UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO POSGRADO EN CIENCIAS BIOLÓGICAS FACULTAD DE CIENCIAS ECOLOGÍA
ASPECTOS SOBRE EL CRECIMIENTO Y REPRODUCCIÓN DEL ACOCIL Cambarellus (Cambarellus) montezumae (SAUSSURE, 1857). UN ANÁLISIS ECOFISIOLÓGICO.
TESIS
QUE PARA OPTAR POR EL GRADO DE: MAESTRA EN CIENCIAS BIOLÓGICAS
PRESENTA: GARCÍA PADILLA GISELA MARINA
TUTOR:
Dr. José Román Latournerié Cervera ENTIDAD DE ADSCRIPCIÓN: FACULTAD DE CIENCIAS, UNAM
COMITÉ TUTOR:
Dr. René de Jesús Cárdenas Vázquez ENTIDAD DE ADSCRIPCIÓN: FACULTAD DE CIENCIAS, UNAM
Dr. Ignacio Méndez Ramírez ENTIDAD DE ADSCRIPCIÓN: IIMAS, UNAM
MÉXICO, D. F., ENERO DE 2014
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UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO POSGRADO EN CIENCIAS BIOLÓGICAS FACULTAD DE CIENCIAS ECOLOGÍA
ASPECTOS SOBRE EL CRECIMIENTO Y REPRODUCCIÓN DEL ACOCIL Cambarellus (Cambarellus) montezumae (SAUSSURE, 1857). UN ANÁLISIS ECOFISIOLÓGICO.
TESIS
QUE PARA OPTAR POR EL GRADO DE: MAESTRA EN CIENCIAS BIOLÓGICAS
PRESENTA: GARCÍA PADILLA GISELA MARINA
TUTOR:
Dr. José Román Latournerié Cervera ENTIDAD DE ADSCRIPCIÓN: FACULTAD DE CIENCIAS, UNAM
COMITÉ TUTOR:
Dr. René de Jesús Cárdenas Vázquez ENTIDAD DE ADSCRIPCIÓN: FACULTAD DE CIENCIAS, UNAM
Dr. Ignacio Méndez Ramírez ENTIDAD DE ADSCRIPCIÓN: IIMAS, UNAM
MÉXICO, D. F., ENERO DE 2014 POSGRADO EN CIENCIAS BIOLÓGICAS FACULTAD DE CIENCIAS DIVISiÓN DE ESTUDIOS DE POSGRADO
OFICIO FCIElDEPI030114 VNIVLI\.'.DAD NAqOJ.lAL AVFftI'MA D[ ASUNTO: Oficio de Jurado Mnm:,o
Dr. Isidro Ávila Martínez Director General de Administración Escolar, UNAM Pr ese nt e
Me permito informar a usted que en la reunión ordinaria del Comité Académico del Posgrado en Ciencias Biológicas, celebrada el día 28 de octubre de 2013 se aprobó el siguiente jurado para el examen de grado de MAESTRA EN CIENCIAS BIOLÓGICAS del (la) alumno (a) GARciA PADILLA GISELA MARINA con numero de cuenta 303177878 con la tesis titulada "Aspectos sobre el crecimiento y reproducción del acocil Cambarellus (Cambarelfus) montezumae (Saussure, 1857). Un análisis ecofisiológico", realizada bajo la dirección del (la ) DR. JOSÉ ROMÁN LATOURNERIÉ CERVERA:
Presidente: DRA. MARIA LUISA FANJUL PEÑA Vocal: DR. RAMIRO ROMÁN CONTRERAS Secretario: DR. REN~ DE JESÚS CÁRDENAS VAzaUEZ Suplente: DR. LUIS HECTOR HERNANDEZ HERNANDEZ Suplente: DR. IGNACIO M~NDEZ RAMiREZ
Sin otro particular, me es grato enviarle un cordial saludo.
Atentamente "POR MI RAZA HABLARA EL EspiRITU" ~"..o DE O/, Cd . Universitaria, D.F ., a 13 de enero de 2014 O.::Jv U ~1 MCAAlMJFM/ASRlmnm AGRADECIMIENTOS. En primer lugar quisiera agradecer al Posgrado en Ciencias Biológicas de la Universidad Nacional Autónoma de México, por haberme dado la oportunidad de formarme tanto en el ámbito profesional como personal, por haberme provisto de excelentes profesores, quienes me brindaron su conocimiento y confianza en el transcurso de mis estudios. Al Programa de Becas de Posgrado del Consejo Nacional de Ciencia y Tecnología (CONACYT), por apoyarme económicamente durante mis estudios de maestría y permitir hacer de este sueño una realidad. Quisiera expresar mi más sincero agradecimiento a mi tutor el Dr. José Román Latournerié Cervera por su ayuda, apoyo, paciencia y enseñanzas, quien además de ser el director de esta tesis, es sin duda, una de las personas que más ha contribuido en mi formación profesional. Por todos los años y lo compartido, GRACIAS. A los miembros de mi comité tutoral, mi reconocimiento y gratitud por todas las enseñanzas que tan generosamente me han brindado, por llevarme de la mano en la realización de esta investigación, al Dr. René de Jesús Cárdenas y al Dr. Ignacio Méndez Ramírez. Un agradecimiento muy especial a los miembros del jurado que revisaron esta tesis: Dra. María Luisa Fanjul Peña, Dr. Ramiro Román Contreras y Dr. Luis Héctor Hernández Hernández, quienes aportaron importantes sugerencias para la culminación de este trabajo y sobre todo me brindaron su apoyo y compresión en el proceso de titulación. Al Dr. Fernando Arana Magallón y al Centro de Investigaciones Biológicas y Acuícolas de Cuemanco (CIBAC), por el apoyo para la realización del monitoreo del hábitat del acocil Cambarellus (C.) montezumae en el lago de Xochimilco 2009 - 2012. A la M en C. Yamel Nacif Osorio que con el paso del tiempo no solo se convirtió en un ejemplo a seguir, sino en una GRAN AMIGA. Gracias por el apoyo en esos días eternos de respirometría y de salidas al campo, por los tantos consejos académicos y personales que me regalaste, pero sobre todo por confiar en mi y ser parte ESENCIAL en vida. A todos los miembros del Laboratorio de Acuacultura y Producción Acuática, que de alguna manera han dejado huella en mi corazón, pero sobre todo a Felipe Rojas Parra, a Silvia Hansen Bernal y a Erika Escalante Garnelo por todo el apoyo que me han brindado, tanto en el trabajo de campo como en el trabajo de laboratorio, sin ustedes este trabajo no sería una realidad, gracias por los buenos momentos que hemos pasado trabajando, viviendo y siendo cómplices en nuestras travesuras, POR SU AMISTAD Y CARIÑO, GRACIAS. A el Arq. Andrés Celis García por los días de pocilga que me hicieron TANTO BIEN y por todos los momentos e historias compartidas, GRACIAS. A la M. en C. Nubia Caballero Mendieta por ser mi primera Jefa y la mejor, gracias por el apoyo en los momentos difíciles y durante el proceso de titulación. A la Universidad Nacional Autónoma de México, que siempre la llevare en mi corazón a donde quiera que vaya, gracias por la oportunidad de formarme como persona y como profesionista, gracias por permitirme hacer de mi hobby mi trabajo. Como no te voy a querer. . . DEDICATORIA. A mis padres: Un hijo es un ser prestado para hacer un curso intensivo de cómo amar a alguien más que a nosotros mismos y de cómo cambiar nuestros peores defectos para darle los mejores ejemplos. Sí. ¡Eso es! Ser padre es el mayor acto de coraje que alguien pueda tener, porque es exponerse a todo tipo de dolor, principalmente de la incertidumbre de estar actuando correctamente y del miedo a perder algo tan amado. Quiero que sepan que ambos lo hicieron maravillosamente, porque con sus enseñanzas, amor y confianza, fortalecieron mi vida. Porque siempre estuvieron para mí con palabras de apoyo, que me ayudaron a seguir adelante (principalmente en estos últimos meses). Por todo esto, quiero que sientan que el objetivo logrado, también es suyo, porque con su esfuerzo y sacrificio, logré el triunfo que hoy les brindo. Con cariño y admiración. . . A Zac = Piscis en maya. Sólo quisiera ser uno de los motivos de tu sonrisa, quizá un pequeño pensamiento de tu mente durante la mañana, o quizá un lindo recuerdo antes de dormir. Sólo quisiera ser una fugaz imagen frente a tus ojos, quizá una voz susurrante en tu oído, o quizá un leve roce en tus labios. Sólo quisiera ser alguien que quisieras tener a tu lado, quizá no durante todo el día, pero de una u otra forma, vivir en ti. GM ÍNDICE Agradecimientos i Dedicatoria ii Resumen iii Abstrac t iv 1. Marco de referencia 1 2. Aspectos biológicos de la especie 5 2.1 Clasificación taxonómica 5 2.2 Morfología externa 6 2.3 Morfología interna 8 2.3.1 Sistema nervioso 8 2.3.2 Sistema circulatorio 8 2.3.3 Sistema respiratorio 9 2.3.4 Sistema excretor 9 2.3.5 Aparato digestivo 10 2.3.6 Aparato reproductivo 11 2.4 Ecdisis o proceso de muda 14 2.5 Reproducción 14 2.6 Hábitat y distribución natural 16 2.7 Alimentación 17 2.8 Requerimientos ambientales 18 2.9 Interacciones ecológicas 18 2.10 Valor nutrimental 19 3. Antecedentes 20 4. Justificación general 38 5. Objetivo general 38 6. CAPÍTULO 1. Estrategia reproductiva del acocil Cambarellus (Cambarellus) montezumae (Saussure, 1857), en el Lago de Xochimilco, México D.F. 6.1 Introducción 39 6.2 Justificación 45 6.3 Objetivos 45 6.3.1 Objetivo general 45 6.3.2 Objetivos particulares 46 6.4 Material y método 47 6.4.1 Área de estudio 47 6.4.2 Trabajo de campo 53 6.4.2.1 Estacionalidad 54 6.4.2.2 Caracterización del hábitat 55 6.4.2.3 Colecta de los organismos 55 6.4.3 Trabajo de laboratorio 56 6.4.3.1 Caracterización de las colectas 56 6.4.3.1.1 Estructura poblacional 57 6.4.3.1.2 Proporción sexual 58 6.4.3.1.3 Relación peso-longitud 59 6.4.3.2 Indicadores del desempeño reproductivo 60 6.4.3.2.1 Época reproductiva 60 6.4.3.2.2 Índice de desove 60 6.4.3.2.3 Fecundidad 60 6.4.3.2.4 Esfuerzo reproductivo 61 6.4.3.3 Indicadores de la calidad del huevo 62 6.4.3.3.1 Volumen 62 6.4.3.3.2 Composición químico proximal 63 6.4.3.4 Desarrollo embrionario 63 6.4.3.4.1 Tiempo de incubación 63 6.4.2.4.2 Tamaño de las crías 64 6.4.3.5 Respuesta fisiológica de las hembras ovígeras 65 6.5 Resultados 67 6.5.1 Caracterización del hábitat 67 6.5.2 Caracterización de las colectas 70 6.5.3 Estructura poblacional 73 6.5.4 Proporción sexual 75 6.5.5 Relación Peso-Longitud 76 6.5.6 Indicadores de desempeño reproductivo 79 6.5.6.1 Época reproductiva 79 6.5.6.2 Índice de desove 81 6.5.6.3 Fecundidad 82 6.5.6.4 Esfuerzo reproductivo 86 6.5.7 Indicadores de la calidad del huevo 88 6.5.7.1 Volumen del huevo 89 6.5.7.2 Composición químico proxima l del huevo 90 6.5.8 Desarrollo embrionario 93 6.5.8.1 Tiempo de incubación 94 6.5.8.2 Tamaño de las crías 95 6.5.9 Respuesta fisiológica de las hembras ovígeras 96 6.6 Discusión 97 6.7 Conclusiones 111 7. CAPÍTULO 2. Efecto de una dieta formulada sobre el crecimiento, sobrevivencia y calidad de la puesta en crías de acocil Cambarellus (Cambarellus) montezumae (Saussure, 1857), en condiciones controladas 7.1 Introducción 113 7.2 Justificación 118 7.3 Objetivos 118 7.3.1 Objetivo general 118 7.3.2 Objetivos particulares 119 7.4 Material y método 120 7.4.1 Trabajo de campo 120 7.4.1.1 Caracterización del hábitat y colecta de los organismos 120 7.4.2 Trabajo de laboratorio 121 7.4.2.1 Elaboración de las dietas 121 7.4.2.2 Análisis químico proximal de las dietas 122 7.4.2.3 FASE I. Crecimiento y sobrevivencia 123 7.4.2.3.1 Diseño experimental 123 7.4.2.3.2 Crecimiento y sobrevivencia 124 7.4.2.3.3 Tasa Instantánea de Crecimiento y Producción 126 7.4.2.4 FASE II. Indicadores de desempeño reproductivo 127 7.4.2.4.1 Diseño experimental 127 7.4.2.4.2 Talla mínima de madurez 128 7.4.2.4.3 Índice de desove 128 7.4.2.4.4 Fecundidad 129 7.4.2.4.5 Calidad de los reproductores 129 7.4.2.5 FASE III. Indicadores de la calidad de la puesta 132 7.4.2.5.1 Volumen y peso del huevo 133 7.4.2.5.2 Composición químico proximal de la puesta 133 7.4.2.5.1 Desarrollo embrionario 134 7.5 Resultados 136 7.5.1 Análisis de la calidad del agua 136 7.5.2 FASE I. Crecimiento y sobrevivencia 137 7.5.2.1 Crecimiento y sobrevivencia 138 7.5.2.2 Tasa Instantánea de Crecimiento y Producción 139 7.5.3 FASE II. Indicadores de desempeño reproductivo 142 7.5.3.1 Talla mínima de madurez 142 7.5.3.2 Índice de desove 144 7.5.3.3 Fecundidad 145 7.5.3.4 Calidad de los reproductores 147 7.5.4 FASE III. Indicadores de la calidad de la puesta 156 7.5.4.1 Volumen y peso del huevo 157 7.5.4.2 Composición químico proximal de la puesta 159 7.5.4.3 Desarrollo embrionario 160 7.6 Discusión 164 7.7 Conclusiones 176 8. Literatura citada 17 8 Cuadro Página Valor nutrimental del acocil Cambarellus (C.) montezumae de la 1 presa de Atlangatepec, Tlaxcala. 19 Distribución media mensual de la temperatura ambiente en la zona 2 lacustre de Xochimilco. 54 Características de cada edad ecológica del acocil Cambarellus (C.) 3 montezumae. 58 Características de los estadios de desarrollo embrionario del acocil 4 Cambarellus (C.) montezumae. 64 Parámetros físico-químicos del hábitat (Canal de Cuemanco) del 5 acocil Cambarellus (C.) montezumae en época cálida y fría del año. 68 Número de organismos del acocil Cambarellus (C.) montezumae 6 colectados mensualmente en el Canal de Cuemanco. 72 Abundancia de organismos del acocil Cambarellus (C.) montezumae 7 por edad ecológica en época cálida y fría del año. 74 Modelo potencial de crecimiento del acocil Cambarellus (C.) 8 montezumae por sexo y época del año. 76 Abundancia de hembras adultas del acocil Cambarellus (C.) 9 montezumae en época cálida y fría del año. 81 Características morfométricas y número de huevos de hembras ovígeras del acocil Cambarellus (C.) montezumae colectas en época 10 83 cálida y fría del año. Volumen y peso húmedo del huevo del acocil Cambarellus (C.) 11 montezumae en época cálida y fría del año. 89 Contenido químico proximal de los huevos del acocil Cambarellus (C.) 12 montezumae en época cálida y fría del año. 91 Contenido químico proximal de las hembras ovígeras del acocil 13 Cambarellus (C.) montezumae en época cálida y fría del año. 92 Análisis químico proximal de las dietas. 15 122 Parámetros físico-químicos promedio registrados durante la fase 16 experimental para cada tratamiento. 136 Crecimiento (LT, LCT y Ph) y sobrevivencia (%) de crías de acocil 17 Cambarellus (C.) montezumae durante un periodo de 60 días. 139 Valores de TIC durante 60 días para crías de acocil Cambarellus (C.) 18 montezumae. 140 Producción (formación de tejido corporal en mg) de las crías del acocil Cambarellus (C.) montezumae alimentados con la dieta formulada y 19 141 la dieta control durante 60 días. Número de desoves de las hembras del acocil Cambarellus (C.) 20 montezumae alimentadas con la dieta formulada y la dieta control. 143 Índice de Desove las hembras del acocil Cambarellus (C.) 21 montezumae alimentadas con la dieta formulada y la dieta control. 144 Características morfométricas y número de huevos de hembras 22 ovígeras de Cambarellus (C.) montezumae para ambas dietas. 146 Índices morfométricos por tratamiento y sexo del acocil Cambarellus 23 (C.) montezumae al termino de los 150 días de experimentación. 148 Análisis químico proximal de las reproductores del acocil Cambarellus (C.) montezumae al final del periodo experimental (150 24 150 días). Gasto de energía promedio por tasa metabólica para ambos sexos y 25 tratamientos del acocil Cambarellus (C.) montezumae. 153 Gasto de energía promedio por excreción nitrogenada para ambos sexos y tratamientos (Dieta formulada y control) del acocil 26 155 Cambarellus (C.) montezumae. Volumen y peso húmedo del huevo de hembras alimentadas con la dieta formulada y la dieta control del acocil Cambarellus (C.) 27 157 montezumae. Composición químico proximal de los huevos de hembras alimentadas con la dieta formulada y la dieta control del acocil Cambarellus (C.) 28 159 montezumae. Sobrevivencia a los 15 días de crías de hembras alimentadas con la 29 dieta formulada y la dieta control del acocil Cambarellus (C.) 163 montezumae. Figura Página Características biométricas del acocil Cambarellus (C.) montezumae. 1 56 Temperatura media mensual en el Canal de Cuemanco. 2 69 Oxígeno disuelto medio mensual en el Canal de Cuemanco. 3 69 Potencial de hidrogeno (pH) medio mensual en el Canal de 4 Cuemanco. 70 Abundancia del acocil Cambarellus (C.) montezumae en época cálida 5 y fría del año en el Canal de Cuemanco. 71 Número de organismos del acocil Cambarellus (C.) montezumae 6 colectados mensualmente en el Canal de Cuemanco. 72 Regresión lineal entre la temperatura hábitat y la abundancia del 7 acocil Cambarellus (C.) montezumae. 73 Abundancia de organismos por sexo del acocil Cambarellus (C.) 8 75 montezumae en época cálida y fría. Modelo potencial de crecimiento del acocil Cambarellus (C.) 9 montezumae en época cálida (a=hembras y b=machos). 77 Modelo potencial de crecimiento del acocil Cambarellus (C.) 10 montezumae en época fría (a=hembras y b=machos). 78 Número de hembras ovígeras del acocil Cambarellus (C.) montezumae 11 colectadas mensualmente en el Canal de Cuemanco. 80 Relación entre temperatura del hábitat y la abundancia mensual de 12 hembras ovígeras del acocil Cambarellus (C.) montezumae. 80 Número total de huevos de las hembras ovígeras del acocil 13 Cambarellus (C.) montezumae en época cálida y fría del año. 84 Relación del número de huevos respecto al tamaño de la hembra 14 ovígera del acocil Cambarellus (C.) montezumae. 85 Relación del número de huevos respecto a la amplitud del abdomen 15 de una hembra ovígera del acocil Cambarellus (C.) montezumae. 86 Relación entre el peso de la masa ovígera respecto al peso de la 16 hembra del acocil Cambarellus (C.) montezumae. 87 Peso de masa ovígera del acocil Cambarellus (C.) montezumae en 17 época cálida y fría del año. 88 Volumen del huevo del acocil Cambarellus (C.) montezumae en época 18 cálida y fría del año. 90 Contenido químico proximal de los huevos del acocil Cambarellus (C.) 19 montezumae en época cálida y fría del año. 91 Contenido químico proximal de las hembras ovígeras del acocil 20 Cambarellus (C.) montezumae en época cálida y fría del año. 92 21 Desarrollo embrionario del acocil Cambarellus (C.) montezumae. 93 Tiempo de incubación del acocil Cambarellus (C.) montezumae en 22 época cálida y fría del año. 94 Peso de crías de época cálida y fría del año del acocil Cambarellus (C.) 23 montezumae. 95 Consumo de oxígeno de hembras ovígeras y no ovígeras del acocil 24 Cambarellus (C.) montezumae. 96 Diseño experimental para evaluar el crecimiento y sobrevivencia de 25 crías del acocil Cambarellus (C.) montezumae. 124 Características biométricas del acocil Cambarellus (C.) montezumae. 26 125 Diseño experimental para evaluar los indicadores del desempeño reproductivo y la calidad de la puesta del acocil Cambarellus (C.) 27 126 montezumae. Índices morfométricos registrados: LT, LCT y Ph de crías del acocil 28 Cambarellus (C.) montezumae en un periodo de 60 días. 138 TIC calculada para crías del acocil Cambarellus (C.) montezumae 29 alimentados con la dieta formulada y la dieta control. 141 Evolución del número de desoves de las hembras del acocil Cambarellus (C.) montezumae alimentadas con la dieta formulada y 30 143 la dieta control. Número de huevos portados por hembra del acocil Cambarellus (C.) 31 montezumae alimentadas con la dieta formulada y la dieta control. 147 Análisis discriminante (Modelo completo: LT, LCT, Ph, MO, MT, 32 Lípidos, Proteínas y Contenido calórico). 151 Análisis discriminante (Modelo reducido: Lípidos y contenido 33 calórico). 151 Gasto de energía promedio por tasa metabólica para ambos sexos y tratamientos (Dieta formulada y control) del acocil Cambarellus (C.) 34 153 montezumae. Gasto de energía promedio por excreción nitrogenada para ambos 35 sexos y tratamientos del acocil Cambarellus (C.) montezumae. 155 Volumen del huevo de hembras alimentadas con la dieta formulada y 36 la dieta control del acocil Cambarellus (C.) montezumae. 157 Peso húmedo del huevo de hembras alimentadas con dieta formulada 37 y dieta control del acocil Cambarellus (C.) montezumae. 158 Composición químico proximal de los huevos de hembras alimentadas con la dieta formulada y la dieta control del acocil Cambarellus (C.) 38 160 montezumae. Tiempo de incubación de hembras alimentadas con dieta formulada y 39 la dieta control del acocil Cambarellus (C.) montezumae. 161 Peso de crías de hembras alimentadas con la dieta formulada y la 40 162 dieta control del acocil Cambarellus (C.) montezumae. RESUMEN. La presente investigación consta de dos capítulos, el primero de ellos trata sobre la estrategia reproductiva del acocil Cambarellus (Cambarellus) montezumae en el Lago de Xochimilco y el segundo, versa sobre el efecto de una dieta formulada sobre el crecimiento, sobrevivencia y calidad de la puesta en crías de este acocil bajo condiciones controladas. En el primer capítulo, para determinar la estrategia reproductiva de la especie, se llevó a cabo un muestreo anual en el Lago de Xochimilco, esto con el fin de determinar las variaciones estacionales de la poblacional en cuanto a su estructura poblacional y a su ecología reproductiva. Se encontró que Cambarellus (C.) montezumae es una especie que se adapta a diferentes condiciones ambientales; en los canales de Xochimilco este acocil encuentra condiciones óptimas para su desarrollo, ya que los parámetros fisicoquímicos del agua (temperatura, oxígeno y pH), se encuentran entre los valores de tolerancia para la especie. La población de este acocil en el Lago de Xochimilco es de tipo joven, ya que presenta una elevada proporción de crías y juveniles, lo que confiere a la población una capacidad latente para su rápido crecimiento, siempre y cuando existan las condiciones medioambientales apropiadas para su desarrollo. Su estrategia reproductiva muestra que existe una época reproductiva bien definida, la cual se lleva a cabo en la época cálida del año, entre los meses de abril, mayo y junio principalmente, cuando la idoneidad de las hembras es mayor para la reproducción reflejándose en la fecundidad, el índice de desove y calidad de los huevos y crías. En el segundo capítulo el objetivo principal de la investigación fue cuantificar el efecto de una dieta formulada sobre la producción de este acocil, con la que se pretendía mejorar el crecimiento, la sobrevivencia, la reproducción, la calidad iii de los reproductores y la puesta, por lo cual se decidió aumentar los niveles de proteínas y ácidos grasos en la dieta, mediante el uso de harina de calamar y aceite de pescado. Encontramos que existe un efecto diferencial en cuento a la calidad de los reproductores y las crías de este acocil alimentadas con la dieta formula, ya que los organismos alimentados con dicha dieta tuvieron una menor edad mínima de primera madurez, así como un mayor índice de desove, fecundidad, calidad de los huevos, sobrevivencia y tamaño de las crías. Estos resultados pueden servir de base para el desarrollo de un sistema de cultivo a nivel intensivo, ya que conocer los mecanismos de reproducción son básicos y previos al funcionamiento de cualquier explotación acuícola, cuyo objetivo principal es maximizar la producción de los organismos útiles, a través de la producción de una progenie numerosa, saludable y homogenea. iii ABSTRACT. The current research consists of two chapters, the first of which deals with the reproductive strategy of the crayfish Cambarellus (Cambarellus) montezumae in the Xochimilco Lake, and the second is about the effect of a formulated diet on growth, survival and quality of the reproduction of this crayfish under controlled conditions. In the first chapter, in order to determine the reproductive strategy of the species, an annual sampling was collected in Xochimilco Lake, with the purpose of determining the seasonal variations of the population regarding their population structure and reproductive ecology. We found that Cambarellus (C.) montezumae is a species adapting to different environmental conditions. Moreover, we found that this crayfish found optimal conditions for its development in the canals of Xochimilco, as the physicochemical parameters of the water (temperature, oxygen, and pH) are within the tolerance values for the species. The population of the crayfish in Xochimilco Lake is young, since it presents a high proportion of breeds and young specimens, which gives the population a latent capacity for rapid growth as long as appropriate environmental conditions for its development exist. Its reproductive strategy shows that there is a well-defined reproductive season, which takes place in the warm season, mainly in the months of April, May and June, when the fitness of females is higher for reproduction, which is reflected in the fertility, the spawning rate, and quality of eggs and breeds. In the second chapter, the main objective of this research was to quantify the effect of a formulated diet on the production of this crayfish. This diet was intended to improve the growth, survival, reproduction, and quality of breeders and increase the spawning rate. Therefore, it was decided to increase the protein and fatty acid levels in the diet through the use of squid flour and fish oil. iii We found that there is a differential effect with regard to the quality of the breeders and the breeds of this crayfish when they are fed with the formulated diet, since the organisms fed with this diet had a lower minimum age at first maturity and a higher spawning rate, fecundity, egg quality, survival, and breed size. These results can serve as a basis for the development of an aquaculture system at intensive level, as to know the reproductive mechanisms is critical and necessary to start the operation of any aquaculture exploitation, whose main objective is to maximize the production of useful organisms through the production of large, healthy, and uniform offspring. iii 1. MARCO DE REFERENCIA. México es un país multifacético, plural y diverso en numerosos aspectos. El rasgo más distintivo del país es su gran heterogeneidad ambiental, albergamos en nuestro territorio infinidad de variados paisajes, además de muchas y singulares culturas. De la misma manera su inmejorable ubicación geográfica, hace que nuestro país sea poseedor de una gran riqueza de recursos naturales, con gran diversidad de flora y fauna tanto terrestres como acuáticas, las cuales muestran en muchos casos un marcado endemismo, cuya preservación y estudio resulta ser una necesidad actual y primordial, así como un serio compromiso con las generaciones venideras, esto en el marco de la sustentabilidad ambiental (Capital Natural, 2009). La sustentabilidad ambiental se refiere a la administración eficiente y racional de los recursos naturales, de manera tal, que sea posible mejorar el bienestar de la población actual sin comprometer la calidad de vida de las generaciones futuras. Uno de los principales retos que enfrenta México es incluir al medio ambiente como uno de los elementos de la competitividad y el desarrollo económico y social. Desafortunadamente, los esfuerzos de conservación de los recursos naturales y ecosistemas suelen verse obstaculizados por un círculo vicioso que incluye pobreza, agotamiento de los recursos naturales, deterioro ambiental y más pobreza (Plan Nacional de Desarrollo, 2007-2012). Indudablemente México enfrenta grandes retos en todos los aspectos de la agenda ambiental. Esta agenda comprende temas fundamentales como la conciliación de la protección del medio ambiente (la mitigación del cambio climático, la reforestación de bosques y selvas, la conservación, uso del agua y del suelo, la preservación de la biodiversidad, el ordenamiento ecológico y la 1 gestión ambiental) con la competitividad de los sectores productivos y con el desarrollo social. Estos temas pueden atenderse desde tres grandes líneas de acción, que son: 1. Aprovechamiento sustentable de los recursos naturales. 2. Protección del medio ambiente. 3. Educación y conocimiento para la sustentabilidad ambiental. Desde la línea de acción del aprovechamiento sustentable de los recursos naturales, en los últimos años ha sido necesario buscar fuentes que impulsen el desarrollo de actividades que contribuyan con el crecimiento económico y social del país, lo cual va de acuerdo con el Plan Nacional de Desarrollo 2007 – 2012 (PND), en el cual se considera estratégico establecer condiciones para que México se inserte en la vanguardia tecnológica. Asimismo, el PND señala que hay que aprovechar las nuevas tecnologías (biotecnología) y contribuir al desarrollo de las mismas, lo cual no sólo implicaría un avance estructural sino que repercutiría en un incremento en la competitividad de la economía mexicana. En este sentido la acuicultura se ha convertido en la actividad de producción de alimentos con mayor crecimiento a nivel mundial en los últimos años. La importancia de cubrir las necesidades alimentarias de la población aumenta rápidamente y con ello, la necesidad de hacerlo de una manera sustentable. En México la alimentación es un tema de alta prioridad; por un lado, se tiene el problema de la desnutrición que prevalece en el sector de la población en extrema pobreza y por otro lado, está el problema de la obesidad que existe en gran parte de la población y con la cual se ha alcanzado el primer lugar de obesidad infantil a nivel mundial (UNICEF, 2012). 2 Estos problemas pueden ser parcialmente compensados a través de un incremento sustancial en el consumo de productos acuáticos. En la actualidad México cuenta con varias especies de crustáceos y moluscos que están siendo utilizadas en prácticas acuícolas como es el caso del “camarón” y el “langostino”, las “ostras” y los “ostiones”, entre otras. Sin embargo, existen especies que por sus características podrían emplearse en estas prácticas y a las cuales se les ha puesto poca atención, tal es el caso del “acocil” o “cangrejo de rio” (Huner, 1981; Huner & Avault, 1985; Holdich & Lowery, 1988; Villareal, 1991; Rodríguez-Serna, 1991). De acuerdo con la Carta Nacional Acuícola (2012) elaborada por el INAPESCA, el acocil Cambarellus (Cambarellus) montezumae (Saussure, 1857), es un crustáceo decápodo de agua dulce susceptible a ser cultivado en el campo de la acuicultura, por lo cual se ha considerado como una especie endémica con potencial acuícola de alto valor nutricional. Su valor nutricional se relaciona principalmente con la cantidad y calidad de proteínas y lípidos que presenta, que tienen una influencia positiva en el desarrollo del ser humano por su participación en el desarrollo muscular, la regeneración de tejidos y enzimas, debido a su contenido de aminoácidos esenciales, además de ser una fuente rica de ácidos grasos, principalmente del tipo de los poliinsaturados (dentro de este grupo se encuentra el ácido linolénico [omega 3] y el linoleico [omega 6]), los cuales son beneficiosos para el ser humano (Monroy, 2011). Asimismo, esta especie es de rápido crecimiento y se reproduce durante todo el año con elevadas tasas de supervivencia, lo que hace posible generar suficientes volúmenes para atender la demanda del mercado. El consumo de un producto 3 como este podría contribuir a disminuir problemas asociados a la desnutrición, obesidad y a una alimentación desbalanceada. Por todo lo anterior, surge el interés y la necesidad de estudiar aspectos sobre el crecimiento y la reproducción de esta especie, lo cual nos puede ayudar a sentar las bases para el desarrollo de un paquete tecnológico (protocolo de producción), con el fin de facilitar la transferencia del conocimiento científico a la sociedad y de esta manera, introducir esta especie en el mercado y ofrecer una alternativa proteica de alta calidad y bajo costo. 4 2. ASPECTOS BIOLÓGICOS DE LA ESPECIE. 2.1 Clasificación taxonómica. La especie Cambarellus (Cambarellus) montezumae pertenece a la familia Cambaridae caracterizada por un dimorfismo cíclico en los machos, esta familia colonizó las agua dulces de Norteamérica con dos subfamilias: Cambarellinae y Cambarinae (Hobbs, 1989). En los cuerpos de agua continentales de nuestro país la familia Cambaridae se encuentra representada hasta el momento por 57 especies, entre las que se encuentra la especie Cambarellus (C.) montezumae, que fue recolectada en el lago de Chapultepec y descrita por primera vez para la ciencia por Henry de Saussure en 1857 (Lám. 1). Lámina 1. Acocil Cambarellus (Cambarellus) montezumae (Saussure, 1857). 5 Según DeGrave, et al., (2009) su clasificación taxonómica es: PHYLUM Arthropoda CLASE Crustacea SUBCLASE Malacostraca SUPERORDEN Eucarida ORDEN Decápoda (Latreille, 1802) SUBORDEN Pleocyemata (Burkenroad, 1953) INFRAORDEN Astacidea (Latreille, 1802) SUPERFAMILIA Astacoidea (De Haan, 1841) FAMILIA Cambaridae (Hobbs, 1942) GENERO Cambarellus (Ortmann, 1905) ESPECIE Cambarellus (C.) montezumae (Saussure, 1857) 2.2 Morfología externa. Cambarellus (C.) montezumae es un pequeño crustáceo decápodo de 30 a 50 mm de longitud total, con dimorfismo sexual claro ya que las hembras son de mayor tamaño que los machos, aunque estos son de aspecto más robusto. Su cuerpo se encuentra segmentado en tres tagmas: cabeza y tórax (cefalotórax) y abdomen, el primero incluye los ojos pedunculados, el aparato bucal, la cámaras branquiales y los sistemas: nervioso, circulatorio, digestivo y reproductivo; en el abdomen se localizan los pleópodos, el ano y el telson. Presentan cinco pares de apéndices torácicos, tres de ellos quelados, los cuales se encuentran modificados para la defensa y el ataque, atrapar el alimento, denominados quelípedos; y los otros dos pares de apéndices son más delgados y cortos, sirven de locomoción, manipulación del alimento y limpieza; esto diez apéndices se conocen como pereiópodos. Los apéndices abdominales se conocen 6 como pleópodos y sirven a la hembra para el transporte e incubación de los huevos (Pennak, 1978), (Lám. 2). Lámina 2. Morfología externa del acocil Cambarellus (C.) montezumae. Cambarellus (C.) montezumae presenta dimorfismo sexual, en donde las hembras se distinguen de los machos por ser de mayor tamaño, presentan un abdomen más ancho y corto, sus quelas son cortas y anchas en contraparte con las quelas de los machos que son largas y delgadas. Al ser más ancho el abdomen de las hembras les permite una mayor superficie para portar los huevecillos (Villalobos, 1955; Civera y Cruz, 1982). En el macho el primer par de pleópodos esta transformado en gonópodos copuladores, también se presentan pequeños ganchos llamados isquiopoditos del segundo y tercer par de pereiópodos. Los gonópodos se encuentran en el quinto par de pereiópodos y sus dos primeros pleópodos están modificados para efectuar la cópula; el primer par puede tener dos formas: la forma I o madurez sexual, la cual se caracteriza por presentar la punta córnea y más quitinizada, 7 y la forma II o de inmadurez sexual. Los machos pueden alternar las formas (I y II) por medio de la muda. El segundo par de pleópodos es más largo y contribuye para que los espermatóforos sean depositados alrededor del annulus ventralis. Las hembras presentan los gonópodos en los coxopoditos de los terceros pereiópodos y una estructura en forma de herradura denominada annulus ventralis, ubicada entre el cuarto y quinto par de apéndices torácicos (Villalobos, 1955; Civera y Cruz, 1982; Morones, 1991). 2.3 Morfología interna (Morones, 1991). 2.3.1 Sistema nervioso. El sistema nervioso tiene una semejanza general a la lombriz de tierra, pero es relativamente mayor; está formado por un par de ganglios cereboides o masa cereboide, un collar esofágico, un ganglio infraesofágico y una cadena ventral de ganglios; los ganglios supraesofágicos (cerebro) ubicados en la cabeza envían nervios a los ojos, anténulas y antenas, y un par de conectivos las unen con los ganglios subesofágicos situados detrás de la boca, en el extremo anterior del cordón nervioso ventral. A lo largo del cordón nervioso cada somita posee un par de ganglios fusionados que envían nervios a los apéndices, músculos y otros ganglios. De la cadena ventral parten nervios que van a inervar a los diferentes órganos del cuerpo. Las fibras nerviosas gigantes surgen de los cuerpos celulares del cerebro y contribuyen al reflejo de la huida rápida de este decápodo. 