образца и ПЦР в режиме реального времени. PVX, PVS, PVM, PVY, APMoV, APLV, мость и аналитическая повторяе- признано быстрым и технологич- В работе были использованы изо- PYDV, PMTV, PAMV, относящими- мость результатов при использова- ным методом диагностики PSTVd ляты PSTVd, предоставленные со- ся к родам потивирус, потексвирус, нии испытуемого набора составили (OEPP/EPPO, 2004). Тест проводится трудниками ВНИИФ и ВНИИКХ, за комовирус, карловирус, тимовирус 100%. в формате двунаправленного (или что авторы выражают им глубокую и фуровирус. Установлено, что для проведения возвратного) электрофореза в геле признательность. Чувствительность данного мето- тестов с данным комплектом реа- полиакриламида. При этом первый да является очень высокой. В наших гентов очистку РНК вироида воз- электрофорез проводится в натив- Отработка диагностики PSTVd экспериментах выявление вироида можно проводить с различными на- ных условиях, a второй — в обрат- методом FLASH-ПЦР достигалось при разведении инфек- борами для выделения нуклеиновых ном направлении в денатурирующих Установлено, что при проведении ционного сока листьев томата до 106 кислот: «Проба-НК», «Проба-ГС» условиях (Schumacher et al., 1986). тестов с набором для FLASH-ПЦР степени (т.е. в 100 тысяч), a также (АгроДиагностика) «НК-М-Сорб», Данный метод позволяет выяв- к PSTVd фирмы «АгроДиагности- при комбинировании 5-10 срезов «М-Сорб-Туб-Автомат» (Синтол), лять до 800 пг вироидной РНК на ка» эффективная очистка РНК ви- (весом до 0,5 г) мякоти инфициро- «RNAqueous Kit» (Life Technologies).

32 4| 14| 2015 КАРАНТИН РАСТЕНИЙ КАРАНТИН РАСТЕНИЙ 4| 14| 2015 33 Набор для real-time-PCR фир- качество продуктов амплификации при проведении 35 циклов амплифи- Encyclo PCR Kit (Евроген), Long теза кДНК изолятов PSTVd всеми При использовании комплектов мы Синтол позволяет выявлять зависит от используемых комплек- кации. При повышении количества Range 2 Step RT-PCR Kit (Qiagen), испытанными комплектами реаген- реагентов «Tersus PCR Kit» (Евро- PSTVd в свежих и замороженных тов реагентов для ПЦР. циклов до 40 значительно возрас- Dream Taq Green PCR Master Mix тов для обратной транскрипции. ген) и MasDRTaqMix-2025 (Диалат) при -80 ºС листьях и клубнях рас- Наиболее качественные спец- тало количество неспецифических (ThermoScientific), MasDDTaqMix-2025 Наиболее качественные специфиче- аналитическая воспроизводимость тений картофеля, листьях растений ифические продукты амплифи- продуктов и шмеров. и MasMix-2025 (Диалат). ские продукты амплификации по- и повторяемость результатов ПЦР томата, Nicotiana tabacum и Datura кации были получены с комплек- Выявление PSTVd в образцах сока, При амплификации кДНК изо- лучены с кДНК, синтезированной с праймерами PPSTV-1P/PPSTV-1M stramonium. Ложноположительной тами реагентов Screen Mix HS нанесенных на мембрану для архиви- лятов PSTVd, синтезированной наборами MMLV RT Kit, и Maxima составили 100%. реакции с аналогичными органами (Евроген), Tersus PCR Kit (Евроген) рования нуклеиновых кислот, было набором реагентов MMLV RT Kit, First Strand cDNA Synthesis Kit. Визу- По результатам проведенных экс- здоровых растений не наблюдалось. и MasDRTaqMix-2025 (Диалат). При достигнуто при комбинировании наиболее качественные специфи- ально наименее концентрированные периментов можно сделать вывод, Набор позволяет также выявлять ви- этом в данных вариантах использо- набора для обратной транскрипции ческие продукты получены с ком- специфические продукты получены что праймеры PРSTV-1P/PPSTV-1M роид в образцах сока, нанесенных на вание для обратной транскрипции Maxima First Strand cDNA Synthesis плектами реагентов Tersus PCR Kit с кДНК, синтезированной набором могут быть эффективно использова-

мембраны для архивирования нукле- праймеров Оligo (dT)16 и Random Kit фирмы ThermoScientific (содержа- и MasMix-2025. Несколько уступал для обратной транскрипции фирмы ны для диагностики PSTVd. Для про-

иновых кислот. (dN)6 имело однозначное преиму- щего смесь праймеров для ОТ Оligo в этом аспекте комплект реагентов АгроДиагностика. Промежуточное ведения ПЦР с данными праймерами DD щество по сравнению с праймером (dT)18 и Random (dN)6) и набора ре- Mas TaqMix-2025. При использо- положение по качеству продуктов возможно применение различных Отработка диагностики PSTVd 2H1-R. агентов для ПЦР MasDRTaqMix-2025 вании комплекта реагентов Screen амплификации имели варианты комплектов реагентов для обратной методом классической ПЦР При использовании комплек- (Диалат). Mix HS наблюдалось образование с кДНК, синтезированной наборами транскрипции и амплификации, с праймерами 3H1-F/2H1-R тов реагентов Screen Mix (Евроген) Установлено, что аналитическая неспецифических продуктов. Ис- Sensiscript RT Kit и First Strand cDNA a также препаратов РНК, выделен- (A. Shamloul et al., 1997) и Encyclo PCR Kit (Евроген) наряду чувствительность классической ПЦР пользование при проведении обрат- Synthesis Kit. ной с использованием различных и PSTVd-1P/PSTVd-1M с продуктами планируемой величи- с праймерами 3H1-F/2H1-R находит- ной транскрипции праймера Oligo Были проведены также экспе- методов.

(K. Nakahara et al., 1998) ны в гелях наблюдались многочис- ся в пределах пятого разведения ин- (dT)16 имело некоторое преимуще- рименты по оптимизации синтеза Валидность продуктов ампли- Проведена всесторонняя отработ- ленные неспецифические полосы фекционного сока растений томата ство в плане получения более чистых кДНК PSTVd за счет использования фикации, полученных в тестах ка ПЦР с праймерами 3H1-F/2H1-R, и шмеры. При этом в варианте с на- (т.е. в 10 тысяч) и на один порядок продуктов амплификации по сравне- универсальных праймеров Oligo с праймерами PPSTV-1P/PPSTV-1M

рекомендуемыми диагностическими бором Screen Mix неспецифических уступает таковой у метода FLASH- нию с праймером Random (dN)6. Од- (dT)17, Oligo (dT)18, Random (dN)6 и 3H1-F/2H1-R, была подтверждена

протоколами ЕОКЗР и МСФМ. продуктов было меньше при исполь- ПЦР. нако при использовании праймера и Random (dN)10. В эксперименте их секвенированием.

По результатам отработки выде- зовании кДНК, синтезированной При использовании комплек- Random dN6 были получены визуаль- были использованы: РНК изоля-

ления РНК PSTVd констатировано с праймером Оligo (dT)16, a в вари- тов реагентов Screen Mix HS (Ев- но более концентрированные специ- тов PSTVd, выделенная набором Литература преимущество наборов для выде- анте с набором Encyclo PCR Kit — роген), Tersus PCR Kit (Евроген) фические полосы. «RNAqueous Kit» (Life Technologies); 1. Берлинчик Е.Е. Диагностика DR ления нуклеиновых кислот «НК- с праймером Random (dN)6. и Mas TaqMix-2025 (Диалат) ана- Специфические продукты плани- набор реагентов для обратной транс- вироида веретеновидности клубней М-Сорб» фирмы Синтол и «Про- При проведении ПЦР с набором литическая воспроизводимость руемой величины были получены крипции MMLV RT Kit (Евроген) картофеля визуальным и индикатор- ба-НК» фирмы АгроДиагностика по MagMIX-2025 (Диалат) значительно и повторяемость результатов ПЦР также с комплектом реагентов Long и набор реагентов для ПЦР «Tersus ными методами // Весцi Акад. навук сравнению с набором «RNAqueous более качественные специфические с праймерами 3H1-F/2H1-R соста- Range 2 Step RT-PCR Kit (Qiagen) при PCR Kit» (Евроген). Беларусi, 1997. № 3. С. 50–52. Kit» фирмы Life Technologies (США). продукты амплификации были по- вили 100%. использовании кДНК, синтезиро- Установлено, что синтез кДНК 2. Гирсова Н.В. Вироид вере- Это было установлено при после- лучены с кДНК, синтезированной В международных стандартах со- ванной набором реагентов фирмы PSTVd возможен со всеми испытан- теновидности клубней картофеля

дующей ОТ-ПЦР выделенной РНК с праймером Оligo (dT)16. держится требование о необходимо- АгроДиагностика. ными универсальными праймера- (Диагностика, сохранение инфек- с наборами для амплификации Неспецифические продукты ам- сти использования в скрининговых При проведении ПЦР с ком- ми. Однако наиболее качественные ционности и особенности передачи «MasDRTaqMix-2025» и «Tersus PCR плификации продуцировались так- и подтверждающих тестах различ- плектами реагентов Encyclo PCR специфические продукты получены патогена) // Автореферат дисс… кан- Kit» (Евроген). же при проведении ПЦР с набора- ных пар праймеров. В связи с этим Kit (Евроген) и Dream Taq Green с набором Maxima First Strand cDNA дидата биол. наук. Большие Вяземы, В предварительных эксперимен- ми реагентов Dream Taq Green PCR наряду с праймерами 3H1-F/2H1-R PCR (ThermoScientific) наряду со Synthesis Kit, содержащим смесь 2003. 24 с.

тах было установлено, что кДНК, Master Mix (ThermoScientific) и Long нами была отработана классиче- специфическими продуктами на- праймером Oligo (dT)16 и Random 3. Дрыгин Ю.Ф., Мусин С.М.,

синтезированная с использованием Range 2 Step RT-PCR Kit (Qiagen, Ни- ская ПЦР со специфическими прай- блюдалось образование неспеци­ (dN)6. Использование праймеров Кондакова О.А. Молекулярная диа-

комплекта реагентов для обратной дерланды) с использованием кДНК, мерами PРSTVd-1P/PРSTVd-1M фических продуктов и шмеров. Random (dN)6 и .Random (dN)10 имело гностика зараженности оздоровлен-

транскрипции фирмы АгроДиагно- синтезированной комплектом реа- (Nakahara et al., 1998), которые ам- Для данных наборов реагентов некоторое преимущество в аспекте ных сортообразцов картофеля виро- стика, не всегда пригодна для по- гентов для обратной транскрипции плифицируют продукт величиной констатирована необходимость получения более качественных спец- идом веретеновидности клубней // следующей ПЦР с праймерами 3H1- Maxima First Strand cDNA Synthesis 300 п.о. детальной оптимизации термо- ифических продуктов, по сравнению Доклады Россельхозакадемии, 1996. F/2H1-R. Kit (ThermoScientific). Констатиро- В экспериментах с этими прай- циклических режимов. с использованием праймеров Oligo № 6. С. 24–25.

В последующих экспериментах вано, что для данных наборов реа- мерами реакцию обратной транс- Для проведения ПЦР с набором (dT)17 и Oligo (dT)18. 4. Кастальева Т.Б., Можаева К.А., кДНК изолятов PSTVd синтезиро- гентов необходимо оптимизировать крипции проводили с наборами реагентов Tersus PCR Kit была испы- Установлено также, что для ПЦР Писецкая Н.Ф., Романова С.А., Тро- вали набором реагентов для обрат- термоциклические режимы ампли- MMLV RT Kit (Евроген), First Strand тана кДНК, синтезированная пятью с праймерами PPSTV-1P/PPSTV-1M фимец Л.Н. Вироид веретеновидно- ной транскрипции MMLV RT Kit фикации и прежде всего — темпера- cDNA Synthesis Kit (ThermoScientific), комплектами реагентов для обрат- выделение РНК изолятов PSTVd сти клубней и оздоровление карто- (Евроген, Россия). Синтез кДНК туру отжига праймеров. Maxima First Strand cDNA Synthesis ной транскрипции MMLV RT Kit, может эффективно осуществляться феля // Вестник РАСХН, 1992. № 3. проводили с универсальными прай- Установлено существенное влия- Kit (ThermoScientific), Sensiscript RT Sensiscript RT Kit, First Strand cDNA с наборами реагентов для экстрак- С. 3–5. мерами для обратной транскрипции ние количества циклов амплифика- Kit (Qiagen) и комплектом реагентов Synthesis Kit — с праймером Random ции нуклеиновых кислот «Про- 5. Кастальева Т.Б., Гирсова К.А.,

Оligo (dT)16 и Random (dN)6, a также ции на эффективность выявления для обратной транскрипции фирмы dN6, фирмы АгроДиагностика — ба-НК» (АгроДиагностика), «НК-М- Можаева К.А., Овенс Р.А. Особен- со специфическим антисмысловым PSTVd и качество амплифицируе- АгроДиагностика (Россия). с праймером Random (химическая Сорб» (Синтол) и «RNAqueous Kit» ности российских изолятов ви- праймером 2H1-R. Последующую мых специфических продуктов. Для При постановке реакции обрат- формула праймера фирмой-про- (Life Technologies). роида веретеновидности клубней амплификацию проводили с ше- большинства испытанных набором ной транскрипции испытывали уни- изводителем не разглашается) Аналитическая чувствительность картофеля (ВВКК) // Интегриро-

стью комплектами реагентов для реагентов при 30 циклах амплифи- версальные праймеры: Oligo (dT)16, и Maxima First Strand cDNA Synthesis классической ПЦР с праймерами ванная защита растение: стратегия

ПЦР фирм Евроген и Диалат (Рос- кации концентрация специфиче- Oligo (dT)17, Oligo (dT)18, Random Kit, содержащим в составе реакци- PPSTV-1P/PPSTV-1M находится и тактика/материалы междунар.

сия). ского продукта была очень низкой (dN)6 и Random (dN)10. онной смеси праймеры Oligo (dT)18 в пределах четвертого разведения научно-практ. конф., посвященной

Установлено, что синтез кДНК вне зависимости от способа синтеза Последующую амплификацию и Random (dN)6. инфекционного сока растений тома- 40-летию РУП «Институт защиты вироида возможен со всеми тремя кДНК. Наиболее качественные спец- проводили с комплектами реаген- По результатам эксперимента та и несколько уступает в этом аспек- растений». Минск, 5–8 июля 2011 г. вышеназванными праймерами, но ифические продукты были получены тов Tersus PCR Kit, Screen Mix HS, констатирована возможность син- те ПЦР с праймерами 3H1-F/2H1-R. С. 523–526.

