Diversidade E Bioprospecção De Fungos Presentes Em Solos Antárticos

UNIVERSIDADE FEDERAL DE OURO PRETO NÚCLEO DE PESQUISAS EM CIÊNCIAS BIOLÓGICAS PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM BIOTECNOLOGIA ELDON CARLOS QUERES GOMES DIVERSIDADE E BIOPROSPECÇÃO DE FUNGOS PRESENTES EM SOLOS ANTÁRTICOS Orientador: Prof. Dr. Luiz Henrique Rosa Coorientadora: Profa. Dra. Valéria Martins Godinho OURO PRETO MINAS GERAIS - BRASIL 2017 UNIVERSIDADE FEDERAL DE OURO PRETO NÚCLEO DE PESQUISAS EM CIÊNCIAS BIOLÓGICAS PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM BIOTECNOLOGIA ELDON CARLOS QUERES GOMES DIVERSIDADE E BIOPROSPECÇÃO DE FUNGOS PRESENTES EM SOLOS ANTÁRTICOS Dissertação apresentada à Universidade Federal de Ouro Preto, como parte das exigências do Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia, para obtenção do título de Mestre em Biotecnologia, área de concentração Biotecnologia Industrial. OURO PRETO MINAS GERAIS – BRASIL 2017 3 Q35d Queres, Eldon Carlos Gomes. Diversidade e bioprospecção de fungos presentes em solos Antárticos [manuscrito] / Eldon Carlos Gomes Queres. - 2017. 66f.: il.: color; grafs; tabs; mapas. Orientador: Prof. Dr. Luiz Henrique Rosa. Coorientadora: Profª. Drª. Valéria Martins Godinho. Dissertação (Mestrado) - Universidade Federal de Ouro Preto. Pró-Reitoria de Pesquisa e Pós-Graduação. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia. Área de Concentração: Biotecnologia Industrial. 1. Biotecnologia. 2. Fungos . 3. Fungos do solo. 4. Solos . 5. Microbiologia. I. Rosa, Luiz Henrique . II. Godinho, Valéria Martins . III. Universidade Federal de Ouro Preto. IV. Titulo. CDU: 606 Catalogação: www.sisbin.ufop.br i ii "Porque Deus tanto amou o mundo que deu o seu Filho Unigênito, para que todo o que nele crer não pereça, mas tenha a vida eterna. ” João 3:16 "Vocês são o sal da terra. Mas se o sal perder o seu sabor, como restaurá-lo? Não servirá para nada, exceto para ser jogado fora e pisado pelos homens. Vocês são a luz do mundo. Não se pode esconder uma cidade construída sobre um monte. E, também, ninguém acende uma candeia e a coloca debaixo de uma vasilha. Pelo contrário, coloca-a no lugar apropriado, e assim ilumina a todos os que estão na casa. Assim brilhe a luz de vocês diante dos homens, para que vejam as suas boas obras e glorifiquem ao Pai de vocês, que está nos céus". Mateus 5:13-16 iii COLABORAÇÕES Dr. Carlos Augusto Rosa Laboratório de Taxonomia, Biodiversidade e Biotecnologia de Leveduras Departamento de Microbiologia da Universidade Federal de Minas Gerais Dr. Carlos Leomar Zani Dra. Tânia Maria de Almeida Alves Dra. Jaquelline Germano de Oliveira Dra. Silvane Maria Fonseca Murta Dr. Policarpo Ademar Sales Junior Centro de Pesquisa René Rachou – Fiocruz (BH) Dr. Fábio Soares de Oliveira Laboratório de Geomorfologia Departamento de Geografia, Universidade Federal de Minas Gerais iv AGRADECIMENTOS Certamente não poderia deixar de agradecer a Deus por sua Graça, amor e paciência para comigo ao longo dos anos. Acima de todos e de tudo, dedico esse trabalho a Ele. A minha família, que me apoia como sempre, nem sempre sabendo do tamanho dos meus passos, mas sempre incentivando e divulgando a Biotecnologia! A minha igreja, Batista Nacional da Esperança que me incentivou e compreendeu esses momentos de ausência, sou muito grato a todos vocês! Aos meu eternos e grandes amigos, Joselma e Henrique, vocês foram e serão minhas referências, mesmo a distância e na correria da vida é como se nós estivéssemos sempre perto, afinal de contas, somos em grupo ou individualmente o Dinamus! Sou fruto desse projeto!!! Algumas pessoas foram excepcionalmente importantes ao longo desses dois anos, vamos a lista: Ao Prof. Luiz Rosa, que me confiou uma grande missão, um projeto totalmente desafiador e diferente de tudo que eu já tinha feito, esse projeto despertou o pesquisador que sempre me motivou e com toda certeza, continuará me motivando ao longo de toda minha vida acadêmica, Luiz você contribuiu muito para isso!! Á Profa. Valéria Godinho, pela coorientação, dedicação, pelas madrugadas corrigindo meus textos, pelos sábados, domingos e feriados, por me ouvir nos problemas gerais que surgiam, propondo ou não soluções, por me fazer pensar, pelos conselhos, VAL você foi essencial, muito obrigado!! As antigas ICS, hoje Biólogas (Maria Theresa, Débora, Bárbara, Gislaine), os resultados desse trabalho, reflete a dedicação de vocês! Ao #boratime, que nas madrugas loucas de produção de artigos e resumos contribuíram grandemente comigo, nessas horas, vejo que fomos mais que colegas de laboratório, minha enorme gratidão! v Aos meus Professores da Graduação (Daniela Chemim e Raquel Alvarenga) e Myriam Morato, por me ajudar e muito na época da seleção do Mestrado, vocês são minhas referências, obrigado! A toda equipe dos Endofíticos, em especial a Zé e Camila, obrigado! Ao Centro