MINISTERUL EDUCAȚIEI, CULTURII ȘI CERCETĂRII

INSTITUTUL DE GENETICĂ, FIZIOLOGIE ȘI PROTECȚIE A PLANTELOR

BIOTEHLOGII BIOTEHNOLOGII AVANSATE – REALIZĂRI ȘI PERSPECTIVE

Simpozionul Științific Internațional (Ediția a V-a )

TEZE

21-22 Octombrie 2019 CHIȘINĂU, REPUBLICA MOLDOVA

MINISTRY OF EDUCATION, CULTURE AND RESEARCH INSTITUTE OF GENETICS, PHYSIOLOGY AND PLANT PROTECTION

ADVANCED BIOTECHNOLOGIES - ACHIEVEMENTS AND PROSPECTS

International Scientific Symposium (Vth Edition)

ABSTRACT BOOK

October 21-22, 2019 CHISINAU, REPUBLIC OF MOLDOVA CZU 631.147+60(082)=135.1=111=161.1 B 53

Simpozionul „Biotehnologii avansate-realizări şi perspective” abordează subiecte ce vizează aplicabilitatea metodelor biotehnologice în identificarea genotipurilor valoroase, extinderea diversității genetice, studiul moștenirii caracterelor cantitative și calitative la plante; elucidarea mecanismelor fiziologice, biochimice şi structurale în ontogeneza plantelor în condiţii optimale şi de stres ecologic, conservarea și valorificarea biodiversității; biotehnologii microbiene și medicale.

Materialele se editează în redacţia autorului.

СOMITETUL ȘTIINȚIFIC

BOTNARI Vasile, dr. hab., Institutul de Genetică, Fiziologie și Protecție a Plantelor ANDRONIC Larisa, dr., Institutul de Genetică, Fiziologie și Protecție a Plantelor NICOLAESCU-ONOFREI Liliana, ministru, Ministerul Educației, Culturii și Cercetării TIGHINEANU Ion, acad., președinte al AȘM WILLIAM Cracroft-Eley, prof., Universitatea Aberystwyth, Marea Britanie TABĂRĂ Valeriu, prof., Academia de Ştiinţe Agricole şi Silvice „Gheorghe Ionescu-Şişeşti”, România VLASOV Veaceslav, m. cor., Institutul de Viticultură și Vinificație „V.E.Tairov”, Odesa, Ucraina CESNOKOV Iurie, acad. Institutul de Cercetări Științifice în Agrofizică, Saint-Petersburg, Federația Rusă BALAȘOVA Irina, prof., Instituția Științifică Bugetară Federală “Centrul științific federal pentru legumicultură”, Moscova, Rusia

COMITETUL ORGANIZATORIC

ANDRONIC Larisa, dr., conf. cercet., președinte, IGFPP BOTNARI Vasile, dr. hab., conf. cercet., IGFPP COTENCO Eugenia, dr., conf. cercet., secretar, IGFPP SMEREA Svetlana, dr., conf. cercet., IGFPP ALEXANDROV Eugen, dr. hab., conf. cercet., IGFPP BATCO Mihail, dr., conf. cercet., IGFPP BRÎNZĂ Lilia, dr., conf. cercet., IGFPP CALUGARU-SPATARU Tatiana, IGFPP LUPAŞCU Galina, dr. hab., prof. cercet., IGFPP ROMANCIUC Gabriela, dr., conf. cercet., IGFPP

Descrierea CIP a Camerei Naționale a Cărții "Biotehnologii avansate – realizări şi perspective", simpozion ştiinţific internaţional (5 ; 2019 ; Chişinău). Biotehnologii avansate – realizări şi perspective : Simpozionul Ştiinţific Internaţional = Advanced biotechnologies – achievements and prospects : International Scientific Symposium, (Ed. a 5-a), 21-22 Octombrie 2019, Chişinău : Teze / com. şt.: Botnari Vasile [et al.] ; com. org.: Andronic Larisa (preşedinte) [et al.]. – Chişinău : S. n., 2019 (Tipogr. "Print-Caro"). – 194 p. Antetit.: Inst. de Genetică, Fiziologie şi Protecţie a Plantelor. – Tit. paral.: lb. rom., engl. – Texte : lb. rom., engl., rusă. – În red. aut. – Index de aut.: p. 191-193. – 300 ex. ISBN 978-9975-56-695-7. 631.147+60(082)=135.1=111=161.1 B 53

ISBN 978-9975-56-695-7.

CUPRINS

Prefață ...... 5

Secțiunea I. – Inginerii celulare și tisulare ...... 6

Secțiunea II. – Tehnici și metode in biotehnologie ...... 22

Secțiunea III. – Biotehnologii avansate in agricultură și protecția plantelor ...... 69

Secțiunea IV. – Bioconservarea și tehnologii de valorificare a resurselor genetice ...... 138