34 4| 14| 2015 КАРАНТИН РАСТЕНИЙ КАРАНТИН РАСТЕНИЙ 3| 13| 2015 35 6. Кондакова О.А., Дрыгин Ю.Ф. curl geminiviroid strains from a wild potato spindle tuber viroid (PSTVd) is Potato spindle tuber viroid (PSTVd) in mission of potato spindle tuber viroid Heilongjiang, China // Am. Potato J. Диагностика вироидного заболева- Solanum sp. // Phytopathology. Vol. 86. not strictly conserved but is variable as Brugmansia spp., Solanum jasminoides, assisted by potato leafroll virus // Fito- Vol. 68. P. 65–74. ния картофеля зондами (диен)Pt- P. 880–886. in other viroids // Plant Molecular Biol- Solanum muricatum and Petunia spp. patologia. Vol. 30. P. 56–58. 59. Singh R.P., Boucher A., Somer- ДНК // Биотехнология, 1999. № 4. С. 16. Bernardy R.G., Jacoli G.G., Ra- ogy. Vol. 19. P. 329–333. in the Czech Republic // New Disease 48. Schroeder M., Weidemann H.L. ville T.H. (1992) Detection of potato 83–91. getli H.W. (1987) Rapid detection of 28. ISPM (2006) Potato spindle tu- Reports. Vol. 19. (1989) Simplified application of return spindle tuber viroid in the pollen and 7. Краснова М.В. Вироид верете- potato spindle tuber viroid by dot blot ber viroid. International Standard for 38. Morris T.J., Smith E.M. (1977) gel electrophoresis for the routine de- various parts of potato plant pollinated новидности клубней картофеля в Се- hybridization // J. Phytopathol. Vol. 118. Phytosanitary Measures. 27 sw. Potato spindle tuber disease: procedures tection of potato spindle tuber viroid // with viroid-infected pollen // Plant Dis- веро-Западном регионе Российской P. 171–180. 29. Khan M.S., Timmermann C., for the detection of viroid RNA and cer- Bulletin OEPP/EPPO Bulletin. Vol. 19. ease. Vol. 6. P. 951–953. Федерации // Автореферат дисс… 17. Blotskaya Z.V., Berlinchik E.E. Hoque M.I., Sarker R.H., Muhlbach H.P. tification of disease-free potato tubers // P. 661–665. 60. Vassilakos N., Kektsidou O., кандидата биол. наук. Санкт-Петер- (1998) Occurrence and harmfulness of (2009) Detection of potato spindle tuber Phytopathology. Vol. 67. P. 145–150. 49. Schumacher J., Meyer N., Papaeythimiou M., Varveri C. (2012) бург, 2000. 23 с. Potato spindle tuber viroid (PSTVd) in viroid (PSTVd) in minute amounts of 39. Mumford R.A., Walsh K., Boon- Riesner D., Weidemann H.L. (1986) Comparison of direct-RT-PCR and 8. Леонтьева Ю.А. Веретеновид- the Republic of Belarus // Arch. Phyto- potato (Solanum tuberosum L.) leaf tis- ham N. (2000) A comparison of molec- Diagnostic procedure for detection of dot-blot hybridization for the detection ность клубней (готика) — одно из path. Pflanz. Vol. 31. P. 453–457. sue by hybridization techniques and, to- ular methods for the routine detection viroids and viruses with circular RNAs of Potato spindle tuber viroid in natural основных вирусных заболеваний 18. Candresse T., Macquaire G., gether with potato viruses, by multiplex of viroids // Bulletin OEPP/EPPO Bul- by return-gel electrophoresis // J. Phyto- host plant species // Eur. J. Plant Pathol. картофеля в Поволжье // Авторефе- Brault V., Monsion M., Dunez J. (1990) RT-PCR // J. Plant Dis. and Protection. letin. Vol. 30. P. 431–435. path. Vol. 115. P. 332–343. Vol. 134. P. 859–864. рат дисс… доктора биол. наук. Пуш- 32P- and biotin-labelled in vitro tran- Vol. 116. P. 97–105. 40. Nakahara K., Hataya T., Hayashi 50. Shamloul A.M., Hadidi A., Zhu 61. Verhoeven J.T., Roenhorst J.W. кин, 1971. 43 с. scribed cRNA probes for the detection 30. Kolchinsky A., Kolesnikova M., Y., Sugimoto T., Kimura I., Shikata E. S.F., Singh R.P., Sagredo B. (1997) Sen- (1995) Virological risks accompany- 9. Можаева К.А., Мелдраис Ю.А., of potato spindle tuber viroid and chry- Ananiev E. (1991) Portraying of plant (1998) A mixture of synthetic oligonu- sitive detection of potato spindle tuber ing the increased interest in pepino Друка А.Я., Кастальева Т.Б., Лайн santhemum stunt viroid // Research in genomes using polymerase chain re- cleotide probes labeled with biotin for viroid using RT-PCR and identification (Solanum muricatum). Proceedings И.Е., Васильева Т.Я. Сравнительное Virology. Vol. 141. P. 97–107. action amplification of ribosomal 5S the sensitive detection of potato spindle of a viroid variant naturally infecting of the 8th Conference on Virus Dis- изучение различных диагностиче- 19. Catley A. (1987) Outbreaks and genes // Genome. Vol. 34. P. 1028–1031. tuber viroid // J. Virol. Methods. Vol. 71. pepino plants // Can. J. Plant Pathology. eases of Vegetables, Prague (CZ). ских методов для вироида верете- new records. Australia: eradication of 31. Lakshman D.K., Hiruki C., Wu P. 219–227. Vol. 19. P. 89–96. P. 109–112. новидности клубней картофеля // potato spindle tuber viroid // FAO Plant X.H., Leung W.C. (1986) Use of 32P RNA 41. OEPP/EPPO (2004) Standard 51. Singh R.P. (1970) Seed trans- 62. Verhoeven J.T., Jansen C.C., Научные Доклады Высшей Школы. Prot. Bull. Vol. 35. P. 32-33. probes for the dot-hybridization detec- PM 7/33 (1) Potato spindle tuber pos- mission of potato spindle tuber virus Roenhorst J.W. (2008a) First report Биологические Науки, 1989. № 7. С. 20. CIP (1993) Detection PSTVd / tion of potato spindle tuber viroid // J. piviroid. Diagnostic protocol for regu- in tomato and potato // Am. Potato J. of pospiviroids infecting ornamentals 104–110. Basic techniques in plant virology. In- Virol. Methods. Vol. 14. P. 309-319. lated pests // Bulletin OEPP/EPPO Bul- Vol. 47. P. 225–242. in the Netherlands: Citrus exocortis 10. Можаева К.А., Васильева Т.Я., ternational Potato Center (CIP). 1993. 32. Lebas B.S., Clover G.R., letin. 2004. Vol. 41. P. 394–399. 52. Singh R.P. (1973) Experimental viroid in Verbena sp., Potato spindle Кастальева Т.Б. Распространение 19 s. Ochoa-Corona F.M., Elliott D.R., Tang 42. OEPP/EPPO (2011) Standard host range of the potato spindle tuber tuber viroid in Brugmansia suaveolens вироида веретеновидности клубней 21. Di Serio F. (2007) Identification Z., Alexander B.J. (2005) Distribution of PM 9/13 (1) Potato spindle tuber viroid «virus» // American Potato J. Vol. 50. and Solanum jasminoides, and Tomato при получении безвирусного карто- and characterization of potato spindle potato spindle tuber viroid in New Zea- on potato. National regulatory control P. 111–123. apical stunt viroid in Cestrum sp. / Plant феля // Защита растений в условиях tuber viroid infecting Solanum jas- land glasshouse crops of capsicum and systems // Bulletin OEPP/EPPO Bulle- 53. Singh R.P. (1984) Solanum ber- Pathology. Vol. 57. P. 399-400. реформирования агропромышлен- minoides and S. rantonetti in Italy // tomato // Australian Plant Pathology. tin. 2011. Vol. 34. P. 394–399. thaultii, a sensitive host for indexing po- 63. Verhoeven J.T., Jansen C.C., ного комплекса: экономика, эффек- Journal of Plant Pathology. Vol. 89. P. Vol. 34. P. 129–133. 43. Puchta H., Herold T., Verho- tato spindle tuber viroid from dormant Roenhorst J.W. (2008b) Streptosolen тивность, экологичность / Тезисы 297–300. 33. Lenarcic R., Morisset D., Mehle even K., Roenhorst A., Ramm K., tubers // Potato Research. Vol. 27. jamesonii ‘Yellow’, a new host plant of докладов Всероссийского съезда по 22. Diener T.O., Raimer W.B. (1967) N., Ravnikar M. (2013) Fast real-time Schmidt-Puchta W., Sanger H.L. (1990) P. 163–172. Potato spindle tuber viroid // Plant Pa- защите растений. Санкт-Петербург, Potato spindle tuber virus. A plant virus detection of Potato spindle tuber vi- A new strain of potato spindle tuber 54. Singh R.P., Finnie R.E. (1977) thology. Vol. 57. P. 399. 1995. С. 67–68. with properties of a free nucleic acid // roid by RT-LAMP Plant Pathology 62, viroid (PSTVd-N) exhibits major se- Stability of potato spindle tuber viroid 64. Verhoeven J.T., Botermans M., 11. Можаева К.А., Васильева Т.Я., Science. Vol. 158. P. 847–895. 1147–1156. quence differences as compared to all in freeze-dried leaf powder // Phytopa- Roenhorst J.W., Westerhof J., Meekes Кастальева Т.Б. Заражение томатов 23. EPPO/CABI (1997) Potato spin- 34. Lykke Nielsen S., Enkegaard A., other strains sequenced so far // Plant thology. Vol. 676. P. 283–286. E.T. (2009) First report of Potato spindle вироидом веретеновидности // Вест- dle tuber viroid // In: Quarantine Pests Nicolaisen M., Kryger P., Virvsvcek M. Molecular Biology. Vol. 15. P. 509–511. 55. Singh R.P., Boucher A. (1987) tuber viroid in Cape gooseberry (Physa- ник РАСХН, 1996. № 3. С. 57–58. for Europe, 2nd edn., CAB Internation- Marn, Mavrivc Plevsko I., Kahrer A., 44. Querci M., Owens R.A., Var- Electrophoretic separation of severe lis peruviana) from Turkey and Germa- 12. Романова С.А., Можаева К.А., al, Wallingford (GB). Gottsberger R. (2012) No transmission gas C., Salazar L.F. (1995) Detection of from mild strains of potato spindle tu- ny // Plant Disease. Vol. 93. P. 316. Рейфман В.Г., Леднева В.А. Вироид 24. Fernow K.H., Peterson L.C., of Potato spindle tuber viroid shown Potato spindle tuber viroid in avocado ber viroid // Phytopathology. Vol. 77. 65. Verhoeven J.T., Jansen C.C., веретеновидности клубней картофе- Plaisted R.L. (1969) The tomato test for in experiments with thrips (Franklin- growing in Peru // Plant Disease. Vol. P. 1588–1591. Botermans M., Roenhorst J.W. (2010a) ля на Дальнем Востоке // Проблемы eliminating spindle tuber from potato iella occidentalis, Thrips tabaci), honey 79. P. 196–202. 56. Singh R.P., Сrowley C.F. (1985) Epidemiological evidence that vegeta- фитовирусологии на Дальнем Восто- planting stock // American Potato J. Vol. bees (Apis mellifera) and bumblebees 45. Querci M., Owens R.A., Barto- Successful management of potato tively-propagated, solanaceous plant ке. 1996. С. 41–47. 46. P. 424–429. (Bombus terrestris) European Journal lini I., Lazarte V., Salazar L.F. (1997) Evi- spindle tuber viroid in seed potato species act as sources of Potato spindle 13. Терещенко О.И. Нова хвороба 25. Fernow K.H., Peterson L.C., of Plant Pathology 02/2012; 133 (3): dence for heterologous encapsidation of crops // Can. Plant Dis. Surv. Vol. 65. tuber viroid inoculum for tomato // картоплi // Сад та город. 1937. № 10. Plaisted R.L. (1970) Spindle tuber virus 505–509. potato spindle tuber viroid in particles P. 9–10. Plant Pathology. Vol. 59. P. 3–12. С. 13–17. in seeds and pollen of infected plants // 35. Mackie A.E., McKirdy S.J., Ro- of potato leafroll virus // Journal of 57. Singh R.P., Boucher A., Sea- 66. Weidemann H.L., Buchta U. 14. Яковлева Г.А. Вироид верете- American Potato Journal. Vol. 47. P. 75– doni B. & Kumar S. (2002) Potato spin- General Virology. Vol. 78. P. 1207–1211. brook J.E. (1988) Detection of the mild (1998) A simple and rapid method for новидности клубней картофеля. Те- 80. dle tuber viroid eradicated in Western 46. Salazar L.F., Owens R.A., Smith strains of potato spindle tuber viroid the detection of Potato spindle tuber стирование коллекции сортов и ди- 26. Grasmick M.E., Slack S.A. Australia. Australasian Plant Pathology, D.R., Diener T.O. (1983) Detection of from single true potato seed by return viroid (PSTVD) by RT-PCR // Potato ких видов картофеля, депонируемой (2011) Effect of potato spindle tuber vi- 31: 311–312. potato spindle tuber viroid by nucle- electrophoresis // Phytopathology. Vol. Research. Vol. 41. P. 1–8. in vitro в БелНИИ картофелеводства roid on sexual reproduction and viroid 36. McInnes J.L., Habili N., Symons ic acid spot hybridization with tuber 78. P. 663–667. 67. Werner-Solska J. (1983) The // Известия Академии аграрных наук transmission in true potato seed Cana- R.H. (1989) Nonradioactive, photobi- sprouts and true potato seed // Amer- 58. Singh R.P., Boucher A., Wang transmission of Potato spindle tuber Республики Беларусь, 2001. № 1. С. dian Journal of Botany 01/2011; 64 (2): otin-labelled DNA probes for routine ican Potato J. Vol. 60. P. 587–597. R.G. (1991) Detection, distribution and viroid by insects – in the light of the lit- 45–49. 336–340. diagnosis of viroids in plant extracts // 47. Salazar L.F., Querci M., Barto- long-term persistence of Potato spindle erature // Biuletyn Instytutu ziemniaka. 15. Behjatnia S.A., Dry I.B., Krake 27. Herold T., Haas B., Singh R.P., J. Virol. Methods. Vol. 23. P. 299–312. lini I., Lazarte V. (1995) Aphid trans- tuber viroid in true potato seed from Vol. 29. P. 57–62. L.R., Conde B.D., Connelly M.I., Ran- Boucher A., Sanger H.L. (1992) Se- 37. Mertelik J., Kloudova K., Cer- dles J.W., Rezaian M.A. (1996) New po- quence analysis of five new field isolates vena G., Necekalova J., Mikulkova H., tato spindle tuber viroid and tomato leaf demonstrates that the chain length of Levkanicova Z. (2009) First report of

36 4| 14| 2015 КАРАНТИН РАСТЕНИЙ КАРАНТИН РАСТЕНИЙ 4| 14| 2015 37 According to ISPM 27, three differ- within 3-4 klx at 18-23 °C and min- This method allows detection of up ent options are available for PSTVd de- imum humidity of 60%. In 8-14 days, to 800 pg viroid RNA per 1 g of tested DETECTION AND tection and identification: local necrosis develops on the inoculat- plant tissue (Schumacher et al., 1986), 1. Screening test by R-PAGE or nu- ed Scopolia leaves. detection of viroid in single true potato cleic acid hybridization or PCR with Indicator plants with a short incu- seed (Singh et al., 1988) and diagnose IDENTIFICATION OF POTATO universal primers and probes for the bation period have been identified: viroid strains (Singh, Boucher, 1987). genus Pospiviroid; a confirmatory test petunia, artichoke, tomato of the Sliv- For wide application a simplified using PCR, sequencing of amplification ochny and Agata varieties. Diagnostic version of the test, developed by M. SPINDLE TUBER VIROID products. regimes for these indicators have been Schroeder, H. Weidemann (1989) is 2. Screening test by PCR with elec- developed: at 24-27 °C, 16-hour light recommended. Svetlana B. Abrosimova, Junior Researcher at FGBU VNIIKR’s trophoretic results detection or real day, light intensity of 5000-7000 lux However, PSTVd RNA and other po- Plant Pathology Research and Methodology Department time PCR with PSTVd specific primers to induce reaction by the 7th – 10th day spiviroid are almost identical with the and probes; confirmation test by PCR (Krasnov, 2000). molecular weight, so this method does Yury N. Prikhodko, Chief of FGBU VNIIKR’s with another pair of primers, sequenc- It was also shown that the Volgograd not allow identification to the species Plant Pathology Research and Methodology Department ing of amplification products. 5/95 tomato variety could be used as level, and should be combined with a 3. Bioassay of herbaceous indica- an indicator plant since it exhibits the confirmatory analysis by PCR method.

