Camila Marques Adade Avaliação Dos
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CAMILA MARQUES ADADE AVALIAÇÃO DOS EFEITOS DO VENENO (TOTAL E FRAÇÕES) DA SERPENTE Crotalus viridis viridis SOBRE A MORFOLOGIA, PROLIFERAÇÃO E INFECTIVIDADE DO Trypanosoma cruzi Tese de Doutorado apresentada ao Programa de Pós-Graduação em Ciências (Microbiologia), Instituto de Microbiologia Prof. Paulo de Góes da Universidade Federal do Rio de Janeiro, como parte dos requisitos necessários à obtenção do título de Doutor em Ciências Biológicas (Microbiologia) Orientador: Thaïs Cristina Baeta Soares Souto-Padrón UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO DE JANEIRO INSTITUTO DE MICROBIOLOGIA PROF PAULO DE GÓES RIO DE JANEIRO JULHO DE 2010 Livros Grátis http://www.livrosgratis.com.br Milhares de livros grátis para download. ii FICHA CATALOGRÁFICA Adade, Camila Marques Avaliação dos efeitos do veneno (total e frações) da serpente Crotalus viridis viridis sobre a morfologia, prolif eração e infectividade do Trypanosoma cruzi/ Camila Marques Adade – Rio de Janeiro, Instituto de Microbiologia Paulo de Góes, UFRJ, 2010. xxii, 155f. Orientadora: Thaïs Souto-Padrón Tese (Doutorado em Ciências Biológicas) - UFRJ/ Instituto de Microbiologia Prof. Paulo de Góes/ Pr ograma de Pós-graduação em Ciências (Microbiologia), 2010. Referências bibliográficas: f. 98 - 126 1. Trypanosoma cruzi 2. Doença de Chagas 3. Quimioterapia 4. Crotalus viridis viridis 5. Microscopia eletrônica 6. Citometria de fluxo 7. HPLC 8. Espectrometria de massas I. Souto-Padr ón, Thaïs. II. UFRJ/ Instituto de Microbiologia Paulo de Góes, Doutorado em Ciências (Microbiologia), 2010. III. Avaliação do efeito dos efeitos do veneno total e suas frações componentes da serpente Crotalus viridis viridis sobre a proliferação, ultraestrutura e infectividade do Trypanosoma cruzi. iii O presente trabalho foi realizado no Laboratório de Biologia Celular e Ultraestrutura, Departamento de Microbiologia Geral, Instituto de Microbiologia Prof. Paulo de Góes (IMPPG), Centro de Ciências da Saúde (CCS), Universidade Federal do Rio de Janeiro, sob a orientação do(a) Profª. Thaïs Souto-Padrón. iv A Thaïs, minha orientadora, um exemplo ímpar de ser humano e de alguém que realmente ama o que faz. Você se tornou, a cada dia, uma fonte de inspiração com toda a sua força e vontade de ser sempre melhor. Muito obrigada por todas as oportunidades, credibilidade e principalmente, obrigada por uma das maiores lições que tive na minha vida. De tudo ficaram três coisas... A certeza de que estamos começando... A certeza de que é preciso continuar... A certeza de que podemos ser interrompidos antes de terminar... Façamos da interrupção um caminho novo... Da queda, um passo de dança... Do medo, uma escada... Do sonho, uma ponte... Da procura, um encontro! Fernando Sabino v Aos meus pais, Cicléia e Alberto, os maiores incentivadores de tudo! Vocês são os responsáveis por tudo o que já fui capaz de realizar e por me fazerem sempre acreditar que tudo no final sempre dará certo. Vocês são o meu chão, a minha vida. Obrigada por tudo. Amo vocês ad infinitum. Para ser grande, sê inteiro: nada Teu exagera ou exclui. Sê todo em cada coisa. Põe quanto és No mínimo que fazes. Assim em cada lago a lua toda Brilha, porque alta vive. Ricardo Reis vi Ao André, que além de meu marido é também o meu melhor amigo, meu ombro. Você sabe quanto foi importante para a realização desta tese, uma etapa tão importante nas nossas vidas. Espero que você consiga mensurar o quanto eu sou grata por todo o seu apoio e compreensão. Amo você “a perder de vista”. Amar: Fechei os olhos para não te ver e a minha boca para não dizer... E dos meus olhos fechados desceram lágrimas que não enxuguei, e da minha boca fechada nasceram sussurros e palavras mudas que te dediquei.... O amor é quando a gente mora um no outro. Mário Quintana vii Ao meu irmão Alberto, a minha prima Mariana e minha avó Miranil, por todos os dias que compartilhamos, mesmo à distância, e a eterna torcida de você por novas conquistas. A luz de vocês torna a minha vida muito mais fácil e plena, difícil imaginar a ausência deste time que está sempre comigo. Amo vocês!! Outros outubros virão Outras manhãs plenas de sol e de luz Fernando Brant viii AGRADECIMENTOS Agradeço a todas as pessoas envolvidas direta ou indiretamente nesta pesquisa. Um especial agradecimento a todos os integrantes do IMPPG que muito contribuíram no meu trabalho e que já fazem parte de muitas lembranças e realizações. Aos auxiliares técnicos Bosco Carlos, Edna Lúcia dos Santos Rocha e Lusinete da Rocha Bonfim que muito contribuíram e possibilitaram o meu trabalho de bancada. O bom trabalho de vocês foi fundamental. Aos secretários da pós-graduação do IMPPG, Safira Farache, Igor S. S. Martins e Luciana S. Soares, por toda a ajuda mais do que essencial com os trabalhos burocráticos realizados durante o período de execução desta tese. A Dra. Rosângela Soares e ao Dr. Antônio F. Pereira o meu muito obrigado pelas ajudas, muitas