Index de autori ...... 191

Participanți la Simpozion ...... 194

PREFACE

Global sustainable development programs have been targeted at reducing poverty and hunger, including eradication of malnutrition. The Paris (2015) agreement on climate change has particularly emphasized on the need to improve the adaptive capacity of crop plants, strengthen resistance and reduce vulnerability to climate change, which has been manifested by intensifying extreme events in the form of drought, critical temperatures. The creation of varieties resistant to environmental factors with an increased ecological plasticity has been an imperative objective, which can be developed through the efficient use of modern biotechnologies. The notion of "Modern biotechnologies" was introduced in the convention of the biosecurity working group (Paris, 1995), being defined as "technologies for in vitro modification of nucleic acid, including obtaining recombinant DNA and fusion of nuclei or cells of species from taxonomic families isolated by physiological barriers, reproduction or recombination". Technological manipulations of DNA were developed after the 1970s through genetic engineering, finding widespread applicability, presenting processes for obtaining macrocompounds, cells, organisms with new characteristics. Subsequently, the importance of modern biotechnologies, in particular in maintaining genetic identity, preserving germplasm, controlling the use of genetically modified organisms and sustainable use of biodiversity, was summarized in the Cartagena Protocol on Biosafety on the conservation of biological diversity (Montreal, 2000). Over the decades, the goals of modern biotechnologies have been revised. Currently, the impact of biotechnologies in enhancing food and nutritional security, promoting human well-being by industrial, agricultural, medical-veterinary requirements has been recognized. At this year's World Congress of Biotechnologists (September 25-26, 2019, Rome, Italy) 21 major themes were set out, among the first being the agricultural, animal, marine, reproductive, pharmaceutical, agri-food biotechnologies. Biotechnology, as a science, is based on research in the field of life sciences that involves the transfer of competences in new products for industry and society as a whole. Following the development of fundamental scientific concepts, biotechnological instruments have found applicability in settling the most diverse areas of activity: genetic engineers (including transgenic, cisgenic, intragenic and subgenic), cell and tissue culture, molecular markers and molecular diagnostics, microbial and medical biotechnologies. A major role continues to be the traditional breeding methods, which ensure the efficient transmission of genes, the combination and multiple improvement of the characters of interest and their inheritance. The importance of biotechnologies is increasing, and competitiveness as a means of stimulating innovations has been clear and recognized. In a report of the Wold Wide Fund for Nature (2009) the potential of modern biotechnologies and their role for a sustainable economy has been identified. The studies concluded that using only transgenic plants can reduce greenhouse gas emissions by 1 - 2.5 billion tonnes of CO2 per year by 2030. According to the data from Grand View Research Inc. (2017), by 2025, the global market resulting from biotechnologies is expected to reach $ 727.1 billion. The problems of climate change, the diminution of natural resources, introduce new demands on the materials used by humans, invoking biological and renewable properties, environmentally friendly. Thus, the creation of a sustainable, precision agri-food system, integrated in the circular economy, is appropriate by integrating biotechnological instruments into a complex value chain. Given the considerable meteorological-climatic fluctuations, the global tendencies of population growth, it is necessary to promote a sustainable system, which aims to create genotypes resistant to a complex of extreme factors, targets on the agenda of European projects for food and environment. Overcoming abiotic stress by creating resilient varieties is imperative means for increasing agricultural media.

Chairman of the Organizing Committee Andronic Larisa

5 Sectiunea I РАЗРАБОТКА СХЕМ КЛЕТОЧНОЙ СЕЛЕКЦИИ ОВСА НА УСТОЙЧИВОСТЬ К ТОКСИЧНОСТИ МЕТАЛЛОВ И ЗАСУХЕ

Абубакирова Р.И. ФГБНУ ФАНЦ Северо-Востока, Россия e-mail: [email protected]

Для создания исходного материала в селекции овса (Avena sativa L.) применяются методы клеточной селекции, которые включают в себя получение каллусной ткани и отбор устойчивых каллусных линий в селективных системах с последующей регенерацией фертильных растений. В лаборатории биотехнологии растений и микроорганизмов ФАНЦ Северо-Востока используются селективные системы для отбора линий с одновременной устойчивостью к ионам токсичных металлов (алюминия, марганца и кадмия) на кислых селективных средах. Другим направлением селективного отбора является получение форм, устойчивых к дефициту влаги, с этой целью в качестве осмотика в среды добавляется полиэтиленгликоль (ПЭГ 6000). Целью данной работы являлось получение регенерантных форм овса, устойчивых одновременно к воздействию ионов водорода, алюминия, марганца, кадмия и дефициту влаги. В 2017-2018г. в работе использовали девять различных генотипов овса из питомника конкурсного сортоиспытания: 308h12, 394h12. И4808, 2h09, 244h13, 275h14, 61h14, 256h13, 79h14, предоставленных академиком РАН Г.А. Баталовой. При отборе устойчивых каллусных линий применяли схемы клеточной селекции, включающие последовательное воздействие ПЭГ, ионов алюминия, марганца и кадмия на этапах пролиферации и морфогенеза каллусной ткани. Наиболее низкой выживаемостью характеризовались каллусные линии, подвергшиеся последовательному воздействию 100 мг/л Мn2+ и 10% ПЭГ (13,3-20,3%). В схемах, включающих введение Мn2+ или ПЭГ на этапе пролиферации и 30мг/л А13+ на этапе морфогенеза, показатели выживаемости были существенно более высокими (35,1-36,9%). В вариантах селективного отбора на среде с добавлением 30 мг/л А13+ на этапе пролиферации и 10% ПЭГ на этапе морфогенеза наблюдали наиболее высокую регенера- ционную активность (13,5-26,7%) каллусной ткани, также как и при обратном воздействии селективных агентов (15,8-17,5%). Наименьшая частота регенерация была в селективных системах с введением 20 мг/л Cd2+ на этапе пролиферации и 30 мг/л А13+ на этапе морфогенеза (0-5,6%). Растения-регенеранты в стадии 2-3 листьев высаживали в вегетационные сосуды и выращивали в климакамере с фотопериодом 16 час при температуре 18оС/14оС день/ночь до получения семенного потомства. Всего за 2017-2018 г.г. были получены 25 растений- регенерантов, индуцированных 7 генотипами овса. Анализ элементов структуры урожая растений-регенерантов показал, что максимальные значения продуктивных признаков (количество зерен достигало 338-480 шт, а масса зерна с одного растения составляла 15,7-21 г) отмечались при воздействии ионов А13+ или Мn2+ на этапе пролиферации, а ПЭГ − на этапе морфогенеза. При воздействии ПЭГ на этапе пролиферации и ионов алюминия на этапе морфогенеза количество зерен с растения составило 337 шт., а масса − 15,1 г. Растения, полученные на средах с введением кадмия, отличались наиболее низкой продуктивностью (248 зерен с растения, масса зерна − 8,0 г). Таким образом, в ходе проведенных исследований установлено, что наиболее эффективными для получения растений-регенерантов овса, устойчивых к токсичности металлов и засухе, могут являться схемы клеточной селекции с введением ионов металлов на этапе пролиферации, а ПЭГ – на этапе морфогенеза. Каллусные линии при этом характеризовались достаточно высокой частотой регенерации, а индуцированные ими растения-регенеранты имели более высокие продуктивные признаки, чем растения, полученные по схемам отбора с обратным порядком введения селективных агентов.

