UNIVERSIDADE FEDERAL DE PERNAMBUCO Laboratório de Imunopatologia Keizo Asami – Centro de Biociências Programa de pós-graduação em Biologia Aplicada à Saúde (PPGBAS) e UNIVERSIDADE DO MINHO Centro de Engenharia Biológica Programa Doutoral em Engenharia Química e Biológica PRISCILLA BARBOSA SALES DE ALBUQUERQUE AVALIAÇÃO DE ATIVIDADES BIOLÓGICAS DE MEMBRANA E GEL DA GALACTOMANANA EXTRAÍDA DAS SEMENTES DE Cassia grandis COM BIOMOLÉCULAS IMOBILIZADAS Recife – PE Fevereiro, 2017 PRISCILLA BARBOSA SALES DE ALBUQUERQUE AVALIAÇÃO DE ATIVIDADES BIOLÓGICAS DE MEMBRANA E GEL DA GALACTOMANANA EXTRAÍDA DAS SEMENTES DE Cassia grandis COM BIOMOLÉCULAS IMOBILIZADAS Tese de Doutorado apresentada ao Programa de Pós-Graduação em Biologia Aplicada à Saúde do Laboratório de Imunopatologia Keizo Asami, UFPE, e ao Programa Doutoral em Engenharia Química e Biológica da UMINHO, como requisito parcial para obtenção do título de Doutor em Biologia Aplicada à Saúde e em Engenharia Química e Biológica, respectivamente, segundo convenção acadêmica estabelecida entre UFPE e UMINHO, para fins de co-tutela. Área de concentração: Biotecnologia. Orientadores: Profª; Dra. Maria das Graças Carneiro da Cunha (Departamento de Bioquímica, Centro de Biociências/UFPE) e Prof. Dr. José António Couto Teixeira (Departamento de Engenharia Biológica, Centro de Engenharia Biológica, UMINHO). Recife – PE Fevereiro, 2017 Catalogação na fonte Elaine Barroso CRB 1728 Albuquerque, Priscilla Barbosa Sales de Avaliação de atividades biológicas de membrana e gel da galactomanana extraída das sementes de Cassia grandis com biomoléculas imobilizadas / Priscilla Barbosa Sales de Albuquerque- Recife: O Autor, 2017. 238 folhas: il., fig., tab. Orientadores: Maria das Graças Carneiro da Cunha e José António Couto Teixeira Tese (doutorado) – Universidade Federal de Pernambuco. Centro de Biociências. Biologia Aplicada à Saúde, 2017. Inclui referências e anexos 1. Polissacarídeos 2. Leguminosa 3. Biotecnologia I. Cunha, Maria das Graças Carneiro da (orientador) II. Teixeira, José António Couto (orientador) III. Título 572.566 CDD (22.ed.) UFPE/CB-2017-230 PRISCILLA BARBOSA SALES DE ALBUQUERQUE AVALIAÇÃO DE ATIVIDADES BIOLÓGICAS DE MEMBRANA E GEL DA GALACTOMANANA EXTRAÍDA DAS SEMENTES DE Cassia grandis COM BIOMOLÉCULAS IMOBILIZADAS Tese de Doutorado apresentada ao Programa de Pós- Graduação em Biologia Aplicada à Saúde do Laboratório de Imunopatologia Keizo Asami, UFPE, e ao Programa Doutoral em Engenharia Química e Biológica da UMINHO, como requisito parcial para obtenção do título de Doutor em Biologia Aplicada à Saúde e em Engenharia Química e Biológica, respectivamente, segundo convenção acadêmica estabelecida entre UFPE e UMINHO, para fins de co-tutela. Área de concentração: Biotecnologia. Aprovada em: 20/02/2017 COMISSÃO EXAMINADORA Profª. Drª. Maria das Graças Carneiro da Cunha (Orientadora) Departamento de Bioquímica – UFPE Prof. Dr. José Teixeira (Orientador) Departamento de Engenharia Biológica – UMINHO Profª. Drª. Maria Tereza dos Santos Correia Departamento de Bioquímica – UFPE Profª. Drª. Luana Cassandra Breitenbach Barroso Coelho Departamento de Bioquímica – UFPE Prof. Dr. Wilson Barros Júnior Departamento de Física – UFPE Recife – PE Fevereiro, 2017 Dedico este trabalho à minha avó, Dona Nina, e ao meu pai, Misael Medeiros de Albuquerque (in memoriam). Por eles eu tenho o amor mais saudoso deste mundo! AGRADECIMENTOS Desenvolver esta Tese de doutorado e ultrapassar cada obstáculo relacionado com ela foi, com certeza, o maior desafio da minha vida. Estou imensamente grata a todos os que me acompanharam, de perto ou de longe, nesta jornada e que participaram nos momentos de dificuldade, mas também nas muitas alegrias. No meu coração fica a certeza de que o título é uma consequência, pois a verdadeira conquista foram as experiências pessoais que eu vivi, as preciosas amizades conquistadas e o desejo de retornar ao meu povo um pouco do muito que eu aprendi neste período. Em primeiro lugar agradeço a Deus pelo Pai, amigo, Senhor e Salvador que é. Não tenho palavras para demonstrar o que Ele representa em minha vida; o meu maior desejo é continuar seguindo o Seu exemplo de humildade, sinceridade, servidão e compaixão. À minha orientadora, professora Graça Cunha, pelo imenso apoio e carinho. Obrigada por ter acreditado em mim quando nem eu mesma acreditava que seria capaz de conseguir. Tenho profunda admiração pelo exemplo de simpatia, respeito, profissionalismo, confiança e liderança que a senhora é! Ao meu orientador, professor José Teixeira, pelo apoio e incentivo, mesmo quando a nossa única forma de comunicação eram os e-mails. Agradeço em especial a sua atenção durante todo o período que estive em Portugal. Agradeço especialmente o fato do professor Teixeira e