o tor-plants; if the symptoms are pres- symptoms earlier and its stunted growth End of the article. Beginning of the article in “Plant Health. Research and Practice” Magazine Issue N 3 (13). ent — a confirmatory test using PCR, is more obvious than in the Rutgers to- Hybridization of nucleic acids sequencing of the amplification prod- mato variety which is traditionally used The method is based on the ability ucts (ISPM, 2006). as an indicator plant for PSTVd (Girs- of cDNA viroid to form hybrid with Thus, the main methods of PSTVd ova, 2003). native molecule, immobilized on a sol- detection are bioassays of indicator We have succeeded in transferring id or liquid membranes. The resulting plants, polyacrylamide gel electropho- PSTVd isolate from an infected potato complex is detected with the probe ra- resis, nucleic acid hybridization and plant into tomato plants of the Mona dioactive, enzymatic or fluorescent tag polymerase chain reaction. Visual detection and identification tubers were more prone to various rots at later stages of the disease. Not all in- The main methods of PSTVd detection are bioassays of of symptoms and did not store well (Girsova, 2003). fected tubers exhibit all or even any of Bioassays of indicator plants indicator plants, polyacrylamide gel electrophoresis, nucleic In potato, symptoms of PSTVd de- Tubers of infected potato plants gen- the abovementioned symptoms. On the Usually, healthy tomato plants of the pend on strain, cultivar, environment erally decrease in size and may be elon- other hand, healthy tubers of a number Rutgers variety are used in bioassays. acid hybridization and polymerase chain reaction. and mode of infection. gated, deformed, cracked, curled and of potato varieties may become spin- The Allerfruheste-Freiland, Sheyenne PSTVd strains can cause mild or se- dumbbell-shaped (Fig. 2-3). On the dle-shaped. There are also instances of (Fernow et al., 1969), Dokhodny, Per- Lisa and Malinovka varieties showing (Salazar et al., 1983; Lakshman et al., vere symptoms based on their aggres- tuber surface, cracks are arranged in various tuber anomalies in greenhouse emoga tomato varieties (Berlinchik, the typical symptoms of infection (Fig. 1986; Bernardy et al., 1987; McInnes et siveness. parallel with the main axis. Reticulate grown potato (Kastaleva et al., 1992; 1997) are also recommended (Berlin- 5), and from inoculated tomato plants al., 1989; Candresse et al., 1990; Khan Plants infected with a mild strain tuber becomes smooth, and turns from Yakovleva, 2001; EPPO/CABI, 1997). chik, 1997). into datura plants (Datura stramonium) et al., 2009). A probe is designed using sometimes show no visible symptoms. red to pink, purple to light-purple. Eyes Taking into consideration the above- When carrying out a conventional and several Nicotiana species – N. taba- a diene-platinum tag, allowing detec- Manifestation of symptoms of severe in infected tubers are more abundant mentioned factors, visual diagnostics of test, young leaves of tomato plants are cum, N. tabacum (variety Xanthii) and tion of 0.3 pg RNA viroid (Drygin et al., strain infection often depends on envi- with protruding “eyebrows”. Necrotic PSTVd symptoms is only of secondary mechanically inoculated with the sap N. rustica. The inoculum was prepared 1996; Kondakova, Drygin, 1999). ronmental conditions. The symptoms spots often appear around lenticels. Tu- importance, and detection and identi- of test samples. Plants are maintained in potassium phosphate buffer (PBS) are more severe at high temperatures ber tissue necrosis may occur. Infected fication of the viroid should be carried in a greenhouse under intensive light- with pH 7.4. Polymerase chain reaction (PCR) and may start as mild and become more tubers germinate slower than healthy out using laboratory analysis (OEPP/ ing and at the minimum temperature Inoculated D. stramonium plants Currently for PSTVd diagnosis most severe in the next generations. tubers (Yakovleva, 2001; EPPO/CABI, EPPO, 2004). of 30°C. In 2-4 weeks, the plants exhib- developed local necrosis and systemic commonly are used molecular tech- Severely infected potato plants have 1997; OEPP/EPPO, 2004). According to the current EPPO stand- it the characteristic symptoms: shoot leaf chlorosis, and inoculated Nicotia- niques based on PCR. thin upright shoots. Axillary buds may Stunted growth and distortion of ard PM 7/33 (1) (OEPP/EPPO, 2004), the deformation at its lower portion, wrin- na plants – systemic vein yellowing, in- In the EPPO Diagnostic protocol proliferate to give symptoms similar plants caused by shorter internodes are following methods are recommended as kling and folding of leaves, dwarfism, terveinal chlorosis and rarely light green PM 7/33 (1) (EPPO/OEPP 2004) and to those of witches’ broom. Leaves are the first symptoms in tomato plants. primary (screening) tests for PSTVd de- and vein necrosis. These symptoms are mosaic (Fig. 6-8). The viroid presence ISPM Standard № 27 (ISPM, 2006) to smaller with wavy edges and the ten- Apical leaves turn yellow, reddish or tection: polyacrylamide gel electropho- observed only in the case of infection in the inoculated plants was confirmed detect PSTVd in the format of a classical dency to bend inward. Their color may purple and often rollup. Necrosis of low- resis (R-PAGE), nucleic acid hybridi- with a severe strain. Plants infected with by PCR. RT-PCR recommended to use specific change to dark green (Fig. 1). In infect- er and middle leaves is observed. Top zation (DIG probe), conventional PCR a mild strain are hardly distinguishable primers 3H1-F/2H1-R (Shamloul et al., ed plants, lower leaves are much short- leaves do not die, but decrease in size with electrophoretic results detection from healthy plants. Polyacrylamide gel electrophoresis 1997; Weidemann, Buchta, 1998) as well er and more erect compared to those (Fig. 4). Flowering and fruit formation (RT-PCR) or real time PCR (TaqMan When conducting the modified Electrophoretic detection of low mo- as primers PLANT-UNI/ PLANT-UN2 of healthy plants lower leaves of which stop. Fruits are hard, small, dark green RT-PCR). If the test gives a positive re- Yang et Hooker (CIP, 1993) bioassay, lecular weight viroid RNA in the total (Kolchinsky et al., 1991) for internal are usually on the ground. Plants are (Mackie et al., 2002). sult for the viroid, confirmation by one mechanically inoculated tomato plants nucleic acid sample to be analyzed is control. These primers allow obtaining markedly stunted (EPPO/CABI, 1997; PSTVd-infected pepper plants, as a of the following methods not used as pri- are kept at 24-30 °C with continuous recognized the most rapid technologi- the product sized 359 bp, which corre- OEPP/EPPO, 2004). rule, do not exhibit severe symptoms mary tests should be performed. When lighting of about 1 klx. Infected toma- cal method of diagnosis PSTVd (OEPP/ sponds to the complete genome PSTVd. In PSTVd-infected plants of the although leaf deformation at top shoots R-PAGE is used as a primary method to plants exhibit albinism with bended EPPO, 2004). The test is conducted in Primers 3H1-F/2H1-R, passed the potato varieties Lugovskoy Nevsky, is usually present (Lebas et al., 2005). which is not species-specific, PCR should leaves. In the case of severe strain infec- a bidirectional format (or reverse) elec- international inter-laboratory testing, Pribrezhy and Utionok, stem and leaf PSTVd infection in solanaceous orna- be used as a confirmatory test. When the tion, vein necrosis also develops. trophoresis in the polyacrylamide gel. are widely used today for the examina- growth ended earlier, budding and flow- mentals is generally latent (Verhoeven viroid is detected for the first time and As an indicator of local reaction to The first electrophoresis is performed tion of regulated products, seed certifi- ering occurred faster and as a conse- et al., 2008 a, b). in other critical situations (e.g., detection PSTVd plants of scopolia (Scopolia sin- under native conditions, and the sec- cation of Solanaceae crops and research. quence earlier top dying was observed. Visual identification of viroid in in- in imported seed material), sequencing ensis) are also recommended (Mozhae- ond – in the reverse direction under The disadvantage of these primers is In heavily infested plants, reproductive fected plants and tubers is usually pos- of the amplification products is recom- va et al., 1989). These are maintained in denaturing conditions (Schumacher et their incomplete species specificity, organs may not form. Viroid-infected sible only in case of severe strains and mended. a greenhouse under moderate lighting al., 1986). since along with PSTVd they also re-

38 4| 14| 2015 КАРАНТИН РАСТЕНИЙ КАРАНТИН РАСТЕНИЙ 4| 14| 2015 39 Analytical reproducibility and re- Testing diagnostic of PSTVd proposed value in the gels there were peatability of the tests by the kit for by the method of classical PCR numerous nonspecific bands and FLASH-PCR to PSTVd was 100%. with primers 3H1-F/2H1-R smears. In this variant with a kit of The possibility of using nucleic acid (A. Shamloul et al., 1997) Screen Mix nonspecific products were preparations prepared for bacteriolog- и PSTVd-1P/PSTVd-1M less while using the cDNA synthesized

ical examination (shaking of tubers (K. Nakahara et al., 1998) with primer Оligo (dT)16, and in variant samples in a buffer, centrifuging the sus- A comprehensive testing of PCR with with Encyclo PCR Kit – with the Ran-

pension, the selection of nucleic acid by primers 3H1-F/2H1-R is recommend- dom (dN)6 primer. Proba-GS and M-Sorb-Automatic-Tub) ed by the diagnostic protocols of EPPO In carrying out PCR with kit Mag- kits, and also to identify PSTVd. In sev- and ISPM. MIX-2025 (Dialat) significantly more eral experiments viroid detection was As a result of testing of RNA PST- qualitative specific products of amplifi- achieved without the isolation of nucle- Vd isolation it was stated the advantage cation were obtained from cDNA syn-

ic acids directly in the centrifuged sus- of the kits for isolation of nucleic acids thesized with primer Оligo (dT)16. pension, but the reproducibility of these NC-M-Sorb of Syntol firm and Pro- Non-specific amplification products results was not high enough. ba-NK AgroDiagnostika firm compared were produced during the PCR with with a kit of RNAqueous Kit of the Life the reagent kit Dream Taq Green PCR Validation of the diagnostic kit Technologies firm (US). It was found Master Mix (ThermoScientific) and PSTVd for PCR in real time of the during the subsequent RT-PCR of the Long Range 2 Step RT-PCR Kit (Qiagen, Synthol firm isolated RNA with amplification kits Netherlands) with the use of cDNA, In the kit of Syntol firm the reverse MasDRTaqMix-2025 and Tersus PCR synthesized with reagent kit for the re- Fig. 8. Symptoms of vein yellowing and interveinal chlorosis on N. rustica (on the taining primer Random, MMLV RT Kit transcription is combined in a single Kit (Evrogen). verse transcription Maxima First Strand left) and N. tabacum (Xanthii variety) (on the right), inoculated with PSTVd MT-08 (2) isolate from a tomato plant of the Mona Lisa variety (FGBU VNIIKR Quarantine (Evrogen, Russia), containing primers tube with polymerase chain reaction, In preliminary experiments, it was cDNA Synthesis Kit (ThermoScientif- greenhouse, 2015, photo by the authors) Oligo (dT)17 and Random dN10 and the which reduces the possibility of con- found that cDNA synthesized using the ic). It was stated that for these kits it is Maxima First Strand cDNA Synthesis tamination and reduces the duration of reagent kit for reverse transcription of necessary to optimize thermal-cycling Рис. 8. Симптомы пожелтения жилок и межжилкового хлороза Kit (ThermoScientific, the USA), con- the tests. the firm AgroDiagnostika, is not always amplification modes, and above all — на растениях N. rustica (слева) и N. tabacum (сорт Xanthii) (справа), taining primers Oligo (dT) and Ran- During the validation the nonspe- suitable for the subsequent PCR with temperature of annealing of primers. инокулированных изолятом PSTVd MT-08 (2) c растения томата сорта Мона 18 dom (dN) . cific reactions used in the primer kit primers 3H1-F/2H1-R. Significant effect of the numbers of Лиза (карантинная теплица ФГБУ «ВНИИКР», апрель 2015 г., фото авторов) 6 The kit for FLASH-PCR to the PST- with various viruses infecting potato In subsequent experiments, cDNA of cycles of amplification on the detection Vd of the AgroDiagnostika allows de- efficiency PSTVd and the quality of the act with the other three pospiviroids – are produced by domestic firms Agro- tection of all viroid isolates in fresh Currently for PSTVd diagnosis most commonly amplified specific products was found. Mexican papita viroid (MPVd), Tomato Diagnostika (formats FLASH-PCR and and frozen at -80 °C leaves and tubers For most of tested by the reagent kits chlorotic dwarf viroid (TCDVd) and real-time PCR) and Syntol (the format of potato plants and tomato leaves. The are used molecular techniques based on PCR. at 30 cycles of amplification the con- Tomato planta Macho viroid (TPM- of real-time PCR). false-positive reaction with similar bod- centration of the specific product was Vd) (ISPM, 2006). For potato it is not At FGBU VNIIKR’s Plant Pathology ies of healthy potato and tomato plants were not observed: PVY, PVS, PVM, PSTVd isolates was synthesized by the very low, regardless of the method of a significant problem, as the culture of Research and Methodology Depart- was not observed. PMTV, APMoV, APLV, PYDV, PAMV kit of reagents for reverse transcription cDNA synthesis. Most quality-specific pospiviroids infects only PSTVd. How- ment testing of complex issues was con- With using of the test kit it was deter- and PBRSV. MMLV RT Kit (Evrogen, Russia). Syn- products were obtained during 35 cy- ever, tomato identified a complex of ducted to identify PSTVd by methods mined that PSTVd is localized in vari- The analytical sensitivity of this kit is thesis of cDNA was performed with the cles of amplification. By increasing the pospiviroids, which necessitates of ob- of classical PCR, FLASH-PCR and PCR ous tissues of infected potato tubers: in within the sixth dissolving of infectious universal primers for reverse transcrip- number of cycles up to 40 the number of ligatory sequencing of the amplification in real time. eyeholes, on the skin of the stolons of juice of tomato plants and the seventh tion Oligo (dT)16 and Random (dN)6, non-specific products and smears sig- products. We used isolates PSTVd, provided tubers, in the pulp adjacent to the vas- dissolving of purified RNA viroid. and with a specific antisense primer nificantly increased. Primers for classical RT-PCR to by employees of VNIIF and VNIIKH, cular ring, and in the core of tubers. All Analytical reproducibility and re- R-2H1. The subsequent amplification Identification of PSTVd in juice sam- separate sections of the genome or the for which the authors express their deep these tuber tissues may be used for vi- peatability of results when using a test was performed with six reagent kits for ples deposited on the membrane for complete genome PSTVd has also been appreciation. roid detecting. kit were 100%. PCR of companies Evrogen and Dialat archiving nucleic acids was achieved at developed by a number of other authors The high specificity of this kit is de- It was found that for the tests with (Russia). a combination of reverse transcription (Querci et al., 1995, 1997; Behjatnia et Testing of PSTVd diagnostic tected, as there was no cross-reactiv- the kit reagents the purification of RNA It is found that the synthesis of Maxima First Strand cDNA Synthesis al., 1996; Nakahara et al., 1998; Wei- by FLASH-PCR ity with closely related to pospiviroid viroid may be carried out with a variety cDNA viroid is possible with all three Kit of the ThermoScientific (containing demann, Buchta, 1998; Di Serio et al., It was found that during the test with Chrysanthemum stunt viroid (CSVd), of kits for nucleic acid isolation Pro- above-mentioned primers, but the a mixture of primers ОТ Оligo (dT)18 and

2007; Khan et al., 2009; Vassilakos et al., a kit of FLASH-PCR to PSTVd by the as well as with different viruses in- ba-NK, Proba-GS (AgroDiagnostika) quality of the amplification products is Random (dN)6) and the kit of reagents 2012, etс.). firm AgroDiagnostika the effective pu- fecting potato: PVX, PVS, PVM, PVY, NC-M-Sorb, M-Sorb-Tube-Automatic dependent on the used reagent kits for for PCR MasDRTaqMix-2025 (Dialat). In the EPPO Diagnostic Protocol rification of RNA viroid is achieved by APMoV, APLV, PYDV, PMTV, PAMV, (Syntol), RNAqueous Kit (Life Technol- PCR. It was found that analytical sensi- PM 7/33 (1) for diagnosis of PSTVd it is kits for nucleic acid isolation of domes- related to the genera of poteksvirus, ogies). Most qualitative specific amplifi- tivity of the classical PCR with primers recommended to use the PCR in “real tic manufacturers: Proba-NK, Proba-GS komovirus, karlovirus, tymovirus and The kit for real-time-PCR of the cation products were obtained with a 3H1-F/2H1-R is within the fifth dilu- time” method, developed by R. Mum- (AgroDiagnostika) and NC-M-Sorb furovirus. Syntol firm can detect PSTVd in fresh reagent kits: Screen Mix HS (Evrogen), tion of the infectious juice of tomato ford et al. (2000). (Syntol) during manual cleaning, as well The sensitivity of this method is very and frozen at -80 °C leaves and tubers Tersus PCR Kit (Evrogen) and Mas- plants (i.e. 10 thousand) and one time The Loop-mediated Isothermal Am- as by the kit of M-Sorb-Tube-automatic high. In our experiments, detection of potato plants, the leaves of tomato DRTaqMix-2025 (Dialat). Thus in these less than with that of the FLASH-PCR plification Method (LAMP), adapted (Syntol) – on the automatic station for of viroid was achieved at a dilution of plants, Nicotiana tabacum and Datura variants, use of primer Оligo (dT)16 and method. 6 for PSTVd diagnosis (Lenarcic et al., the isolation of nucleic acids Freedom infectious juice of tomato leaves to 10 stramonium. The false-positive reac- Random (dN)6 for reverse transcription At using reagent kits Screen Mix HS 2013), should be mentioned as the latest Evo (Tecan, Switzerland). degrees (i.e., 100 000) and by combining tions with similar bodies of healthy had a clear advantage in comparison (Evrogen), Tersus PCR Kit (Evrogen) development Besides, for the FLASH-PCR the of 5-10 slices of (weight 0.5 g) infected plants were not observed. The kit can with primer 2H1-R. and MasDRTaqMix-2025 (Dialat) an- The Russian Federation currently has cDNA synthesis viroid can be realizes potato tubers’ pulp with the same 190- also detect viroid in juice samples de- While using the reagent kits Screen alytical reproducibility and repeatabil- a reliable basis for diagnosis of PSTVd. by kit of reagents for reverse transcrip- 195 with similar healthy slices of potato posited on the membrane for nucleic Mix (Evrogen) and Encyclo PCR Kit ity of PCR with primers 3H1-F/2H1-R Diagnostic kits for detection of PSTVd tion of the AgroDiagnostika firm, con- tubers. acids archiving. (Evrogen) along with products of the amounted 100%.