8 2.3.2 Sistema circulatorio. Consta de un corto corazón muscular de forma irregular y de contorno poligonal, y se halla suspendido y colocado en la región dorsal del tórax mediante seis ligamentos que se insertan en las paredes del seno pericárdico dorsal medio. La hemolinfa, oxigenada, incolora o ligeramente coloreada, es de un tono verdoso que le comunica la hemocianina. En ella existen corpúsculos celulares amibiodeos o amebocitos. Al contraerse el corazón la hemolinfa es expulsada y corre por varias (seis) arterias que se ramifican y llegan a diversos espacios o senos venosos que se encuentran entre los órganos del cuerpo. Cuando la hemolinfa ha cedido su oxígeno y recogido dióxido de carbono de las células, es conducida por varios senos desde el seno esternal a las branquias en donde se oxigena y de allí vuelve por el seno braquiocárdico al pericárdico y al corazón. 2.3.3 Sistema respiratorio. La respiración se efectúa por varios pares de branquias, son delicadas expansiones plumiformes de la pared del cuerpo, colocadas dentro de las cámaras branquiales situadas a uno y otro lado de la región toráxica, contienen conductos sanguíneos; la cámara branquial se encuentra cubierta por una expansión del caparazón llamada branquiostegito, pero se abre ventralmente en los dos extremos. Las regiones branquiales del caparazón que se extiende sobre las branquias están separadas de la región cardiaca o areola, por los surcos branquicardícos. 9 2.3.4 Sistema excretor. Consta de un par de órganos bastante complicado llamado glándula verde, situados en la región ventral de la cabeza y delante del esófago, sirven para eliminar las substancias de desecho de la sangre y de los líquidos del cuerpo. Cada glándula verde consta de una porción glandular de color verde que se encarga de recoger los productos de excreción que lleva la hemolinfa que son conducidos a una vejiga que las almacena y de un corto tubo que los expulsa al exterior y que se abre por un orificio que está situado en la base del primer artejo de la entena externa o antena del segundo par. 2.3.5 Aparato digestivo. El aparato digestivo comprende la parte que se abre por encima de las mandíbulas en la parte ventral de la cabeza y que continua con un esófago corto tubular que termina en el estómago situado en el tórax, y que ocupa gran parte de la porción cefálica. El estómago se divide en una porción ancha de gran tamaño o cámara cardíaca, y otra más pequeña posterior o cámara pilórica. En la porción anterior del estómago se encuentra un aparato masticador, el molino gástrico, formado de piezas quitinosas calcificadas denominadas oscículos. En la entrada de la cámara pilórica se localizan numerosas cerdas parecidas a pelos, que solo permiten el paso de las partículas finas y actúan como filtro. El estómago no funciona como órgano de la digestión, sino como triturador (masticador y filtrador) del alimento. Después se encuentra el intestino, que es un tubo que se extiende en toda la longitud del resto del cuerpo y termina en el ano (casi en la base del telson), en el que actúan los jugos digestivos. En el 10 tórax y a los lados del estómago se encuentran dos glándulas digestivas o hepatopáncreas, con tres lóbulos a cada lado conteniendo muchos tubos que vierten una secreción amarillenta en la parte pilórica del estómago contribuyendo a la digestión de las sustancias nutritivas. El alimento pasa a la boca mediante las quelas del segundo y tercer par de patas en donde las mandíbulas lo parten en pequeños fragmentos, el alimento es triturado y después de pasar por el esófago van a la cámara cardiaca, la cual presenta salientes en las que se ubican los dientes fuertemente calcificados, uno mediano y dos laterales movidos por músculos insertos fuera del estómago que forman el molinillo gástrico que tritura más el alimento. El hepatopáncreas secreta enzimas digestivas que almacenan glucógeno, grasa, calcio y conjuntamente con el intestino medio, absorbe el alimento digerido. Las partículas finas son empujadas por la boca o el molinillo gástrico al intestino medio; los materiales no digeridos se transforman en heces en el intestino para ser expulsadas por el ano. El tubo digestivo, excepto el intestino medio esta tapizado por una delicada capa de quitina que en la boca y en el ano, se continúan con la cutícula externa, en cada muda se cambia todo este revestimiento. 2.3.6 Aparato reproductivo. Aparato reproductor masculino. El aparato reproductor del macho, está formado por tres pequeños testículos esferoides, los que miden aproximadamente 180 micras de diámetro, situados debajo del corazón y atrás del hepatopáncreas, en los tres lóbulos que forman los anteriores son cortos y laterales en tanto que el posterior es largo y situado en la línea media. De uno 11 a otro lado del punto de unión de estos tres lóbulos parten los conductos deferentes muy largos y estrechos en los existen numerosas vueltas antes de llegar a los orificios que están situados en las coxas del último par de periópodos; estos tres testículos están formados por un gran número de pequeñas vesículas esferoidales originadas por dilataciones de los tubos seminíferos, las células de los bordes de estas dilataciones de las células que forman la pared de cada vesícula, al llegar la época de reproducción, se multiplican y experimentan los cambios relativos a la espermatogénesis; de los testículos laterales sale un conducto ancho de 2 mm de largo, que se une al conducto del testículo anterior, al unirse estos dos sale un conducto largo y ancho de donde salen dos conductos deferentes de aproximadamente 12 mm de largo y de color lechoso que cuando tiene el contenido seminal en su interior éste se escapa por ruptura. Los espermatozoides pasan después a los conductos deferentes donde forma un material viscoso que se expulsa al exterior en forma de espermatóforo filamentoso (Rosas, 1976). Aparato reproductor femenino. El aparato reproductor de la hembra está constituido por el ovario, órgano trilobulado situado inmediatamente debajo y delante del corazón, entre el seno pericárdico y el tubo digestivo (volumen que ocupa en el cefalotórax) de los tres lóbulos que lo forman, dos son anteriores, laterales y uno medio impar; del tercio anterior de los lóbulos laterales y ventralmente salen dos conductos cortos y gruesos: los oviductos, los cuales se abren mediante orificios separados en la base del segundo par de patas ambulacrales, por debajo del opérculo genital. Las paredes del ovario están formadas por un epitelio formado por capas de células cúbicas, de núcleo pequeño y cromatina compacta; entre ellas se destacan las oogonias por su forma redondeada, su citoplasma claro y su núcleo 12 grande con la cromatina dispuesta en forma de red laxa. Estos elementos sexuales al crecer, arrastran consigo a las células epiteliales de las partes del ovario que acaban por formar en torno a cada oogonia una capa de células aplanadas que se ponen en contacto directo con la membrana vitelina del ovulo, dicha capa epitelial es semejante a la que presentan los folículos de primer orden en los ovarios de los vertebrados. El ovario tiene de 90 a 120 óvulos en promedio, cuando ya están maduros y listos para la fecundación tienen un tamaño de 500 a 700 micras y son de color verde olivo, la forma de los óvulos es casi esférica por la presión que ejercen unos sobre otros. De la cara externa de los lóbulos salen los oviductos con un diámetro de 600 micras y longitud de 12 mm, estos oviductos que atraviesan la capa muscular son transparentes y elásticos y desembocan en las caras internas de las coxas. Cuando los óvulos se encuentran en el interior del ovario tienen diferente tamaño y coloración que cuando ya se ha realizado la fertilización y han bajado por los oviductos, pegándose en los pleópodos abdominales de la hembra, la abertura de salida de los oviductos tienen forma de ojiva y se encuentra escondida en las coxas (Rosas, 1976). Por la cantidad y distribución de las reservas nutritivas, el huevo de los acociles corresponde al tipo denominado centrolécito, en éste el citoplasma formativo aparece como una capa muy fina por debajo de la membrana vitelina pero la mayor parte se acumula en la porción central del vitelo y del citoplasma formativo, lo que va a determinar el mecanismo de segmentación (Cantú, 1959), (Lám. 3). 13 Lámina 3. Morfología interna del acocil Cambarellus (C.) montezumae. 2.4 Ecdisis o proceso de muda. El acocil debe pasar por la ecdisis o muda (que consiste en renovar su caparazón o exoesqueleto, el cual está compuesto de quitina impregnada de calcio) para crecer (crecimiento en escala, es decir que el acocil incrementa su tamaño al mudar y lo detiene mientras que su exoesqueleto se endurece) o regenerar alguna parte de su cuerpo. El acocil se desprende de su exoesqueleto el cual sale con las antenas, ojos, mandíbulas, branquias y patas, posteriormente se cubre de un nuevo caparazón (Santiago, 2001). Durante la etapa de muda el acocil no se alimenta ya que en ese momento también está regenerando sus órganos internos, especialmente el estómago triturador. El endurecimiento del caparazón se realiza por reservas de calcio en órganos especializados llamados gastrolitos (Santiago, 2001). Antes de la muda se forman dos gastrolitos, que son piedras de carbonato cálcico que se localizan a los lados del estómago. Cuando se aproxima la muda, parte del calcio extraído del viejo exoesqueleto se almacena en los 14 gastrolitos durante la muda, el forro articulado del esófago y el estómago, incluida la pared gástrica, se desplazan hacia adelante a través de la pared de la boca. Los gastrolitos se depositan en la cavidad del estómago en donde se disuelven; y el cuerpo absorbe ese carbonato de calcio para el endurecimiento inicial del exoesqueleto y la boca (Coll, 1987). 2.5 Reproducción. Los acociles se ubican entre los crustáceos decápodos de agua dulce que presentan un marcado dimorfismo sexual y un ciclo de vida directo sin fases larvales. La reproducción se lleva a cabo durante todo el año y depende de las condiciones ambientales. En los acociles el acoplamiento es lento y difícil; el macho busca a la hembra e intenta voltearla con la ayuda de sus quelas. Después de varios intentos, cuando el macho domina a la hembra deposita el líquido espermático, al principio sobre las placas externas de la aleta caudal y después sobre el tórax y alrededor de los orificios externos de los oviductos en donde la materia seminal se gelifica y los filamentos resultantes son como espermatóforos tubulares resistentes que contienen el líquido seminal (Espinoza, 1992). La fertilización es externa y no es siempre inmediata, ya que la hembra puede almacenar el saco espermático por más de seis meses, hasta que las condiciones ambientales sean favorables. La hembra después de la fecundación se aísla en una guarida donde proseguira la gestación. El tiempo que transcurre desde la cópula hasta que los huevos son depositados en el abdomen puede ser incluso de 3 ó 4 días (Morones, 1991). Cuando los huevecillos descienden al abdomen son adheridos a los pleópodos en forma de 15 racimo por una sustancia mucilaginosa de color blanco que produce la hembra días antes del desove. Cada huevo queda unido a los pleópodos por una delgada membrana (Civera y Cruz, 1982). El número de huevos varía con la calidad del medio, disponibilidad del alimento y el tamaño del abdomen de la hembra (Santos, 1998). La hembra provoca una corriente de agua que irriga los huevos fecundados mediante contracciones repetidas de su cola. Los huevos no fecundados se descomponen o son retirados por los apéndices abdominales los cuales limpian, peinan y raspan constantemente al racimo. La duración de la incubación depende de los parámetros del agua, llegando a ser de 35 a 40 días (Rosas, 1976). La liberación no es sincrónica, sino se da de forma gradual en un lapso de 2-5 días. Los acociles tiene un desarrollo directo (no tienen estadios larvales) y eclosionan como un pequeño acocil, el cual es muy parecido al adulto. La cría tiene el caparazón blando y maleable, se alimenta de las reservas contenidas en su cefalotórax, permanecen adheridas a la madre y regresan a refugiarse bajo el abdomen durante aproximadamen diez días, hasta que concluyen dos mudas (Espinoza, 1992; Avault & Huner, 1985). 2.6 Hábitat y distribución natural. En México, Villalobos (1955) menciona la ubicación de esta especie en cuencas cerradas del Eje Neovolcánico, que abarca desde Puebla hasta Jalisco y Nayarit, siendo probablemente Cambarellus (C.) montezumae la especie de distribución más occidental entre los Cambáridos mexicanos. Es evidente que su área de distribución ha experimentado una merma considerable en los 16 últimos cuarenta años, debido principalmente a la desecación de los lagos que ocuparon los Valles de México y Toluca y secundariamente a la contaminación del Alto Lerma. 2.7 Alimentación. Descripciones generales para Cambáridos indican que estos organismos en el medio natural son omnívoros y depredadores ocasionales, donde el canibalismo es común. Como en muchos decápodos, estos organismos se alimentan principalmente de detritus enriquecido con microorganismos degradadores, donde los fragmentos de hojas son predominantes así como de raíces y microalgas, por lo que sus hábitos alimenticios se definen como politróficos (Pennak, 1978; Huner, 1981; McHarney, 1984). Los acociles juveniles son primordialmente cazadores y preferentemente consumen proteína animal. En la edad adulta no depredan, pero consumen pequeñas cantidades de animales aunque gran parte de su alimento consiste de detritus vegetal (Huner, 1981; Rodríguez-Serna, 1991, 1999; Rodríguez-Serna, et al., 1998). De acuerdo a observaciones de Jones (1990) y Gherardi (2002), se sabe que existen dos picos de actividad durante el día, los cuales están condicionados por la intensidad luminosa; el más intenso se encuentra entre las 18 horas y la media noche, y el segundo es justo antes de amanecer. 17 2.8 Requerimientos ambientales. Los acociles requieren agua con un pH comprendido entre 7 y 9; en estas aguas es imprescindible la presencia de calcio en altas concentraciones, necesario para una adecuada calcificación en el proceso de muda, y un nivel mínimo de 4 ppm de oxígeno disuelto. El intervalo de temperatura es importante para el desarrollo de esta especie y oscila entre los 12 y 26 °C (Moctezuma, 1996). 2.9 Interacciones ecológicas. Cambarellus (C.) montezumae es presa de anfibios como ajolotes (Ambystoma sp.); de ranas del género Rana; de peces como la carpa Cyprinus carpio, especie introducida en México (Hinojosa & Zambrano, 2004), de los charales Chirostoma jordani y de reptiles como la culebra de agua Tamnophis sp. Los acociles juveniles son filtradores de materia orgánica finamente fragmentada y consumidores de algas. Cuando crecen se adaptan para procesar el detritus, fraccionan las raíces de la vegetación riparia y las hojas que caen de los árboles favoreciendo su degradación por bacterias (Holdich, 2002). Cambarellus (C.) montezumae es elemento fundamental como consumidor de especies macrófitas como Elodea sp., planta acuática que se encuentra disponible en su hábitat (Rodríguez-Serna y Carmona, 2002). En su medio natural Cambarellus (C.) montezumae se alimenta de larvas de invertebrados como los insectos de las clases Hemiptera (chinche y escorpión acuático), Coleoptera (escarabajo acuático), Odonata (libélula) y Phasmida (insecto palo); en el caso de los crustáceos, su alimentación incluye larvas de anostracos, cladóceros (pulga de agua) y anfípodos (Hyalella sp.), e incluso 18 ingiere rotíferos (Moctezuma, 1996). Por lo tanto, se puede afirmar que Cambarellus (C.) montezumae tiene una influencia significativa en varios niveles tróficos, tanto como depredador y como presa (Rangel, 2009). 2.10 Valor nutrimental de la especie. Fuente: Laboratorio de Bromatología del Centro de investigaciones en Ciencias Biológicas, Universidad Autónoma de Tlaxcala, 1991. Cuadro 1. Valor nutrimental del acocil Cambarellus (C.) montezumae de la presa de Atlangatepec, Tlaxcala. Composición nutrimental % Materia humeda 73 Materia seca 27 Cenizas 16.8 Proteína 10.7 Lípidos 15.2 Fibra Cruda 26.6 Materia libre de N. 30.7 19 3. ANTECEDENTES. El acocil Cambarellus (C.) montezumae es una especie endémica de nuestro país, es un componente crítico en el ecosistema lacustre con un potencial comercial importante, pese a esto, se conoce muy poco acerca de aspectos como: su crecimiento, requerimientos nutricionales, procesos fisiológicos, sobrevivencia, reproducción, producción y aspectos ecológicos tanto en condiciones naturales como de laboratorio. Hasta ahora son escasos los estudios que se han realizado; sin embargo, algunas investigaciones han aportado aspectos significativos sobre la biología de este organismo; a continuación se describen algunas de las investigaciones más importantes sobre esta especie. Uno de los primeros estudios sobre la especie fue realizado por Villalobos en 1955, en donde describe aspectos taxonómicos, morfológicos y de distribución de los Cambarinos de la Fauna Mexicana (Crustacea: Decapoda); en este estudio se menciona que dicha especie se distribuye en cuencas cerradas del Eje Neovolcánico, que abarca desde Puebla hasta Jalisco, siendo probablemente Cambarellus (C.) montezumae la especie de distribución más occidental entre los Cambáridos mexicanos. En relación a su biología, Cantú (1959) llevó a cabo un estudio sobre la embriología de esta especie y realizó la colecta de los organismos en el Lago de Chapultepec, de donde obtuvo hembras ovígeras de las cuales extrajo los huevos para realizar cortes histológicos y observar los cambios superficiales del blastodermo y su desarrollo. Cantú reporta que los huevos de Cambarellus (C.) montezumae son de tipo centrolecito, con tres membranas (la membrana de 20 adhesión a las patas, el corion y la membrana vitelina). Su tipo de segmentación es superficial y la gastrulación se produce por movimientos de involución y convergencia. En 1982, Civera y Cruz realizaron una investigación acerca de la posible incubación artificial del acocil Cambarellus (C.) montezumae, en esta investigación consideraron aspectos sobre el hábitat de este organismo, su reproducción, desarrollo embrionario y fecundidad. Los autores concluyeron que existe un modelo logarítmico de predicción de la fecundidad, basándose en la relación entre la talla y/o el peso de la hembra progenitora y la fecundidad. Asimismo, describen un mecanismo experimental de incubación, que demuestra que es posible el desarrollo de los hueveos en un sistema de incubación artificial. Maldonado (1990) estudió la respuesta al estrés térmico del acocil Cambarellus (C.) montezumae, comparando los métodos de temperatura crítica máxima (TCM) y temperatura letal 50 (TL50). Encontró que la TCM para verano es de 35.1 °C y para invierno de 30.7 °C, la TL50 para organismos de verano fue de 41.8 °C y en invierno es de 41.5 °C, concluyendo que las altas temperaturas modifican el medio interno de los organismos como consecuencia de la búsqueda del equilibrio de temperaturas con el medio externo, afectando la presión osmótica total. Cornejo, en 1991, realizó estudios sobre la selección térmica de Cambarellus (C.) montezumae y su correlación con algunos índices fisiológicos; encontrando que existen diferencias en la selección térmica influenciadas por el sexo, talla y época del año. Además encontró diferencias significativas en el desempeño de 21 los organismos debido al efecto que ejerce la temperatura como factor maestro en el crecimiento, sobrevivencia y metabolismo. En 1991 Rodríguez-Serna, determinó la influencia que tiene la dieta en la eficiencia de asimilación, perdidas de energía por respiración y productos nitrogenados, en el balance energético del acocil Cambarellus (C.) montezumae, contrastando las temperaturas de 17 y 23 °C. En ese estudio se encontró que los organismos mantenidos a 23 °C presentaron una mayor tasa metabólica, así con un mayor consumo de alimento y una mayor excreción nitrogenada; a diferencia de los organismos mantenidos a 17 °C, los cuales presentaron la mayor eficiencia de consumo y crecimiento. García en 1991, llevó a cabo un estudio sobre el efecto de diversas dietas sobre la sobrevivencia y crecimiento de crías del acocil Cambarellus (C.) montezumae, estas dietas consistieron en alimento balanceado, spirulina, alimento balanceado-spirulina, Elodea densa, E. densa fresca y alimento balanceado-E. densa fresca, el periodo de alimentación fue de 40 días. García concluye que el mayor crecimiento se dio en las crías alimentadas con alimento balanceado - E. densa fresca, seguido de las crías alimentadas con alimento balanceado – spirulina, y finalmente de las crías alimentadas con alimento balanceado. Por otro lado, Aguilar (1991) en su investigación, evaluó el crecimiento y producción de juveniles de acocil Cambarellus (C.) montezumae, alimentándolos con la macrófita Egeria densa usando cinco niveles de ración y dos temperaturas 17 y 23 °C, con el fin de determinar el efecto de estas dos variables sobre el crecimiento. Concluyendo que el crecimiento tiene una relación significativa con respecto a la temperatura y los niveles de ración. 22 Morones, realizó un estudio en 1991 sobre aspectos reproductivos bajo condiciones de laboratorio de Cambarellus (C.) montezumae, en el cual delimitó las tallas a las cuales este organismo es capaz de reproducirse en condiciones de cautiverio, demás efectuó observaciones sobre el comportamiento de las hembras ovígeras. Los organismos utilizados en este experimento fueron alimentados con un 4% de su peso promedio corporal de un macerado de Poecillia reticulata y zanahoria cocida. La longitud total registrada para hembras reproductoras fue de 3.0 cm en promedio en comparación con los machos reproductores de una longitud total de 2.8 cm. La actividad de las hembras ovígeras se vio reducida a permanecer ocultas dentro de sus refugios hasta el periodo de eclosión de las crías. En 1995 se llevó a cabo un proyecto llamado “Plan Lago de Xochimilco”, en el cual Aragones realizó un estudio para conocer y aplicar biotecnología para producir en cautiverio especies nativas del Lago de Xochimilco, entre estas especie se consideró al acocil Cambarellus (C.) montezumae¸ ya que resultaba relevante su fomento y rescate para las comunidades ribereñas debido a su importancia económica y alimentaria. En este estudio se concluye que esta especie es de fácil reproducción pero que hace falta mayor investigación en torno a las condiciones físico-químicas del sedimento y la calidad del agua en el Lago de Xochimilco, ya que este organismo en su hábitat natural presenta elevadas tasas de mortalidad. Moctezuma en 1996 estudió las bases biológicas y técnicas del cultivo de Cambarellus (C.) montezumae bajo condiciones de laboratorio y en pequeños estanques, realizó observaciones sobre su distribución natural, sus necesidades de substrato y alimento, profundidad del agua, cobertura vegetal, oxigenación y densidad de cultivo que promovieran su óptimo crecimiento. 23 En 1997, González comparó las concentraciones de los metales: Hierro (Fe), Cobre (Cu), Manganeso (Mn), Zinc (Zn), Plomo (Pb), Cromo (Cr), Cobalto (Co), Níquel (Ni) y Cadmio (Cd) en el acocil (Cambarellus (C.) montezumae), en el ajolote (Ambystoma mexicanum) y en el charal (Chirostoma jordani), estas determinaciones las realizó en diferentes sitios de la zona lacustre de Xochimilco, encontrando que los organismos no son aptos para consumo humano según la Organización Mundial de la Salud. Arana y colaboradores en 1998, efectuaron una investigación sobre Cambarellus (C.) montezumae en tres embalses del estado de Tlaxcala, con el objetivo de delimitar la importancia que tienen estos organismos en la cadena trófica, puesto que son depredadores activos que transforman la materia orgánica en los cuerpos de agua dulce, además de ser aprovechado como alimento autóctono por habitantes de las zonas rurales. Barbosa (1998) realizó una revisión de estudios previos empleando varios modelos estadísticos con la finalidad de observar el efecto que tienen la temperatura y los distintos niveles de nutrientes (proteínas, lípidos y carbohidratos), sobre el crecimiento de Cambarellus (C.) montezumae. Concluyó que no hubo una relación significativa entre la preferencia de temperatura y la talla de este organismo; asimismo, indica que los individuos de menor talla exhiben una tasa de crecimiento superior que los de talla mayor; y que el porcentaje óptimo de nutrientes es el siguiente: proteínas de 30% a 40%, lípidos no deben ser mayor al 10% y los carbohidratos entre 5 y 20%, con base al peso corporal de un organismo. En 1999 Salazar efectuó un experimento en el que uso organismos de la especie Cambarellus (C.) montezumae para observar el daño tóxico y genotóxico del 24 pesticida dieldrín (hidrocarburo clorado) utilizando una técnica de medición para los niveles de la lipoperoxidación, así como un bioensayo de electroforesis unicelular en gel. En el cual se determinó que el pesticida dieldrín es genotóxico y probablemente tóxico para este organismo, y se deduce que puede tener un efecto potencial para sus depredadores. Bárcena en el 2000, realizó un estudio sobre crecimiento del acocil Cambarellus (C.) montezumae¸ utilizando dos dietas: la dieta A conformada por 40% de semilla de amaranto, 30% de levadura de cerveza y 30% de pluma de pollo; y la dieta B, constituida por 50% de alimento de engorda para conejo y 50% de harina de carne. Los organismos se alimentaron al 4% de su peso húmedo corporal promedio por día, se realizaron dos bloques: hembras y machos. Para ambas dietas se observó un mayor crecimiento de las hembras en comparación con los machos de su tratamiento. En el año 2001 Santiago llevó a cabo una investigación sobre la tasa de crecimiento de Cambarellus (C.) montezumae, usando diferentes temperaturas en condiciones de laboratorio por un periodo de ochos meses. Las temperaturas experimentales fueron 22 y 24 °C, no encontró diferencias significativas entre éstas. Santiago reporta algunas observaciones sobre el ciclo de muda de estos organismos, afirmando que durante los 2 primeros meses de vida estos organismos tienen una mayor frecuencia de muda, observó que la madurez sexual se presenta a una talla de 2.6 cm para hembras y de 2.06 cm para machos, los apareamientos se llevaron a cabo durante todo el año y observó una relación directa entre el peso de la hembra y el número de huevos que esta porta. 25 Rodríguez-Serna & Carmona en el año 2002, estudiaron el balance energético del acocil Cambarellus (C.) montezumae y las pérdidas de energía por metabolismo. Se evaluó su efecto en la nutrición de los acociles, observando que el metabolismo es modificado por la clase talla y el nivel de ración del alimento, el factor limitante para el crecimiento de la especie es la temperatura, encontrando los mejores resultados a una temperatura de 17 °C en donde se presentó el mayor consumo de alimento, así como la mejor eficiencia de asimilación de este. En el 2003 Rojas realizó una revisión taxonómica de las especies de Cambarellus (Cambarellus) (Cruatcea: Decapoda: Astacidae: Cambaridae), en donde se encuentra ubicada taxonómicamente la especie de estudio. Esta especie es aparentemente la especie con mayor distribución de las especies pertenecientes al género Cambarellus. Muestra un alto grado de variación morfológica, la cual puede atribuirse a cambios en las condiciones del agua, la contaminación, el aislamiento en ciertas áreas o debido a la manipulación del hombre en las áreas donde habita. En el año 2003 Palacios realizó una investigación cuyo objetivo era optimizar la tasa de reproducción en cautiverio del acocil Cambarellus (C.) montezumae, con el fin de obtener un mayor número de hembras ovígeras por unidad de espacio y tiempo. Realizó dos experimentos, uno en invierno (Noviembre a Febrero; 18.5 °C) y otro en primavera (Marzo a Mayo; 22 °C), en ambos experimentos se utilizó para la alimentación de los organismos alimento balanceado con la siguiente formulación: proteína 35%, grasa 5%, fibra cruda 25% y humedad 10%, además de alimento vivo como Tubifex, Artemia y Daphnia. El mayor porcentaje de hembras ovígeras se obtuvo en el experimento de primavera. 26 Fragoso en el 2003, llevo a cabo un estudio sobre el aprovechamiento como alimento de desechos orgánicos procedentes de las explotaciones pecuarias. Durante este estudio se alimentó a acociles de la especie Cambarellus (C.) montezumae con sólidos ensilados de cerdaza, por un periodo de cuatro meses. Evaluando su crecimiento (ganancia de peso), mortalidad y número de mudas, así como su reproducción. Fragoso concluye que el ensilado de cerdaza no cubre las necesidades nutricionales de los acociles en cultivo. Hinojosa & Zambrano (2004) realizaron una investigación sobre los efectos que tiene la carpa Cyprinus carpio (especie exótica) sobre Cambarellus (C.) montezumae lermensis (especie endémica) en embalses de bordos del municipio de Acambay, Estado de México. Este estudio es trascendental para modificar la percepción que se tiene sobre la carpa como depredador esencial del acocil, ya que la conclusión que obtienen los investigadores, indica que el acocil no es un alimento significativo para este animal. Sin embargo, se mantiene un efecto negativo indirecto de la carpa hacia el acocil, porque ésta modifica el entorno a través del incremento de nutrientes sobre el medio, generando turbidez en el agua, destruyendo las plantas enraizadas que son el hábitat apropiado de este organismo, causando consecuencias sobre su distribución y abundancia. Nacif en el 2004, llevó a cabo un estudio sobre la descomposición aeróbica de la macrófita Egeria densa presente en el hábitat natural de Cambarellus (C.) montezumae y su uso potencial como alimento para esta especie. Obtuvo sustratos alimenticios, bajo los cuales se evaluó la respuesta de crías de este acocil bajo un enfoque bioenergético. Concluyendo que el ensilado vegetal promovió el crecimiento de las crías alcanzándose en un lapso de cinco semanas tallas cercanas a la de un estadio de sub-adulto. 