6 SELECTAREA GENOTIPURILOR REZISTENTE LA TEMPERATURI ÎNALTE ȘI DEFICITUL HIDRIC DUPĂ VARIABILITATEA POLENULUI

Antoci Liudmila Institutul de Genetică, Fiziologie și Protecție a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail: [email protected]

Problemele, care stau în fața savanților nu sunt lipsite de necesitatea creării genotipurilor cu o productivitate și rezistență înaltă la factorii stresanți ai mediului (temperatură înaltă, limită de umiditate). Procesul de selectare a formelor rezistente presupune utilizarea metodelor tradiționale clasice, cât și celor mai performante tehnologii. Acțiunea factorilor nefavorabili poate fi diminuată prin ameliorarea genotipurilor rezistente. După părerea marelui savant N.I.Vavilov mediul este un bun și puternic factor pentru ameliorare. Reeșind din cele menționate, cercetările au fost axate pe evaluarea și selectarea genotipurilor rezistente la temperaturile înalte și deficitul hidric. Au fost incluse în studiu 8 combinații hidride în generația F3 de tomate, plantele au fost cultivate pe câmpul experimental al IGFPP. La etapa de înflorire s-a colectat polenul genotipurilor, care ulterior, a fost supus tratării termice în termostat cu regimul de temperatură de 40ºC timp de 2 și 4 ore, după ce a urmat cultivarea polenului fiecărui genotip variantele martor și probă pe mediu nutritiv artificial. După 3 ore de cultivare, la microscop au fost analizate preparatele și s-au stabilit următoarele caractere: viabilitatea și rezistența polenului, lungimea tuburilor polinice și rezistența acestora. Evaluarea după rezistență la deficitul hidric s-a efectuat prin utilizarea mediului cu sorbit de 85% - varianta probă, ca martor a servit polenul uscat. Analiza efectuată la microscop a stabilit, că fondalul de temperatură înaltă a modificat în mod diferit valorile caracterelor polenului genotipurilor analizate. După așa indicatori ca viabilitatea polenului și lungimea tuburilor polinice în varianta probă valorile polenului au diminuat de 1,04 - 8,0 ori în comparație cu martorul și în dependență de genotip. Această variație a fost determinată veridic de factorul termic, genotip și interacțiunea lor. Este necesar de remarcat, că la peste 40% de genotipuri, în rezultatul acțiunii termice, viabilitatea polenului s-a micșorat de 5 ori, dar au fost evidențiate trei genotipuri, care au atestat o rezistență înaltă a polenului la temperatură înaltă de la 69 până la 94%. Analiza tuburilor polinice a demonstrat o rezistență înaltă de 70 - 92% la 90% de populații hibride studiate. Prelucrarea statistică prin metoda dispersională polifactorială a permis stabilirea cotelor de influență în variabilitatea caracterelor gametofitului masculin. Astfel, variabilitatea viabilității polenului este determinateă în mare parte de acțiunea factorului termic, ce constitue 90%, pe când acțiunea genotipului și interacțiunea ambilor factori a fost egală cu 5%. Stresul termic a avut o acțiune și asupra lungimii tuburilor polinice, cu valoarea de 77%, însă influența genotipului a fost de 5 ori mai mică. În scopul testării genotipurilor rezistente la acțiunea deficitului de umiditate a fost evaluat polenul pe mediu cu sorbit. S-a stabilit, că insuficiența de umiditate a contribuit la modificarea mărimii grăuncioarelor de polen în direcția micșorării de 1,9- 3,0 ori în dependență de genotip. Combinațiile hibride Mary Gratefully x Tomiș; Mary Gratefully x Prestij; Mary Gratefully x Mihaela; Veneț x Mihaela au fost evidențiate cu o rezistență înaltă cuprinsă între 75 - 79%. Analiza statistică a permis stabilirea contribuției fiecărui factor în variabilitatea viabilității și rezistenței polenului. Astfel, factorul termic a avut o pondere mai înaltă, ce a constituit 89 - 92%, pe când acțiunea genotipului a fost de numai 5-7%. Este necesar de menționat, că au fost obținute rezultate importante privitor la termorezistența polenului în decurs de doi ani consecutivi, care ne-au permis să evidențiem trei combinații hibride cu rezistență înaltă: Veneț x Mihaela;Veneț x Elvira; Victorina x Mihaela. Rezultatele obținute denotă despre posibilitatea selectării genotipurilor rezistente la factorii nocivi ai mediului ambiant, nu doar folosind metodele clasice tradiționale, ci și celor noi prin ameliorarea la nivel de gametofit masculin, utilizând metode simple, veridice și eficiente.

