CODE REV ENREV PRODNAME LANG Replace Spaces with Underline

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EN TEST PROCEDURE Konelab™ / T Series Refer to the Reference Manual and Application Notes for an automated procedure on your Konelab analyzer. Any application which has not been validated by Thermo Fisher Scientific ALT/GPT (IFCC) Oy cannot be performance guaranteed and therefore must be evaluated by the user. Materials provided 981361 7 x 50 ml Reagents as described above. 981769 8 x 20 ml Materials required but not provided Pyridoxal-5’-phosphate (code 981839) for 3-reagent method. THIS PACKAGE INSERT IS APPLICABLE FOR USE Controls as indicated below. OUTSIDE THE US. ANY REFERENCE TO THE KONELAB SYSTEMS ALSO REFERS TO THE T SERIES. Calibration The response dA/min is converted to result units by a calculation factor. INTENDED USE Or use eCal (981830) as a calibrator according to the instructions given in the package For the in vitro quantitative determination of alanine aminotransferase (L-Alanine: insert of eCal (981830). 2-Oxoglutarate Aminotransferase (ALT), EC 2.6.1.2) activity in human serum or plasma on Konelab analyzers. All test results must be interpreted with regard to the clinical context. Quality Control Use quality control samples at least once a day and every time a new bottle of reagent is SUMMARY(1) used. Alanine aminotransferase (ALAT/ALT), formerly called glutamic pyruvic transaminase Available controls: (GPT), and Aspartate aminotransferase (ASAT/AST), formerly called glutamic oxalacetic Nortrol, code 981043 transaminase (GOT), belong to a group of enzymes, the aminotransferases or Abtrol, code 981044 transaminases, which catalyze the reversible transformation of α-keto acids into amino The Control intervals and limits must be adapted to the individual laboratory requirements. acids by transfer of amino groups. The results of the quality control samples should fall within the limits pre-set by the Both AST and ALT are normally present in human plasma, bile, cerebrospinal fluid and laboratory. saliva, but they are not found in urine unless a kidney lesion is present. In viral hepatitis and other forms of liver disease associated with hepatic necrosis, serum AST and ALT CALCULATION OF RESULTS level are elevated even before the clinical signs and symptoms of disease appear. Levels The results are calculated automatically by the Konelab analyzer as follows: of both enzymes may reach values as high as 100 times the upper reference limit, although 20- to 50- fold elevations are most frequently encountered Activity in U/l = dA/min x Factor Although serum levels of both AST and ALT become elevated whenever processes affect liver cell integrity, ALT is the more liver-specific enzyme. Increased AST levels can occur TV x 1000 in connection with damages of heart or skeletal muscle as well as of liver parenchyma. Theoretical factor = - ⎯⎯⎯⎯⎯- Serum elevation of ALT activity is rarely observed in other conditions than parenchymal 6.3 x SV x P liver disease. where: TV= Total reaction volume in ml PRINCIPLE OF THE PROCEDURE SV= Sample volume in ml ALT catalyzes the transfer of the amino group from alanine to oxoglutarate with the 6.3= Extinction coefficient of NADH at 340 nm formation of glutamate and pyruvate. Pyruvate is reduced to lactate by lactate P= Cuvette pathlength = 1 dehydrogenase (LDH). Conversion factor μkat/l = (U/l)/60

ALT If eCal (981830) is used as a calibrator, the results are calculated automatically by the L-Alanine + 2-Oxoglutarate <⎯⎯> L-Glutamate + Pyruvate Konelab analyzer using a calibration curve.

LDH LIMITATIONS OF THE PROCEDURE Pyruvate + NADH + H+ <⎯⎯> D-Lactate + NAD+ Interference In this same reaction an equivalent amount NADH is oxidized to NAD. The resulting Criterion: Recovery within ± 10% of initial values. decrease in absorbance at 340 nm is followed and is directly proportional to the activity of ALT in serum. 1-reagent method: The IFCC reference method includes pyridoxal –5’-phosphate (P-5´-P) at a level of Conjugated bilirubin: No interference found up to 420 μmol/l (24.6 mg/dl). 0.1 mmol/l, which has been shown to be sufficient to activate apo ALT in 5 minutes (2). Unconjugated bilirubin: No interference found up to 600 μmol/l (35.1 mg/dl). Hemolysate: No interference found up to 10 g/l of hemoglobin. REAGENT INFORMATION Lipemia: No interference found up to 2 g/l of Intralipid® (trademark of Fresenius Kabi AB). Reagent A: Enzyme reagent There is a poor correlation between turbidity and triglycerides concentration. Code: 981361 7 x 40 ml 3-reagent method: Code: 981769 8 x 16 ml Conjugated bilirubin: No interference found up to 420 μmol/l (24.6 mg/dl). Reagent B: Substrate Unconjugated bilirubin: No interference found up to 600 μmol/l (35.1 mg/dl). Code: 981361 7 x 10 ml Hemolysate: No interference found up to 8 g/l of hemoglobin. Code: 981769 8 x 4 ml Lipemia: No interference found up to 2 g/l of Intralipid®. For other interfering substances, please refer to the reference 4. Concentrations EXPECTED VALUES (2) Reagent A: Enzyme reagent Tris buffer, pH 7.15 137.5 mmol/l Male: < 45 U/l (< 0.74 μkat/l) at 37 °C L-Alanine 700 mmol/l Female: < 34 U/l (< 0.56 μkat/l) at 37 °C LDH > 1650 U/l The quoted values should serve as a guide only. It is recommended that each laboratory verify this range or derives a reference interval for the population that it serves. NaN3 < 0.1 % MEASURING RANGE Reagent B: Substrate 2-oxoglutarate 82.5 mmol/l 1-reagent method: NADH 1.0 mmol/l 4 - 300 U/l (0.07 – 5.00 μkat/l) NaN3 < 0.1 % Extended measuring range after secondary dilution: Note: Liquid pyridoxal-5’-phosphate is not included in the kit. It can be ordered separately 4 – 1800 U/l (0.07 – 30.00 μkat/l) by code number 981839. 3-reagent method: 5 - 250 U/l (0.08 – 4.17 μkat/l) Precautions Extended measuring range after secondary dilution: For in vitro diagnostic use only. Exercise the normal precautions required for handling all 5 – 1500 U/l (0.08 – 25.00 μkat/l) laboratory reagents. The reagents contain sodium azide as preservative. Do not swallow. Avoid contact with PERFORMANCE CHARACTERISTICS skin and mucous membranes. Detection limit Preparation 1-reagent method:

Code: 981361, 981769 2 U/l (0.03 μkat/l) reserved. hts g 1-reagent method (without P-5´-P): 3-reagent method: Add the contents of Reagent B to the bottle of Reagent A. Cap vial and mix. The monoreagent must 2 U/l (0.03 μkat/l) be protected from light! The detection limit represents the lowest measurable concentration/activity that can be 3-reagent method (with P-5´-P): distinguished from zero. It is calculated as the concentration of zero sample + 3 SD (within Reagents are ready for use. run, n=24). Note: Check that there are no bubbles in the bottleneck or on the surface of the reagent when you insert the reagent vials or vessels in the Konelab analyzer. Imprecision (result unit U/l) Storage and Stability 1-reagent method: Mean Mean Mean Reagents in unopened vials are stable at 2…8 °C until the expiration date printed on the 33 U/l 90 U/l 108 U/l label when protected from light. SD CV% SD CV% SD CV% Refer to the Application Notes of your Konelab analyzer for the on board stability of reagents. Within run 0.6 1.8 0.6 0.6 0.9 0.8 Between run 0.5 1.5 0.9 1.0 1.0 0.9 SPECIMEN COLLECTION Total 1.0 3.0 1.8 2.0 2.7 2.4

Sample Type 3-reagent method: Clear serum or heparin plasma can be used. Mean Mean Mean Precautions 31 U/l 89 U/l 109 U/l SD CV% SD CV% SD CV% Human samples should be handled and disposed of as if they were potentially infectious. Within run 0.6 1.8 0.6 0.7 1.0 0.9 Between run 0.2 0.7 0.8 0.9 0.8 0.8 Storage (3) Total 0.8 2.6 1.5 1.7 2.2 2.0 The sample can be stored for 3 days at 20…25 °C, for 7 days at 4…8 °C or for 2 days at –20 °C. A precision study was performed according to guidelines in the NCCLS Document EP5-A using Konelab 60 during 20 days, with the number of measurements being n = 80. Template: D01162_4 © 2008 Thermo Fisher Scientific Inc. All ri All Inc. Scientific Fisher Thermo © 2008 D01162_4 Template:

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Method comparison REAGENZDATEN REAGENZ A: Enzymreagenz 1-reagent method: Bestellnr.: 981361 7 x 40 ml A comparison study was performed using the NCCLS Document EP9-A as a guideline and Bestellnr.: 981769 8 x 16 ml Konelab two-reagent method as a reference. REAGENZ B: Substrat Linear regression (result unit U/l): Bestellnr.: 981361 7 x 10 ml y = 0.75 x + 2.8 Bestellnr.: 981769 8 x 4 ml r = 0.988 n = 60 The sample concentrations were between 7 and 190 U/l. Konzentrationen 3-reagent method: REAGENZ A: Enzymreagenz A comparison study was performed using the NCCLS Document EP9-A as a guideline and Tris-Puffer, pH 7.15 137.5 mmol/l Konelab two-reagent method as a reference. L-Alanin 700 mmol/l Linear regression (result unit U/l): LDH > 1650 U/l y = 1.00 x + 0.2 NaN3 < 0.1 % r = 1.00 REAGENZ B: Substrat n = 65 2-Oxoglutarat 82.5 mmol/l The sample concentrations were between 10 and 155 U/l. NADH 1.0 mmol/l NaN3 < 0.1 % The results obtained in individual laboratories may differ from the given performance data. Hinweis: BIBLIOGRAPHY Flüssiges Pyridoxal-5’-phosphat ist nicht im Kit enthalten. Es kann getrennt unter der 1. Burtis, CA and Ashwood, E R (ed.), Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry, 5th Bestellnummer 981839 bestellt werden. edition, W B Saunders Company, Philadelphia, 2001, pp. 354 - 355. 2. IFCC 2002/5: IFCC Primary Reference Procedures for the Measurement of Catalytic Sicherheitsmaßnahmen Activity Concentrations of Enzymes at 37 °C, Part. 4 Reference Procedure for the Nur zur In-vitro-Diagnose. Measurement of Catalytic Concentrations of Alanine Aminotransferase, Befolgen Sie die üblichen Sicherheitsmaßnahmen beim Umgang mit Laborreagenzien. Clin.Chem.Lab.Med. 2002, 40(7): 718-724. Die Reagenzien enthalten Natriumazid als Konservierungsmittel. Nicht verschlucken. 3. Guder WG, Narayanan S, Wisser H, Zawta B. List of Analytes; Preanalytical variables. Kontakt mit Haut und Schleimhäuten vermeiden. Brochure in: Samples: From Patient to the Laboratory. GIT Verlag GmbH, Darmstadt, 1996. Vorbereitung 4. Young, D.S., Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests, Fifth Edition, AACC Press, Bestellnr.: 981361, 981769 Washington, D.C., 3-8 – 3-23, 2000. System mit 1 Reagenz (ohne P-5´-P): Geben Sie den Inhalt von Reagenz B in die Flasche von Reagenz A. Verschließen Sie die MANUFACTURER Flasche und mischen Sie diese. Das Reagenzgemisch muss vor Lichteinwirkung Thermo Fisher Scientific Oy geschützt werden. Clinical Diagnostics Finland System mit 3 Reagenzien (mit P-5´-P): Ratastie 2, P.O. Box 100, FI-01621 Vantaa Die Reagenzien sind gebrauchsfertig. Tel. +358 9 329 100, Fax +358 9 3291 0300 HINWEIS: Darauf achten, dass sich im Flaschenhals oder an der Reagenzoberfläche www.thermo.com/konelab keine Luftblasen befinden, wenn Sie die Reagenzgefäße in das Konelab-Analysengerät einsetzen. Date of revision (yyyy-mm-dd) 2007-08-14 Lagerung und Haltbarkeit Die ungeöffneten Reagenzien sind bei 2...8 °C bis zum Ablauf des Verfallsdatums auf dem Changes from previous version Etikett haltbar, wenn sie vor Lichteinwirkung geschützt werden. Die Haltbarkeit der Reagenzien nach Einsetzen in das Konelab-Analysengerät ist in den Company name updated. entsprechenden Anwendungshinweisen enthalten. UNTERSUCHUNGSMATERIAL Probenart Es kann klares Serum oder Heparinplasma verwendet werden.

Sicherheitsmaßnahmen DE Proben, die Humanserum enthalten, sind als potenziell infektiös zu betrachten und Konelab™ / T Serie dementsprechend zu behandeln und zu entsorgen. Lagerung (3) ALT/GPT (IFCC) Die Probe kann 3 Tage lang bei 20…25 °C, 7 Tage lang bei 4…8 °C oder 2 Tage lang bei –20 °C gelagert werden.

981361 7 x 50 ml TESTDURCHFÜHRUNG 981769 8 x 20 ml Angaben zur automatischen Testdurchführung mit dem Konelab-Analysengerät entnehmen Sie bitte dem Bedienungshandbuch und den Applikationshinweisen. Bei Verwendung von Applikationen, die nicht durch Thermo Fisher Scientific Oy validiert DIESE PACKUNGSBEILAGE IST ZUR wurden, kann keine Garantie für die angegebenen Leistungsdaten übernommen werden. VERWENDUNG AUSSERHALB DER USA Für die Validation derartiger Applikationen ist daher der Anwender selbst verantwortlich. VORGESEHEN. JEDER VERWEIS AUF KONELAB- Lieferumfang SYSTEME BEINHALTET AUCH DIE T SERIE. Reagenzien, wie oben beschrieben.

ANWENDUNGSBEREICH Erforderliches, jedoch nicht im Lieferumfang enthaltenes Material Zur quantitativen In-vitro-Bestimmung der Aktivität der Alaninaminotransferase (L-Alanin: Pyridoxal-5’-phosphat (Bestellnr. 981839) für die Methode mit 3 Reagenzien. 2-Oxoglutarataminotransferase (ALT), EC 2.6.1.2) in Humanserum oder –plasma mit Kontrollen, wie nachstehend angegeben. Konelab-Analysengeräten. Alle Testergebnisse müssen mit Bezug zum klinischen Zusammenhang interpretiert werden. Kalibrierung ZUSAMMENFASSUNG (1) Die Reaktion (dE/min) wird durch einen Berechnungsfaktor in Ergebniseinheiten umgerechnet. Oder verwenden Sie eCal (981830) als Kalibrator gemäß den Anweisungen in der Die Alaninamino-transferase (ALAT/ALT) - ältere Bezeichnung Glutamat-Pyruvat- Packungsbeilage von eCal (981830). Transaminase (GPT) - und Aspartataminotransferase (ASAT/AST) - ältere Bezeichnung Glutamat-Oxalazetat-Transaminase (GOT) - gehören zu einer Gruppe von Enzymen, den Aminotransferasen bzw. Transaminasen, welche die reversible Umwandlung von α- Qualitätskontrolle Ketosäuren in Aminosäuren durch den Transfer von Aminogruppen katalysieren. Mindestens einmal täglich und bei jeder Verwendung eines neuen Reagenzfläschchens Sowohl AST als auch ALT sind in der Regel im Humanplasma, in der Gallenflüssigkeit, im eine Qualitätskontrolle durchführen. Liquor cerebrospinalis und in der Speichelflüssigkeit enthalten, aber nicht im Urin, sofern Lieferbare Kontrollen: hts reserved. reserved. hts keine Nierenläsion vorliegt. Bei der viralen Hepatitis und anderen Formen von Nortrol, Bestellnr. 981043 g Lebererkrankungen, die mit einer Lebernekrose verbunden sind, sind die AST- und ALT- Abtrol, Bestellnr. 981044 Konzentrationen im Serum bereits vor dem Auftreten von klinischen Anzeichen und Die Intervalle und Grenzen der Kontrolle müssen an die Anforderungen der einzelnen Symptomen der Erkrankung erhöht. Die Konzentrationen beider Enzyme können Werte Laboratorien angepasst werden. erreichen, die 100fach über der oberen Bezugsgrenze liegen, auch wenn 20- bis 50fache Die Ergebnisse der Qualitätskontrollen sollten innerhalb der vom Labor vorgegebenen Erhöhungen häufiger auftreten. Grenzwerte liegen. Zwar erhöhen sich die Serumkonzentrationen beider Enzyme, AST und ALT, bei allen Vorgängen, die die Integrität der Leberzellen beeinflussen, ALT weist jedoch eine höhere BERECHNUNG DER ERGEBNISSE Leberspezifität auf. Erhöhte AST-Werte können neben dem Leberparenchym auch im Die Ergebnisse werden vom Konelab-Analysengerät automatisch wie folgt errechnet: Zusammenhang mit Schädigungen des Herzmuskels oder Skelettmuskels auftreten. Eine erhöhte ALT-Aktivität im Serum tritt mit Ausnahme von parenchymatösen Aktivität in U/l = dE/min x Faktor Lebererkrankungen nur sehr selten auf. TV x 1000 TESTPRINZIP Theoretischer Faktor = - ⎯⎯⎯⎯⎯ Die ALT katalysiert den Transfer der Aminogruppe von Alanin zu Oxoglutarat, wobei 6.3 x SV x P Glutamat und Pyruvat gebildet werden. Das Pyruvat wird durch die Lactatdehydrogenase (LDH) zu Lactat reduziert. wobei: V = Gesamtes Reaktionsvolumen in ml ALT V = Probenvolumen in ml L-Alanin + 2-Oxoglutarat <⎯⎯> L-Glutamat + Pyruvat 6.3 = Extinktionskoeffizient von NADH bei 340 nm P= Pfadlänge der Küvette = 1 LDH Konversionsfaktor μkat/l = (U/l)/60 Pyruvat + NADH + H+ <⎯⎯> D-Lactat + NAD+ Wenn eCal (981830) als Kalibrator verwendet wird, werden die Ergebnisse vom Konelab- Bei der gleichen Reaktion wird eine äquivalente Menge NADH zu NAD oxidiert. Daraus resultiert Analysengerät automatisch mit einer Bezugskurve berechnet. eine Abnahme der Extinktion bei 340 nm, die direkt proportional zur Aktivität der ALT im Serum ist. Die IFCC-Referenzmethode enthält Pyridoxal–5’-phosphat (P-5´-P) in einer Konzentration von 0.1 mmol/l, die nachgewiesenermaßen ausreicht, um die Apo-ALT innerhalb von 5 Minuten zu aktivieren (2). Template: D01162_4 © 2008 Thermo Fisher Scientific Inc. All ri All Inc. Scientific Fisher Thermo © 2008 D01162_4 Template:

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GRENZEN DES VERFAHRENS Änderungen gegenüber der vorherigen Fassung: Name des Unternehmens aktualisiert. Störfaktoren Kriterium: Wiederfindung von + 10% der Ausgangswerte. System mit 1 Reagenz: Konjugiertes Bilirubin: Keine Interferenzen bei bis zu 420 μmol/l (24.6 mg/dl). Nicht-konjugiertes Bilirubin: Keine Interferenzen bei bis zu 600 μmol/l (35.1 mg/dl). Hämolysat: Keine Interferenzen bei Zugabe von Hämoglobin von bis zu 10 g/l. Lipämie: Keine Interferenzen bei Zugabe von Intralipid® von bis zu 2 g/l. (Warenzeichen der Fresenius Kabi AB). Es besteht eine schwache Korrelation zwischen der Trübung und FR der Konzentration der Triglyceride. System mit 3 Reagenzien: Konelab™ / Gamme T Konjugiertes Bilirubin: Keine Interferenzen bei bis zu 420 μmol/l (24.6 mg/dl). Nicht-konjugiertes Bilirubin: Keine Interferenzen bei bis zu 600 μmol/l (35.1 mg/dl). ALT/GPT (IFCC) Hämolysat: Keine Interferenzen bei Zugabe von Hämoglobin von bis zu 8 g/l. Lipämie: Keine Interferenzen bei Zugabe von Intralipid® von bis zu 2 g/l. 981361 7 x 50 ml Siehe Literaturhinweis 4 für weitere Substanzen, die Störfaktoren darstellen können. 981769 8 x 20 ml REFERENZBEREICHE (2) Männer: < 45 U/l (< 0.74 μkat/l) bei 37 °C CETTE NOTICE EST VALABLE POUR UTILISATION Frauen: < 34 U/l (< 0.56 μkat/l) bei 37 °C EN DEHORS DES ÉTATS-UNIS. TOUTE RÉFÉRENCE Die angegebenen Werte gelten nur als Richtlinie. Es wird empfohlen, dass jedes Labor diesen Bereich überprüft oder ein Referenzintervall für die betroffene Population ableitet. AUX SYSTÈMES KONELAB FAIT ÉGALEMENT RÉFÉRENCE À LA GAMME T. MESSBEREICH System mit 1 Reagenz: UTILISATION 4 - 300 U/l (0.07 – 5.00 μkat/l) Pour la détermination quantitative in vitro de l’activité de l’alanine aminotransférase Erweiterter Messbereich nach automatischer Verdünnung: (L-alanine : 2-oxoglutarate aminotransférase (ALT), EC 2.6.1.2) dans le sérum ou le 4 – 1800 U/l (0.07 – 30.00 μkat/l) plasma humains au moyen des analyseurs Konelab. Tous les résultats obtenus doivent être interprétés en tenant compte du contexte clinique. System mit 3 Reagenzien: 5 - 250 U/l (0.08 – 4.17 μkat/l) RÉSUMÉ (1) Erweiterter Messbereich nach automatischer Verdünnung: L’alanine aminotransférase (ALAT/ALT), précédemment désignée sous le nom de 5 – 1500 U/l (0.08 – 25.00 μkat/l) transaminase glutamique pyruvique (GPT), et l’aspartate aminotransférase (ASAT/AST), précédemment désignée sous le nom de transaminase glutamique oxalacétique (GOT), LEISTUNGSEIGENSCHAFTEN font partie d’un groupe d’enzymes, les aminotransférases ou transaminases, qui Nachweisgrenze catalysent la transformation réversible des acides α-cétoniques en acides aminés par transfert de groupes amine. System mit 1 Reagenz: L’AST et l’ALT sont toutes deux normalement présentes dans le plasma, la bile, le liquide 2 U/l (0.03 μkat/l) céphalo-rachidien et la salive humains, mais sont absents dans l’urine, sauf en présence System mit 3 Reagenzien: d’une lésion rénale. Lors d’hépatite virale et d’autres formes de pathologies hépatiques 2 U/l (0.03 μkat/l) associées à une nécrose hépatique, les concentrations sériques en AST et en ALT Die Nachweisgrenze stellt die unterste messbare Konzentration/Aktivität dar, die von null s’élèvent avant même l’apparition des signes cliniques et des symptômes de la maladie. unterschieden werden kann. Sie wird als Konzentration der Nullprobe + 3 SD (in der Serie, Les taux de ces deux enzymes peut atteindre des valeurs de jusqu’à 100 fois la limite de n=24) berechnet. référence, bien que les élévations les plus fréquentes sont de l’ordre d’un facteur 20 à 50 fois. Bien que les concentrations sériques en AST et en ALT augmentent toutes deux lors de Impräzision (Ergebnisse in U/l) tout processus affectant l’intégrité des cellules hépatiques, l’ALT est l’enzyme la plus System mit 1 Reagenz: spécifique du foie. Une élévation du taux d’AST peut survenir en association avec des lésions du cœur ou des muscles squelettiques au même titre qu’avec des lésions du Mittelwert Mittelwert Mittelwert parenchyme hépatique. Une élévation de l’activité de l’ALT sérique n’est que rarement 33 U/l 90 U/l 108 U/l observée lors de maladies autres que des pathologies du parenchyme hépatique. SD CV % SD CV % SD CV % In der Serie 0.6 1.8 0.6 0.6 0.9 0.8 PRINCIPE DE LA PROCÉDURE Von Serie zu Serie 0.5 1.5 0.9 1.0 1.0 0.9 L’ALT catalyse le transfert du groupe amine de l’alanine vers l’oxoglutarate avec formation Gesamt 1.0 3.0 1.8 2.0 2.7 2.4 de glutamate et de pyruvate. Le pyruvate est réduit en lactate par la lactate déhydrogénase (LDH). System mit 3 Reagenzien: ALT Mittelwert Mittelwert Mittelwert L-alanine + 2-oxoglutarate <⎯⎯> L-glutamate + pyruvate 31 U/l 89 U/l 109 U/l SD CV % SD CV % SD CV % LDH In der Serie 0.6 1.8 0.6 0.7 1.0 0.9 Pyruvate + NADH + H+ <⎯⎯> D-lactate + NAD+ Von Serie zu Serie 0.2 0.7 0.8 0.9 0.8 0.8 Gesamt 0.8 2.6 1.5 1.7 2.2 2.0 Au cours de cette même réaction, une quantité équivalente de NADH est oxydée en NAD. La diminution de l’absorbance à 340 nm qui en résulte est suivie et est directement Es wurde 20 Tage lang eine Präzisionsstudie gemäß NCCLS-Richtlinie EP5-A mit dem proportionnelle à l’activité de l’ALT dans le sérum. Konelab 60 durchgeführt, wobei die Anzahl der Messungen n=80 betrug. La méthode de référence IFCC inclut du pyridoxa-5’-phosphate (P-5´-P) à la concentration de 0.1 mmol/l et il a été démontré que cette concentration est suffisante pour activer l’apo Vergleich der Methoden ALT en 5 minutes (2). System mit 1 Reagenz: INFORMATIONS SUR LE RÉACTIF Es wurde eine Vergleichsstudie gemäß NCCLS-Richtlinie EP9-A mit der 2 Reagenz Réactif A : Réactif enzymatique Methode von Thermo Fisher Scientific Oy als Referenz durchgeführt. Code : 981361 7 x 40 ml Lineare Regression (Ergebnisse in U/l): Code : 981769 8 x 16 ml y = 0.75 x + 2.8 Réactif B : Substrat r = 0.988 Code : 981361 7 x 10 ml n = 60 Code : 981769 8 x 4 ml Die in den Proben enthaltenen Konzentrationen lagen zwischen 7 und 190 U/l. System mit 3 Reagenzien: Es wurde eine Vergleichsstudie gemäß NCCLS-Richtlinie EP9-A mit der 2-Reagenz- Concentrations Methode (Konelab) als Referenz durchgeführt. Réactif A : Réactif enzymatique Lineare Regression (Ergebnisse in U/l): Tampon tris, pH 7.15 137.5 mmol/l y = 1.00 x + 0.2 L-alanine 700 mmol/l r = 1.00 LDH > 1650 U/l n = 65 NaN3 < 0.1 % hts reserved. reserved. hts