40 4| 14| 2015 КАРАНТИН РАСТЕНИЙ КАРАНТИН РАСТЕНИЙ 4| 14| 2015 41 In the international standards there of reagents there is a need for detailed (AgroDiagnostika), NC-M-Sorb (Syn- 6. Kondakova O.A. Drygin U.F. Di- curl geminiviroid strains from a wild potato spindle tuber viroid (PSTVd) is is contained the requirement to use in optimization of thermal cycling condi- tol) and RNAqueous Kit (Life Technol- agnostics of Potato spindle tuber viroid Solanum sp. // Phytopathology. Vol. 86. not strictly conserved but is variable as the screening and confirmatory tests tions. ogies). using (dien) Pt-DNA // Biotechnologia, P. 880-886. in other viroids // Plant Molecular Biol- of different pairs of primers. Therefore, For PCR with the kit of reagents Ter- The analytical sensitivity of the clas- 1999. № 4. pp. 83-91. 16. Bernardy R.G., Jacoli G.G., Ra- ogy. Vol. 19. P. 329-333. along with the primers F-3H1/2H1-R sus PCR Kit was tested cDNA, synthe- sical PCR with primers PPSTV-1P/ 7. Krasnova M.V., Cand. Sc. {Biolo- getli H.W. (1987) Rapid detection of 28. ISPM (2006) Potato spindle tu- we have worked out the classical PCR sized by five kits of reagents for reverse PPSTV-1M is within the fourth diluting gy}. Potato spindle tuber viroid in the potato spindle tuber viroid by dot blot ber viroid. International Standard for with specific primers PRSTVd-1P/ transcription MMLV RT Kit, Sensis- of infectious tomato juice and is slightly Northwest region of the Russian Feder- hybridization // J. Phytopathol. Vol. 118. Phytosanitary Measures. 27 sw. PRSTVd-1M (Nakahara et al., 1998), cript RT Kit, First Strand cDNA Synthe- weaker in the aspect of PCR with prim- ation // Abstract of the thesis, St. Peters- P. 171-180. 29. Khan M.S., Timmermann C., that amplify product of size 300 bp. sis Kit – with primer Random dN6, of ers 3H1-F/2H1-R. burg, 2000. P.23. 17. Blotskaya Z.V., Berlinchik E.E. Hoque M.I., Sarker R.H., Muhlbach H.P. For experiments with these primers the AgroDiagnostika firm – with primer When using the reagents kit Tersus 8. Leontieva U. A. Doctor of Biolog- (1998) Occurrence and harmfulness of (2009) Detection of potato spindle tuber the reaction of reverse transcription Random (chemical formula of the prim- PCR Kit (Evrogen) and MasDRTaq- ical Sciences. Spindle tuber (“gothic”) – Potato spindle tuber viroid (PSTVd) in viroid (PSTVd) in minute amounts of is performed with kits MMLV RT Kit er is not disclosed by the manufacturer) Mix-2025 (Dialat) analytical reproduc- one of the major viral diseases of potato the Republic of Belarus // Arch. Phyto- potato (Solanum tuberosum L.) leaf tis- (Evrogen), First Strand cDNA Synthe- and Maxima First Strand cDNA Synthe- ibility and repeatability of PCR prim- in the Volga region // Abstract of the path. Pflanz. Vol. 31. P. 453-457. sue by hybridization techniques and, to- sis Kit (ThermoScientific), Maxima sis Kit, consisting of reaction mix prim- ers PPSTV-1P/PPSTV-1M amounted thesis. Pushkin, 1971. P. 43. 18. Candresse T., Macquaire G., gether with potato viruses, by multiplex

First Strand cDNA Synthesis Kit (Ther- ers Oligo (dT)18 and Random (dN)6. 100%. 9. Mozhaeva K.А., Meldrais Yu.A., Brault V., Monsion M., Dunez J. (1990) RT-PCR // J. Plant Dis. and Protection. moScientific), Sensiscript RT Kit (Qia- According to the results of the ex- On the results of the experiments Druka A.Ya., Kastaleva T.B., Lain I.E., 32P- and biotin-labelled in vitro tran- Vol. 116. P. 97-105. gen) and a kit of reagents for reverse periment the possibility of synthesis of it can be concluded that the primers Vasilyeva T.Ya. Comparative studies scribed cRNA probes for the detection 30. Kolchinsky A., Kolesnikova M., transcription of the AgroDiagnostika cDNA isolates PSTVd by all the tested PРSTV-1P/PPSTV-1M can be effec- of various diagnostic methods for the of potato spindle tuber viroid and chry- Ananiev E. (1991) Portraying of plant (Russia) firm. kits of reagents for reverse transcrip- tively used for the diagnosis of PSTVd. Potato spindle tuber viroid // Scientif- santhemum stunt viroid // Research in genomes using polymerase chain reac- When setting a reaction of reverse tion is stated. Most qualitative specific For PCR with these primers different ic Papers of Higher Education Institu- Virology. Vol. 141. P. 97-107. tion amplification of ribosomal 5S genes transcription the universal primers amplification products are obtained sets of reagents for reverse transcription tions. Biological Sciences, 1989. № 7. 19. Catley A. (1987) Outbreaks and // Genome. Vol. 34. P. 1028-1031. were tested: Oligo (dT)16, Oligo (dT)17, with cDNA synthesized by the kits and amplification can be used, as well pp. 104-110. Mozhayeva K.A., Vasilyeva new records. Australia: eradication of 31. Lakshman D.K., Hiruki C., Wu 32 Oligo (dT)18, Random (dN)6 and Ran- MMLV RT Kit, and Maxima First as preparations of RNA isolated using T.Y., Kastaleva T.B. Distribution of Po- potato spindle tuber viroid // FAO Plant X.H., Leung W.C. (1986) Use of P RNA dom (dN)10. Strand cDNA Synthesis Kit. Visually, various methods. tato spindle tuber viroid when growing Prot. Bull. Vol. 35. P. 32-33. probes for the dot-hybridization detec- The subsequent amplification was the less concentrated specific products Validity of the amplification prod- virus-free potato // Protection of plants 20. CIP (1993) Detection PSTVd / tion of potato spindle tuber viroid // J. performed with the reagent kit Tersus are obtained from cDNA synthesized ucts obtained in the tests with prim- in the process of reforming the agricul- Basic techniques in plant virology. In- Virol. Methods. Vol. 14. P. 309-319. PCR Kit, Screen Mix HS, Encyclo PCR by the kit for reverse transcription of ers PPSTV-1P/PPSTV-1M and 3H1- tural sector: economy, efficiency, envi- ternational Potato Center (CIP). 1993. 32. Lebas B.S., Clover G.R., Kit (Evrogen), Long Range 2 Step RT- the firm AgroDiagnostika. An inter- F/2H1-R was confirmed by sequencing. ronmental soundness / Abstracts of the 19 s. Ochoa-Corona F.M., Elliott D.R., Tang PCR Kit (Qiagen), Dream Taq Green mediate position on the quality of the All-Russian Plant Protection Congress. 21. Di Serio F. (2007) Identification Z., Alexander B.J. (2005) Distribution of PCR Master Mix (ThermoScientific), amplification products had versions References St. Petersburg, 1995. pp. 67-68. and characterization of potato spindle potato spindle tuber viroid in New Zea- MasDDTaqMix-2025 and MasMix-2025 with cDNA synthesized by the Sen- 1. Berlinchik E.E. Detection and 10. Mozhayeva K.A., Vasilyeva T.Y., tuber viroid infecting Solanum jasmi- land glasshouse crops of capsicum and (Dialat). siscript RT Kit and First Strand cDNA identification of Potato spindle tuber Kastaleva T.B. Distribution of viroid noides and S. rantonetti in Italy // Jour- tomato // Australian Plant Pathology. At amplification of cDNA isolates Synthesis Kit. viroid using visual examination and spindle tuber at obtaining of the vi- nal of Plant Pathology. Vol. 89. P. 297- Vol. 34. P. 129-133. PSTVd, synthesized by the reagents Experiments to optimize the syn- indicators // Journal of the Belarusian rus-free potato // Protection of plants in 300. 33. Lenarcic R., Morisset D., Mehle MMLV RT Kit, the products of the thesis of cDNA PSTVd were also con- Academy of Sciences, 1997. № 3. pp. the conditions of agriculture reforming: 22. Diener T.O., Raimer W.B. (1967) N., Ravnikar M. (2013) Fast real-time highest quality were achieved with the ducted by using universal primers Oli- 50-52. the economy, efficiency, environmental- Potato spindle tuber virus. A plant virus detection of Potato spindle tuber viroid specific reagent Tersus PCR Kit and go (dT)17, Oligo (dT)18, Random (dN)6 2. Girsova N.V., Cand. Sc. {Biology}. ity / Abstracts of reports of the All-Rus- with properties of a free nucleic acid // by RT-LAMP Plant Pathology 62, 1147- D- MasMix-2025. The reagent kit Mas и Random (dN)10. There were used in Potato spindle tuber viroid (Detection sian Congress of Plant Protection. St. Science. Vol. 158. P. 847-895. 1156. DTaqMix-2025 was weaker in this as- the experiment: RNA strains PSTVd, and identification, infectivity retention Petersburg, 1995. P. 67-68. 23. EPPO/CABI (1997) Potato spin- 34. Lykke Nielsen S., Enkegaard A., pect. When using the reagent kit Screen isolated by the kit RNAqueous Kit (Life and pathogen transmission) // Abstract 11. Mozhayeva K.A., Vasilyeva T.Y., dle tuber viroid // In: Quarantine Pests Nicolaisen M., Kryger P., Virvsvcek M. Mix HS the formation of non-specific Technologies); reagent kit for reverse of the thesis. Bolschije Viasemy, 2003. Kastaleva T.B. Infection with Potato for Europe, 2nd edn., CAB Internation- Marn, Mavrivc Plevsko I., Kahrer A., products was observed. Use during the transcription MMLV RT Kit (Evrogen) P. 24. spindle tuber viroid // Journal of the al, Wallingford (GB). Gottsberger R. (2012) No transmission reverse transcription of primer Oligo and reagent kit for PCR Tersus PCR Kit 3. Drygin U.F., Musin S.M., Konda- RAAS, 1996. № 3. pp. 57-58. 24. Fernow K.H., Peterson L.C., of Potato spindle tuber viroid shown in

(dT)16 had a slight advantage in terms (Evrogen). kova O.A. Molecular diagnostics of im- 12. Romanov S.A., Mozhayeva K.A., Plaisted R.L. (1969) The tomato test for experiments with thrips (Frankliniella of obtaining a more pure amplifica- It is found that the synthesis of cDNA proved potato varieties for Potato spin- Reyfman V.G., Ledneva V.A. Potato eliminating spindle tuber from potato occidentalis, Thrips tabaci), honey bees tion product compared to the primer PSTVd is possible with the help of all dle tuber viroid infection// Reports of spindle tuber viroid in the Far East // planting stock // American Potato J. Vol. (Apis mellifera) and bumblebees (Bom-

Random (dN)6. However, when using tested universal primers. However, the the RAAS, 1996. № 6. pp. 24-25. Problems of the Far East Phytovirology. 46. P. 424-429. bus terrestris) European Journal of Plant the Random dN6 primer there were ob- most high-qualitative products are 4. Kastaleva T.B., Mozhayeva K.A. 1996. pp. 41-47. 25. Fernow K.H., Peterson L.C., Pathology 02/2012; 133 (3): 505-509. tained visually more concentrated spe- obtained with the specific kit of Max- Pisetskaya N.F., Romanova S.A., Tro- 13. Tereshenko O.I. New potato dis- Plaisted R.L. (1970) Spindle tuber virus 35. Mackie A.E., McKirdy S.J., Ro- cific bands. ima First Strand cDNA Synthesis Kit, fimets L.N. Potato spindle tuber viroid ease. // Sad ta Gorod. 1937. № 10. pp. in seeds and pollen of infected plants doni B. & Kumar S. (2002) Potato spin- Specific products of the planned val- containing a mixture of primers Oligo and potato improvement // Bulletin of 13-17. // American Potato Journal. Vol. 47. P. dle tuber viroid eradicated in Western ues were also obtained with a kit of re- (dT)16 and Random (dN)6. Use of prim- RAAS, 1992. № 3. pp. 3-5. 14. Yakovleva G.A. Potato spindle 75-80. Australia. Australasian Plant Pathology, agents Long Range 2 Step RT-PCR Kit ers Random (dN)6 and Random (dN)10 5. Kastaleva T.B., Girsova K.A. tuber viroid. Testing collection varieties 26. Grasmick M.E., Slack S.A. 31: 311-312. (Qiagen) at using cDNA, synthesized by has a slight advantage in terms of ob- Mozhayeva K.A., Owens R.A. Proper- and wild species of potatoes deposited (2011) Effect of potato spindle tuber vi- 36. McInnes J.L., Habili N., Symons the kit of reagents of the AgroDiagnos- taining the more specific quality prod- ties of Russian isolates of Potato spin- in vitro in the Belarusian Research Po- roid on sexual reproduction and viroid R.H. (1989) Nonradioactive, photobi- tika firm. ucts as compared to using the primers dle tuber viroid (PSTVd) // Integrated tato Institute // News of the Academy transmission in true potato seed Cana- otin-labelled DNA probes for routine

During the PCR with the reagent Oligo (dT)17 and Oligo (dT)18. Plant Protection: strategy and tactics / of Agrarian Sciences of the Republic of dian Journal of Botany 01/2011; 64 (2): diagnosis of viroids in plant extracts // kit Encyclo PCR Kit (Evrogen) and It was also found that the PCR with Proceedings of the International. Scien- Belarus, 2001. № 1. P. 45-49. 336-340. J. Virol. Methods. Vol. 23. P. 299-312. Dream Taq Green PCR (ThermoScien- primers PPSTV-1P/PPSTV-1M isola- tific Conference dedicated to the 40th 15. Behjatnia S.A., Dry I.B., Krake 27. Herold T., Haas B., Singh R.P., 37. Mertelik J., Kloudova K., Cer- tific) along with specific products were tion of RNA strains PSTVd can be ef- anniversary of RUE Institute of Plant L.R., Conde B.D., Connelly M.I., Ran- Boucher A., Sanger H.L. (1992) Se- vena G., Necekalova J., Mikulkova H., observed the formation of non-specif- fectively carried out with kits of reagents Protection. Minsk, 5-8 July, 2011. pp. dles J.W., Rezaian M.A. (1996) New po- quence analysis of five new field isolates Levkanicova Z. (2009) First report of ic products and smears. For these kits for nucleic acid extraction Proba-NK 523-526. tato spindle tuber viroid and tomato leaf demonstrates that the chain length of Potato spindle tuber viroid (PSTVd) in