7 DURUM WHEAT ROOTS ADAPT TO SALINITY REMODELLING THE CELLULAR CONTENT OF NITROGEN METABOLITES AND SUCROSE

Annunziata Maria Grazia1, Ciarmiello Loredana F.2, Woodrow Pasqualina2, Maximova Eugenia1, Fuggi Amodio 2 and Carillo Petronia2 1 Department of Metabolic Networks, Max Planck Institute of Molecular Plant Physiology, Potsdam, Germany, 2 Dipartimento di Scienze e Tecnologie Ambientali, Biologiche e Farmaceutiche, Università degli Studi della Campania “Luigi Vanvitelli”,Caserta, Italy e-mail: [email protected]

Plants are currently experiencing increasing salinity problems due to irrigation with brackish water. Moreover, in fields, roots can grow in soils which show spatial variation in water content and salt concentration, also because of the type of irrigation. Salinity impairs crop growth and productivity by inhibiting many physiological and metabolic processes, in particular nitrate uptake, translocation, and assimilation. Salinity determines an increase of sap osmolality from about 305 mOsmol kg-1 in control roots to about 530 mOsmol kg-1 in roots under salinity. Root cells adapt to salinity by sequestering sodium in the vacuole, as a cheap osmoticum, and showing a rearrangement of few nitrogen-containing metabolites and sucrose in the cytosol, both for osmotic adjustment and oxidative stress protection, thus providing plant viability even at low nitrate levels. Several studies have already been carried out on durum wheat under salinity; most of them were performed on leaves. Only few data concern the effects of salinity on root metabolic profile, and how metabolite changes are related to the physiology of cells and root tissues. Since it is unquestionable that the elucidation of fundamental molecular and physiological responses to salinity is instrumental to improving crops salt tolerance, in the present study uniform and non-uniform salinity have been simulated with a split-root system in which the root system was divided into two equal portions and each portion irrigated with 0 mM (control) or 100 mM NaCl (salt stress) solution and 10 mM KNO3. Moreover, for the uniform salinity treatment (with the entire root system grown at 0 or 100 mM NaCl), low and high nitrate concentrations (0.1 and 10 mM KNO3, respectively) are applied. These conditions are used to study physiological root responses to salinity focusing on: (i) root ions accumulation and effect on some physiological parameters; (ii) osmolytes accumulation and contribution with ions to the osmotic balance of the root cells; (iii) expression and activity of the main enzymes involved in the synthesis of nitrogen-containing osmolytes; (iv) antioxidant response. Durum wheat roots under salinity showed few changes in selected metabolites which allowed the plant viability even at low nitrate. This metabolic rearrangement was necessary to meet the demand for anti-stress agents including compatible solutes and antioxidants. Thus, while the sodium was used as osmoticum in the vacuole, mainly glycine betaine, sucrose, nystose, and 1- fructofuranosylnystose at low nitrate, and glycine betaine, asparagine and proline at high nitrate were responsible for the osmotic adjustment, the assimilation of the excess of ammonium and the scavenging of ROS under salinity in the cytosol. The strong increase of the sole asparagine and glutamine in high nitrate split roots, either in control and salt stress conditions, suggests that the stress- induced adjustment is not a regional effect. On the contrary, the plant operates as an integrated system in which metabolic stress-induced signals spread in the plant and change the metabolism even in areas in which the stress conditions are not present. Notwithstanding this, different parts of plant root systems may behave as physiologically autonomous units, differing their responses to environmental signals, and preserving their own capability to supply the shoots with water, nutrients or assimilates. In this way one part of the root system can compensate the plant for a decreased supply or a loss of functionality by the other part, optimizing plant viability under heterogeneous water, nutrients or stressing conditions.