da professora Graça terem- me aceitado como aluna de mestrado mesmo sem me conhecerem. Espero ter correspondido com êxito a este voto de confiança durante estes 6 anos de trabalho. Aos professores António Vicente, Luana Coelho, Miguel Cerqueira, Tereza Correia e Wilson Barros, por terem trabalhado comigo de maneira especialmente próxima e paciente. O progresso da ciência faz-se através de pessoas como vocês! À minha Mãe, Lindalva Maria Barbosa Sales de Albuquerque, pelo amor, carinho, esforço e empenho que sempre teve para me educar. Você é o meu tesouro mãezinha, a minha razão de viver. Tudo o que sou, devo a você! À minha grande família, que mesmo estando tão espalhada, representa o meu porto seguro. O amor que sinto mistura-se à saudade e ao orgulho que tenho por cada um de vocês! Obrigada por cuidarem de mim (seja de João Pessoa, Recife, Timbaúba, Goiana, São Paulo, Boa Vista, Madrid ou num circo itinerante) e me apoiarem nos momentos mais decisivos! Espero que possamos seguir o exemplo de humildade, honestidade e respeito que vovó Nina e vovô Joaquim nos deixaram! À Patyanne Carvalho, a minha melhor amiga e comadre. A vida é muito mais fácil de ser levada com o seu apoio e amizade. Obrigada por compartilhar comigo uma das coisas mais preciosas de nossas vidas, a nossa cachorrinha Lua. Estendo o meu agradecimento a toda a sua família. Aos queridos amigos do Laboratório de Biotecnologia da UFPE: Fernanda Andrade, Fernanda Pacífico, Joyce, Mirla, Rita, Adelmo, Jan, José Roberto e George, pela imensa ajuda, amizade, apoio e por muitas vezes terem sido a razão de alegria e disposição para continuarmos o nosso trabalho. Aos amigos do Laboratório de Indústria e Processo da UMINHO, que me receberam de braços abertos e fizeram com que a minha estada em Portugal ficasse cheia de ótimas lembranças. Aos amigos que conheci durante os 3 meses de estágio na Universidade de Reading, na Inglaterra, por terem segurado a barra de um período muito difícil, mas que hoje em dia só me traz boas recordações. Às amigas mais gatas que tenho, as lab.gatas (em especial Aline, Mychely e Raiana), por serem um verdadeiro presente de Deus e alívio nos momentos de tanto trabalho. Aos colegas e funcionários do Departamento de Bioquímica da UFPE, por compartilharem trabalhos, risadas, experimentos, lanches e alegrias, e por conseguirem superar as dificuldades encontradas no cotidiano com tanta boa vontade. Vocês são admiráveis! Às preciosas amizades feitas durante o ano que passei em Portugal: Tati, Carol, Maria Helena, Laylla, Leilson, Meirielly, Nayra, Catarina, David, Thaís, Rejane, Rute, Rutilene, Sheylla e Jorge, Katia e família, José Moraes e às glamorosas do DEB. Estendo o agradecimento às suas famílias, pois tornaram-se também minha família durante este período tão maravilhoso. Aos meus queridos amigos Carol, Isabel, Marthyna e Paulo, por estarem comigo nos melhores e piores momentos dessa vida acadêmica. Não tenho palavras para demonstrar o quanto vocês são importantes na minha vida pessoal e também essenciais na construção da minha vida profissional. Amo vocês! Aos amigos da graduação em Biomedicina da FASER, especialmente Kelly, Carol, Helô, David, Dyego, Gabi, Vivi, Prissilinha, Renata e Kivvi, que se tornaram amigos da vida! Amo especialmente cada um de vocês. Obrigada por me terem ajudado a tornar a pessoa e a profissional que hoje sou. Aos amigos da Cidade Viva, por representarem a família que eu escolhi para amar. Vocês são as melhores pessoas que conheço. Aos amigos Karol Marçal, Raquel e Christiano, Karlinha e Taciano, Ilceny e João Pedro, Eduardo, Ana Félix, Marcella e João, Jéssica, Tânia, Carol e D. Marta, família Taroni Madureira e às minhas chuchoteuses, grandes amigos que se tornaram a minha família aqui em Recife. Aos amados amigos de João Pessoa, especialmente Simone, Edward, Morrana, Rafaela, Fabíola, Aninha Vital, Thaizinha, Pulinha, Georgia, Sarinha e André Felipe. Por último, mas não menos importante, às minhas gatinhas Aninha, Andressa, Ianara, Ilana, Marcia e Wany, por todos os anos de amizade e principalmente por terem- me ajudado a vencer a saudade de um oceano de distância durante o período que estive em Portugal. Vocês são, na grande maioria das vezes, as responsáveis pelos meus melhores sorrisos, pelas lágrimas mais sinceras e pela esperança que persiste no coração. Amo muito cada uma de vocês e suas famílias. À CAPES, FCT e à Facepe pelo apoio financeiro. Há muito a quem agradecer, mas deixo aqui o meu reconhecido e carinhoso muito obrigada a todos que de alguma forma me apoiaram, incentivaram e contribuíram para a realização e conclusão deste trabalho. RESUMO A galactomanana extraída das sementes de C. grandis representa uma fonte alternativa para galactomananas principalmente devido à sua capacidade de