27 Félix y Gutiérrez (2005) realizaron un estudio poblacional del acocil Cambarellus (C.) montezumae en dos sitios (El Boyecito y Las Rosas) del río San Juan, Querétaro; El Boyecito, lugar con alta calidad del agua y sedimentos y Las Rosas sitio altamente degradado en calidad debido a la contaminación química y orgánica. El momento de máxima reproducción se localizó en noviembre, ya que fue cuando se encontraron el mayor número de hembras cargadas en ambas poblaciones; y durante los meses de diciembre y enero se localizaron las tallas más chicas. Sólo se encontraron diferencias significativas en las tallas mínimas de reclutamiento y máximas de crecimiento entre ambas poblaciones, la población de Las Rosas tuvo menor talla de reclutamiento (0.4 cm) y mayor talla máxima (4.0 cm) indicando que los individuos presentes en el lugar contaminado crecen más, debido posiblemente, a la mayor cantidad de materia orgánica en el sustrato. En el año 2006 Colín realizó un estudio sobre el crecimiento y ciclo de vida del acocil Cambarellus (C.) montezumae de los canales de Xochimilco, empleando tres diferentes densidades de población: 50, 100 y 150 organismos por metro cuadrado. Los resultados indicaron un crecimiento acelerado entre la cuarta y la sexta quincena respecto al peso y un crecimiento gradual respecto a la talla. Entre la quinta y sexta quincena los machos presentaron cambios de forma II o de inmadurez a forma I o de madurez sexual, durante esta etapa se pudo observar un mayor aumento de talla en las hembras con respecto los machos y un engrosamiento del abdomen. Además, se observó en esta investigación que bajo condiciones apropiadas estos organismos pueden tener un ciclo continuo de reproducción. Álvarez y Rangel en el 2007, realizaron un estudio poblacional del acocil Cambarellus (C.) montezumae en Xochimilco, basado en el análisis de 12 28 muestreos, en los que se colectaron 668 organismos. El intervalo de tallas registrado fue de 21 a 41.5 mm de longitud total. La presencia constante de machos forma I y de hembras ovígeras, así como la presencia de organismos de tallas pequeñas en la mayoría de los muestreos, sugieren que existe una reproducción continua a lo largo del año. Las tallas de la primera reproducción fueron 24 mm de longitud total para hembras y 21 mm para machos. No se encontró ninguna relación entre la abundancia de Cambarellus (C.) montezumae con respecto a la temperatura, la concentración de oxígeno disuelto y el pH. Sánchez (2007) llevó a cabo un estudio sobre el aprovechamiento de los ambientes reducidos en los canales de Xochimilco para desarrollar el cultivo del acocil Cambarellus (C.) montezumae, para consumo humano. En este estudio se evaluaron los parámetros fisicoquímicos del agua y sedimentos de los canales de Xochimilco, además se determinó la presencia de metales pesados tanto en el sedimento como en los organismos. Concluyendo que los canales de Xochimilco cumplen con las características de un ambiente reducido, se demostró que los niveles de metales pasados y carga bacteriana registrados, no superan los límites máximos permisibles para crustáceos comestibles. En el 2009 Vásquez realizó un estudio sobre la reproducción y el crecimiento del acocil Cambarellus (C.) montezumae en condiciones de laboratorio, planteó tres diseños experimentales; el primero consistió en cuatro tanques exteriores de 800 L con 219 reproductores por 335 días, el segundo en condiciones de laboratorio manejó dos machos y una hembra con diez réplicas, y en el tercero se manejaron tres densidades, 77, 154 y 231 org/m2 con dos réplicas. En cada caso, se controló la alimentación y se realizó monitoreo de la calidad del agua. Para el primer diseño se obtuvieron 6 174 huevos y 3 162 larvas, con una 29 mortalidad del 51.2%. En el segundo diseño se obtuvieron 14 huevos en promedio por hembra y en el tercer diseño se encontró que la mejor densidad es con 77 org/m2. De acuerdo con los resultados, el acocil Cambarellus (C.) montezumae es una especie que se adapta perfectamente a las condiciones de cultivo y es posible mantener una reproducción constante a lo largo del año y generar una buena cantidad de juveniles que pueden ser utilizados para programas de recuperación de la especie, repoblación o bien cultivos comerciales. Rangel en el 2009, llevó a cabo un estudio sobre la dinámica poblacional de Cambarellus (C.) montezumae, en la pista de Remo y Canotaje “Virgilio Uribe” ubicada en Cuemanco; Xochimilco. Efectuó 24 muestreos quincenales donde capturó 1,476 organismos; de los cuales 717 fueron hembras, 705 machos y 54 individuos indeterminados. Las principales características poblacionales las determinó a través de los siguientes parámetros: abundancia, composición de tallas por sexo y a lo largo del muestreo, tasa de crecimiento individual directa y estimada, tallas de reproducción, fecundidad e intensidad de reclutamiento. Calculó la talla máxima a la que puede llegar Cambarellus (C.) montezumae, dentro del sitio de estudio, mediante el modelo de crecimiento de von Bertalanffy teniendo como resultado 48.7 mm LT. Midió los principales parámetros fisicoquímicos (temperatura, pH, concentración de oxígeno disuelto y porcentaje de saturación de oxígeno disuelto) a fin de conocer si tienen una relación con las principales variables demográficas. Los resultados indican que la temperatura tiene un efecto significativo sobre la abundancia de Cambarellus (C.) montezumae, por lo que el crecimiento poblacional aumenta en los meses cálidos. Sin embargo, la reproducción y el reclutamiento se presentaron en todo el año de colecta. La mortalidad es alta en individuos jóvenes por lo que muy pocos llegan a edad reproductiva. Por lo tanto, 30 Cambarellus (C.) montezumae es una especie que presenta, principalmente, características de la selección “r” para tener éxito en su hábitat. Gayosso en 2009, determinó la cantidad de metales pesados (Cd, Cr, Fe, Ni y Pb) en carpas (Cyprinus carpio) y acociles (Cambarellus (C.) montezumae) del Lago de Xochimilco, encontrado que los acociles presentan una acumulación de Cr, Cd y Pb en la talla grande, Fe en la talla mediana y Ni en la talla chica. Se rebasó la concentración permisible para cada uno de los metales pesados determinados, por lo que no se recomienda para consumo humano. En el 2010, García-Padilla llevo a cabo la estimación del balance energético del acocil Cambarellus (C.) montezumae en el lago de Xochimilco, realizó muestreos en época cálida y fría del año, con el fin de determinar la influencia de la estacionalidad sobre los elementos de la ecuación general del balance de energía (C = P + R + F + U). El análisis de abundancia de los organismos, mostró que en época cálida existe un mayor número de individuos con respecto a los meses que son considerados de época fría, así como un mayor número de individuos de tallas pequeñas, lo que nos indica que la reproducción se acentúa en los meses cálidos del año. La estacionalidad no tuvo influencia en la composición del tejido de los organismos. En cuanto a los parámetros de la ecuación general del balance de energía, se obtuvo que Cambarellus (C.) montezumae consume alrededor de 1,440 Calorías/ejemplar*día de alimento en época cálida y 876 Calorías/ejemplar*día en época fría y pierde por evacuación de heces 2 % de la energía total extraída del alimento, por respiración entre el 46 y 51 % y por excreción nitrogenada el 7%, por lo que el campo de crecimiento o producción para la época cálida es del 45% de la energía obtenida del alimento consumido y en época fría es del 40%, la importancia de conocer los 31 valores de la ecuación general del balance de energía, radica en la aplicación de biotécnicas para acelerar la tasa de crecimiento y reproducción de esta especie. En 2010 Cerón-Ortiz, et al., realizaron un estudio sobre la influencia del alimento y la calidad del agua en el crecimiento de post-larvas del acocil Cambarellus (C.) montezumae, diseñaron cuatro tratamientos: T1 (calidad del agua alta y alimento inerte [Camaronina 35]), T2(calidad del agua baja y alimento inerte[Camaronina 35]), T3 (calidad del agua alta y alimento vivo [Daphnia pulex]) y T4 (calidad del agua baja y alimento vivo [Daphnia pulex]), los organismos se alimentaron al 15% de su peso húmedo promedio. Los resultaron mostraron los mejores crecimientos en largo y peso para Camaronina 35 independientemente a la calidad del agua. Con relación al ancho, se encuentran diferencias significativas tanto por la calidad del agua como por el tipo de alimento. Los resultados expresaron la posibilidad que en relación al crecimiento (peso y longitud) el efecto de la calidad del agua no afecta directamente el desarrollo de este organismo, pero es necesario conocer los impactos antropogénicos sobre aspectos básicos del hábitat como el alimento y el refugio para hacer más efectiva la elaboración de una técnica de cultivo. Ángeles-Monrroy, et al., en 2010, llevó a cabo un estudio sobre los parámetros físico-químicos que afectan la población en medios naturales del acocil Cambarellus (C.) montezumae en Tezontepec de Aldama, Hidalgo; para lo cual se establecieron zonas de muestreo con el fin de obtener la talla (longitud y ancho), peso y densidad de acociles. Se identificaron las posibles fuentes de contaminación, los factores físico-químicos y se determinó el contenido y tipo de microorganismos presentes en el agua. Los pesos y las tallas de los organismos oscilaron en tres rangos: pesos menores a 0.09 gr, de 0.01 a 1.5 gr y mayores a 1.6 gr. En talla los valores fueron menores a 9 mm, de 10 a 25 mm 32 y el tercero mayores a 26 mm. Los resultados descritos sugieren que el efecto de la actividad antropogénica no es la afección directa al crecimiento del acocil, sino más bien el efecto que tiene la interacción de los factores bióticos y abióticos del hábitat, como el tipo de vegetación, el cual sirve de refugio y alimento para este organismo. En el 2010, Cortes realizó una investigación acerca de la relación entre los organismos más representativitos del sistema lacustre de Xochimilco, el ajolote (Ambystoma mexicanum) y el acocil (Cambarellus (C.) montezumae). Estos organismos comparten el ambiente de forma muy estrecha, así como sus respectivos papeles en la red de alimentos del ecosistema. El objetivo de este trabajo fue determinar las posibles interacciones depredador-presa entre el ajolote y el acocil en cuanto a la dirección de la interacción y a los tamaños involucrados en ella. Encontrando que los ajolotes adultos depredan a los acociles de diferentes tamaños, desde que éstos se separan del abdomen de la hembra hasta que alcanzan la madurez sexual; por otro lado, los acociles adultos son capaces de alimentarse de huevos y crías de ajolote. Villa en 2010, lleva a cabo un estudio preliminar acerca de aspectos de la dinámica poblacional del acocil Cambarellus (C.) montezumae en el Lago de Xochimilco, específicamente en el canal del Bordo, los aspectos evaluados fueron la abundancia de organismos, época reproductiva, picos de reclutamiento y variaciones de talla dentro de la población. Los resultados indican que la temperatura tiene un efecto significativo sobre la abundancia de Cambarellus (C.) montezumae, los picos de reclutamiento de la población se dieron en los meses de abril y junio, la época reproductiva comprendió los meses de marzo y mayo. 33 Arredondo-Figueroa, et al., (2011), llevan a cabo un estudio aspectos reproductivos del acocil Cambarellus (C.) montezumae en condiciones controladas, con el objetivo de determinar la factibilidad de la producción de huevos y juveniles y su potencial de aplicación a programas de rescate, repoblación y cultivo. Se realizaron 2 ensayos experimentales, el primero en 4 estanques exteriores de 800 litros conectados a sistemas cerrados de recirculación y el segundo en recipientes de plástico en laboratorio de 2 litros. Para el primer ensayo se manejaron 219 reproductores durante 335 días obteniendo 136 hembras ovígeras. Cada hembra produjo en promedio 45 ± 23 huevos por puesta. El 83.7% de los huevos eclosionaron obteniéndose un total de 3 162 juveniles. Los resultados indican la factibilidad para su cultivo y producción de huevos y juveniles. En el 2011, Ávila determinó la calidad microbiológica del acocil Cambarellus (C.) montezumae en las localidades: Presa Atlangatepec, Lagunas de Zempoala y los acociles vendidos en el mercado de San Juan, México D.F., en los cuales se determinaron coliformes totales, mesófitas aéreas y Salmonella sp., así como bacterias asociadas. Encontrando que dichas muestras no cumplen con la norma sanitaria de la NOM-242-SSA1-2009 para coliformes. El total de las muestras cumplen con el límite que establece la NOM-242-SSA1-2009 para bacterias mesófilas aerobias. Estos organismos no presentan un riesgo para el consumidor debido a que los acociles se consumen cocidos; sin embargo, la presencia de estas bacterias en el agua representa un indicador de la calidad del agua de su hábitat y un riesgo para el pescador o comercializador de estos organismos. Cerón, et al., en 2011 obtuvieron resultados preliminares acerca de la reproducción como un efecto secundario en cultivos controlados del acocil de rio 34 Cambarellus (C.) montezumae. En los bioensayos utilizados no se consideró la separación se sexos, ya que no existen estudios que establezcan el efecto de esta variable sobre los cultivos. Se utilizaron dos bloques, el primer bloque se alimentó con Camaronina 35 y el segundo con Daphia sp. Se identificó a la primera hembra ovígera a la semana 7 del cultivo (con 2.7 cm de longitud y un peso de 1.2 g), dentro del bloque alimentado con Camaronina 35. Se encontraron diferencias significativas en el número de hembras ovígeras en ambos bloques, obteniendo el mayor número de hembras en el bloque alimentado con Camaronina 35. Santos, et al., (2011) evaluaron el aporte nutricional del acocil Cambarellus (C.) montezumae que se encuentra en la presa Madin del Municipio de Atizapan de Zaragoza encontrando valores del 77.57 % de humedad, proteína del 44.04 %, 20.17 % de carbohidratos, 3.56 % de lípidos, 8.93 % de fibra y 23.30 % de minerales de los cuales solamente se cuantificaron: Na 0.608 g/100 g; K 0.608%; Fe 0.023%; Ca 11.85 g/100 g. En el 2011 Aguilar-Román evaluó la influencia de la temperatura (20, 25 y 30 °C) en diferentes índices fisiológicos y crecimiento de crías de acocil Cambarellus (C.) montezumae. Consideró los indicadores de supervivencia, crecimiento total, tasa de crecimiento intrínseco (TIC) y producción (P). Los organismos se alimentaron con una dieta comercial 40% de proteína, durante un periodo de 60 días. Se obtuvo como resultado que el efecto de la temperatura se refleja en la supervivencia, en la TIC y en la producción, obteniendo los mejores resultados para los organismos mantenidos a 25 °C. Considerando los resultados obtenidos en esta investigación se considera que el rango de temperatura recomendado para obtener un rápido crecimiento y una mayor producción de este organismo es de 20 a 25 °C. 35 Pacheco, et al., 2011 realizaron un experimento con acociles (Cambarellus (C.) montezumae) obtenidos en los canales de Xochimilco (CIBAC), utilizando una dieta artificial enriquecida con un probiótico (lactobacilo) y como control la misma dieta pero sin probiótico. El experimento se realizó durante 24 semanas, la temperatura se mantuvo en 25±2ºC. Cada semana los organismos fueron pesados y medidos para que al final del experimento se determinara la Tasa de crecimiento relativo (TCR) y el Factor de condición (KM). Los valores de TCR con la dieta con el probiótico indican que el mayor crecimiento se da en las primeras 8 semanas, mientras que para la dieta control, se observa al final del experimento. La dieta enriquecida permitió a los organismos tener un grado de bienestar mejor a lo largo de todo el experimento, en cambio con la dieta control, el beneficio apenas se observa en la semana 24. En 2011 Gallardo llevó a cabo un estudio sobre el efecto de la temperatura en el crecimiento, supervivencia, desove y viabilidad del acocil Cambarellus (C.) montezumae, bajo condiciones de laboratorio. Se probaron tres temperaturas 18 ± 1 °C, 22 ± 1 °C y 26 ± 1 °C. Los resultados no mostraron diferencias significativas entre tratamientos con respecto al crecimiento y supervivencia, se encontraron diferencias significativas entre tratamientos respecto a la supervivencia y no así en el porcentaje de desoves, a 26 °C se reportó la mayor viabilidad, lo que demuestra que la temperatura tiene una marcada influencia sobre los parámetros evaluados. En el 2013, Escalante llevó a cabo una evaluación sobre el crecimiento de crías de acocil Cambarellus (C.) montezumae alimentadas con detritus de las macrófitas Eichhornia crassipes y Typha latifolia sometidas a un proceso de descomposición aeróbico, dichas macrófitas se encuentran presentes en el 36 hábitat natural de esta especie. Para la evaluación del detritus de las macrófitas como alimento en crías de acocil, se alimentaron a saciedad con el detritus proveniente de tres tiempos de degradación de las macrófitas: T2, T3 y T4, correspondientes a15, 21, 30 días respectivamente, y como alimento Control se empleó Camaronina, la fase de crecimiento duró 90 días. Los resultados de este trabajo muestran que entre tiempos de degradación para ambas macrófitas no se encontraron diferencias significativas en el crecimiento y en el análisis químico proximal de los acociles; pero se encontró un mejor desempeño con el ensilado de E. crassipes tanto en el crecimiento como en la supervivencia comparado con el de T. latifolia. 37 4. JUSTIFICACIÓN GENERAL. El desarrollo de paquetes tecnológicos de especies endémicas como es el caso del acocil Cambarellus (C.) montezumae, presenta un retraso en comparación con los paquetes tecnológicos de especies comerciales como es el caso del camarón, esto debido al poco o nulo desarrollo productivo a nivel piloto. Esto establece la necesidad de que los estudios técnico-científicos que comprenden el conocimiento de la biología (crecimiento, reproducción, nutrición y alimentación) de esta especie, permitan optimizar y disminuir los costos operativos de su cultivo, y de este modo generar un paquete tecnológico que garantice un adecuado manejo del recurso y su aprovechamiento sostenible. 5. OBJETIVO GENERAL. Contribuir al conocimiento sobre el crecimiento y la biología reproductiva del acocil Cambarellus (Cambarellus) montezumae (de Saussure, 1857), tanto en su hábitat natural como en condiciones controladas. 38 CAPÍTULO 1. ESTRATEGIA REPRODUCTIVA DEL ACOCIL Cambarellus (Cambarellus) montezumae (SAUSSURE, 1857), EN EL LAGO DE XOCHIMILCO. MÉXICO, DISTRITO FEDERAL. 6.1 INTRODUCCIÓN. El valle de México se ubica en una gran cuenca cerrada (actualmente drenada en forma artificial), que en la época prehispánica se acumulaba en el centro del valle formando diversos lagos: al norte, Zumpango y Xaltocan; al centro, el gran Lago de Texcoco; los tres contuvieron agua salobre. Al sur, el Lago de Chalco y Xochimilco, de agua dulce y abastecidos por numerosos ríos y manantiales (Ezcurra, 1990). Una gran cantidad de productos tuvieron su origen en esta región (principalmente en el Lago de Xochimilco), gracias a los beneficios de un medio lacustre rico en cantidad y variedad de especies, a las técnicas de cultivo intensivo por medio de chinampas, a la agricultura de temporal y a las piezas de caza conseguidas en el pie de monte. Aunque es difícil precisar la importancia absoluta que tuvo el aprovechamiento de recursos alimenticios en cada etapa del desarrollo del México prehispánico, es posible afirmar que en las más antiguas, la pesca, junto con la caza, la recolección de animales y vegetales acuáticos, así como la caza de mamíferos y recolección de plantas y frutos terrestres, fueron las actividades fundamentales para garantizar la supervivencia de los asentamientos humanos localizados alrededor del Lago de Xochimilco (Ezcurra, 1990). Hasta la fecha, se han acumulado numerosos testimonios en códices y crónicas, del consumo de una gran diversidad de productos. En el medio lacustre de Xochimilco se consumían las tortugas de agua dulce, peces, las cuitlatl (ranas), atepocatl (renacuajos), ahuauhtli (huevecillos del insecto acuático llamado 39 axayacatl), axolotl (ajolote) y acuitzil (acocil), entre otros productos (Ambrosio- Arzate, et al., 2005). Entre este grupo de productos el consumo de acocil (Cambarellus (C.) montezumae) ha perdurado hasta nuestros días, aunque su consumo ya no es tan frecuente, principalmente por su poca disponibilidad y su alto costo. Su poca disponibilidad se debe a la merma que han sufrido sus poblaciones, ya que se han visto disminuidas debido a la degradación, fragmentación y contaminación de su hábitat, su sobreexplotación y la introducción de especies exóticas. Su consumo actualmente es solo local en los estados del centro del país como Tlaxcala, Hidalgo, Distrito Federal y Puebla (Rodríguez y Mendoza, 1999). Este acocil representa un importante recurso biótico que posee un potencial acuicultural importante en México, esto debido a que es un organismo tolerante a los cambios de humedad y temperatura, así como a variaciones climáticas extremas (Bückle, et al., 1994). Además, crece en un intervalo amplio de temperatura, modula su tasa metabólica, ajusta su reproducción a las condiciones imperantes en el ambiente y sus requerimientos nutricionales son de bajo costo (Aguilar, 1991; Colín, 2006; Gutiérrez-Yurrita, 2008, Escalante, 2013). Sin embargo, existen escasos estudios destinados a comprender los mecanismos de su biología, ecofisiología y cultivo. En este sentido, es importante mencionar que los estudios encaminados al conocimiento de su ciclo de vida y a las estrategias reproductivas de esta especie en su hábitat natural, permiten señalar cómo este organismo ajusta sus respuestas bioquímicas, fisiológicas y de comportamiento a las condiciones imperantes en su hábitat, esta información nos puede ayudar a diseñar 40 programas de manejo con miras a su explotación sustentable y/o a la conservación de la especie en su hábitat natural. Una manera de estudiar estas respuestas es a través del cómo, cuándo y dónde se reproducen estos organismos, con relación a los efectos de los factores medioambientales, por lo que el objetivo básico de este capítulo será comprender la ecología de la reproducción de esta especie en el Lago de Xochimilco durante un ciclo anual. Mientras los acociles son inmaduros toda la energía adquirida a través de la ingesta de alimento se reparte entre el crecimiento y la sobrevivencia. Al madurar gran parte de esta energía debe ser dedicada a los diversos procesos reproductivos. El éxito reproductivo de la población dependerá enormemente de dónde y cuándo se reproduzcan los acociles y de cómo los recursos energéticos se administren para la reproducción (Saborido-Rey, 2005). Es aquí donde surge una pregunta crucial: ¿Por qué es tan importante la reproducción? La reproducción, es un proceso indispensable en la vida de los organismos, ya que debido a ella perduran las especies a lo largo del tiempo, por lo que todas las especies, incluido el acocil (Cambarellus (C.) montezumae), buscaran maximizar su éxito reproductivo (Begon, et al., 2006). Para maximizar el éxito reproductivo, un individuo debe repartir sus recursos energéticos adecuadamente y además, procurar que su descendencia nazca en las condiciones medioambientales adecuadas. Por tanto, la estacionalidad con que se produce el desove es de vital importancia para el futuro desarrollo y supervivencia de la descendencia. Si los acociles buscan optimizar la producción de descendencia viable tienen que procurar que ésta se desarrolle en el medio adecuado para favorecer su 41 sobrevivencia. Las crías deben eclosionar en un entorno que proporcione alimento apropiado, protección de los depredadores y condiciones abióticas favorables. La selección de la época de desove en cualquier especie se basa también en la idoneidad de la condición de las hembras que deben haber acumulado las suficientes reservas energéticas para este proceso, ya que como en el caso de Cambarellus (C.) montezumae, las hembras ovadas permanecen refugiadas durante todo el proceso de reproducción, desde el descenso de los huevecillos hasta la liberación de las crías (Civera y Cruz, 1982; Begon, et al., 2006). En el Lago de Xochimilco las principales variaciones estacionales son la temperatura y el fotoperiodo. Correlacionado con los cambios en estos factores abióticos, hay normalmente variaciones en la abundancia y calidad del alimento, así como en la densidad de la vegetación riparia que sirve de refugio para el acocil Cambarellus (C.) montezumae (García-Padilla, 2010). Las crías, debido a su tamaño y limitada capacidad locomotora, deben alimentarse de alimento altamente nutritivo y de tamaño apropiado. Cuanto más rápido se desarrollen los huevos y las crías, más rápido dejarán de ser vulnerables a la depredación. Así pues, una primera estrategia es producir huevos con gran contenido de vitelo y en las condiciones abióticas que permitan un rápido desarrollo del huevo y la cría; y en un medio en el que exista la suficiente cantidad de alimento para las crías (Saborido-Rey, 2005). Otro aspecto muy importante es la compartamentalización de la energía obtenida por el alimento que realizan los reproductores del acocil Cambarellus (C.) montezumae, aproximadamente el 95% de la energía ingerida es digerida. La energía digerida se subdivide en excreción nitrogenada y heces (10%) y energía metabolizable (85%). A su vez, ésta tiene los siguientes destinos: 42 metabolismo basal y metabolismo activo (45%), crecimiento (0-40%) y reproducción (0-40%), indicando entre paréntesis los porcentajes con respecto a la energía ingerida (García-Padilla, 2010). Con el comienzo de la actividad reproductora el individuo entra en una fase en la que una parte importante de los recursos disponibles para crecimiento hasta entonces, deben ser asignados a las tareas de la reproducción. Estas tareas comprenden: formación de gónadas, búsqueda de pareja, acoplamiento, búsqueda de refugio, cuidado maternal, etc. La energía destinada para la formación de la gónada va a determinar la fecundidad y la calidad de las cría (Saborido-Rey, 2005). La fecundidad es el eslabón principal entre las estimaciones cuantitativas de huevos y crías y la estimación del tamaño del stock o reclutamiento de la población. Para calcular la biomasa reproductora el primer paso radica en conocer la fecundidad específica, determinando el número de huevos puestos por hembra. La segunda fase es determinar por mes o estación la probabilidad de que una hembra adulta logre las condiciones necesarias para un desove efectivo, es que se puede expresar por medio del índice de desove (Saborido- Rey, 2005). La fecundidad también se utiliza para estimar la sobrevivencia, para determinar el número de individuos necesario para mantener un reclutamiento a nivel sostenible. Los datos de fecundidad generalmente se encuentran relacionados con la talla, el peso o la edad de la hembra progenitora (Begon, et al., 2006). La fecundidad de una especie es el resultado de un proceso evolutivo, en el que se optimiza el reparto de energía obtenida por la alimentación entre el consumo metabólico, el crecimiento y la reproducción y tiene un carácter adaptativo en relación a las estrategias vitales de r y k. 43 Las especies con estrategia “r” están adaptadas a ambientes muy variables e impredecibles, ponen muchos huevos de pequeño tamaño, tienen una puesta prolongada y una mortalidad larvaria muy elevada. Esta estrategia les permite sobrevivir en cuanto se dan condiciones ambientales favorables. Las especies estrategas “k” ocupan ambientes más estables o predecibles, ponen menos huevos, de mayor tamaño y en puestas cortas. De alguna forma están más protegidos y su mortalidad larvaria previsiblemente es menor (Begon, et al., 2006). Por tanto, las opciones posibles para asegurar la descendencia se reducen a dos: aumentar el número de huevos o aumentar su tamaño. En este sentido el acocil Cambarellus (C.) montezumae se ha considerado estratega “r” (Rangel, 2004 y 2009). 44 6.2 JUSTIFICACIÓN. Es de amplio reconocimiento que los primeros estadios vitales (huevos, crías y etapas tempranas de juveniles) son críticos para las fluctuaciones en la abundancia de las poblaciones naturales. En los últimos años se ha extendido una nueva visión acerca de la importancia maternal (fecundidad, rendimiento reproductivo, calidad de los huevos y larvas, cuidado maternal y costos bioenergéticos) en los procesos de reclutamiento, comprobándose que tienen una importante influencia en las fluctuaciones de las poblaciones. El estudio de la ecología de la reproducción del acocil Cambarellus (C.) montezumae es de vital importancia para entender la dinámica de la población natural de este acocil en el Lago de Xochimilco. 6.3 OBJETIVOS. 6.3.1 OBJETIVO GENERAL. . Conocer la estrategia reproductiva de la población de acocil Cambarellus (C.) montezumae en el Lago de Xochimilco, desde el punto de vista de la ecología reproductiva. 45 6.3.2 OBJETIVOS PARTICULARES. . Determinar la variación del número de organismos y su proporción sexual en época cálida y fría del año. . Caracterizar la estructura poblacional de Cambarellus (C.) montezumae en el lago de Xochimilco. . Establecer la evolución mensual del número de desoves de hembras ovígeras de Cambarellus (C.) montezumae en época cálida y fría del año. . Evaluar la fecundidad de Cambarellus (C.) montezumae en función de su talla, peso corporal y amplitud del abdomen. . Determinar la calidad del huevo y de las hembras ovígeras de Cambarellus (C.) montezumae en época cálida y fría del año. . Evaluar la repuesta fisiológica de hembras ovígeras de Cambarellus (C.) montezumae. 46 6.4 MATERIAL Y MÉTODO. 6.4.1 ÁREA DE ESTUDIO. Antecedentes. El presente estudio se realizó en la zona lacustre de la delegación Xochimilco, específicamente en el Canal de Cuemanco. La zona lacustre de Xochimilco ha sido tradicionalmente reconocida como atractivo turístico nacional e internacional, ya que representa un enorme patrimonio cultural como jardín prehispánico y como vestigio histórico del sistema de chinampas (forma de cultivo único en el mundo por su alto grado de integración ambiental al antiguo funcionamiento hidrológico de esta cuenca), además de albergar tradiciones y creencias religiosas únicas, representa también el último testimonio precuauhtémico de lo que fueron las grandes culturas Xochimilca y Mexica, así como uno de los últimos reductos del antiguo Lago del Valle de México (Ezcurra, 1990). Hoy sus remanentes más significativos están representados por las zonas agrícolas y de chinampas de los ejidos de Xochimilco y San Gregorio Atlapulco. A pesar del impacto ambiental al que ha sido sometida esta zona debido a la presión demográfica y urbana, aún conserva características bióticas, abióticas y culturales que la identifican como una de las reservas ecológicas más importantes del Distrito Federal, ya que ofrece un gran número de servicios ambientales a los habitantes del Valle de México, como son: . Dilución de contaminantes como el C02. . Un control de inundaciones. . Regula la temperatura del Valle de México y . Conserva la flora y fauna endémica. 47 Ubicación Geográfica. La zona lacustre de la delegación Xochimilco (Canal de Cuemanco), se encuentra ubicada al sur de la Ciudad de México, entre las coordenadas 19° 09’ de latitud norte y 98° 58’ y 99° 10’ de longitud oeste. La delegación Xochimilco tiene una extensión territorial de 117.70 Km2, lo cual representa el 7.9 % del territorio de la Ciudad de México. Se encuentra delimitada al norte por las delegaciones de Coyoacán e Iztapalapa, al poniente por Tlalpan, al sur por Milpa Alta y al oriente por Tláhuac (INEGI, 2008). Clima. El clima presente en esta región se ha clasificado como C(w2)(w)b(i’), templado semi-seco y sin estación invernal bien definida, este tipo de clima es la variante menos húmeda de los templados (según la clasificación Köppen modificada por García en 1988). La precipitación pluvial en la región de estudio presenta niveles menores de 700 mm/año, la temporada de lluvias se ubica entre los meses de mayo y octubre; en los demás meses sólo se registran lluvias esporádicas y aisladas. La mayor precipitación pluvial se registra en junio con un valor que oscila entre 100 y 110 mm y la mínima en febrero y diciembre, con valores menores a 5 mm. Las temperaturas mínimas se presentan en los meses de diciembre y enero (7.5 °C), mientras que las más altas en los meses de abril, mayo y junio (23.2 °C), la temperatura promedio en la zona es de 15.8 °C (INEGI, Inédito). Hidrología. El lago de Xochimilco pertenece a la región del Pánuco, en la cuenca hidrológica del Río Moctezuma y la subcuenca Lago Texcoco-Zumpango. Se estima una longitud aproximada de 203 km de canales conectados entre sí; entre los más importantes se encuentran: Cuemanco, Nacional, Chalco, Bordo, Apatlaco, San Sebastián, Ampampilco, Texhuilo, Zacapa, Caltongo, Santa Cruz y Japón. Las lagunas principales son Caltongo, Del Toro y el Lago de 48 Conservación de Flora, Fauna y Acuacultura de San Gregorio Atlapulco (INEGI, 1998). Actualmente, los canales y lagunas son alimentados artificialmente con agua tratada de las plantas del Cerro de la Estrella, cuyo aporte es de 1 m³/s; San Luis Tlaxialtemalco, que aporta 0.225 m³/s; además de la planta de San Lorenzo Tezonco. Otra fuente de abastecimiento son los escurrimientos superficiales originados por los ríos Santiago, San Lucas y San Gregorio que se forman en las estribaciones de la Sierra Ajusco-Cuautzin (INEGI, 2008). Vegetación. Vegetación Acuática y Subacuática. Está integrada por capas de las especies Lemna minúscula (Lentejilla), Wolffia columbiana (chilacastle) y Eichhornia crassipes (lirio acuático); el lirio es la especie más prolífica y su abundancia depende de la época del año. En canales y lagunas son característicos los “tulares” (Typha latifolia; Scirpus americanus y en menor proporción Cyperus sp., Juncus sp., entre otras), constituyendo un elemento de gran relevancia en la dinámica del Sistema (Ficha Ramsar, 2004). Vegetación Terrestre. En esta zona existe vegetación asociada a las corrientes de agua y común en las chinampas compuesta por especies leñosas como Salixbon plandiana (ahuejote); asímismo, se registran especies introducidas que se desarrollan en sitios propiamente secos, entre ellas Taxodium mucronatum (ahuehuete), Salix babylonica (sauce llorón), Cassuarina equisetifolia (casuarina), Eucaliptus sp. (eucalipto) y Fraxinu sudhei (fresno), (Ficha Ramsar, 2004). El cultivo sobre las chinampas es característico de esta región como la floricultura (margarita, pensamiento, crisantemo, estate, rosa, alcatraz, 49 zempoalzúchitl y otros), también se cultivan verduras y legumbres (calabaza, lechuga, espinaca, haba, frijol, rábano y acelga), así como cereales (Luna, 1988). Fauna. En la zona lacustre de Xochimilco, la fauna terrestre, acuática y aérea fue muy abundante; había gran cantidad de aves (Podilimbus podiceps, Anas acuta, Anas platyrhynchos diazi, Accipiter striatus, Buteo jamaisensis, Casmerodius albus, Egretta caerulea, Gallinula chroropus, Jacana spinosa, Tyto alba, Calothorax pulcher, entre muchas otras especies), tlacuaches (Didelphis virginiana), liebres, roedores, tigrillos, venados, tepexcuintles, carpas de gran tamaño, ajolotes (Ambystoma mexicanum y Ambystoma tigrinum), truchas, acociles (Cambarellus (C.) montezumae), ranas (Rana montezumae, Rana tlaloci), culebras (Thamnophis eques, Thamnophis scaliger, Toluca lineata), víboras (Crotalus polistictus y Sistrurus ravus) y tortugas (Kinosternon hirtipes). Desafortunadamente en la zona existen poblaciones animales que se han visto reducidas como son las dos especies de ajolote (A. mexicanum y A. tigrinum; la rana de Moctezuma y la rana de Xochimilco, así como el acocil (Cambarellus (C.) montezumae). En la actualidad es rara su presencia a causa del deterioro del medio ambiente y la excesiva pesca a que estuvieron sometidos durante décadas (Ficha Ramsar, 2004). Situación ecológica del Lado de Xochimilco. En 1936 y 1942 se emitieron decretos que identificaban a Xochimilco “Zona Típica, Pintoresca de Belleza Natural” cuya conservación es de interés público. El Departamento del Distrito Federal, en sus Programas Parciales de Desarrollo Urbano señaló a la región chinampera dentro de los límites de conservación ecológica. Por otra 50 parte, la UNESCO declaró la región chinampera de Xochimilco como Patrimonio Mundial de la Humanidad el 11 de diciembre de 1987, esto tuvo como propósito proteger, conservar y rehabilitar esta zona con la cooperación de la comunidad internacional. Otro aspecto importante de la zona lacustre de Xochimilco, es su incorporación a la clasificación de Humedales de Importancia Internacional; el 2 de febrero de 2004 esta zona fue incorporada a la Lista de Sitios Ramsar (Convenio Ramsar para la conservación y protección de Humedales a nivel Mundial). A pesar de los esfuerzos por conservar la zona lacustre de Xochimilco, se ha perdido el control hidrológico debido al manejo inadecuado del acuífero que ha generado hundimientos diferenciales en la zona, provocando el desnivel de los canales y zanjas y la inundación de los terrenos. Asimismo, el agotamiento de los manantiales que alimentaban el sistema y el aporte actual de aguas residuales tratadas, ocasionaron la pérdida de la calidad del agua y la degradación física y química del suelo (Ficha Ramsar, 2004). El problema se ha acentuado debido al cierre de canales y zanjas. La circulación del agua también está siendo afectada por el crecimiento excesivo de vegetación acuática y por la acumulación de azolves. En general, la zona lacustre de Xochimilco presenta eutroficación con alto contenido de sales y baja proporción de sodio (Jiménez, 1989). En cuanto a la contaminación biológica se han obtenido registros altos de coliformes fecales que rebasan los niveles permisibles (Coutiño, 1981). Respecto a los metales pesados, en la zona lacustre se han reportado elementos en concentraciones mayores a las permisibles, tal es el caso de registros de cadmio y zinc (Rangel, 1981; Flores, 1982); asimismo se han registrado altos contenidos de bicarbonato, níquel y cobre y de arsénico (Palacios et al. 1995). 