42 4| 14| 2015 КАРАНТИН РАСТЕНИЙ КАРАНТИН РАСТЕНИЙ 4| 14| 2015 43 Brugmansia spp., Solanum jasminoides, of potato spindle tuber viroid assisted Heilongjiang, China // Am. Potato J. Solanum muricatum and Petunia spp. by potato leafroll virus // Fitopatologia. Vol. 68. P. 65-74. in the Czech Republic // New Disease Vol. 30. P. 56-58. 59. Singh R.P., Boucher A., Somer- РЕЖИМЫ ОБЕЗЗАРАЖИВАНИЯ Reports. Vol. 19. 48. Schroeder M., Weidemann H.L. ville T.H. (1992) Detection of potato 38. Morris T.J., Smith E.M. (1977) (1989) Simplified application of return spindle tuber viroid in the pollen and Potato spindle tuber disease: procedures gel electrophoresis for the routine de- various parts of potato plant pollinated ЛЕСА И ЛЕСОМАТЕРИАЛОВ for the detection of viroid RNA and cer- tection of potato spindle tuber viroid // with viroid-infected pollen // Plant Dis- от вредителей древесины tification of disease-free potato tubers // Bulletin OEPP/EPPO Bulletin. Vol. 19. ease. Vol. 6. P. 951-953. Phytopathology. Vol. 67. P. 145-150. P. 661-665. 60. Vassilakos N., Kektsidou O., 39. Mumford R.A., Walsh K., Boon- 49. Schumacher J., Meyer N., Papaeythimiou M., Varveri C. (2012) Р.К. Магомедов, ведущий научный сотрудник группы обеззараживания ФГБУ «ВНИИКР» ham N. (2000) A comparison of molec- Riesner D., Weidemann H.L. (1986) Comparison of direct-RT-PCR and ular methods for the routine detection Diagnostic procedure for detection of dot-blot hybridization for the detection of viroids // Bulletin OEPP/EPPO Bul- viroids and viruses with circular RNAs of Potato spindle tuber viroid in natural letin. Vol. 30. P. 431-435. by return-gel electrophoresis // J. Phyto- host plant species // Eur. J. Plant Pathol. 40. Nakahara K., Hataya T., Hayashi path. Vol. 115. P. 332-343. Vol. 134. P. 859-864. Еще в 1983–1985 гг. Европейская тория Россия благоприятна для адап- Y., Sugimoto T., Kimura I., Shikata E. 50. Shamloul A.M., Hadidi A., Zhu 61. Verhoeven J.T., Roenhorst J.W. и Средиземноморская организация тации сосновой стволовой нематоды (1998) A mixture of synthetic oligonu- S.F., Singh R.P., Sagredo B. (1997) Sen- (1995) Virological risks accompanying по карантину и защите растений (Кулинич, Козырева, 2004). cleotide probes labeled with biotin for sitive detection of potato spindle tuber the increased interest in pepino (Sola- (ЕОКЗР) начала разрабатывать фито- Несмотря на то что сосновая ство- the sensitive detection of potato spindle viroid using RT-PCR and identification num muricatum). Proceedings of the санитарные правила в международ- ловая нематода официально считает- tuber viroid // J. Virol. Methods. Vol. 71. of a viroid variant naturally infecting 8th Conference on Virus Diseases of ной торговле не только по отношению ся видом, отсутствующим на терри- P. 219-227. pepino plants // Can. J. Plant Pathology. Vegetables, Prague (CZ). P. 109-112. к сельскохозяйственной продукции, тории РФ, южная часть территории 41. OEPP/EPPO (2004) Standard Vol. 19. P. 89-96. 62. Verhoeven J.T., Jansen C.C., посевному и посадочному материалу, РФ — Краснодарский, Ставрополь- PM 7/33 (1) Potato spindle tuber pos- 51. Singh R.P. (1970) Seed trans- Roenhorst J.W. (2008a) First report но также к древесине и пиломатери- ский края, Крым – благоприятна для piviroid. Diagnostic protocol for regu- mission of potato spindle tuber virus in of pospiviroids infecting ornamentals алам. Сначала ограничения касались адаптации нематоды. Ежегодный Fig. 1. Pine wood nematode lated pests // Bulletin OEPP/EPPO Bul- tomato and potato // Am. Potato J. Vol. in the Netherlands: Citrus exocortis только некоторых вредителей и воз- ущерб при адаптации этого патогена (Bursaphelenchus mucronatus) letin. 2004. Vol. 41. P. 394-399. 47. P. 225-242. viroid in Verbena sp., Potato spindle будителей заболеваний древесных в России может достичь от 40 до 112 42. OEPP/EPPO (2011) Standard 52. Singh R.P. (1973) Experimental tuber viroid in Brugmansia suaveolens пород, отсутствующих в европей- млрд рублей. Рис. 1. Сосновая стволовая нематода PM 9/13 (1) Potato spindle tuber viroid host range of the potato spindle tuber and Solanum jasminoides, and Tomato ском и средиземноморском регионах, Большинство номинальных видов (Bursaphelenchus mucronatus) on potato. National regulatory control “virus” // American Potato J. Vol. 50. P. apical stunt viroid in Cestrum sp. / Plant затем они распространились на ряд нематод этого рода в жизненном ци- systems // Bulletin OEPP/EPPO Bulle- 111-123. Pathology. Vol. 57. P. 399-400. переносчиков возбудителей заболе- кле облигатно связаны со стволовы- тепловой обработкой, фумигацией tin. 2011. Vol. 34. P. 394-399. 53. Singh R.P. (1984) Solanum ber- 63. Verhoeven J.T., Jansen C.C., ваний и нематод. ми насекомыми. Последние являют- бромистым метилом по заданным 43. Puchta H., Herold T., Verho- thaultii, a sensitive host for indexing po- Roenhorst J.W. (2008b) Streptosolen Ограничения ужесточились после ся переносчиками нематод с одного стандартам обработки (МСФМ № 15, even K., Roenhorst A., Ramm K., tato spindle tuber viroid from dormant jamesonii ‘Yellow’, a new host plant of обнаружения агрессивных патоти- дерева на другое в период питания 2009). Schmidt-Puchta W., Sanger H.L. (1990) tubers // Potato Research. Vol. 27. P. Potato spindle tuber viroid // Plant Pa- пов древесных нематод, в частности и откладки яиц. В борьбе с насекомыми карантин- A new strain of potato spindle tuber 163-172. thology. Vol. 57. P. 399. сосновой нематоды Bursaphelenchus В связи с этим возрастают ка- ного значения, в том числе и вре- viroid (PSTVd-N) exhibits major se- 54. Singh R.P., Finnie R.E. (1977) 64. Verhoeven J.T., Botermans M., xylophilus, при ввозе древесины рантинные требования не только дителями леса и лесоматериалов, quence differences as compared to all Stability of potato spindle tuber viroid Roenhorst J.W., Westerhof J., Meekes хвойных пород из США в ряд стран. к древесине, которая вывозится из наиболее эффективным и удобным other strains sequenced so far // Plant in freeze-dried leaf powder // Phytopa- E.T. (2009) First report of Potato spindle Отмечено, что этот вид переносят нашей страны, но и к древесному в применении методом фумигации Molecular Biology. Vol. 15. P. 509-511. thology. Vol. 676. P. 283-286. tuber viroid in Cape gooseberry (Physa- усачи рода Monochamus и некоторые упаковочному материалу. Упаковоч- является метод фумигации броми- 44. Querci M., Owens R.A., Var- 55. Singh R.P., Boucher A. (1987) lis peruviana) from Turkey and Germa- другие стволовые вредители, кото- ная и крепежная древесина требует стым метилом. Однако с 2008 года он gas C., Salazar L.F. (1995) Detection of Electrophoretic separation of severe ny // Plant Disease. Vol. 93. P. 316. рые широко представлены в лесной фитосанитарной регламентации, по- был ограничен в применении. Такое Potato spindle tuber viroid in avocado from mild strains of potato spindle tu- 65. Verhoeven J.T., Jansen C.C., фауне России, в то время как в не- скольку может служить средством за- положение сложилось потому, что growing in Peru // Plant Disease. Vol. ber viroid // Phytopathology. Vol. 77. P. Botermans M., Roenhorst J.W. (2010a) которых странах — членах ЕОКЗР, носа и распространения карантинных РФ подписала Монреальский прото- 79. P. 196-202. 1588-1591. Epidemiological evidence that vegeta- например Великобритании, вообще вредных организмов. По этой причи- кол, обязывающий обеспечить сни- 45. Querci M., Owens R.A., Barto- 56. Singh R.P., Сrowley C.F. (1985) tively-propagated, solanaceous plant не встречаются. В древесине, экспор- не Секретариатом Международной жение и постепенное прекращение lini I., Lazarte V., Salazar L.F. (1997) Evi- Successful management of potato spin- species act as sources of Potato spindle тируемой из России, был обнаружен конвенции по карантину и защите выбросов в атмосферу Земли озоно- dence for heterologous encapsidation of dle tuber viroid in seed potato crops // tuber viroid inoculum for tomato // близкородственный вид нематоды — растений (МККЗР) был выработан разрушающих веществ, к которым potato spindle tuber viroid in particles Can. Plant Dis. Surv. Vol. 65. P. 9-10. Plant Pathology. Vol. 59. P. 3-12. B. mucronatus, жизненный цикл кото- стандарт, рекомендующий проведение относится и бромистый метил. of potato leafroll virus // Journal of 57. Singh R.P., Boucher A., Sea- 66. Weidemann H.L., Buchta U. рой, возможно, также связан с пере- маркировки древесного упаковочного В настоящее время для защиты General Virology. Vol. 78. P. 1207-1211. brook J.E. (1988) Detection of the mild (1998) A simple and rapid method for носчиками из рода Monochamus. и крепежного материалов, заменяю- лесопродукции от насекомых и не- 46. Salazar L.F., Owens R.A., Smith strains of potato spindle tuber viroid the detection of Potato spindle tuber Увядание хвойных пород, вызыва- щий фитосанитарные сертификаты. матод специалистами используются D.R., Diener T.O. (1983) Detection of from single true potato seed by return viroid (PSTVD) by RT-PCR // Potato емое сосновой стволовой нематодой, В соответствии с Международ- различные методы: тепловая обра- potato spindle tuber viroid by nucle- electrophoresis // Phytopathology. Vol. Research. Vol. 41. P. 1-8. можно отнести к наиболее опасным ным стандартом по фитосанитарным ботка горячим и влажным воздухом ic acid spot hybridization with tuber 78. P. 663-667. 67. Werner-Solska J. (1983) The заболеваниям лесных насаждений мерам МСФМ № 15 «Руководство по 85 °С и ОВВ 50%, термическая обра- sprouts and true potato seed // Amer- 58. Singh R.P., Boucher A., Wang transmission of Potato spindle tuber в мире. регулированию древесных упаковоч- ботка при 56 °С, гамма-облучение, ican Potato J. Vol. 60. P. 587-597. R.G. (1991) Detection, distribution and viroid by insects – in the light of the lit- Вред, наносимый сосновой ство- ных материалов в международной химические препараты, такие как 47. Salazar L.F., Querci M., Bartolini long-term persistence of Potato spindle erature // Biuletyn Instytutu ziemniaka. ловой нематодой хвойным породам, торговле», обеззараживать древес- фосфин, окись этилена, сульфурил- I., Lazarte V. (1995) Aphid transmission tuber viroid in true potato seed from Vol. 29. P. 57-62. весьма существен. Наглядно это вид- ный материал можно термической фторид, ряд контактных препаратов. но на примере Японии. В 1970-х го- дах ущерб от потерь строевого леса Увядание хвойных пород, вызываемое сосновой стволовой ежегодно составлял 2,4 млн м3. Как нематодой, можно отнести к наиболее опасным показал анализ, значительная терри- заболеваниям лесных насаждений в мире.

44 4| 14| 2015 КАРАНТИН РАСТЕНИЙ КАРАНТИН РАСТЕНИЙ 4| 14| 2015 45 Режимы обеззараживания лесопродукции йодистым метилом речном проникновении в древесину жидкости, использование этого пре- сосны в 2–2,5 раза больше, нежели парата более безопасно для специали- Биологический индикатор Норма расхода, г/м3 Экспозиция, час. Температура, °С ПСКВ, часограмм при продольном, и такое соотноше- стов, проводящих обеззараживание. ние длится до 30 часов. Объяснить Йодистый метил широко исполь- Трогодерма изменчивая 6 48 16 288 это можно большей плотностью зуется в синтезе органических соеди- древесины сосны по сравнению нений. В настоящее время йодистый и лесоматериалов данным препара- температуре 16–18 °С. Препараты с березой. При закладке таблеток не- метил не зарегистрирован в качестве том представляется возможной. , фосфина: фумифаст, магтоксин, посредственно в бревна диффузия фумиганта в РФ. Фумигацию леса и лесоматериа- концентрация 3 г/м3, фосфин в сме- где N — необходимое количество фумиганта увеличивалась. По результатам исследований йо- лов в стационарных условиях можно си с углекислым газом, углекислый жидкого йодистого метила, мл; Смертность биоиндикаторов, за- дистого метила как фумиганта про- осуществлять под покрытиями из газ – 45 и 70%. K — норма расхода согласно ре- ложенных в бревна березы и сосны, тив комплекса вредителей запасов, синтетических пленок. В качестве В качестве биоиндикаторов бра- жимам, г/м3; показывает, что фосфин вызывает их проведенных в 2011–2013 гг., были покрытия может быть использова- лись следующие виды вредителей: 2,28 — удельный вес йодистого гибель при достаточно длительной сделаны следующие выводы: на полиэтиленовая пленка толщи- сосновая стволовая нематода рода метила, г/см3; экспозиции. - йодистый метил по биологиче- ной 0,03-0,05 мм для одноразового Bursaphelenchus mucronatus, амбарные V — объем фумигируемого поме- Большой интерес вызывает мало- ской эффективности обеззаражи- использования или более толстая — вредители, по устойчивости близкие Fig. 2. Monochamus alternatus щения, м3. известный в РФ препарат йодистый вания зерновой продукции против 0,1–0,15 мм для многократного ис- усачам рода Monochamus, точиль- Рис. 2. Черный усач метил. Известно, что йодистый ме- вредителей запасов представляет пользования. В стационарных условиях для бы- щикам: имаго Sitophilus granarium — (Monochamus alternatus) тил использовался в качестве фун- интерес для дальнейшего изучения Основной целью исследований яв- строго получения ядовитых паров амбарного долгоносика, личинки гицида, гербицида, инсектицида, а как средство, альтернативное бро- ляется изучение проникающего дей- йодистого метила его вводят в фу- Trogoderma variabile – трогодермы Фтористый сульфурил (Vicane) также как дезинфицирующее сред- мистому метилу; ствия различных фумигантов в бревна мигируемую емкость через газои- изменчивой и личинки Trogoderma зарегистрирован в США, Германии, ство для обеззараживания почвы. - минимальной летальной до- леса против карантинных вредителей спаритель. granarium — капрового жука. Швеции для обработки древесины Сделан вывод о том, что йодистый зировкой обеззараживания про- лесопродукции, определение мини- Для этих целей применяют змее- Содержание фосфина, йодистого против вредителей и возбудителей метил можно рассматривать в ка- тив комплекса вредителей запасов, мальных летальных дозировок ПКВ виковый тип газоиспарителя, пред- метила, углекислого газа в фумига- грибковых заболеваний. В качестве честве эффективной альтернативы в том числе насекомых карантинно- c использованием для обеззаражива- ставляющий собой бак для воды, по- ционной камере определяли газоа- фумигантов для обеззараживания бромистому метилу. го значения, является 4 г йодистого ния бревен следующих фумигантов: догреваемой до 80–85 °С, с медным нализатором «Sensis — ХХХ». древесины, разрешенных к примене- Озоноразрушающая способность метила на 1 м3, при экспозиции 48 йодистый метил, фосфин, магтоксин, змеевиком длиной до 2,5 м и диа- Перед проведением опытов све-