Die in den Proben enthaltenen Konzentrationen lagen zwischen 10 und 155 U/l. Réactif B : Substrat g 2-oxoglutarate 82.5 mmol/l Die Ergebnisse einzelner Laboratorien können von den angegebenen Leistungsdaten NADH 1.0 mmol/l abweichen. NaN3 < 0.1 % Remarque : Le pyridoxal-5’-phosphate liquide n’est pas inclus dans le kit. Il est disponible LITERATURHINWEISE séparément sous la référence 981839. 1. Burtis, CA and Ashwood, E R (ed.), Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry, 5th edition, W B Saunders Company, Philadelphia, 2001, pp. 354 - 355. Précautions 2. IFCC 2002/5: IFCC Primary Reference Procedures for the Measurement of Catalytic Usage diagnostique in vitro uniquement. Activity Concentrations of Enzymes at 37 °C, Part. 4 Reference Procedure for the Respecter les précautions habituelles requises lors de la manipulation de tout réactif de Measurement of Catalytic Concentrations of Alanine Aminotransferase, laboratoire. Clin.Chem.Lab.Med. 2002, 40(7): 718-724. Les réactifs contiennent de l’azide de sodium en tant que conservateur. Ne pas avaler. 3. Guder WG, Narayanan S, Wisser H, Zawta B. List of Analytes; Preanalytical variables. Eviter tout contact avec la peau et les muqueuses. Brochure in: Samples: From Patient to the Laboratory. GIT Verlag GmbH, Darmstadt, 1996. Préparation 4. Young, D.S., Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests, Fifth Edition, AACC Press, Codes : 981361, 981769 Système utilisant un seul réactif (sans P-5´-P) : Washington, D.C., 3-8 – 3-23, 2000. Ajouter le contenu du réactif B dans le flacon de réactif A. Boucher le flacon et mélanger. HERSTELLER Le monoréactif doit être protégé de la lumière! Système utilisant trois réactifs (avec P-5´-P) : Thermo Fisher Scientific Oy Les réactifs sont prêts à l’emploi. Clinical Diagnostics Finland Remarque : S’assurer de l’absence de bulles au niveau du goulot du flacon ou à la surface Ratastie 2, P.O. Box 100, FI-01621 Vantaa du réactif lors de la mise en place des flacons de réactifs dans l’analyseur Konelab. Tel.: +358 9 329 100, Fax: +358 9 3291 0300 www.thermo.com/konelab Conservation et stabilité Datum der Überarbeitung (JJJJ-MM-TT) Les réactifs contenus dans les flacons scellés sont stables à 2…8 °C jusqu’à la date de péremption figurant sur l’étiquette à condition d’être protégés de la lumière. 2007-08-14

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PRÉLÈVEMENT DES ÉCHANTILLONS En triréactif :

Nature de l’échantillon Moyenne Moyenne Moyenne On peut utiliser des échantillons de sérum ou de plasma hépariné limpides. 31 U/l 89 U/l 109 U/l ET CV% ET CV% ET CV% Précautions Répétabilité 0.6 1.8 0.6 0.7 1.0 0.9 Reproductibilité 0.2 0.7 0.8 0.9 0.8 0.8 Les échantillons d’origine humaine doivent être manipulés et éliminés comme des matériaux potentiellement infectieux. Total 0.8 2.6 1.5 1.7 2.2 2.0

L’étude de précision a été menée conformément aux directives du document NCCLS EP5- Conservation (3) A sur un analyseur Konelab 60 pendant 20 jours, le nombre de mesures étant de n = 80. Les échantillon peuvent être conservés pendant 3 jours à 20…25 °C, pendant 7 jours à 4…8 °C ou pendant 2 mois à -20 °C. Comparaison de méthodes PROCÉDURE DE TEST En monoréactif : Se référer au manuel de référence et à la fiche d’application pour une description de la Une étude de comparaison a été réalisée conformément aux directives du document procédure automatisée sur l’analyseur Konelab. Toute application n’ayant pas été validée NCCLS EP9-A en utilisant comme référence la méthode utilisant deux réactifs de Konelab. par Thermo Fisher Scientific Oy, ne peut pas être garantie en ce qui concerne ses Régression linéaire (unités du résultat: U/l) : performances et doit par conséquent être évaluée par l’utilisateur. y = 0.75 x + 2.8 r = 0.988 n = 60 Matériel fourni Les concentrations des échantillons se situaient entre 7 et y 190 U/l. Réactifs comme décrits ci-dessus. En triréactif : Une étude de comparaison a été réalisée conformément aux directives du document Matériel requis mais non fourni NCCLS EP9-A en utilisant comme référence la méthode utilisant deux réactifs de Konelab. Pyridoxal-5’-phosphate (code 981839) pour la méthode utilisant trois réactifs. Régression linéaire (unités du résultat: U/l) : Contrôles comme indiqué ci-dessous. y = 1.00 x + 0.2 r = 1.00 n = 65 Calibrage Les concentrations des échantillons se situaient entre 10 et 155 U/l. La réponse (dA/min) est convertie en unités de résultat à l’aide d’un facteur de calcul. Ou utiliser eCal (981830) comme calibrateur conformément aux instructions figurant dans Les résultats obtenus dans chaque laboratoire peuvent différer de l’imprécision indiquée et la notice de eCal (981830). des données de la comparaison de méthodes.

Contrôle de qualité BIBLIOGRAPHIE Utiliser les échantillons de contrôle de qualité au moins une fois par jour et chaque fois 1. Burtis, CA and Ashwood, E R (ed.), Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry, 5th que l’on entame un nouveau flacon de réactif. edition, W B Saunders Company, Philadelphia, 2001, pp. 354 - 355. Contrôles disponibles : 2. IFCC 2002/5: IFCC Primary Reference Procedures for the Measurement of Catalytic Nortrol, code 981043 Activity Concentrations of Enzymes at 37 °C, Part. 4 Reference Procedure for the Abtrol, code 981044 Measurement of Catalytic Concentrations of Alanine Aminotransferase, Les intervalles et les limites de contrôle doivent être adaptés aux besoins de chaque Clin.Chem.Lab.Med. 2002, 40(7): 718-724. laboratoire. Les résultats des échantillons de contrôle de qualité doivent se situer dans la 3. Guder WG, Narayanan S, Wisser H, Zawta B. List of Analytes; Preanalytical variables. fourchette de tolérance prédéfinie par le laboratoire. Brochure in: Samples: From Patient to the Laboratory. GIT Verlag GmbH, Darmstadt, CALCUL DES RÉSULTATS 1996. Les résultats sont calculés automatiquement par l’analyseur Konelab de la manière 4. Young, D.S., Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests, Fifth Edition, AACC Press, suivante : Washington, D.C., 3-8 – 3-23, 2000.

Activité en U/l = dA/min x facteur FABRICANT Thermo Fisher Scientific Oy VT x 1000 Clinical Diagnostics Finland Facteur théorique = - ⎯⎯⎯⎯⎯ Ratastie 2, P.O. Box 100, FI-01621 Vantaa 6.3 x VE x L Tél. +358 9 329 100, télécopie +358 9 3291 0300 www.thermo.com/konelab où: VT = Volume réactionnel total en ml VE = Volume d’échantillon en ml Date de révision (aaaa-mm-jj) 6.3 = Coefficient d’extinction moléculaire du NADH à 340 nm L = Longueur du trajet optique dans la cuve de lecture = 1 2007-08-14 Facteur de conversion : µkat/l = (U/l)/60 Modifications par rapport à la version précédente : Si l’on utilise eCal (981830) comme calibrateur, les résultats sont calculés automatiquement par l’analyseur Konelab à l’aide d’une courbe de calibrage. Mise à jour du nom de la société. LIMITES DE LA PROCÉDURE Interférence Critère : Acceptation dans les limites de ± 10 % des valeurs initiales. En monoréactif : Bilirubine conjuguée : Aucune interférence observée jusqu’à 420 µmol/l (24.6 mg/dl). Bilirubine non conjuguée : Aucune interférence observée jusqu’à 600 µmol/l (35.1 mg/dl). Hémolysat : Aucune interférence observée jusqu’à 10 g/l d’hémoglobine. Lipémie : Aucune interférence observée jusqu’à 2 g/l d’Intralipid® (marque de Fresenius Kabi AB). Il existe une faible corrélation entre turbidité et concentration en triglycérides. En triréactif : Bilirubine conjuguée : Aucune interférence observée jusqu’à 420 μmol/l (24.6 mg/dl). Bilirubine non conjuguée : Aucune interférence observée jusqu’à 600 μmol/l (35.1 mg/dl). Hémolysat: : Aucune interférence observée jusqu’à 8 g/l d’hémoglobine. Lipémie : Aucune interférence observée jusqu’à 2 g/l d’Intralipid®. Pour les autres substances interférentes, se reporter à la référence 4. VALEURS ATTENDUES (2) Hommes : < 45 U/l (< 0.74 µkat/l) à 37 °C Femmes : < 34 U/l (< 0.56 µkat/l) à 37 °C Les valeurs citées sont données à titre indicatif uniquement. Il est recommandé que chaque laboratoire établisse les valeurs physiologiques pour la population qui constitue sa clientèle. hts reserved. reserved. hts DOMAINE DE MESURE g En monoréactif : 4 – 300 U/l (0.07 – 5.00 µkat/l) Domaine de mesure étendu après dilution secondaire: 4 – 1800 U/l (0.07 – 30.00 µkat/l) En triréactif : 5 - 250 U/l (0.08 – 4.17 μkat/l) Domaine de mesure étendu après dilution secondaire: 5 – 1500 U/l (0.08 – 25.00 μkat/l) CARACTÉRISTIQUES EN MATIÈRE DE PERFORMANCES Limite de détection En monoréactif : 2 U/l (0.03 µkat/l) En triréactif : 2 U/l (0.03 μkat/l) La limite de détection représente la plus faible concentration/activité mesurable qu’il est possible de distinguer de zéro. Elle est calculée comme la concentration d’un échantillon zéro + 3 ET (répétabilité, n=24).

Imprécision (unité du résultat: U/l) En monoréactif : Moyenne Moyenne Moyenne 33 U/l 90 U/l 108 U/l ET CV% ET CV% ET CV% Répétabilité 0.6 1.8 0.6 0.6 0.9 0.8 Reproductibilité 0.5 1.5 0.9 1.0 1.0 0.9 Total 1.0 3.0 1.8 2.0 2.7 2.4 ri All Inc. Scientific Fisher Thermo © 2008 D01162_4 Template:

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CS POSTUP TESTU Údaje o automatizovaném postupu práce na analyzátoru Konelab naleznete v Konelab™/Série T Referenčním manuálu a aplikačních poznámkách. Nelze zaručit provedení žádné aplikace, která nebyla validována společnosti Thermo Fisher Scientific Oy. Taková ALT/GPT (IFCC) aplikace proto musí být hodnocena uživatelem.

981361 7 x 50 ml Dodané materiály 981769 8 x 20 ml Reagencia uvedená výše.

Potřebné materiály, které se dodávají zvlášť TATO PŘÍBALOVÁ INFORMACE JE URČENA PRO Pyridoxal–5’-fosfát (kód 981839) pro metodu se třemi reagencii. POUŽITÍ MIMO ÚZEMÍ USA. KAŽDÁ ZMÍNKA O Kontrolní materiály uvedené dále. SYSTÉMECH KONELAB SE ROVNĚŽ TÝKÁ SÉRIE T. Kalibrace Reakce dA/min je přepočtena pomocí faktoru výpočtu na výsledné jednotky. URČENÉ POUŽITÍ Nebo použijte jako kalibrátor eCal (981830), a to v souladu s návodem uvedeným na Pro kvantitativní stanovení aktivity alaninaminotransferázy (L-alanin: 2-oxoglutarát příbalovém letáku eCal (981830). aminotransferázy (ALT), EC 2.6.1.2) in vitro v lidském séru nebo plazmě na analyzátorech Konelab. Všechny výsledky testů musejí být interpretovány s ohledem na klinický kontext. Řízení jakosti SHRNUTÍ (1) Používejte vzorky pro řízení jakosti alespoň jednou denně a pokaždé, když použijete Alaninaminotransferáza (ALAT/ALT), dříve nazývaná glutamát-pyruvát transamináza novou lahvičku reagens. (GPT), a asparátaminotransferáza (ASAT/AST), dříve nazývaná glutamát-oxalacetát Dostupné kontrolní materiály: transamináza (GOT), patří do skupiny enzymů aminotransferáz nebo transamináz, které Nortrol, kód 981043 katalyzují reverzibilní transformaci α-keto kyselin na aminokyseliny pomocí přenosu Abtrol, kód 981044 aminoskupin. Intervaly a limity kontrolních materiálů musejí být upraveny podle požadavků jednotlivých AST a ALT jsou běžně přítomné v lidské plazmě, žluči, mozkomíšní tekutině a slinách, laboratoří. Výsledky vzorků pro řízení jakosti by měly vyhovovat limitním hodnotám nevyskytují se však v moči, pokud pacient není postižen lézí ledvin. U virové hepatitidy a přednastaveným laboratoří. dalších forem jaterních onemocnění, při nichž dochází k nekróze jater, je hladina AST a ALT zvýšená ještě před tím, než se projeví klinické příznaky a symptomy onemocnění. VÝPOČET VÝSLEDKŮ Hladiny obou enzymů mohou dosáhnout hodnot až stonásobně vyšších než horní Výsledky jsou automaticky vypočteny analyzátorem Konelab, a to dále uvedeným referenční limit, i když nejčastěji se vyskytuje dvaceti až padesátinásobné zvýšení. způsobem: I když se hladiny AST a ALT v séru zvyšují vždy, když procesy postihnou integritu jaterních buněk, ALT je enzym, který je charakterističtější pro játra. Zvýšené hladiny AST Aktivita v U/l = dA/min x Faktor se mohou projevit v souvislosti s poškozením srdce nebo kosterních svalů a jaterního parenchymu. Zvýšení aktivity ALT v séru se vyskytuje v jiných případech než u TV x 1000 onemocnění jaterního parenchymu jen vzácně. Teoretický faktor = - ⎯⎯⎯⎯⎯- 6.3 x SV x P PRINCIP POSTUPU ALT katalyzuje přenos aminoskupin z alaninu na oxoglutarát, při němž se vytváří glutamát kde: TV = Celkový reakční objem v ml a pyruvát. Pyruvát je redukován na laktát pomocí laktát dehydrogenázy (LDH). SV = Objem vzorku v ml 6.3= Extinkční koeficient NADPH při 340 nm ALT P = Optická tloušťka kyvety = 1 L-Alanin + 2-Oxoglutarát <⎯⎯> L-Glutamát + Pyruvát Faktor přepočtu μkat/l = (U/l)/60 Je-li použit jako kalibrátor eCal (981830), jsou výsledky vypočteny analyzátorem Konelab LDH automaticky pomocí kalibrační křivky. Pyruvát + NADH + H+ <⎯⎯> D-Laktát + NAD+ OMEZENÍ POSTUPU V téže reakci je ekvivalentní množství NADH oxidováno na NAD. Je sledováno výsledné snížení absorbance při 340 nm, které je přímo úměrné aktivitě ALT v séru. Součástí referenční metody IFCC je pyridoxal–5’-fosfát (P-5´-P) v množství 0.1 mmol/l, o Interference němž bylo dokázáno, že je dostatečné pro aktivaci apo ALT během 5 minut (2). Kritérium: Recovery v rozpětí ± 10% počátečních hodnot. Metoda s jedním reagens: INFORMACE O REGENCIÍCH Konjugovaný bilirubin: Až do 420 μmol/l (24.6 mg/dl) nebyla zjištěna interference. Reagens A: Enzymatické reagens Nekonjugovaný bilirubin: Až do 600 μmol/l (35.1 mg/dl) nebyla zjištěna interference. Kód: 981361 7 x 40 ml Hemolyzát: Až do 10 g/l hemoglobinu nebyla zjištěna interference. Kód: 981769 8 x 16 ml Lipémie: Až do 2 g/l přípravku Intralipid® (ochranná známka společnosti Fresenius Kabi AB) Reagens B: Substrát nebyla zjištěna interference. Mezi turbiditou a koncentrací triglyceridů existuje nízká korelace. Kód: 981361 7 x 10 ml Metoda se třemi reagencii: Kód: 981769 8 x 4 ml Konjugovaný bilirubin: Až do 420 μmol/l (24.6 mg/dl) nebyla zjištěna interference. Nekonjugovaný bilirubin: Až do 600 μmol/l (35.1 mg/dl) nebyla zjištěna interference. Hemolyzát: Až do 8 g/l hemoglobinu nebyla zjištěna interference. Koncentrace Lipémie: Až do 2 g/l přípravku Intralipid® nebyla zjištěna interference. Reagens A: Enzymatické reagens Údaje o dalších interferujících látkách naleznete v odkazu č. 4. Pufr TRIS, pH 7.15 137.5 mmol/l L-Alanin 700 mmol/l PŘEDPOKLÁDANÉ HODNOTY (2) LDH > 1 650 U/l Muži: < 45 U/l (< 0.74 μkat/l) při 37 °C NaN3 < 0.1 % Ženy: < 34 U/l (< 0.56 μkat/l) při 37 °C Uvedené hodnoty by měly sloužit pouze jako vodítko. Doporučuje se, aby každá laboratoř toto Reagens B: Substrát rozpětí ověřila nebo odvodila referenční interval pro populaci, jíž poskytuje služby. 2-Oxoglutarát 82.5 mmol/l NADH 1.0 mmol/l ROZPĚTÍ MĚŘENÍ NaN3 < 0.1 % Metoda s jedním reagens: 4 - 300 U/l (0.07 – 5.00 μkat/l) Poznámka: Tekutý pyridoxal-5’-fosfát není součástí soupravy. Je možné jej objednat Rozšířené rozpětí měření po sekundárním ředění: samostatně, číselný kód 981839. 4 – 1 800 U/l (0.07 – 30.00 μkat/l) Metoda se třemi reagencii: 5 - 250 U/l (0.08 – 4.17 μkat/l) Zvláštní opatření Rozšířené rozpětí měření po sekundárním ředění: Určeno pouze pro diagnostické použití in vitro. Používejte běžná bezpečnostní opatření 5 – 1 500 U/l (0.08 – 25.00 μkat/l) vyžadovaná pro manipulaci se všemi laboratorními reagencii. Reagens obsahuje jako konzervační látku azid sodný. Nepolykejte. Zabraňte kontaktu CHARAKTERISTIKY ÚČINNOSTI s kůží a sliznicemi. Limitní hodnota detekce Příprava Metoda s jedním reagens: Kód: 981361, 981769 2 U/l (0.03 μkat/l) hts reserved. reserved. hts

Metoda s jedním reagens (bez P-5´-P): Metoda se třemi reagencii: g Obsah reagens B přidejte do lahvičky s reagens A. Lahvičku uzavřete a její obsah promíchejte. 3 U/l (0.03 μkat/l) Monoreagens je nutné chránit před světlem! Limitní hodnota detekce představuje nejnižší měřitelnou koncentraci/aktivitu, kterou lze Metoda se třemi reagencii (s P-5´-P): odlišit od nulové hodnoty. Vypočítává se jako koncentrace nulového vzorku + 3 SD Reagencia jsou připravena k použití. (v rámci série, n = 24). Poznámka: Překontrolujte, zda při vkládání lahviček nebo nádob s reagencii do analyzátoru Konelab nejsou v hrdle lahvičky nebo na povrchu reagens bubliny. Nepřesnost (výsledky v jednotkách U/l) Metoda s jedním reagens: Uchovávání a stabilita Reagencie v neotevřených lahvičkách jsou stabilní při teplotě 2…8 °C, jsou-li uchovávány Střední hodnota Střední hodnota Střední hodnota ve tmě, a to do data ukončení použitelnosti vytištěného na štítku. 33 U/l 90 U/l 108 U/l Údaje o stabilitě reagencií „on-board“ naleznete v aplikačních poznámkách svého SD % CV SD % CV SD % CV analyzátoru Konelab. V rámci série 0.6 1.8 0.6 0.6 0.9 0.8 Mezi sériemi 0.5 1.5 0.9 1.0 1.0 0.9 ODBĚR VZORKŮ Celkem 1.0 3.0 1.8 2.0 2.7 2.4

Typ vzorků Metoda se třemi reagencii: Lze použít čisté sérum nebo heparinizovanou plazmu. Střední hodnota Střední hodnota Střední hodnota 31 U/l 89 U/l 109 U/l Zvláštní opatření SD % CV SD % CV SD % CV S lidskými vzorky je nutné nakládat a likvidovat je, jako by byly potenciálně infekční. V rámci série 0.6 1.8 0.6 0.7 1.0 0.9 Mezi sériemi 0.2 0.7 0.8 0.9 0.8 0.8 Uchovávání (3) Celkem 0.8 2.6 1.5 1.7 2.2 2.0 Vzorek lze uchovávat po dobu 3 dnů při teplotě 20…25 °C, po dobu 7 dnů při teplotě 4…8 °C nebo 2 dny při teplotě –20 °C. Byla provedena studie přesnosti podle směrnic v dokumentu NCCLS EP5-A pomocí Konelabu 60 trvající 20 dní, v níž byl počet měřených vzorků n = 80. Template: D01162_4 © 2008 Thermo Fisher Scientific Inc. All ri All Inc. Scientific Fisher Thermo © 2008 D01162_4 Template:

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Srovnání metod Κωδικός: 981769 8 x 16 ml Αντιδραστήριο Β: Υπόστρωμα Metoda s jedním reagens: Κωδικός: 981361 7 x 10 ml Byla provedena srovnávací studie, při níž byl jako směrnice použit dokument NCCLS EP9- Κωδικός: 981769 8 x 4 ml A a metoda se dvěma reagens pomocí analyzátoru Konelab jako metoda referenční. Lineární regrese (jednotky výsledku U/l): y = 0.75 x + 2.8 Συγκεντρώσεις r = 0.988 Αντιδραστήριο Α: Αντιδραστήριο ενζύμου n = 60 Ρυθμιστικό διάλυμα Tris, pH 7.15 137.5 mmol/l Koncentrace vzorků se pohybovaly v rozmezí 7 až 190 U/l. L-Αλανίνη 700 mmol/l Metoda se třemi reagencii: LDH > 1650 U/l. Byla provedena srovnávací studie, při níž byl jako směrnice použit dokument NCCLS EP9- NaN3 < 0.1 % A a metoda Konelab se dvěma reagencii jako metoda referenční. Αντιδραστήριο Β: Υπόστρωμα Lineární regrese (jednotky výsledku U/l): 2-Οξογλουταρικό 82.5 mmol/l y = 1.00 x + 0.2 NADH 1.0 mmol/l r = 1.00 NaN3 < 0.1 % n = 65 Koncentrace vzorků se pohybovaly v rozmezí 10 až 155 U/l. Σημείωση: Η υγρή πυριδοξάλη-5'-φωσφορική δεν περιλαμβάνεται στο κιτ. Μπορεί να γίνει ξεχωριστή Výsledky získané v jednotlivých laboratořích se mohou od uvedených dat účinnosti lišit. παραγγελία με τον κωδικό αριθμό 981839.

SEZNAM LITERATURY Προφυλάξεις 1. Burtis, CA and Ashwood, E R (ed.), Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry, 5th Για in vitro διαγνωστική χρήση μόνον. edition, W B Saunders Company, Philadelphia, 2001, pp. 354 - 355. Εφαρμόζετε τις κανονικές προφυλάξεις που απαιτούνται για το χειρισμό όλων των 2. IFCC 2002/5: IFCC Primary Reference Procedures for the Measurement of Catalytic εργαστηριακών αντιδραστηρίων. Activity Concentrations of Enzymes at 37 °C, Part. 4 Reference Procedure for the Τα αντιδραστήρια περιέχουν νατραζίδιο ως συντηρητικό. Μην καταπίνετε. Αποφύγετε την επαφή Measurement of Catalytic Concentrations of Alanine Aminotransferase, με το δέρμα και με τους βλεννογόνους. Clin.Chem.Lab.Med. 2002, 40(7): 718-724. 3. Guder WG, Narayanan S, Wisser H, Zawta B. List of Analytes; Preanalytical variables. Προετοιμασία Brochure in: Samples: From Patient to the Laboratory. GIT Verlag GmbH, Darmstadt, Κωδικός: 981361, 981769 1996. Σύστημα ενός αντιδραστηρίου (χωρίς την P-5΄-P): 4. Young, D.S., Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests, Fifth Edition, AACC Press, Προσθέστε το περιεχόμενο του Αντιδραστηρίου B, στη φιάλη του Αντιδραστηρίου A. Κλείστε το πώμα του φιαλιδίου και αναμίξτε. Το μονοαντιδραστήριο πρέπει να Washington, D.C., 3-8 – 3-23, 2000. προστατευτεί από το φως! Σύστημα τριών αντιδραστηρίων (με την P-5΄-P): VÝROBCE Τα αντιδραστήρια είναι έτοιμα προς χρήση. Thermo Fisher Scientific Oy Σημείωση: Ελέγξτε ότι δεν υπάρχουν φυσαλίδες στο λαιμό ή στην επιφάνεια του φιαλιδίου Clinical Diagnostics Finland αντιδραστηρίου όταν εισάγετε τα φιαλίδια ή τα δοχεία αντιδραστηρίων στην αναλυτή Ratastie 2, P.O. Box 100, FI-01621 Vantaa Konelab. Tel.: +358 9 329 100, Fax: +358 9 3291 0300 www.thermo.com/konelab Αποθήκευση και Σταθερότητα Datum revize (rrrr-mm-dd) Τα αντιδραστήρια σε φιαλίδια που δεν έχουν ανοιχτεί είναι σταθερά στους 2... 8 °C μέχρι την ημερομηνία λήξης που αναγράφεται στην ετικέτα και εφόσον διατηρούνται μακριά από το φως. 2007-08-14 Ανατρέξτε στις Σημειώσεις Εφαρμογών του αναλυτή Konelab για την σταθερότητα των αντιδραστηρίων όταν αυτά είναι φορτωμένα στο μηχάνημα. Změny oproti předchozí verz: Název společnosti byl aktualizován. ΔΕΙΓΜΑΤΟΛΗΨΙΑ Τύπος δείγματος Μπορεί να χρησιμοποιηθεί διαυγής ορός ή ηπαρινισμένο πλάσμα.