8 TESTAREA PRIMERILOR SPECIFICI PENTRU DETECȚIA 'Candidatus Phytoplasma solani'

Bahșiev Aighiuni, Mitin V., Zamorzaeva Irina Institutul de Genetică, Fiziologie și Protecție a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail: [email protected]

Fitoplasma este un microorganism fără perete celular care infectează plantele, fiind propagat prin floem la un spectru larg de culturi agricole de importanță economică majoră ca de exemplu: grâu, porumb, cartof ș.a. În special infectează tomatele, simptomele tipice ale infecției se manifestă prin piticism, îngălbenirea frunzelor, scurtarea internodurilor și sterilitatea înflorescenței, ce duce în final la scăderea semnificativă a calității producției și a productivității. Detecția morfologică este greu de realizat, din motiv că fitoplasmoza prezintă simptome specifice și altor infecții virale iar simtomele distinctive se observă la etapele tardive de creștere a tomatelor când are loc infecția sistemică în plante. La fel diagnosticul fitoplasmei este mai dificil din cauza imposibilității cultivării in vitro. Pe când metodele moleculare permit identificarea veridică și specifică a fitoplasmei. De obicei detecția moleculară a fitoplasmei se realizează prin metoda nested-PCR care constă în amplificarea în două runde a secvenței specifice. Însă această metodă posedă unele dezavantaje fiindcă consumă mult timp și reactive. Scopul cercetării a constat în optimizarea condițiilor de identificare a 'Candidatus Phytoplasma solani' într-o singură rundă, astfel am realizat testarea primerilor specifici pentru detecția sigură a fitopatogenului la plante. Materialul a fost colectat la etapa de coacere în masă a fructelor în luna august a anului 2018, când titrul fitoplasmei atinge un nivel înalt în plante. Izolarea ADN-ul s-a realizat prin metoda DNA- zol din 10 plante a soiului Elvira. Soiul Elvira fiind considerat ca soi sensibil la infecția fitoplasmică. În studiu au fost analizați șase primeri ps (3 Forward și 3 Revers în diferite combinații), specifici pentru 'Ca. P. solani'. Primeri au fost creați cu ajutorul programei Primer 3, pe baza secvenței genei chaperonin. Reacția de amplificare a decurs conform următorului program : I - 94°C 5'; II - 94°C 30'', 58°C 30'', 72°C 30'' × 30; III - 72°C 10'; IV - 4°C ∞. Rezultatele amplificării au fost înregistrate prin electroforeza ampliconilor coloraţi cu bromură de etidiu (gel de agaroză de 2%, soluţie-tampon 1xTBE) şi vizualizaţi în UV. Veridicitatea metodei de detecție a fitoplasmei a fost determinată pe baza datelor obținute cu ajutorul metodei nested-PCR. Inițial s-a realizat testarea primerilor ps3-ps4. Rezulatetele detecției moleculare a 'Ca. P. solani' cu primerii ps3-ps4 au demonstrat prezența a 8 semnale de amplificare din 10 probe analizate. În urma comparației datele obținute prin metoda PCR au fost identice cu rezultatele primite prin metoda nested-PCR. Utilizând primerii ps1-ps4 la fel s-au demonstrat rezultate asemanătoare iar semnalele de amplificare fiind mai accentuate. Diagnosticul molecular al fitoplasmei cu perechea de primerii ps3-ps6 nu a prezentat o sensibilitate atât de înaltă fiind prezente 7 semnale de amplificație din 10 probe, mai mult ca atât s-a atestat sinteza unor fragmente de ADN cu lungimi nespecifice. Date similare au fost obținute și prin utilizarea primerilor ps1-ps5. În acest caz au fost determinate 6 benzi din cele 8 obținute în urma realizării nested-PCR. Analizând rezultatele primite putem menționa că perechea de primeri ps1-ps4 este cea mai potrivită pentru identificarea sigură și precisă a fitoplasmei. La fel primerii ps3-ps4 pot fi utilizați în diagnosticul molecular al 'Ca. P. solani' dar benzile electroforetice (semnele de infecție) nu au fost așa de accentuate în acest caz. Perechea ps3-ps6 nu a demonstrat rezultate veridice, dar pe viitor pot fi analizate și alte condiții de realizare a PCR. Perechea de primeri ps1-ps5 a prezentat rezultate fals- negative și nu necesită de a fi inclusă în cercetările ulterioare pentru diagnosticul molecular al fitoplasmei prin metoda PCR. În concluzie putem recomanda perechile de primeri ps1-ps4 și ps3-ps4 pentru detecția moleculară sigură și precisă a 'Ca. P. solani'. Primerii dați demonstrează o sensibilitate înaltă permițând obținerea rezultatelor veridice, cu minimizarea timpului și a reactivelor utilizate.

9 МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ФИТОПАТОГЕННОГО ПОРАЖЕНИЯ ПЛОДОВ ТОМАТА НА РАННИХ СТАДИЯХ

Белоусова Галина, Шубина Виктория Институт генетики, физиологии и защиты растений, Кишинэу, Республика Молдова e-mail:[email protected]

