DOCSLIB.ORG

Bioprospecção De Plantas Da Família Solanaceae Com Atividade Fungitóxica À Moniliophthora Perniciosa

Total Page：16

File Type：pdf, Size：1020Kb

Download full-text PDF Read full-text
Bioprospecção De Plantas Da Família Solanaceae Com Atividade Fungitóxica À Moniliophthora Perniciosa 1 Universidade de São Paulo Escola Superior de Agricultura “Luiz de Queiroz” Bioprospecção de plantas da família Solanaceae com atividade fungitóxica à Moniliophthora perniciosa Flávio Rocha Tese apresentada para obtenção do título de Doutor em Ciências. Área de concentração: Microbiologia Agrícola Piracicaba 2015 2 Flávio Rocha Biólogo Bioprospecção de plantas da família Solanaceae com atividade fungitóxica à Moniliophthora perniciosa versão revisada de acordo com a resolução CoPGr 6018 de 2011 Orientador: Profa. Dra. SIMONE POSSEDENTE DE LIRA Tese apresentada para obtenção do título de Doutor em Ciências. Área de concentração: Microbiologia Agrícola Piracicaba 2015 Dados Internacionais de Catalogação na Publicação DIVISÃO DE BIBLIOTECA - DIBD/ESALQ/USP Rocha, Flávio Bioprospecção de plantas da família Solanaceae com atividade fungitóxica à Moniliophthora perniciosa / Flávio Rocha. - - versão revisada de acordo com a resolução CoPGr 6018 de 2011. - - Piracicaba, 2015. 211 p. : il. Tese (Doutorado) - - Escola Superior de Agricultura “Luiz de Queiroz”. 1. Produto natural 2. Fitopatógeno 3. Saponina 4. Brunfelsia uniflora 5. Solanum seaforthianum 6. Cestrum nocturnum I. Título CDD 635.64 R672b “Permitida a cópia total ou parcial deste documento, desde que citada a fonte – O autor” 3 DEDICATÓRIA A minha família, especialmente aos meus pais Cícero e Emília por sempre acreditarem na minha dedicação. Aos meus sobrinhos Samira, Maria Eduarda e Gabriel que, apesar de pequenos, já se orgulham de seu tio coruja. E à minha futura família que será construída ao lado de minha amada, Muriel Prado. 4 5 AGRADECIMENTOS A Universidade de São Paulo, a CAPES e a FAPESP pela infraestrutura, apoio financeiro e pela bolsa de doutorado (Processo FAPESP 2012/02861-0). Agradeço novamente a FAPESP pelo apoio financeiro por meio de projeto regular (Processo FAPESP 2014/15760-3) e de projeto temático (Processo FAPESP 2013/50228-8). A minha orientadora Dra. Simone Possedente de Lira pela amizade, confiança, paciência e pela condução deste trabalho. Ao Dr. Luiz Humberto Gomes e a Dra. Keila Maria Roncato Duarte pela amizade, ajuda e por me guiarem até este momento. Ao aluno de iniciação científica Jorge Henrique Custodio (FAPESP, processo 2011/11272-6) pelo tempo que participou e colaborou neste trabalho. Ao Dr. Vinicius Castro Souza e Dr. Gerson Oliveira Romao (Herbário ESA, ESALQ) pela coleta e identificação das plantas. Ao Dr. Roberto Gomes de Souza Berlinck (QOSBio, IQSC) por disponibilizar laboratório e o equipamento CLAE-UV-ELSD-MS. E as técnicas Dra. Fabiana Tessari Rodrigues e Dra. Karin Fabiana Bandeira de Camargo por toda ajuda e paciência. Ao Dr. Antonio Gilberto Ferreira e a técnica Ms. Luciana Vizotto (Laboratório de Ressonância Magnética Nuclear, UFSCAR) pela obtenção dos espectros de RMN. Ao Dr. Edson Rodrigues Filho (LaBioMMi, UFSCAR) e ao Dr. Douglas Ferreira pela recepção, ajuda e obtenção de espectros de HRMS e RMN. Ao Dr. Antônio Vargas de Oliveira Figueira e Ms. Juliana Leles Costa (CENA, USP) pelo auxilio nos ensaios biológicos e por disponibilizar basidiósporos de M. perniciosa. A Dra. Daniela Paula Toledo Thomazella pela recepção e por disponibilizar linhagens de M. perniciosa. A Dra. Aline Aparecida Pizzirani Kleiner e ao técnico José Antonio da Silva (Zezo) (ESALQ) por fornecer algumas das linhagens fúngicas utilizadas neste trabalho. Ao Dr. Marcos Yassuo Kamogawa, Dr. Arquimedes Lavorenti, Dr. Marcelo Eduardo Alves e a Dra. Wanessa Melchert Mattos por disponibilizar laboratório e equipamentos. Aos técnicos Ms. Felipe Gabriel Andrino, Janaina Truffi, Gertrudes C. B. Fornazier, Lenita M. C. P. E. Oliveira e Rita de Cassia L. de Castro pelos vários auxílios. A secretária Maria Fernanda Almeida Prado, do Programa de Pós-Graduação em Microbiologia Agrícola, por todo auxilio durante este curso. 6 Aos meus amigos e companheiros de laboratório Luciana Mecatti Elias, Joze Aparecida Marciano Corrêa, Diana Fortkamp, Gislâine Vicente dos Reis, Richtier Gonçalves da Cruz, José Brites Neto, Ana Claudia Lo Buono Tavares, Isabela Maria Nascimento, Marcos Pinto Monteiro de Oliveira e Natália Alexandrino pelos momentos de diversão, criatividade e auxilio na execução deste trabalho. Aos meus amigos de departamento Jeane Maria Cunha Machado, Cleiton dos Santos Mattos, Amanda Ribeiro Martins da Silva, Fernanda Souza Krupek e Jeová Correia Miranda pelo companheirismo e pelos bons momentos. Ao Sergio Birello Sartori e Marcos Canto Machado pela amizade, disposição em ajudar e pelas releituras deste trabalho. Aos alunos de iniciação científica Camila Fortunato da Silva, Natasha Linhares de Lima Braga, Higor Augusto Seraphim Pimpinato, Isabelli Casagrande e Jessica Aparecida Ferrarezi pela amizade e aos bons momentos. Aos meus amigos do Instituto de Zootecnia e Pontifícia Universidade Católica de Campinas pelas boas lembranças. A minha namorada Maria Muriel de Cássia Silva Prado pelas releituras, por me acompanhar, tolerar e me compreender durante toda a execução deste trabalho. 