Προφυλάξεις Τα ανθρώπινα δείγματα πρέπει να χρησιμοποιούνται και να απορρίπτονται σαν να ήταν δυνητικά μολυσματικά. EL Αποθήκευση (3) Konelab™ / ΣειράT Τα δείγματα μπορούν να αποθηκευτούν για 3 ημέρες στους 20…25 °C, για 7 ημέρες στους 4…8 °C ή για 2 μέρες στους –20 °C. ALT / GPT (IFCC) ΔΙΑΔΙΚΑΣΙΑ ΕΚΤΕΛΕΣΗΣ ΕΞΕΤΑΣΗΣ Ανατρέξτε στα φυλλάδια του Εγχειριδίου Αναφοράς και των Σημειώσεων Εφαρμογών για 981361 7 x 50 ml μια αυτοματοποιημένη διαδικασία του αναλυτή σας Konelab. Η καλή λειτουργία οποιασδήποτε εφαρμογής που δεν έχει επικυρωθεί από την Thermo Fisher Scientific Oy 981769 8 x 20 ml της Φιλανδίας, δεν μπορεί να έχει εγγύηση απόδοσης και επομένως πρέπει να εκτιμηθεί ΑΥΤΟ ΤΟ ΕΝΘΕΤΟ ΣΥΣΚΕΥΑΣΙΑΣ ΠΡΟΤΙΘΕΤΑΙ ΓΙΑ από το χρήστη. ΧΡΗΣΗ ΕΚΤΟΣ ΤΩΝ ΗΠΑ. ΟΠΟΙΑΔΗΠΟΤΕ Παρεχόμενα Υλικά ΑΝΑΦΟΡΑ ΣΤΑ ΣΥΣΤΗΜΑΤΑ KONELAB Αντιδραστήρια όπως περιγράφονται παραπάνω. ΑΝΑΦΕΡΕΤΑΙ ΕΠΙΣΗΣ ΣΤΗ ΣΕΙΡΑ T. Υλικό που απαιτείται αλλά δεν παρέχεται ΠΡΟΟΡΙΖΟΜΕΝΗ ΧΡΗΣΗ Πυριδοξάλη-5'-φωσφορική (κωδικός 981839) για το σύστημα τριών αντιδραστηρίων. Για τον in vitro ποσοτικό προσδιορισμό της αμινοστρανφεράνσης της αλανίνης Δείγματα ποιοτικού ελέγχου όπως περιγράφεται παρακάτω. (L- Αλανίνη: διοξογλουταρική αμινοστρανσφεράση (ALT), EC 2.6.1.2) ενεργότητα στον ανθρώπινο ορό ή το πλάσμα σε αναλυτές Konelab. Όλα τα αποτελέσματα της εξέτασης Βαθμονόμηση πρέπει να ερμηνεύονται σε σχέση με το κλινικό περιβάλλον. Η απόκριση dA/min μετατρέπεται σε μονάδες αποτελέσματος από έναν παράγοντα υπολογισμού. Ή χρησιμοποιήστε το eCal (981830) ως βαθμονομητή σύμφωνα με τις οδηγίες που ΠΕΡΙΛΗΠΤΙΚΑ (1) αναγράφονται στο ένθετο συσκευασίας του eCal (981830). Η αμινοτρανσφεράση της ασπαρτάμης (ASAT/AST), που ονομαζόταν παλιότερα γλουταμική οξαλοξεική τρανσαμινάση (GOT) και η αμινοτρανσφεράση της αλανίνης (ALAT/ALT), που ονομαζόταν παλιότερα γλουταμική πυρουβική τρανσαμινάση (GPT) Ποιοτικός Έλεγχος ανήκουν σε μια ομάδα ενζύμων, τις αμινοτρανσφεράσες ή τρανσαμινάσες που καταλύουν Χρησιμοποιήστε δείγματα ποιοτικού ελέγχου τουλάχιστον μια φορά την ημέρα και κάθε την αναστρέψιμη μετατροπή των α-κετο οξέων σε αμινοξέα με μεταφορά των αμινομάδων. φορά που χρησιμοποιείται καινούργια φιάλη αντιδραστηρίου. Τόσο η AST όσο και η ALT βρίσκονται συνήθως στο ανθρώπινο πλάσμα, τη χολή, στο Διαθέσιμα δείγματα ποιοτικού ελέγχου: εγκεφαλονωτιαίο υγρό και στο σίελο, αλλά όχι και στα ούρα εκτός κι αν παρατηρείται Nortrol, κωδικός 981043 κάποια νεφρική πάθηση. Στην ιογενή ηπατίτιδα και σε άλλες μορφές παθήσεων του Abtrol, κωδικός 981044

Τα διαστήματα και τα όρια των Υλικών ελέγχου πρέπει να προσαρμόζονται στις reserved. hts

ήπατος που σχετίζονται με ηπατική νέκρωση, το επίπεδο του ορού AST και ALT αυξάνεται g πριν καν εμφανιστούν οι κλινικές ενδείξεις και τα συμπτώματα της πάθησης. Τα επίπεδα απαιτήσεις των ξεχωριστών εργαστηρίων. και των δύο ενζύμων μπορούν να φτάσουν σε επίπεδο ως και 100 φορές υψηλότερο από Τα αποτελέσματα των δειγμάτων ποιοτικού ελέγχου πρέπει να εμπίπτουν εντός των ορίων το ανώτατο όριο αναφοράς, αν και αυξήσεις ως και 20 ή 50 φορές προς τα πάνω είναι που έχει προκαθορίσει το εργαστήριο. αρκετά συνηθισμένο φαινόμενο. Αν και τα επίπεδα ορού τόσο της AST όσο και της ALT αυξάνονται κατά τη διάρκεια ΥΠΟΛΟΓΙΣΜΟΣ ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΩΝ διαδικασιών που επηρεάζουν την ακεραιότητα των ηπατικών κυττάρων, η ALT είναι το Τα αποτελέσματα υπολογίζονται αυτομάτως από τον αναλυτή Konelab ως εξής: ένζυμο εκείνο που εξαρτάται κυρίως από το ήπαρ. Αυξημένα επίπεδα AST μπορούν να παρουσιαστούν σε σχέση με καρδιακές ή μυοσκελετικές βλάβες, καθώς και με ηπατικό Ενεργότητα σε U/l = Παράγων x (dA/min) παρέγχυμα. Η αύξηση της ενεργότητας της ALT στον ορό παρατηρείται σπάνια σε άλλες περιστάσεις, εκτός της παρεγχυματικής ηπατικής πάθησης. TV x 1000 Θεωρητικός παράγοντας = - ⎯⎯⎯⎯⎯- ΑΡΧΗ ΤΗΣ ΜΕΘΟΔΟΥ 6.3 x SV x P

Η ALT καταλύει την μεταφορά της αμινομάδας από αλανίνη σε οξογλουταρικό μέσα από το σχηματισμό γλουταμικού και πυροσταφυλικού. Το πυροσταφυλικό μειώνεται σε όπου: TV = Ολικός όγκος αντίδρασης σε ml γαλακτικό άλας μέσω γαλακτικής υδρογονάσης (LDH). SV = Όγκος δείγματος σε ml 6.3 = Συντελεστής εξασθένησης του NADH στα 340 nm ALT P = Μήκος διαδρομής κυψελίδας = 1 L-Αλανίνη + 2-Οξογλουταρικό <⎯⎯> L-Γλουταμικό + Πυροσταφυλικό Παράγων μετατροπής μkat/l = (U/l)/60 LDH + + Πυροσταφυλικό + NADH + H <⎯⎯> D-Γαλακτικό + NAD Αν το eCal (981830) χρησιμοποιείται ως βαθμονομητής, τα αποτελέσματα υπολογίζονται

Στην ίδια αντίδραση, ένα ίσο ποσό NADH οξειδώνεται σε NAD. Η συνεπαγόμενη μείωση της αυτομάτως από τον αναλυτή Konelab με χρήση καμπύλης βαθμονόμησης. απορρόφησης στα 340nm ακολουθείται και είναι ευθέως ανάλογη με την ενεργότητα της ALT στον ορό. ΠΕΡΙΟΡΙΣΜΟΙ ΤΗΣ ΜΕΘΟΔΟΥ Η μέθοδος αναφοράς IFCC περιλαμβάνει πυριδοξάλη 5'-φωσφορική (P-5΄-P) σε επίπεδο 0,1 mmol/l, το οποίο φαίνεται πως αρκεί για να ενεργοποιήσει απο-ALT σε πέντε λεπτά (2). Παρεμβολές Κριτήριο: Ανάκτηση εντός + 10% των αρχικών τιμών. ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ ΑΝΤΙΔΡΑΣΤΗΡΙΩΝ Σύστημα ενός αντιδραστηρίου: Αντιδραστήριο Α: Αντιδραστήριο ενζύμου

Συζευγμένη χολερυθρίνη: Δε βρέθηκε παρεμβολή έως 420 μmol/l (24.6 mg/dl). ri All Inc. Scientific Fisher Thermo © 2008 D01162_4 Template: Κωδικός: 981361 7 x 40 ml Ασύζευκτη χολερυθρίνη: Δε βρέθηκε παρεμβολή έως 600 μmol/l (35.1 mg/dl).

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Άλας αιμολυσίνης: Δεν βρέθηκε παρεμβολή μέχρι 10 g/l αιμοσφαιρίνης. ES Λιπαιμία: Δε βρέθηκε παρεμβολή μέχρι 2 g/l Intralipid® (εμπορικό σήμα της Fresenius Kabi AB). Υπάρχει μικρή συσχέτιση ανάμεσα στη θολερότητα και τη συγκέντρωση τριγλυκεριδίων. Konelab™ / Serie T Σύστημα τριών αντιδραστηρίων Συζευγμένη χολερυθρίνη: Δε βρέθηκε παρεμβολή έως 420 μmol/l (24.6 mg/dl). Ασύζευκτη χολερυθρίνη: Δε βρέθηκε παρεμβολή έως 600 μmol/l (35.1 mg/dl). ALT/GPT (IFCC) Άλας αιμολυσίνης: Δεν βρέθηκε παρεμβολή μέχρι 8 g/l αιμοσφαιρίνης. Λιπαιμία: Δε βρέθηκε παρεμβολή μέχρι 2g/l Intralipid®. 981361 7 x 50 ml Για άλλες παρεμβαλλόμενες ουσίες, παρακαλούμε να ανατρέξετε στην παραπομπή 4. 981769 8 x 20 ml ΑΝΑΜΕΝΟΜΕΝΕΣ ΤΙΜΕΣ (2) ESTE PROSPECTO ES PARA USO FUERA DE EE.UU. Άρρεν: < 45 U/l (< 0.74 μkat/l) στους 37 °C Θήλυ: < 34 U/l (< 0.56 μkat/l) στους 37 °C TODAS LAS REFERENCIAS A LOS SISTEMAS Οι προαναφερθείσες τιμές πρέπει να εκλαμβάνονται ως οδηγός μόνον. Συνιστάται το κάθε εργαστήριο να διεξάγει την επαλήθευση αυτού του εύρους τιμών ή να παράγει ένα KONELAB SE REFIEREN TAMBIÉN A LA SERIE T. διάστημα αναφοράς για τον πληθυσμό με τον οποίο ασχολείται. INDICACIONES ΕΥΡΟΣ ΜΕΤΡΗΣΗΣ Para la determinación cuantitativa in vitro en analizadores Konelab de la actividad de la Σύστημα ενός αντιδραστηρίου: alanina aminotransferasa (L-alanina: 2-oxoglutarato aminotransferasa (ALT), EC 2.6.1.2) 4 - 300 U/l (0.07 – 5.00 μkat/l) en suero o plasma humanos. Todos los resultados del test deben interpretarse en función Εκτεταμένο εύρος μέτρησης μετά από δευτερογενή αραίωση: del contexto clínico. 4 – 1800 U/l (0.07 – 30.00 μkat/l) Σύστημα τριών αντιδραστηρίων RESUMEN (1) 5 -250 U/l (0,08 – 4,17 μkat/l) La alanina aminotransferasa (ALAT/ALT), antes denominada transaminasa glutámica pirúvica Εκτεταμένο εύρος μέτρησης μετά από δευτερογενή αραίωση: (GPT), y la aspartato aminotransferasa (ASAT/AST), antes denominada transaminasa 5 – 1500 U/l (0.08 – 25.00 μkat/l) glutámica oxalacética (GOT), pertenecen a un grupo de enzimas, las aminotransferasas o transaminasas, que catalizan la transformación reversible de α-cetoácidos en aminoácidos ΧΑΡΑΚΤΗΡΙΣΤΙΚΑ ΕΚΤΕΛΕΣΗΣ mediante la transferencia de grupos amino. La ALT y la AST están presentes normalmente en el plasma, la bilis, el líquido Όριο ανίχνευσης cefalorraquídeo y la saliva humanos, pero no se encuentran en la orina a menos que haya Σύστημα ενός αντιδραστηρίου: una lesión renal. En la hepatitis vírica y en otras enfermedades hepáticas asociadas a 2 U/l (0.03 μkat/l) necrosis hepática, se observa un aumento del nivel de ALT y AST en suero incluso antes Σύστημα τριών αντιδραστηρίων de la aparición de los signos y síntomas clínicos de la enfermedad. Los niveles de ambas 2 U/l (0.03 μkat/l) enzimas pueden alcanzar valores de hasta 100 veces el límite máximo de referencia, Το όριο ανίχνευσης αντιπροσωπεύει τη χαμηλότερη συγκέντρωση/ενεργότητα που μπορεί aunque lo más frecuente es encontrar aumentos de 20 a 50 veces superiores. να μετρηθεί και να διακριθεί από το μηδέν. Υπολογίζεται ως η συγκέντρωση του δείγματος Aunque los niveles séricos de AST y ALT son elevados siempre que algún proceso afecta μηδέν + 3 SD (εντός της εκτέλεσης, n=24). a la integridad de las células hepáticas, la ALT es la enzima hepática más específica. Pueden darse niveles elevados de AST en presencia de daños en el músculo cardiaco o esqueletal, así como de parenquima hepático. Rara vez se observa una elevación sérica Ανακρίβεια (μονάδα αποτελεσμάτων U/l) de la actividad de ALT en trastornos distintos de la enfermedad parenquimática hepática. Σύστημα ενός αντιδραστηρίου: Μέση τιμή Μέση τιμή Μέση τιμή PRINCIPIO DEL PROCEDIMIENTO 33 U/l 90 U/l 108 U/l La ALT cataliza la transferencia del grupo amino de la alanina al oxoglutarato con la SD CV% SD CV% SD CV% formación de glutamato y piruvato. La lactato deshidrogenasa (LDH) reduce el piruvato a Εντός κύκλου 0.6 1.8 0.6 0.6 0.9 0.8 lactato. Μεταξύ κύκλων 0.5 1.5 0.9 1.0 1.0 0.9 Συνολικό 1.0 3.0 1.8 2.0 2.7 2.4 ALT L-alanina + 2-oxoglutarato <⎯⎯> L-glutamato + Piruvato Σύστημα τριών αντιδραστηρίων: LDH Μέση τιμή Μέση τιμή Μέση τιμή + + 31 U/l 89 U/l 109 U/l Piruvato + NADH + H <⎯⎯> D-lactato + NAD SD CV% SD CV% SD CV% En esta misma reacción, una cantidad equivalente de NADH se oxida a NAD, lo que Εντός κύκλου 0.6 1.8 0.6 0.7 1.0 0.9 produce una disminución de la absorbencia a 340 nm directamente proporcional a la Μεταξύ κύκλων 0.2 0.7 0.8 0.9 0.8 0.8 actividad de la ALT sérica. Συνολικό 0.8 2.6 1.5 1.7 2.2 2.0 El método de referencia de la IFCC incluye piridoxal-5'-fosfato (P-5'-P) a un nivel de 0.1 mmol/l, que ha demostrado ser suficiente para activar la apo-ALT en 5 minutos (2). Διεξάχθηκε μελέτη ακριβείας σύμφωνα με τις οδηγίες στο Έγγραφο NCCLS EP5-A χρησιμοποιώντας το Konelab 60 σε διάρκεια 20 ημερών, με τον αριθμό των μετρήσεων να INFORMACIÓN SOBRE LOS REACTIVOS είναι n = 80. Reactivo A: reactivo enzimático Código: 981361 7 x 40 ml Σύγκριση μεθόδου Código: 981769 8 x 16 ml Σύστημα ενός αντιδραστηρίου: Reactivo B: sustrato Διεξάχθηκε συγκριτική μελέτη χρησιμοποιώντας ως κατευθυντήρια γραμμή το Έγγραφο NCCLS Código: 981361 7 x 10 ml EP9-A και τη μέθοδο δύο αντιδραστηρίων της Konelab ως αναφορά. Código: 981769 8 x 4 ml Γραμμική παλινδρόμηση (μονάδα αποτελεσμάτων U/I): y = 0.75 x + 2.8 Concentraciones r = 0.988 Reactivo A: reactivo enzimático n = 60 Tampón Tris, pH 7.15 137.5 mmol/l Οι συγκεντρώσεις δείγματος ήταν μεταξύ 7 και 190 U/l. L-alanina 700 mmol/l Σύστημα τριών αντιδραστηρίων LDH > 1650 U/l Διεξάχθηκε συγκριτική μελέτη χρησιμοποιώντας ως κατευθυντήρια γραμμή το Έγγραφο NaN3 < 0.1 % NCCLS EP9-A και το σύστημα δύο αντιδραστηρίων Konelab ως αναφορά. Γραμμική παλινδρόμηση (μονάδα αποτελεσμάτων U/I): Reactivo B: sustrato y = 1,00 x +0,2 2-oxoglutarato 82.5 mmol/l r = 1,00 NADH 1.0 mmol/l n = 65 NaN < 0.1 % Οι συγκεντρώσεις δείγματος ήταν μεταξύ 10 και 155 U/l. 3 Nota: El piridoxal-5'-fosfato líquido no se incluye en el kit. Puede encargarse por separado Τα αποτελέσματα που λαμβάνονται σε ξεχωριστά εργαστήρια πιθανόν να διαφέρουν από con el número de código 981839. την ανακρίβεια και τα δεδομένα μεθόδου σύγκρισης. Precauciones ΒΙΒΛΙΟΓΡΑΦΙΑ Sólo para uso en diagnósticos in vitro. 1. Burtis, CA and Ashwood, E R (ed.), Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry, 5th Adopte las medidas de precaución habituales para manipular reactivos de laboratorio. edition, W B Saunders Company, Philadelphia, 2001, pp. 354 - 355. Los reactivos contienen azida sódica como agente de conservación. No lo ingiera. Evite el 2. IFCC 2002/5: IFCC Primary Reference Procedures for the Measurement of Catalytic contacto con la piel y las membranas mucosas. Activity Concentrations of Enzymes at 37 °C, Part. 4 Reference Procedure for the

Measurement of Catalytic Concentrations of Alanine Aminotransferase, Preparación reserved. hts Clin.Chem.Lab.Med. 2002, 40(7): 718-724. Código: 981361, 981769 g 3. Guder WG, Narayanan S, Wisser H, Zawta B. List of Analytes; Preanalytical variables. Método con un reactivo (sin P-5'-P): Brochure in: Samples: From Patient to the Laboratory. GIT Verlag GmbH, Darmstadt, Agregue el contenido del reactivo B a la botella del reactivo A. Tape el vial y agítelo. El monorreactivo debe protegerse de la luz. 1996. Método con tres reactivos (con P-5'-P): 4. Young, D.S., Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests, Fifth Edition, AACC Press, Los reactivos están listos para su uso. Washington, D.C., 3-8 – 3-23, 2000. Nota: compruebe que no haya burbujas en el cuello de la botella ni en la superficie del reactivo cuando inserte los viales o recipientes de reactivos en el analizador Konelab. ΚΑΤΑΣΚΕΥΑΣΤΗΣ Thermo Fisher Scientific Oy Almacenamiento y estabilidad Clinical Diagnostics Finland Ratastie 2, P.O. Box 100, FI-01620 Vantaa Si se protegen de la luz, los reactivos contenidos en viales sin abrir permanecen estables Τηλ. +358 9 329 100, Fax +358 9 3291 0300 a 2...8 °C hasta la fecha de caducidad impresa en la etiqueta. www.thermo.com/konelab Consulte las notas de aplicación del analizador Konelab para determinar la estabilidad de los reactivos una vez abiertos y puestos en el analizador. Ημερομηνία αναθεώρησης (εεεε-μμ-ηη) RECOGIDA DE MUESTRAS 2007-08-14 Tipo de muestra Puede utilizarse suero limpio o plasma con heparina. Αλλαγές από την προηγούμενη έκδοση: Ενημερωμένο όνομα εταιρίας. Precauciones Las muestras de origen humano deben manejarse y desecharse como si se tratase de material potencialmente infeccioso.

Almacenamiento (3) La muestra puede almacenarse durante 3 días a 20...25 °C, durante 7 días a 4...8 °C o durante 2 días a –20 °C. Template: D01162_4 © 2008 Thermo Fisher Scientific Inc. All ri All Inc. Scientific Fisher Thermo © 2008 D01162_4 Template:

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PROCEDIMIENTO DEL TEST Comparación de métodos Consulte el procedimiento automático en el analizador Konelab en el Manual del Analizador y las notas de la aplicación. No puede garantizarse la fiabilidad de ninguna Método con un reactivo: aplicación no aprobada por Thermo Fisher Scientific Oy, por lo que deberá evaluarla el Se realizó un estudio comparativo utilizando el Documento EP9-A del NCCLS como guía usuario. y el método de dos reactivos de Konelab como referencia. Regresión lineal (unidad de resultado U/l): y = 0.75 x + 2.8 Materiales suministrados r = 0.988 Reactivos descritos anteriormente. n = 60 Las concentraciones de las muestras oscilaron entre 7 e 190 U/l. Materiales requeridos pero no suministrados Método con tres reactivos: Se realizó un estudio comparativo utilizando el Documento EP9-A del NCCLS como guía y el Piridoxal-5'-fosfato (código 981839) para el método con tres reactivos. método de dos reactivos de Konelab como referencia. Controles descritos a continuación. Regresión lineal (unidad de resultado U/l): y = 1.00 x + 0.2 Calibración r = 1.00 La respuesta (dA/min) se convierte en unidades de resultado con un factor de cálculo. n = 65 O utilice eCal (981830) como calibrador según las instrucciones del prospecto del paquete. Las concentraciones de las muestras oscilaron entre 10 y 155 U/l.