нию в 2015 году, в РФ является также йодистого метила оценивается как часов (192 часограмма) и темпе- фосфин в смеси с СО2, углекислый газ метром 6–7 мм. Испаритель должен жесрезанные бревна сосны, заражен- магтоксин фирмы Дегеш. 0,016, а бромистого метила — 0,65. ратуре +17–20 ºС. При этом режи- различной концентрации, установле- быть снабжен прибором для измере- ные нематодами рода Bursaphelenchus По данным отдела обеззаражи- Йодистый метил имеет ряд ме обеззараживания достигалась ние режимов фумигации от сосновой ния температуры воды (рис. 5). mucronatus, предварительно выдер- вания, фосфин проникает как в ли- свойств, в частности наличие запа- 100% смертность против имаго стволовой нематоды (рис. 1) и усачей При отсутствии газоиспарителя живали в термостате для размноже- ственную (береза), так и в хвойную ха, невоспламеняемость, достаточно акароидных клещей, жуков рисо- рода Monochamus (рис. 2). жидкий йодистый метил разливают ния (рис. 6). (сосна) древесину. При этом, как высокое парциальное давление, что вого долгоносика, малого мучного на мешковину, после чего он начина- Нематоды в высохшей древесине правило, поперечное проникнове- делает возможным его использова- хрущака, имаго большого мучного Методика проведения работ ет испаряться. крайне малочисленны и находятся ние газа проходит быстрее, нежели ние для обеззараживания зерна и ле- хрущака и зерноядных кожеедов Внутрь стационарной вакуумной Определение концентрации йо- в 3-й устойчивой к внешним услови- продольное. На сосне та же законо- сопродукции. рода Trogoderma — капрового жука камеры объемом 0,85 м3 помещались дистого метила проводится с ис- ям личиночной стадии. Для размно- мерность наблюдается за более дли- В связи с тем, что йодистый ме- и трогодермы изменчивой. бревна сосны, березы и осины (рис. пользованием интерферометров. жения нематод бревна сосны поме- тельное время. Так, через 4–6 часов тил — жидкость с температурой ки- - в связи с тем, что давление паров 3), в отверстиях которых в торцевой Встроенный в прибор фотосенсор концентрация фосфина при попе- пения 42,4 °С и ядовитые свойства йодистого метила достаточно высо- и боковой части закладывались био- преобразует световой сигнал в элек- Рис. 3. Бревна березы, сосны, осины проявляются только при испарении кое (400 мм рт. ст.), фумигация леса индикаторы испытываемых видов трический, величина которого про- в фумигационной камере Таблица 1 вредителей по количеству вариантов порциональна содержанию газа. Учет смертности биоиндикаторов в древесных растительных культурах без оболочек (рис. 4). В испаритель внутри камеры Еще одним методом определения Fig. 3. Logs of birch, pine, aspen in the помещалось нужное количество пре- концентрации йодистого метила яв- fumigation chamber Экспозиция 4 суток парата, камера закрывалась и гер- ляется газожидкостная хроматогра- Размеще- Условия Биоиндикатор ние в дре- Береза Сосна Осина метизировалась; включался вну- фия. опыта весине Смерт- Смерт- Смерт- тренний вентилятор для быстрого Предварительно для подтвержде- ж п м ж п м ж п м ность, % ность, % ность, % испарения жидкого препарата на 10 ния эффективности фумигации йо- Учет через 1 час после окончания экспозиции минут, после чего начинался отсчет дистым метилом лесоматериалов Амбарный долгоносик CH I — 4 мл, времени экспозиции. в качестве биологического индикато- 3 торцевое 0 0 10 100 0 0 10 100 0 0 10 100 (Sitophilus granarium) экспозиция Необходимое для фумигации ко- ра использовали имаго трогодермы 72 часа, личество жидкого йодистого метила изменчивой (Trogoderma variabile). Трогодерма изменчивая температура торцевое 0 0 10 100 0 0 10 100 0 0 10 100 (Trogoderma variabile) рассчитывается по формуле: Испытывались концентрации 17 °С йодистого метила: 2, 4 и 6 мл при Учет через 1 час после окончания экспозиции Таблица 2 Амбарный долгоносик боковое 0 0 10 100 0 0 10 100 0 0 10 100 Учет смертности биоиндикаторов в древесных растительных культурах без оболочек (бок, торец) (Sitophilus granarium) (фумифаст 3 г, экспозиция 6 суток, температура 19 °С) Амбарный долгоносик CH3I — 2 мл, торцевое 0 0 10 100 0 0 10 100 0 0 10 100 (Sitophilus granarium) экспозиция Учет через 1 час после окончания экспозиции Капровый жук (Trogoderma 48 часов, торцевое 0 0 10 100 9 1 0 10 3 5 2 70 Биоиндикатор Береза Сосна Осина granarium) (личинки) температура ж п м ж п м ж п м 16 °С Учет через 24 часа после окончания экспозиции Капровый жук (Trogoderma Амбарный долгоносик (Sitophilus granarium) 0 0 10 0 0 10 0 0 10 торцевое 0 0 10 100 5 1 4 55 0 0 10 100 granarium) (личинки) Контроль 10 * Примечание: ж — живые; п — парализованные; м — мертвые.

46 4| 14| 2015 КАРАНТИН РАСТЕНИЙ КАРАНТИН РАСТЕНИЙ 4| 14| 2015 47 Результаты исследований Рис. 5. Схема газоиспарителя: 1 — емкость с жидким йодистым метилом; 2 — зажим; щали в термостат при температуре При изучении проникающей спо- 3 — армированная тефлоновая или полиэтиленовая труба для подачи жидкого 25–26 °С на 3-4 недели. Древесину собности йодистого метила в дре- йодистого метила; 4 — термометр; 5 — 25-миллиметровая полиэтиленовая предварительно необходимо немно- весину березы, сосны и осины уста- труба для подачи испарившегося газа; 6 — медный змеевик; го смочить водой, далее взятые дре- новлено, что биоиндикаторы (имаго 7 — емкость с водой; 8 — газовая горелка или источник тепла весные пробы измельчают секатором и личинки) капрового жука после Fig. 5. The scheme of the gas-evaporator: на мелкие кусочки (рис. 7), далее не- 72-часовой экспозиции при кон- 1 — container with liquid methyl iodide; 2 — clamp; 3 — reinforced Teflon матод из древесины выделяют по ме- центрации 4–6 мл СН3I полностью or polyethylene pipe for the supply of liquid methyl iodide; 4 — thermometer; тоду Бермана (рис. 8). погибали (табл. 1). С уменьшением 5 — 25-millimeter polyethylene pipe for supplying of the vaporized gas; После измельчения каждой про- концентрации СН3I до 2 мл и экспо- 6 — copper coil; 7 — water container; 8 — gas burner or heat source бы контактировавшие с древесиной зиции до 48 часов имаго амбарного части инструмента (лезвия секатора, долгоносика как при торцевом, так туре 17 °С обеспечивает 100% гибель 2. Кулинич О.А., Козырева Н.И. лобзика и пр.) необходимо стерили- и боковом размещении в древесине Fig. 4. Logs with flat биоиндикатора амбарного долгоно- Сосновая древесная нематода зовать, протирая ваткой, смоченной погибали на 100%. Однако личинки face and transverse сика и трогодермы изменчивой. Bursaphelenchus xylophilus: исследова- openings for laying спиртом или в пламени зажигалки капрового жука вели себя по-разно- bio-indicators 4. При концентрации СН3I 2 мл ния в России и за рубежом. В кн.: Па- (лабораторной спиртовки). му в зависимости от породы древе- после 72 часов смертность личинок разитические нематоды растений и на- Перед выделением нематод кусоч- сины. Так, в осине была 70% гибель, Рис. 4. Бревна с торцевыми капрового жука была 100% в древе- секомых. М.: Наука, 2004. С. 100–117. ки древесины взвешивают с целью в сосне 10%, а в березе все биоинди- и поперечными отверстиями температуре 19–20 °С. Обеззаражи- сине осины и березы. Из-за высокой 3. Лесной карантин. Организация дальнейшего пересчета выделенных каторы оставались живыми (табл. 1). для закладки биоиндикаторов вание бревен при концентрации 70% плотности сосны смертность личи- фитосанитарного контроля и сертифи-

нематод на 1 г. Проведенный через 24 часа после СО2 позволяло добиться 100% смерт- нок капрового жука была всего 55%. кация лесоматериалов. М., 1998. С. 9. В опытах использовались бревна окончания экспозиции учет показал Одним из альтернативных мето- ности биоиндикаторов в бревне при 5. Йодистый метил в бревне сосны, 4. Международный стандарт по со следующими параметрами: 100% смертность личинок в березе дов обеззараживания древесины мо- экспозиции 6 суток. березы и осины в оболочке и без обо- фитосанитарным мерам МСФМ - бревно сосны: длина — 49,5 см; и осине и всего 55% в сосне. Объ- жет служить фумигация углекислым Последействие фумигантов на со- лочки в торцевом и боковом направ- № 15, 2009. ОЕРР/ЕРРО. диаметр — 12 см; объем — 5595,5 яснить это можно большей плотно- газом при длительной экспозиции. сновую стволовую нематоду после лении распространяется одинаково. 5. Мордкович Я.Б. Древесные упа- см3; глубина торцевых отверстий — стью древесины сосны по сравнению С этой целью были проведены опыты выделения из опытных бревен со- 6. Для лучшего проникновения ковочные материалы требуют обе- 8 см; 7,5 см; глубина бокового отвер- с осиной и березой. по обеззараживанию древесины при сны определяли подсчетом их бино- фосфина необходимо фумигировать ззараживания. Защита и карантин

стия — 5,5 см. При изучении проникновения фу- высоких концентрациях СО2 — 45% кулярным методом. лесопродукцию в вакуумной фуми- растений, 2006, № 7. С. 36–37.

- бревно березы: длина — 48,5 мифаста в сосну и березу 100% гибель и 70%. При концентрации СО2 45% Проведенные исследования по гационной камере, а с использовани- 6. Изучение продольного и попе- см; диаметр — 13,5 см; объем — биоиндикаторов амбарного долгоно- гибель имаго амбарного долгоноси- действию фумигантов фосфина ем йодистого метила можно исполь- речного проникновения фосфина 6944,4 см3; глубина торцевых отвер- сика наблюдалась при экспозиции 6 ка при экспозиции 4 суток составила и йодистого метила на сосновую зовать безвакуумный метод. в древесину. Заключительный отчет стий — 7 см и 8,5 см; глубина боково- суток (табл. 2). В отличие от йодистого лишь 30-60%, после 5 суток 60-90%, а стволовую нематоду показала 100% 7. Для обеззараживания лесома- отдела обеззараживания, 2012. го отверстия — 7 см. метила, препараты фосфина слабо или после 6 суток 80-100% в зависимости смертность нематод по сравнению с териалов от древесных вредителей - бревно осины: длина — 49,5 см; вовсе не действуют на личинок капро- от породы древесины, меньше всего контролем, при экспозиции 3 суток (жуков) при перевозке на дальнее Рис. 6. Бревна сосны, зараженные сосновой диаметр — 11,5 см; объем — 5144,7 вого жука, помещенных в древесину, в березе (табл. 3). (табл. 4). Углекислый газ в чистом расстояние может быть использова- стволовой нематодой Bursaphelenchus см3; глубина торцевых отверстий – ввиду их высокой устойчивости. Установлено, что минимальная виде слабо повлиял на нематод, по- на высокая концентрация углекис- mucronatus, для инкубации в термокамере 7,5 см и 9 см; глубина бокового от- Проникновение фумифаста в тор- экспозиция для обеззараживания сле 5 суток фумигации смертность лого газа до 70% при экспозиции 6 при температуре 25 °С верстия — 5,5 см. цевую часть древесины выше, чем лесоматериалов углекислым газом составила лишь 40%. и более суток. в боковую. должна быть не менее 6 суток при 8. По предварительным данным, Fig. 6. Pine logs infested with pine Таблица 3 Заключение для полного уничтожения стволовой stem nematode Bursaphelenchus Учет смертности биоиндикаторов в древесных растительных культурах без оболочек mucronatus, for incubation in the 1. Согласно полученным данным, сосновой нематоды Bursaphelenchus thermochamber at 25 °С йодистый метил обладает высокой mucronatus достаточно экспозиции Береза Сосна Осина Размеще- проникающей способностью в дре- 3 суток при концентрации фосфина Смерт- Смерт- Смерт- Биоиндикатор Условия опыта ние в дре- весину и вполне может заменить 6 г/м3, йодистого метила 6 мл. весине ж п м ность, ж п м ность, ж п м ность, % % % бромистый метил и фосфин. 9. Действие фосфина на нематод Экспозиция 4 суток 2. Для сравнения: для обеспечения повышается при малой дозировке — 3 Амбарный долгоносик боковое 5 3 2 20 3 2 5 50 3 3 4 40 90% смертности вредителей необхо- 1 г/м в смеси с высокой концентра- дима экспозиция фосфина 96 часов, а цией углекислого газа — 40%. (Sitophilus granarium) торцевое 6 1 3 30 2 3 5 50 3 1 6 60 при использовании йодистого мети- Контроль 4 6 ла — 48 часов, что обеспечивает 100% Литература Экспозиция 5 суток гибель биоиндикаторов в древесине. 1. Кулинич О.А., Рысс А.Ю. Древес- Амбарный долгоносик Рис. 7. Измельченный сегмент спила CО2 — 45%, тем- боковое 2 - 8 80 1 2 7 70 1 1 8 80 3. Йодистый метил при довольно ные нематоды рода Bursaphelenchus (Sitophilus granarium) пература 19 °С 3 бревна сосны торцевое 3 1 6 60 - 1 9 90 - 1 9 90 низкой концентрации 2 мл (5 г/м ) на территории России. В кн. При- и экспозиции 48 часов при темпера- кладная нематология. М.: Наука, Контроль 1 9 90 Fig. 7. The ground segment of the 2006, С. 162–184. saw cut of pine logs Экспозиция 6 суток Таблица 4 Амбарный долгоносик боковое - 2 8 80 - 2 8 80 - 2 8 80 Учет смертности сосновой стволовой нематоды (Sitophilus granarium) торцевое - 1 9 90 - - 10 100 - - 10 100 (Bursaphelenchus mucronatus) в сосне с оболочкой Контроль 10 100 Смертность, % Варианты опыта Экспозиция 6 суток Экспозиция 3 суток Экспозиция 5 суток Амбарный долгоносик Фосфин РН , 6 г/м3 100 100 CО — 70%, тем- 3 2 боковое 0 0 10 100 0 0 10 100 0 0 10 100 Йодистый метил СН I, 6 мл 100 - (Sitophilus granarium) пература 19 °С 3 Углекислый газ СО , 55% 33 40 Контроль 2 10 100 Контроль - -