51 La flora y la fauna nativas han sido afectadas por el deterioro del hábitat (agua y suelo) y por la introducción de especies exóticas. Según Novelo y Gallegos (1988) 26 especies de plantas acuáticas, de un total de 67 pertenecientes a 20 familias, están extintas de la región chinampera del sureste de la Cuenca de México, y 8 especies tienen altas posibilidades de extinguirse en pocos años, si continúan las condiciones de degradación existentes. La introducción del “lirio acuático” a la zona lacustre de Xochimilco a fines del Siglo XIX, ha ido sustituyendo a varias especies de plantas acuáticas nativas convirtiéndose en una plaga por su alto grado de adaptabilidad a las condiciones físico-químicas de los canales (Ficha Ramsar, 2004). La vegetación terrestre también ha sido disminuida por la presencia de plagas que dañan a los ahuejotes (árbol típico del paisaje chinampero), principalmente el muérdago (Cladocolea loniceroide) y el malacosoma (Malacosoma incurvum var. azteca). En cuanto a la introducción de especies exóticas se registran varias especies de palmas (Phoenix canariensis y Washingtonia robusta), casuarinas (Casuarina equisetifolia), pirul (Schinus molle), ficus (Ficus benjaminia), higo (Ficus carica), hule (Ficus elastica), jacarandá (Jacaranda mimosaefolia), ricino (Riccinus communis), fitolaca (Phytolaccai cosandra), entre las más frecuentes. La pérdida del arbolado de la zona chinampera, por las causas antes mencionadas, afecta el equilibrio ecológico y el paisaje típico de la localidad dado que en el sistema agrícola de chinampas, las raíces del ahuejote son las que retienen el sustrato de la misma (Ficha Ramsar, 2004). Desde la época prehispánica la zona se distinguía por su gran productividad agrícola que abastecía de alimentos a México-Tenochtitlán; sin embargo, por los problemas citados, actualmente se utiliza aproximadamente solo un 15% de la superficie de uso agrícola. Cerca de 350 hectáreas están afectadas por inundación, una superficie aproximada de 500 hectáreas presenta degradación 52 por salinidad y sodicidad; cerca del 4% está ocupada por asentamientos humanos irregulares y el resto ha sido abandonado por problemas de tenencia de la tierra o por falta de interés. Por lo que respecta a la superficie en producción, la problemática que se registra es debido al cambio en el tipo de producción que se ha dado por la búsqueda de cultivos de mayor rentabilidad (Ficha Ramsar, 2004). El empleo de invernaderos ha conducido a un uso intensivo de agroquímicos, al cierre de canales y zanjas, y en general al depósito de grandes cantidades de residuos tóxicos. Por otro lado, existe la tendencia a la desaparición de la agricultura en chinampas, que es una técnica prehispánica de bajo impacto ambiental que da identidad a México. 6.4.2 TRABAJO DE CAMPO. Se realizaron visitas mensuales al canal de Cuemanco en la zona lacustre de Xochimilco, en los meses de marzo, abril, mayo, junio, julio, agosto, septiembre, octubre, noviembre y diciembre de 2011 y enero y febrero de 2012; con el fin de colectar organismos de la especie Cambarellus (C.) montezumae, la colecta de estos organismos nos permitió establecer una comparación de los diferentes parámetros evaluados tanto en época cálida como en época fría del año, lo cual nos ayudó a disponer de información relevante para una adecuada comprensión e interpretación de los factores que afectan el ciclo reproductivo de estos organismos en su hábitat natural. 53 6.4.2.1 Estacionalidad. Para establecer la estacionalidad en el área de estudio (época cálida y época fría), se tomaron como referencia las temperaturas medias ambientales para cada uno de los meses en la zona lacustre de Xochimilco, reportadas en el plan Delegacional de Desarrollo Sustentable: Delegación Xochimilco (2010), las temperaturas medias mensuales son las siguientes: Cuadro 2. Distribución media mensual de la temperatura ambiente (°C) en la zona lacustre de Xochimilco. Ene Feb Mar Abr May Jun Jul Ago Sep Oct Nov Dic 11.8 12.7 15.8 17.4 18.3 18.2 17.7 17.8 17.6 15.8 13.4 13.4 La época cálida está representada por los meses de abril, mayo, junio, julio, agosto y septiembre, su temperatura media es 17.8 ± 0.35 °C y la época fría por los meses de octubre, noviembre, diciembre, enero y febrero, con una temperatura media de 13.8 ± 1.6 °C; la agrupación de los meses en cada una de las épocas se llevó a cabo en base a datos reportados por García-Padilla en 2010, posteriormente se realizó una prueba de ANOVA para determinar si existían diferencias significativas entre ambas época del año, la hipótesis nula se analizó a un nivel de significancia de 0.05. 54 6.4.2.2 Caracterización del hábitat. En virtud de que las condiciones del ambiente inciden en la distribución de los recursos y usos de la energía contenida en el alimento ingerido de las especies que habitan en los cuerpos de agua, y esto a su vez influye en parámetros como la distribución de tallas y ciclo reproductivo, es básico entonces, efectuar un monitoreo de las principales variables que pudieran afectarles. Por tal motivo se midió en el sitio de colecta: la temperatura (± 0.05 °C) y el oxígeno disuelto (± 0.05 mg O2/L) con un oxímetro (YSI modelo 51B) y el pH con un potenciómetro (HI 98129), tanto en el estrato fondo como en la superficie. 6.4.2.3 Colecta de los organismos. Se colectaron los organismos que se obtuvieron tras 90 minutos de captura en promedio, por medio de una red de cuchara de 1 mm de luz de malla de forma triangular. La captura de los acociles se llevó a cabo entre las 10:00 y las 12:00 horas. Posteriormente fueron colocados en botes con agua del medio para su traslado al área de acuarios del Laboratorio de Acuacultura y Producción Acuática de la Facultad de Ciencias, UNAM. Una vez en el área de acuarios se separaron las hembras ovígeras encontradas en campo, se colocaron individualmente en botes de plástico de 2 L de capacidad con refugios (para evitar la pérdida de huevos y apéndices) y aireación constante a temperatura ambiente, se realizó un recambio de agua del 25% cada tercer día, el resto de los organismos se colocaron en un reservorio con capacidad de 75 L para promover el apareamiento. Este reservorio contó con aireación constante y refugios, se realizó un recambio de agua una vez a la 55 semana del 20%. Tanto las hembras ovígeras como los organismos colocados en el reservorio fueron alimentados ad libitum con alimento comercial Camaronina (Purina, con un 40% de proteína). 6.4.3 TRABAJO DE LABORATORIO. 6.4.3.1 Caracterización de las colectas. De los organismos colectados se obtuvieron las siguientes características morfométricas: Longitud total (LT: desde la punta del rostro hasta la parte final del telson), Longitud del cefalotórax (LCT: desde la punta del rostro, hasta la parte final del cefalotórax en su región dorsal media) con un vernier (± 0.01 mm) Caliper y el peso húmedo (Ph) con una abalanza (± 0.01 gr) Ohaus, Scout Pro (Fig. 1). La determinación del sexo se llevó a cabo de manera visual, los datos obtenidos se utilizaron para determinar la estructura poblacional de Cambarellus (C.) montezumae en el Canal de Cuemanco. Figura 1. Características biométricas del acocil Cambarellus (C.) montezumae. 56 De las hembras ovígeras obtenidas en el campo además de las medidas mencionadas, se llevó a cabo el conteo aproximado del número de huevos, el tiempo de incubación, el número de crías vivas eclosionadas, así como el peso de las crías. Se tomó una hembra ovígera por cada mes de muestro para ser congelada y posteriormente llevar a cabo análisis morfológicos y químicos proximales de los huevecillos. 6.4.3.1.1 Estructura poblacional. La determinación de la estructura de una población requiere uniformar criterios para la clasificación de los organismos en clases o edades, en el caso del desarrollo de Cambarellus (C.) montezumae aún no se cuenta con un criterio para determinar en qué etapa de desarrollo se encuentra un determinado individuo. Es un hecho que esta clasificación debería estar vinculada con el concepto de edades ecológicas que, típicamente, considera la existencia de una edad prereproductiva, reproductiva y posreproductiva (Odum, 1987). El concepto es útil cuando es difícil establecer correlaciones fehacientes con el tamaño del animal y la edad como es el caso de Cambarellus (C.) montezumae. Para determinar la estructura de la población de Cambarellus (C.) montezumae en la zona lacustre de Xochimilco, específicamente en el Canal de Cuemanco, se determinaron cuatro clases de tamaño que se muestran en el Cuadro 3. Dentro de la edad prereproductiva encontramos las clases: cría, juvenil y subadulto, en la edad reproductiva encontramos a la clase adulto en donde ya se presentan encuentros reproductivos exitosos. Estas clases de tamaño fueron determinadas en base a la experiencia en el manejo de la especie y en 57 observaciones realizadas en campo, así como en datos reportados en investigaciones previas realizadas por otros autores (Rangel, 2004 y 2009; García-Padilla, 2010; Villa, 2010). 6.4.3.1.2 Proporción sexual. Para determinar la desviación de la proporción sexual esperada 1:1 se utilizó la prueba Chi2. Tanto la estructura poblacional como la proporción sexual de los organismos se analizaron por separado para cada época del año (época cálida y época fría). Cuadro 3. Características de cada edad ecológica del acocil Cambarellus (C.) montezumae. Etapa Edad Características Organismos recién eclosionados de 2 mm hasta 10 Cría mm de longitud total. Organismos de 11 mm a 18 mm de longitud total, no Prereproductiva Juvenil presentan dimorfismo sexual aparente. Organismos de 19 mm a 27 mm de longitud total, con Subadulto evidente dimorfismo sexual, pero que aun no presentan maduración gonadal evidente. Organismos a partir de 28 mm de longitud total que Reproductiva Adulto presentan fenómenos de maduración sexual (gónadas evacuadas). 58 6.4.3.1.3 Relación peso-longitud. Se estableció la relación peso-longitud de los organismos colectados para cada clase talla y época de año con el fin de determinar las distintas fases de crecimiento en peso y longitud de los acociles de acuerdo a la siguiente ecuación: Pt= a Lsb En donde: Pt= peso total (g) a una longitud estándar determinada. Ls= longitud estándar. a y b= valores constantes en la regresión. El valor de la contante b permite definir el tipo de crecimiento que presentan estos organismos, considerándose como isométrico un valor de b=3 y como alométrico cuando presenta un valor diferente (Ricker, 1975), esta evaluación se llevó a cabo mediante una prueba de t de Student. 59 6.4.3.2 Indicadores del desempeño reproductivo. 6.4.3.2.1 Época reproductiva. La época reproductiva se determinó según la evolución mensual del número de desoves, se reconoce actividad reproductiva cuando el número de desoves alcanzan valores máximos en un ciclo anual. 6.4.3.2.2 Índice de desove. Así mismo se calculó el índice de desove (ID) mediante la variación en el porcentaje de hembras ovígeras en relación con el total de hembras adultas en cada muestreo. 6.4.3.2.3 Fecundidad. Entre los indicadores de desempeño reproductivo más importantes encontramos a la fecundidad, que en términos biológicos se refiere a la capacidad reproductora de un ser vivo. En este estudió la fecundidad (F) de Cambarellus (C.) montezumae se determinó contando el número aproximado de huevos que una hembra incuba en un momento dado durante su época reproductiva. 60 Para representar la fecundidad se seleccionó el modelo potencial que ha sido utilizado para numerosos crustáceos (Hines, 1988, 1991; Reid & Corey, 1991; Palma & Arana, 1997): F = a * Lsb En donde: F= fecundidad. Ls= longitud estándar (Longitud Total). a y b= valores constantes en la regresión. Los datos fueron ajustados a un modelo de regresión lineal mediante la transformación, logF =loga + blogLs, y los parámetros a y b fueron calculados a través del método de mínimos cuadrados (Zar, 1996). Se utilizó análisis de covarianza para comparar las pendientes entre las ecuaciones de las regresiones lineales correspondientes a ambas épocas del año (Hamazaki, et al., 2006). 6.4.3.2.4 Esfuerzo Reproductivo. Otro indicador importante en el desempeño reproductivo de un organismo es el esfuerzo reproductivo (ER), que es utilizado para determinar la relación entre la inversión de energía en la reproducción y el tamaño de las hembras. Este índice se estimó aplicando los índices propuestos por Parada, et al., (1987), para invertebrados, quienes estiman el ER en base a la relación entre el peso de la masa ovígera y el peso de la hembra. El esfuerzo reproductivo (ER) se correlacionó linealmente con la talla corporal de las hembras tomando como 61 variable dependiente el esfuerzo reproductivo. Este índice se comparó entre ambas épocas del año mediante una ANOVA unifactorial, la hipótesis nula se examinó a un nivel de significancia de 0.05. 6.4.3.3 Indicadores de la calidad del huevo. Para determinar la calidad de las masas ovígeras en ambas épocas del año se llevó a cabo un análisis morfológico de los huevecillos (volumen del huevo y peso húmedo) y el análisis químico proximal de su composición (composición de lípidos y proteínas). 6.4.3.3.1 Volumen del huevo (Vh). El volumen del huevo se calculó separando a una hembra ovígera proveniente de cada mes de muestro, de cada uno de los huevecillos se midió el diámetro mayor (a) y menor (b) con una rejilla milimétrica y una lupa, se descartaron los huevos que presentaron algún grado de deterioro debido al periodo de congelación. Los datos obtenidos se incorporaron en la fórmula Vh = 1/6 (a * b2 * π) propuesta por Reid & Corey (1991). De estos mismos huevecillos se tomaron submuestras para llevar a cabo el análisis químico proximal. 6.4.3.3.2 Composición químico proximal del huevo. El peso húmedo se determinó pesando cada huevecillo en una balanza digital (± 0.001 gr) Ohaus, Scout Pro, de cada una de las hembras congeladas que se 62 utilizarían en el análisis químico proximal. Así mismo se llevó a cabo la determinación del porcentaje de lípidos y proteínas de tres submuestras por época del año. El contenido de lípidos se evaluó mediante el método de Fofovainillina (2006); para determinar la concentración de lípidos en las submuestras se realizó una curva patrón con aceite de maíz, las muestras fueron leídas en un espectrofotómetro Beckman DU 640 a 490 nm. Para la determinación de proteína se utilizó el método de Nitrógeno Total de Silicato 10023, para ello se utilizó un equipo HACH DR/780 y un reactor DRB 200, los valores obtenidos se multiplicaron por un factor de 6.25 para determinar la cantidad de proteína total en los huevecillos, de acuerdo a lo referido en el método Número 976.06 de la AOAC Analysis Methods (1995). La comparación de los diversos índices en ambas épocas del año se realizó mediante una ANOVA unifactorial, la hipótesis nula se examinó a un nivel de significancia de 0.05. 6.4.3.4 Desarrollo embrionario. 6.4.3.4.1 Tiempo de incubación. Durante el periodo de incubación-eclosión de la hembras ovígeras encontradas en campo tanto en época cálida como en época fría, se realizó un monitoreo diario de las características morfológicas de los huevecillos, se registró el número de días en el que permanecían los huevecillos en cada uno de los 63 estadios de desarrollo embrionario. Para determinar en qué estadio del desarrollo embrionario se encontraban, se desarrolló una clasificación basada en la caracterización morfológica de las diferentes etapas de desarrollo del embrión, durante el proceso de incubación-eclosión se describen 4 estadíos de desarrollo en función de los cambios morfológicos ocurridos durante la embriogénesis (Cuadro 4). Cuadro 4. Características de los estadios de desarrollo embrionario del acocil Cambarellus (C.) montezumae. Estado de desarrollo Características Huevo redondeado, vitelo uniforme y sin mancha ocular I visible. Huevo ovoide, vitelo ocupa más de la mitad del huevo, mancha II ocular alargada y escasamente visible. Huevo ovoide, poca cantidad de vitelo, ojos visibles bien III desarrollados e intensamente pigmentados, abdomen libre. Crías eclosionadas, completamente desarrolladas y con IV movilidad. 6.4.3.4.2 Tamaño de las crías. Una vez que las crías eran liberadas del abdomen de la madre y tenían completa autonomía, se procedió a retirar a la hembra del reservorio y a tomar sus características morfométricas. Aproximadamente a los 5 días posteriores a 64 la eclosión de las crías se llevó a cabo el registro de su peso húmedo, mediante una balanza digital (± 0.001 gr) Ohaus, Scout Pro. 6.4.3.5 Respuesta fisiológica de las hembras ovígeras. El cuidado que realizan las hembras de Cambarellus (C.) montezumae de la masa ovígera que portan durante el periodo de incubación-eclosión es conocido como cuidado parental, el cual se define como toda aquella conducta realizada por uno o ambos progenitores que incrementa la supervivencia de la progenie (Clutton-Brock, 1991). Si este incremento en la adecuación genera una disminución en el éxito reproductivo residual de las hembras ovígeras, se le conoce como inversión parental (Trivers, 1972). Esta disminución en el éxito reproductivo residual puede ser debida a factores tales como: pérdidas de oportunidad de apareamiento o alimentación, un aumento en el riesgo de depredación y/o aumento en el gasto energético (Clutton-Brock, 1991; Tallamy & Schaeffer, 1997; Gross, 2005). En este sentido el propósito de este experimento fue determinar si existía un incremento en el gasto energético de las hembras ovígeras de Cambarellus (C.) montezumae en comparación con hembras que no se encontraban grávidas o cargadas. Esto se determinó por medio de la cuantificación de la Tasa Metabólica (R). Este índice fisiológico se evaluó a través del consumo de oxígeno (QO2) de rutina expresado como una tasa, mg O2 g Ps-1 día-1 en hembras ovígeras y hembras no grávidas bajo condición de ayuno, pertenecientes al mes de abril en donde se presentó una mayor proporción de hembras ovígeras en el hábitat natural. 65 Se llevó a cabo un monitoreo de 3 horas de medición del consumo de oxígeno, debido a que no se deseaba someter a altos niveles de estrés a las hembras ovígeras y evitar la pérdida de los huevecillos. El consumo de oxígeno se midió en cámaras respirométricas de 120 mL de capacidad con una hembra por cámara. Se emplearon 14 cámaras, 6 para hembras ovígeras, 6 para hembras no grávidas y 2 cámaras control, todas sumergidas en una caja de plástico de 50 L, a manera de baño maría, para evitar los cambios bruscos de temperatura. La medición de oxígeno se efectuó con un oxímetro YSI 51B (± 0.05 mg O2/L). Se tomó una lectura inicial después de la cual se cerraron las cámaras, luego de tres horas se tomó la muestra final. Se probó estadísticamente el efecto del gasto energético por cuidado parental de las hembras ovígeras mediante una prueba de ANOVA unifactorial. 66 6.5 RESULTADOS. 6.5.1 Caracterización del hábitat. Se llevó a acabo un análisis de varianza de dos factores, para determinar si existe estacionalidad (época cálida y época fría) y estratificación (estrato superficie y estrato fondo) en el canal de Cuemanco de los parámetros físico- químicos monitoreados: temperatura (T °C), oxígeno disuelto (O2) y potencial de hidrogeno (pH), (Cuadro 5). Se encontraron diferencias significativas (p<0.05) para la temperatura y el oxígeno disuelto tanto en la estacionalidad como en la estratificación. La época cálida presentó una temperatura media en el estrato superficie de 23.3 ± 1.3 °C y en el estrato fondo de 21.3 ± 1.2 °C, en contraste con la época fría que presentó una temperatura media en el estrato superficie de 17.7 ± 2.4 °C y en el estrato fondo de 16.5 ± 2.1 °C. El mes más caluroso fue el mes de junio con una temperatura media de 24.2 ± 1.6 °C y el mes más frío fue el mes de enero con una temperatura media de 15.3 ± 0.2 °C (Fig. 2). El oxígeno disuelto en época cálida presento valores promedio en el estrato superficie de 9.5 ± 1.1 mg/L y en el estrato fondo de 4.1 ± 0.6 mg/L, en época fría encontramos valores promedio para el estrato superficie de 10.5 ± 0.5 mg/L y para el estrato fondo de 4.7 ± 0.6 mg/L (Fig. 3). 67 Cuadro 5. Parámetros físico-químicos del hábitat (Canal de Cuemanco) del acocil Cambarellus (C.) montezumae en época cálida y fría del año. ₂ Estacionalidad Mes Estrato Temperatura (°C) pH O disuelto ABRILa Superficie 21.5 8.0 10.4 Fondo 20.7 7.9 3.3 MAYOa Superficie 23.8 5.3 9.1 Fondo 21.7 4.2 4.2 JUNIOa Superficie 25.4 6.0 9.2 Época Cálida Fondo 23.1 5.2 3.2 JULIOa Superficie 23.0 8.2 8.9 Fondo 21.5 8.1 4.4 AGOSTOa Superficie 22.0 9.2 12.5 Fondo 19.3 9.2 5.2 SEPTIEMBREa Superficie 23.0 9.5 12.8 Fondo 21.5 9.4 3.8 OCTUBREb Superficie 16.5 8.4 10.2 Fondo 16.0 8.5 5.8 NOVIEMBREb Superficie 17.0 8.3 9.4 Fondo 15.0 8.5 4.8 DICIEMBREb Superficie 15.8 8.6 10.5 Época Fría Fondo 15.0 8.4 5.2 ENEROb Superficie 15.5 8.0 14.5 Fondo 15.0 8.2 4.7 FEBREROb Superficie 20.4 8.7 8.4 Fondo 17.2 8.1 5.2 MARZOa Superficie 21.3 7.7 13.6 Fondo 20.3 7.5 6.1 *Indicando con superindices los meses que fueron diferentes entre si (temperatura promedio). 68 Figura 2. Temperatura promedio mensual en el Canal de Cuemanco. Figura 3. Promedios mensuales de oxígeno disuelto en el Canal de Cuemanco. 69 En época cálida encontramos valores promedio para el pH en el estrato superficie de 9.1 ± 0.3 y para el fondo de 8.8 ± 0.6, la epoca fría presenta valores de 8.7 ± 0.3 en el estrato superficie y de 8.4 ± 0.2 en el fondo, no se encontraron diferencias significativas en la estacionalidad ni en la estratificacion de este parametro (p>0.05), (Fig. 4). Figura 4. Potencial de hidrogeno (pH) promedio mensual en el Canal de Cuemanco. 6.5.2 Caracterización de las colectas. Se realizaron muestreos mensuales para colectar acociles de la especie Cambarellus (C.) montezumae tanto en época cálida como en época fría del año, a los organismos colectados se les midieron los siguientes índices morfométricos: longitud total (LT), longitud cefalotóraxica (LCT) y peso húmedo (Ph). 70 Se colectaron 1,345 organismos a lo largo de los 12 muestreos; de los cuales 862 fueron organismos colectados en época cálida del año y 483 organismos colectados en época fría del año, se encontraron diferencias significativas en el número de organismos colectados, es decir en la abundancia, en ambas épocas del año (p<0.05), (Fig. 5). Figura 5. Abundancia del acocil Cambarellus (C.) montezumae en época cálida y fría del año en el Canal de Cuemanco. El número de organismos colectados varió en todas las colectas, sin embargo, se puede obervar que en época cálida se colectaron 1.8 veces más organismos que en época fría. La mayor captura se realizó en el mes de abril con 194 organismos, seguido por el mes de mayo en donde se capturaron 185 organismos; en el mes de enero se obtuvo la menor captura con 65 organismos (Cuadro 6 y Fig. 6). 71 Cuadro 6. Número de organismos del acocil Cambarellus (C.) montezumae colectados mensualmente en el Canal de Cuemanco. Abundancia Abr May Jun Jul Ago Sep Oct Nov Dic Ene Feb Mar Hembras 114 142 81 101 89 53 66 48 64 37 39 52 Machos 80 43 46 53 35 25 21 24 29 28 30 45 Total 194 185 127 154 124 78 87 72 93 65 69 97 Figura 6. Número de organismos del acocil Cambarellus (C.) montezumae colectados mensualmente en el Canal de Cuemanco. 72 Así mismo, se llevó a cabo un Modelo de Regresión Lineal para determinar si existia una relación directa entre la temperatura en el hábitat y la abundancia de los organismos. Se encontró que la relación entre la temperatura y la abundancia de los organismos fue significativa (p<0.05), (Fig. 7). y = -60.93 + 8.81*T°C R2 = 0.39 Figura 7. Regresión lineal entre la temperatura del hábitat y la abundancia del acocil Cambarellus (C.) montezumae. 6.5.3 Estructura poblacional. Para determinar la estructura poblacional de Cambarellus (C.) montezumae en la zona lacustre de Xochimilco, específicamente en el Canal de Cuemanco, se determinaron cuatro clases o edades ecológicas, las cuales se describen en el Cuadro 3. En la etapa prereproductiva encontramos las siguientes edades: cría, juvenil y subadulto; en la etapa reproductiva encontramos a la edad adulto en donde ya se presentan encuentros reproductivos exitosos. 73 Para la época cálida encontramos que el 96% de la población se encuentra en etapa prereproductiva, en donde la edad cría representa el 63% de la población total, la edad juvenil contribuye con un 17% y la edad subadulto representa el 16%, el restante 4% se encuentra representado por la etapa reproductiva. En época fría la etapa prereproductiva constituye el 94% de la población total, 55 % de la población pertenece a la edad cría, 15% a la edad juvenil y 24% a la edad subadulto; la etapa reproductiva se encuentra conformada por un 6% de la población (Cuadro 7). Cuadro 7. Abundancia de organismos del acocil Cambarellus (C.) montezumae por edad ecológica en época cálida y fría del año. Etapa Edad Población Total % Época cálida % Época fría % Cría 2008 61 1439 63 569 55 Prereproductiva Juvenil 617 19 429 19 188 18 Subadulto 526 16 310 14 216 21 Reproductiva Adulto 146 4 87 4 59 6 *El número de crías fue calculado considerando el reclutamiento de las hembras ovígeras encontradas en campo para ambas época. 74 6.5.4 Proporción sexual. La determinación del sexo se llevó a cabo de manera visual en cada uno de los organismos, en la época cálida se encontramos 580 hembras y 282 machos, la proporción sexual fue de 2:1 (2 hembras por cada macho) aproximandamente. Para la época fría encontramos 306 hembras y 177 machos, la proporción sexual fue la misma que para la época cálida de 2:1. Se llevó a cabo una prueba de Chi2 para determinar si existía una desviación de la proporción sexual esperada de 1:1 (1 hembra por cada macho), se encontraron diferencias significativas (p<0.05), (Fig. 8). Figura 8. Abundancia de organismos por sexo del acocil Cambarellus (C.) montezumae en época cálida y fría. En la figura anterior se puede observar que en todos los meses la abundancia de hembras siempre fue superior que la de machos, en una proporción de 2:1, la estacionalidad no tuvo influencia sobre esta proporción. 75 6.5.5 Relación Peso-Longitud. Las relaciones talla (longitud total [mm]) y peso corporal (g) mostraron una relación de tipo isometrico para hembras y machos en ambas épocas del año, teniendo un mejor R2 para el modelo potencial (Pt= a Lsb), los organismos colectados en epoca fría del año (Cuadro 8; Fig. 9 y 10). Cuadro 8. Modelo potencial de crecimiento del acocil Cambarellus (C.) montezumae por sexo y época del año. Estacionalidad Sexo n LT (mm)* Peso (g)* Modelo R² 3.02 ± 0.02 Hembras 580 23.87 ± 0.96 0.81 ± 0.04 P = 0.00002 Lt 0.79 Época cálida 2.82 ± 0.08 Machos 282 25.21 ± 1.39 0.77 ± 0.06 P = 0.00005 Lt 0.81 3.11 ± 0.01 Hembras 306 23.66 ± 1.38 0.71 ± 0.05 P = 0.00002 Lt 0.95 Época fría 3.17 ±0.01 Machos 177 22.03 ± 1.38 0.51 ± 0.05 P = 0.00001 Lt 0.95 * media ± e.e. 76 1.6 1.41.4 P = 0.00002 L, 302 1.2 + 1 + ~ + -~" ~ 0.8 1 + + • + Il.1>. 0.6 + OA + + 0.2 + + + a o 5 10 15 20 25 30 35 40 Longgititud Total (mm)( 1.6 1.4 lA P = 0.00005 L,L, 2.82 1.2 1 + ~ ++ + -~ "'"00.80 0,8 +~ • + + • + /'-+ Il.1>. 0.6 + +1 + + + +" .... + t + + .... OA0.4 .,... + 0.2 + +".+.. b O 5 1100 1 155 20 2 255 3300 35 40 LLongitudLonongitud ToTTotaottal Figura 9. Modelo potencial del crecimiento del acocil Cambarellus (C.) montezumae en época cálida (a=hembras y b=machos). 77 1.6 P = 0.00002O.OOOO2L L,, 3.11 1.41.4 = 1.2 + + ~ 1 + + ~ + "0O 0.8 + • + ~ Il. 0.6 ++ 0.4 .... + e 0.2 + + + + + o 5 1100 1 155 20 25 30 35 40 LongitudLongitud TotaTotall (nun)(mmuuu) 1.6 11.4.4 P = 0 .0000 1 L, 3.17 1.2 1 + ~ ++ + -"~ 0.8 • + ++ .. 00.6.6 0.4 0.2 + d + + O 5 10 1 155 20 25 30 35 40 LLongitudongitudngitud TTotalotal (mm) Figura 10. Modelo potencial del crecimiento del acocil Cambarellus (C.) montezumae en época fría (a=hembras y b=machos). 78 6.5.6 Indicadores de desempeño reproductivo. 6.5.6.1 Época reproductiva. La época reproductiva se determinó según la evolución mensual del número de desoves, se reconoce actividad reproductiva cuando el número de desoves alcanza valores máximos en un ciclo anual. En el ciclo anual encontramos un total de 42 hembras ovígeras en el hábitat natural, de las cuales en época cálida se encontraron 35 hembras ovígeras que representan el 83% de las hembras encontradas en todo el ciclo anual, el restante 17% se encontró en época fría, con un total de 7 hembras ovígeras. El mes que mayor actividad reproductiva fue el mes de mayo con un total de 10 hembras ovígeras, seguido del mes junio en donde se encontron 7 hembras grávidas, tan sólo estos dos meses en su conjunto, representan el 41% de la actividad reproductiva en el ciclo anual; en los meses de noviembre y diciembre no se encontraron hembras ovígeras en el hábitat natural (Fig. 11). Adicionalmente se llevo a cabo un Modelo de Regresión Lineal para determinar si existía una relación directa entre la temperatura en el hábitat y la abundancia de hembras ovígeras. Se encontró que la relación entre la temperatura y la abundancia de las hembras ovadas fue significativa (p<0.05), (Fig. 12). 79 Figura 11. Número de hembras ovígeras del acocil Cambarellus (C.) montezumae colectadas mensualmente en el Canal de Cuemanco. y = -11.81 + 0.77*T°C R2 = 0.59 Figura 12. Relación entre temperatura del hábitat y la abundancia mensual de hembras ovígeras del acocil Cambarellus (C.) montezumae. 80 6.5.6.2 Índice de desove (ID). Se calculó el índice de desove (ID) mediante la variación en el porcentaje de hembras ovígeras en relación con el total de hembras en edad adulta en cada una de la épocas del año. En época cálida encontramos un total de 49 hembras en edad adulta, que pertenecen a la etapa reproductiva y que pueden tener encuentros reproductivos exitosos y en época fría encontramos un total de 37 hembras; en el Cuadro 9 se muestra el número de individuos por sexo y edad reproductiva para cada época cálida y fría del año. Cuadro 9. Abundancia de hembras adultas del acocil Cambarellus (C.) montezumae en época cálida y fría del año. Estacionalidad Sexo Cría Juvenil Subadulto Adulto Hembras 959 265 231 49 Época cálida Machos 480 111 132 38 Hembras 379 102 147 37 Época fría Machos 190 52 104 20 El ID para época cálida es de 0.41 y para época fría de 0.16, lo cual nos estaría refiriendo que para época cálida el 41% de las hembras con potencial reproductivo se están reproduciendo en comparación con el 16 % que lo hace en época fría. 81 6.5.6.3 Fecundidad. Debido a la importancia de la fecundidad como indicador de desempeño reproductivo para la especie Cambarellus (C.) montezumae, se llevó a cabo una caracterización morfométrica de las hembras ovígeras colectadas tanto en época cálida como en época fría del año (Cuadro 10). Las hembras ovígeras colectadas en época cálida presentaron una longitud total promedio menor (34.31 ± 3.99 mm) que las hembras colectadas en época fría (35.35 ± 3.65 mm), sin que esta diferencia en cuanto al tamaño (longitud total) resultara significativa (p>0.05). El peso promedio de las hembras ovígeras para época cálida fue de 0.97 ± 0.35 g y para época fría de 1.07 ±0.34 g, no se encontraron diferencias significativas (p>0.05). La hembra ovígera más grande se colecto en época cálida con una longitud total de 43.21 mm y un peso de 1.91 g, así mismo la hembra ovígera más pequeña también se colecto en época cálida con una longitud total de 28.31 mm y un peso corporal de 0.58 g. En cuanto a la fecundidad (número de huevos por hembra), para época cálida encontramos que en promedio una hembra porta 46 ± 25 huevos, en comparación a una hembra de época fría que portaría en promedio de 49 ± 11 huevos, esta diferencia tampoco resulta ser estadísticamente significativa (p>0.05), (Fig. 13). En época cálida el mayor número de huevos portados por una hembra fueron 150, en comparación con una hembra de época fría donde el mayor número de huevos fueron 65. El número total de huevos para época cálida fue de 1628 y para época fría de 341, esto está estrechamente relacionado con el número de hembras ovígeras encontradas en cada una de las épocas del año. 82 Cuadro 10. Características morfométricas y número de huevos de hembras ovígeras del acocil Cambarellus (C.) montezumae colectas en época cálida y fría del año. Estacionalidad Variables Promedio D.E. Max. Min. n 35 LT 34.31 3.99 43.21 28.31 LCT 15.83 1.96 20.35 19.13 Época cálida LA 13.28 1.75 20.35 16.12 AA 6.44 0.76 8.11 5.29 Peso 0.97 0.35 1.91 0.58 No. Huevos 46 25 150 13 Total de Huevos 1628 n 7 LT 35.35 3.65 40.17 29.97 LCT 16.18 0.25 20.16 13.63 Época fría LA 12.54 3.47 15.6 7.46 AA 6.31 0.63 7.23 5.56 Peso 1.07 0.34 1.72 0.61 No. Huevos 49 11 65 37 Total de Huevos 341 *Longitud total (LT); Longitud del cefalotórax (LCT); Largo del abdomen (LA); Amplitud del abdomen (AA), expresadas en mm. El peso se representó en g. 83 Figura 13. Número total de huevos de las hembras ovígeras del acocil Cambarellus (C.) montezumae en época cálida y fría del año. Complementario a esto, se llevó a cabo un análisis para determinar si las relaciones talla (longitud total (mm)) y peso corporal (g) de la hembra ovada mostraban una relación con el número de huevos portados (Fecundidad). El primer análisis se realizó por medio de un modelo potencial entre la longitud total de la hembra ovígera y el número de huevos que portaba (Fig. 14). Al realizarse el análisis de varianza sobre la correlación entre las variables, encontramos que existe una relación directa entre el número de huevos y el tamaño de la hembra ovígera (p<0.05). El modelo potencial que describe esta relación es: Número de Huevos = 0.0038 Lt2.6387, (R2= 0.53). 84 Figura 14. Relación del número de huevos respecto al tamaño de la hembra ovígera del acocil Cambarellus (C.) montezumae. Otra característica morfométrica que se encuentra muy relacionada con el tamaño de la hembra es la amplitud del abdomen, esta a su vez es de vital importancia en la fecundidad, ya que es un indicador del área disponible para la portación de los huevos. Por lo que se decidió llevar a cabo un análisis de correlación que nos permitiera determinar si esta variable morfométrica se encuentra relacionada con el número de huevos portados por hembra (Fig. 15). 85 Figura 15. Relación del número de huevos respecto a la amplitud del abdomen de una hembra ovígera del acocil Cambarellus (C.) montezumae. El análisis de varianza sobre la correlación entre las variables, mostró que existe una relación directa entre el número de huevos y la amplitud del abdomen de la hembra ovígera (p<0.05). El modelo potencial que describe esta relación es: Número de Huevos = 0.3583 AA2.554, (R2= 0.61). 6.5.6.4 Esfuerzo reproductivo. El esfuerzo reproductivo es muy utilizado para determinar la relación entre la inversión de energía en la reproducción (peso de la masa ovígera) y el tamaño de la hembra (peso corporal), (Fig. 16). 86 Figura 16. Relación entre el peso de la masa ovígera respecto al peso de la hembra del acocil Cambarellus (C.) montezumae. El análisis de varianza sobre la correlación entre las variables mostró que no existe una relación directa entre el peso de la masa ovígera y el peso de la hembra ovada (p>0.05). El peso promedio de la masa ovígera para época cálida fue de 0.31 ± 0.17 g y para época fría de 0.20 ± 0.07 g; se encontraron diferencias significativas entre ambas épocas del año (p<0.05), (Fig. 17). 