Control de calidad Los resultados obtenidos en cada laboratorio pueden diferir de los datos de imprecisión y de comparación de métodos ofrecidos. Utilice muestras de control de calidad al menos una vez al día y cada vez que se utilice un nuevo recipiente de reactivo. BIBLIOGRAFÍA Controles disponibles: 1. Burtis, CA and Ashwood, E R (ed.), Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry, 5th Nortrol, código 981043 Abtrol, código 981044 edition, W B Saunders Company, Philadelphia, 2001, pp. 354 - 355. Los intervalos y límites de control deben adaptarse a los requisitos de cada laboratorio. 2. IFCC 2002/5: IFCC Primary Reference Procedures for the Measurement of Catalytic Los resultados de las muestras de control de calidad deben estar dentro de los límites Activity Concentrations of Enzymes at 37 °C, Part. 4 Reference Procedure for the establecidos por el laboratorio. Measurement of Catalytic Concentrations of Alanine Aminotransferase, Clin.Chem.Lab.Med. 2002, 40(7): 718-724. CÁLCULO DE RESULTADOS 3. Guder WG, Narayanan S, Wisser H, Zawta B. List of Analytes; Preanalytical variables. El analizador Konelab calcula los resultados automáticamente de la manera siguiente: Brochure in: Samples: From Patient to the Laboratory. GIT Verlag GmbH, Darmstadt, Actividad en U/l = dA/mín x Factor 1996. 4. Young, D.S., Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests, Fifth Edition, AACC Press, TV x 1000 Washington, D.C., 3-8 – 3-23, 2000. Factor teórico = - ⎯⎯⎯⎯⎯- 6.3 x SV x P FABRICANTE Thermo Fisher Scientific Oy donde: TV = Total de volumen de reacción en ml Clinical Diagnostics Finland SV = Volumen de muestra en ml Ratastie 2, P.O. Box 100, FI-01621 Vantaa 6.3 = Coeficiente de extinción de NADH a 340 nm Tel. +358 9 329 100, Fax +358 9 3291 0300 P = Longitud de recorrido de cubeta = 1 www.thermo.com/konelab Factor de conversión μkat/l = (U/l)/60 Fecha de revisión (aaaa-mm-dd) Si se utiliza eCal (981830) como calibrador, el analizador Konelab analiza automáticamente los resultados con una curva de calibración. 2007-08-14 LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO Cambios desde la versión anterior: Nombre de empresa actualizado. Interferencias Criterio: recuperación entre ± 10% de los valores iniciales. Método con un reactivo: Bilirrubina conjugada: sin interferencias encontradas hasta 420 μmol/l (24.6 mg/dl). Bilirrubina no conjugada: sin interferencias encontradas hasta 600 μmol/l (35.1 mg/dl). Hemolizado: sin interferencias encontradas hasta 10 g/l de hemoglobina. Lipemia: sin interferencias encontradas hasta 2 g/l de Intralipid® (marca comercial de Fresenius Kabi AB). Existe una escasa correlación entre turbidez y concentración de ET triglicéridos. Método con tres reactivos: Konelab™ / T seeria Bilirrubina conjugada: sin interferencias encontradas hasta 420 μmol/l (24.6 mg/dl). Bilirrubina no conjugada: sin interferencias encontradas hasta 600 μmol/l (35.1 mg/dl). Hemolizado: sin interferencias encontradas hasta 8 g/l de hemoglobina. ALT/GPT (IFCC) Lipemia: sin interferencias encontradas hasta 2 g/l de Intralipid®. Si desea información sobre la interferencia de otras sustancias, consulte la referencia 4. 981361 7 x 50 ml VALORES PREVISTOS (2) 981769 8 x 20 ml Varones: < 45 U/l (< 0.74 μkat/l) a 37 °C Mujeres: < 34 U/l (< 0.56 μkat/l) a 37 °C PAKENDI INFOLEHT ON KOOSTATUD KASUTAMISEKS Los valores mencionados sirven sólo como guía. Se recomienda que cada laboratorio verifique este rango o derive un intervalo de referencia para la población a la que atiende. VÄLJASPOOL USA-D. KONELAB SYSTEMSI VIITED KEHTIVAD ÜHTLASI T SEERIA KOHTA. RANGO DE MEDIDA Método con un reactivo: 4 - 300 U/l (0.07 - 5.00 μkat/l) SIHTOTSTARVE Rango de medida aumentado después de la segunda dilución: Alaniin aminotransveraasi (L-Alaniin: 2-Oxoglutarate Aminotransferase (ALT) EC 2.6.1.2) 4 - 1800 U/l (0.07 - 30.00 μkat/l) aktiivsuse in vitro kvantitatiivseks määraimiseks inimese vereseerumis või -plasmas. Método con tres reactivos: Katsetulemuste tõlgendamisel tuleb alati arvesse võtta kliinilist tausta. 5 - 250 U/l (0.08 – 4.17 μkat/l) Rango de medida aumentado después de la segunda dilución: KOKKUVÕTE (1) 5 – 1500 U/l (0.08 – 25.00 μkat/l) Aspartaadi aminotransferaas (ASAT/AST), varasema nimetusega glutamaadi- oksaloatsetaadi transaminaas (GOT) ja alaniini aminotransferaas (ALAT/ALT), varasema CARACTERÍSTICAS DEL RESULTADO nimetusega glutamaadi-püruvaadi transaminaas (GPT) kuuluvad aminotransferaasideks ehk transaminaasideks nimetatavate ensüümide rühma, mis katalüüsivad α-ketohapete pöörduvat muundumist aminohapeteks aminorühmade ülekandega. Límite de detección Normaalolukorras leidub nii AST-i kui ALT-i inimese plasmas, sapis, liikvoris ja süljes, kuid Método con un reactivo: uriinis leidub neid ainult neerukahjustuse puhul. Viirushepatiidi ja muude maksa nekroosiga 2 U/l (0.03 μkat/l) seonduvate maksahaiguste puhul kõrgenevad seerumi AST ja ALT juba enne haiguse

Método con tres reactivos: kliiniliste tunnuste ja sümptomite ilmnemist. Mõlema ensüümi tase võib ülemise etalontaseme reserved. hts 2 U/l (0.03 μkat/l) ületada kuni 100-kordselt, kuid kõige sagedamini täheldatakse 20–50-kordset tõusu g El límite de detección representa la concentración/actividad más baja mensurable que Ehkki maksarakke kahjustavate protsessidega kaasneb nii AST- kui ALT-taseme tõus, on puede distinguirse de cero. Se calcula como la concentración de muestra cero + 3 DS ALT neist rohkem maksaspetsiifiline. Kõrgenenud AST tase võib olla seotud südame või (intraserie, n=24). skeletilihaste, aga ka maksa parenhüümi kahjustustega. Muude seisundite puhul peale parenhümatoossete maksahaiguste täheldatakse seerumi ALT-aktiivsuse kõrgenemist harva. Imprecisión (unidad de resultado U/l) Método con un reactivo: MEETODI PÕHIMÕTE ALT katalüüsib aminorühma ülekannet alaniinilt oksoglutaraadile, tekivad glutamaat ja püruvaat. Püruvaat redutseeritakse laktaadiks ja laktaat dehüdrogenaasiks (LDH). Media Media Media 33 U/l 90 U/l 108 U/l ALT SD CV% SD CV% SD CV% L-alaniiin + 2-oksoglütraat <⎯⎯> L-grutamaat + püruvaat Intraserie 0.6 1.8 0.6 0.6 0.9 0.8 Interdiario 0.5 1.5 0.9 1.0 1.0 0.9 LDH Total 1.0 3.0 1.8 2.0 2.7 2.4 Püruvaat + NADH + H+ <⎯⎯> D-laktaat + NAD+

Método con tres reactivos: Samas reaktsioonis oksüdeeritakse ekvivalentne kogus NADH-d NAD-ks. Jälgitakse sellest tingitud neelduvuse langust lainepikkusel 340 nm, mis on võrdeline ALT Media Media Media aktiivsusega seerumis. 31 U/l 89 U/l 109 U/l IFCC standardmeetodis kasutatakse püridoksaal-5’-fosfaati (P-5´-P) kontsentratsioonis SD CV% SD CV% SD CV% 0.1 mmol/l; on näidatud, et see on küllaldane apo-ALT aktiveerimiseks 5 minuti jooksul (2). Intraserie 0.6 1.8 0.6 0.7 1.0 0.9 Interdiario 0.2 0.7 0.8 0.9 0.8 0.8 TEAVE REAKTIIVIDE KOHTA Total 0.8 2.6 1.5 1.7 2.2 2.0 A-reaktiiv: ensüümreaktiiv kood: 981361 7 x 40 ml kood: 981769 8 x 16 ml En el estudio de precisión realizado según las directrices del Documento EP5-A del NCCLS B-reaktiiv: substraat se utilizó el analizador Konelab 60 durante 20 días, siendo el número de medidas n = 80. kood: 981361 7 x 10 ml kood: 981769 8 x 4 ml Template: D01162_4 © 2008 Thermo Fisher Scientific Inc. All ri All Inc. Scientific Fisher Thermo © 2008 D01162_4 Template:

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Kontsentratsioonid Hemolüsaat: hemoglobiini kontsentratsioonini kuni 8 g/l segavat mõju ei täheldatud. Lipeemia: Intralipid® kontsentratsioonini kuni 2g/l segavat mõju ei täheldatud. A-reaktiiv: ensüümreaktiiv Muid segavaid aineid on käsitletud viites 4. Tris-puhver, pH 7.15 137.5 mmol/l L-alaniin 700 mmol/l OODATAVAD TULEMUSED (2) LDH > 1650 U/l Meespatsiendid: < 45 U/l (< 0.74 μkat/l) temperatuuril 37 °C NaN3 < 0.1 % Naispatsiendid: < 34 U/l (< 0,56 μkat/l) temperatuuril 37 °C Toodud väärtused on mõeldud suunitluslikena. Kõikidel laboritel on soovitatav seda B-reaktiiv: substraat vahemikku kontrollida, või tuletada ise etalonvahemik teenindatava populatsiooni seas. 2-oksoglutaraat 82.5 mmol/l NADH 1.0 mmol/l MÕÕTEPIIRKOND NaN3 < 0.1 % Ühe reaktiivi meetod: Note: Liquid pyridoxal-5’-phosphate is not included in the kit. Seda on võimalik eraldi 4 - 300 U/l (0.07 – 5.00 μkat/l) tellida koodi 981839 abil. Pikendatud mõõtepiirkond pärast sekundaarset lahjendust: 4 – 1800 U/l (0.07 – 30.00 μkat/l) Hoiatused Kolme reaktiivi meetod: Kasutamiseks ainult in vitro diagnostikas. Kõigi laborireaktiivide käsitsemisel tuleb 5–250 U/l (0.08–4.17 μkat/l) rakendada tavapäraseid ettevaatusabinõusid. Pikendatud mõõtepiirkond pärast sekundaarset lahjendust: Reagent sisaldavad säilitusainet naatriumasiidi. Mitte neelata. Vältida kokkupuudet naha ja 5–1500 U/l (0.08–25.00 μkat/l) limaskestadega. SOORITUSNÄITAJAD Ettevalmistamine kood: 981363, 981769 Avastamispiir Ühe reaktiivi meetod (ilma P-5´-P-ta): Ühe reaktiivi meetod: A-reaktiivi pudelile lisatakse B-reaktiiv. Viaal suletakse korgiga ja segatakse. Monoreagenti tuleb 2 U/l (0.03 µkat/l) hoida valguse eest kaitstuna! Kolme reaktiivi meetod (P-5´-P-ga): Kolme reaktiivi meetod: Reaktiivid on kasutusvalmis. 2 U/l (0.03 μkat/l) Märkus: Enne reaktiiviviaalide või -nõude viimist Konelab analüsaatorisse tuleb Avastamispiir on madalaim mõõdetav kontsentratsioon/aktiivsus, mis on nullist eristatav. kontrollida, et pudelikaelas ega reaktiivi pinnal ei oleks mulle. See leitakse kui nullproovi kontsentratsioon + 3 SD (katseseeriasisene, n=24).

Säilitamine ja stabiilsus Ebatäpsus (tulemuse ühik U/l) Avamata viaalides püsivad reaktiivid temperatuuril 2…8 °C valguse eest kaitstuna Ühe reaktiivi meetod: stabiilsena sildile trükitud aegumistähtajani. Keskmine Keskmine Keskmine Teave laetud reaktiivide stabiilsuse kohta on esitatud Konelab analüsaatori tehnilistes 33 U/l 90 U/l 108 U/l märkustes. SD CV% SD CV% SD CV% Katseseeriasisene 0.6 1.8 0.6 0.6 0.9 0.8 PROOVIDE VÕTMINE Eri partiid 0.5 1.5 0.9 1.0 1.0 0.9 Summaarne 1.0 3.0 1.8 2.0 2.7 2.4 Proovi tüüp Kasutada võib läbipaistvaid seerumi- või hepariiniga plasmaproove. Kolme reaktiivi meetod: Keskmine Keskmine Keskmine Hoiatused 31 U/l 89 U/l 109 U/l Inimpäritolu proovid tuleb käsitsemisel ja kõrvaldamisel lugeda võimalikeks nakkusallikateks. SD CV% SD CV% SD CV% Katseseeriasisene 0.6 1.8 0.6 0.7 1.0 0.9 Säilitamine (3) Eri partiid 0.2 0.7 0.8 0.9 0.8 0.8 Summaarne 0.8 2.6 1.5 1.7 2.2 2.0 Proovi võib temperatuuril 20…25 °C säilitada 3 kuni päeva, temperatuuril 4…8 °C kuni 7 päeva, temperatuuril –20 °C kuni 2 päeva. Vastavalt NCCLS dokumendi EP5-A suunistele viidi Konelab 60 peal 20 päeva jooksul läbi KATSEPROTSEDUUR täpsusuuring, mõõtmiste arv uuringus oli n = 80. Teave automaatse katseprotseduuri kasutamise kohta Konelab analüsaatoril on esitatud juhendis ja tehnilistes märkustes. Thermo Fisher Scientific Oy poolt valideerimata Meetodite võrdlus rakendusviiside sooritusnäitajaid tagada ei saa, seetõttu peab neid hindama lõppkasutaja. Ühe reaktiivi meetod: NCCLS dokumendi EP9-A suuniseid järgides viidi läbi võrdlev uuring, kasutades etalonina Kaasasolevad materjalid Konelab kahe reagendi meetodit. Eespool kirjeldatud reaktiivid. Lineaarne regressioon (tulemuse ühik U/l): y = 0.75 x + 2.8 r = 0.988 Vajalikud materjalid, mida kaasas pole n = 60 Püridoksaal –5’-fosfaat (kood 981839) kolme reaktiivi meetodile. Proovide kontsentratsioonid jäid vahemikku 7 ja 190 U/l. Allpool kirjeldatud kontrollid. Kolme reaktiivi meetod: Kaliibrimine NCCLS dokumendi EP9-A suuniseid järgides viidi läbi võrdlev uuring, kasutades etalonina Konelab kahe reagendi meetodit. Vastus dA/min teisendatakse ühikuliseks tulemuseks vastava arvutusteguri abil. Lineaarne regressioon (tulemuse ühik U/l): Teine võimalus on kasutada eCal (981830) kalibraatorit, järgides eCal (981830) pakendi y = 1.00 x + 0.2 infolehes toodud juhiseid. r = 1.00 n = 65 Kvaliteedikontroll Proovide kontsentratsioonid jäid vahemikku 10 – 155 U/l. Kvaliteedikontrolliproove kasutatakse vähemalt kord päevas ja iga kord, kui kasutatakse uut reaktiivipudelit. Individuaalsetes laborites saadavad tulemused võivad erineda esitatud sooritusnäitajatest. Saadaval on järgmised kontrollproovid: Nortrol, koodiga 981043 KIRJANDUS Abtrol, koodiga 981044 1. Burtis, CA and Ashwood, E R (ed.), Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry, 5th Kontrollide vahemikud ja piirid tuleb kohaldada individuaalsete laborite vajadustele. edition, W B Saunders Company, Philadelphia, 2001, pp. 354 - 355. Kvaliteedikontrolliproovide tulemused peavad jääma labori poolt seatud piiridesse. 2. IFCC 2002/5: IFCC Primary Reference Procedures for the Measurement of Catalytic Activity Concentrations of Enzymes at 37 °C, Part. 4 Reference Procedure for the TULEMUSTE ARVUTAMINE Tulemused arvutab Konelab analüsaator automaatselt järgmisel viisil: Measurement of Catalytic Concentrations of Alanine Aminotransferase, Clin.Chem.Lab.Med. 2002, 40(7): 718-724. 3. Guder WG, Narayanan S, Wisser H, Zawta B. List of Analytes; Preanalytical variables. Aktiivsus (U/l) = dA/min x tegur Brochure in: Samples: From Patient to the Laboratory. GIT Verlag GmbH, Darmstadt, 1996. TV x 1000 4. Young, D.S., Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests, Fifth Edition, AACC Press,

Teoreetiline võrdetegur = - ⎯⎯⎯⎯⎯- Washington, D.C., 3-8 – 3-23, 2000. reserved. hts 6.3 x SV x P g TOOTJA kus: TV = reageerivate ainete kogumaht (ml) Thermo Fisher Scientific Oy SV = proovi maht (ml) Clinical Diagnostics Finland 6.3= NADH ekstinktsioonitegur 340 nm juures Ratastie 2, P.O. Box 100, FI-01621 Vantaa P= küveti optiline teepikkus = 1 Tel. +358 9 329 100, Faks +358 9 3291 0300 Teisendustegur μkat/l = (U/l)/60 www.thermo.com/konelab eCal (981830) kasutamisel kalibraatorina arvutab Konelab analüsaator tulemused Teksti läbivaatamise kuupäev (aaaa-kk-pp) kaliibrimiskõvera järgi automaatselt. 2007-08-14

PROTSEDUURI PIIRANGUD Muudatused võrreldes eelmise versiooniga Ettevõtte nimi uuendatud. Segavad mõjud Tingimus: Saagis algväärtuse ± 10% suhtes. Ühe reaktiivi meetod: Konjugeeritud bilirubiin: kontsentratsioonini kuni 420 μmol/l (24.6 mg/dl) segavat mõju ei täheldatud. Konjugeerimata bilirubiin: kontsentratsioonini kuni 600 μmol/l (35.1 mg/dl) segavat mõju ei täheldatud. Hemolüsaat: hemoglobiini kontsentratsioonini kuni 10 g/l segavat mõju ei täheldatud. Lipeemia: Intralipid® (Fresenius Kabi AB kaubamärk) sisalduseni kuni 2 g/l segavat mõju ei täheldatud. Korrelatsioon hägususe ja triglütseriidide sisalduse vahel oli väike. Kolme reaktiivi meetod: Konjugeeritud bilirubiin: kontsentratsioonini kuni 420 μmol/l (24.6 mg/dl) segavat mõju ei täheldatud.

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HU A VIZSGÁLATI ELJÁRÁS Automatizált eljárás kivitelezéséhez olvassa el a Konelab analizátorhoz tartozó Használati Konelab™ / T Sorozat kézikönyvet és Alkalmazási tudnivalókat. Nem garantálható semmilyen olyan alkalmazás eredménye, amelyet a Thermo Fisher Scientific Oy nem hagyott jóvá, ezért ezeket a ALT/GPT (IFCC) felhasználónak kell értékelnie. Szolgáltatott anyagok

981361 7 x 50 ml A fent leírt reagensek. 981769 8 x 20 ml Szükséges, de nem szolgáltatott anyagok EZ A TÁJÉKOZTATÓ AZ EGYESÜLT ÁLLAMOKON Piridoxál-5’-foszfát (kód: 981839) a 3-reagenses módszerhez. KÍVÜLI HASZNÁLATRA VONATKOZIK. A KONELAB Az alább leírt kontrollminták. RENDSZEREKRE TETT MINDEN UTALÁS A T Kalibrálás SOROZATRA IS VONATKOZIK. A válasz (dA/min) egy számítási tényező segítségével eredményegységekre átszámítva jelenik meg. Ettől eltérően használhatja az eCal (981830) vegyületet kalibrálásra az eCal (981830) RENDELTETÉS csomagjában található tájékoztató szerint. Emberi szérum, illetve plazma alanin-aminotranszferáz (L-alanin: 2-oxoglutarát aminotranszferáz (ALT), EC 2.6.1.2) aktivitásának in vitro kvantitatív meghatározásához Konelab analizátorokban. Minden vizsgálati eredményt a klinikai képpel összefüggésben Minőségellenőrzés kell értékelni. Használjon minőségellenőrző mintákat naponta legalább egyszer, illetve minden új üveg reagens felnyitásakor. ÖSSZEGZÉS (1) Rendelkezésre álló kontrollminták: Az alanin-aminotranszferáz (ALAT/ALT) – korábbi nevén glutamát-piruvát-transzamináz Nortrol, kód 981043 (GPT) –, valamint az aszpartát-aminotranszferáz (ASAT/AST) – korábbi nevén glutamát- Abtrol, kód 981044 oxálacetát-transzamináz (GOT) – az aminotranszferáz/transzamináz enzimek csoportjába Az ellenőrzési intervallumokat és határértékeket az aktuális laboratóriumi követelményekhez tartozik, ezen csoport enzimei amino csoportok átvitelével az α-ketosavak aminosavakká kell igazítani. A minőségellenőrző minták eredményeinek a laboratórium által előre beállított alakulásának reverzibilis reakcióját katalizálják. határértékek közé kell esniük. Mind az AST, mind az ALT élettanilag jelen van az emberi plazmában, epében, cerebrospinális folyadékban és nyálban, nem találhatók meg azonban a vizeletben, AZ EREDMÉNYEK KISZÁMÍTÁSA hacsak nincs jelen vesekárosodás. Vírusos májgyulladásban és más, hepatikus Az eredményeket a Konelab analizátor automatikusan kiszámítja a következők szerint: nekrózissal járó májbetegségben a szérum AST és ALT szintje megemelkedik még azelőtt, hogy a betegség klinikai jelei és tünetei megjelennének. Mindkét enzim szintje Aktivitás U/l = dA/min x faktor elérheti a referenciatartomány felső határának akár százszorosát is, azonban a leggyakrabban észlelt eltérés a felső határ 20-50-szerese. TV x 1000 Habár mind az AST, mind az ALT szérumszintje a májsejtek épségét befolyásoló Elméleti faktor = - ⎯⎯⎯⎯⎯- behatásokra emelkedik meg, a kettő közül az ALT a májra specifikusabb enzim. Az AST 6.3 x SV x P szintjének emelkedése a májparenchyma károsodása mellett létre jöhet szív-, illetve vázizomkárosodás kapcsán is. Az ALT aktivitás szérumszintjének emelkedése ritkán ahol: TV = teljes reagáló térfogat ml-ben figyelhető meg a parenchymális májkárosodástól eltérő állapotokban. SV = minta térfogata ml-ben 6.3= a NADPH extinkciós együtthatója 340 nm-en AZ ELJÁRÁS ALAPELVE P= küvetta úthossza = 1 Az ALT amino csoport átvitelét katalizálja alaninról 2-oxoglutarátra, a reakció során Átváltási faktor μkat/l = (U/l)/60 glutamát és piruvát képződik. A piruvátot a laktát-dehidrogenáz (LDH) laktáttá redukálja. eCal (981830) alkalmazásával történő kalibráláskor az eredményeket a Konelab analizátor ALT egy kalibrációs görbe segítségével automatikusan kiszámítja. L-alanin + 2-oxoglutarát <⎯⎯> L-glutamát + piruvát AZ ELJÁRÁS KORLÁTAI LDH + + piruvát + NADH + H <⎯⎯> D-laktát + NAD Interferencia

Ugyanebben a reakcióban ekvivalens mennyiségű NADH oxidálódik NAD-dá. A 340 nm- Kritérium: Az értékek a kezdeti értékek ± 10%-án belül maradnak. en mért abszorbancia-csökkenés mérhető és egyenesen arányos a szérum ALT Egyreagenses módszer: aktivitásával. Konjugált bilirubin: Nem észleltek interferenciát 420 μmol/l (24.6 mg/dl) értékig. Az IFCC referenciamódszere 0.1 mmol/l koncentrációjú piridoxál-5’-foszfátot (P-5’-P) Nem konjugált bilirubin: Nem észleltek interferenciát 600 μmol/l (35.1 mg/dl) értékig. alkalmaz, amely elegendőnek bizonyult az apo-ALT 5 percen belüli aktiváláshoz (2). Hemolizátum: Nem észleltek interferenciát 10 g/l hemoglobinszintig. Lipaemia: Nem észleltek interferenciát Intralipid® (a Fresenius Kabi AB védjegye) esetén REAGENSEK ADATAI 2 g/l értékig. Gyenge összefüggés van a zavarosság és trigliceridkoncentráció között. A reagens: Enzim reagens 3-reagenses módszer: Kód: 981361 7 x 40 ml Konjugált bilirubin: Nem észleltek interferenciát 420 μmol/l (24.6 mg/dl) értékig. Kód: 981769 8 x 16 ml Nem konjugált bilirubin: Nem észleltek interferenciát 600 μmol/l (35.1 mg/dl) értékig. B reagens: Szubsztrát Hemolizátum: Nem észleltek interferenciát 8 g/l hemoglobinszintig. Kód: 981361 7 x 10 ml Lipaemia: Nem észleltek interferenciát 2g/l Intralipid® szintig. Kód: 981769 8 x 4 ml Egyéb interferenciát okozó anyagok tekintetében lásd az 4. referenciát. VÁRHATÓ ÉRTÉKEK (2) Koncentrációk Férfi: < 45 U/l (< 0.74 μkat/l) 37 °C hőmérsékleten A reagens: Enzim reagens Nő: < 34 U/l (< 0.56 μkat/l) 37 °C hőmérsékleten Tris puffer, pH 7.15 137.5 mmol/l A feltüntetett értékek kizárólag tájékoztató jellegűek. Minden laboratórium esetében ajánlott L-alanin 700 mmol/l a normál tartomány megerősítése, illetve a kiszolgált populációra jellemző referenciaintervallum LDH > 1650 U/l kialakítása. NaN3 < 0.1 % B reagens: Szubsztrát MÉRÉSI TARTOMÁNY 2-oxoglutarát 82.5 mmol/l Egyreagenses módszer: NADH 1.0 mmol/l 4 -300 U/l (0.07 – 5.00 μkat/l) Kiterjesztett mérési tartomány másodlagos hígítás után: NaN3 < 0.1 % Megjegyzés: A készlet nem tartalmazza a folyékony piridoxál-5’-foszfátot. Ez külön, 4 – 1800 U/l (0.07 – 30.00 μkat/l) kódszám (981839) alapján megrendelhető. 3-reagenses módszer: 5 -250 U/l (0.08 – 4.17 μkat/l) Kiterjesztett mérési tartomány másodlagos hígítás után: Óvintézkedések 5 – 1500 U/l (0.08 – 25.00 μkat/l) Kizárólag in vitro diagnosztikus használatra. Tartsa be a laboratóriumi reagensek kezelésére vonatkozó szokásos előírásokat. TELJESÍTMÉNY JELLEMZŐK A reagens tartósítószerként nátrium-azidot tartalmaz. Ne nyelje le. Kerülje érintkezését a bőrrel és a nyálkahártyákkal. Detektálási határérték

Egyreagenses módszer: reserved. hts Előkészítés 2 U/l (0.03 μkat/l) g Kód: 981361, 981769 3-reagenses módszer: Egyreagenses módszer (P-5’-P nélkül): 2 U/l (0.03 μkat/l) Adja a B reagens üvegének tartalmát az A reagenshez. Zárja le az üveget és keverje A detektálási határérték az a legkisebb mérhető koncentráció/aktivitás, amely még össze. A reagenst fénytől óvni kell! megkülönböztethető a nullától. Kiszámítása a következő: nulla minta koncentrációja 3-reagenses módszer (P-5’-P-tal): + 3 SD (mérés közben n=24). A reagensek használatra készek. Megjegyzés: Ellenőrizze, hogy nincs-e buborék az üveg nyakánál vagy a reagens Pontatlanság (eredmény egység U/l) felszínén, amikor reagenst tartalmazó üvegeket, illetve edényeket tesz a Konelab Egyreagenses módszer: analizátorba. Középérték Középérték Középérték Tárolás és stabilitás 33 U/l 90 U/l 108 U/l A felbontatlan üvegben, fénytől védett helyen tárolt reagensek 2...8 °C között a címkén SD CV% SD CV% SD CV% feltüntetett lejárati időpontig stabilak. Mérés közben 0.6 1.8 0.6 0.6 0.9 0.8 A reagensek elemzőkészüléken belüli stabilitásához olvassa el a Konelab analizátorhoz Napok közt 0.5 1.5 0.9 1.0 1.0 0.9 tartozó Alkalmazási tudnivalókat. Teljes 1.0 3.0 1.8 2.0 2.7 2.4

MINTAVÉTEL 3-reagenses módszer:

A minta típusa Középérték Középérték Középérték Használjon tiszta szérumot vagy heparinos plazmát. 31 U/l 89 U/l 109 U/l SD CV% SD CV% SD CV% Óvintézkedések Mérés közben 0.6 1.8 0.6 0.7 1.0 0.9 Napok közt 0.2 0.7 0.8 0.9 0.8 0.8 Az emberi mintákat úgy kell kezelni és kidobni, mintha azok fertőzőek lennének. Teljes 0.8 2.6 1.5 1.7 2.2 2.0

Tárolás (3)

A minta 20...25 °C-on 3 napig, 4…8 °C-on 7 napig, –20 °C-on pedig 2 napig tárolható. Az NCCLS EP5-A dokumentumának előírásai alapján pontossági mérést végeztek ri All Inc. Scientific Fisher Thermo © 2008 D01162_4 Template: 20 napon keresztül a Konelab 60 analizátorral, 80-as mérésszámmal (n=80).