48 4| 14| 2015 КАРАНТИН РАСТЕНИЙ КАРАНТИН РАСТЕНИЙ 4| 14| 2015 49 products against pests of stocks is of in- terest for further study as a mean alter- SCHEDULES OF TIMBER native to methyl bromide; , - minimum lethal dose of disinfection where N – is the necessary quantity against complex of pests of stocks, in- of the liquid iodomethyl, ml; AND TIMBER PRODUCTS cluding insect quarantine value, is 4 g of K – application rate according to the methyl iodide per 1 m3, with 48 hours of disinfecting against wood pests schedule, g/m3; exposure (192 hour-gramm) at tempera- 2,28 – the specific gravity of methyl ture +17-20 ºС. In this fumigation sched- iodide, g/sm3; ule achieved 100% mortality of adults R.K. Magomedov, Leading Researcher FGBU VNIIKR’s Disinfection Department V – the volume of the room fumigat- Araceae mites, beetles of rice weevil, ed, m3. small mealworms, imago of mealworm Рис. 9. Закладка опыта and granivorous khapra beetle of genus Under stationary conditions for Trogoderma – Khapra beetle and ware- quick achieving of toxic fumes of me- In 1983-1985 the European and Med- nodar and Stavropol regions and the Fig. 9. Laying of the test house beetle (Trogoderma variabile). thyl iodide it is added into container be- iterranean Plant Protection Organization Crimea – is favourable for establishment - due to the sufficient vapor pressure ing fumigated through gas-evaporator. (EPPO) started developing phytosani- of the nematode. The annual damage at up to 30 hours. This can be explained by of methyl iodide (400 mm Hg), fumiga- For these purposes, the pipe-coil tary regulations in international trade, establishment of the pathogen in Russia a greater density of wood of pine than tion of timber and timber materials with type of gas evaporator is used, which is not only with respect to agricultural can be 40 to 112 billion rubles. of birch. When laying the tablet directly the drug seems possible. a tank of water heated to 80-85 °C, with products and plants for planting, but also The majority of rated nematode spe- into the beam diffusion of the fumigant Fumigation of wood and timber in a copper coil of 2.5 m length and 6-7 to timber and lumber. First, restrictions cies of this genus in the life cycle are increased. stationary conditions can be carried out mm in diameter. The evaporator should only applied to certain pests and patho- obligatory associated with stem insects. Mortality of bio-indicators laid in the under the covers of synthetic films. The be provided with a device for measuring gens of tree species, which were absent The insects are vectors of nematodes birch and pine logs, indicate that phos- covering can be of a polyethylene film the water temperature (Fig. 5). in the European and Mediterranean re- from tree to tree during feeding and phine causes their death at sufficiently 0,03-0,05 mm for single use or thicker – In the absence of gas-evaporator liq- gions, and then have spread to a number oviposition. long exposure. 0,1-0,15 mm reusable. uid methyl iodide is poured on burlap, of vectors of pathogens and nematodes. In this connection increase quaran- Рис. 8. Выделение нематод A little-known in Russia drug methyl The main goal of the research is the after which it begins to evaporate. по методу Бермана Restrictions were clamped following tine requirements not only to the wood iodide is of great interest. It is known study of penetrating of various fumi- The methyl iodide concentration is the discovery of aggressive prototypes exported from our country, but also to that methyl iodide is used as a fungi- gants into log of forest against quaran- determined with the use of interferom- Fig. 8. Isolation of nematodes by the of wood nematodes, in particular pine the wood packing material. Packaging Berman method cide, herbicide, insecticide, and as a tine pests of forest products, the deter- eters. The built-in photosensor converts nematode Bursaphelenchus xylophilus, at and fastening wood require phytosan- disinfectant for disinfection of soil. It mination of the minimum lethal dose of the light into an electrical signal propor- importation of softwood from the Unit- itary regulations, because it can act as Currently, for the protection of timber is concluded that methyl iodide can be PCT (product of concentration on time) tional to the gas content. ed States into a number of countries. It means of introduction and spread of against insects and nematodes specialists regarded as an effective alternative to with the use of following fumigants for Another method to determine the is noted that this type is transferred by quarantine pests. For this reason the use various techniques: thermal treatment methyl bromide. disinfection logs: methyl iodide, phos- methyl iodide concentration is a gas-liq- long-horned beetles of the genus Mon- Secretariat of the International Plant with hot, humid air of 85 °C and RH 50% Ozone-depleting potential of methyl phine, magtoksin phosphine mixed uid chromatography. ochamus and some other by the stem Protection Convention (IPPC) the (relative humidity), heat treatment at 56 iodide is estimated as 0.016, and methyl with CO2, carbon dioxide of various Previously to confirm the effective- pests, which are widely represented in standard was developed to recommend °C, gamma irradiation, chemicals such as bromide – 0.65. concentrations, the determination of ness of fumigation with methyl iodide the forest fauna of Russia, while in some carrying out the marking of wood phosphine, ethylene oxide, sulfuryl fluo- Methyl iodide has following prop- fumigation schedule of pine stem nem- of the lumber, the imago of trogodermy members-countries of EPPO, such as packing materials and fasteners, which ride, a number of contact preparations. erties: the presence of odor, inflamma- atodes (Fig. 1) and of long-horned bee- (Trogoderma variabile) was used as a bi- Great Britain, they are not known to ap- replaces the phytosanitary certificates. Sulfuryl fluoride (Vicane) is regis- bility, sufficiently high partial pressure, tles, genus Monochamus (Fig. 2). ological indicator. pear. In the wood exported from Russia, In accordance with the International tered in the United States, Germany, that all makes it possible to use grain Tested concentration of methyl there was found closely related species Standard for Phytosanitary Measures Sweden, for the treatment of wood and timber disinfecting. Working procedure iodide is: 2, 4 and 6 ml at 16-18°С. of nematodes – B. mucronatus, lifecycle ISPM № 15, “Guidelines for regulating against pests and fungal pathogens dis- Due to the fact that the methyl iodide Inside the stationary vacuum cham- Preparations of phosphine: fumifast, of which may also be associated with the wood packing material in international eases. As a fumigant for disinfecting is a liquid with a boiling point 42.4 °C ber with a volume of 0.85 m3 logs of magtoksin, concentration of 3 g/m3, the vector of the genus Monochamus. trade”, disinfection of the wood packing timber, approved for use in 2015 in the and poisonous properties appear only pine, birch and aspen are placed (Fig. phosphine mixture with carbon diox- Pine wilt disease caused by stem material can be by thermal heat treat- Russian Federation, there is magtoksin when the liquid evaporates, the use of 3), in the end and side of which the test ide, the carbon dioxide – 45 and 70%. nematode is one of the most danger- ment, fumigation with methyl bromide of the “Degesh” company. this drug is more safe for professionals species were laid bioindicators of pests The following pests were taken as bi- ous diseases of forest plantations in the on the set standards of treatment (ISPM According to data of the Department conducting disinfection. on a number of variants (Fig. 4). Into ological indicators: pine stem nematode world. № 15, 2009). of Disinfection, phosphine permeates Methyl iodide is widely used in the the evaporator inside the chamber the of the genus Bursaphelenchus mucrona- Harm caused by pine nematode to During the control measures applied both hardwood (birch) and the conif- synthesis of organic compounds. Cur- right amount of preparation is placed, tus, storage pests, on sustainability are stem softwood is quite substantial. It’s to the pests of quarantine significance, erous (pine) wood. Thus, as a rule, the rently, methyl iodide is not registered in the camera is closed and sealed; an in- related to Monochamus, borer: adults of evident in Japan. In the 1970s, the to- including forest pests and forest prod- cross ingress of gas is faster than longi- the RF as a fumigant. ternal fan is switched on for rapid evap- Sitophilus granarium – granary weevil, tal damage caused by the loss of timber ucts, the most effective and easy-to-use tudinal. The same pattern has been ob- According to studies of methyl io- oration of the liquid preparation for 10 larvae Trogoderma variabile – trogo- per year was 2.4 million m3. The result method of fumigation is the method of served on pine for a longer time. Thus, dide as a fumigant against a complex of minutes and counting down of exposure dermy volatile and larvae Trogoderma showed that the predominant part of fumigation with methyl bromide. But after 4-6 hours the concentration of pests of stocks held in 2011-2013, the time starts. granarium – Khapra beetle. Russia is favourable for establishment since 2008 it is restricted in implemen- phosphine in penetrating transversely following conclusions were made: The adequate quantity of the liquid The ratio of phosphine, methyl io- of the pine wood nematode (Kulinich, tation. The situation is caused by the into the pine wood is 2-2.5 times great- - methyl iodide with its biological iodomethyl for fumigation is calculated dide, carbon dioxide in the fumigation Kozyreva, 2004). fact that the Russian Federation has er than in longitudinal and a ratio takes effectiveness in disinfection of grain by the formula: chamber is determined by a gas analyzer Despite the fact that the pine wood signed the Montreal Protocol requir- «Sensis – ХХХ». nematode is officially considered the ing ensuring the reduction and phasing Pine wilt disease caused by Fumigation schedule by for the timber methyl iodide stem nematode is one of the species that is absent from the territory out emissions into the atmosphere of Biological indicator Consumption rate, g/m3 Exposure, hour Temperature, °С PACT, hour-gramm of the Russian Federation, the southern ozone-depleting substances, which in- most dangerous diseases of part of the territory of Russia – Kras- clude methyl bromide. forest plantations in the world. Trogoderma variabile 6 48 16 288

50 4| 14| 2015 КАРАНТИН РАСТЕНИЙ КАРАНТИН РАСТЕНИЙ 4| 14| 2015 51 Table 1 Table 3 Rate of mortality of bio-indicators in woody plant crops without bark Rate of mortality of bio-indicators in woody plant crops without bark

Exposure 4 days birch pine aspen Test Position in Test Position in Bio-indicator mortality, mortality, mortality, Bio-indicator birch pine aspen condition wood l p d l p d l p d conditions the wood % % % mortality, mortality, mortality, l p d l p d l p d % % % Exposure 4 days Record after 1 hour after exposure complete Warehouse beetle lateral 5 3 2 20 3 2 5 50 3 3 4 40 Granary weevil CH3I – 4 (Sitophilus granarium) 0 0 10 100 0 0 10 100 0 0 10 100 flat face 6 1 3 30 2 3 5 50 3 1 6 60 (Sitophilus granarium) ml, exposure Control 4 6 72 hours, Warehouse beetle temperature Flat end 0 0 10 100 0 0 10 100 0 0 10 100 Exposure 5 days (Trogoderma variabile) Warehouse beetle 17 °С CО2 – 45%, lateral 2 - 8 80 1 2 7 70 1 1 8 80 (Sitophilus granarium) Record after 1 hour after exposure complete temperature flat face 3 1 6 60 - 1 9 90 - 1 9 90 Warehouse beetle 19 °С Lateral 0 0 10 100 0 0 10 100 0 0 10 100 Control 1 9 90 (Sitophilus granarium) Warehouse beetle Exposure 6 days CH3I – 2 Flat end 0 0 10 100 0 0 10 100 0 0 10 100 (Sitophilus granarium) ml, exposure Warehouse beetle lateral - 2 8 80 - 2 8 80 - 2 8 80 Khapra beetle (Trogoderma (Sitophilus granarium) 48 hours, Flat end 0 0 10 100 9 1 0 10 3 5 2 70 flat face - 1 9 90 - - 10 100 - - 10 100 granarium) (larvae) temperature Control 10 100 16 °С Record after 24 hours after exposure complete Exposure 6 days Khapra beetle (Trogoderma Flat end 0 0 10 100 5 1 4 55 0 0 10 100 granarium) (larvae) Warehouse beetle CО2 – 70%, (Sitophilus granarium) temperature lateral 0 0 10 100 0 0 10 100 0 0 10 100 * Note: l – live individuals; p – paralyzed; d – dead. 19 °С pine, birch and all biological indicators Control 10 100 Prior to the experiments the freshly the depth of the end openings – 8 cm; were alive (Table 1). cut pine logs, affected by nematodes of 7.5 cm; the depth of lateral openings – The record conducted 24 hours after the genus Bursaphelenchus mucronatus, 5.5 cm. the end of exposure had shown 100% dioxide must be at least 6 days at 19- thyl iodide – 48 hours, thus providing centration of carbon dioxide up to 70% are pre-incubated in the thermostat for - birch logs: length – 48.5 cm; diame- mortality of larvae in the birch and as- 20 °C. Disinfection of logs at a concen- 100% mortality of bio-indicators in with an exposure for 6 days or more. 3 reproduction (Fig. 6). ter – 13.5 cm; volume – 6944.4 cm ; the pen, and only 55% in the pines. It can tration of 70% CO2 allowed achieving wood. 8. According to preliminary data, Nematodes in dried wood are very depth of the end openings – 7 cm and be explained by higher density of pine 100% mortality of bio-indicators in the 3. Methyl iodide at low concentra- for complete elimination of stem pine few and are in 3rd resistant to exter- 8.5 cm; the depth of lateral openings – compared with aspen and birch. log with an exposure for 6 days. tions 2 ml (5 g/m3) and at exposure for nematode Bursaphelenchus mucrona- nal conditions larval stage. For repro- 7 cm. While study of penetration of fumi- The aftereffect of fumigants on pine 48 hours at temperature 17 °C provides tus it’s enough to expose for 3 days at a duction of nematodes pine logs were - aspen log: length – 49.5 cm; diam- fast in pine and birch 100% mortality stem nematode after isolation from test- 100% mortality of bio-indicator of gra- phosphine concentration 6 g/m3, 6 ml of placed in an incubator at 25-26 °С for eter – 11.5 cm; volume – 5144.7 cm3; of bioindicators of granary weevil was ed pine logs was determined by count- nary weevil and volatile trogoderma. methyl iodide.

3-4 weeks. Wood needs to be a little wet, depth of the end openings – 7.5 cm and observed at 6 days of exposure (Table ing with binocular method. 4. At concentration of СН3I ml after 9. Effect of phosphine to nematodes then taken wood samples are crushed 9 cm; the depth of lateral openings – 5.5 2). Unlike methyl iodide, phosphine Studies on the action of the fumi- 72 hours the mortality of larvae Khapra increased in low dose – 1 mg/m3 in mix- into small pieces (Fig. 7) and then the cm. has a weak or no effect on the larvae of gant of phosphine and methyl iodide beetle was 100% in the wood of aspen ture with a high concentration of car- nematodes are isolated from wood by Khapra beetle placed in the timber, due on the pine stem nematode showed and birch. Because of the high density of bon dioxide – 40%. the method of Berman (Fig. 8). Findings of investigation to their high stability. 100% nematode mortality compared the pine Khapra beetle larval mortality After grinding of each sample, all At the study of the penetrating pow- Penetration of fumifast into a timber to control, at exposure for 3 days (Table was only 55%. References instruments contacted with the wood er of methyl iodide in birch, pine and end is higher than in the side. 4). Carbon dioxide in pure had weakly 5. Methyl iodide in a log of pine, 1. Kulinich O.A., Ryss A.U. Wood nem- (blade of pruner, jigsaw, etc.) must be aspen it was found that bio-indicators One of the alternative methods of affected nematode, after 5 days of the birch and aspen in bark and without it atodes species of Bursaphelenchus on the sterilized by rubbing a cotton swab (adults and larvae) of Khapra beetle disinfection of timber can serve fumi- fumigation the mortality was only 40%. is distributed equally in both of end and territory of Russia. In the book Applied moistened with alcohol or in a flame of after 72-hour exposure at concentra- gation with carbon dioxide at a long ex- laterally directions. nematology. M.: Nauka, 2006, p. 162-184. lighter (laboratory spirit lamp). tion 4-6 ml СН3I completely died (Ta- posure. For this purpose, experiments Conclusion 6. For better penetration of phos- 2. Kulinich O.A., Kozyreva N.I. Pine Before isolation of nematodes wood ble 1). At lowering the concentration on disinfection of wood were conduct- 1. According to information re- phine it is necessary to fumigate wood wood nematode Bursaphelenchus xylo- pieces are weighed in order to further of СН3I to 2 ml and exposure up to 48 ed at high concentrations СО2 – 45% ceived, methyl iodide has high ability products in a vacuum fumigation philus: researches in Russia and abroad. count the selected nematodes per 1 g. hours adults of granary weevil both in and 70%. At concentration of СО2 45% to penetrate into the wood and could chamber and one can use non-vacuum In the book: Parasitic nematodes of plants In experiments using logs with the face and lateral placement of the wood mortality of adults of granary weevil at replace methyl bromide and phosphine. technique with methyl iodide. and insects. M.: Nauka, 2004. p. 100-117. following parameters were used in test- were dying 100%. However, larvae of exposure for 4 days was only 30-60%, 2. For comparison, for the 90% mor- 7. For disinfection of timber against 3. Forest Quarantine. Organization ing: the Khapra beetle behaved differently after 5 days 60-90%, and after 6 days 80- tality of the pests 96 hours phosphine wood pests (beetles) at long distance of phytosanitary control and certifica- - pine timber length – 49.5 cm; diam- depending on the type of wood. Thus, 100% depending on the type of wood, exposure is required, while using me- transportation it can be used a high con- tion of forest products. M., 1998. p. 9. eter – 12 cm; log volume – 5595.5 cm3; in aspen it was 70% mortality in 10% of the least of all in birch (Table 3). 4. International Standard for Phy- It is found that the minimum expo- Table 4 tosanitary Measures ISPM № 15, 2009. Table 2 sure for timber disinfection by carbon Rate of mortality of pine stem nematode (Bursaphelenchus mucronatus) ОЕРР/ЕРРО. Rate of mortality of bio-indicators in woody plant crops without bark in pine with bark 5. Mordkovich Y.B. Wood packaging (lateral, flat end) (fumifast 3 g, exposure 6 days, temperature 19 °С) Mortality, % materials require disinfection. Plant Test variants Protection and Quarantine, 2006, № 7. Record after 1 hour after exposure complete Exposure 3 days Exposure 5 days p. 36-37. Bio-indicator birch pine aspen Phosphine РН , 6 g/m3 100 100 3 6. Study of the longitudinal and l p d l p d l p d Iodide methyl СН3I, 6 ml 100 - transverse phosphine penetrating into Warehouse beetle (Sitophilus granarium) 0 0 10 0 0 10 0 0 10 Carbon dioxide СО2, 55% 33 40 the wood. Final Report of the Depart- Control 10 Control - - ment of disinfection, 2012.