Рост вредоносных микологических заболеваний томата тесно связан с ухудшением экологической обстановки, значительным перемещением сельскохозяйственных культур, интенсивным использованием химических удобрений и пестицидов и другими факторами. Около 85% всех болезней растений вызываются грибковыми или грибоподобными организмами. Интенсивное использование химических удобрений и пестицидов в борьбе с микозами растений являются высокоэффективными, но дорогостоящими средствами. Поэтому поиск новых агентов, способных подавлять рост патогенных микроорганизмов и одновременно способствовать росту и урожайности растений является актуальной задачей. В настоящее время возрос интерес к экологически чистым биопрепаратам. Альтернативой химическим удобрениям и пестицидам является использование микроорганизмов. Нами изучено влияние бактериальной суспензии Bacillus subtilis CNMN BB-09 в концентрации 0,5% и химического препарата Cupromax на фитопатогенное поражение плодов томата сорта Томиш в полевом опыте. Контролем служил вариант без обработки. Диагностику плодов на присутствие фитопатогенов проводили молекулярными методами, что способствовало точности и достоверности исследований. Для выявления фитопатогенов с растений были отобраны здоровые зеленные плоды томата на стадии первой кисти. Плоды были промыты детергентом и многократно дистиллированной водой для снятия поверхостной инфекции. Из них выделена ДНК с использованием SDS метода (метод выделения ДНК с помощью додецилсульфат натрия). Проведено тестирование ДНК на присутствие грибных фитопатогенов Alternaria spp., Fusarium spp., и Myrothecium roridum с помощью метода nested PCR. Для каждого патогена использовали специфичные праймеры. Патогены Alternaria spp. определяли, используя праймеры к гену RNA polymerase II second largest subunit (rpb 2), Fusarium spp. определяли с помощью праймеров из последовательности гена final elongation factor TEF1 нуклеотидного банка NCBI. Для M. roridum использовали праймеры из последовательности ITS small subunit ribosomal RNA gene. Результаты оценивали с помощью электрофоретического разделения ампликонов в 1% агарозном геле с последующим окрашиванием бромистым этидием. Для варианта с биологической обработкой бактериальной суспензией Bacillus subtilis CNMN BB-09 фитопатогены Alternaria spp. и Fusarium spp. не были идентифицированы. При химической обработке Alternaria spp. выявлена в 11% образцов. Fusarium spp. присутствовал в 11% образцов. В контрольном варианте Fusarium spp. не выявлен ни в одном образце, а патоген Alternaria spp. присутствовал в 11% образцов. Во всех трёх случаях патоген M. roridum не был выявлен ни в одном из проанализированных образцов. Проведённые молекулярно-генетические исследования по выявлению фитопатогенов в полевом эксперименте показали, что биологическая обработка полевого опыта бактериальной суспензией Bacillus subtilis CNMN BB-09 в концентрации 0,5% на ранних этапах способствует защите томатных растений от тестированных фитопатогенов Alternaria spp. и Fusarium spp., M. roridum. Биопрепарат на основе Bacillus subtilis CNMN BB-09 может быть использован для защиты растений.

10 ASSESSMENT OF DIVERSITY IN SOME WHEAT GENOTYPES, BASED ON RGA MARKERS ANALYSIS

Bivol Ina, Gore A., Rotari Silvia Institute of Genetics, Physiology and Plant Protection, Chisinau, Republic of Moldova е-mail: [email protected]

During the coevolution of plant-pathogen interactions the plants, have developed the sophisticated multi-layered immune defense systems, which involving many resistance genes (R) and their products. Most of the known R-genes and resistance gene analogs (RGAs) discovered in plants possess conserved functional domains and structural features, and can be grouped into five classes: nucleotide binding site – leucine-rich repeat (NBS–LRR), intracellular serine – threonine protein kinase (PK), leucine-rich repeat – single transmembrane region (LRR–TM), PK–LRR–TM, and signaling anchor – coiled-coil domain (SA–CC). Specific genomic DNA sequences amplified by degenerate primers based on these motifs are known as RGAs or potential R-genes, using that possible to identify and isolate of numerous related sequences of R-genes and RGAs in other plant species. Many studies have demonstrated the high level of RGA polymorphisms that may result from various mutations types such as deletions, duplications, unequal crossing-over, frame shifts due to continuous response to diverse plant pathogen populations. The RGAs technique is important tool for the development of molecular markers that are utilized for genetic diversity analysis, tagging disease resistance related traits, discovering candidate genes in several crops, and also understanding of the molecular mechanisms of R-gene function and evolution, thus enhancing numerous disease resistance by breeding programs. The purpose of the present study was to assess the existing genetic diversity and relationships based upon several potential candidate resistance genes among some wheat genotypes. Genetic diversity and relationship between 11 common wheat (Triticum aestivum L.) and durum wheat (T. turgidum var. durum) genotypes from the collection of the Institute of Genetics, Physiology and Plant Protection were studied by means of RGA markers. Six pairs of RGA primers (NLRR for/rev, CLRR for/rev, XLRR for/rev, RLRR for/rev, Ptokin1/2 and Ptokin3/4) derived from PK and LRR domains of R-genes were used. In RGA analysis two effective primers (XLRR for/rev and Ptokin1/2) were selected and, in consequence, RGA amplified fragments were produced in sizes ranging from 153 to 1402 bp. The number of amplicons generated by the primers ranged from 11 to 14. It was discovered that RGA primers produced 16 specific and 9 polymorphic fragments among wheat accessions. The level of polymorphism detected with primers XLRR for/rev and Ptokin1/2 was 42.86 and 27.27%, respectively, that indicating the genetic variation among the examined genotypes. Genetic similarity between accessions was estimated by means of cluster analysis using Nearest Neighbor method, Euclidean distances. According to this data, the genotypes were divided into 2 distinct clusters. The first cluster was formed from two separate subclusters: subcluster 1 contained cultivars ATHLON and Lăutar; cultivars Moldova 77, Moldova 79, Moldova 5, Moldova 614, Kuialnic, Epoha and Hordeiforme 335 were clustered in subcluster 2, moreover, Kuialnic and Epoha showed a high degree of similarity. While in the second cluster there were Moldova 66 and Moldova 11. In conclusion, RGA markers are suitable for both assessment genetic diversity and for recognition of candidate genes and also for inferring genetic relationships among wheat genotypes. Whereas, it was detected the medium level of polymorphism with 2 RGA primers, for the increase exactness scanning of the genome need to use more number of the primer combinations. This information will be highly relevant for identify and deployment of disease resistance genes with goal of development resistant genotypes of wheat to a wide array of pathogens.