7 EPÍGRAFE "O homem científico não pretende alcançar um resultado imediato, ele não espera que suas ideias avançadas sejam imediatamente aceitas. Seus trabalhos são como sementes para futuro, seu dever é lançar as bases para aqueles que estão por vir e apontar o caminho.". Nikola Tesla 8 9 SUMÁRIO RESUMO................................................................................................................... 13 ABSTRACT ............................................................................................................... 15 1 INTRODUÇÃO ....................................................................................................... 27 2 OBJETIVOS ........................................................................................................... 29 2.1 Objetivo principal ................................................................................................. 29 2.2 Objetivos específicos .......................................................................................... 29 3 REVISÃO BIBLIOGRÁFICA ................................................................................... 31 3.1 Importância econômica e distribuição do cacaueiro ............................................ 31 3.2 Principais doenças do cacaueiro ......................................................................... 32 3.3 Origem e impacto econômico da vassoura-de-bruxa .......................................... 33 3.4 Ciclo da infecção por Moniliophthora perniciosa no cacaueiro ............................ 34 3.5 Métodos de controle da vassoura-de-bruxa ........................................................ 36 3.6 Controle químico da vassoura-de-bruxa.............................................................. 38 3.7 Produtos naturais como pesticidas ...................................................................... 39 3.8 Produtos naturais como fungicidas ..................................................................... 41 3.9 Metabólitos vegetais inibidores de fungos fitopatógenos .................................... 44 3.10 Metabólitos antifúngicos de solanáceas ............................................................ 45 3.11 Participação das saponinas no mecanismo de defesa vegetal ......................... 48 3.12 Mecanismos de resistência aos compostos vegetais ........................................ 50 4 MATERIAL E MÉTODOS ....................................................................................... 53 4.1 Obtenção de plantas pertencentes a família Solanaceae ................................... 53 4.1.1 Coleta de plantas solanáceas .......................................................................... 53 4.1.2 Cultivo de plantas solanáceas .......................................................................... 53 4.1.3 Identificação botânica das espécies e depósito em herbário ........................... 53 4.2 Obtenção dos extratos aquosos .......................................................................... 54 4.3 Técnicas cromatográficas para purificação dos compostos ................................ 54 4.3.1 Partição líquido-líquido ..................................................................................... 54 4.3.2 Cromatografia em coluna pré-empacotada ...................................................... 54 4.3.3 Cromatografia em coluna por permeação em gel ............................................ 55 4.3.4 Cromatografia em Camada Delgada (CCD) ..................................................... 55 4.3.5 Cromatografia Liquida de Alta Eficiência .......................................................... 56 4.4 Técnicas utilizadas para Estudo químico dos compostos ................................... 56 4.4.1 Espectrometria de Massas e Ultravioleta ......................................................... 56 4.4.2 Espectrometria de Massas de Alta Resolução ................................................. 58 4.4.3 Ressonância Magnética Nuclear ...................................................................... 58 4.5 Reação de hidrólise ácida com as frações SsM5d6a e BuM8i4 .......................... 59 10 4.6 Protocolos dos bioensaios e fitopatógenos utilizados ......................................... 59 4.6.1 Fungos fitopatógenos utilizados ...................................................................... 59 4.6.2 Preservação e armazenamento dos fungos .................................................... 60 4.6.3 Ensaio biológico por diluição em ágar ............................................................