vezes indiretas, que muito colaboraram com meu aprendizado e desenvolvimento. A Dra. Marta Helena Branquinho, por ter se dedicado à minuciosa revisão desta tese, contribuindo com excelentes sugestões e muitas inserções neste trabalho. Às Dras. Ângela H. Lopes e Juliany C. Rodrigues por terem aceitado participar da minha defesa e principalmente, por toda as ajudas e toques durante todos os anos de execução deste trabalho e de minha estada na UFRJ. A boa ciência é feita por pessoas especiais como vocês. Ao Marcos e Venício pela disponibilidade e apoio durante as incontáveis horas na microscopia. Muito obrigado por toda a ajuda e todos os papos que tanto fizeram com que o meu trabalho se tornasse mais fácil. Ao Prof. Paulo Melo por todos os ensinamentos, ótimos papos e principalmente, por ter, desde sempre, me aberto as portas do seu lab com tanta disponibilidade. O Sr. é um exemplo de excelente pesquisador e humildade. Muito do que está escrito hoje neste tese se deve a toda esta disponibilidade, muito obrigada. À toda equipe do Laboratório de Farmacologia das Toxinas e Substâncias Antagonistas, em especial ao Bruno L. Cons e ao Marcelo A. Tomáz por terem contribuído diretamente com a realização de alguns dos resultados desta tese. Muito obrigada por terem sido extremamente profissionais, além de terem se tornado ótimos colegas de “ralação”. Aos ix demais integrantes: Marquinho, Marcelo Strauch, Camila, Paula, Glauco e Fabrício pelos ótimos papos no lab e principalmente, no XVI ISTx onde a companhia de vocês fez tudo ser tão bom. Valeu!! A toda equipe do Laboratório de Ultraestrutura Celular Hertha Meyer pelas incontáveis contribuições ao desenvolvimento desta tese. Ao prof. Ulysses Lins pelos ótimos papos, boas risadas e toda a contribuição a realização desta tese, e principalmente, por fazer do seu lab uma extensão da nossa bancada de trabalho. E da mesma forma, um muuiiiitttoo obrigada a toda sua equipe, em especial a Fernanda, a Karen e ao Fernando, por fazerem com que esta filosofia seja sempre seguida a risca. Valeu pelas dicas, ajudas, papos e ótimas festinhas! A Profª. Lina Zingali, meu muito obrigado MAIÚSCULO!!! Você permitiu que eu continuasse acreditando neste trabalho e foi fundamental pra realização desta tese. Da mesma forma, Aninha, você foi uma das pessoas que mais possibilitaram a execução de tantas etapas e a produção de vários dos resultados aqui apresentados. Muuiittooo obrigada pela disponibilidade, os ensinamentos, a paciência e a primazia pela qualidade! Você é mil!!!!! Minha toda gratidão também a todos do UEMP pelas ajudas, pela pronta solução das minhas eternas dúvidas, por sempre aturarem as minhas perguntas do tipo “até que horas vai ter gente aqui?”, vocês todos foram demais! Difícil achar palavras pra agradecer por tudo o que aprendi aí. Ah, não posso mesmo deixar de agradecer demais a Brigitte, SINISTRA D+!!! Bom, tenho que começar os agradecimentos ao pessoal do lab. Espero conseguir expressar aqui todos os “sentimentos de mundo”... Gabi, “minha” aluna, muito obrigada por ter me ajudado em tantas coisas, ter sido competente e principalmente, ter aturado os meus momentos de insanidade. Você tem muito potencial! Anne “Maria”, muito obrigada por todas as milhares de ajudas, as ótimas conversas, as incontáveis risadas, as cervas, ou seja, muito obrigada por todo estes anos super especiais de lab, onde você foi, com toda a certeza, uma das pessoas que fez com este período de quatro anos fosse tão especial. Roberta, você não faz idéia o quanto é especial. Eu, sinceramente, não sei como te agradecer por tanta coisa, tanto “perrengue” que você dividiu comigo, e pela disponibilidade que poucas pessoas neste mundo conseguem ter... Querida, você é luz, nunca se esqueça disso. Moara (mais conhecida como x MARMOTA), só posso te agradecer dizendo o quanto amo a sua amizade e o quanto a sua presença em minha vida é essencial. Espero tê-la sempre por perto ouvindo ótimas músicas, devaneando sobre sonhos, rindo, chorando, discutindo ciência, aprontando e principalmente, fazendo isso tudo ao mesmo tempo com um copo na mão... Você é o fino da bossa. Não posso deixar também, de agradecer a Cyntia que tanto agregou durante o período em que ficou conosco. Muito obrigada por tudo! E, ah, no heart feelings..... Não posso deixar nunca de agradecer ao Maurilio, mais que uma pessoa que tanto me ensinou, alguém que sempre acreditou neste projeto, e principalmente, que sempre acreditou em mim. Espero nunca desapontá-lo. Muito obrigada! Da mesma forma, a Solange L. de Castro, pessoa linda no sentido strictu da palavra. Ótima professora e uma querida amiga, aprendi demais durante todos esses anos, mesmo a distância. Obrigada!!! Augusto e Juliana, tenho certeza que mesmo se eu um dia tivesse tido a chance de escolher, nunca teria escolhido cunhas tão especiais como vocês. Muito obrigada por todos as nossas ótimas conversas, as bagunças, as milhares de risadas, e a certeza de que a minha vida só ficou melhor com a presença de vocês.