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Módszerösszehasonlítás Codice: 981769 8 x 16 ml Reagente B Substrato Egyreagenses módszer: Codice: 981361 7 x 10 ml Összehasonlítási tanulmányt végeztek az NCCLS EP9-A dokumentumának előírásai Codice: 981769 8 x 4 ml alapján, referencianként a Konelab kétreagenses módszerét használva. Lineáris regresszió (eredmény egység U/l): y = 0.75 x +2.8 Concentrazioni r = 0.988 Reagente A Reagente enzimatico n = 60 Tampone Tris, pH 7.15 137.5 mmol/l A mintakoncentrációk 7 és 190 U/l között voltak. L-Alanina 1700 mmol/l 3-reagenses módszer: LDH > 1650 U/l Összehasonlítási tanulmányt végeztek az NCCLS EP9-A dokumentumának előírásai NaN3 < 0.1 % alapján, referenciaként a Konelab kétreagenses módszerét használva. Lineáris regresszió (eredmény egység U/l): Reagente B Substrato y = 1.00 x + 0.2 2-ossoglutarato 82.5 mmol/l r = 1.00 NADH 1.0 mmol/l n = 65 NaN3 < 0.1 % A mintakoncentrációk 10 és 155 U/l között voltak. Nota: Il piridossal-5’-fosfato liquido non è incluso nel kit. Può essere ordinato separatamente indicando il numero di codice 981839. Az egyes laboratóriumokban nyert értékek különbözhetnek a megadott teljesítmény adatoktól. BIBLIOGRÁFIA Precauzioni 1. Burtis, CA and Ashwood, E R (ed.), Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry, 5th Solo per uso diagnostico in vitro. Rispettare le normali precauzioni previste per l’utilizzo di tutti i reagenti di laboratorio. edition, W B Saunders Company, Philadelphia, 2001, pp. 354 - 355. Il reagente contiene sodio azide come conservante. Non ingerire. Evitare il contatto con la 2. IFCC 2002/5: IFCC Primary Reference Procedures for the Measurement of cute e le membrane mucose. Catalytic Activity Concentrations of Enzymes at 37 °C, Part. 4 Reference Procedure for the Measurement of Catalytic Concentrations of Alanine Aminotransferase, Preparazione Clin.Chem.Lab.Med. 2002, 40(7): 718-724. Codice: 981361, 981769 3. Guder WG, Narayanan S, Wisser H, Zawta B. List of Analytes; Preanalytical Metodica monoreagente (senza P-5´-P): variables. Brochure in: Samples: From Patient to the Laboratory. GIT Verlag GmbH, Aggiungere il contenuto del reagente B al flacone di reagente A. Tappare il flacone ed agitare. Il Darmstadt, 1996. monoreagente deve essere conservato al riparo dalla luce. 4. Young, D.S., Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests, Fifth Edition, AACC Metodica con 3 reagenti (con P-5´-P): Press, Washington, D.C., 3-8 – 3-23, 2000. I reagenti sono pronti all’uso. Nota: Controllare che non siano presenti bolle sul collo del flacone o sulla superficie del GYÁRTÓ reagente durante l'inserimento di vial o recipienti di reagente nell'analizzatore Konelab. Thermo Fisher Scientific Oy Clinical Diagnostics Finland Conservazione e stabilità Ratastie 2, P.O. Box 100, FI-01621 Vantaa I reagenti in flaconi intatti sono stabili fino alla data di scadenza indicata sull'etichetta, se Tel. +358 9 329 100, Fax +358 9 3291 0300 conservati a una temperatura di 2…8 ° C al riparo dalla luce. www.thermo.com/konelab Per la stabilità dei reagenti sullo strumento, vedere le note applicative dell'analizzatore Konelab in uso. Ellenőrzés időpontja (éééé-hh-nn) 2007-08-14 RACCOLTA DEL CAMPIONE

Változtatások az előző változathoz képest Tipo di campione A cég neve frissítésre került. Possono essere utilizzati siero o plasma eparinizzato.

Precauzioni I campioni umani devono essere maneggiati e smaltiti come campioni potenzialmente infetti.

Conservazione (3) IT Il campione può essere conservato per 3 giorni a 20…25° C, per 7 giorni a 4…8 °C o per 2 Konelab™ / Serie T giorni a –20 °C. PROCEDURA ANALITICA ALT / GPT (IFCC) Per le procedure automatiche consultare il manuale d’uso e le note applicative dell'analizzatore Konelab. Tutte le applicazioni non esplicitamente approvate da Thermo Fisher Scientific Oy, non possono essere garantite in termini di prestazioni e dovranno 981361 7 x 50 ml pertanto essere valutate dall'utilizzatore. 981769 8 x 20 ml Materiali inclusi nel kit IL PRESENTE INSERTO NELL’IMBALLO PUO’ I reagenti sopra descritti. ESSERE APPLICATO AL DI FUORI DEGLI STATI UNITI. EVENTUALI RIFERIMENTI A KONELAB Materiali necessari ma non inclusi nel kit Piridoxal –5’-fosfato (codice 981839) per il metodo con 3 reagenti SYSTEMS SI RIFERISCE ANCHE ALLA SERIE T. I controlli indicati di seguito.

USO CONSIGLIATO Calibrazione Per la determinazione quantitativa in vitro dell’attività della alanina aminotransferasi (L- Alanina: 2-Ossoglutarato Aminotransferasi (ALT), EC 2.6.1.2) nel siero o nel plasma La risposta dA/min è convertita nelle unità di misura del risultato per mezzo di un fattore di umano sugli analizzatori Konelab. Tutti i risultati del test devono essere interpretati in calcolo. riferimento al contesto clinico specifico. In alternativa, utilizzare eCal (981830) conformemente alle istruzioni fornite nell’inserto dell’imballo di eCal (981830). SOMMARIO (1) L’alanina aminotransferasi (ALAT/ALT), precedentemente nota come transaminasi Controllo qualità glutammico-piruvica (GPT) e l’aspartato aminotransferasi (ASAT/AST), precedentemente Utilizzare i campioni del controllo di qualità almeno una volta al giorno e ogni volta che si noto come transaminasi glutammico-ossalacetica (GOT) appartengono alle utilizza un nuovo flacone di reagente. aminotransferasi o transaminasi, un gruppo enzimatico che catalizza la trasformazione Controlli disponibili: reversibile degli α-cheto-acidi in amminoacidi mediante trasferimento di gruppi amminici. Nortrol, codice 981043. L’AST e l’ALT sono normalmente presenti nel plasma umano, nella bile, nel liquido Abtrol, codice 981044 cerebrospinale e nella saliva, ma non si trovano nelle urine, a meno che non sia presente Gli intervalli e i limiti del controllo devono essere adattati ai requisiti dei singoli laboratori. una lesione renale. Nell’epatite virale e in altre forme di epatopatie associate a necrosi I risultati dei campioni del controllo di qualità devono rientrare nei limiti di variabilità stabiliti epatica, il livello di AST e ALT sieriche è elevato anche prima della comparsa dei segni reserved. hts

a priori dal laboratorio. g clinici e dei sintomi indicativi di patologia. L’attività dei due enzimi può raggiungere valori anche 100 volte maggiori del limite superiore di riferimento, benché nella maggior parte CALCOLO DEI RISULTATI dei casi si riscontrino aumenti di 20-50 volte i valori normali. I risultati vengono calcolati automaticamente dall’analizzatore Konelab come segue: Nonostante i livelli sierici dei due enzimi registrino un innalzamento mentre sono in atto processi che interagiscono sull’integrità delle cellule epatiche, l’ALT è l’enzima più Attività in U/l = dA/min x Fattore specifico per la diagnosi di danno epatico. Livelli aumentati di AST possono rilevarsi in connessione con danni cardiaci o dei muscoli scheletrici oltre che del parenchima epatico. TV x 1000 Raramente viene osservato un aumento dell’attività dell’ALT nel siero in condizioni diverse Fattore teorico =- ⎯⎯⎯⎯⎯- dalle patologie che interessano il parenchima epatico. 6.3 x SV x P

PRINCIPIO DELLA PROCEDURA dove: TV = Volume totale di reazione in ml L’ALT catalizza il passaggio del gruppo amminico da alanina a ossoglutarato con la SV = Volume del campione in ml formazione di glutamato e piruvato. Il piruvato è ridotto a lattato mediante la deidrogenasi 6.3= Coefficiente di estinzione del NADH a 340 nm del lattato (LDH). P = Tracciato della cuvetta = 1 Fattore di conversione (kat/l = (U/l)/60 ALT L-Alanina+ 2-Ossoglutarato <⎯⎯>L-Glutamato + Piruvato Se come calibratore è usato eCal (981830), i risultati vengono calcolati automaticamente dall’analizzatore Konelab in base ad una curva di calibrazione: LDH + + Piruvato NADH H+<⎯⎯> D-Lattato + NAD+ LIMITI DELLA PROCEDURA

In questa stessa reazione una quantità equivalente di NADH viene ossidata in NAD. Ne Interferenze consegue una diminuzione dell’assorbanza a 340 nm che è direttamente proporzionale Criterio: Recupero entro ± 10% del valore iniziale. all’attività dell’ALT nel siero. Metodica monoreagente: Il metodo di riferimento IFCC include piridossal –5’-fosfato (P-5´-P) a un livello di 0.1 mmol/l, che si è rivelato sufficiente per attivare l’apo ALT entro 5 minuti (2). Bilirubina coniugata: Non sono state rilevate interferenze fino a 420 μmol/l (24.6 mg/dl). Bilirubina non coniugata: Non sono state rilevate interferenze fino a 600 μmol/l INFORMAZIONI SUI REAGENTI (35.1 mg/dl). Emolisato: Non sono state rilevate interferenze fino a 10 g/l di emoglobina.

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Lipemia: Non sono state riscontrate interferenze significative fino a 2 g/l di Intralipid® (marchio registrato di Fresenius Kabi AB). Vi è una scarsa correlazione tra torbidità e concentrazione di trigliceridi. Metodica con tre reagenti: Bilirubina coniugata: Non sono state rilevate interferenze fino a 420 μmol/l (24.6 mg/dl). Bilirubina non coniugata: Non sono state rilevate interferenze fino a 600 μmol/l (35.1 mg/dl). Emolisato: Non sono state rilevate interferenze fino a 8 g/l di emoglobina. LT Lipemia: Non sono state rilevate interferenze fino a 2 g/l di emoglobina. Per le altre sostanze interferenti, vedere la voce bibliografica 4. Konelab™ / T serija VALORI PREVISTI (2) ALT/GPT (IFCC) Uomini: < 45 U/l (< 0.74 μkat/l) a 37 °C Donne: < 34 U/l (< 0.56 (kat/l) a 37 °C I valori citati dovranno servire esclusivamente come riferimento. Si raccomanda ad ogni 981361 7 x 50 ml laboratorio di verificare l'applicabilità di questo intervallo alla propria popolazione di pazienti e, se 981769 8 x 20 ml necessario, di determinare appositi intervalli di riferimento. ŠIOS PAKUOTĖS INFORMACINIS LAPELIS INTERVALLO DI MISURAZIONE TINKAMAS NAUDOTI UŽ JAV RIBŲ. BET KOKIA Metodica monoreagente: 4 - 300 U/l (0.07 – 5.00 μkat/l) NUORODA Į KONELAB SYSTEMS APIMA IR T Intervallo di misurazione ampliato dopo la seconda diluizione: PRODUKTŲ SERIJĄ. 4 – 1800 U/l (0.07 – 30.00 μkat/l) Metodica con tre reagenti: PASKIRTIS 5 - 250 U/l (0.08 – 4.17 μkat/l) In-vitro kiekybiniam alanino aminotransferazės ( L-alaninas: 2-oksoglutarato Intervallo di misurazione ampliato dopo la seconda diluizione: aminotransferazės (ALT), EC 2.6.1.2) aktyvumo nustatymui žmogaus serume arba 5 – 1500 U/l (0.08 – 25.00 μkat/l) plazmoje naudojant Konelab analizatorius. Visi tyrimų rezultatai turi būti interpretuojami atsižvelgiant į klinikinį kontekstą. CARATTERISTICHE PRESTAZIONALI SANTRAUKA (1) Limite di rilevamento Alanino aminotransferazė (ALAT/ALT), anksčiau vadinta glutamo piruvine transaminaze Metodica monoreagente: (GPT), ir aspartato aminotransferazė (ASAT/AST), anksčiau vadinta glutamo oksalacetato 2 U/l (0.03 (kat/l) transaminaze (GOT), priklauso fermentų A grupei - aminotransferazėms arba transaminazėms, kurios katalizuoja grįžtamąjį α-keto rūgščių virtimą amino rūgštimis Metodica con tre reagenti: amino grupių perkėlimu. 2 U/l (0.03 (kat/l) Tiek AST, tiek ir ALT yra žmogaus plazmoje, tulžyje, nugaros smegenų skystyje ir seilėse, Il limite di rilevamento rappresenta la concentrazione/attività misurabile più bassa che può tačiau jų nėra šlapime, išskyrus tuos atvejus, kai yra pažeisti inkstai. Esant virusiniam essere distinta da zero. È calcolato come la concentrazione misurata nel campione zero + hepatitui ir kitoms kepenų ligų formoms susijusioms su hepatine nekroze, serumo AST ir 3 DS (entro la serie, n=24). ALT kiekis padidėja dar net nepasirodžius klinikiniams ligos požymiams ir simptomams. Abiejų fermentų kiekis viršutinę ribą gali viršyti net 100 kartų, tačiau dažniausiai pasitaiko Imprecisione (risultati espressi in U/l) 20-50 kartų viršutinės ribos viršijimas. Metodica monoreagente: Nors ir AST, ir ALT kiekis serume padidėja, kai pažeidžiamas kepenų ląstelių vientisumas, Media Media Media ALT yra labiau susijęs su kepenimis fermentas. AST gali padidėti dėl širdies ar skeleto 33 U/l 90 U/l 108 U/l raumenų pažeidimų, taip pat ir dėl kepenų parenchimos. ALT aktyvumo padidėjimas serume retai pastebimas esant kitoms, ne parenchiminėms kepenų ligoms. DS CV% DS CV% DS CV% Entro la serie 0.6 1.8 0.6 0.6 0.9 0.8 PROCEDŪROS PRINCIPAS Fra la serie 0.5 1.5 0.9 1.0 1.0 0.9 ALT katalizuoja amino grupės perėjimą iš alanino į oksaglutaratą, susidarant glutamatui ir Totale 1.0 3.0 1.8 2.0 2.7 2.4 piruvatui. Piruvatas laktato dehidrogenaze (LDH) redukuojamas į laktatą.

Metodica con tre reagenti: ALT Media Media Media L-alaninas + 2-oksoglutaratas <⎯⎯> L-glutamatas + piruvatas 31 U/l 89 U/l 109 U/l LDH DS CV% DS CV% DS CV% + + Entro la serie 0.6 1.8 0.6 0.7 1.0 0.9 Piruvatas + NADH + H <⎯⎯> D-laktatas + NAD

Fra la serie 0.2 0.7 0.8 0.9 0.8 0.8 Šioje reakcijoje ekvivalentiškas NADH kiekis yra oksiduojamas į NAD. Dėl to sumažėja Totale 0.8 2.6 1.5 1.7 2.2 2.0 absorbcija prie 340 nm ir yra tiesiogiai proporcinga ALT aktyvumui serume. IFCC etaloninis metodas naudoja 0,1 mmol/l piridoksal–5’-fosfato (P-5´-P), kuris, kaip È stato eseguito uno studio di precisione conformemente al protocollo NCCLS, documento buvo parodyta, yra efektyvus aktyvuoti apo ALT per 5 minutes (2). EP5-A, utilizzando un analizzatore Konelab 60 per 20 giorni, con un numero di misurazioni pari a n=80. INFORMACIJA APIE REAGENTUS Reagentas A: Fermentų reagentas Metodo di confronto Kodas: 981361 7 x 40 ml Metodica monoreagente: Kodas: 981769 8 x 16 ml È stato eseguito uno studio comparato secondo il protocollo NCCLS Documento EP9-A Reagentas B: Substratas come linee guida e una metodica bireagente Konelab come riferimento. Kodas: 981361 7 x 10 ml Regressione lineare (risultato espresso in U/I): Kodas: 981769 8 x 4 ml y = 0.75 x + 2.8 r = 0.988 Koncentracijos n = 60 Reagentas A: Fermentų reagentas Le concentrazioni dei campioni erano comprese tra 7 e 190 U/l. Tris-buferis, pH 7.15 137.5 mmol/l Metodica con 3 reagenti: L-alaninas 700 mmol/l È stato eseguito uno studio comparato secondo il protocollo NCCLS Documento EP9-A LDH > 1650 U/l come linee guida e una metodica bireagente Konelab come riferimento. NaN3 < 0.1% Regressione lineare (risultato espresso in U/I): y = 1.00 x + 0.2 Reagentas B: Substratas r = 1.00 2-oksoglutaratas 82,5 mmol/l n = 65 NADH 1,0 mmol/l Le concentrazioni dei campioni erano comprese tra 10 e 155 U/l. NaN3 < 0.1 % Pastaba: Skystas piridoksal-5’-fosfatas nėra įtrauktas į rinkinį. Preparatą galima užsakyti I risultati ottenuti nei singoli laboratori possono differire dai dati di imprecisione e di atskirai, jo kodo numeris - 981839. confronto dei metodi riportati. BIBLIOGRAFIA Atsargumo priemonės 1. Burtis, CA and Ashwood, E R (ed.), Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry, 5th Tik in vitro diagnostiniam naudojimui. Laikykitės įprastų atsargumo priemonių, būtinų dirbant su laboratoriniais reagentais. reserved. hts edition, W B Saunders Company, Philadelphia, 2001, pp. 354 - 355. g 2. IFCC 2002/5: IFCC Primary Reference Procedures for the Measurement of Catalytic Reagentų sudėtyje yra natrio azido, kaip konservanto. Negalima ryti. Venkite patekimo ant odos ir gleivinės. Activity Concentrations of Enzymes at 37 °C, Part. 4 Reference Procedure for the Measurement of Catalytic Concentrations of Alanine Aminotransferase, Clin.Chem.Lab.Med. 2002, 40(7): 718-724. Paruošimas 3. Guder WG, Narayanan S, Wisser H, Zawta B. List of Analytes; Preanalytical variables. Kodas: 981361, 981769 1 reagento metodas (be P-5´-P): Brochure in: Samples: From Patient to the Laboratory. GIT Verlag GmbH, Darmstadt, 1996. Supilkite B reagento turini i A reagento buteliuką. Uždarykite buteliuką ir sumaišykite. 4. Young, D.S., Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests, Fifth Edition, AACC Press, Sumaišytą reagentą saugokite nuo šviesos! Washington, D.C., 3-8 – 3-23, 2000. 3 reagentų metodas (su P-5´-P): Reagentai paruošti naudojimui. PRODUTTORE Pastaba: Prieš dėdami reagento buteliukus ar indus į Konelab analizatorių, įsitikinkite, kad Thermo Fisher Scientific Oy buteliuko kaklelyje arba reagento paviršiuje nėra burbuliukų. Clinical Diagnostics Finland Ratastie 2, P.O. Box 100, FI-01621 Vantaa, Finlandia Saugojimas ir stabilumas Tel. +358 9 329 100, Fax +358 9 3291 0300 www.thermo.com/konelab Jei laikomi apsaugoti nuo šviesos, reagentai uždarytuose buteliukuose yra pastovūs prie 2...8 °C iki ant etiketės užrašytos galiojimo datos. Data della revisione (aaa-mm-gg) Apie analizatoriuje patalpintų reagentų stabilumą skaitykite Pastabose apie taikymą. 2007-08-14 MĖGINIŲ SURINKIMAS

Modifiche rispetto alla versione precedente: Mėginio rūšis Ragione sociale aggiornata Galima naudoti skaidrų serumą arba heparino plazmą.

Atsargumo priemonės Su žmonių mėginiais reikia dirbti ir juos šalinti taip, lyg jie būtų potencialiai užkrečiami. Template: D01162_4 © 2008 Thermo Fisher Scientific Inc. All ri All Inc. Scientific Fisher Thermo © 2008 D01162_4 Template:

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Laikymas (3) Metodų palyginimas Mėginį galima laikyti 3 dienas esant 20...25 °C, 7 dienas esant 4...8 °C arba 2 mėnesius 1 reagento metodas: esant -20 °C temperatūrai. Palyginimu studija atlikta pagal NCCLS dokumento EP9-A gaires ir, kaip etaloną naudojant Konelab 2 reagentų metodą. TYRIMO TVARKA Linijinė regresija (rezultatų vienetas U/I): Apie automatizuotą procedūrą naudojant Konelab analizatorių skaitykite Vartotojo y = 0.75 x + 2.8 instrukcijoje ir Pastabose apie taikymą. Jei prietaisas naudojamas procedūroms, kurių r = 0.988 nepatvirtino Thermo Fisher Scientific Oy, jų sėkmės garantuoti negalima ir tokį taikymą turi n = 60 įvertinti vartotojas. Mėginių koncentracijos buvo tarp 7 ir 190 U/I. 3 reagentų metodas: Skiriamos medžiagos Palyginimu studija atlikta pagal NCCLS dokumento EP9-A gaires ir, kaip etaloną Prieš tai aprašyti reagentai. naudojant Konelab 2 reagentų metodą. Linijinė regresija (rezultatų vienetas U/I): y = 1.00 x + 0.2 Būtinos, bet neskiriamos medžiagos r = 1.00 Piridoksal-5’-fosfatas (kodas 981839) 3 reagentų metodui. n = 65 Toliau aprašytos kontrolinės medžiagos. Mėginių koncentracijos buvo tarp 10 ir 155 U/I.

Kalibravimas Individualiose laboratorijose gauti rezultatai gali skirtis nuo pateiktųjų duomenų. Atsakas (A) paverčiamas rezultato vienetais, pritaikant skaičiavimo koeficientą. BIBLIOGRAFIJA Taip pat kaip kalibratorių galima naudoti eCal (981830) pagal instrukcijas pateiktas eCal (981830) pakuotės informaciniame lapelyje. 1. Burtis, CA and Ashwood, E R (ed.), Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry, 5th edition, W B Saunders Company, Philadelphia, 2001, pp. 354 - 355. Kokybės valdymas 2. IFCC 2002/5: IFCC Primary Reference Procedures for the Measurement of Catalytic Naudokite kokybės valdymo mėginius bent kartą per dieną ir po kiekvieno kalibravimo, taip Activity Concentrations of Enzymes at 37 °C, Part. 4 Reference Procedure for the pat kiekvieną kartą, kai naudojate naują reagento buteliuką. Measurement of Catalytic Concentrations of Alanine Aminotransferase, Kontrolinės medžiagos: Clin.Chem.Lab.Med. 2002, 40(7): 718-724. Nortrol, kodas 981043 3. Guder WG, Narayanan S, Wisser H, Zawta B. List of Analytes; Preanalytical variables. Abtrol, kodas 981044 Brochure in: Samples: From Patient to the Laboratory. GIT Verlag GmbH, Darmstadt, 1996. Kontrolės intervalai ir apribojimai turi būti nustatyti pagal individualios laboratorijos 4. Young, D.S., Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests, Fifth Edition, AACC Press, reikalavimus. Kokybės valdymo mėginių rezultatai turi patekti į iš anksto laboratorijos Washington, D.C., 3-8 – 3-23, 2000. nustatytas ribas. REZULTATŲ APSKAIČIAVIMAS GAMINTOJAS Konelab analizatorius automatiškai apskaičiuoja rezultatus taip: Thermo Fisher Scientific Oy Clinical Diagnostics Finland Aktyvumas išreikštas U/I = dA/min x koeficientas Ratastie 2, P.O. Box 100, FI-01621 Vantaa Tel. +358 9 329 100, faksas +358 9 3291 0300 TV x 1000 www.thermo.com/konelab Teorinis koeficientas = - ⎯⎯⎯⎯⎯- 6.3 x SV x P Peržiūros data (metai-mėnuo-diena) 2007-08-14 kai: TV = Bendras reakcijos tūris ml SV= Mėginio tūris ml Pokyčiai nuo ankstesnės versijos 6.3= NADH ekstinkcijos koeficientas prie 340 nm P= Kiuvetės trajektorijos ilgis = 1 Atnaujintas kompanijos pavadinimas. Konversijos koeficientas µkat/l = (U/l)/60

Jei eCal (981830) naudojamas kaip kalibratorius, Konelab analizatorius automatiškai apskaičiuoja rezultatus, naudodamas kalibravimo kreivę. PROCEDŪROS RIBOTUMAI