Load more

Recommended publications
  • Genera of Corticioid Fungi: Keys, Nomenclature and Taxonomy Article
    Studies in Fungi 5(1): 125–309 (2020) www.studiesinfungi.org ISSN 2465-4973 Article Doi 10.5943/sif/5/1/12 Genera of corticioid fungi: keys, nomenclature and taxonomy Gorjón SP BIOCONS – Department of Botany and Plant Physiology, University of Salamanca, 37007 Salamanca, Spain Gorjón SP 2020 – Genera of corticioid fungi: keys, nomenclature, and taxonomy. Studies in Fungi 5(1), 125–309, Doi 10.5943/sif/5/1/12 Abstract A review of the worldwide corticioid homobasidiomycetes genera is presented. A total of 620 genera are considered with comments on their taxonomy and nomenclature. Of them, about 420 are accepted and keyed out, described in detail with remarks on their taxonomy and systematics. Key words – Corticiaceae – Crust fungi – Diversity – Homobasidiomycetes Introduction Corticioid fungi are a diverse and heterogeneous group of fungi mainly referred to basidiomycete fungi in which basidiomes are generally resupinate. Basidiome construction is often simple, and in most cases, only generative hyphae are found. In more structured basidiomes, those with a reflexed margin or with a pileate surface, more or less sclerified hyphae are usually found. Even the basidiome structure is apparently not very complex, hymenophore configuration should be highly variable finding smooth surfaces or different variations to increase the spore production area such as rugose, tuberculate, aculeate, merulioid, folded, or poroid hymenial surfaces. It is often thought that corticioid fungi produce unattractive and little variable forms and, in most cases, they go unnoticed by most mycologists as ungraceful forms that ‘cover sticks and look like a paint stain’. Although the macroscopic variability compared to other fungi is, but not always, usually limited, under the microscope they surprise with a great diversity of forms of basidia, cystidia, spores and other microscopic elements (Hjortstam et al.
    [Show full text]
  • Identificação De Receptores De Plantas Envolvidos No
    UNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINAS INSTITUTO DE BIOLOGIA GUSTAVO HENRIQUE ALCALÁ ZAPAROLI “Uma segunda família de proteínas indutoras de necrose encontrada em Moniliophthora perniciosa, causador da doença Vassoura-de-Bruxa em cacaueiros” Tese apresentada ao Instituto de Biologia para obtenção do Título de Mestre em Genética e Biologia Molecular, na área de Genética de Microorganismos. Orientador: Prof. Dr. Gonçalo Amarante Guimarães Pereira Campinas, 2007 1 2 3 AGRADEÇO À MINHA FAMÍLIA PELO APOIO E COMPREENSÃO, AO PESSOAL DO LAB. E AOS MEUS AMIGOS. “O SIMPLES FARFALHAR DE ASAS DE UMA BORBOLETA PODE CAUSAR UM TUFÃO NO OUTRO LADO DO MUNDO” 4 RESUMO O fungo basidiomiceto hemibiotrófico Monilophthora perniciosa é o agente causador da doença Vassoura-de-Bruxa em cacaueiros. A infecção é caracterizada pela hipertrofia e hiperplasia dos tecidos da planta durante a fase biotrófica do fungo, formando as denominadas vassouras-verdes, que sofrem necrose e completa degradação durante a fase saprotrófica do fungo, formando as vassouras-secas. Encontramos no genoma de M. perniciosa pelo menos cinco seqüências codificando possíveis proteínas similares aos membros da família Cerato-platanina, uma classe de proteínas inicialmente encontrada no fitopatógeno Ceratocystis fimbriata. Um dos genes de M. perniciosa cerato-platanina (MpCP1) foi expresso “in vitro” e mostrou ter capacidade de induzir necrose em folhas de tabaco e cacaueiro. A proteína apresenta-se em solução como um dímero e é capaz de recuperar a capacidade de necrose após tratamento de denaturação térmica. Análises de transcrição “ex planta” mostraram que MpCP1 é mais expresso no micélio biotrófico do que no saprotrófico. O perfil de necrose apresentado é diferente do causado pelas MpNEPs (outra família de elicitores presente em M.