de Pesquisas René Rachou – FIOCRUZ BH (Zani, Tânia, Fátima, Alisson, Policarpo, Emerson), pelas portas abertas e pela contribuição que fez a diferença! Aos colegas do LSBF e LTBBL que me receberam muito bem e que proporcionaram horas de divertimento nos aniversariantes do mês e nas festas. Ao Prof. Fábio, que enriqueceu esse trabalho com análises extremamente importantes. Ao Prof. William Borges da UFOP (Biotecnologia), que sempre foi muito receptivo e me incentivou a entrar para o programa de Pós-graduação em Biotecnologia. A Universidade Federal de Ouro Preto, por toda a estrutura física, professores, ao programa de Pós-graduação em Biotecnologia, em especial ao Josino que me ajudou muito no relacionamento UFOP-UFMG e nas dúvidas administraticas que foram surgindo. À Universidade Federal de Minas Gerais e ao Departamento de Microbiologia pelo apoio acadêmico e institucional, a FAPEMIG, CNPq, PROANTAR, Marinha Brasileira pelo apoio logístico na realização desse projeto. vi SUMÁRIO COLABORAÇÕES ................................................................................................................ iv AGRADECIMENTOS ........................................................................................................... v LISTA DE ABREVIATURAS E SÍMBOLOS .................................................................. viii LISTA DE FIGURAS ............................................................................................................ xi LISTA DE TABELAS.......................................................................................................... xiii RESUMO .............................................................................................................................. xiv ABSTRACT ........................................................................................................................... xv 1 INTRODUÇÃO, RELEVÂNCIA E JUSTIFICATIVA .................................................................................. 1 2 REVISÃO DA LITERATURA .......................................................................................................................... 2 2.1 ANTÁRTICA ........................................................................................................................................................ 2 2.1.1 Diversidade de fungos na Antártica ............................................................................................................... 3 2.2 ESTUDO DOS SOLOS ANTÁRTICOS ....................................................................................................................... 4 2.2.1 Classificação dos solos .................................................................................................................................. 4 2.3 BIOTECNOLOGIA DE MICRO-ORGANISMOS E FUNGOS DA ANTÁRTICA ................................................................. 5 3 OBJETIVOS ....................................................................................................................................................... 7 3.1 OBJETIVO GERAL ............................................................................................................................................... 7 3.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS ..................................................................................................................................... 7 4 MATERIAIS E MÉTODOS .............................................................................................................................. 8 4.1 ÁREA DE ESTUDO ................................................................................................................................................ 8 4.2 PROCESSAMENTO, ISOLAMENTO, PURIFICAÇÃO E PRESERVAÇÃO DAS AMOSTRAS .............................................. 9 4.3 IDENTIFICAÇÃO DOS ISOLADOS ......................................................................................................................... 10 4.3.1 Fungos filamentoso e leveduras ................................................................................................................... 10 4.4 EXTRAÇÃO DNA TOTAL ................................................................................................................................... 11 4.4.1 Fungos filamentosos .................................................................................................................................... 11 4.4.2 Leveduras ..................................................................................................................................................... 12 4.5 OBTENÇÃO DOS AMPLICONS ............................................................................................................................

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