11 IDENTIFICATION QTL OF LEAVES DIFFUSE REFLECTANCE INDICES IN SPRING HEXAPLOID BREAD WHEAT (Triticum aestivum L.)

Chesnokov Yu.1, Kanash Elena1, Mirskaya Galina1, Kocherina Nataliya1, Rusakov D.1, Lohwasser Ulrike2, Börner Andeas2 1Agrophysical Research Institute, St. Petersburg, Russia 2Leibniz Institute of Plant Genetics and Crop Plant Research, Gatersleben, Germany e-mail: [email protected]

To date, QTL (quantitative trait loci) mapping is one of the main approaches actively used to study interactions between the genotype and the environment. Hereditability, which represents a part of the total phenotypic variability caused by genetic differences, is used in this approach to determine whether a trait can be used for mapping of genes or chromosome loci that determine this trait. QTL mapping of diffuse reflectance indices of laminas in bread wheat (Triticum aestivum L.) has been first performed under controlled conditions of a regulated agroecobiological testing ground in the presence or absence of nitrogen fertilizers. Contact and remote optic technologies were used earlier for the development and implementation of precision agriculture technologies based on the phenotyping of spring wheat; they included a quantitative assessment of plants’ need for the main mineral nutrients (nitrogen, phosphorus, and potassium) and water. Results of our earlier studies showed that the conclusion about the suppression of plants and deterioration of their physiological state caused by the presence of a growth-limiting stressor may be made via the measurement of the reduction of a chlorophyll index determined for each crop and cultivar under optimal conditions. Optical indices chosen for the study determine a range of important characteristics, such as the content of chlorophylls and anthocyanins, carotenoid/chlorophyll ratio, photochemical activity of the photosynthetic apparatus, light scattering on a lamina, assimilating leaf surface area, and grain productivity. The reliability of a correlation between the revealed loci and the polymorphism of certain traits was assessed based on a threshold value of the likelihood ratio of the logarithm of the odds or the LOD score. For each experiment, a separate QTL analysis was carried out for each trait, and the trait variation degrees (R2) explained by the corresponding QTL data were determined. A significance of each LOD was estimated by the permutation test (1000 repeats). Only loci with LOD ≥ 3.0 (P < 0.001), 2 ≤ LOD < 3 (P < 0.01), and 1.5 ≤ LOD < 2 (P < 0.1) were taken into account. In total, 31 QTLs have been mapped. The performed study showed that all six physiological reflectance indices assessed in two parallel experiments demonstrated unstable localization of the corresponding QTLs on the linkage groups. A significant correlation has been revealed between the introduction of a nitrogen fertilizer and the five of six optical characteristics of the photosynthetic apparatus activity in bread wheat. The only exception is the reflectance index for near-infrared radiation (800 nm), which depends on the structural features of leaf tissues. No statistically significant correlation has been revealed between the thousand-grain weight and spectral characteristics of the diffuse reflectance of the lamina measured at the booting stage. However, a significant correlation between the number of grains formed in the spike of the main stalk and the traits characterizing activity of the photosynthetic apparatus (reflectance indices, leaf area) has been observed. Results of the performed variance, correlation, and QTL analyses confirm each other indicating reliability of the revealed effect of nitrogen nutrition level on the manifestation of the studied reflectance indices in bread wheat under strictly controlled conditions of an agroecobiological testing ground. Application of noninvasive optical methods provides a high-throughput assessment of photosynthetic intensity in plants and, therefore, can be used for efficient selection of promising wheat genotypes with high grain productivity under both controlled and field conditions. They provide a high-throughput analysis of phenotypical traits as well as the study of relationships between the phenotype and genotype and their variability during realization of the evolutionary adaptive and physiologo-genetic “genotype- environment” interaction. The study was supported by the Russian Foundation for Basic Research (16-04-00311а).

12 EVALUAREA INDICILOR CITOGENETICI LA CELULELE CALUSALE OBŢINUTE DIN EMBRIONI MATURI DE TRITICALE SUB ACŢIUNEA RADIAŢIEI GAMA

Ciobanu Renata Institutul de Genetică, Fiziologie şi Protecţie a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail: [email protected]