87 Figura 17. Peso de masa ovígera del acocil Cambarellus (C.) montezumae en época cálida y fría del año. 6.5.7 Indicadores de la calidad del huevo. Las características de la calidad del huevo están estrechamente relacionadas entre sí, dado que a nivel ecológico están determinadas por el volumen, el peso, la forma y el color, así como los parámetros internos directamente relacionados con su composición química proximal. Para determinar esta calidad se recurrió a la inspección de ciertos elementos del huevo tanto en su exterior (volumen y peso) como en su interior (lípidos y proteínas). 88 6.5.7.1 Volumen del huevo. El volumen del huevo mostró diferencias notorias entre ambas época del año, encontrando volúmenes mayores para los huevos de hembras ovígeras colectadas en época cálida. Al llevar a cabo la comparación estadística encontramos diferencias significativas entre ambas épocas del año (p<0.05), (Fig. 18). El peso húmedo de cada huevo presentó una alta relación con el volumen del huevo, encontrando diferencias significativas entre ambas épocas del año (Cuadro 11). Cuadro 11. Volumen y peso húmedo del huevo del acocil Cambarellus (C.) montezumae en época cálida y fría del año. Estacionalidad Volumen del huevo mm³ Peso húmedo (mg) Época cálida 0.45 ± 0.24 8.17 ± 0.79 Época fría 0.16 ± 0.09 4.35 ± 1.97 89 Figura 18. Volumen del huevo del acocil Cambarellus (C.) montezumae en época cálida y fría del año. 6.5.7.2 Composición químico proximal del huevo. La composición químico proximal de los huevos es un indicador de la calidad o estado de salud de las hembras y a su vez un indicador importante de la probabilidad de eclosión y supervivencia de las crías en las primeras etapas. Dos de los componentes químicos proximales más importantes son las proteínas y los lípidos, al llevar a cabo el análisis de estas dos variables encontramos que tanto para el porcentaje de proteínas como para el de lípidos se encontraron diferencias significativas entre ambas épocas del año (p<0.05), encontrando los porcentajes más altos de estas variables en los huevos de época cálida (Cuadro 12 y Fig. 19). 90 Cuadro 12. Contenido químico proximal de los huevos del acocil Cambarellus (C.) montezumae en época cálida y fría del año. Estacionalidad Proteína % Lípidos % Época cálida 14.93 ± 0.49 11.85 ± 0.48 Época fría 12.36 ± 0.97 4.51 ± 3.01 Figura 19. Contenido químico proximal de los huevos del acocil Cambarellus (C.) montezumae en época cálida y fría del año. Otro factor muy importante es la calidad químico proximal del tejido de las hembras ovígeras, ya que dependiendo de su estado de salud será la calidad de 91 su descarga reproductiva, por lo que se procedió a evaluar los mismas variables (porcentaje de proteínas y lípidos) pero ahora en las hembras que portaban huevos. Se encontraron diferencia significativas (p<0.05) entre ambas época del año tanto para el porcentaje de proteínas como para el contenido de lípidos (Cuadro 13 y Fig. 20). Cuadro 13. Contenido químico proximal de las hembras ovígeras del acocil Cambarellus (C.) montezumae en época cálida y fría del año. Estacionalidad Proteína % Lípidos % Época cálida 50.61 ± 2.49 9.77 ± 0.65 Época fría 35.61 ± 1.51 5.19 ± 0.57 Figura 20. Contenido químico proximal de las hembras ovígeras del acocil Cambarellus (C.) montezumae en época cálida y fría del año. 92 6.5.8 Desarrollo embrionario. El desarrollo embrionario del acocil Cambarellus (C.) montezumae para este estudio se dividió en cuatro etapas que culminan con la eclosión (Fig. 21). Estas etapas se describen en el Cuadro 4, este proceso va a estar determinado por factores tantos bióticos como abióticos. Entre los factores bióticos que influyen en este proceso se encuentran: la composición químico proximal de los huevos, así como su volumen y tamaño, el cuidado que las hembras dan a la masa ovígera y la interacción de éstas con los depredadores. Entre los factores abióticos encontramos como factor principal a la temperatura, ya esta puede influir de manera directa en el tiempo de incubación de los huevos, para este estudio se monitoreo el desarrollo embrionario de Cambarellus (C.) montezumae durante época cálida y fría del año, con temperaturas promedio de 23.3 y 17.7 °C respectivamente. Figura 21. Desarrollo embrionario del acocil Cambarellus (C.) montezumae. 93 6.5.8.1 Tiempo de incubación. Se monitoreo el desarrollo embrionario de 32 hembras ovígeras para época cálida y de 4 hembras ovígeras para época fría, desde la etapa I en donde el huevo es completamente redondo, presenta vitelo uniforme y aún no presenta mancha ocular evidente, hasta la etapa IV, en donde el desarrollo embrionario ha finalizado y las crías se encuentran completamente desarrolladas y con movilidad. Para la época cálida encontramos que el desarrollo embrionario se realiza en un periodo promedio de 39 ± 2 días; para la época fría el período promedio de incubación es de 46 ± 3 días; se encontraron diferencias significativas para ambas época del año (p<0.05), (Fig. 22). Figura 22. Tiempo de incubación del acocil Cambarellus (C.) montezumae en época cálida y fría del año. 94 6.5.8.2 Tamaño de las crías. El peso (mg) de las crías estará determinado por la calidad químico proximal del huevo y de los factores abióticos que se presenten durante el periodo de incubación. Se pesaron 50 crías en época cálida y 50 crías en época fría, de aproximadamente 5 días de nacidas, se encontraron diferencias significativas entre ambas época del año (p<0.05). Para época cálida encontramos un peso promedio de 15 ± 5 mg y en época fría de 6 ± 1 mg, la cría de mayor peso fue registrada en época cálida con un peso de 33 mg y la más pequeña en época fría con un peso de 3 mg (Fig. 23). Figura 23. Peso de las crías en época cálida y fría del año del acocil Cambarellus (C.) montezumae. 95 6.5.9 Respuesta fisiológica de las hembras ovígeras. El cuidado que realizan las hembras del acocil Cambarellus (C.) montezumae de la masa ovígera que portan durante el periodo de incubación-eclosión, es conocido como cuidado maternal, el cual se define como toda aquella conducta realizada por las hembras que incrementa la supervivencia de la progenie (Fernández, et al., 2003). Se encontró que las hembras ovígeras consumen significativamente más oxígeno que las hembras no ovígeras (p<0.05), las cuales consumen en promedio 388.1 ± 36.9 cal/g Ps-1 día-1 y las hembras no ovígeras 233.4 ± 19.8 cal/g Ps-1 día-1 (Fig. 24). Figura 24. Consumo de oxígeno de hembras ovígeras y no ovígeras del acocil Cambarellus (C.) montezumae. 96 6.6 DISCUSIÓN. La caracterización de hábitats acuáticos por medio del monitoreo de parámetros físico-químicos como temperatura, pH y oxígeno disuelto, es tal vez la forma más sencilla de identificar sus variaciones tanto espaciales como temporales, resultantes de cambios en factores naturales como el clima de la región. En general, es aceptado que dichos parámetros ejercen una influencia notable sobre los procesos químicos y biológicos que ocurren dentro del ecosistema (Hem, 1985; Manahan, 1972). Las variaciones en los parametros físico-químicos en el Lago de Xochimilco establecen una estacionalidad bien definida, de abril a septiembre son meses de época cálida y los meses de octubre a marzo los correspondientes a época fría. Dicha estacionalidad está determinada principalmente por las variaciones en la temperatura (García-Padilla, 2010). La temperatura desempeña un papel fundamental en el funcionamiento del ecosistema al regular o afectar otros factores abióticos del sistema como son la solubilidad de nutrientes, solubilidad de gases, el grado de toxicidad de ciertos compuestos, el pH, el potencial redox, la densidad del agua, el estado físico y la viscosidad del sustrato. Todas estas interacciones afectan a su vez la distribución, composición y el grado de actividad metabólica de los organismos que integran el ecosistema, por lo que la temperatura es un factor regulador de procesos vitales para los organismos (factor controlador), así mismo afecta su distribución espacial y temporal (factor directriz), (Johnson, 1987). Estos cambios en la distribucón espacial y temporal de los individuos de una población, estarán intimamente ligados a la estacionalidad, ya que en época 97 fría, las poblaciones decrecen, generalmente a causa de las bajas temperaturas, de la escasez de alimento y refugio, generando cambios en los principales parámetros demográficos (Chapman & Reiss, 1992). En los ecosistemas lénticos el nivel de oxígeno puede variar tanto estacional como diariamente, desde un estado sobresaturado hasta cerca de un estado anóxico. Los acociles que habitan aguas cálidas o tropicales generalmente no requieren altos niveles de oxígeno disuelto para sobrevivir. Sin embargo, su crecimiento es lento en comparación con los que viven en aguas frías (Holdich, 2002). Este autor, indica que los acociles pueden soportar bajas concentraciones de oxígeno (menos de 4.0 mg O2/L) ya que tienen una molécula compensatoria que incrementa la eficiencia de transporte de oxígeno en la hemolinfa, denominada hemocianina. En este estudio, en la mayor parte de los muestreos la concentración promedio de oxígeno en el estrato fondo y superficie se mantuvo por arriba de 6 mg O2/L e incluso, en los meses de agosto, septiembre, enero y marzo se presentó una sobresaturación de oxígeno disuelto con valores de 12 mg O2/L en el estrato superficie. Las causas principales de sobresaturación de oxígeno pueden ser debido al efecto acelerador de la temperatura sobre las altas concentraciones de algas fotosintéticas que se encuentran en el cuerpo lacustre. Por lo anterior, se deduce que Cambarellus (C.) montezumae puede soportar variaciones en los niveles de oxígeno por lo que este parametro, no tiene un efecto significativo sobre la abundancia de los organismos. Uno de los factores importantes para el crecimiento de los acociles es el calcio, (carbonato de calcio y bicarbonato de calcio), ya que necesitan una alta concentración de estas sales durante la postmuda para reemplazar el calcio cuticular que perdieron durante la fase de muda, por lo cual la mayoría de las 98 especies de acociles se ven afectados negativamente por aguas ácidas a un pH de 5.5 (Appelberg, 1989). En el Lago de Xochimilco encontramos valores de pH de entre 8.6 y 10, lo que indica que el agua de los canales es muy alcalina, esto debido a que el lago recibe agua de la planta tratadora de aguas negras del Cerro de la Estrella; en consecuencia, ingresan nutrientes inorgánicos como sales, fósforo, nitratos y nitritos, así como también metales pesados; dichos valores no inhiben el crecimiento y abundancia de Cambarellus (C.) montezumae (Alva, 1996; Flores, 2009). En conclusión, a partir de los resultados obtenidos de los parámetros físico-químicos, se demuestra que la temperatura es el único factor de los considerados en este estudio que afecta la abundancia y crecimiento de Cambarellus (C) montezumae en el Lago de Xochimilco. Una de las principales preguntas en ecología es ¿qué determina la distribución y abundancia de los organismos? La abundancia de individuos de una población es producto de factores físicos del ambiente, de factores históricos y de la relación entre sus individuos y con otras especies. En este sentido se han realizado pocos estudios destinados a conocer la interacción entre los factores limitantes del habitat (que son aquellos que regulan el crecimiento y la expansión de las poblaciones), como la temperatura (analizada a traves de la estacionalidad) y los principales parametros demográficos del acocil Cambarellus (C.) montezumae en condiciones naturales. Entre estos estudios se encuentran los elaborados por Rangel (2007 y 2009), que se llevaron acabo en la pista de Remo y Canotaje “Virgilio Uribe”, la cual presenta una mejor calidad del agua en comparación a los canales del Bordo y Cuemanco en donde se han realizado estudios similares (Villa y García-Padilla, 99 2010), el común denominador en estos trabajos ha sido la relación que existe entre la estacionalidad del habitat y la dinamica poblacional del acocil Cambarellus (C.) montezumae. En dichos trabajos se ha encontrado una relación significativa entre las caracteristicas intrínsecas del medio (principalmente la temperatura) y la abundancia de los individuos en la población, encontrando que en los meses más calidos del año se encuentra una mayor abundancia del acocil Cambarellus (C.) montezumae, lo cual concuerda con lo encontrado en este trabajo, en donde los meses con mayor abundancia de individuos fueron abril, mayo y junio. En los meses más fríos que fueron enero y febrero encontramos una reducción considerable de la abundancia de individuos en la población. Aunque la temperaura fue el único parámetro físico-químico que presentó una relación directa con la abundancia del acocil Cambarellus (C.) montezumae, no podemos afirmar que sea el único factor responsable de la abundancia de este organismo, ya que existen otros factores que pueden estar incidiendo sobre el tamaño de la población, estos factores pueden ser tanto abióticos como bióticos. Los factores abióticos son todos aquellos relacionados con el ambiente físico del Lago de Xochimilco y los factores bióticos (que de igual manera puede afectar la distribución y abundancia de la población), son los relacionados con otros organismos, es decir, las relaciones que puede presentar el acocil Cambarellus (C.) montezumae con los integrantes de la misma población (ej. canibalismo) y con las especies presentes en el habitat (ej. depredación). Otro aspecto significativo dentro de la dinámica de una población es la composición por edad y sexo de los individuos que la conforman, como generalmente se denomina, la estructura poblacional. Conocer la estructura poblacional es esencial en la investigación ecológica para la formulación de 100 propuestas de conservación y/o manejo sustentable de una población. El principal motivo para analizar la distribución por edad y sexo de la población del acocil Cambarellus (C.) montezumae en el Lago de Xochimilco, fue poder realizar una inferencia de cuál era el estado actual del recurso. La población de Cambarellus (C.) montezumae en el Lago de Xochimilco se encuentra conformada por cuatro edades ecológicas: crías, juveniles, subadultos y adultos, la proporción de individuos en cada una de estas edades no tuvo variaciones significativas en relación a la época del año, observando que el 61% de la población se encuentra en la edad de cría, el 19% en edad juvenil y el 16% en edad de subadulto, estas edades corresponden a una etapa prereproductiva en donde aún no existen encuentros sexuales exitosos. La etapa reproductiva se encuentra conformada por la edad de adulto en donde sólo se encuentra el 4% de la población. El examen de la estructura poblacional de este acocil, revela bastante información acerca de la historia de la población y de sus perspectivas futuras. La composición de la población va a depender de tres componentes principalmente: mortalidad, fecundidad y migraciones, aunque el tercer componente no va a tener influencia sobre esta población, ya que se encuentra aislada, no existe un flujo de acociles entre una población y otra. Una población con una elevada proporción de crías y juveniles como es este caso, se denomina población joven, que generalmente es el resultado de una elevada fecundidad y mortalidad alta. Algunas poblaciones, con el paso del tiempo presentan cambios en la fecundidad, es decir, que la fecundidad se reduce, con lo cual la composición de la población inicia un proceso de maduración, esto es, hay un aumento en la proporción de subadultos y adultos y una disminución de las proporciones de 101 crías y juveniles, este proceso continúa con el envejecimiento de la población (Begon, et al., 2006). La composición de una población aporta información valiosa sobre características demográficas futuras, en el caso de la población de Cambarellus (C.) montezumae en el Lago de Xochimilco, considerada una población joven (por su elevada proporción de crías y juveniles), implica una capacidad latente para un crecimiento rápido, siempre y cuando existan las condiciones adecuadas para que esto suceda. Aunque la población de Cambarellus (C.) montezumae presente características favorables para presentar un rápido crecimiento de su población, esto no está ocurriendo, debido muy probablemente a la influencia de la calidad del agua del Lago de Xochimilco, ya que este lago era alimentado por 4 manantiales de gran importancia y su calidad del agua era excelente. La sobreexplotación del agua agotó el caudal de los manantiales, provocó hundimientos en los terrenos y con ello la contaminación en las aguas del lago (INEGI, 2000); el nivel de agua de los diversos canales ha bajado en forma alarmante desde noviembre de 1975 hasta la fecha (esta disminución del volumen del agua ha provocado que en el Canal del Bordo donde en el 2011 aún se podían encontrar acociles hoy en día ya no se encuentren); por ello, al final de la década de los ochenta el gobierno del Distrito Federal puso en marcha el “Plan de Rescate Ecológico de Xochimilco”, en el cual tenía como fin la recuperación en todos sentidos (flora, fauna, etc.) de la zona lacustre. Por otro lado, en la zona chinampera se han detectado 19 asentamientos irregulares, que representan aproximadamente a 2,600 familias; esto implica que todos los desechos que generan son vertidos al lago. Paralelamente en el área turística se reciben a casi 30,000 visitantes cada fin de semana, en dicha 102 área se carece de una infraestructura sanitaria adecuada, por lo cual todo esto provoca una grave contaminación por materia orgánica, dando como resultado la eutrofización y contaminación del lago y con esto la disminución o desaparición de fauna lacustre como es el caso de este acocil (Balanzario, 1982; Arcos, et al., 1995). Estas alteraciones en el hábitat han provocado una desviación de la proporción sexual de este organismo, ya que en condiciones idóneas la proporción entre hembras y machos en poblaciones naturales, debería ser cercano a 1:1 con igual número de descendientes de uno y otro sexo (aunque las diferencias en la mortalidad entre machos y hembras modifica esta proporción con el paso del tiempo (Dajoz, 2002)). Sin embargo, en el caso del acocil Cambarellus (C.) montezumae encontramos una proporción sexual de 2:1 (dos hembras por cada macho), esta deviación en el valor esperado, puede deberse a algún tipo de disruptor endocrino o alterador hormonal (Sustancias químicas que suplantan a las hormonas naturales, trastornando los procesos normales de reproducción y desarrollo), que puede estar presente en el hábitat de estos organismos, provocando diferentes efectos adversos sobre la población, entre estos efectos podemos considerar la desviación de la proporción sexual en la población y/o cambios en su comportamiento, estos disruptores pueden ser plaguicidas organoclorados, policlorobifenilos, agentes tensoactivos, ésteres de ácido ftálico y/o monómeros plásticos, todos ellos provenientes de la actividad antropogénica dentro del Lago de Xochimilco. La proporción sexual influye decisivamente en la presión de la selección sexual en el sentido de que establece la intensidad de la competencia por la cópula dependiendo de la cantidad de parejas sexuales disponibles (Andersson, 1994). 103 En este trabajo se llevó a cabo el estudio de la ecologia reproductiva del acocil Cambarellus (C.) montezumae, entendida desde el punto de vista de la importancia maternal (epoca reproductiva, fecundidad, éxito reproductivo, calidad de los huevos y juveniles) en los procesos de reclutamiento de la población en el Lago de Xochimilco. Como ya hemos hecho notar, las poblaciones naturales en general y en particular la del acocil Cambarellus (C.) montezumae, viven inmersas en un medio que experimenta cambios de luz, temperatura, pH, oxígeno disuelto, calidad y cantidad de alimento disponible, entre otros factores, en donde la supervivencia, reproducción y crecimiento van a depender en gran medida, de la percepción de estos estímulos o factores ambientales por los individuos de la población. Uno de los principales factores ambientales que influyen en dichos procesos es la temperatura, ya que no solo ejerce un efecto directo en la abundancia de individuos en la población, sino que tambien ejerce un efecto significativo sobre los patrones reproductivos. Para que la reproducción tenga éxito es preciso que se produzca una sincronización de los reproductores entre sí y de éstos con las variaciones de los factores ambientales. Esta sincronización permitirá que existan individuos maduros en el momento más idóneo para garantizar una mayor supervivencia de la progenie (Begon, et al., 2006). Esta sincronización de los individuos con los factores ambientales resulta de gran importancia en el ciclo reproductivo de Cambarellus (C.) montezumae, ya que habita en un medio que experimenta variaciones estacionales y con estas se presentan cambios en la cantidad y calidad de alimento disponible y en la cobertura vegetal (la cual sirve de refugio para esta especie), dos de los 104 elementos más importantes para la subrevivencia de este organismo (Garcia- Padilla, 2010). Así, cada acocil debe disponer de un sistema que reciba la información procedente tanto del exterior como del interior del organismo, que las integre y determine el establecimiento de un estado endocrino idóneo, que regule a su vez, todos los eventos fisiológicos que conducirán a lareproducción. Este sistema (conformado por una serie de hormonas, el órgano X-Glándula del seno y el órgano Y), va a encargarse de la traducción de los estimulos ambientales a impulsos bioelectricos y hormonales y finalmente de la adaptación fisiológica de la especie, que suele ser cíclica y en sincronía con el medio externo (Castelló, 1993). Aunque se ha considerado que el acocil Cambarellus (C.) montezumae tiene una reproducción contínua durante todo el año, en este trabajo se ha observado que aun cuando encontramos desoves consecutivos (ecepto en los meses de noviembre y diciembre), existe una estación bien definida para la reproducción, y ésta comprende los meses correspondientes a la época cálida del año (principalmente abril, mayo y junio), ya que en esta época se obtuvo el 83 % del total de los desoves, con lo cual se concluye que esta especie en el Lago de Xochimilco, presenta una reproducción cíclica y en sincronía con la epoca cálida del año (donde las condiciones medio ambientales son las más favorables), lo cual nos podría indicar que el acocil Cambarellus (C.) montezumae presenta una estrategia reproductiva bien definida. Una estrategia reproductiva es el conjunto de características que una especie ha desarrollado para tener éxito en la reproducción (Vazzoler, 1996). Las combinaciones con el hábitat, la fisiología y el comportamiento reproductivo que lleva a cabo el acocil Cambarellus (C.) montezumae, va a determinar directamente el éxito reproductivo de la especie en el Lago de Xochimilco. 105 Asi mismo, el éxito reproductivo va a depender de que las hembras puedan asegurar la sobrevivencia de una porción considerable de huevos y/o crías, esto por medio de una elección adecuada del lugar y tiempo del desove, ya que con adecuadas condiciones ambientales el desarrollo del los huevos y crías se llevará a cabo en un menor tiempo; y de esta manera, disminuirá el tiempo en que son más vulnerables a los cambios ambientales y/o a la depredación (Tresierra, 2002). Los primeros estadios vitales son extremadamente vulnerables tanto a las condiciones abióticas desfavorables como al ataque de los predadores. La carencia de movilidad de estos estados tempranos significa que ellos puedan aportar poco o nada ante esos peligros. Al igual que el momento de nacer es importarte, el lugar elegido por la hembra ovígera para liberar a las crías también lo será. De acuerdo a su comportamiento reproductivo el acocil Cambarellus (C.) montezumae pertenece a la sección etológica de crustáceos ovíparos con cuidado maternal, lo cual le da, en comparación a otras especies de crustáceos que no presentan este comportamiento, una menor fecundidad y una mayor probabilidad de supervivencia de la descendencia. La fecundidad de Cambarellus (C.) montezumae se encuentra entre un rango de 45 a 50 huevos, dicha fecundidad no se vio influenciada por la época del año donde fue encontrada la hembra ovígera. La fecundidad más bien se relacionó a otros factores como el tamaño y/o peso de la hembra (Civera y Cruz, 1982). Hembras de menor tamaño portaron un número menor de huevos que las hembras de mayor tamaño, lo cual puede estar relacionado directamente con el área abdominal disponible de la hembra para portar los huevecillos, y su capacidad para llevar a cabo la aireación de los mismos durante el periodo de incubación-eclosión (Steven, et al., 1995). 106 Para este estudio encontramos a la hembra ovada más pequeña en época cálida del año con una longitud total de 28.31 mm. Morones (1991), reporta una longitud mínima de reproducción para las hembras de 27.01 mm y una fecundidad de 47 huevos por hembra, lo cual es muy cercano a lo encontrado en este trabajo, ambos estudios realizados en el lago de Xochimilco. Civera y Cruz (1982), reportan fecundidades promedio de 110 huevos para hembras ovigeras de 30.01 a 40.01 mm de longitud total y para hembras de 41.01 a 49.01mm de longitud total una fecundidad promedio de 161 huevos; estos autores realizaron su estudio en la Presa “Barranca del Muerto”, en el estado de Tlaxcala, donde la calidad del agua es mejor que en el Lago de Xochimilco, y los parámetros físico-químicos (temperatura, pH, oxígeno disuelto) son muy similares. Álvarez y Rangel (2007), realizaron un estudio en la pista de Remo y Canotaje “Virgilio Uribe” durante el año 2001, donde reportan actividad reproductiva en los meses de enero, febrero, marzo, octubre y noviembre, estos meses se ubican en la época fría del año, lo que contrasta con lo encontrado en este estudio donde la mayor actividad reproductiva se dio durante los meses correspondientes a época cálida. Encontraron tallas mínimas de reproducción a los 24.01 mm de longitud total y una fecundidad promedio de 50 huevos, tanto la talla mínima de reproducción como la fecundidad promedio son muy parecidas a lo encontrado en este estudio. Existe una homogeneidad en la talla de la primera reproducción en todos los estudios [24.01 a 30.01 mm de longitud total para hembras (Holdich, 2002)]. Esta característica se encuentra relacionada con otros parámetros poblacionales como la tasa reproductiva neta (Ro) y la tasa instantánea de 107 crecimiento (r) que explican el crecimiento poblacional (Begon, et al., 1996). La talla de primera reproducción depende, además, de la condición medio ambiental prevaleciente en ese momento de la historia de vida del organismo y determina los procesos fisiológicos a seguir y, en última instancia, le permite responder adaptativamente, a los cambios ambientales mediante cambios fisiológicos y de comportamiento como repuesta a esa condición medio ambiental. Entre los parámetros ambientales de mayor influencia sobre la talla de primera reproducción y la tasa de crecimiento en crustáceos se encuentra la temperatura, junto con todos los cambios que conlleva en la dinámica del ecosistema (Feist, et al., 2004), lo cual además afecta la temporada en que se lleva a cabo la gametogénesis y establece la estacionalidad del ciclo reproductor (Pankhurst, 1998). Durante la gametogénesis se llevará a cabo la formación y de desarrollo de las células generativas especializadas o gametos (células sexuales: ovocitos y espermatozoides), permitiendo la preparación de las células sexuales para la fecundación. Los ovocitos del acocil Cambarellus (C.) montezumae son ricos en reservas nutritivas, las cuales aparecen acumuladas de muy diferentes maneras y es la mayor o menor abundancia de vitelo y su particular distribución en los óvulos lo que va a determinar en primer término, la orientación de los planos de segmentación y las características de los blastodermos, y posteriormente, el mecanismo de la gastrulación y de una manera precisa el grado de desarrollo a que pueden llagar los nuevos individuos antes de eclosionar (Cantú, 1959). Las hembras de Cambarellus (C.) montezumae son ovíparas; los huevos por la cantidad y distribución del vitelo pertenecen al tipo denominado centrolecito, 108 cada huevo presenta tres envolturas: la membrana de adhesión a las patas, el corion y la membrana vitelina. El vitelo aparece formado por dos componentes fundamentales: una sustancia homogénea y las gotas de materiales lipídicos. Su segmentación es superficial y su gastrulación se produce por movimientos de involución y convergencia (Cantú, 1959). La cantidad y calidad de las reservas nutritivas de los huevos de este acocil van a estar determinadas por varios parámetros que frecuentemente cambian a lo largo de la estación reproductiva. Entre estos factores podemos mencionar el estado endócrino de la hembra durante la ovogénesis, la cantidad y calidad del alimento ingerido, parámetros físico-químicos del hábitat, estrés de los reproductores, etc., (Campbell, et al., 1992; Bromage, et al., 1994; Brooks, et al., 1997). Debido a que se han encontrado evidencias de que la composición del huevo cambia con respecto a la estación reproductiva de algunas especies, se decidió analizar las características intrínsecas de los huevos, encontrando que el tamaño de los huevos de época cálida fue mayor que el de los huevos de época fría. Huevos de mayor tamaño dan lugar a larvas más grandes, con una mayor eficiencia (tanto para desarrollarse como para alimentarse) y en consecuencia, presentan una mayor sobrevivencia durante las fases tempranas de desarrollo (Mylonas, et al., 2004). Es de esperarse que el aumento en el volumen del huevo esté determinado por una presencia mayor de sustancias de reserva, para este estudio se encontró un mayor porcentaje de proteína y lípidos en los huevos de época cálida reafirmando con esto, la importancia de la estacionalidad en el ciclo reproductivo de Cambarellus (C.) montezumae. 109 Este acocil presenta un periodo de desarrollo embrionario corto en comparación a otras especies de crustáceos y depende de la temperatura; este factor afecta las tasas metabólicas y en consecuencia la velocidad de desarrollo por lo cual el periodo de desarrollo fue menor en época cálida que en época fría. Kamler, et al., (1998) mencionan que la temperatura modifica la eficiencia con la cual el vitelo es utilizado por el embrión y que existe un patrón en el uso de la energía relacionado con el incremento térmico presente en la época reproductiva. Este efecto térmico también ha sido correlacionado con la eficiencia de obtención de energía derivada del alimento en crías y juveniles (Hoffman y Fisher, 2003) y que de manera general y en cualquier etapa de la vida de los organismos, afecta la velocidad a la que ocurren sus reacciones bioquímicas, por lo que la temperatura modifica el metabolismo de rutina y en consecuencia del activo (Diana, 1995; Kamler, 1992). Se ha demostrado que entre los factores ambientales la temperatura ejerce efectos sobre el crecimiento y el desarrollo de la ontogenia de las especies (Mommsen, 1998; Ojanguren y Braña, 2003; Robinson & Wardrop, 2002). En síntesis, el efecto de la temperatura en la población del acocil Cambarellus (C.) montezumae en el Lago de Xochimilco, denota no solo efectos sobre la abundancia de organismos, sino también en la época de reproducción, en la calidad del huevo y en el tiempo de desarrollo embrionario. Lo que pone de manifiesto que este acocil posee una estrategia reproductiva bien definida. Entender la estrategia reproductiva de una especie nos permitirá la formulación de propuestas de conservación y/o de manejo sustentable. 110 6.7 CONCLUSIONES. Las conclusiones que se obtuvieron en este capítulo sobre la ecología reproductiva del acocil Cambarellus (C.) montezumae en el lago de Xochimilco son: . El acocil Cambarellus (C.) montezumae es una especie que se adapta a diferentes condiciones ambientales, en los canales de Xochimilco los parámetros fisicoquímicos (temperatura, oxígeno y pH), se encuentran entre los valores de tolerancia para la especie, sin embargo, esta especie se encuentra sometida a un estrés constante debido a múltiples factores como la contaminación crónica del cuerpo de agua, la depredación y la actividad humana. . La composición de la población del acocil Cambarellus (C.) montezumae en el Lago de Xochimilco es de tipo joven, ya que presenta una elevada proporción de crías y juveniles que confiere a la población una capacidad latente para su rápido crecimiento, siempre y cuando existan las condiciones ambientales adecuadas. . La ecología reproductiva de este acocil nos muestra una marcada estrategia donde existe una época reproductiva bien definida, la cual se lleva a cabo en la época cálida del año (abril, mayo y junio) donde la idoneidad de las hembras es mayor para la reproducción, reflejándose en el índice de desove de esta especie y en el número de huevos producidos por época. 111 . La fecundidad a través de la época cálida y fría del año se mantiene constante, viéndose afectada sólo por características intrínsecas de las hembras, como el tamaño corporal y la amplitud del abdomen y no por las condiciones ambientales. . Los huevos encontrados en época cálida del año presentan características más favorables para su rápido desarrollo y sobrevivencia de las crías, ya que presentan mayor tamaño, mayor volumen, mayor contenido de lípidos y proteínas. . Las condiciones ambientales y la calidad del huevo se ven reflejadas en el tiempo de incubación y en el tamaño de la cría al eclosionar, ya que en época cálida el tiempo de incubación es menor y las crías de mayor tamaño en comparación a época fría, en donde existe un retardo en el periodo de incubación y las crías eclosionan de menor tamaño. . El incremento en la tasa metabólica de las hembras ovígeras pone de manifiesto el cuidado maternal que ejercen sobre la masa ovígera, ya que este comportamiento (movimiento de los pleópodos) aumenta la adecuación biológica de la progenie, lo que implica un beneficio para las crías pero tiene un costo para las hembras reflejado en el aumento del consumo de oxígeno. 112 CAPÍTULO 2. EFECTO DE UNA DIETA FORMULADA SOBRE EL CRECIMIENTO, SOBREVIVENCIA Y CALIDAD DE LA PUESTA EN CRÍAS DE ACOCIL Cambarellus (Cambarellus) montezumae (SAUSSURE, 1857), EN CONDICIONES CONTROLADAS. 