Interferencija LV Kriterijus: Pradinių verčių atstatymas ± 10 % ribose. 1 reagento metodas: Konelab™/ T Sērijas Konjuguotasis bilirubinas: Interferencijos nepastebėta iki 420 μmol/l (246 mg/dl). Nekonjuguotasis bilirubinas: Interferencijos nepastebėta iki 600 μmol/l (35.1 mg/dl). ALT/GPT (IFCC) Hemolizatas: Iki 10 g/l hemoglobino interferencijos nepastebėta. Lipemija: Iki 2 g/l Intralipid® (Fresenius Kabi AB prekinis ženklas) interferencijos nepastebėta. Koreliacija tarp drumstimosi ir trigliceridu koncentracijos labai nedidele. 981361 7 x 50 ml 3 reagentų metodas: 981769 8 x 20 ml Konjuguotasis bilirubinas: Interferencijos nepastebėta iki 420 μmol/l (24.6 mg/dl). Nekonjuguotasis bilirubinas: Interferencijos nepastebėta iki 600 μmol/l (35.1 mg/dl). Hemolizatas: Interferencijos nepastebėta iki 8 g/l hemoglobino. ŠIS IEPAKOJUMA PIELIKUMS IR PIELIETOJAMS Lipemija: Iki 1 g/l Intralipid® interferencijos nepastebėta. ĀRPUS ASV. JEBKURA ATSAUKSME UZ KONELAB Daugiau apie interferencijos medžiagas skaitykite 4 nuorodoje. SISTĒMĀM ATTIECAS ARĪ UZ T SĒRIJĀM. NUMATOMOS VERTĖS (2) Vyrai: < 45 U/l (< 0.74 μkat/l) prie 37 °C PAREDZĒTĀ LIETOŠANA Moterys: < 34 U/l (< 0.56 μkat/l) prie 37 °C Šios vertės yra tik orientacinės. Rekomenduojama, kad kiekviena laboratorija patikrintų šį Lai in vitro kvantitatīvi noteiktu aspartāta alanīna aminotransferāzi (L-Aspartātu L-Alanīna : diapazoną arba išvestų atskaitos intervalą savo aptarnaujamiems gyventojams. 2-oksoglutarāta aminotransferāzes (AST), EC 2.6.1.2) aktivitāti cilvēka serumā vai plazmā ar Konelab analizatoriem. Visi testa rezultāti ir jāņem vērā, vadoties pēc klīniskā konteksta. MATAVIMO SRITIS KOPSAVILKUMS (1) 1 reagento metodas: Alanīna aminotransferāze (ALAT/ALT), agrāk saukta glutamiskā piruvīta transamināze 4 - 300 U/l (0.07 – 5.00 μkat/l) glutamātpiruvāttransamināze (GPT), un asparāta aminotransferāze (ASAT/AST), agrāk Praplėsta matavimo sritis atskiedus antrą kartą: saukta glutamiskā oksalacētiskā transamināze glutamātoksalacetāttransferāze (GOT), 4 - 1800 U/l (0.07 – 30.00 μkat/l) pieder pie enzīmu grupas, aminotransferāzēm jeb transamināzēm, kuras katalizē atgriezenisko alfa-keto skābju transformāciju aminoskābēs, pārvietojot aminogrupas. 3 reagentų metodas: Gan AST, gan ALT normāli atrodami cilvēka plazmā, žultī, muguras smadzeņu šķidrumā 5 - 250 U/l (0.08 – 4.17 μkat/l) un siekalās, taču šīs vielas nav atrodamas urīnā, ja vien nepastāv nieru bojājums. Vīrusa Praplėsta matavimo sritis atskiedus antrą kartą: hepatīta un citos aknu slimību, kas saistītas ar aknu nekrozi, gadījumos seruma AST un 5 - 1500 U/l (0.08 – 25.00 μkat/l) ALT līmenis ir paaugstināts pat pirms slimības klīnisko pazīmju un simptomu parādīšanās. Abu enzīmu līmenis var sasniegt vērtības, kas ir 100 reižu lielākas par augstāko EKSPLOATACIJOS CHARAKTERISTIKOS reserved. hts

pieļaujamo robežu, tomēr visbiežāk sastopams 20 līdz 50 reižu lielāks paaugstinājums g Aptikimo ribos Kaut arī gan AST, gan ALT serumu līmenis tiek palielināts ikreiz, kad procesi ietekmē aknu šūnu integritāti, ALT ir daudz specifiskāks aknu enzīms. Palielināti AST līmeņi var tikt 1 reagento metodas: paaugstināti saistībā ar sirds vai skeleta muskuļu bojājumiem, kā arī aknu parenhīmas 2 U/l (0,03 μkat/l) bojājuma gadījumā. Seruma ALT aktivitātes palielināšanās ir reti novērojama apstākļos, 3 reagentų metodas: kas nav saistīti ar parenhimālu aknu slimību. 2 U/l (0.03 μkat/l) Aptikimo riba žymi žemiausią išmatuojamą koncentraciją / aktyvumą, kurį galima atskirti PROCEDŪRAS PRINCIPS nuo nulio. Ji apskaičiuojama kaip nulinio mėginio koncentracija + 3 SD (serijoje, n=24). ALT katalizē aminogrupas pārvietošanos no alanīna uz oksoglutarātu ar glutamāta un pyruvate piruvāta izveidošanos. Pyruvate Piruvāts tiek reducēts uz lactate laktātu ar lactate laktāta dehidrogenāzi (LDH). Netikslumas (rezultatų matavimo vienetas U/l) 1 reagento metodas: ALT Vidurkis Mean Mean L- alanīna + 2-oksoglutarāts <⎯⎯> L-glutamāts + Pyruvate Piruvāts 33 U/l 90 U/l 108 U/l LDH + + SD CV% SD CV% SD CV% Pyruvate Piruvāts + NADH + H <⎯⎯> D-Lactate Laktāts + NAD Serijoje 0.6 1.8 0.6 0.6 0.9 0.8 Kas seriją 0.5 1.5 0.9 1.0 1.0 0.9 Šajā pašā reakcijā līdzvērtīgs NADH daudzums tiek oksidēts par NAD. Seko attiecīga Iš viso 1.0 3.0 1.8 2.0 2.7 2.4 absorbētspējas samazināšanās pie 340 nm, un tā ir tieši proporcionāla ALT aktivitātei serumā. 3 reagentų metodas: IFCC atsauces metode iekļauj P-5´-P pie 0.1 mmol/l, kas ir apstiprināta kā pietiekoša, lai aktivizētu ALT 5 minūšu laikā (2). Vidurkis Mean Mean 31 U/l 89 U/l 109 U/l REAĢENTU INFORMĀCIJA SD CV% SD CV% SD CV% Reaģents A: Enzīma reaģents Serijoje 0.6 1.8 0.6 0.7 1.0 0.9 Kods: 981361 7 x 40 ml Kas seriją 0.2 0.7 0.8 0.9 0.8 0.8 Kods: 981769 8 x 16 ml Iš viso 0.8 2.6 1.5 1.7 2.2 2.0 Reaģents B: Substrāts Kods: 981361 7 x 10 ml Tikslumo studija atlikta pagal gaires, išdėstytas NCCLS dokumente EP5-A, 20 dienu Kods: 981769 8 x 4 ml ri All Inc. Scientific Fisher Thermo © 2008 D01162_4 Template: naudojant Konelab 60, matavimu skaičius buvo n = 80.

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Koncentrācijas PAREDZAMĀS VĒRTĪBAS (2) Vīriešiem: < 45 U/l (< 0.74 µkat/l) pie 37 °C Reaģents A: Enzīma reaģents Sievietēm: < 34 U/l (< 0.56 µkat/l) pie 37 °C Tris buferšķīdums, pH 7.15 137.5 mmol/l Pēdiņās ietvertās vērtības ir jāuztver tikai kā uzziņas vērtībās. Ieteicams, lai katra laboratorija L-Alanine Alanīns 700 mmol/l verificētu šo diapazonu vai izstrādātu uzziņas intervālu populācijai, kam tā darbojas. LDH > 1650 U/l NaN3 < 0.1 % MĒRĪŠANAS DIAPAZONS

Reaģents B: Substrāts 1-reaģenta metode: 2-oksoglutarāts 82.5 mmol/l 4 - 300 U/l (0.07 – 5.00 μkat/l) NADH 1.0 mmol/l Paplašināts mērīšanas diapazons pēc sekundāras atšķaidīšanas: NaN3 < 0.1 % 4 – 1800 U/l (0.07 – 30.00 μkat/l) Piezīme: Šķidrais pirīdoksāl-5’-fosfāts komplektā nav iekļauts. To iespējams pasūtīt 3-reaģenta metode: atsevišķi at koda numuru 981839. 5 - 250 U/l (0.08 – 4.17 μkat/l) Paplašināts mērīšanas diapazons pēc sekundāras atšķaidīšanas: Piesardzības pasākumi 5 – 1500 U/l (0.08 – 25.00 μkat/l) Tikai in vitro diagnostikas vajadzībām. Nodrošiniet parastos piesardzības pasākumus, kas jāievēro attiecībā uz rīkošanos ar visiem laboratorijas reaģentiem. VEIKTSPĒJAS RAKSTUROJUMS Reaģents satur nātrija azādu kā konservantu. Nenorīt. Izvairieties no kontakta ar ādu un gļotādu. Uztveršanas robeža Sagatavošana 1-reaģenta metode: Kods: 981361, 981769 2 U/l (0.03 µkat/l) 1-Viena reaģenta metode (bez P-5´-P): 3-reaģenta metode: Pievienojiet reaģenta B saturu reaģenta A pudelei. Aizkorķējiet un sajauciet. Aizveriet mēģeni un 2 U/l (0.03 μkat/l) sajauciet. Monoreaģents ir jāsargā no gaismas iedarbības! Uztveršanas robeža ir zemkākā izmērāmā koncentrācija/aktivitāte, ko var atšķirt no nulles. 3-Divu reaģentu metode (ar P-5´-P): Tā tiek aprēķināta kā nulles parauga koncentrācija + 3 SD (darbības laikā, n=24). Reaģenti ir gatavi lietošanai. Piezīme: Ievietojot reaģenta pudelītes vai traukus Konelab analizatorā, pārliecinieties, ka pudelītes kakliņā vai uz reaģenta virsmas nav burbuļi. Neprecizitāte (rezultāta vienība U/l) 1-reaģenta metode:

Uzglabāšana un Stabilitāte Vidējais Vidējais Vidējais Reaģenti neatvērtās pudelītēs ir stabili 2…8 °C temperatūrā līdz uzglabāšanas laika, kas 33 U/l 90 U/l 108 U/l uzdrukāts uz etiķetes, beigām, ja tie tiek pasargāti no gaismas iedarbības. SD CV% SD CV% SD CV% Vadieties pēc sava Konelab analizatora pielietojuma piezīmēm, lai iegūtu informāciju par Darbības laikā 0.6 1.8 0.6 0.6 0.9 0.8 ievietoto reaģentu stabilitāti. Ar dienas starpību 0.5 1.5 0.9 1.0 1.0 0.9 PARAUGU IEGŪŠANA Kopā 1.0 3.0 1.8 2.0 2.7 2.4

3-reağenta metode: Parauga tips Vidējais Vidējais Vidējais Var izmantot nehemolizētu serumu vai heparīna plazmu. 31 U/l 89 U/l 109 U/l SD CV% SD CV% SD CV% Piesardzības pasākumi Darbības laikā 0.6 1.8 0.6 0.7 1.0 0.9 Ar no cilvēkiem iegūtajiem paraugiem ir jārīkojas un no tiem jāatbrīvojas tā, it kā tie būtu Ar dienas starpību 0.2 0.7 0.8 0.9 0.8 0.8 iespējami infekciozi. Kopā 0.8 2.6 1.5 1.7 2.2 2.0

Uzglabāšana (3) Precizitātes izpēte tika veikta saskaņā ar noteikumiem NCCLS Dokumentā EP5-A, izmantojot Konelab 60, divdesmit dienu laikā, kur mērījumu skaitlis bija n = 80. Paraugu var uzglabāt 3 dienas 20…25 °C temperatūrā, 7 dienas 4…8 °C temperatūrā vai 2 dienas –20 °C temperatūrā tums. Metodes salīdzināšana PĀRBAUDES PROCEDŪRA 1-reaģenta metode: Vadieties pēc Uzziņas Rokasgrāmatas un Pielietojuma Piezīmēm, lai iegūtu informāciju Salīdzināšanas izpēte tikai veikta, kā direktīvu izmantojot NCCLS dokumentu EP9-A un par sava Konelab analizatora automātisko procedūru. Jebkāds pielietojuums, kuru nav citu komerciāli pieejamu divu reaģentu metodi kā atsauci. apstiprinājis Thermo Fisher Scientific Oy, nevar sniegt garantētu rezultātu, tādēļ tas Lineārā regresija (rezultāta vienība U/l): jāizvērtē pašam lietotājam. y = 0.75 x + 2.8 r = 0.988 Piegādātie materiāli n = 60 Paraugu koncentrācija bija starp 7 un 190 U/l. Iepriekš aprakstītie reaģenti. 3-reaģenta metode: Salīdzināšanas izpēte tikai veikta, kā direktīvu izmantojot NCCLS dokumentu EP9-A un Nepieciešamie, taču nepiegādātie materiāli Konelab divu-reağentu metodi kā atsauci. Piridoksāl –5’-fosfāts (kods 981839) 3-reağentu metodei. Lineārā regresija (rezultāta vienība U/l): Kontroles, kas aprakstītas tālāk. y = 1.00 x + 0.2 r = 1.00 n = 65 Kalibrēšana Paraugu koncentrācija bija starp 10 un 155 U/l. Atbilde (dA/min) tiek pārveidota rezultāta vienībās, izmantojot aprēķinu faktoru. Jeb izmantojiet eCal (981830) kā kalibrētāju saskaņā ar instrukcijām, kas ievietotas eCal Rezultāti, kas iegūti atšķirīgās laboratorijās, var atšķirties no dotajiem veiktspējas datiem. (981830) iepakojumā. BIBLIOGRĀFIJA Kvalitātes Kontrole 1. Burtis, CA and Ashwood, E R (ed.), Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry, 5th Izmantojiet kvalitātes kontroles paraugus vismaz rezi dienā un ikreiz, kad tiek izmantota edition, W B Saunders Company, Philadelphia, 2001, pp. 354 - 355. jauna reaģenta pudele. 2. IFCC 2002/5: IFCC Primary Reference Procedures for the Measurement of Catalytic Pieejamās kontroles: Activity Concentrations of Enzymes at 37 °C, Part. 4 Reference Procedure for the Nortrol, kods 981043 Measurement of Catalytic Concentrations of Alanine Aminotransferase, Abtrol, kods 981044 Kontroles intervāli un ierobžojumi ir jāpiemēro individuālajām laboratorijas prasībām. Clin.Chem.Lab.Med. 2002, 40(7): 718-724. Kvalitātes kontroles paraugu rezultātiem ir jāsakrīt ar laboratorijas iepriekš noteiktajiem 3. Guder WG, Narayanan S, Wisser H, Zawta B. List of Analytes; Preanalytical variables. limitiem. Brochure in: Samples: From Patient to the Laboratory. GIT Verlag GmbH, Darmstadt, 1996. REZULTĀTU APRĒĶINĀŠANA 4. Young, D.S., Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests, Fifth Edition, AACC Press, Konelab analizators sekojoši automātiski aprēķina rezultātus: Washington, D.C., 3-8 – 3-23, 2000.

Aktivitāte U/l = dA/min x Faktors RAŽOTĀJS

Thermo Fisher Scientific Oy reserved. hts TV x 1000 Clinical Diagnostics Finland g Teorētiskais faktors = ⎯⎯⎯⎯⎯⎯- Ratastie 2, P.O. Ratastie 2, P.O. Box 100, FI-01621 Vantaa 6.3 x SV x P Tel. +358 9 329 100, Fax +358 9 3291 0300 www.thermo.com/konelab kur: TV= Kopējais reakcijas daudzums ml SV= Parauga daudzums ml 6.3= NADH zuduma koeficents pie 340 nm Atjaunošanas datums (yyyy-mm-dd) P= Kuvetes ceļš = 1 2007-08-14 Konversijas faktors µkat/l = (U/l)/60 Izmaiņas no iepriekšējās versijas Ja kā kalibrētājs tiek izmantots eCal (981830), Konelab analizators rezultātus aprēķina automātiski, izmantojot kalibrēšanas līkni. Atjaunināts uzņēmuma nosaukums. PROCEDŪRAS IEROBEŽOJUMI

Interference Kritērijs: Atjaunošana ± 10% robežās no sākotnējām vārtībām. 1-reaģenta metode: Saistīts bilirubīns: Līdz 420 μmol/l (24.6 mg/dl) interference nav novērota. Nesaistīts bilirubīns: Līdz 600 μmol/l (35.1 mg/dl) interference nav novērota. Hemolizēts: Līdz 10 g/l hemoglobīna interference nav novērota. Lipēmija: Līdz 2 g/l Intralipid® (Fresenius Kabi AB preču zīme) interference nav novērota. Pastāv vāja korelācija starp duļķainumu un triglicerīdu koncentrāciju. 3-reaģenta metode: Saistīts bilirubūns: Līdz 420 µmol/l (24.6 mg/dl) interference nav novērota. Nesaistīts bilirubīns: Līdz 600 µmol/l (35.1 mg/dl) interference nav novērota. Hemolizēts: Līdz 8 g/l hemoglobīna interference nav novērota. Lipēmija: Līdz 2 g/l Intralipid® interference nav novērota.

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PL Przechowywanie (3) Próbki mogą być przechowywane przez 3 dni w 20…25 °C, przez 7 dni w 4…8 °C lub Konelab™ / Seria T przez 2 miesiące w –20 °C. ALT/GPT (IFCC) POMIAR Należy odnieść się do instrukcji i aplikacji dla zautomatyzowanej procedury na analizatorze Konelab. Aplikacja, która nie została autoryzowana przez Thermo Fisher 981361 7 x 50 ml Scientific Oy nie może być gwarancją i musi zostać oceniona przez użytkownika. 981769 8 x 20 ml NINIEJSZA ULOTKA OPAKOWANIA Dostarczone materiały PRZEZNACZONA JEST DO STOSOWANIA POZA Odczynniki wymienione powyżej. GRANICAMI USA. WSZELKIE ODNIESIENIA DO Materiały wymagane, nie należące do zestawu SYSTEMÓW KONELAB ODNOSZĄ SIĘ RÓWNIEŻ DO 5’-fosforan pirydoksalu (code 981839) do metody trój-odczynnikowej. SERII T. Kontrole wskazane poniżej. Kalibracja ZASTOSOWANIE Wynik otrzymujemy w jednostkach mnożąc odczyt (dA/min) przez współczynnik kalkulacyjny. Do ilościowego oznaczania in vitro aktywności aminotransferazy alaninowej (L-alanina: Odczynnik eCal (981830) można również wykorzystać jako związek odniesienia – sposób 2- oksoglutaran aminotransferazy (ALT), EC 2.6.1.2) w ludzkiej surowicy lub osoczu na postępowania opisano w instrukcji umieszczonej na wkładce informacyjnej do opakowania analizatorach Konelab. Interpretacji wyników należy dokonać w kontekście klinicznym. odczynnika eCal (981830). OMÓWIENIE (1) Aminotransferaza alaninowa (ALT) (uprzednio określana jako transaminaza glutaminowo- Kontrola jakości pirogronianowa) oraz amino-transferaza asparaginianowa (AspAT) (uprzednio określana Zalecane jest wykonanie kontroli jakości co najmniej raz dziennie, po każdej kalibracji i jako transaminaza glutaminowo-szczawiooctanowa) należą do grupy enzymów – zawsze przy użyciu nowej butelki odczynnika. aminotransferaz lub transaminaz – katalizujących odwracalną reakcję przemiany Dostępne kontrole: α-ketokwasów w aminokwasy poprzez przeniesienie grup aminowych. Nortrol, numer 981043 AspAT i ALT w warunkach fizjologicznych występują w ludzkim osoczu, żółci, płynie Abtrol, numer 981044 mózgowo-rdzeniowym i ślinie. Oba związki nie występują w moczu, chyba że dojdzie do Przedziały i limity kontroli muszą być dostosowane do indywidualnych wymagań upośledzenia czynności nerek. U chorych z wirusowym zapaleniem wątroby i innymi laboratorium. Wyniki kontroli jakości powinny odpowiadać wartościom ustanowionym schorzeniami wątroby przebiegającymi z martwicą komórek wątrobowych zwiększenie wstępnie przez laboratorium. poziomów AspAT i ALT w surowicy następuje przed objawami przedmiotowymi oraz podmiotowymi. Poziomy obu enzymów mogą osiągać wartości 100-krotnie przekraczające OBLICZANIE WYNIKÓW górną granicę zakresu referencyjnego. Niemniej jednak najczęściej występuje 20 - 50- Wyniki obliczane są automatycznie przez analizator Konelab, używając wzoru: krotny wzrost poziomu aktywności. Wprawdzie w przypadku uszkodzenia komórek wątrobowych dochodzi do zwiększenia Aktywność w U/l = dA/min x faktor poziomu AspAT i ALT w surowicy, jednak ALT wykazuje większą swoistość w odniesieniu do schorzeń wątroby. Wzrost poziomu AspAT może nastąpić na skutek uszkodzenia TV x 1000 mięśnia sercowego, mięśni szkieletowych lub miąższu wątroby. Wzrost aktywności ALT w Równoważnik miareczkowania = - ⎯⎯⎯⎯⎯ surowicy rzadko towarzyszy schorzeniom innym niż uszkodzenie miąższu wątroby. 6.3 x SV x P

ZASADA METODY gdzie: TV = Objętość mieszaniny reakcyjnej w ml ALT katalizuje przeniesienie grupy aminowej od alaniny do oksoglutaranu z utworzeniem SV = Objętość próbki w ml glutaminianu i pirogronianu. Pirogronian jest redukowany do mleczanu przez 6.3 = Współczynnik ekstynkcji NADH przy 340 nm dehydrogenazę mleczanową (LDH). P = Światło kuwety = 1 Współczynnik przeliczeniowy μkat/l = (U/l)/60 ALT L-alania + 2- oksoglutaran <⎯⎯> L-glutamian + pirogronian Jeżeli odczynnik eCal (981830) jest stosowany jako związek odniesienia, uzyskane wyniki są automatycznie obliczane w analizatorze Konelab w oparciu o krzywą kalibracyjną. LDH + + pirogronian + NADH + H <⎯⎯> D-mleczanu + NAD OGRANICZENIA PROCEDURY

W tej reakcji równoważna ilość NADH jest utleniana do NAD. Spadek absorbancji przy 340nm jest wprost proporcjonalny do aktywności ALT w surowicy. Interferencje Metoda odniesienia IFCC zawiera -5’-fosforan (P−5´-P) w ilości 0.1 mmol/l, który został Kryterium: Zakres±10% wartości początkowych. dodany, aby osiągnąć aktywność apo ALT w 5 minut (2). Metoda jedno-odczynnikowa: Bilirubina związana: Nie ma wpływu aż do 420 μmol/l (24.6 mg/dl). INFORMACJA O ODCZYNNIKU Bilirubina wolna: Nie ma wpływu aż do 600 μmol/l (35.1 mg/dl). Odczynnik A: Odczynnik enzymatyczny Hemoliza: Nie ma wpływu aż do 10 g/l hemoglobiny. Numer: 981361 7 x 40 ml Lipemia: Nie ma wpływu aż do 2 g/l Intralipid® (znak firmowy Fresenius Kabi AB). Numer: 981769 8 x 16 ml Istnieje słaba korelacja pomiędzy stopniem zmętnienia a stężeniem triglicerydów Odczynnik B: Substarat Metoda trój-odczynnikowa: Numer: 981361 7 x 10 ml Bilirubina związana: Nie ma wpływu aż do 420 μmol/l (24.6 mg/dl). Numer: 981769 8 x 4 ml Bilirubina wolna: Nie ma wpływu aż do 600 μmol/l (35.1 mg/dl). Hemoliza: Nie ma wpływu aż do 8 g/l hemoglobiny. Stężenia Lipemia: Nie ma wpływu aż do 2g/l Intralipid®. Odczynnik A: Odczynnik enzymatyczny Dla innych interferujących substancji, odnieś się do pozycji 4. Bufor Tris, pH 7.15 137.5 mmol/l WARTOŚCI OCZEKIWANE (2) L-alanina 700 mmol/l LDH > 1650 U/l Mężczyźni: < 45 U/l (< 0.74 μkat/l) w 37 °C Kobiety: < 34 U/l (< 0.56 μkat/l) w 37 °C NaN3 < 0.1 % Odczynnik B: Substarat Podane wartości powinny służyć tylko jako wytyczne. Zaleca się, aby każde laboratorium 2-oksyglutaran 82.5 mmol/l zweryfikowało ten zakres, lub wprowadziło zmiany dla danej populacji. NADH 1.0 mmol/l NaN3 < 0.1 % ZAKRES POMIARU Metoda jedno-odczynnikowa: Uwaga: 4 - 300 U/l (0.07 – 5.00 μkat/l) Płynny -5’-fosforan pirydoksalu nie należy do zestawu. Może być zamówiony oddzielnie. Rozszerzony zakres pomiaru po rozcieńczeniu: Numer katalogowy: 981839. 4 – 1800 U/l (0.07 – 30.00 μkat/l) Metoda trój-odczynnikowa: Środki ostrożności 5 - 250 U/l (0.08 – 4.17 μkat/l) Wyłącznie do diagnostyki in vitro. Zachowaj środki ostrożności wymagane dla Rozszerzony zakres pomiaru po rozcieńczeniu: odczynników laboratoryjnych. 5 – 1500 U/l (0.08 – 25.00 μkat/l) Odczynnik zawiera azydek sodu jako konserwant. Nie połykać. Unikać kontaktu ze skórą i CHARAKTERYSTYKA PRACY reserved. hts błonami śluzowymi. g

Przygotowanie Granica wykrywalności Numer: 981361, 981769 Metoda jedno-odczynnikowa: Metoda jedno-odczynnikowa (bez P-5´-P): 2 U/l (0.03 μkat/l) Dodaj zawartość odczynnika B do butelki z odczynnikiem A. Zamknij i zamieszaj. Odczynnik Metoda trój-odczynnikowa: powinien być chroniony przed światłem! 2 U/l (0.03 μkat/l) Granica wykrywalności to najniższe wymierne stężenie/aktywność, które może zostać Metoda trój-odczynnikowa (z P-5´-P): odróżnione od zera. Obliczane jest jako stężenie próbki zerowej + 3 SD (wewnątrz serii, Odczynniki są gotowe do użycia. n =24).