52 4| 14| 2015 КАРАНТИН РАСТЕНИЙ КАРАНТИН РАСТЕНИЙ 4| 14| 2015 53 Особую озабоченность ПРАКТИЧЕСКОЕ вызывают поставки грузов из стран Юго-Восточной Азии, Африки, Южной ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ФЕРОМОНОВ Америки, фитосанитарная как гарантия биобезопасности Российской Федерации обстановка которых мало изучена или не изучена вообще. А.А. Кузин, заместитель начальника отдела синтеза и применения феромонов ФГБУ «ВНИИКР» ния территории Российской Феде- рации. Н.М. Атанов, ведущий научный сотрудник лаборатории испытания Специалистами отдела разработа- и применения феромонов ФГБУ «ВНИИКР» на и внедрена в практику «Програм- Fig. 2. A barrier trap Fig. 3. A vertical trap В.П. Князева, начальник организационно-аналитического отдела ФГБУ «ВНИИКР» ма по выявлению карантинных вре- дителей на территории РФ с исполь- Рис. 2. Барьерная ловушка Рис. 3. Вертикальная ловушка зованием феромонных и цветных ловушек в зонах наибольшего фито- то в 2014 году обследовано 2 743 тыс. использовании феромонных лову- санитарного риска» на 2010–2015 гг. га, т.е. в 6 раз больше. шек в зонах фитосанитарного риска В течение этого периода специали- Достаточно красноречивы дан- впервые зафиксировано два случая Многократное увеличение интен- точной Азии, Африки, Южной Аме- стами отдела путем лабораторного ные о количестве случаев обнару- обнаружения опасного карантин- сивности перемещения разнообраз- рики, фитосанитарная обстановка химического синтеза получено 18 жения всего видового разнообразия ного вредителя — кукурузного жука ного ассортимента растительных которых мало изучена или не изуче- видоспецифичных феромонов ка- карантинных вредителей (табл. 2). диабротика в приграничных с Укра- грузов, поставляемых на территорию на вообще. рантинных вредителей, применение Этот показатель свидетельствует иной районах Ростовской области, а Российской Федерации, указывает на Анализ случаев обнаружения которых обеспечивало Россельхоз- о стабильном росте числа выявлен- также четыре случая обнаружения необходимость поиска новых путей, карантинных вредителей на тер- надзор достоверной и оперативной ных видов. Так, если в 2009 году сум- карантинного вредителя плодовых обеспечивающих безопасность стра- риториях, где они раньше никогда информацией о фитосанитарном марное число случаев обнаружения культур — средиземноморской пло- ны от заноса чужеземных вредонос- не выявлялись, свидетельствует о Fig. 1. Kuzin А.А., состоянии страны. составляло 28, то в 2014 году оно довой мухи. ных видов насекомых и регулярного невозможности их обнаружения an honorable FGBU VNIIKR’s specialist В соответствии с упомянутой возросло до 3 391, в том числе вре- Следует отменить неуклонный контроля в очагах ограниченно рас- традиционными методами (визу- Программой за несколько лет при- дителей лесных угодий и декоратив- рост площадей фитосанитарных пространенных карантинных вреди- ально, пищевыми приманками, све- Рис. 1. А.А. Кузин, менено 419,5 тыс. комплектов феро- ных насаждений — 1 731 случай, или зон. Другими словами, имеет ме- телей. толовушками) в начальный период ветеран ФГБУ «ВНИИКР» монных ловушек. Объемы использо- 51%, карантинных вредителей пло- сто масштабное расширение очагов Проникновение карантинных обоснования, когда первоначальная вания феромонных ловушек начиная доносящих садов и плодовых питом- ограниченно распространенных ка- насекомых на новые территории численность вредителей весьма не- тилетий целенаправленно на уровне с 2010 года по настоящее время воз- ников — 650 случаев, или 19,2%, что рантинных вредителей (табл. 3). Из сопряжено с угрозой необратимых значительна. Обычно инвазивные государственных целевых программ росли в 4 раза (табл. 1). Что касается в целом соответствует фактическо- приведенных данных на примере изменений в структуре сельскохо- виды фиксировались лишь спустя успешно используется во многих зон фитосанитарного риска, то, если му увеличению объемов обследова- восточной плодожорки, картофель- зяйственного производства, а также годы после их заноса и обоснования. развитых странах мира, является в 2009 году на этих территориях тельских мероприятий по плодовым ной моли и персиковой плодожорки массового уничтожения абориген- Как показывает мировая прак- феромонный мониторинг. было обследовано всего 458,7 тыс. га, культурам и лесным угодьям. При очевидно, что по сравнению с дан- ной растительности, существенного тика, контроль состояния подка- С созданием на базе ФГБУ «ВНИ- ными площадей по карантинным изменения среды обитания и серьез- рантинных объектов и материалов ИКР» отдела синтеза и применения Таблица 2 зонам, установленным в 2005 году, ных социально-экономических по- должен обеспечиваться максималь- феромонов насекомых появилась Карантинные вредители, выявленные в 2014 году площади, заселенные следствий. но достоверными и оперативными возможность восстановить это ра- с помощью феромонных и цветных ловушек Особую озабоченность вызывают методами. Одним из таких методов, нее забытое научное направление поставки грузов из стран Юго-Вос- который в течение последних деся- и сделать его прорывным в плане Случаи выявления № Вид вредного организма практической реализации инстру- 2009 г. 2010 г. 2011 г. 2012 г. 2013 г. 2014 г. Таблица 1 ментального мониторинга каран- 1 Азиатская хлопковая совка 0 8 48 2 13 47 тинного фитосанитарного состоя- Объемы проведенных обследований на выявление 2 Американская белая бабочка 0 0 0 0 0 4 карантинных вредителей с помощью феромонных и цветных ловушек 3 Восточная плодожорка 16 87 91 41 56 166 Лесные 4 Калифорнийская щитовка 6 87 76 90 74 262 Применено Плодовые Посадки и лесодекора- Складские 5 Калифорнийский трипс 0 7 6 647 151 518 Год ловушек Посевы насаждения картофеля тивные Овощные помещения (шт.) кукурузы (га) (га) (га) насаждения (га) (кв. м) 6 Кукурузный жук 0 0 1 1 0 0 (га) 7 Картофельная моль 3 11 5 13 22 152 2009 24263 38749 39972 5362 373119 987 4957497 8 Непарный шелкопряд 1 38 415 124 277 519 2010 29449 50994 127908 45456 2453979 10600 6351683 9 Персиковая плодожорка 0 33 62 83 102 221 2011 79796 39927 48858 15482 1320420 7297 1865746 10 Сибирский шелкопряд 2 22 193 487 252 1118 2012 82621 63766 92025 28591 1007786 3817 3394920 11 Средиземноморская плодовая муха 0 3 0 0 0 1 2013 109343 164671 127552 27766 543948 12904 17962688 12 Ус ачи 0 0 46 2 1 90 2014 94019 36025 460337 15820 1807508 5106 1830000 13 Томатная моль 0 0 1 1 7 288 Итого: 419491 394132 896652 138477 7506760 40711 36362534 Итого: 28 296 944 1491 955 3391

54 4| 14| 2015 КАРАНТИН РАСТЕНИЙ КАРАНТИН РАСТЕНИЙ 4| 14| 2015 55 этими вредителями, увеличились со- мониторинга карантинного фитоса- Table 1 ответственно с 10 070 га до 25 338 га нитарного стояния РФ, рассчитан- Detection surveys for quarantine pests conducted using pheromone and color traps (в 2,5 раза), с 2 614 га до 8 362 га (в 3,2 ная на три года (2016–2018 гг.). раза) и с 1 775 га до 138 048 га (более В работе над статьей использова- Forest and Traps used Fruit crops ornamental Vegetables Storage чем 77 раз). ны материалы ежегодно издаваемо- Year (units) Corn (ha) (ha) Potato (ha) plants (ha) facilities В сложившейся ситуации, на наш го Справочника по карантинному (ha) (sq.m) взгляд, необходимо активизировать состоянию территории РФ, а также 2009 24,263 38,749 39,972 5,362 373,119 987 4,957,497 мероприятия по локализации и лик- ежегодных информационных отчетов Fig. 4. Pheromone quality control видации карантинных вредителей ФГБУ «ВНИИКР» о применении фе- 2010 29,449 50,994 127,908 45,456 2,453,979 10,600 6,351,683 в фитосанитарных зонах, подкон- ромонных и цветных ловушек на тер- 2011 79,796 39,927 48,858 15,482 1,320,420 7,297 1,865,746 Рис. 4. Контроль качества феромонов трольных региональным управле- ритории РФ для установления каран- 2012 82,621 63,766 92,025 28,591 1,007,786 3,817 3,394,920 ниям Россельхознадзора. Этому тинного фитосанитарного состояния 2013 109,343 164,671 127,552 27,766 543,948 12,904 17,962,688 призвана помочь новая научно обо- подкарантинных объектов. В статье 2014 94,019 36,025 460,337 15,820 1,807,508 5,106 1,830,000 снованная Программа феромонного использованы фотографии авторов. Таблица 3 Total: 419,491 394,132 896,652 138,477 7,506,760 40,711 36,362,534 Площади карантинных фитосанитарных зон, установленных на территории РФ за период с 2005 по 2014 гг. (га) Imports of commodities state of the territory of the Russian Fed- in 2014 it increased to 3,391, including Название from Southeast Asia, Africa, eration. pests of forest and ornamental plants — карантинного 2005 г. 2006 г. 2007 г. 2008 г. 2009 г. 2010 г. 2011 г. 2012 г. 2013 г. 2014 г. and South America are of The Department specialists have de- 1,731 cases, or 51%; quarantine pests of организма particular concern since their veloped and put into practice Quaran- fruit-bearing orchards and fruit nurser- Восточная phytosanitary condition is tine Pest Identification Program for the ies — 650 cases, or 19.2%, which gener- плодожорка Russian Federation using pheromone ally reflects the intensification of surveys 10070 11591,7 14288,1 15519,7 9562,3 9677,6 16233,05 19153,3 22120,3 25338,1 insufficiently studied or not Grapholita and color traps in high pest risk areas of fruit crops and forests. In pest risk ar- molesta studied at all. for 2010–2015. During this period, the eas where pheromone traps were used, Картофельная specialists of the laboratory have ob- there have been two interceptions of a моль ible baits, light traps) at the initial phase tained 18 species-specific pheromones dangerous quarantine pest, the Western 2614,5 2846 2997,7 2321,7 1716 2804 6387,1 6815,5 8049,01 8361,99 Phthorimaea of their establishment when the pest is of quarantine pests by chemical syn- corn rootworm, which was intercepted operculella present at low prevalence. Typically, in- thesis. The use of these pheronomes for the first time in the parts of Rostov Персиковая vasive species have been reported only helped provide Rosselkhoznadzor with region bordering on Ukraine, and four плодожорка 1774,7 1548,2 1548,2 36419,1 32177 36442,3 100908,4 136872,03 122212,8 138048,3 years after their entry and establish- reliable and timely information on the interceptions of the Mediterranean fruit Carposina ment. phytosanitary condition of the country. fly, a quarantine pest of fruit crops. niponensis Global experience shows that control Under the program, 419.5 thousand of It is worth mentioning that phy- of regulated articles should be provid- sets of pheromone traps were used within tosanitary areas increased in size. In ed using reliable and efficient methods. several years. Since 2010, the number of other words, there is a large-scale ex- Pheromone monitoring is one of such sets used has increased four times (Ta- pansion of outbreaks of limitedly dis- methods. During the last decades, this ble. 1). In high pest risk areas, only 458.7 tributed quarantine pests (Table. 3). The method has been extensively and suc- thousand ha were surveyed in 2009, while data on the Oriental fruit moth, potato cessfully used in national programs in 2,743 thousand ha were surveyed in 2014, tuber moth and peach fruit moth show USE OF PHEROMONES IN many developed countries. i.e. the survey area increased six times. that in 2014 as compared with 2005, the Reestablishment of the Department The data on the number of intercep- areas where these pests are prevalent for synthesis and use of insect phero- tions of all quarantine pests species (Ta- have increased from 10,070 ha to 25,338 PROTECTING THE BIOLOGICAL mones at FGBU VNIIKR revived this ble. 2) are quite illustrative. These data ha (by 2.5 times), 2,614 ha to 8,362 ha Safety of the Russian Federation previously neglected research area and show a steady increase in the number (by 3.2 times) and 1,775 to 138,048 ha made it a breakthrough in terms of of interceptions. Thus, the total number (by more than 77 times). monitoring quarantine phytosanitary of interceptions in 2009 was 28, while With this in view, in our opinion, it Anatoly А. Kuzin, Deputy Head of FGBU VNIIKR’s is necessary to strengthen measures for Department for Pheromone Synthesis and Use Fig. 5. A roof-shaped trap Fig. 6. Delta trap; fruit pest monitoring

Nikolay М. Atanov, Leading Researcher of FGBU VNIIKR’s Рис. 5. Крышевидная ловушка Рис. 6. Дельтовидная ловушка, Laboratory for Pheromone Testing and Use мониторинг вредителей плодовых Valentina P. Knyazeva, Head of FGBU VNIIKR’s Organization and Analytics Department

Increased volumes of import of vari- Quarantine insects enter new terri- are of particular concern since their ous plant commodities into the Russian tories and cause irreversible changes in phytosanitary condition is insufficiently Federation necessitates finding new the structure of agricultural production studied or not studied at all. ways of safeguarding the country from and mass destruction of native vegeta- Analysis of quarantine pest inter- the introduction of alien pest species tion, habitat alteration and serious so- ceptions in areas where they have never and of conducting regular outbreak cioeconomic consequences. been detected before proves that they monitoring to limit the spread of quar- Imports of commodities from South- are impossible to detect by convention- antine pests. East Asia, Africa, and South America al methods (visual detection, use of ed-

56 4| 14| 2015 КАРАНТИН РАСТЕНИЙ КАРАНТИН РАСТЕНИЙ 4| 14| 2015 57 Table 2 Quarantine pests detected using pheromone and color traps Interceptions № Pest species 2009 2010 2011 2012 2013 2014 1 Oriental leafworm moth 0 8 48 2 13 47 2 Fall webworm 0 0 0 0 0 4 3 Oriental fruit moth 16 87 91 41 56 166 4 San Jose scale 6 87 76 90 74 262 5 Western flower thrips 0 7 6 647 151 518 6 Western corn rootworm 0 0 1 1 0 0 7 Potato tuber moth 3 11 5 13 22 152 8 Gypsy moth 1 38 415 124 277 519 9 Peach fruit moth 0 33 62 83 102 221 10 Siberian moth 2 22 193 487 252 1,118 11 Mediterranean fruit fly 0 3 0 0 0 1 12 Longhorn beetle 0 0 46 2 1 90 13 Tomato moth 0 0 1 1 7 288 Total: 28 296 944 1,491 955 3,391

Table 3 Size of quarantine areas established in the Russian Federation between 2005 and 2014 (ha) Pest species 2005 2006 2007 2008 2009 2010 2011 2012 2013 2014 Oriental fruit moth 10,070 11,591.7 14,288.1 15,519.7 9,562.3 9,677.6 16,233.05 19,153.3 22,120.3 25,338.1 Grapholita molesta Potato tuber moth 2,614.5 2,846 2,997.7 2,321.7 1,716 2,804 6,387.1 6,815.5 8,049.01 8,361.99 Phthorimaea operculella Peach fruit moth 1,774.7 1,548.2 1,548.2 36,419.1 32,177 36,442.3 100,908.4 136,872.03 122,212.8 138,048.3 Carposina niponensis containment and eradication of quaran- been developed for the Russian Federa- VNIIKR information reports on the use of tine pests in phytosanitary areas subject tion to be conducted in 2016–2018. pheromone and color traps in the Russian to surveillance of Rosselkhoznadzor’s In the present paper, we used materials Federation for the evaluation of the phy- territorial offices. For this purpose, a annually published in the Handbook on tosanitary condition of regulated articles. new scientifically justified three-year the Quarantine Condition of the Russian The images are provided by the au- pheromone monitoring program has Federation as well as the annual FGBU thors of the present paper.

ИНФОРМАЦИОННОЕ АГЕНТСТВО «FRUITNEWS» Самые свежие новости российского рынка фруктов и овощей на русском — www.FruitNews.ru и английском — www.FruitNews.info языках.

FruitNews — крупнейший российский информационный портал, созданный КОНТАКТЫ для регулярного и оперативного освещения событий рынка овощей, фруктов, Сайт: www.fruitnews.ru, www.fruitnews.info ягод, грибов, орехов, сухофруктов и продуктов их переработки. E-mail: [email protected] Аудитория FruitNews — специалисты рынка из России, Украины, Телефон: +7 (495) 729-3080 Казахстана, Белоруссии и других стран Восточной Европы. Twitter: @fruitnewsru Среднее количество посетителей сайта ~ 60 тысяч человек в месяц. Facebook: www.facebook.com/fruitnews.ru 60 4| 14| 2015 КАРАНТИН РАСТЕНИЙ