    [Show full text]
  • Training of Master Facilitators (Tomf) Training Manual
    STDF - CABI - ICCO PROJECT: “CocoaSafe”: Capacity Building and Knowledge Sharing in SPS in Cocoa in Southeast Asia (STDF/PG/381) TRAINING OF MASTER FACILITATORS (TOMF) TRAINING MANUAL 2014 ACKNOWLEDGEMENTS This TOMF manual draws heavily from the following resources: 1. Bateman, R. (2013). Pesticide Use in Cocoa. A Guide for Training Administrative and Research Staff. ICCO. 94 pp. 2. Bijlmakers, H. (2005). FFS for IPM-Refresh your memory. IPM DANIDA Project, Thailand. 60 pp. 3. CABI (2007). Crop Protection Compendium. An interactive multimedia knowledge base, containing a wide range of science-based information on all aspects of crop protection. 4. CABI SEA (2008). Training of Master Facilitators (TOMF). ACIAR Project PC/2006/114 on the Management of Cocoa Pod Borer in PNG. 109 pp. 5. David, S. (2008). Learning about sustainable cocoa production-A guide for participatory farmer training. 1. Integrated Crop and Pest Management. STCP- ITTA Accra, Ghana. 227 pp. 6. David, S. et. al. (2006). A guide for conducting FFS on cocoa integrated crop and pest management. STCP-ITTA Accra, Ghana.93 pp. 7. Dankers C. and C.N. Twin (2007). Organic cocoa production – A guide for FFS in Sierra Leone. FAO Rome. 63 pp. 8. ICCO (2008). Manual of Best Known Practices in Cocoa Production. CB/16/2. 9 pp. 9. UTZ Certified (2009). Good Inside Code of Conduct for Cocoa. Version 1.0. 33 pp. 10. Vos, J.G.M., B.J. Ritchie and J. Flood (2003). Discovery Learning about Cocoa – An Inspirational guide for training facilitators. CABI Bioscience. 110 pp. 11. ASEAN GAP November 2006, RMIT International 12.
    [Show full text]
  • Taxonomic Re-Evaluation of the Ceratobasidium-Rhizoctonia Complex and Rhizoctonia Butinii, a New Species Attacking Spruce
    Taxonomic re-evaluation of the Ceratobasidium-Rhizoctonia complex and Rhizoctonia butinii, a new species attacking spruce Franz Oberwinkler, Kai Riess, Robert Bauer, Roland Kirschner & Sigisfredo Garnica Mycological Progress ISSN 1617-416X Mycol Progress DOI 10.1007/s11557-013-0936-0 1 23 Your article is protected by copyright and all rights are held exclusively by German Mycological Society and Springer-Verlag Berlin Heidelberg. This e-offprint is for personal use only and shall not be self- archived in electronic repositories. If you wish to self-archive your article, please use the accepted manuscript version for posting on your own website. You may further deposit the accepted manuscript version in any repository, provided it is only made publicly available 12 months after official publication or later and provided acknowledgement is given to the original source of publication and a link is inserted to the published article on Springer's website. The link must be accompanied by the following text: "The final publication is available at link.springer.com”. 1 23 Author's personal copy Mycol Progress DOI 10.1007/s11557-013-0936-0 ORIGINAL ARTICLE Taxonomic re-evaluation of the Ceratobasidium-Rhizoctonia complex and Rhizoctonia butinii, a new species attacking spruce Franz Oberwinkler & Kai Riess & Robert Bauer & Roland Kirschner & Sigisfredo Garnica Received: 11 September 2013 /Accepted: 22 September 2013 # German Mycological Society and Springer-Verlag Berlin Heidelberg 2013 Abstract A taxonomic re-evaluation of the Ceratobasidium- Tulasnella anceps (Fig. 3b)inCeratobasidium, a decision Rhizoctonia group suggests that Ceratobasidium contains only accepted in following treatments. The plant parasitic Hypochnus the type species C.
    [Show full text]