Uwaga: Sprawdź przed wstawieniem naczynia z odczynnikiem do analizatora Konelab, Nieprecyzyjność (wyniki w jednostkach U/l) czy w fiolce i na powierzchni odczynnika nie znajdują się pęcherzyki powietrza. Metoda jedno-odczynnikowa: Średnia Średnia Średnia Przechowywanie i stabilność 33 U/l 90 U/l 108 U/l Zamknięte odczynniki są trwałe w temperaturze 2…8 °C aż do daty ważności podanej na SD CV% SD CV% SD CV% opakowaniu. Chronić przed światłem. Wewnątrz oznaczenia 0.6 1.8 0.6 0.6 0.9 0.8 Trwałość odczynników w analizatorze podana jest w aplikacji analizatora Konelab. Pomiędzy oznaczeniami 0.5 1.5 0.9 1.0 1.0 0.9 Całkowita 1.0 3.0 1.8 2.0 2.7 2.4 POBRANIE I PRZYGOTOWANIE PRÓBKI Metoda trój-odczynnikowa: Rodzaj próbki Średnia Średnia Średnia Jasna surowica lub osocze pobrane na heparynę. 31 U/l 89 U/l 109 U/l SD CV% SD CV% SD CV% Wewnątrz oznaczenia 0.6 1.8 0.6 0.7 1.0 0.9 Środki ostrożności Pomiędzy oznaczeniami 0.2 0.7 0.8 0.9 0.8 0.8 Ludzkie próbki powinny być traktowane jako potencjalnie zakaźne. Całkowita 0.8 2.6 1.5 1.7 2.2 2.0

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Precyzja została wykonana zgodnie z zaleceniami NCCLS dokument EP5-A używając INFORMAÇÕES DOS REAGENTES Konelab 60 przez 20 dni z ilością pomiarów n = 80. Reagente A: Reagente da enzima Código: 981361 7 x 40 ml Metoda porównawcza Código: 981769 8 x 16 ml Metoda jedno-odczynnikowa: Reagente B: Substrato Porównanie zostało wykonane zgodnie z zaleceniami NCCLS dokument EP9-A jako Código: 981361 7 x 10 ml wytyczne i Konelab metody dwu-odczynnikowej jako odniesienia. Código: 981769 8 x 4 ml Regresja liniowa (wyniki w jednostkach U/l): y = 0.75 x + 2.8 Concentrações r = 0.988 Reagente A: Reagente da enzima n = 60 Tris tampão, pH 7.15 137.5 mmol/l Stężenia próbek znajdowały się między 7 i 190 U/l. L-Alanina 700 mmol/l LDH > 1650 U/l Metoda trój-odczynnikowa: NaN3 < 0.1 % Porównanie zostało wykonane zgodnie z zaleceniami NCCLS dokument EP9-A jako Reagente B: Substrato wytyczne i Konelab metody dwu-odczynnikowej jako odniesienia. 2-oxoglutarato 82.5 mmol/l Regresja liniowa (wyniki w jednostkach U/l): NADH 1.0 mmol/l y = 1.00 x + 0.2 NaN3 < 0.1 % r = 1.00 Nota: O piridoxal-5’-fosfato líquido não está incluído no kit. Pode ser encomendado em n = 65 separado através do código 981839. Stężenia próbek znajdowały się między 10 i 155 U/l. Rezultaty w indywidualnych laboratoriach mogą różnić się dla podanych precyzji oraz danych dla metod porównawczych. Precauções Só para uso diagnóstico in vitro. PIŚMIENNICTWO Adopte as precauções habitualmente requeridas para o manuseamento dos reagentes de 1. Burtis, CA and Ashwood, E R (ed.), Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry, 5th laboratório. edition, W B Saunders Company, Philadelphia, 2001, pp. 354 - 355. Os reagentes contêm azida de sódio como conservante. Não ingira. Evite o contacto com a pele e com as membranas mucosas. 2. IFCC 2002/5: IFCC Primary Reference Procedures for the Measurement of Catalytic Activity Concentrations of Enzymes at 37 °C, Part. 4 Reference Procedure for the Preparação Measurement of Catalytic Concentrations of Alanine Aminotransferase, Código: 981361, 981769 Clin.Chem.Lab.Med. 2002, 40(7): 718-724. Sistema de um reagente (sem P-5´-P): 3. Guder WG, Narayanan S, Wisser H, Zawta B. List of Analytes; Preanalytical variables. Adicione o conteúdo do Reagente B ao frasco do Reagente A. Feche o frasco e agite. Brochure in: Samples: From Patient to the Laboratory. GIT Verlag GmbH, Darmstadt, O monoreagente deve ser protegido da luz! 1996. Sistema de três reagentes (com P-5´-P): 4. Young, D.S., Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests, Fifth Edition, AACC Press, Os reagentes estão prontos a usar. Washington, D.C., 3-8 – 3-23, 2000. Nota: Certifique-se de que não há nenhuma bolha no gargalo do frasco ou na superfície do reagente quando inserir o frasco ou a ampola do reagente no analisador Konelab. PRODUCENT Thermo Fisher Scientific Oy Armazenamento e Estabilidade Clinical Diagnostics Finland Os reagentes que se encontram em frascos fechados permanecem estáveis até à data Ratastie 2, P.O. Box 100, FI-01621 Vantaa, Finland indicada no rótulo, desde que mantidos a 2...8 °C e protegidos da luz. Tel. +358 9 329 100, Fax +358 9 3291 0300 Consulte as Notas de aplicação do analisador Konelab para obter mais informações sobre www.thermo.com/konelab a estabilidade dos reagentes quando inseridos no analisador.

Ostatnia zmiana (yyyy-mm-dd) COLHEITA DA AMOSTRA 2007-08-14 Tipo de amostra Zmiany w stosunku do poprzedniej wersji Pode utilizar-se soro claro ou plasma de heparina. Zaktualizowano nazwę firmy. Precauções As amostras humanas devem ser manuseadas e eliminadas como se fossem potencialmente infecciosas.

Armazenamento (3) A amostra pode ser armazenada durante 3 dias a 20...25 °C, durante 7 dias a 4...8 °C ou durante 2 dias a -20 °C. PT PROCEDIMENTO Konelab™ / Série T Consulte o Manual de referência e as Notas de aplicação para obter mais informações sobre o procedimento automático do analisador Konelab. Qualquer aplicação não ALT/GPT (IFCC) validada pela Thermo Fisher Scientific Oy, não pode ter o desempenho garantido e, por isso, tem de ser avaliada pelo utilizador. 981361 7 x 50 ml Materiais fornecidos 981769 8 x 20 ml Reagentes conforme descrito acima. ESTE FOLHETO INFORMATIVO É APLICÁVEL PARA USO FORA DOS E.U.A. QUALQUER REFERÊNCIA Materiais necessários mas não incluídos Piridoxal-5’-fosfato (código 981839) para o método de três reagentes. AOS SISTEMAS KONELAB TAMBÉM SE REFERE À Controlos conforme indicado abaixo. SÉRIE T. Calibragem USO PRETENDIDO A resposta dA/min é convertida para unidades de resultado através de um factor de Para a determinação quantitativa in vitro da actividade da alanina aminotransferase cálculo. (L-Alanina: 2-Oxoglutarato Aminotransferase (ALT), EC 2.6.1.2) no soro ou plasma Ou utilize o eCal (981830) como calibrador de acordo com as instruções fornecidas no humano, nos analisadores Konelab. Todos os resultados dos testes têm de ser folheto da embalagem do eCal (981830). interpretados no contexto clínico. Controlo de qualidade SUMÁRIO (1) Utilize amostras de controlo de qualidade pelo menos uma vez por dia e sempre que usar A alanina aminotransferase (ALAT/ALT), anteriormente designada como transamínase um novo frasco de reagente. glutâmico pirúvica (GPT) e a aspartato aminotransferase (ASAT/AST), anteriormente Controlos disponíveis: designada como transamínase glutâmico oxalacética (GOT) pertencem a um grupo de Nortrol, código 981043 enzimas, as aminotransferases ou transaminases, que catalizam a transformação reversível

Abtrol, código 981044 reserved. hts de ácidos α-ceto em aminoácidos por intermédio da transferência de aminogrupos. Os intervalos e limites do Controlo devem ser adaptados aos requisitos individuais de g A AST e a ALT estão normalmente presentes no plasma humano, na bílis, no fluido cada laboratório. Os resultados das amostras de controlo de qualidade devem ficar dentro cérebro-espinal e na saliva, mas não se encontram na urina a menos que ocorra uma dos limites predefinidos pelo laboratório. lesão renal. Na hepatite viral e noutras formas de doenças hepáticas associadas à necrose hepática, o nível de AST e de ALT no soro já é elevado mesmo antes dos sinais CÁLCULO DE RESULTADOS e sintomas clínicos da doença surgirem. Os níveis das duas enzimas podem alcançar Os resultados são automaticamente calculados pelo analisador Konelab da seguinte valores tão elevados quanto 100 vezes o limite superior de referência, apesar de ser mais forma: frequente encontrar níveis 20 a 50 vezes mais elevados. Actividade em U/l = dA/min x Factor Apesar dos níveis séricos da AST e da ALT se tornarem elevados sempre que determinados processos afectam a integridade das células hepáticas, a ALT é a enzima TV x 1000 mais específica do fígado. Podem ocorrer níveis mais elevados de AST derivados de Factor teórico = - ⎯⎯⎯⎯⎯- lesões no músculo cardíaco ou nos músculos interósseos ou de um parênquima hepático. 6.3 x SV x P A elevação sérica da actividade da ALT raramente é observada em outras condições que não sejam doenças hepáticas parenquimais. sendo que: TV = Volume total da reacção em ml SV = Volume da amostra em ml PRINCÍPIO DO PROCEDIMENTO 6.3 = Coeficiente de extinção do NADH a 340 nm A ALT cataliza a transferência de amino grupos da alanina para o oxoglutarato com a P = Comprimento do percurso da cuvette = 1 formação de glutamato e de piruvato. O piruvato é reduzido a lactato pela enzima lactato Factor de conversão μkat/l = (U/l)/60 dehidrogenase (LDH). ALT Se utilizar o eCal (981830) como calibrador, os resultados são calculados automaticamente L-Alanina + 2-Oxoglutarato <⎯⎯> L-Glutamato + Piruvato pelo analisador Konelab através de uma curva de calibragem.

LDH LIMITAÇÕES DO PROCEDIMENTO Piruvato + NADH + H+ <⎯⎯> D-Lactato + NAD+ Interferência Nessa mesma reacção uma quantidade equivalente de NADH é oxidada para NAD. A Critério: Recuperação dentro de ± 10% dos valores iniciais. redução daí resultante na absorvência a 340 nm é seguida e é directamente proporcional Sistema de um reagente: à actividade da ALT no soro. Bilirrubina conjugada: Nenhuma interferência detectada até 420 μmol/l (24.6 mg/dl). O método de referência IFCC inclui piridoxal –5’-fosfato (P-5´-P) a um nível de 0,1 mmol/l, Bilirrubina não conjugada: Nenhuma interferência detectada até 600 μmol/l (35.1 mg/dl). o qual tem sido considerado suficiente para activar a apoproteína ALT em 5 minutos (2). Hemolizado: Nenhuma interferência detectada até 10 g/l de hemoglobina. ri All Inc. Scientific Fisher Thermo © 2008 D01162_4 Template:

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Lipemia: Nenhuma interferência detectada até 2 g/l de Intralipid® (marca comercial da RO Fresenius Kabi AB). Há uma correlação fraca entre a turvação e a concentração de triglicéridos. Konelab™ / T Series Sistema de três reagentes: Bilirrubina conjugada: Nenhuma interferência detectada até 420 μmol/l (24.6 mg/dl). Bilirrubina não conjugada: Nenhuma interferência detectada até 600 μmol/l (35.1 mg/dl). ALT/GPT (IFCC) Hemolizado: Nenhuma interferência detectada até 8 g/l de hemoglobina. Lipemia: Nenhuma interferência detectada até 2 g/l de Intralipid®. Para obter informações sobre 981361 7 x 50 ml outras substâncias interferentes, consulte a referência 4. 981769 8 x 20 ml VALORES DE REFERÊNCIA (2) ACEST PROSPECT INTRODUS ÎN PACHET ESTE Sexo masculino: < 45 U/l (< 0.74 μkat/l) a 37 °C Sexo feminino: < 34 U/l (< 0.56 μkat/l) a 37 °C APLICABIL PENTRU FOLOSIREA ÎN AFARA S.U.A. Os valores indicados devem servir apenas como uma referência. Recomendamos que cada laboratório verifique este intervalo ou obtenha um intervalo de referência para a ORICE REFERINŢĂ LA KONELAB SYSTEMS SE população que serve. REFERĂ ŞI LA SERIA T.

INTERVALO DE MEDIÇÃO UTILIZAREA RECOMANDATĂ Sistema de um reagente: Pentru determinarea cantitativă in vitro a activităţii alanin aminotransferazei (L-Alanină: 4 - 300 U/l (0.07 – 5.00 μkat/l) 2-oxoglutarat aminotransferază (ALT), EC 2.6.1.2) din serul sau plasma umane, cu Intervalo de medição alargado após a segunda diluição: dispozitivele de analiză Konelab. Toate rezultatele analizei trebuie interpretate în context 4 – 1800 U/l (0.07 – 30.00 μkat/l) clinic. Sistema de três reagentes: 5 - 250 U/l (0.08 – 4.17 μkat/l) REZUMAT(1) Intervalo de medição alargado após a segunda diluição: Alanin aminotransferaza (ALAT/ALT), denumită anterior şi transaminază glutamil-piruvică 5 – 1500 U/l (0.08 – 25.00 μkat/l) (GPT), şi aspartat aminotransferaza (ASAT/AST), denumită anterior şi transaminază glutamil-oxaloacetică (GOT), aparţin unui grup de enzime, aminotransferazele sau CARACTERÍSTICAS DE DESEMPENHO transaminazele, care catalizează transformarea reversibilă a α-cetoacizilor în aminoacizi prin transferarea grupărilor amino. Limite de detecção Atât AST cât şi ALT se găsesc în mod normal în plasma umană, în bilă, în lichidul Sistema de um reagente: 2 U/l (0.03 μkat/l) cefalorahidian şi în salivă, dar nu se găsesc în urină decât în caz de leziuni renale. În Sistema de três reagentes: 2 U/l (0.03 μkat/l) hepatita virală şi în alte boli hepatice asociate cu necroza hepatică, nivelurile serice ale O limite de detecção representa a concentração/actividade mensurável mais baixa que pode ser AST şi ALT cresc înainte de apariţia semnelor clinice şi a simptomelor bolii. Nivelurile distinguida de zero. É calculada como a concentração da amostra de zero + 3 DS (ensaio, n=24). ambelor enzime pot atinge valori de până la 100 de ori mai mari faţă de limita superioară de referinţă, deşi cel mai frecvent se întâlnesc creşteri de 20-50 de ori. Deşi nivelurile serice ale ambelor enzime AST şi ALT cresc atunci când procesele Imprecisão (unidade do resultado U/l) afectează integritatea celulei hepatice, ALT este enzima cea mai specifică pentru ficat. Sistema de um reagente: Nivelurile crescute de AST apar ca urmare a leziunilor cardiace sau ale muşchilor Média Média Média scheletici, precum şi ale parenchimului hepatic. Creşterea activităţii serice a ALT se 33 U/l 90 U/l 108 U/l constată rareori în alte condiţii decât în boala parenchimului hepatic. DS CV% DS CV% DS CV% Ensaio 0.6 1.8 0.6 0.6 0.9 0.8 PRINCIPIUL DETERMINĂRII Vários dias 0.5 1.5 0.9 1.0 1.0 0.9 ALT catalizează transferul grupării amino de la alanină la oxoglutarat cu formarea Total 1.0 3.0 1.8 2.0 2.7 2.4 glutamatului şi a piruvatului. Piruvatul este redus la lactat de către lactat- dehidrogenază(LDH).

Sistema de três reagentes: ALT L-Alanină + 2-Oxoglutarat <⎯⎯> L-Glutamat + Piruvat Média Média Média 31 U/l 89 U/l 109 U/l LDH DS CV% DS CV% DS CV% Piruvat + NADH + H+ <⎯⎯> D-Lactat + NAD+ Ensaio 0.6 1.8 0.6 0.7 1.0 0.9 Vários dias 0.2 0.7 0.8 0.9 0.8 0.8 În aceeaşi reacţie se oxidează o cantitate echivalentă de NADH la NAD. Descreşterea Total 0.8 2.6 1.5 1.7 2.2 2.0 care rezultă în absorbanţa la 340 nm e urmată şi e direct proporţională cu activitatea ALT din ser. Efectuou-se um estudo de precisão de acordo com as directrizes do Documento EP5-A da Metoda de referinţă IFCC include piridoxal –5’-fosfat (P-5´-P) cu un nivel de 0.1 mmol/l, ce s-a NCCLS mediante a utilização de um analisador Konelab 60 durante 20 dias, com um demonstrat a fi suficient ca să activeze apo ALT în 5 minute (2). número de medições equivalente a n = 80. INFORMAŢII PRIVIND REACTIVII Comparação de métodos Reactiv A: Reactiv enzimă Cod: 981361 7 x 40 ml Sistema de um reagente: Cod: 981769 8 x 16 ml Realizou-se um estudo comparativo de acordo com o Documento EP9-A da NCCLS, Reactiv B: Substrat tendo-se utilizado como método de referência o método de dois reagentes da Konelab. Cod: 981361 7 x 10 ml Regressão linear (unidade do resultado U/l): Cod: 981769 8 x 4 ml y = 0.75 x + 2.8 r = 0.988 n = 60 Concentraţii Concentrações das amostras entre 7 e 190 U/l. Reactiv A: Reactiv enzimă Sistema de três reagentes: Tampon Tris, pH 7.15 137.5 mmol/l Realizou-se um estudo comparativo de acordo com as indicações contidas no Documento L-Alanină 700 mmol/l EP9-A da NCCLS, tendo-se utilizado como método de referência o método de dois LDH > 1650 U/l reagentes da Konelab. NaN3 < 0.1 % Regressão linear (unidade do resultado U/l): y = 1.00 x + 0.2 Reactiv B: Substrat r = 1.00 2-oxoglutarat 82.5 mmol/l n = 65 NADH 1.0 mmol/l Concentrações das amostras entre 10 e 155 U/l. NaN3 < 0.1 % Notă: Piridoxal-5’-fosfatul lichid nu este inclus în trusă. Poate fi comandat separat cu Os resultados obtidos em laboratórios individuais podem diferir dos dados de comparação numărul de cod 981839. de métodos e de imprecisão fornecidos. BIBLIOGRAFIA Precauţii 1. Burtis, CA and Ashwood, E R (ed.), Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry, 5th Numai pentru diagnostic in vitro. Adoptaţi măsurile normale de precauţie necesare pentru mânuirea reactivilor de laborator. edition, W B Saunders Company, Philadelphia, 2001, pp. 354 - 355. Reactivul conţine azidă de sodiu drept conservant. Nu înghiţiţi. Evitaţi contactul cu pielea 2. IFCC 2002/5: IFCC Primary Reference Procedures for the Measurement of Catalytic şi membranele mucoasei. Activity Concentrations of Enzymes at 37 °C, Part. 4 Reference Procedure for the

Measurement of Catalytic Concentrations of Alanine Aminotransferase, Pregătirea reserved. hts g Clin.Chem.Lab.Med. 2002, 40(7): 718-724. Cod: 981361, 981769 3. Guder WG, Narayanan S, Wisser H, Zawta B. List of Analytes; Preanalytical variables. Metoda cu 1 reactiv (fără P-5´-P): Brochure in: Samples: From Patient to the Laboratory. GIT Verlag GmbH, Darmstadt, Adăugaţi conţinutul reactivului B în flaconul cu reactiv A. Închideţi flaconul şi omogenizaţi. 1996. Monoreactivul trebuie ferit de lumină! 4. Young, D.S., Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests, Fifth Edition, AACC Press, Metoda cu 3 reactivi (cu P-5´-P): Washington, D.C., 3-8 – 3-23, 2000. Reactivii sunt gata de folosire. Notă: Verificaţi să nu existe bule în gâtul flaconului sau la suprafaţa reactivului când FABRICANTE introduceţi fiolele sau recipientele cu reactiv în analizorul Konelab. Thermo Fisher Scientific Oy Clinical Diagnostics Finland Păstrarea şi stabilitatea Ratastie 2, P.O. Box 100, FI-01621 Vantaa Reactivii din fiolele nedeschise sunt stabili la 2…8 °C până la data de expirare tipărită pe Tel. +358 9 329 100, Fax +358 9 3291 0300 etichetă, dacă sunt feriţi de lumină. www.thermo.com/konelab Consultaţi Notele de Aplicare ale dispozitivului dv. de analiză Konelab pentru stabilitatea reactivilor în cazul respectiv. Data de revisão (aaaa-mm-dd) 2007-08-14 RECOLTAREA PROBELOR

Alterações à versão anterior: Tipul de probe Nome da empresa actualizado. Pot fi folosite ser sau plasmă heparinizată limpezi.

Precauţii Probele umane trebuie mânuite şi aruncate ca şi cum ar fi potenţial infecţioase.

Păstrarea (3) Proba poate fi păstrată timp de 3 zile la 20…25 °C, timp de 7 zile la 4…8 °C sau timp de 2

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PROCEDURA DE ANALIZARE Comparaţia metodelor Consultaţi Manualul de Referinţă şi Notele de Aplicare pentru procedura automată cu dispozitivul dv. de analiză Konelab. Toate aplicaţiile care nu au fost validate de Thermo Metoda cu 1 reactiv: Fisher Scientific Oy nu garantează performanţa şi, prin urmare, trebuie evaluate de către A fost efectuat un studiu comparativ folosindu-se Documentul EP9-A NCCLS ca ghid şi o utilizator. metodă Konelab cu doi reactivi ca referinţă. Regresia liniară (unitatea rezultatului U/l): y = 0.75 x + 2.8 Materiale furnizate r = 0.988 Reactivii mai sus-menţionaţi. n = 60 Concentraţiile probelor au fost între 7 şi 190 U/l. Materiale necesare, dar care nu sunt furnizate Metoda cu 3 reactivi: A fost efectuat un studiu comparativ folosindu-se Documentul EP9-A NCCLS ca ghid şi o Piridoxal-5’-fosfat (cod 981839) pentru metoda cu 3 reactivi. metodă Konelab cu doi reactivi ca referinţă. Martorii indicaţi mai jos. Regresia liniară (unitatea rezultatului U/l): y = 1.00 x + 0.2 Calibrarea r = 1.00 Răspunsul (dA/min) e convertit în unităţile rezultatului, cu ajutorul unui factor de calcul. n = 65 Sau folosiţi eCal (981830) drept calibrator, conform instrucţiunilor din prospectul din Concentraţiile probelor au fost între 10 şi 155 U/l. pachetul cu eCal (981830). Rezultatele obţinute în laboratoarele individuale pot diferi de datele referitoare la Controlul de calitate performanţă menţionate. Folosiţi probe pentru controlul de calitate cel puţin o dată pe zi şi de fiecare dată când se BIBLIOGRAFIE foloseşte un flacon nou de reactiv. 1. Burtis, CA and Ashwood, E R (ed.), Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry, 5th Martori disponibili: Nortrol, cod 981043 edition, W B Saunders Company, Philadelphia, 2001, pp. 354 - 355. Abtrol, cod 981044 2. IFCC 2002/5: IFCC Primary Reference Procedures for the Measurement of Catalytic Intervalele şi limitele Martorului trebuie adaptate la necesităţile individuale ale Activity Concentrations of Enzymes at 37 °C, Part. 4 Reference Procedure for the laboratorului. Rezultatele probelor pentru controlul de calitate trebuie să se încadreze în Measurement of Catalytic Concentrations of Alanine Aminotransferase, limitele stabilite de laborator. Clin.Chem.Lab.Med. 2002, 40(7): 718-724. 3. Guder WG, Narayanan S, Wisser H, Zawta B. List of Analytes; Preanalytical variables. CALCULAREA REZULTATELOR Rezultatele sunt calculate automat de dispozitivul de analiză Konelab după cum urmează: Brochure in: Samples: From Patient to the Laboratory. GIT Verlag GmbH, Darmstadt, 1996. Activitatea în U/l = dA/min x Factor 4. Young, D.S., Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests, Fifth Edition, AACC Press, Washington, D.C., 3-8 – 3-23, 2000. TV x 1000 Factor teoretic = - ⎯⎯⎯⎯⎯- PRODUCĂTOR 6.3 x SV x P Thermo Fisher Scientific Oy Clinical Diagnostics Finland unde: TV= Volumul total de reacţie în ml Ratastie 2, P.O. Box 100, FI-01621 Vantaa SV = Volumul probei în ml Tel. +358 9 329 100, Fax +358 9 3291 0300 6.3 = Coeficientul de extincţie al NADH la 340 nm www.thermo.com/konelab P = Lungimea cuvei = 1 Factor de conversie μkat/l = (U/l)/60 Data reviziei (aaaa-ll-zz)

Dacă se foloseşte eCal (981830) drept calibrator, rezultatele sunt calculate automat de 2007-12-07 dispozitivul de analiză Konelab folosind o curbă de calibrare. LIMITELE PROCEDURII Modificări faţă de versiunea precedentă Interferenţe Criteriu: Recuperare în interval ± 10% din valorile iniţiale. Metoda cu 1 reactiv: Bilirubină conjugată: Nu s-au găsit interferenţe până la 420 μmol/l (24.6 mg/dl). Bilirubină neconjugată: Nu s-au găsit interferenţe până la 600 μmol/l (35.1 mg/dl). Hemolizat: Nu s-au găsit interferenţe până la 10 g/l de hemoglobină. Lipemie: Nu s-au găsit interferenţe până la 2 g/l de Intralipid® (marcă comercială a SK Fresenius Kabi AB). Există o corelaţie scăzută între turbiditate şi concentraţia trigliceridelor. Konelab™/ Séria T Metoda cu 3 reactivi: Bilirubină conjugată: Nu s-au găsit interferenţe până la 420 μmol/l (24.6 mg/dl). ALT/GPT (IFCC) Bilirubină neconjugată: Nu s-au găsit interferenţe până la 600 μmol/l (35.1 mg/dl). Hemolizat: Nu s-au găsit interferenţe până la 8 g/l de hemoglobină. Lipemie: Nu s-au găsit interferenţe până la 2 g/l de Intralipid®. 981361 7 x 50 ml Pentru alte substanţe care pot interfera, vă rugăm să consultaţi referinţa 4. 981769 8 x 20 ml VALORI ESTIMATE (2) TENTO PRÍBALOVÝ LETÁK JE URČENÝ NA POUŽITIE Bărbaţi: < 45 U/l (< 0.74 μkat/l) la 37 °C Femei: < 34 U/l (< 0.56 μkat/l) la 37 °C MIMO USA. AKÁKOĽVEK ZMIENKA SYSTÉMOV Valorile menţionate au doar caracter indicativ. Se recomandă ca fiecare laborator să verifice KONELAB SA VZŤAHUJE AJ NA SÉRIU T. acest interval sau să elaboreze un interval de referinţă pentru populaţia pe care o deserveşte. INTERVAL DE MĂSURARE POUŽITIE Na kvantitatívne in vitro stanovenie alanín aminotransferázy (L-alanín: 2-oxoglutarát Metoda cu 1 reactiv: aminotransferázy (ALT), EC 2.6.1.2) v ľudskom sére, alebo plazme v Konelab analyzátoroch. 4 - 300 U/l (0.07 – 5.00 μkat/l) Všetky výsledky testov musia byť interpretované s ohľadom na klinický kontext. Interval extins de măsurare după a doua diluţie: 4 – 1800 U/l (0.07 – 30.00 μkat/l) ZHRNUTIE (1) Alanín aminotransferáza (ALAT/ALT), predtým glutamát pyruvát transamináza (GPT) a Metoda cu 3 reactivi: aspartát aminotransferáza (ASAT/AST), predtým glutamát oxaloacelát transamináza 5 - 250 U/l (0.08 – 4.17 μkat/l) (GOT) patria do skupiny enzýmov, aminotransferázy alebo transaminázy, ktoré katalyzujú Interval extins de măsurare după a doua diluţie: reverzibilnú transformáciu α-keto kyselín na aminokyseliny presunom aminoskupín. 5 – 1500 U/l (0.08 – 25.00 μkat/l) Oba enzýmy AST aj ALT sa normálne nachádzajú v ľudskej plazme, žlči, mozgovomiešnom moku a slinách, ale nenachádzajú sa v moči, ak nie sú poškodené CARACTERISTICILE PERFORMANŢEI obličky. Pri vírusovej hepatitíde a iných formách ochorenia pečene, ktoré sú asociované s Limită de detecţie hepatálnou nekrózou, sa zvyšujú hladiny AST a ALT ešte pred nástupom klinických príznakov ochorenia. Hladiny oboch enzýmov môžu dosiahnuť hodnoty až 100 krát vyššie