7.1 INTRODUCCIÓN. La acuicultura en México se constituye como una alternativa económica muy atractiva a mediano y largo plazo; sin embargo, en estos momentos el país requiere de fuentes de trabajo productivas para su población, además de alimentos de buena calidad, los cuales puedan ser alcanzados por la mayoría de la sociedad sin que esto ocasione alteraciones en su economía familiar, por lo que los cultivos acuícolas se deben considerar como una fuente complementaria a la agricultura en la producción de alimentos. En México la búsqueda y el desarrollo de tecnologías acuícolas útiles para diversas especies tanto nativas como introducidas han sido poco estudiadas. Para llevar a cabo una acuicultura productiva exitosa es necesario conocer las especies nativas del país, y a partir de ellas, tratar de incorporar tecnologías útiles para su explotación sustentable. Uno de los aspectos más importantes que se debe de considerar, es el conocimiento de la biología de la especie que se pretende explotar, con el fin, de obtener perspectivas reales de producción; además, conociendo sus requerimientos y potencial estas especies se pueden llevar a otras zonas ambientales similares y a partir de organismos domesticados se pueden crear nuevas zonas de cultivo económicamente activas. Por estos motivos se considera pertinente realizar estudios a nivel experimental y de planta piloto, para posteriormente desarrollar los proyectos más convenientes, para cada una de las especies deseadas (Moss, et al., 1979). Existe gran variedad de especies en las que se ha comprobado su productividad a nivel experimental y que podrían tener buenos resultados en su producción, 113 este es el caso del acocil Cambarellus (C.) montezumae, el cual es una especie endémica de la meseta central de nuestro país. Los cangrejos de río o acociles, son especies que pueden considerarse como candidatas idóneas para producciones en masa a bajo costo, además de que son conocidas por una parte de la población mexicana (desde la época prehispánica) y, si se considera que precisamente parte de esta población requiere de mayor cantidad de alimentos, la producción acuícola de este acocil se vuelve una buena alternativa con un mercado asegurado. Debido a lo anterior, se vuelve de vital importancia la creación de un paquete tecnológico que garantice el éxito del cultivo de esta especie. Uno de los factores críticos en la explotación comercial de esta especie y de muchas otras es el abastecimiento de crías para crecimiento, ya que las poblaciones de acociles tanto naturales como cultivadas dependen de la producción de huevos de buena calidad; pues las puestas de baja calidad constituyen uno de los mayores impedimentos para la expansión de la acuicultura de cualquier especie. En la industria de la acuicultura las puestas de buena calidad han sido definidas como aquellas en las que los huevos tienen baja mortalidad en la fecundación, formación del embrión y la eclosión (Bromage, et al., 1992). Otros indicadores de la calidad de la puesta que se han utilizado son el tamaño y la composición bioquímica del huevo. Aunque es conocido que huevos grandes producen también crías grandes, no existen evidencias de que el diámetro del huevo sea un aspecto determinante de su calidad (Kjorsvik, et al., 1990). En cuanto a la composición bioquímica del huevo, en principio podría esperarse que ese fuera el componente más determinante de la calidad. Sin embargo, los resultados obtenidos en varias especies tantos marinas como dulceacuícolas no han mostrado una clara relación entre la composición 114 bioquímica del huevo y la posterior supervivencia de huevos y larvas (Craik & Harvey, 1984; Kjorsvik, et al., 1990). En la mayoría de los trabajos de investigación sobre la calidad de la puesta, las tasas de fecundación y de eclosión han sido utilizadas como criterios importantes (Kjorsvik, et al., 2003). La supervivencia, hasta un determinado estadio de desarrollo, y la producción final de larvas también se han utilizado como medidas de la calidad (Fernández-Palacios, et al., 1995). Existen numerosos factores que pueden afectar la calidad de la puesta, al igual que el crecimiento gonadal y la fecundidad son muy susceptibles a las influencias medioambientales, es claro que la calidad de los huevos producidos podría también verse afectada limitando la producción de crías y su sobrevivencia (Kjorsvik, et al., 1990). Factores tanto bióticos como abióticos han sido señalados como posibles determinantes de la calidad del huevo o de su supervivencia tanto en el medio natural como en cautiverio. La calidad del huevo estaría determinada por varios parámetros físicos, genéticos y químicos, así como por los procesos fisiológicos que suceden durante el desarrollo inicial del huevo. Los factores que afectan la calidad del huevo están determinados por sus propiedades intrínsecas y el entorno en el que son fecundados y posteriormente incubados. Algunos de los factores que afectan a la calidad del huevo son conocidos, pero muchos otros (probablemente más) son desconocidos. Factores que afectan la calidad del huevo incluyen el estado endocrino de la hembra durante el crecimiento del oocito en el ovario. Existe la creencia extendida de que los nutrientes aislados por el oocito y su procesamiento durante el crecimiento y maduración, son los factores más importantes que 115 afectan la calidad del huevo (Craik & Harvey, 1984; Kjorsvik, et al., 1990; Bromage, et al., 1992). La fisiología del reproductor y su estado hormonal, que a su vez afecta la incorporación de compuestos en los huevos, probablemente influyen en su calidad, por ejemplo, el estrés en los reproductores tiene efectos perjudiciales en la calidad de las puestas (Campbell, et al., 1994). La dieta de los reproductores ha recibido gran atención con respecto a su efecto en la calidad del huevo, y existen estudios que indican que las influencias mayores sobre la calidad la ejercen sólo unos pocos de los componentes dietéticos (Washburn, et al., 1990; Watanabe, et al., 1991a,b; Harel, et al., 1994). En acuicultura el manejo de los reproductores es probablemente el factor que más influye en la calidad de la puesta; entre los numerosos factores que han sido sugeridos como posibles determinantes de la calidad de la puesta, sólo unos pocos han mostrado una clara evidencia en la calidad de la progenie (Carrillo, et al., 2000) y pueden resumirse en los siguientes: Factores que afectan a los reproductores Genotipo Alimentación Inducción a la puesta Estrés Edad Sobremaduración 116 Factores que afectan al huevo Propiedades físicas y fisiológicas Aberraciones cromosómicas Colonización bacteriana Propiedades físico-químicas del agua de la puesta e incubación El efecto de los componentes de la dieta para reproductores ha mostrado tener una relación directa con la calidad de la puesta, durante el periodo de maduración o prepuesta es el factor que más influye en la calidad de los huevos y la viabilidad de las crías, por lo cual en este capítulo, se evaluará el efecto de una dieta formula sobre indicadores de la calidad de la puesta en crías del acocil Cambarellus (C.) montezumae bajo condiciones controladas. Existen componentes dietéticos como lípidos polares y no polares (Watnabe, et al., 1991a, b; ácidos grasos (Harel, et al., 1994; Carrillo, et al., 1995; Bruce et al., 1999; Marrozzaet al., 2003), ácido ascórbico (Mangor-Jensen, et al., 1991; Dabroswki & Blom, 1994, 1995), vitamina A (Furuita, et al., 2003a), vitamina E (Emata, et al., 2000), carotenos (Agius, et al., 2001), carbohidratos (Washburn, et al., 1990; Mangor-Jensen & Brikeland, 1993), proteínas (Harel, et al., 2005; Gunasekera, et al., 1996 a, b) y nucleótidos (González-Vecino, et al., 2004), que han demostrado su efecto sobre la calidad de la puesta en reproductores de peces, en el caso de los crustáceos aun no existen estudios concluyentes. Lípidos y ácidos grasos son los componentes dietéticos que más influyen en la calidad de las puestas, especialmente en aquellas especies de puesta continúa como es el caso del acocil Cambarellus (C.) montezumae, que presentan cortos periodos de vitelogenesis y que son capaces de incorporar estos componentes dietéticos en los huevos incluso durante el periodo de puesta. 117 7.2 JUSTIFICACIÓN. Buscando fuentes alternativas de producción de alimentos se ha encontrado en el estudio del acocil Cambarellus (C.) montezumae una posibilidad de producción acuícola, por lo que el estudio de los mecanismos de reproducción son básicos y previos al funcionamiento de cualquier explotación acuícola, cuyo objetivo principal es maximizar la producción de los organismos útiles a través de la producción de una progenie numerosa, saludable y uniforme, mediante la manipulación de la alimentación de los reproductores, del control de los factores ambientales que los afectan y de la eliminación de los agentes causantes de mortalidad. 7.3 OBJETIVOS. 7.3.1 OBJETIVO GENERAL. . Evaluar el efecto de una dieta formulada sobre el crecimiento, sobrevivencia y calidad de la puesta de crías de acocil Cambarellus (C.) montezumae en condiciones controladas. 118 7.3.2 OBJETIVOS PARTICULARES. . Determinar la tasa de crecimiento y sobrevivencia de crías de acocil Cambarellus (C.) montezumae alimentadas bajo dos dietas (formulada y control). . Establecer la talla mínima de madurez, el índice de desove y la fecundidad de juveniles del acocil Cambarellus (C.) montezumae alimentados bajo dos dietas (formulada y control). . Evaluar la calidad de los reproductores del acocil Cambarellus (C.) montezumae alimentados bajo dos dietas (formulada y control) por un periodo de 150 días. . Determinar la calidad del huevo de hembras ovígeras del acocil Cambarellus (C.) montezumae alimentadas bajo dos dietas (formulada y control). . Evaluar el tiempo de incubación, tamaño de las crías y su supervivencia, de las hembras ovígeras del acocil Cambarellus (C.) montezumae alimentadas bajo dos dietas (formulada y control). 119 7.4 MATERIAL Y MÉTODO. 7.4.1 TRABAJO DE CAMPO 7.4.1.1 Caracterización del hábitat y colecta de los organismos. Se realizaron visitas mensuales al canal de Cuemanco en la zona lacustre de Xochimilco en los meses de abril y mayo de 2011, con el fin colectar hembras ovígeras de la especie Cambarellus (C.) montezumae. El canal de Cuemanco se encuentra localizado dentro de la Área Natural Protegida (ANP) de la delegación Xochimilco, al sur de la ciudad de México (Ver Cap. 1). Los meses de colecta de las hembras ovígeras son considerados meses de época cálida en donde la temperatura media es de 23.3 ± 1.3 °C, el pH se encuentra en promedio alrededor de 8.5 ± 0.5, y la concentración de oxígeno promedio varía según el estrato (superficie o fondo) de 9.5 a 4.1 mg/L. La colecta de las hembras ovigeras se llevó a cabo por medio de una red de cuchara de 1 mm de luz de malla de forma triangular. La captura de dichas hembras se llevó a cabo entre las 10:00 y las 12:00 horas. Posteriormente fueron colocadas en botes con agua del medio de una capacidad 2 L para su traslado al área de acuarios del Laboratorio de Acuacultura y Producción Acuática de la Facultad de Ciencias, UNAM. Una vez en el área de acuario se llevó a cabo el monitoreo de las hembras ovígeras colectadas en campo hasta la eclosión de las crías. Después de 10 días de eclosionadas las crías fueron retiradas de la hembra y colocadas en un 120 reservorio de 120 L a temperatura ambiente, con aireación constante, tubos de PVC de 5 cm de largo (que actuaron como refugio) y alimentación ad libitum (Camaronina, Purina, 40 % de proteína) hasta alcanzar los 30 días de edad. 7.4.2 TRABAJO DE LABORATORIO. 7.4.2.1 Elaboración de las dietas. Los ingredientes usados para la formulación de la dieta experimental como el calamar, el aceite de hígado de pescado y la Camaronina comercial fueron productos de uso comercial en la Ciudad de México. Los ingredientes utilizados para cada una de las dietas se trituraron en un molino de martillo, con el fin de que los ingredientes tuvieran un tamaño de partícula adecuado para la alimentación de la especie en sus primeros estadios de vida. El calamar se secó en una estufa a 60 °C por un periodo 48 horas con el fin de aumentar su digestibilidad; una vez seco y convertido en harina se procedió a agregar el aceite de pescado y la Camaronina triturada previamente, una vez que se formó una pasta homogénea se procedió a secar la pasta en una estufa a 60 °C por un lapso de 24 horas. Esta mezcla de 47% harina de calamar, 47% Camaronina y 6% de aceite de hígado de pescado fue lo que conformó la Dieta Formulada = Acocilina. La Dieta Control = Camaronina, consistió en 100 % de Camaronina (Purina, 40% de proteína), triturada a un tamaño de partícula similar a la dieta formulada. 121 7.4.2.2 Análisis químico proximal de las dietas. El análisis químico proximal de las dietas (formulada y control) se llevó a cabo en el Laboratorio de Análisis Químicos para Alimentos, del Departamento de Nutrición Animal y Bioquímica de la Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia, de la Universidad Nacional Autónoma de México, de acuerdo a los métodos Oficiales de Análisis de la Asociación de Química Analítica (AOAC, 1990). Los resultados se muestran en el Cuatro 15 y se expresan en porcentaje con respecto a la materia seca. Cuadro 15. Análisis químico proximal de las dietas. Dieta Formulada Dieta Control Materia seca 98.1 94.7 Humedad 1.8 5.2 Proteína cruda 46.4 26.2 Extracto etéreo 31.5 12.2 Minerales totales 6.9 10.4 Fibra cruda 2.0 1.7 Extracto libre de nitrógeno 11.2 43.6 Contenido de energía (cal/g PS) 5591.0 4,265 *Los resultados se expresan en base húmeda La evaluación de la dieta formulada (Acocilina) se llevó a cabo en tres fases: La primera fase consistió en la evaluación del crecimiento y la supervivencia de crías de acocil Cambarellus (C.) montezumae; la segunda consistió en la evaluación de los indicadores de desempeño reproductivo; y la tercera en la 122 evaluación de la calidad de la puesta. Estas evaluaciones se llevaron a cabo en las instalaciones del acuario del Laboratorio de Acuacultura y Producción Acuática de la Facultad de Ciencias, UNAM. 7.4.2.3 FASE I. Evaluación del crecimiento y la sobrevivencia. 7.4.2.3.1 Diseño experimental. Esta fase fue evaluada por un periodo de 60 días, el bioensayo se realizó en peceras de 10 L de capacidad en las que se colocaron 15 peceras por tratamiento, cada una tuvo una densidad de 10 organismos asignados completamente al azar. Las crías tuvieron un peso promedio inicial de 25 ± 5 mg, no se encontraron diferencias significativas entre el peso inicial de las crías para cada tratamiento (p>0.05). Los organismos fueron alimentados ad libitum con las dietas de Acocilina y Camaronina, las peceras se mantuvieron a una temperatura promedio de 23 ± 1 °C (Fig. 25). Se colocó tubería de PVC de 5 cm de longitud y 3 cm de diámetro para que actuara como refugio, las peceras tuvieron aireación contante y un calentador de 5W para mantener la temperatura en un rango de 23 ± 1 °C, esta temperatura fue seleccionada en base a los estudios previos de Santiago (2001) y Aguilar (2011), los cuales señalan una temperatura óptima para el crecimiento y la sobrevivencia de estos organismos entre 20 y 25 °C. 123 Figura 25. Diseño experimental para evaluar el crecimiento y sobrevivencia de crías del acocil Cambarellus (C.) montezumae. Se llevó a cabo el monitoreo de la calidad del agua de los acuarios utilizados en cada fase experimental. Los parámetros físico-químicos monitoreados fueron: la temperatura (± 0.05 °C) y el oxígeno disuelto (± 0.05 mg O2/L) con un oxímetro (YSI modelo 51B) y el pH con un potenciómetro (HI 98129), con una frecuencia de dos veces por semana en tres acuarios tomados al azar por cada tratamiento. Se realizaron recambios de agua del 30% semanalmente. 7.4.2.3.2 Crecimiento y Sobrevivencia. Para evaluar el crecimiento de un organismo se pueden realizar mediciones para determinar los cambios en términos de longitud o peso. Dado que el crecimiento ha sido registrado usualmente en términos del incremento en peso (Jobling, 1994; Goddard, 1996), con el fin de evaluarlo se realizaron biometrías cada 15 días de los organismos de cada tratamiento, registrando los índices 124 morfométricos de longitud total (LT: desde la punta del rostro hasta la parte final del telson), longitud del cefalotórax (LCT: desde la punta del rostro hasta la parte final del cefalotórax en su región dorsal media) con un vernier (± 0.01 mm) Caliper, y el peso húmedo (Ph) con una balanza (± 0.01 gr) Ohaus, Scout Pro; la determinación del sexo se llevó a cabo de manera visual (Fig. 26). Figura 26. Características biométricas del acocil Cambarellus (C.) montezumae. El análisis del crecimiento se realizó por medio de un ANOVA, para un diseño factorial competo: Tratamiento (Dieta formula y control) X Tiempo (2 X 4), con el paquete estadístico SPSS ver. 21 con el fin de determinar la influencia del tipo de alimentación en los índices morfométricas considerados. La sobrevivencia final fue calculada como el porcentaje (%) del número de organismos vivos al término de los 60 días del experimento. 125 7.4.2.3.3 Tasa Instantánea de Crecimiento y Producción. La Tasa Instantánea de Crecimiento (TIC) se calculó cada 15 días con los datos obtenidos de peso húmedo (Ph) de cada una de las biometrías. De acuerdo con Chapman (1971) que menciona que la Tasa Instantánea de Crecimiento (G) es una medida de crecimiento exponencial; esta describe el crecimiento en un instante particular del tiempo, y se estima con la siguiente ecuación: G = [Ln (W2) – Ln (W1)] / t *100 Donde: Ln (W2) = Logaritmo natural del peso en el momento t. Ln (W1) = Logaritmo natural del peso inicial. Es común que los datos de G se multipliquen por 100, y el resultado se exprese como la tasa de crecimiento especifica (TEC) en % / día. A su vez, se estimó el valor de producción usando los datos obtenidos de cada una de las biometrías realizadas a los organismos mantenidos bajo la dieta experimental y la dieta control. De acuerdo a la ecuación modificada por Chapman (1971): P = G * B Donde: P = Producción (g) 126 G = Tasa Instantánea de Crecimiento (g/día/%) B = Biomasa promedio (g) La producción debe entenderse como la formación de tejido corporal total en un intervalo de tiempo, incluyendo el de los organismos que no sobreviven al final del intervalo considerado. La producción puede ser medida en términos de peso húmedo, peso seco, contenido de nitrógeno o contenido de energía. De estos, la energía es el índice más flexible, realista y universal sobre todo cuando la dinámica de un ecosistema entero está bajo estudio. Sin embargo, todas las investigaciones de producción están basadas en el peso (usualmente peso húmedo en g) en primera instancia, y el contenido de energía en segunda instancia (Chapman, 1971). Se calculó además la producción para los 60 días de fase experimental en relación a la densidad de organismos, la cual para ambas dietas fue de 154 crías/m2. 7.4.2.4 FASE II. Indicadores del desempeño reproductivo. 7.4.2.4.1 Diseño Experimental. La fase 2 fue evaluada por un periodo de 90 días adicionales a la fase experimental 1, dicho bioensayo consistió en seguir alimentando a los organismos de la primera fase hasta encontrar hembras ovígeras, en un diseño por bloques al azar con quince repeticiones: los factores de contraste fueron: tipo de alimento (Dieta Formulada = Acocilina VS Dieta Control = Camaronina) y el sexo (Hembras vs Machos). En esta fase experimental se 127 evaluaron indicadores del desempeño reproductivo e indicadores de la calidad del huevo. Los organismos continuaron siendo alimentados ad libitum con las dietas de Acocilina y Camaronina, las peceras se mantuvieron a temperatura promedio de 23 ± 1 °C. 7.4.2.4.2 Talla mínima de madurez. La talla mínima de madurez de las hembras del acocil Cambarellus (C.) montezumae se determinó según la evolución quincenal del número de desoves, se reconoce la talla mínima de madurez en la cual el número de desoves alcanza valores máximos dentro de un intervalo de tiempo, en este caso durante los 150 días que duró la fase experimental. 7.4.2.4.3 Índice de Desove. Así mismo, se calculó el índice de desove (ID) mediante la variación en el porcentaje de hembras ovígeras en relación con el total de hembras adultas al inicio del experimento. Para determinar se existía una diferencia significativa en el número de desoves entre ambas dieta, se llevó a cabo una chi2 de contingencia. 128 7.4.2.4.4 Fecundidad. La fecundidad (F) de Cambarellus (C.) montezumae en este estudio se determinó contando el número aproximado de huevos que una hembra incuba en el momento dado de la fase experimental, durante el periodo de 60 a los 150 días. 7.4.2.4.5 Calidad de los reproductores. . Índices morfométricos. Al concluir la fase experimental (150 días) se llevó a cabo una biometría final de 10 organismos por cada sexo de ambas dietas experimentales, de los que se tomaron los siguientes índices morfométricos: longitud total (LT) y longitud del cefalotórax (LCT), con un vernier (± 0.01 mm) Caliper; y el peso húmedo (Ph) con una balanza (± 0.01 gr) Ohaus, Scout Pro; la determinación del sexo se llevó a cabo de manera visual. Se sacrificó a los 40 organismos con shock hipotérmico a -20ºC por 3 horas, para su posterior análisis químico proximal. . Composición químico proximal del tejido. - Materia orgánica y Minerales totales. Se determinó el contenido de materia orgánica (MO) y minerales totales (MT) de una muestra de 3 individuos por sexo de cada una de las dietas, empleando 129 la técnica de incineración en un horno de alta temperatura (Thermolyne) a 550°C, durante un periodo de tres horas. - Lípidos y Proteínas. Para las determinaciones de lípidos y proteínas en los acociles se realizó un homogenizado de una muestra de 3 individuos por sexo de cada una de las dietas (Anexos - Procedimiento 1). Se llevó a cabo la determinación del porcentaje de lípidos mediante el análisis de submuestras por época del año. El contenido de lípidos se evaluó mediante el método de Fosfovainillina (2006); para determinar la concentración de lípidos en las submuestras se realizó una curva patrón con aceite de maíz, las muestras fueron leídas en un espectrofotómetro Beckman DU 640 a 490 nm. Para la determinación de proteína se utilizó el método de Nitrógeno Total de Silicato 10023, para ello se utilizó un equipo HACH DR/780 y un reactor DRB 200, los valores obtenidos se multiplicaron por un factor de 6.25 para determinar la cantidad de proteína total en los huevecillos, de acuerdo a lo referido en el método Número 976.06 de la AOAC Analysis Methods (1995). La comparación de los diversos índices en ambas épocas del año se realizó mediante una ANOVA unifactorial, la hipótesis nula se probó a un nivel de significancia de 0.05. 130 . Índices fisiológicos. - Tasa metabólica. Este índice fisiológico se evaluó a través del consumo de oxígeno (QO2) de rutina expresado como una tasa, mg O2g-1 PS día-1 en los organismos bajo condiciones de ayuno en periodo de intermuda. El consumo de oxígeno se midió en cámaras respirométricas de 120 ml de capacidad con un individuo por cámara. Se emplearon 18 cámaras para estas mediciones: 8 para la dieta formulada, 8 para la dieta comercial, y sus respectivas cámaras control. Todas fueron sumergidas en un contenedor de 50 litros con un termostato marca Sunny de 100 W, el cual actuó como baño maría y permitió conservar la temperatura a 23 ± 1 º C. La medición del oxígeno se efectuó con un oxímetro YSI 51B (± 0.05 mg O2/L). Se tomaron las lecturas iniciales de todas las cámaras previo a su cierre hermético, y después de un periodo de 3 horas se abrieron secuencialmente para registrar su concentración de oxígeno final. - Excreción nitrogenada. Las pérdidas por excreción de nitrógeno fueron evaluadas en las mismas muestras en las que se midió el oxígeno consumido empleando alícuotas de 25 ml de c/u de ellas, la determinación de nitrógeno amoniacal se realizó mediante el método de Azul de Indofenol (Rodier, 1981), donde la intensidad de este compuesto leído a 640 nm con un espectrofotómetro es directamente 131 proporcional a la concentración de amonio, la cual fue expresada como mg N- NH4g-1 PS h-1. Estos datos de absorbancia fueron transformados a valores de concentración por medio de una curva patrón con estándares de concentración conocido de NH4Cl, calculando la ecuación de regresión entre absorbancia (Abs) vs concentración del estándar, con un modelo lineal (Abs = B0 + B1 [estándar]). Tanto la tasa metabólica como la excreción de nitrógeno fueron estandarizadas por medio de calorimetría indirecta (R y U), utilizando un coeficiente oxicalórico (QOX) de 3.31 cal/mg O2 y un coeficiente de excreción (QEX) de 4.05 cal/mg N-NH4+ (Brafield & Solomon, 1972; Kay & Brafield, 1973). Con estos valores se estimó la fracción de energía corporal destinada a respiración y a excreción. - Relación atómica O:N Se calculó la relación atómica (O: N) para estimar las cantidades relativas de proteínas, lípidos y carbohidratos oxidados por los organismos (Mayzaud & Conover, 1988). 7.4.2.5 FASE 3. Indicadores de la calidad del huevo. Para determinar la calidad de las masas ovigeras para ambas dietas se llevó a cabo un análisis morfológico de los huevecillos (volumen del huevo y peso húmedo), un análisis químico proximal de su composición (composición de lípidos y proteínas) y un análisis de desarrollo embrionario (tiempo de 132 incubación, tamaño de las crías al eclosionar y % de sobrevivencia a los 15 días). 7.4.2.5.1 Volumen y peso húmedo del huevo. El volumen del huevo se calculó separando a 5 hembras ovígeras por dieta, de cada uno de los huevecillos se midió el diámetro mayor (a) y menor (b) con una rejilla milimétrica y una lupa, se descartaron los huevos que presentaron algún grado de deterioro debido al periodo de congelación. Los datos obtenidos se incorporaron en la fórmula Vh = 1/6 (a * b2 * π) propuesta por Corey & Reid (1991). De estos mismos huevecillos se tomaron submuestras para llevar a cabo el análisis químico proximal. El peso húmedo se determinó pesando cada huevecillo en una balanza digital (± 0.001 gr) Ohaus, Scout Pro, de cada una de las hembras congeladas que se utilizarían en el análisis químico proximal. 7.4.2.5.2 Composición químico proximal de la puesta. . Lípidos y Proteínas. Así mismo se llevó a cabo la determinación del porcentaje de lípidos y proteínas de tres submuestras para cada una de las dietas. El contenido de lípidos se evaluó mediante el método de Folch (1959); para determinar la concentración de lípidos en las submuestras se realizó una curva patrón con aceite de maíz, las muestras fueron leídas en un espectrofotómetro Beckman DU 640 a 490 nm. 133 Para la determinación de proteína se utilizó el método de Nitrógeno Total de Silicato 10023, para ello se utilizó un equipo HACH DR/780 y un reactor DRB 200, los valores obtenidos se multiplicaron por un factor de 6.25 para determinar la cantidad de proteína total en los huevecillos, de acuerdo a lo referido en el método Número 976.06 de la AOAC Analysis Methods (1995). 7.4.2.5.3 Desarrollo embrionario. . Tiempo de incubación. Se realizó un monitoreo diario de las características morfológicas de los huevecillos con el fin de determinar en qué estadio del desarrollo embrionario se encontraban, durante el proceso de incubación-eclosión se describen 4 estadíos de desarrollo en función de los cambios morfológicos ocurridos durante la embriogénesis (Cuadro 4 – Capitulo 1). . Tamaño de las crías. Una vez que las crías eran liberadas del abdomen de la madre y tenían completa autonomía, se procedió a retirar a la hembra del reservorio y a tomar sus características morfométricas. Aproximadamente a los 5 días posteriores a la eclosión de las crías se llevó a cabo el registro de su peso húmedo, mediante una balanza digital (± 0.001 gr) Ohaus, Scout Pro. 134 . Sobrevivencia de las crías a los 15 días. La sobrevivencia final fue calculada como el porcentaje (%) del número de organismos vivos al término de los 15 días de eclosionados. Se analizaron estadísticamente los resultados entre la dieta formulada y la dieta control, al igual que por sexo sobre las variables estimadas, mediante el uso de ANOVAS utilizando el paquete estadístico SPSS ver. 21. A su vez se realizó un análisis discriminante múltiple con las variables del análisis químico proximal de los reproductores, y posteriormente uno de modelo reducido con las variables de mayor importancia (lípidos y contenido de energía), con el paquete estadístico JMP ver. 8. 135 7.5 RESULTADOS. 7.5.1 Análisis de la calidad del agua. Durante los 150 días que comprendieron las tres fases experimentales se registraron los parámetros físico-químicos: temperatura (± 0.05 °C), potencial de hidrógeno (pH) con un potenciómetro HI 98129; y la concentración de oxígeno disuelto (± 0.05 O2 mg/L) con un oxímetro YSI modelo 51B, cada tercer día en tres acuarios tomados al azar para cada tratamiento. Se llevó a cabo un análisis de varianza para determinar si existían variaciones significativas de estos parámetros entre los tratamientos y a lo largo del tiempo. No se encontraron diferencias significativas (p>0.05) para ninguno de estos parámetros (Cuadro 16). Cuadro 16. Parámetros físico-químicos promedio registrados durante la fase experimental para cada tratamiento. Tratamiento Temperatura (°C) O2 disuelto (mg/L) pH Dieta Formulada 23.5 ± 0.1 5.9 ± 0.1 8.4 ± 0.1 Dieta Control 23.4 ± 0.2 6.0 ± 0.1 8.4 ± 0.1 *Media ± error estándar 136 7.5.2 FASE I. Crecimiento y Sobrevivencia. 7.5.2.1 Crecimeinto y Sobrevivencia. Durante la primera fase experimental se midieron los indices morfometricos: longitud total (LT), longitud cefalotoráxica (LCT) y peso húmedo (Ph) al inicio del experimento y cada 15 días durante un período de 60 días. Se llevó a cabo un análisis factorial completo para determinar si existían diferencias significativas entre tratamientos y durante el periodo experimental. Se encontraron diferencias significativas (p<0.05) tanto para el tratamiento como para la biometría (tiempo) y su interacción,de cada uno de los índices morfométricos medidos. El peso húmedo promedio (310 ± 22 mg), así como la longitud total (22.71 ± 5.98 mm) y la longitud cefalotorácica (10.17 ± 2.82 mm) de los organismos alimentados con la dieta control (Camaronina) después de los 60 días de experimentación fueron, mayores con respecto a los valores obtenidos con la dieta formulada (Acocilina). En cuanto a la sobrevivencia, se observó que el mayor poncentaje se obtuvo con la dieta formulada (Acocilina), con un 69 % al cabo de los 60 días, en comparación con la dieta control (Camaronina) donde se obtuvo una sobrevivencia al final del experimento del 55%. Se puede observar que la mayor mortalidad en la dieta formulada se dio durante los 45 y 60 días en comparación a la dieta control donde existen dos picos de alta mortalidad, el primero en los primeros 15 días del experimento y el segundo al igual que para la dieta formulada en el periodo de los 45 a 60 días (Cuadro 17 y Fig. 28). 137 1,"'aT'3\Y'3\a_o...... _o mo •••••••• S> r------...... ---_.. ::::~"!""=~"'!""" ""--'" -- ...... ,/ / / ! ./.... ;:; -'•p ...-./ ....0"/ / ...... 0"/ .!! 11 ./ r ...._."ff ,i t ...... ,// ¡¡¡¡¡jl l • " .~ ./ " "'''Días DíasOiasOías 1,"'am,.moT'alT'alaa...... rm.mo mo Tr:lramoentoT,Traraml9MO ••,ml.nto ",-,,~~F~F.. ..- ...... =:==~""!" .. ••••••• 1'1> ------_.------_.-/...... / ...... •...... -",.. -",.- I'2 .,/...' , .-./ j.. E9 p ...... i-S{¡ 'o.0'0 -' u ...... / / 1 .... i§~ , .... .,/ ¡ I t , ~ ., ~ ., " • " " • " "" DíasDiasOías 1'310_0TmTmamitntoamienlo T'3\."""moy,,,,.móemoy,,,u,,,,,,mo DicI.DioI.DioI. f .....-...... -...... =-::-::==:-=:=:':=~= Diot.c-oIllIoI.c-oIDIoI.eor.oI § .r~"• .....,/ ...... , ¡ ! + ~ ~ I ~ ., ~ ., • " " • " • " DiDíasOlasas Figura 28. Índices morfométricos registrados: LT, LCT y Ph de crías del acocil Cambarellus (C.) montezumae en un período de 60 días. 138 Cuadro 17. Crecimiento (LT, LCT y Ph) y sobrevivencia (%) de crías de acocil Cambarellus (C.) montezumae durante un periodo de 60 días. Tratamiento Días N LT (mm) LCT (mm) Ph (mg) Sobrevivencia (%) 0 150 - - 23 ± 5 100 15 144 12.92 ± 1.51 5.89 ± 0.18 53 ± 7 96 Dieta Formulada 30 137 16.47 ± 0.61 7.78 ± 0.71 111 ± 4 91 45 131 19.38 ± 7.26 9.15 ± 3.11 195 ± 36 87 60 104 21.95 ± 0.96 10.47 ± 0.51 275 ± 49 69 0 150 - - 21 ± 2 100 15 126 12.99 ± 0.64 6.01 ± 0.08 56 ± 11 84 Dieta Control 30 112 17.01 ± 3.41 7.99 ± 1.61 128 ± 5 75 45 108 19.16 ± 1.06 8.91 ± 1.13 180 ± 40 72 60 82 22.71 ± 5.98 10.17 ± 2.82 310 ± 22 55 *Media ± error estándar 7.5.2.1.2 Tasa Instantánea de Crecimiento (TIC) y Producción. Los resultados de la Tasa Instantánea de Crecimiento (TIC) se presentan en el Cuadro 19, donde se puede observar la estimación de la TIC utilizando el peso húmedo de cada una de las biometrías, la TIC va siendo más baja con cada biometría debido a que la velocidad de crecimiento de los organismos disminuye 139 con el aumento de talla. La TIC promedio fue mayor para los organismos alimentados con la dieta control (Camaronina) con valor de 4.49 %/día, respecto a la obtenida por los organismos alimentados con la dieta formulada (Acocilina) de 4.14 %/día (Cuadro 18 y Fig. 29). Cuadro 18. Valores de TIC durante 60 días para crías de acocil Cambarellus (C.) montezumae. Tratamiento N Tiempo (días) TIC %/días TIC promedio 144 T0- T15 5.57 137 T15 - T30 4.93 Dieta Formulada 4.14 131 T30 - T45 3.76 104 T45 - T60 2.29 126 T0- T15 6.54 112 T15 - T30 5.51 Dieta Control 4.49 108 T30 - T45 2.27 82 T45 - T60 3.62 140 Figura 29. TIC calculada para crías del acocil Cambarellus (C.) montezumae alimentados con la dieta formulada y la dieta control. La producción total después de los 60 días de fase experimental fue menor para la dieta formulada (Acocilina), se tomó como base la dieta control (Camaronina) para llevar a cabo la comparación; la estimación por metro cuadrado se hizo a una densidad de 154 organismos (Cuadro 19). Cuadro 19. Producción (formacion de tejido corporal en mg) de las crías del acocil Camabarellus (C.) montezumae alimentados con la dieta formulada y la dieta control durante 60 días. Tratamiento mg/60 días/0.13m2 mg/m2 Relación prod./dieta Dieta Formulada 171.42 1318.63 0.83 Dieta Control 206.57 1589.07 1 141 7.5.3 FASE 2. Indicadores de desempeño reproductivo. 