Metoda cu 1 reactiv: ako horná referenčná hranica, hoci najčastejšie je zvýšenie 20 až 50 násobné reserved. hts 2 U/l (0.03 μkat/l) Hoci sérové hladiny AST aj ALT sa zvyšujú akonáhle patologický proces naruší integritu g Metoda cu 3 reactivi: pečeňovej bunky, ALT je špecifickejší pečeňový enzým. Zvýšenie hladiny AST sa objavuje 2 U/l (0.03 μkat/l) v súvislosti s poškodením srdca a kostrového svalu, ako aj pečeňového parenchýmu. Limita de detecţie reprezintă cea mai mică concentraţie/activitate măsurabilă care poate fi Elevácia aktivity ALT v sére sa vyskytuje zriedkavo v iných prípadoch ako je ochorenie distinsă de zero. Este calculată ca fiind concentraţia probei zero + 3 DS (în cadrul pečeňového parenchýmu. aceleiaşi analize, n=24). PRINCÍP METÓDY ALT katalyzuje prenos aminoskupiny z alanínu na oxoglutarát pričom vzniká glutamát a Imprecizie (unitatea rezultatului U/l) pyruvát. Pyruvát sa redukuje na laktát pomocou malát dehydrogenázy (LDH). Metoda cu 1 reactiv: Medie Medie Medie ALT 33 U/l 90 U/l 108 U/l L-alanín + 2-oxoglutarát <⎯⎯> L-glutamát + pyruvát DS CV% DS CV% DS CV% LDH În cadrul aceleiaşi analize 0.6 1.8 0.6 0.6 0.9 0.8 + + Între analize 0.5 1.5 0.9 1.0 1.0 0.9 Pyruvát + NADH + H <⎯⎯> D-Laktát + NAD Total 1.0 3.0 1.8 2.0 2.7 2.4 V tejto reakcii sa ekvivalentné množstvo NADH oxiduje na NAD. Nasleduje zníženie Metoda cu 3 reactivi: absorbancie pri 340 nm, ktoré je priamo úmerné aktivite ALT v sére. IFCC referenčná metóda obsahuje pyridoxal-5'-fosfát (P-5'-P) v hladine 0.1 mmol/l, ktorá sa Medie Medie Medie ukázala ako dostatočná na aktiváciu apo ALT za 5 minút (2). 31 U/l 89 U/l 109 U/l INFORMÁCIE O ČINIDLÁCH DS CV% DS CV% DS CV% Činidlo A: Enzýmové činidlo În cadrul aceleiaşi analize 0.6 1.8 0.6 0.7 1.0 0.9 Kód: 981361 7 x 40 ml Între analize 0.2 0.7 0.8 0.9 0.8 0.8 Kód: 981769 8 x 16 ml Total 0.8 2.6 1.5 1.7 2.2 2.0 Činidlo B: Substrát Kód: 981361 7 x 10 ml Un studiu asupra preciziei a fost efectuat conform liniilor directoare din Documentul EP5-A Kód: 981769 8 x 4 ml

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Koncentrácie Ďalšie interferujúce substancie nájdete v Bibliografii č 4. Činidlo A: Enzýmové činidlo OČAKÁVANÉ HODNOTY (2) tris pufer, pH 7.15 137.5 mmol/l Muž: < 45 U/l (< 0.74 μkat/l) pri 37 °C L-Alanín 700 mmol/l Žena: < 34 U/l (< 0.56 μkat/l) pri 37 °C LDH > 1650 U/l Tieto hodnoty slúžia len ako smernica. Odporúča sa, aby si každé laboratórium prispôsobilo NaN3 < 0.1 % rozsah referenčných hodnôt na konkrétnu populáciu.

Činidlo B: Substrát MERACÍ ROZSAH 2-oxoglutarát 82.5 mmol/l NADH 1.0 mmol/l Metóda s jedným činidlom: NaN3 < 0.1 % 4 - 300 U/l (0.07 – 5.00 μkat/l) Poznámka: Tekutý pyridoxal-5’-fosfát nie je súčasťou sady. Možno ho objednať Rozšírený merací rozsah po sekundárnom rozriedení: samostatne pod kódovým číslom 981839. 4 – 1800 U/l (0.07 – 30.00 μkat/l) Metóda s tromi činidlami: Varovanie 5 - 250 U/l (0.08 – 4.17 μkat/l) Len na in vitro diagnostiku. Dodržujte normálne bezpečnostné opatrenia, ktoré sú Rozšírený merací rozsah po sekundárnom rozriedení: nevyhnutné pri manipulácii so všetkými laboratórnymi činidlami. 5 – 1500 U/l (0.08 – 25.00 μkat/l) Činidlo obsahuje azid sodný ako konzervačnú látku. Neprehĺtajte/nepožívajte. Zabráňte styku spokožkou a sliznicami. PREVÁDZKOVÉ CHARAKTERISTIKY

Príprava Hranica citlivosti detekcie Kód: 981361, 981769 Metóda s jedným činidlom: Metóda s jedným činidlom (bez P-5'-P): 2 U/l (0.03 μkat/l) Pridajte obsah činidla B do nádoby s činidlom A. Zatvorte nádobku a premiešajte. Monočinidlo musí byť chránené pred svetlom! Metóda s tromi činidlami: Metóda s tromi činidlami (s P-5'-P): 2 U/l (0.03 μkat/l) Činidlá sú pripravené na použitie. Hranica citlivosti detekcie reprezentuje najnižšiu merateľnú koncentráciu/aktivitu, ktorá sa dá Poznámka: Pred vložením nádobiek do analyzéra Konelab skontrolujte, či sa v hrdle odlíšiť od nuly. Vypočíta sa ako koncentrácia nulovej vzorky + 3 SD (počas procesu, n=24). nádobky, alebo na povrchu činidla nenachádzajú bubliny. Nepresnosť (výsledok v jednotkách U/I) Uskladnenie a trvanlivosť Metóda s jedným činidlom: Činidlá v neotvorených nádobách sú stabilné pri 2...8 °C až do exspiračnej doby vytlačenej na štítku ak sú chránené pred svetlom. Priemer Priemer Priemer Informácie o stabilite činidiel nájdete v Používateľskej príručke vášho analyzéra Konelab. 33 U/l 90 U/l 108 U/l SD CV% SD CV% SD CV% ODBER VZORIEK Počas procesu 0.6 1.8 0.6 0.6 0.9 0.8 Medzi jednotlivými dňami 0.5 1.5 0.9 1.0 1.0 0.9 Celkovo 1.0 3.0 1.8 2.0 2.7 2.4 Typ vzorky Môžete používať sérum, alebo heparinizovanú plazmu. Metóda s tromi činidlami: Priemer Priemer Priemer Varovanie 31 U/l 89 U/l 109 U/l Manipulujte a znehodnocujte ľudské vzorky ako potenciálne infekčný materiál. SD CV% SD CV% SD CV% Počas procesu 0.6 1.8 0.6 0.7 1.0 0.9 Uskladnenie (3) Medzi jednotlivými 0.2 0.7 0.8 0.9 0.8 0.8 dňami Vzorku môžete skladovať 3 dni pri teplote 20...25 °C, 7 dní pri 4...8 °C a 2 dní pri –20 °C. Celkovo 0.8 2.6 1.5 1.7 2.2 2.0

TESTOVACÍ POSTUP Vykonala sa štúdia presnosti v súlade so smernicami NCCLS dokumentu EP5-A s Automatický postup použitia analyzátora Konelab nájdete v manuáli a Používateľskej prístrojom Konelab 60 počas 20 dní, s počtom meraní n= 80. príručke. Meranie postupom, ktorý nie je validizovaný firmou Thermo Fisher Scientific Oy nie je garantované a musí byť vyhodnotené užívateľom. Porovnanie metódy Metóda s jedným činidlom: Poskytnuté materiály Vykonala sa porovnávacia štúdia s použitím NCCLS dokumentu EP9-A ako smernice a Činidlá popísané vyššie. Konelab metódou s dvoma činidlami ako referencie. Lineárna regresia (výsledok v jednotkách U/I): y = 0.75 x + 2.8 Materiály potrebné, ale neposkytované r = 0.988 Pyridoxal –5’-fosfát (kód 981839) pre metódu s tromi činidlami. n = 60 Kontroly uvedené nižšie. Koncentrácie vzoriek sa pohybovali medzi 7 a 190 U/I. Metóda s tromi činidlami: Kalibrácia Vykonala sa porovnávacia štúdia s použitím NCCLS dokumentu EP9-A ako smernice a Výsledok (dA/min) sa konvertuje na výsledné jednotky pomocou prepočtového koeficientu. Konelab metódy s dvoma činidlami ako referencie. Môžete použiť aj eCal (981830) ako kalibrátor, v súlade s inštrukciami v príbalovom letáku Lineárna regresia (výsledok v jednotkách U/I): eCal (981830). y = 1.00 x + 0.2 r = 1.00 n = 65 Kontrola kvality Koncentrácie vzoriek sa pohybovali medzi 10 a 155 U/I. Používajte vzorky na kontrolu kvality aspoň raz denne a vždy, keď použijete novú fľašku s činidlom. Výsledky získané v jednotlivých laboratóriách sa môžu líšiť od daných prevádzkových dát. Dostupné kontroly: Nortrol, kód 981043 BIBLIOGRAFIA Abtrol, kód 981044 1. Burtis, CA and Ashwood, E R (ed.), Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry, 5th Intervaly a rozmedzia kontrolných hodnôt sa musia prispôsobiť individuálnym požiadavkám edition, W B Saunders Company, Philadelphia, 2001, pp. 354 - 355. laboratória. Výsledné hodnoty kontrolných vzoriek by mali byť vrozmedzí referenčných hodnôt laboratória. 2. IFCC 2002/5: IFCC Primary Reference Procedures for the Measurement of Catalytic Activity Concentrations of Enzymes at 37 °C, Part. 4 Reference Procedure for the VÝPOČET VÝSLEDKOV Measurement of Catalytic Concentrations of Alanine Aminotransferase, Výsledky sa vypočítajú automaticky Konelab analyzátorom: Clin.Chem.Lab.Med. 2002, 40(7): 718-724. 3. Guder WG, Narayanan S, Wisser H, Zawta B. List of Analytes; Preanalytical variables. Aktivita v U/l = dA/min x faktor Brochure in: Samples: From Patient to the Laboratory. GIT Verlag GmbH, Darmstadt,

TV x 1000 1996. teoretický faktor = − ⎯⎯⎯⎯⎯- 4. Young, D.S., Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests, Fifth Edition, AACC Press,

6.3 x SV x P Washington, D.C., 3-8 – 3-23, 2000. reserved. hts g kde: TV = Celkový reagujúci objem v ml VÝROBCA SV = Objem vzorky v ml Thermo Fisher Scientific Oy 6.3 = Extinkčný koeficient NADH pri 340 nm Clinical Diagnostics Finland P = Veľkosť kyvety = 1 Ratastie 2, P.O. Box 100, FI-01621 Vantaa Konverzný pomer μkat/l = (U/l)/60 Tel. +358 9 329 100, Fax +358 9 3291 0300 www.thermo.com/konelab Ak sa eCal (981830) používa ako kalibrátor, výsledky sa automaticky vypočítajú Konelab analyzátorom pomocou kalibračnej krivky. Dátum revízie (RRRR-MM-DD) 2007-08-14 OBMEDZENIA METODIKY Zmeny od predchádzajúcej verzie Interferencie Meno spoločnosti aktualizované. Kritérium: Návrat k východziemu stavu ±10% počiatočných hodnôt. Metóda s jedným činidlom: Konjugovaný bilirubín: Bez interferencie do 420 μmol/l (24,6 mg/dl). Nekonjugovaný bilirubín: Bez interferencie do 600 μmol/l (35,1 mg/dl). Hemolyzát: Bez interferencie do 10 g/l hemoglobínu. Lipémia: Bez interferencie do 2 g/l Intralipid® (registrovaná značka Fresenius Kabi AB). Korelácia medzi turbiditou a koncentráciou triglyceridov je nízka. Metóda s tromi činidlami: Konjugovaný bilirubín: Bez interferencie do 420 μmol/l (24.6 mg/dl). Nekonjugovaný bilirubín: Bez interferencie do 600 μmol/l (35.1 mg/dl). Hemolyzát: Bez interferencie do 8 g/l hemoglobínu. Lipémia: Bez interferencie do 2 g/l Intralipid®. ri All Inc. Scientific Fisher Thermo © 2008 D01162_4 Template:

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SV TESTUTFÖRANDE Se Handhavandemanualen och Application Notes för automatiskt utförande på aktuell Konelab™ / T Serien Konelab-analysator. Varje applikation som ej har validerats av Thermo Fisher Scientific ALT/GPT (IFCC) Oy, kan ej garanteras vad gäller prestanda och måste därför utvärderas av användaren. Bifogat material 981361 7 x 50 ml Reagenser enligt ovan. 981769 8 x 20 ml Erforderligt material som ej medföljer DENNA BIPACKSEDEL GÄLLER FÖR ANVÄNDNING Pyridoxal-5’-fosfat (artikelnr. 981839) för tre-reagenssystem. UTOM USA. ALLA HÄNVISNINGAR TILL KONELAB Kontroller enligt nedan. SYSTEM AVSER ÄVEN T SERIEN. Kalibrering Svaret dA/min omvandlas till resultatenheter med en omräkningsfaktor. AVSEDD ANVÄNDNING Använd alternativt eCal (981830) som en kalibrator, enligt anvisningarna som ges på För kvantitativ bestämning in vitro av alaninaminotransferas (L-alanin: 2-oxoglutarat- bipacksedeln för eCal (981830). aminotransferas (ALT), EC 2.6.1.2) aktivitet i humant serum eller plasma på Konelab- analysatorer. Alla testresultat måste tolkas med hänsyn till det kliniska sammanhanget. Kvalitetskontroll SAMMANFATTNING (1) Använd kvalitetskontrollprover minst en gång om dagen och varje gång en ny reagensflaska används. Alaninaminotransferas (ALAT/ALT), som tidigare kallades glutaminsyra- Tillgängliga kontroller: pyrodruvsyratransaminas (GPT) och aspartataminotransferas (ASAT/AST), som tidigare Nortrol, artikelnr. 981043 kallades glutaminsyra-oxalättiksyratransaminas (GOT) tillhör en grupp enzymer, Abtrol, artikelnr. 981044 aminotransferas eller transaminas, som katalyserar reversibel transformation av α-ketosyror till aminosyror, genom överföring av aminogrupper. Kontrollintervaller och -gränser måste anpassas efter det enskilda laboratoriets krav. Både AST och ALT finns normalt i humant plasma, galla, cerebrospinalvätska och saliv, Resultatet från kvalitetskontrollproven bör ligga inom de av laboratoriet fastställda gränserna. men finns inte i urin, utom om det finns en njurlesion. Vid virushepatit och andra former av leversjukdom som förknippas med levernekros är nivån serum-AST och serum-ALT RESULTATBERÄKNING förhöjd även innan kliniska tecken och symtom på sjukdomen förekommer. Nivåerna för Resultaten beräknas automatiskt av Konelab-analysatorn enligt följande: båda enzymerna kan nå värden så höga som 100 gånger den övre referensgränsen, trots att 20 till 50 gångers förhöjning är det oftast förekommande. Aktivitet i U/l = dA/min x Faktor Trots att serumnivåer för både AST och ALT blir förhöjda när processer påverkar levercellernas funktionsduglighet är ALT det mer leverspecifika enzymet. Förhöjd AST- TV x 1000 nivå kan inträffa i anslutning till skador på hjärta eller skelettmuskulatur samt Teoretisk faktor = - ⎯⎯⎯⎯⎯- leverparenkym. Serumförhöjning av ALT aktivitet uppträder sällan vid andra tillstånd än 6.3 x SV x P leverparenkym-sjukdom. TESTPRINCIP där: TV = Total reaktionsvolym i ml SV = Provvolym i ml ALT katalyserar överföring av aminogruppen från alanin till oxoglutarat, vilket bildar 6.3 = Utplåningskoefficient för NADH vid 340 nm glutamat och pyruvat. Pyruvat reduceras till laktat via laktatdehydrogenas (LDH). P = Kyvettlängd = 1 Omvandlingsfaktor μkat/l = (U/l)/60 ALT L-alanin + 2-oxoglutarat <⎯⎯> L-glutamat + pyruvat Om eCal (981830) används som en kalibrator kommer resultaten att beräknas automatiskt av Konelab-analysatorn med hjälp av en kalibreringskurva. LDH + + Pyruvat + NADH + H <⎯⎯> D-laktat + NAD BEGRÄNSNINGAR I UTFÖRANDET

I denna samma reaktion oxideras en likvärdig mängd NADH till NAD. Den påföljande minskningen i absorbans vid 340 nm följer och är direkt proportionell mot aktiviteten av Interferens ALT i serum. Kriterium: Utbyte inom ± 10 % av initialvärdena. IFCC-referensmetoden inkluderar pyridoxal-5’-fosfat (P-5´-P) vid en nivå av 0,1 mmol/l, Ett-reagens-system: vilket har visat sig vara tillräckligt för att aktivera apo-ALT på 5 minuter (2). Konjugerat bilirubin: Ingen interferens har konstaterats upp till 420 μmol/l (24.6 mg/dl). Okonjugerat bilirubin: Ingen interferens har konstaterats upp till 600 μmol/l (35.1 mg/dl). REAGENSINNEHÅLL Hemolysat: Ingen interferens har konstaterats upp till 10 g/l hemoglobin. Reagens A: Enzymreagens Lipemi: Ingen interferens har konstaterats upp till 2 g/l av Intralipid® (varumärket tillhör Artikelnr.: 981361 7 x 40 ml Fresenius Kabi AB). Det är dålig korrelation mellan grumlighet och triglyceridkoncentration. Artikelnr.: 981769 8 x 16 ml Tre-reagens-system: Reagens B: Substrat Konjugerat bilirubin: Ingen interferens har konstaterats upp till 420 μmol/l (24.6 mg/dl). Artikelnr.: 981361 7 x 10 ml Okonjugerat bilirubin: Ingen interferens har konstaterats upp till 600 μmol/l (35.1 mg/dl). Artikelnr.: 981769 8 x 4 ml Hemolysat: Ingen interferens har konstaterats upp till 8 g/l hemoglobin. Lipemi: Ingen interferens har konstaterats upp till 2 g/l av Intralipid®. Koncentrationer För andra interfererande ämnen, se referens 4. Reagens A: Enzymreagens Tris-buffert, pH 7.15 137.5 mmol/l REFERENSOMRÅDE (2) L-alanin 700 mmol/l Man: < 45 U/l (< 0.74 μkat/l) vid 37 °C LDH > 1650 U/l Kvinna: < 34 U/l (< 0.56 μkat/l) vid 37 °C Angivna värden är endast avsedda som vägledning. Vi rekommenderar att varje laboratorium NaN3 < 0.1 % Reagens B: Substrat verifierar detta område eller fastställer ett referensintervall för populationen som betjänas. 2-oxoglutarat 82.5 mmol/l NADH 1.0 mmol/l MÄTOMRÅDE Ett-reagens-system: NaN3 < 0.1 % Obs: 4 - 300 U/l (0.07 – 5.00 μkat/l) Flytande pyridoxal-5’-fosfat ingår inte i kitet. Det kan beställas separat under Utökat mätområde efter sekundär spädning: artikelnummer 981839. 4 – 1800 U/l (0.07 – 30.00 μkat/l) Tre-reagens-system: 5 - 250 U/l (0.08 – 4.17 μkat/l) Försiktighetsåtgärder Utökat mätområde efter sekundär spädning: Endast för in vitro-diagnostik. 5 – 1500 U/l (0.08 – 25.00 μkat/l) Vidta normala försiktighetsåtgärder som vid all hantering av laboratoriereagenser. Reagenserna innehåller natriumazid som konserveringsmedel. Får ej sväljas. Undvik UTFÖRANDETS KARAKTERISTIKA kontakt med hud och slemhinnor. Detektionsgräns Beredning Ett-reagens-system: Artikelnr.: 981361, 981769 2 U/l (0.03 μkat/l) Ett-reagens-system (utan P-5´-P): Tre-reagens-system:

2 U/l (0.03 μkat/l) reserved. hts

Tillsätt innehållet i Reagens B i flaskan med Reagens A. Tillslut flaskan och blanda. g Monoreagenset måste skyddas mot ljus! Detektionsgränsen representerar lägsta mätbara koncentration/aktivitet som kan skiljas från noll. Den beräknas som koncentrationen av nollprov + 3 SD (standardavvikelser) Tre-reagens-system (med P-5´-P): (inom serien, n=24). Reagenserna är klara för användning. Obs: Kontrollera att det ej finns bubblor i flaskhalsen eller på ytan av reagens då Imprecision (resultatenhet U/l) behållarna placeras i Konelab-analysatorn. Ett-reagenssystem:

Förvaring och hållbarhet Medel Medel Medel Reagens i oöppnade flaskor är hållbar vid 2…8 °C till på etiketten angivet utgångsdatum, 33 U/l 90 U/l 108 U/l om det skyddas mot ljus. SD CV% SD CV% SD CV% Se Application Notes för aktuell Konelab-analysator för information om reagensernas Inom serie 0.6 1.8 0.6 0.6 0.9 0.8 hållbarhet i instrumentet. Mellandags 0.5 1.5 0.9 1.0 1.0 0.9 Totalt 1.0 3.0 1.8 2.0 2.7 2.4 PROVTAGNING Tre-reagensystem:

Provmaterial Medel Medel Medel Klart serum eller heparinplasma kan användas. 31 U/l 89 U/l 109 U/l SD CV% SD CV% SD CV% Försiktighetsåtgärder Inom serie 0.6 1.8 0.6 0.7 1.0 0.9 Humana prover ska behandlas som potentiellt smittförande, både vid hantering och Mellandags 0.2 0.7 0.8 0.9 0.8 0.8 kassering. Totalt 0.8 2.6 1.5 1.7 2.2 2.0

Förvaring (3) En precisionsstudie har utförts enligt anvisningarna i NCCLS Dokument EP5-A med Provet kan förvaras i 3 dagar vid 20…25 °C, i 7 dagar vid 4…8 °C eller i 2 dagar vid –20 °C. Konelab 60 under 20 dagar. Antalet mätningar var n = 80. Template: D01162_4 © 2008 Thermo Fisher Scientific Inc. All ri All Inc. Scientific Fisher Thermo © 2008 D01162_4 Template:

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Metodjämförelse Ett-reagens-system: En jämförelsestudie har utförts enligt anvisningarna i NCCLS Dokument EP9-A med Konelab två-reagens-metod som referens. Linjär regression (resultatenhet U/l): y = 0.75 x + 2.8 r = 0.988 n = 60 Provens koncentration låg mellan 7 och 190 U/l. Tre-reagens-system: En jämförelsestudie har utförts enligt anvisningarna i NCCLS Dokument EP9-A med Konelab två-reagens-metod som referens. Linjär regression (resultatenhet U/l): y = 1.00 x + 0.2 r = 1.00 n = 65 Provens koncentration låg mellan 10 och 155 U/l.

Resultaten som erhålls vid varje enskilt laboratorium kan skilja sig från angivna data för prestanda. REFERENSER 1. Burtis, CA and Ashwood, E R (ed.), Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry, 5th edition, W B Saunders Company, Philadelphia, 2001, pp. 354 - 355. 2. IFCC 2002/5: IFCC Primary Reference Procedures for the Measurement of Catalytic Activity Concentrations of Enzymes at 37 °C, Part. 4 Reference Procedure for the Measurement of Catalytic Concentrations of Alanine Aminotransferase, Clin.Chem.Lab.Med. 2002, 40(7): 718-724. 3. Guder WG, Narayanan S, Wisser H, Zawta B. List of Analytes; Preanalytical variables. Brochure in: Samples: From Patient to the Laboratory. GIT Verlag GmbH, Darmstadt, 1996. 4. Young, D.S., Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests, Fifth Edition, AACC Press, Washington, D.C., 3-8 – 3-23, 2000. TILLVERKARE Thermo Fisher Scientific Oy Clinical Diagnostics Finland Ratastie 2, P.O. Box 100, FI-01621 Vantaa Tel. +358 9 329 100, Fax +358 9 3291 0300 www.thermo.com/konelab

Rev. datum (åååå-mm-dd) 2007-08-14

Ändringar från tidigare utgåva: Företagsnamnet är uppdaterat.