7.5.3.1 Talla mínima de madurez. La talla mínima de madurez de las hembras del acocil Cambarellus (C.) montezumae se determinó según la evolución quincenal del número de desoves, se reconoce la talla mínima de madurez en la cual el número de desoves alcanza valores máximos dentro de un intervalo de tiempo, en este caso dentro de los 150 días que duró la fase experimental. Durante el periodo experimental encontramos un total de 21 hembras ovígeras que fueron alimentadas con la dieta formulada (Acocilina) y 18 hembras ovígeras que fueron alimentadas con la dieta control (Camaronina). El período donde se encontró mayor actividad reproductiva para la dieta formulada fueron entre los 75 – 90 días con un total de 8 hembras ovígeras en comparación con la dieta control donde el período con mayor actividad reproductiva fue entre los 90 y 105 días, con un total de 9 hembras ovígeras. Para el período de los 120 a 135 días se habían dado ya el 100 % de los desoves para ambos tratamientos (Cuadro 20 y Fig. 30). 142 Cuadro 20. Número de desoves de las hermbras del acocil Cambarellus (C.) montezumae alimentadas con dieta formulada y dieta control. Días Dieta Formulada % Dieta Control % 60 - 75 0 0 0 0 75 - 90 8 38 2 11 90 - 105 7 33 9 50 105 - 120 3 14 6 33 120 - 135 3 14 1 6 135 - 150 0 0 0 0 Figura 30. Evolución del número de desoves de las hembras del acocil Cambarellus (C.) montezumae alimentadas con dieta formulada y dieta control. 143 7.5.3.2 Índice de desove. Se calculó el índice de desove (ID) mediante la variación en el porcentaje de hembras ovígeras en relación con el total de hembras que iniciaron el experimento para cada una de las dietas. Los resultados muestran que el índice de desove (ID) presenta un porcentaje mayor para la dieta formulada que para la dieta control, con 20% y 15 % respectivamente; se encontraron diferencias significativas (p>0.05) al realizar el Chi2 de contingencia. De igual manera, se encontró mayor número de huevos (640) para la dieta formulada (Acocilina) que para la dieta control (Cuadro 21). Cuadro 21. Índice de Desove hembras del acocil Cambarellus (C.) montezumae alimentadas con dieta formulada y dieta control. Tratamiento Hembras No. de Desoves No. de Huevos Índice de Desove Totales Totales (%) Dieta Formulada 106 21 640 20 Dieta Control 118 18 563 15 144 7.5.3.3 Fecundidad. Debido a la importancia de la fecundidad como indicador de desempeño reproductivo para el acocil Cambarellus (C.) montezumae, se llevó a cabo una caracterización morfométrica de las hembras ovígeras encontradas durante toda la fase experimental para ambas dietas (Cuadro 22). Las hembras ovígeras alimentadas con la dieta formula presentaron una longitud total de mínima madurez o primera reproducción de 27.43 ± 2.05 mm, en comparación con las hembras alimentadas con la dieta control que alcanzaron una longitud total de 28.11 ± 1.61 mm, sin que esta diferencia en cuanto al tamaño (longitud total) resultara significativa (p>0.05). El peso promedio de las hembras ovígeras alimentadas con la dieta formulada fue de 0.54 ± 0.13 g y para la dieta control de 0.65 ±0.11 g, se encontraron diferencias significativas (p<0.05) observándose mayor peso húmedo en las hembras alimentadas con la dieta control. En cuanto a la fecundidad (número de huevos por hembra), para la dieta formulada encontramos que en promedio una hembra porta 30 ± 11 huevos, en comparación a una hembra alimentada con la dieta control que porta en promedio de 31 ± 9 huevos, esta diferencia no resultó ser estadísticamente significativa (p<0.05), (Fig. 31). 145 Cuadro 22. Características morfométricas y número de huevos de hembras ovígeras de Cambarellus (C.) montezumae para ambas dietas. Tratamiento Variables Promedio D.E. Max. Min. n 21 LT 27.43 3.54 29.21 24.19 LCT 12.76 1.95 13.67 10.91 Dieta LA 10.22 1.49 11.39 9.28 Formulada AA 4.88 0.67 5.26 4.31 Peso 0.54 0.28 0.75 0.35 No. Huevos 30 24 45 11 Total de Huevos 640 n 18 LT 28.92 1.61 30.01 27.84 LCT 13.44 0.33 13.68 13.21 Dieta LA 10.49 0.19 10.63 10.35 Control AA 5.01 0.04 5.03 4.97 Peso 0.68 0.24 0.85 0.51 No. Huevos 27 9.88 0.85 0.51 Total de Huevos 563 146 Figura 31. Número de huevos portados por hembra del acocil Cambarellus (C.) montezumae alimentadas con la dieta formulada y la dieta control. 7.5.3.4 Calidad de los reproductores. . Índices morfométricos. Al final del tiempo experimental (150 días) se tomó una muestra de 10 organismos por sexo de cada uno de los tratamientos, y a los que se les midieron los índices morfométricos: longitud total (LT), longitud cefalotoráxica (LCT) y peso húmedo (Ph). Para cada tratamiento y sexo se probó estadisticamente si existian diferencias significativas entre dichos índices. No se encontraron diferencias significativas (p>0.05), para ninguno de los índices morfométricos evaluados ni entre tratamientos ni entre los sexos (Cuadro 23). 147 Cuadro 23. Indices morfométricos por tratamiento y sexo del acocil Cambarellus (C.) montezumae al termino de los 150 días de experimentación. Tratamiento N Sexo Longitud Total* Longitud Cefalotórax* Peso (gr) 10 Hembras 26.63 ± 1.16 11.77 ± 0.6 0.44 ± 0.08 Dieta Formulada 10 Machos 25.78 ± 1.69 11.91 ± 0.7 0.38 ± 0.05 10 Hembras 25.75 ± 1.38 12.01 ± 1.3 0.43 ± 0.08 Dieta Control 10 Machos 27.05 ± 1.46 12.69 ± 0.6 0.48 ± 0.08 media ± e.e * mm . Composición químico proximal del tejido. - Materia orgánica y Minerales totales. El contenido de materia orgánica (MO) de los organismos alimentados con la dieta control no presentó diferencias significativas entre sexos, con valores de 71.8 % y 71.2 % para hembras y machos, respectivamente. Sin embargo, los organismos alimentados con la dieta formulada presentaron diferencias significativas (p<0.05) entre sexos, las hembras presentan un mayor porcentaje de MO (73.3%) que los machos (67.4%). Esto contrasta con el porcentaje de minerales totales donde los machos bajo la dieta formulada presentan el mayor porcentaje con 32.4%, y las hembras bajo este tratamiento el menor con 26.2%. Los organismos bajo la dieta control 148 obtuvieron registros de 28% y 31.7% para hembras y machos respectivamente (Cuadro24). . Lípidos, Proteínas y Contenido calórico. Los resultados para el contido de lípidos muestran que los organismos alimentados con la dieta control tienen porcentajes de 10.2% y 19.7% para hembras y machos, respectivamente, siendo este último el mayor porcentaje del análisis. En cuanto a los organismos bajo la dieta formulada las hembras presentaron 18.6% de contenido lipídico, mientras que los machos solo 15%. Al realizar el analisis estadistico (ANOVA) se encontraron diferencias significativas para este factor en la interacción de sexo y tratamiento (p<0.05), (Cuadro 24). En cuanto al contenido de proteína los organismos bajo la dieta formulada presentan un mayor porcentaje con 43.2% y 48.1% para machos y hembras, respectivamente, siendo las hembras de este tratamiento las que tienen el mayor porcentaje en esta investigación. Los organismos bajo la dieta control presentan porcentajes de 44.5% y 44.6% para hembras y machos, respectivamente. Al realizar el analisis estadístico (ANOVA) no se encontraron diferencias significativas (p>0.05) para el contenido de proteínas en el tejido de los organismos (Cuadro 24). Los resultados del análisis del contenido calorico del tejido muestran que los organismos alimentados con la dieta formulada presentan un contenido calórico mayor en comparación con los organismos alimentados con la dieta control, las hembras presentan un contenido calórico de 6,294 cal-1 g PS, mientras que los machos un contenido calórico de 5,784 cal g-1 PS. Sin embargo, los machos 149 alimentados con la dieta control presentaron un valor mayor que los machos bajo la dieta formulada, con 5,827 cal g-1 PS; mientras que las hembras presentaron el menor valor de todos con 5,553 cal/g-1 PS; se encontraron diferencias significativas (p<0.05) para el contenido energético del tejido de los organismos (Cuadro 24). Cuadro 24. Análisis químico proximal de las reproductores del acocil Cambarellus (C.) montezumae al final del período experimental (150 días). Tratamiento N Sexo MO* MT* Lípidos* Proteína* CE cal/g PS 3 Hembras 73 ± 2.4 26 ± 2.4 18.6 ± 1.0 48 ± 6.6 6294.3 ± 78.7 Dieta Formulada 3 Machos 67 ± 2.6 32 ± 2.6 15.0 ± 1.0 43 ± 2.1 5784.1 ± 78.7 3 Hembras 70 ± 6.1 29 ± 6.1 10.2 ± 1.0 43 ± 2.9 5533.5 ± 78.5 Dieta Control 3 Machos 71 ± 5.7 28 ± 5.7 19.7 ± 1.0 45 ± 1.4 5827.0 ± 78.7 *expresado en % media ± e.e. Con base en los resultados anteriores, y con el fin de determinar la influencia de la alimentación sobre las variables evaluadas se llevó a cabo un análisis discriminante (Modelo completo) con las siguientes variables: LT, LCT, Ph, MO, MT, Lípidos, Proteínas y Contenido calórico. Los resultados muestran que existen diferencias significativas (p<0.05) para la interacción del tratamiento y el sexo, siendo las hembras las más influenciadas por la alimentación encontrándose un mayor efecto en los parámetros lípidos y contenido calórico del tejido (Fig. 32). 150 Figura 32. Análisis discriminante (Modelo completo: LT, LCT, Ph, MO, MT, Lípidos, Prote´pinas y Contenido calórico). Una vez realizado el análisis discriminante completo se decidió realizar un ajuste al modelo anterior con las variables de mayor peso (lípidos y contenido de energía en el tejido), su nivel de significancia en el análisis fue muy alto (F = 21.12, P<0.0004) para la interacción sexo versus tratamiento (Fig.33). Figura 33. Análisis discriminante (Modelo reducido: Lípidos y contenido calórico). 151 . Índices Fisiológicos. - Tasa Metabólica. La tasa metabólica (QO2 mg O2 h-1 g-1 PS) fue determinada en un lapso de 3 horas en laboratorio al término de la fase experimental (150 días). Los valores promedio de esta tasa fueron convertidos a cal día-1 PS utilizando un Qox =3.2 cal/mg O2 (Bradfield & Solomon, 1972). No se encontraron diferencias significativas en el gasto de energía por metabolismo respiratorio (p>0.05) entre la dieta formulada y la dieta control ni entre sexos. El valor promedio para la dieta formulada fue de 630.8 cal/g PS/día en conparación con el valor promedio de la dietacontrol que fue de 730.5 cal/g PS/día, se obtuvieron los valores del gasto de energía por metabolismo respiratorio para cada sexo. El porcentaje de energía destinado a respiración se calculó en base al contenido calórico de un gramo de peso seco de tejido de un organismo por tratamiento y sexo, encontrando valores para la dieta formulada de 10.4%y 10.5 % para hembras y machos, respectivamente; para los organismos alimentados con la dieta control encontramos valores de 11.6 % y 15.0 % para hembras y machos, respectivamente (Cuadro 25 y Fig. 34). 152 Cuadro 25. Gasto de energía promedio por tasa metabólica para ambos sexos y tratamientos del acocil Cambarellus (C.) montezumae. Tratamiento Sexo N Consumo de oxígeno QO2 (cal/g PS/día) % de energía destinada (QO2) a la respiración Hembras 6 200.2 ± 27.2 662.7 ± 90.2 10.5 Dieta formulada Machos 4 181.9 ± 46.1 602.1 ± 152.4 10.4 Hembras 6 193.8 ± 42.9 641.5 ± 142.1 11.6 Dieta Control Machos 4 264.1 ± 57.9 873.9 ± 191.8 15.0 media ± e.e Figura 34. Gasto de energía promedio por tasa metabólica para ambos sexos y tratamientos (Dieta formulada y control) del acocil Cambarellus (C.) montezumae. 153 . Excreción nitrogenada. la tasa de excreción nitrogenada promedio se calculó para los organismos sometidos a la dieta formulada y control en un lapso de 3 horas en laboratorio al término de la fase experimental (150 días). Posteriormente se realizaron los cálculos para obtener datos correspondientes a un ciclo de 24 horas. Los valores promedio de la excreción nitrogenada fueron convertidos a cal día-1 PS utilizando un QEX = 4-05 cal/mg N-NH4+(Bradfield & Solomon, 1972). Los organismos que fueron sometidos a la dieta formulada presentaron una menor tasa de excreción nitrogenada, 5.18 ± 0.15 mg N-NH4+/gPS/día, con repecto a los organismos alimentados con la dieta control, lo cuales tuvieron una mayor excreción nitrogenadas con valor promedio de 7.00 ± 0.21 mg N- NH4+/gPS/día. Además, se calculo la pérdida de energía por excreción nitrogenada para cada sexo por tratamiento, con el fin de determinar si existia una influencia de la alimentación sobre el desempeño fisiológico para cada sexo, al realizar la prueba de análisis de varianza no se encontraron diferencias significativas(p>0.05), (Cuadro 26 y Fig. 35). 154 Cuadro 26. Gasto de energía promedio por excreción nitrogenada para ambos sexos y tratamientos (Dieta formulada y control) del acocil Cambarellus (C.) montezumae. Tratamiento Sexo N Excreción de nitrogenada QN-NH4 (cal/g PS/día) % de energía destinada (QN-NH4) a la excreción Hembras 6 4.88 ± 2.2 19.77 ± 9.3 0.3 Dieta formulada Machos 4 5.59 ± 1.7 22.64 ± 7.1 0.4 Hembras 6 6.68 ± 2.7 27.08 ± 10.9 0.5 Dieta Control Machos 4 8.51 ± 2.4 34.4 ± 10.1 0.6 media ± e.e Figura 35. Gasto de energía promedio por excreción nitrogenada para ambos sexos y tratamientos del acocil Cambarellus (C.) montezumae. 155 . Relación atómica O:N La relación atómica O:N es un índice que permite determinar el tipo de sustrato metabólico que es utilizado por los organismos acuáticos como fuente de energía, ante variaciones de algunos parámetros ambientales como la temperatura y la salinidad (Mayzaud & Conover, 1988, Díaz, et al, 1999; Medina-Romo, 2005). Para esta investigación se tomaron en cuenta que los valores de la relación O:N entre 3 – 50 indican oxidación protéica, entre 50 – 60 una proporción igual de proteínas y lípidos mientras que valores mayores a 60 un catabolismo de carbohidratos, según lo reportado por Mayzaud & Conover (1988). Los resultados para los organismos alimentados con la dieta formulada presentan un índice de relación O:N de 29.19, mientras que los sometidos a la dieta control de 25.02, en ambos casos denotan una oxidación de proteína, pero en la dieta formulada el valor es mayor. 7.5.4 FASE 3. Indicadores de la calidad de la puesta. Para determinar esta calidad se recurrió a la inspección de ciertos elementos del huevo tanto en su exterior (volumen y peso) como en su interior (lípidos y proteínas). 156 7.5.4.1 Volumen y peso del huevo. El volumen del huevo mostró diferencias notorias entre ambas dietas, encontrando volúmenes mayores en los huevos de hembras ovígeras alimentadas con la dieta formulada (Acocilina). Al llevar a cabo la comparación estadística encontramos diferencias significativas entre ambas dietas (p<0.05), (Fig.36). El peso húmedo de cada huevo presentó una alta relación con respecto al volumen del huevo encontrando diferencias significativas entre ambas dietas (p<0.05), (Cuadro 27, Fig. 37). Cuadro 27. Volumen y peso húmedo del huevo de hembras alimentadas con la dieta formulada y la dieta control del acocil Cambarellus (C.) montezumae. Tratamiento Volumen del huevo en (mm3) Peso húmedo en (mg) Dieta Formulada 0.48 ± 0.24 0.010 ± 0.002 Dieta Control 0.32 ± 0.13 0.008 ± 0.001 media ± e.e 157 Figura 36. Volumen del huevo de hembras alimentadas con la dieta formulada y la dieta control del acocil Cambarellus (C.) montezumae. Figura 37. Peso húmedo del huevo de hembras alimentadas con la dieta formulada y la dieta control del acocil Cambarellus (C.) montezumae. 158 7.5.4.2 Composición químico proximal de la puesta. . Lípidos y Proteínas. La composición químico proximal de los huevos es un indicador de la calidad o estado de salud de las hembras, y a su vez un indicador importante de la probabilidad de eclosión y supervivencia de las crías en las primeras etapas. Dos de los componentes químicos proximales más importantes son las proteínas y los lípidos, al llevar a cabo el análisis de estas dos variables encontramos que tanto para el porcentaje de proteínas como para el de lípidos se encontraron diferencias significativas entre ambas dietas (formulada y control), (p<0.05), encontrando los porcentajes más altos de estas variables en los huevos de hembras ovígeras alimentadas con la dieta formulada (Acocilina), (Cuadro 28 y Fig. 38). Cuadro 28. Composición químico proximal de los huevos de hembras alimentadas con la dieta formulada y la dieta control del acocil Cambarellus (C.) montezumae. Tratamiento Proteína % Lípidos % Dieta Formulada 17.0 ± 1.4 27.9 ± 3.6 Dieta Control 11.3 ± 1.8 15.3 ± 3.0 media ± e.e 159 Figura 38. Composición químico proximal de los huevos de hembras alimentadas con la dieta formulada y la dieta control del acocil Cambarellus (C.) montezumae. 7.5.4.3 Desarrollo embrionario. . Tiempo de incubación. Se monitoreó el desarrollo embrionario de 20 hembras ovígeras 10 para la dieta formulada y 10 para la dieta control desde la etapa I en donde el huevo es completamente redondo, que presenta vitelo uniforme y aún no presenta mancha ocular evidente hasta la etapa IV, en donde el desarrollo embrionario ha finalizado y las crías se encuentran completamente desarrolladas y con movilidad. 160 Para las hembras alimentadas con la dieta formulada (Acocilina) encontramos que el desarrollo embrionario se dio en un periodo promedio de 37 ± 2 días, para las hembras alimentadas con la dieta control (Camaronina) donde el periodo promedio de incubación fue de 42 ± 3 días, se encontraron diferencias significativas para ambas dietas (p<0.05), (Fig. 39). Figura 39. Tiempo de incubación de hembras alimentadas con la dieta formulada y la dieta control del acocil Cambarellus (C.) montezumae. . Tamaño de las crías. El tamaño (peso en mg) de las crías va a estar determinado por la calidad químico proximal del huevo y de los factores abióticos que se presenten durante el periodo de incubación. Se pesaron 60 crías de hembras ovígeras alimentadas con la dieta formulada (Acocilina) y 60 crías de hembras alimentadas con la dieta control (Camaronina) de aproximadamente 5 días de 161 eclosionadas, se encontraron diferencias significativas entre ambas dietas (p<0.05). Para las crías de hembras ovígeras alimentadas con la dieta formulada encontramos un peso promedio de 18 ± 2 mg y para las alimentas con la dieta control un peso de 13 ± 2 mg, la cría de mayor peso fue registrada para la dieta formulada con un peso de 22 mg y la más pequeña para la dieta control con un peso de 10 mg (Fig. 40). Figura 40. Peso de crías de hembras alimentadas con la dieta formulada y la dieta control del acocil Cambarellus (C.) montezumae. . Sobrevivencia de las crías a los 15 días. En cuanto a la sobrevivencia, se observó que el mayor poncentaje se obtuvo con la dieta formulada (Acocilina) con 80% al cabo de los 15 días, en comparación 162 con la dieta control (Camaronina) donde se obtuvo una sobrevivencia del 58% (Cuadro 29). Cuadro 29. Sobrevivencia a los 15 días de crías de hembras alimentadas con la dieta formulada y la dieta control del acocil Cambarellus (C.) montezumae. Tratamiento 0 días 15 días % de sobrevivencia Dieta Formulada 60 48 80 Dieta Control 60 35 58 163 7.6 DISCUSIÓN. La calidad del agua tiene influencia directa en el desarrollo de los organismos, y si estos parámetros (temperatura, oxígeno disueltoy pH) se mantienen a niveles óptimos, el crecimiento de los organismos se lleva a cabo de mejor manera. Los parámetros de la calidad del agua que fueron medidos durante la fase experimental fueron: la temperatura (°C), el potencial de hidrogeno (pH) y el oxígeno disuelto (O2), para ninguno de estos parametros se presentaron diferencias significativas ni entre los tratamientos ni a lo largo del experimento, lo que indicanría que el crecimiento del acocil Cambarellus (C.) montezumae no se vió afectado por la variación de estos parametros. La temperatura y el oxígeno disuelto tienen una relación inversa ya que al aumentar la temperatura del agua disminuye la capacidad de está para captar oxígeno. En la presente investigación esta relación no se vió afectada ya que encontramos un promedio en la temperatura de 23.5 °C y una concentración de oxígeno de 6.0 mg/L. La temperatura es uno de los principales parámetros que desempeña un papel primordial en el comportamiento, tolerancia y resistencia de las especies, ya que puede llegar a ser un factor determinante en la respuesta fisiológica como factor directriz (espacial y temporal) y controlador (funciones del organismo), modificando las funciones nerviosas, el metabolismo respiratorio, la captación de nutrientes e incidiendo en el desarrollo y la sobrevivencia. La capacidad del acocil Cambarellus (C.) montezumae de tolerar amplios intervalos de temperatura y evitar aquellos que pueden ser letales, le ha permitido una alta plasticidad ecológica que se refleja en su gran capacidad de adaptación a ambientes muy diversos. 164 En su habitát natural Cambarellus (C.) montezumae vive en temperaturas que flúctuan a corto (24 horas) y largo plazo (estacional), (Cornejo, 1991), en el intervalo de 10 a 30 °C y en condiciones extremas de -2 a 35 °C (Flores, 2009; García-Padilla, 2010; Latournerié, com. pers.). La zona de preferencia térmica para las crías, juveniles, subadultos y adultos oscila entre 19 y 25 °C, siendo este rango térmico donde se optimizan los costos del metabolismo de mantenimiento de la especie (Cornejo, 1991), de tal manera que una temperatura de 23 ± 1 °C coloca a Cambarellus (C.) montezumae en un rango óptimo para llevar acabo sus funciones vitales de sobrevivencia, crecimiento y reproducción. La concentración mínima de oxígeno requerida por una especie varía pero el agua no debe presentar concentraciones menores a 70% de saturación de oxígeno para organismos acuáticos (Gilbert, 1991). Con respecto a los niveles de oxígeno disuelto disponible se observaron valores de 6.0 ± 0.1 mg/L. Auvergne (1982) menciona que los valores de este factor para los acociles, se deben ubicarse en el rango de 3 a 12 mg/L; ya que bajas concentraciones de oxígeno pueden causar la muerte o suceptibilidad a patógenos, aun así, estos organismos tienen gran tolerancia a niveles de 1 a 2 mg/L. Holdich (2002) refiere que estos organismos pueden tolerar bajas concentraciones de oxígeno gracias a que poseen un pigmento respiratorio (hemocianina) que incrementa la eficiencia de transporte de oxígeno en su hemolinfa. Los acociles requieren agua ligeramente alcalina con pH entre 6 y 8.5, donde es imprescindible la presencia de calcio. Palacios (2003) señala que este elemento es necesario para la calcificación del exoesqueleto de estos organismos durante su crecimiento. A su vez, el pH también funciona como regulador en los procesos respiratorios y enzimáticos, un valor por debajo de 5 o por arriba de 9 165 es peligroso o letal (Rosas, 1976). En este estudio los valores de pH se mentuvieron en un intervalo de 8.4 ± 0.1. La Acuicultura tiene como objetivos básicos la sobrevivencia, el crecimiento, y la reproducción de las especies de mayor interés socio-económico. En la práctica, esta actividad supone el mantenimiento de los organismos en condiciones de cautividad con objeto de comercializarlos para su consumo, la reintroducción de la especie a su habitat natural o con la intención de incrementar su producción por encima de los niveles obtenidos en el medio natural. El cultivo intensivo de especies acuáticas y en particular de acociles introduce, en la mayoría de los casos, variaciones respecto a las condiciones en las que se encuentran en las poblaciones naturales, provocando alteraciones en su ciclo reproductivo (Matsuyama, et al., 1991). Por tanto, el conocimiento de los mecanismos que regulan la función reproductora de especies de interés es un requisito indispensable para el desarrollo de la Acuicultura. Una vez adquiridos los conocimientos necesarios sobre el proceso reproductor y su regulación en una especie determinada (Cambarellus (C.) montezumae) es posible controlar en cierta medida las distintas etapas de la reproducción. La reproducción de los crustáceos es un proceso muy complejo por la diversidad de elementos que determinan que un organismo se reproduzca. Los eventos reproductivos están sujetos a múltiples estímulos del ambiente y de los propios organismos. En esta investigación se evaluó el efecto que tiene una dieta formulada (Acocilina) enriquecida en proteína y ácidos grasos sobre la sobrevivencia, el crecimiento y la reproducción del acocil Cambarellus (C.) montezumae bajo condiciones controladas. 166 A pesar de ser un grupo con alto potencial acuicultural y comercial, en la actualidad es poco lo que se conoce en relación a los requerimientos nutricionales de los acociles, y en particular del acocil Cambarellus (C.) montezumae, por lo que la discusión en relación a sus requerimientos nutricionales y sus efectos se presume pueden ser similares a las de otros organismos acuáticos como camarones y peces (Bardach, et al., 1990). Se puede señalar que los acociles en su hábitat son omnívoros, es decir, ingieren materia vegetal o animal viva o muerta. Debido a que los acociles no son depredadores activos no pueden capturar peces o insectos que nadan rápidamente. Generalmente, cerca del 20% de la dieta del acocil consiste en gusanos, larvas de insectos y otros tipos de materia relativamente inactiva, el resto consiste en vegetación. El material vegetal consumido contiene grandes cantidades de animales microscópicos particularmente cuando está en estado de descomposición y durante el proceso el contenido de proteína es considerablemente mayor debido al material de origen animal (Davis, 1987a; García-Padilla, 2010, Escalante, 2013). No pueden seguir desconociéndose las necesidades nutricionales indispensables del acocil Cambarellus (C.) montezumae, si se pretende realizar producciones comerciales con esta especie. Problema que poco a poco ha ido subsanándose, ya que actualmente se inician estudios de especies nativas, como son los acociles mexicanos del género Cambarellus, probándose dietas tanto naturales como artificiales y estableciéndose las bases para el desarrollo de una tecnología con alto potencial acuícola (García, 1991; Moctezuma, 1996; Vásquez, 2009; Escalante, 2013). Para desarrollar un cultivo a nivel intensivo es necesario contar con un alimento de buena calidad que cubra los requerimientos de la especie y además 167 que su costo no sea elevado. En la elaboración de dietas para acociles, además de utilizar subproductos agrícolas, también se pueden usar desperdicios de la pesca (Cordero, 1988), tales como pescado de desecho, harina de sardina, harina de calamar, algunos tipos de aceites (animales y vegetales) y subproductos agrícolas. De aquí la importancia de elaborar dietas que realmente cubran los requerimientos de la especie, sin olvidar la parte económica de la misma; al respecto para este trabajo se utilizó una dieta comercial Camaronina (Purina, 40% de proteína), la cual es la línea de alimentos completos pelletizados para camarón de cultivo formulados y utilizados en sistemas de producción semi- intensivo e intensivos. En la línea Camaronina se ofrecen alimentos con 35 y 40% de proteína, mismos que han sido formulados utilizando los últimos avances tecnológicos y un balance adecuado de nutrientes, por lo cual se eligió como dieta control. La dieta experimental denominada Acocilina, estuvo conformada con un 47% de Camaronina (Purina, 40% de proteína), 47% de harina de calamar y 6% de aceite de hígado de pescado. Con la dieta experimental se pretendía mejorar el crecimiento, la sobrevivencia, la reproducción, la calidad de los reproductores y la puesta, por lo cual se decidió aumentar los niveles de proteínas y ácidos grasos en la dieta mediante el uso de harina de calamar y el aceite de pescado. La harina de calamar y el aceite de pescado son productos químicos de origen natural obtenidos de la reducción de pesca pelágica con la consiguiente producción de una línea de alimentos protéicos (la harina de calamar) y de una línea de productos grasos (el aceite de pescado). Ambos productos son utilizados en la formación de alimentos balanceados para la nutrición animal, 168 ya sea de productos acuícolas, de aves, de rumiantes, de cerdos y de estos animales domésticos. El calamar posee un alto nivel de proteínas, carbohidratos y grasas (monoinsaturadas y poliinsaturadas), vitamina A, B3, B12, C, D y K, minerales (Calcio, Hierro, Zinc, Yodo, Magnesio y Fosforo), aminoácidos (Ácido aspártico, Ácido glutámico, Alanina, Arginina, Cisteína, Leucina, Metionina, Tirosina, Triptófano y Valina) así como carotenos y retinol. El aceite de pescado aportó a la dieta ácidos grasos omega-3 de cadena larga; eicosapentaenoico (C20:5, EPA), docosapentaenoico (C22:5, DPA) y docosahexaenoico (C22:6, DHA), (Valenzuela, 2012). Otro aspecto importante fue la estabilidad de las dietas en el agua, ya que contribuye a la conservación de su calidad; los crustáceos requieren de un alimento de buena consistencia y alta estabilidad en el agua, ya que no lo consumen rápidamente en el transcurso del día; por lo que los productores de alimento para crustáceos recomiendan que su estabilidad en el agua sea de por lo menos 24 horas (Tacos, 1987). Sin embargo, Zendejas (1991) indicó que no es necesario que la dieta dure más de 6 horas en el agua ya que si ésta cuenta con los atrayentes y palatabilidad adecuados, el organismo lo consumirá en un lapso no mayor de 2 a 3 horas, que fue el lapso en el que los acociles consumían la dieta formulada (Acocilina), en el caso de la dieta control (Camaronina), su estabilidad en el agua y su palatabilidad da buenos resultados. La nutrición de los reproductores sigue siendo una de las áreas más pobremente entendidas e investigadas en el campo de la nutrición de crustáceos, y los estudios realizados están limitados a unas pocas especies como es el caso del camarón y el langostino (Brooks, et al., 1997; Izquierdo, et al, 2001). A grandes rasgos esto es debido a la necesidad de grandes 169 instalaciones, interiores o exteriores, para mantener grandes grupos de crustáceos adultos y, consecuentemente, al alto costo necesario para poder desarrollar largos experimentos de alimentación de reproductores. Sin embargo, como ocurre en la nutrición humana y en ganadería (Leboulanger, 1977), es obvio que los requerimientos nutricionales de los reproductores se diferencian claramente de los que requieren los animales juveniles en rápido crecimiento. Es más, como en otros animales, está claro que muchos de los problemas y deficiencias que aparecen en las etapas tempranas del desarrollo de las crías recién eclosionadas están directamente relacionadas con el régimen alimenticio (tamaño de la ración, nivel de nutrientes y periodo de alimentación) de los reproductores. Varios estudios realizados sobre las principales especies cultivadas (principalmente de camarón y peces), han demostrado que la reproducción y la calidad del huevo son influenciadas por nutrientes como proteínas, lípidos, minerales, vitaminas y carbohidratos, así como por el tamaño de la ración y por el periodo de alimentación de los reproductores. Esto ha sido descrito en especies como Procambarus clarkii (Hernández, 1996), Cherax tenuimanus (Morrissy, 1989; Villareal, 1995), Cherax destructor (Mills & McCloud, 1983), y Cherax quadricarinatus (Jones, 1995; Hutchings & Villarreal, 1996). Una restricción en el nivel de ingesta afecta seriamente a la puesta. Así, la reducción en la tasa de alimentación ha sido descrita como la causa de inhibición de la maduración de las gónadas, la disminución de las tasas de crecimiento, el retraso del período de puesta, los huevos y crías recién nacidas son más pequeñas que las obtenidas de organismos que ingieren la ración completa (Sasayama & Takahashi, 1972; Berglund, 1995). 170 Algunos estudios realizados en el medio natural han mostrado que la disponibilidad de alimento es el principal factor ambiental determinante de la fecundidad, que se puede definir como el número de huevos maduros que son producidos por una hembra durante un ciclo reproductivo (Wotton, 1979; Bromageeía, 1992). Algunos de estos estudios se han llevado a cabo sobre especies dulceacuícolas que habitan en ríos con diferente disponibilidad de alimento, mostrando que los ejemplares que viven en los ríos con más baja productividad muestran una disminución en su fecundidad (McKay & Mann, 1969; Constanz, 1975; Ali & Wooton, 2000). Los estudios realizados en el medio natural muestran ligeras evidencias de una relación directa entre el tamaño de la ración y la reproducción, mostrando la necesidad de realizar experimentos en cautividad que estudien los efectos del tamaño de la ración sobre la fecundidad, los cuales aún no se han realizado en el acocil Cambarellus (C.) montezumae, ya que para este experimento los organismos fueron alimentados ad libitum. Experimentos realizados en condiciones de cautividad, han mostrado que restricciones en la ración tienen como consecuencia una reducción de la fecundidad, y en algunos casos, de la proporción de ejemplares que llegan a la maduración sexual; para el acocil Cambarellus (C.) montezumae alimentado ad libitum con ambas dietas (formulada y control) encontramos una talla de primera madurez entre los 75 y 90 días de experimentación para la dieta formulada, y de 90 a 105 días para la dieta control. Uno de los parámetros utilizados para evaluar la calidad de la puesta es el de la fecundidad, la cual es considerada como el número medio de huevos producidos por hembra (Wotton, 1979). La fecundidad se ve afectada por deficiencias nutricionales en las dietas de los reproductores, fecundidades reducidas han sido citadas en varias especies causadas por la influencia de un 171 desequilibrio de nutrientes que afecta el sistema endócrino, o por restricciones en la disponibilidad de componentes bioquímicos para la formación de los huevos. El aumento en los niveles de lípidos dietéticos produce un aumento en la fecundidad (Duray, et al., 1994), aunque este efecto también pudiera relacionarse con el aumento gradual en los ácidos grasos esenciales de la dieta. De hecho, uno de los factores nutritivos que más pueden afectar la calidad de la puesta es el contenido en ácidos grasos esenciales (AGEs) de la dieta (Watanabe, et al., 1984 a, b). La dieta formulada (Acocilina), al estar adicionada con aceite de hígado de pescado, posee un alto contenido de ácidos grasos omega-3 de cadena larga; eicosapentaenoico (EPA), docosapentaenoico (DPA) y docosahexaenoico (DHA), lo cual se vió reflejado en la calidad bioquímica de los reproductores, en el número de huevos totales y en la calidad de la puesta, ya que todas estas variables tuvieron una mejor respuesta en comparación a los organismos alimentados con la dieta control (Camaronina). Asimismo, la composición protéica de la dieta de los reproductores influye en la calidad de la puesta regulando la síntesis y selección de los componentes del saco vitelino (Tandler, et al., 1995). Las proteínas actúan como fuente de aminoácidos y como material de reserva utilizado durante muchas actividades biosintéticas que son esenciales para las etapas tempranas de la embriogénesis (Metcoff, 1986). El desarrollo embrionario depende del balance de aminoácidos presentes en el huevo (Fynh & Serigstad, 1987; Fynh, 1989). El contenido de proteínas para la dieta control fue del 46 % en comparación con la dieta control con un 26 % de proteína cruda, el origen de la proteína de la dieta control (Camaronina) se basa en el desperdicio de cabeza de camarón entre otros subproductos; la proteína de la dieta formulada (Acocilina) fue de primera calidad, la cual fue aportada principalmente por el harina de calamar que 172 además posee una fuente importante de aminoácidos como ácido aspártico, ácido glutámico, alanina, arginina, cisteína, leucina, metionina, tirosina, triptófano y valina (http://alimentos.org.es/calamar/). En estudios llevados a cabo en especies acuáticas se ha estimado que el nivel óptimo de proteínas en dietas, conteniendo harina de pescado como principal fuente de energía, está alrededor del 45%; los reproductores alimentados por debajo de ese nivel producen aproximadamente 30% menos de huevos (Watanabe, et al., 1984). De la misma manera, se ha probado que reproductores alimentados con dietas conteniendo diferentes porcentajes de proteína, la fecundidad está positivamente correlacionada con el nivel de proteína contenida en la dieta (El-Sayed, et al, 2003). Otros nutrientes que pueden afectar la fecundidad son la vitamina E (Izquierdo y Fernández-Palacios, 1997; Fernández-Palacios, et al., 1998), la vitamina C (Blom & Dabrowski, 1995), la combinación de ambas vitaminas (Emata, et al., 2000) y los carbohidratos. Los ácidos grasos poliinsaturados también influyen de manera determinante en los procesos reproductivos (Moore, 1985), incluyendo la producción de hormonas, el desarrollo gonadal y la ovulación. Varios nutrientes son esenciales para el normal desarrollo del embrión y su nivel óptimo en las dietas de los reproductores mejora la morfología del huevo y el porcentaje de eclosión. Se ha encontrado que el porcentaje de huevos morfológicamente normales se incrementa con un aumento de los niveles de ácidos grasos esenciales (DHA y EPA), en las dietas de los reproductores y la incorporación de estos ácidos grasos en los huevos (Fernández-Palacios, et al, 1995). Estos ácidos grasos desempeñan un papel estructural importante como componentes de fosfolípidos en las biomembranas del organismo y están 173 asociados con su fluidez y el correcto funcionamiento de las funciones celulares (Bell, et al., 1986). En algunas especies los ácidos grasos esenciales se consideran la mayor fuente de energía durante el desarrollo embrionario temprano (Falk-Peterseneí, et al., 1989). No obstante, la composición en ácidos grasos de los lípidos de los huevos no sólo es determinada por la dieta de los reproductores, sino que también está relacionada con la calidad de los reproductores mismos (Pickova, et al., 1997). Los radicales libres pueden deteriorar las membranas del huevo y la integridad de las mismas. La vitaminas E y C y los carotenos (por ejemplo la astaxantina) se han mostrado como importantes agentes contra la acción de radicales libres. Un aumento de los niveles dietéticos de vitamina E produce un aumento en los porcentajes de huevos fecundados, de eclosión y de larvas normales (Watanabe, et al, 1991 a). La función de la vitamina E como antioxidante ínter e intracelular para mantener la homeostasis de metabolitos lábiles en la célula y en el plasma tisular es bien conocida. De nuevo, estos resultados sugieren que la composición bioquímica de los huevos no debe ser usada como el único criterio para determinar su calidad, a pesar del hecho de que varios autores (Sandnes, et al, 1984; Craik, 1985; Harel, et al., 1994) han sugerido que la composición química de los huevos está relacionada con el éxito de la puesta, desde el momento en que los nutrientes almacenados en el huevo deben satisfacer las demandas nutricionales para el desarrollo del embrión y su crecimiento. Pocos estudios han podido demostrar la mejora de calidad de la puesta a través de la dieta de los reproductores, en el caso de este estudio es factible señalar 174 que se puede demostrar que la alimentación de los reproductores juega un papel esencial en la sobrevivencia, crecimiento, calidad de los reproductores y de la puesta de crías de acocil Cambarellus (C.) montezumae, abriendo la puerta para realizar investigaciones más detalladas acerca de los requerimientos nutricionales de esta especie. 175 7.7 CONCLUSIONES. Las conclusiones que se obtuvieron en este capítulo sobre el efecto de una dieta formulada sobre el crecimiento, sobrevivencia y calidad de la puesta del acocil Cambarellus (C.) montezumae bajo condiciones controladas son: . El efecto del aumento en los niveles de proteínas y lípidos (ácidos grasos) en la dieta del acocil Cambarellus (C.) montezumae tuvo un efecto significativo sobre la tasa de crecimiento y sobrevivencia de los organismos, encontrando una menor tasa de crecimiento en los organismos alimentados con la dieta formulada, lo cual se vio compensado con una mayor sobrevivencia y menor talla de primera madurez. Lo que pone de manifiesto que estos organismos realizan una compartamentalización de la energía destinada al crecimiento y la reproducción. . El efecto de los altos niveles de proteínas y ácidos grasos en la dieta se vieron también reflejados en el índice de desove y la fecundidad de hembras del acocil Cambarellus (C.) montezumae, obteniendo los mejores resultados con la dieta la formulada. Lo cual estaría mostrando la idoneidad de la dieta formulada (niveles de proteínas y lípidos) para obtener mejores resultados sobre la producción de crías. . Se obtuvo una producción de progenie numerosa, saludable y uniforme de los organismos alimentados con la dieta formulada, esto se observó en la calidad del huevo, que presentaron mayor contenido de proteínas y 176 lípidos en comparación con los huevos producidos por los organismos alimentados con la dieta control. Esto a su vez, se vió reflejado en menor tiempo de incubación y mayor sobrevivencia de las crías de las hembras ovígeras alimentadas bajo la dieta formulada. 177 8. LITERATURA CITADA. Aguilar, E. R. 1991. Producción y crecimiento en Cambarellus montezumae (Saussure), (Crustacea: Astacidae), empleando alimento vegetal. Tesis de Licenciatura. Facultad de Ciencias. Universidad Nacional Autónoma de México. 76 p. Aguilar-Román, E. 2011. Efecto de la temperatura en el metabolismo energético y crecimiento de crías de acocil Cambarellus montezumae (Saussure). Tesis de licenciatura. Facultad de ciencias. Universidad Nacional Autónoma de México. 89 p. Agius, R.V., T. Watanabe, S. Satoh & V Kiron. 2001. Supplementation of paprika as a carotenoid source in soft-drypellets for broodstock yellowtail Serióla quinqueradiata (Temminck & Schlegel). Aquaculture Research. 32:1, 263-272 pp. Alva, M. 1996. La calidad del agua en la Pista de Remo y Canotaje “Virgilio Uribe”, México, D. F. con base en el contenido de nutrientes y factores físicos. Tesis de Licenciatura. Universidad Autónoma Metropolitana – Xochimilco, 35 p. Álvarez, F. y R. Rangel. 2007. Estudio poblacional del acocil Cambarellus montezumae (Crustacea: Decapoda: Cambaridae) en Xochimilco, México. Revista Mexicana de Biodiversidad 78: 431-437 pp. Andersson, M. 1999. Sexual selection. Princeton University Press. 218 p. 178 Appelberg, M. 1989. Evaluating water quality criteria for freshwater: exemplified by the impact of acid – stress. In: J. Skurdal, K. Westman y P. I. Bergan (eds.) Crayfish Culture in Europe. 476 p. Aragones, R. G. 1995. Realizar investigación que permita conocer y aplicar la biotecnología para producir en cautiverio acocil, rana, ajolote, desarrollo de lotes. Informe servicio social. Universidad Autónoma Metropolitana - Iztapalapa. 101 p. Arana, M. F., R. Pérez-Rodríguez y A. Malpica-Sánchez. 1998. Cambaridos de tres embalses del Estado de Tlaxcala, México (Crustacea: Decapoda). Revista de la Sociedad Mexicana de la Historia Natural 48: 23 – 35 pp. Arcos, R. E. y B. Barragán. 1995. Evaluación de la Calidad del Agua de los Canales Chinamperos de Xochimilco, Posibles Alternativas de Usos y Tratamiento. Memorias, II Seminario Internacional de Investigación de Investigadores de Xochimilco. 76-82 pp. Arredondo-Figueroa, J. L., A. Vásquez-González, L. Núñez-García, I. Barriga- Sosa y J. Ponce-Palafox. 2011. Aspectos reproductivos del acocil Cambarellus (Cambarellus) montezumae (Crustacea: Decapoda: Cambaridae) en condiciones controladas. Revista Mexicana de Biodiversidad 82: 168-178 pp. Auvergne, M. 1982. El cangrejo de río. Mundi-Prensa. Madrid España. 119 p. 179 Avault, J. W. & J. V. Huner. 1985. Crawfish culture in the United States. In: Huner J. V. & E. E. Brows (Eds.), Crustacean and mollusk aquaculture in the United States. AVI. Publ. Co. Westpent, Connecticut, 1-61 pp. Ávila, S. F. 2011. Determinación de la calidad microbiológica del acocil Cambarellus montezumae. Tesis de Licenciatura. Facultad de Medicina Veterinaria Zootecnista. Universidad Nacional Autónoma de México. 81 p. Balanzario, Z. 1982. Contaminación de los Canales de Xochimilco y su Repercusión en las Actividades Económicas. Boletín Mexicano de Geografía y Estadística (Archivo Histórico de la Delegación Xochimilco). 247-284 pp. Barbosa, M. 1998. Aplicación de modelos estadísticos al estudio de crecimiento del acocil Cambarellus montezumae (Saussure) en condiciones de laboratorio. Tesis de especialidad (Estadística Aplicada). Universidad Nacional Autónoma de México. 32 p. Barcena, B. L. 2000. Evaluación de dietas regionales en el crecimiento (longitud y peso) del acocil Cambarellus montezumae, bajo condiciones de cultivo. Tesis de licenciatura. Biología agropecuaria. Universidad Autónoma de Tlaxcala. 96 p. Begon, M., C. Townsend & J. Harper. 2006. Ecology, from Individuals to Ecosystems. Blackwell Publishing Ltd., U.K. 698 p. 180 Brafield, A. E. & D. J. Salomon. 1972. Oxicalorific coefficients for animals respiring nitrogenous substrates. Comparative Biochemistry Physiology 43:837-841 pp. Bromage, J., J. Jones, C. Randall, M. Thrush & B. Davies. 1992. Broodstock management, fecundity, egg quality and timing of egg production in the rain brown trout (Onchorhynchus mykiss). Aquaculture.100: 141-166 pp. Bromage, N. R., M. Bruce & N. Basavaraja. 1994. Egg quality determinants in finfish: the role of overripening with special reference to the timing of stripping in the Atlantic halihut Hippoglossus hippoglossus. Journal of the World Aquaculture Society. 25: 13 -21 pp. Brooks, S., C. Schreck, W. Contreras-Sanchez & M. S. Fitzpatrick. 1997. Egg quality in fish: What makes a good egg? Reviews in Fish Biology and Fisheries. 7: 387-416 pp. Bruce, M. F., F. Oyen, G. Bell, F. Asturiano & B. Farndale. 1999. Development of brood stock diets for the European sea bass (Dicentrarchus labrax) with special emphasis on the importance of n-3 and n-6 HUFA to reproductive performance. 117(1-4): 85-97 pp. Bückle-Ramírez, L., F. Díaz, F. Correa, B. Barón & M. Hernández. 1994. Diel thermoregulation of the crawfish Procambarus clarkia (Crustacea, Cambaridae). Journal of Thermal Biology, 19(6):419-422 pp. Campbell, P. M., M. Morgan, C. Wilson & L. Crim. 1994. Preliminary evidence that chronic confínement stress reduces the quality of gametes produced by brown and rainbow trout. Aquaculture.120: 151-169 pp. 181 Cantú, L. L. 1959. Contribución al conocimiento de la embriología de una especie de acocil: Cambarellus montezumae montezumae (Saussure). Crustacea: Decápoda. Tesis de licenciatura. Facultad de Ciencias. Universidad Nacional Autónoma de México. 37 p. Capital Natural de México. 2009. Acciones Estratégicas para su Valoración, Preservación y Recuperación. Comisión Nacional para el Conocimiento y Uso de la Biodiversidad. México. 95 p. Carta Nacional Acuícola. 2012. Diario Oficial. Estados unidos Mexicanos. Secretaría de Agricultura, Ganadería, Desarrollo Rural Pesca y Alimentación. Segunda Sección. 80 p. Carrillo, M., J. Cerdá, J. Navas, F. Oyen, J. Ramos & S. Zanuy. 2000. Some criteria of the quality of the progeny as indicators of physiological brood stock fitness. Cah. Options. Mediterr., 41: 61-13 pp. Castelló, O. 1993. Acuicultura marina: fundamentos biológicos y tecnología de la producción, Barcelona, España. 310 p. Cerón, O. A., M. M. Ángeles y E. J. León. 2010. Evaluación de la influencia del alimento y calidad del agua en el crecimiento de post-larvas del acocil (Cambarellus montezumae). I Reunión Nacional de Innovación Acuícola y Pesquera de Campeche. Nutrición Acuícola. 41 p. Cerón, O. A., M. M. Ángeles y E. J. León. 2011. Resultados preliminares sobre la reproducción como un efecto secundario en cultivos controlados del 182 acocil de río (Cambarellus montezumae). Memoria II Reunión Nacional de Innovación Acuícola y Pesquera. León, Guanajuato. 59 p. Chapman, W. D. 1971. Production. In: Bagenal, T. (Ed.) Methods for assessment of fish production in fresh waters. 3er. Ed. IBP. No 3. Blackwell Sci. Publ. Oxford. 365 p. Civera, C. R. y S. L. Cruz. 1982. Bioensayo de incubación artificial del acocil Cambarellus montezumae, (Saussure, 1858), (Decapoda: Astacidae). Informe servicio social. Universidad Autónoma Metropolitana - Iztapalapa. 75 p. Colín, H. S. 2006. Estudio sobre el crecimiento y ciclo de vida del Cambarellus montezumae montezumae (Saussure, 1857) de los canales de Xochimilco; México, DF. Informe Servicio Social. Universidad Autónoma Metropolitana - Iztapalapa. 57 p. Coll, M. J. 1987. Cría del cangrejo de río. Editores Hispano Europea. Barcelona-España. 158 p. Cornejo, R. A. 1991. Selección térmica del acocil Cambarellus montezumae (Saussure) (Crustacea: Astacidae) y su correlación con algunos índices fisiológicos: diferencias estacionales. Tesis de licenciatura. Facultad de ciencias. Universidad Nacional Autónoma de México. 71 p. Cortés, J. E., H. Villareal-Colmenares y M. Rendón-Rumualdo. 2002. Efecto de la frecuencia alimenticia en el crecimiento y sobrevivencia de juveniles de langosta de agua dulce Cherax quadricarinatus (Decapoda: 183 Parastacidae). I Congreso Iberoamericano Virtual de Acuacultura. 882- 890 pp. Cortés, O. A. 2010. Interacción de depredación entre el ajolote (Ambystoma mexicanum) y el acocil (Cambarellus montezumae) especies nativas de Xochimilco. Tesis Maestría en Ciencias Biológicas. Universidad Nacional Autónoma de México. 64 p. Coutiño, M. 1981. Evaluación Bacteriana en Vegetales Irrigados con Aguas Negras en la Zona de San Gregorio, Xochimilco. Tesis de Licenciatura. Facultad de Ciencias. Universidad Nacional Autónoma de México. 84 p. Clutton-Brock, T. H. 1991. The Evolution of Parental Care. Princeton (NJ): Princeton University Press. Craik, J. C. & S. M. Harvey. 1984. Egg quality in rainbow trout. The relation between egg viability, selected aspects of egg composition, and time of stripping. Aquaculture, 40: 115-134 pp. Dabrowski, K. & J. H. Blom. 1994. Ascorbic acid deposition in rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) eggs and survival of embryos. Comparative Biochemistry and Physiology. 129-135 pp. Dajoz, R. 2002. Tratado de ecología. Mundi-Prensa Libros. 600 pp. De Gaves, S., N. Sammy & D. Pentcheff. 2009. A classification of living and fossil genera of decapods crustaceans. National University Singapore. Raffles bulletin of Zoology. Supplement No. 21: 1-109 pp. 184 Díaz, F., G. Escalante y E. Sierra. 2006. Fisiología energética de Cherax quadricarinatus (Von Martens) alimentado con dos dietas, expuesto a un régimen constante y fluctuante de temperatura. Hidrobiológica. Universidad Autónoma Metropolitana - Iztapalapa.16: 1, 35-44 pp. Emata, A., I. Borlongan & J. Damaso. 2000. Dietary vitamin C and E supplementation and reproduction of milkfish Chanos chanos Forsskal. Aquaculture Research, 31:7, 557-564 pp. Escalante, G. E. 2013. Crecimiento de crías de acocil Cambarellus montezumae (Saussure) con diferentes dietas vegetales. Tesis de Licenciatura. Facultad de Ciencias. Universidad Nacional Autónoma de México. 99 p. Espinoza, E. G. 1992. Evaluación de una calentador solar rustico con funcionamiento nocturno para el cultivo del acocil mexicano (Cambarellus montezumae) en clima templado. Colegio Nacional de Educación Profesional Técnica el Zarco. 142 pp. Ezcurra, E. 1990. De las Chinampas a la Megalopólis. México. Fondo de Cultura Económica. (La Ciencia desde México). 65 p. Feist, G., F. Grant F., Eenennaam J., Doroshov S., Schneider R. & Fitzpatricke M. 2004. Early identification of sex in cultured White sturgeon, Acipenser transmontanus, using plasma steroid levels. Aquaculture, 232: 581-590 pp. Félix, C. L. y Gutiérrez, Y. P. 2005. Influencia de los factores ambientales en la ecología poblacional de Cambarellus montezumae (Crustacea, Decápoda). 185 Resumen. Memorias XVII Congreso Nacional de Zoología, Monterrey, Nuevo León. 80-84 pp. Fernández-Palacios, H., N. Sammy & D. Pentcheff. 1995. Effect of n-3 HUFA level in broodstock diets on egg quality of gilthead sea bream (Sparus aurata). Aquaculture.132 (3-4): 325-337 pp. Flores, M. G. 1982. Determinación de algunos metales pesados en el sedimento de los Canales del Lago de Xochimilco. Tesis Profesional. Escuela Nacional de Ciencias Biológicas. Instituto Politécnico Nacional. México. 100 p. Flores, R. A. 2009. Análisis preliminar de algunos factores físico-químicos indicadores de la calidad del agua en Xochimilco. Tesis de Licenciatura. Universidad Nacional Autónoma de México. 92 p. Folch, J., M. Lees & G. H. Stanley. 1959. A simple method for the isolation and purification of total lipids from animal tissues. The Journal of Biological Chemistry. 226: 497-509 pp. Fondo Internacional de Emergencia de las Naciones Unidas para la Infancia. UNICEF. 2012. El doble reto de la malnutrición y la obesidad. ONU. www.unicef.org/mexico/spanish/17047.htm Fragoso, C. M., H. Martínez y M. Rodríguez. 2003. Estudio comparativo del comportamiento productivo en acuario, del acocil (Cambarellus montezumae) alimentado con excretas de cerdo ensiladas y empastillados 186 contra un alimento comercial para tilapia. REDVET - Revista Electrónica de Veterinaria. Universidad Nacional Autónoma de México. Furuita. H., H. Tanaka, T. Yamamoto, M. Shiraishi & T. Takeuchi. 2003a. Supplemental effect of vitamin A in diet on the reproductive performance and egg quality of the Japanese flounder Paralichthys olivaceus (T&S). Aquaculture Research, 34(6): 461-468 pp. García, O. A. 1991. Efecto de diversas dietas sobre la sobrevivencia y crecimiento de crías del acocil Cambarellus montezumae (Saussure), (Crustacea: Astacidae). Tesis de Licenciatura. Facultad de Ciencias. Universidad Nacional Autónoma de México. 73 p. García-Padilla, G. M. 2010. Estimación del balance energético del acocil Cambarellus montezumae en el lago de Xochimilco. Tesis de Licenciatura. Facultad de Ciencias. Universidad Nacional Autónoma de México. 92 p. Gilbert, B. 1991. Acuacultura. Eds. Omega, S.A. Barcelona. Vol. 1: 478 p. Gherardi, F. 2002. Behaviour. In: D. M. Holdich (ed.), Biology of freshwater crayfish. Blackwell Science. UK. 258 – 290 pp. González, V. E. 1997. Presencia de metales pesados en Cambarellus montezumae, Ambistoma mexicanum y Chirosthoma jordani, especies endémicas comestibles del área lacustre de Xochimilco. Informe servicio social. UAM Xochimilco. 63 p. 187 González-Vecino, J. L., T. Lyons & K. Jacques. 2004. Short & long term effects of a nucleotide enriched broodstock diet on the reproductive performance of haddock (Melanogrammusa eglefinus). 11 International Symposium on nutrition and Feeding in Fish. Phuket. Thailand. 99 pp. Guillaume, J., Bourne & N., Hodgson. 2004. Nutrición y alimentación de peces y crustáceos. Editorial Mundi-Prensa, España. 475p. Gutiérrez-Yurrita, P. J. 2008. Nuevos paradigmas y retos de la ecología. En: Crustáceos de México estado actual de su conocimiento. Álvarez, F. N. y R. A. Gabino. Universidad Autónoma de Nuevo León.301-329 pp. Hamasaki, K. & F. Chu. 2006. Batch fecundity of the swimming crab Portunus trituberculatus (Brachyura: Protunidae). Aquaculture. 253: 359-365 pp. Harel, M., J. Bell, I. Uriarte, R. Henderson & J. Sargent, J. 1994. The kinetics of nutrient, incorporation into body tissues of gilthead sea bream (Sparus aurata) females and the subsequent effects on egg composition and egg quality. British Journal of Nutrition, 72: 45-58 pp. Hines, A. 1988. Fecundity and reproductive output in two species of deep-sea crabs, Geryon fenneri and G. quinquedens (Decapoda: Brachyura). Journal Crustacean Biology. 8 (4): 557-562 pp. Hines, A. 1991. Fecundity and reproductive output in nine species of Cancer crabs (Crustacea, Brachyura, Cangridae). Canadian Journal of Fisheries and Aquatic Sciences. 48: 267-275 pp. 188 Hinojosa, D. & L. Zambrano. 2004. Interaction of common carp (Cyprinus carpio) with bentic crayfish decapods in shallow ponds. Hydrobiology.515: 115-122 pp. Hem, J. D. 1985. Study and interpretation of the chemical characteristics of natural water. 3rd Ed. U.S.Survey Water Supply Paper 2254. Washington (USA). 1-263 pp. Holdich, D. M. & R. S. Lowery (Eds.). 1988. Freshwater Crayfish, biology, management and exploitation. Cromm Helm Press. London. 198 p. Hobbs, H. H., Jr., 1989. An illustrated checklist of the American Crayfish (Decapoda: Astacoidae: Cambaridae: Parastacidae) Smithsonian Contributions to Zoology, 480: 1 – 236 pp. Holdich, D. M. 2002. Biology of freshwater crayfish. Blackwell Science. Oxford England. 702 p. Huner, J. V. & J. E. Barr. 1984. Red swamp crawfish. Biology and exploitation. The Louisiana Sea Grant College Program, Louisiana State University. 135 p. Huner, J. V. 1981. Information about the biology and culture of red crawfish Procambarus clarkii (Girad, 1852) (Decapoda: Cambaridae) for fisheries managers in Latin America. Anales del Instituto de Ciencias del mar y Limnología. Universidad Nacional Autónoma de México. 8(1):43-50 pp. 189 Hutchings, R. W. & H. Villarreal. 1996. Biología y Cultivo de la langosta de agua dulce Cherax quadricarinatus. Manual de Producción. Navimar, S. A. Guayaquil, Ecuador. 500 pp. Inouye, L. S. & G. R. Lotufo. 2006. Comparison of macro-gravimetric and micro-colorimetric lipid determination methods. Talanta 70: 584-587. Instituto Nacional de Estadística y Geografía (INEGI). 2008. Cuaderno estadístico delegacional de Xochimilco, Distrito Federal. Sistema Nacional de Información Estadística y Geográfica. http://www.inegi.org.mx Consultado en marzo 2013. Instituto Nacional de Estadística y Geografía (INEGI). 2000. Cuaderno Estadístico Delegacional, Xochimilco, Distrito Federal. 163 p. Jiménez, O. E. 1989. Meso microclima de la Ciudad de México. Universidad Nacional Autónoma de México. 95 pp. Johnson, S. K. 1987. Calidad del agua en el Cultivo del Cangrejo de Rio (Acocil). FONDEPESCA. Extensionismo. FOEXT/A3. Jones, C. M. 1990b. General biology of Cherax quadricarinatus. In: C.C. Shelly and M. Pearce, (Eds.) Farming the red-claw freshwater crayfish. NT Department of Primary Industry and Fisheries Report No.21. Northern Territory, Australia. 1 – 6 pp. Jones, C. M. 1995. Evaluation of six diets for red claw, Cherax quadricarinatus, von Martens, held in pond enclosures, Tenth International Symposium of 190 Astacology. Geddes, M. C., Fielde, D. R. and Richardson, A. M. M. eds. Louisiana State University, U. S. A. 399-409 pp. Kiewek, M. M. 2002. Efecto del nivel de lípidos en el desarrollo de juveniles de langosta de agua dulce Cherax quadricarinatus (Von Martens 1868). Tesis de Licenciatura. Universidad Nacional Autónoma de México.78 p. Kjorsvik, E., Y. Marty, J. Moal & F. Samain. 1990. Egg quality in fishes. Advances in Marine Biology, 26: 71-113 pp. Kjorsvik, E., Y. Marty, J. Moal & F. Samain. 2003. Egg and larval quality criteria as predictive measures for juvenile production in turbot (Scophthalmus maximus). Aquaculture, 227 (4): 9-20 pp. Klekowsky, R. Z. & A. Duncan. 1975. Phisiological approach to ecological energetic. In Methods for ecological Bioenergetics. I.B.P. Blackwell Science Oxford. 100 p. Latournerié-Cervera, J. R., Y. Nacif y R. J. Cárdenas. 2006. Crecimiento, producción y eficiencia de energía de crías de acocil Cambarellus montezumae (Saussure) alimentadas con detritus de Egeria densa. Revista electrónica de veterinaria REDVET. 7(12). 1-11 pp. Lot, A., A. Novelo, M. Olvera y P. Ramírez. 1999. Catálogo de angiospermas acuáticas de México. Instituto de Biología. Universidad Nacional Autónoma de México. 161 p. 191 Manahan, S. E. 1972. Environmental Chemistry. Willard Grant Press Mass, U.S.A., 393 pp. McHarney, W. 1984. The freshwater aquaculture book. Hartley & Marks Press, N.Y., 583 p. Maldonado, R. G. 1990. Respuesta al stress térmico del acocil Cambarellus montezumae (Saussure), (Crustacea: Astacidae). Comparación de métodos. Tesis de Licenciatura. Facultad de Ciencias. Universidad Nacional Autónoma de México. 75 p. Mangor-Jensen, A., H. Fernández-Palacios & A. G. J Tacon. 1993. Effects of cod brood stock dietary vitamin C on embryonic growth and survival. Milestone. Rapp. Sent. Havbruk. Inst. Mar. Res. 18 – 8 pp. Mazorra, C., K. Miller & G. Newkirk. 2003. Dietary lipid enhancement of brood stock reproductive performance and egg and larval quality in Atlantic halibut (Hippoglossus hippoglossus). Aquaculture, 227 (1-4): 21-33 pp. Mills, B. J., J. Philip & H. McCould. 1983. Effects of stocking and feeding rates on experimental pond production of the crayfish Cherax destructor, Clark (Decapoda: Parastacidae). Aquaculture, 34: 51-72 pp. Moctezuma, M. A. 1996. Bases biológicas y técnicas para el cultivo del acocil Cambarellus montezumae. Tesis de Maestría en Acuacultura. Universidad de Colima. 85 p. 192 Monroy, A. M., J. Carabias, C. Mapes y C. Toledo. 2010. Análisis de parámetros físico- químicos que afectan la población en medio natural del acocil (Cambarellus montezumae) en Tezontepec de Aldama, Hidalgo. I Reunión de Innovación acuícola y Pesquera Campeche. Nutrición acuícola. 43 pp. Montemayor, L. J., R. Maldonado y E. Guarneros. 2010. Influencia de la alimentación sobre la reproducción y crecimiento del acocil regio (Procambarus regiomontanus) especie en peligro de extinción. Ciencias Universidad Autónoma de Nuevo León, Vol. XVII. No. 3. 276-286 pp. Morones, B. F. 1991. Aspectos reproductivos bajo condiciones de laboratorio de Cambarellus montezumae (Saussure) proveniente de la zona lacustre de Xochimilco, D.F. Informe servicio social. Universidad Autónoma Metropolitana -Xochimilco. 94 p. Morrissy, N. M., 1989. A standard reference diet for crustacean nutrition research. IV. Growth of freshwater crayfish Cherax tenuimanus. Journal of the World Aquaculture Society, 20: 114-117 pp. Nacif, O. Y. 2004. Evaluación del proceso de descomposición aeróbica de la macrófita Egeria densa presente el hábitat de Cambarellus montezumae y su potencial como alimento para esta especie. Tesis de Licenciatura. Facultad de Ciencias. Universidad Nacional Autónoma de México. 63 p. Novelo, R. A. y M. M. Gallegos. 1988. Estudio de Flora y vegetación acuática relacionada con el sistema de chinampas en el sureste del Valle de México. Biota 13: 121-139 pp. 193 Odum, H. T. 1987. Energy systems in ecology. In Systems and Control Encyclopedia - Theory, Technology, Applications, M. G. Singh, ed. Pergamon Press, New York. 1458-1462 pp. Palacios, S., E. Espinoza, G. García y C. Pérez. 1995. Absorción de Metales Pesados por la Asociación de Azolla lemna (Chilacastle-Chilacastle) en el Parque Ecológico Xochimilco, D. F. Resúmenes del Primer Seminario Internacional de Investigadores de Xochimilco. México. 82 p. Palacios, G. A. 2003. Aspectos de reproducción, alimentación y crecimiento en cautiverio de Cambarellus montezumae, Saussure 1857, (Crustacea: Decapoda) de Xochimilco. Informe Servicio Social. Universidad Autónoma Metropolitana - Iztapalapa. 44 p. Palma, S. y P. Arana. 1997. Aspectos reproductivos del langostino colorado (Pleuroncodes monodon H. Milne Edwards, 1837), frente a la costa de Concepción, Chile. Invest. Mar., Valparaíso. 25: 203-221 pp. Parada, C. 1987. Influencia de factores físicos en la variabilidad inter-diaria de la distribución de estados tempranos de Engraulis ringens en el Golfo de Arauco. Tesis de Magíster en Ciencias, Mención Oceanografía. Facultad de Oceanografía. Universidad de Concepción. 98 p. Pennak, R. W. 1978. Freshwater invertebrates of the United States. Ed. Jhon Wiley and Sons. Nueva York. EUA. 803 p. 194 Plan Delegacional de Desarrollo Sustentable: DelegaciónXochimilco.1991. Rescate de Xochimilco. Universidad Autónoma Metropolitana - Xochimilco. 310 pp. Plan Nacional de Desarrollo. 2007-2012. Se presenta, en cumplimiento al Artículo 26 de la Constitución Política de los Estados Unidos Mexicanos y se ha elaborado de acuerdo a lo establecido en la Ley de Planeación. 319 p. Rangel, M. R. 1981. Determinación de Algunos Metales Tóxicos, Boro, Cadmio, Cobre, Plomo y Zinc en Aguas del Lago de Xochimilco Para Uso agrícola. Tesis Profesional. Escuela Nacional de Ciencias Biológicas. Instituto Politécnico Nacional. México. 89 p. Rangel, R. 2004. Estudio poblacional de Cambarellus montezumae en la Pista de Remo y Canotaje “Virgilio Uribe”, Xochimilco; México, D.F. Tesis de Licenciatura. Facultad de Ciencias. Universidad Nacional Autónoma de México. 50 p. Rangel, R. 2009. Ecología poblacional de Cambarellus montezumae en Xochimilco, México, D. F. Tesis de Maestría en Ciencias Biológicas. Facultad de Ciencias. Universidad Nacional Autónoma de México. 72 p. Reid, D. & S. Corey. 1991. Comparative fecundity of decapod crustaceans II. The fecundity of fifteen species of Anomuran and Brachyuran crabs. Crustaceana. 61: 175-189 pp. Ricker, W. E. 1975. Computation and interpretation of biological statistics of fish population. Bull. Fish. Res. Bd. Can., 191: 382 pp. 195 Rojas, P. Y. R. 2003. Revisión taxonómica de las especies de Cambarellus (Cambarellus) (Crustacea: Decapoda: Astacidae: Cambaridae): análisis morfológico. Tesis de Maestría. Instituto de Biología. Universidad Nacional Autónoma de México. 102 p. Rosas, M. M. 1976. Datos biológicos sobre el acocil del lago de Pátzcuaro (C. montezumae patzcuarensis). Memorias del Simposio sobre pesca en aguas continentales. Tuxtla Gutiérrez, Chiapas. 40-63 pp. Rodríguez-Serna, M., 1991. Influencia de la dieta en la eficiencia de asimilación: Pérdidas de energía por respiración y productos nitrogenados en el balance energético del acocil Cambarellus montezumae (Saussure) (Crustacea: Cambaridae). Tesina de Licenciatura.Universidad Autónoma Metropolitana - Xochimilco. 43 p. Rodríguez, S. M. 1999. Biología y sistemática de los Cambaridos del sudeste de México y su potencial aprovechamiento en la acuacultura. Tesis de Doctorado en Ciencias Biológicas. Universidad Nacional Autónoma de México. 118 p. Rodríguez, S. M. y Carmona, O. C. 2002. Balance energético del acocil Cambarellus montezumae (Saussure) (Crustacea: Astacidae: Cambaride) pérdida de energía en la tasa metabólica. Universidad Juárez Autónoma de Tabasco, Villahermosa, México. Universidad y Ciencia 18:36. 182-134 pp. 196 Roy, E. 1985. El cangrejo de río, biología y nutrición. Acribia, S. A. Zaragoza España. 185 p. Saborido-Rey F. 2005. Review of population structure and ecology of S. mentella in the Irminger Sea and adjacent waters. Reviews in Fish Biology and Fisheries. 04-61 pp. Salazar, I. 1999. Estudio sobre el efecto toxico y genotóxico sobre el acocil Cambarellus montezumae. Tesis de Licenciatura. Facultad de Estudios Superiores Cuautitlan. Universidad Nacional Autónoma de México. 50 p. Sánchez, M. P. 2007. Aprovechamiento de los ambientes reducidos en los canales de Xochimilco para el cultivo del acocil Cambarellus montezumae, para consumo humano. Tesis de Maestría en Ciencias Agropecuarias. Universidad Autónoma Metropolitana - Xochimilco. 44 p. Santiago, M. C. 2001. Evaluación de la tasa de crecimiento de Cambarellus montezumae (Saussure 1858) (Crustacea: Decapoda) a diferentes temperaturas bajo condiciones de laboratorio y algunos aspectos de su ciclo biológico. Informe Servicio Social. Universidad Autónoma Metropolitana - Xochimilco. 50 p. Santos, C. E. 1998. Importancia ecológica y socioeconómica del “acocil” (Cambarellus montezumae Custacea: Decapoda), de dos embalses de Tlaxcala. Informe Servicio Social. Universidad Autónoma Metropolitana - Xochimilco. 45 p. 197 Santos, M. S., A. Celis y M. García-Rodríguez. 2011. Consumo de acocil Cambarellus montezumae como fuente importante de macronutrientes. Revista Latinoamericana de Química. 75 p. Secretaría de Medio Ambiente y Recursos Naturales. Norma Oficial Mexicana NOM – 059 – ECOL - 2001. Protección ambiental especies nativas de México de flora y fauna silvestres-categorías de riesgo y especificaciones para su inclusión, exclusión o cambio - lista de especies en riesgo. Publicada en el Diario Oficial de la Federación el 6 de marzo de 2002. 153 p. Tallamy, D. W. & C. W. Schaefer. 1997. Maternal care in the Hemiptera: ancestry, alternatives, and current adaptive value, In: J.C. CHOE & B.J. CRESPI (Eds). The evolution of social behavior in insects and arachnids. Cambridge, Cambridge University Press. 94-115 pp. Trivers, R. L. 1975. Natural selection of parental ability to vary the sex ratio of offspring. Science, 179(68), 90-2 pp. Valenzuela, B. A., G. Cifuentes y M. MAldonado. 2012. El aceite de pescado: ayer un desecho industrial, hoy un producto de alto valor nutricional. Revista Chilena de Nutrición 39:2. 201-209 pp. Vazzoler, A. E. A. 1996. Biologia da reproduçao de peixes Teleósteos: Teoría e práctica. EDUEM, Maringa, PR. 88 pp. Villa, N. A. 2010. Aspectos preliminares de la dinámica poblacional del acocil Cambarellus montezumae (Saussure) de Xochimilco. Tesis de 198 Licenciatura. Facultad de Ciencias. Universidad Nacional Autónoma de México. 50 p. Villarreal-Colmenares, H. 1991. A partial energy budget for the Australian Crayfish Cherax tenuimanus. Journal of the World Aquaculture Society, 22:252-259 pp. Villarreal, H. M., 1995. Evaluación del potencial de cultivo de la langosta de agua dulce Australiana Cherax tenuimanusen función de su eficiencia bioenergética. Memorias del 3er Simposium Internacional de Nutrición Acuícola. Universidad Autónoma de Nuevo León, México. En prensa. Vásquez, G. A. 2009. Aspectos sobre la reproducción y el crecimiento del acocil Cambarellus (C.) montezumae (Saussure, 1857), en condiciones de laboratorio. Tesis de Maestría en ciencias agropecuarias Universidad Autónoma Metropolitana - Xochimilco. 101 pp. Villalobos, F. A. 1955. Cambarinos de la Fauna Mexicana (Crustacea: Decapoda). Tesis Doctorado. Facultad de Ciencias. Universidad Nacional Autónoma de México. 290 p. Washburn, B., B. Washburn, D. Frye & S. Hung. 1990. Dietary effects on tissue composition, oogénesis and the reproductive performance of female rainbow trout (Oncorhynchus mykiss). Aquaculture.90: 179-195 pp. Zar, J. H. 1984. Biostatistical Analysis. Prentice-Hall. USA. 620 pp. 199