Radiaţiile ionizante s-au dovedit unul din mijloacele eficiente de intervenţie în schimbarea structurii genetice a speciilor, în crearea şi ameliorarea soiurilor, fiind o sursă preţioasă de sporire a variabilităţii genetice. Efectele acţiunii radiaţiei gama asupra triticalelor sunt multiple şi depind de o serie întreagă de factori: doza, durata de iradiere, genotip. Mutaţiile apărute în cultura in vitro pot avea origine diferită şi cuprinde un spectru variat de restructurări cromozomiale, similare celor induse de alți factori fizici şi chimici. În rezultatul iradierii ţesuturilor vegetale apar multiple rupturi şi modificări ale structurii fine a cromozomilor, fiind caracterizate prin instabilitatea genomului celulelor. Embrionii maturi de triticale au fost prelevaţi de la genotipurile: Ingen 33, Ingen 35, Ingen 40, Ingen 93, Polonez LT 76872, Rodlen, Colina, 188TR5021, CAD 2/917 şi supuşi iradierii gama cu doza de 150 Gy la instalaţia gama RXM-V-20, sursa radiaţiilor - 60Co, 0,16 g/sec. Pentru inducerea calusogenezei embrionii au fost inoculaţi pe mediul Murashige şi Skoog (1962) suplimentat cu mezo- inositol (250 mg/l), 2,4-D (2 mg/l), kinetină (0,2 mg/l), zaharoză (30 g/l), agar (7 g/l), pH-ul 5,8. La etapa de inducere, explantele au fost cultivate la întuneric în camera de cultură la temperatura 26±20C, timp de 4 săptămâni. Calusul obţinut a fost fixat în soluţie de alcool-acid acetic glacial (3:1), probele de calus au fost tratate cu soluţie de alaun (7%), supuse hidrolizei şi macerării preventive cu pectinază (0,5 %) şi colorarea celulelor calusale în soluţie carmin-acetic (2 %) timp de 24 de ore. Pentru analiza citologică au fost evaluate mostre de calus fixate la 96 şi 192 ore de cultivare de la începutul iniţierii calusogenezei. În rezultatul examinării - 4133 celule calusale a fost stabilită cota celulelor cu aberaţii, care reprezintă procentul celulelor cu aberaţii raportat la numărul total de celule studiate în ana- telofaza diviziunii mitotice. Studiul influenţei radiaţiei gama asupra procesului de diviziune a celulelor din calus a demonstrat reacţii diferite ale genotipurilor cercetate. Devieri semnificative s-au observat la genotipurile: LT 76872, Colina și 188 TR 5027, numărul celulelor mitotice cu aberaţii constituind 28,20, 25,23 și respectiv 23,33%. Cel mai mare număr de celule mitotice aberante a fost semnalat la genotipul LT 76872. Numărul celulelor cu aberaţii cromozomiale în celulele calusale la genotipul Rodlen a constitui 15,50%, pe când la varianta martor acest indice este doar de 4,56%, ceea ce demonstrează aportul culturii in vitro și specificul genotipului în inducerea mutaţiilor. La genotipul Ingen 35 acest indice atinge valoarea de 13,61% în comparaţie cu martorul pentru care nu au fost depistate aberaţii. S-a stabilit că efectul citogenetic al culturii in vitro este dependent prioritar de genotip, cât și de iradierea materialului cu raze gama, ce a favorizat creşterea cotei de celule cu aberaţii şi inducerea mutaţiilor cromozomiale. Datele obţinute ne demonstrează că, la doza de 150 Gy în comparaţie cu martorul, activitatea mitotică scade. Datorită acestei acţiuni, cromozomii suferă diverse restructurări. S-au observat aberaţii în anafază-telofază de tipul: punţi cromozomiale simple sau duble, cromozomi retardaţi, fragmente cromozomiale. Cel mai mare număr de aberaţii cromozomiale în procesul diviziunii mitotice îl constituie punţile cromozomiale şi fragmentele cromatidice. Anume aceste tipuri de aberaţii au o pondere mai importantă asupra procesului mutaţional, procese care determină spectrul variabilităţii genetice somaclonale. Astfel de schimbări structurale nu revin la starea normală şi deci, probabil sunt responsabile de apariţia unor forme mutante. Iradierea cu raze gama are efect puternic asupra procesului mitotic, prin reducerea indicelui mitotic şi prin provocarea de aberaţii cromozomiale.

13 ИЗМЕНЧИВОСТЬ ПРИЗНАКА «ДИАМЕТР ПЫЛЬЦЫ» У ПРОСТЫХ ГИБРИДОВ F1 КУКУРУЗЫ

Клименко Оксана Институт генетики, физиологии и защиты растений, Кишинэу, Республика Молдова e-mail: [email protected]

Оценка устойчивости генотипов к стрессовым факторам по признакам мужского гаметофита является важной частью селекции кукурузы. В качестве исходного материала использовали простые гибриды F1(материнские генотипы-XL12, Mo17, A285 и отцовские генотипы - Р165, N6, W23, P101, Rf7) по схеме 2х5 и 3х4, а также гибриды с материнской линией МК01 и отцовскими генотипами W47, B73, L276, W23, N6, Rf7, Mo17 по схеме 1х7. Всего оценивалось 22 генотипа. С помощью микрометра определяли диаметр у свежесобранных пыльцевых зерен и у зёрен, на искусственной питательной среде (как при действии нормальных температур, так и стрессовых - от +40С до +150С). Из двух схем простых гибридов достоверная зависимость изучаемого признака от материнского генотипа (в нормальных условиях) была отмечена только в схеме 3x4 и коэффициент наследуемости составил 0,1252**. В стрессовых условиях, достоверной зависимости от материнского генотипа не было выявлено, однако в обеих схемах была отмечена достоверная зависимость от отцовского генотипа (h2=0,1626*** и h2=0,1365**). Также в стрессовых условиях в схеме 3х4 был достоверен коэффициент наследуемости взаимодействия материнского и отцовского генотипов (h2=0,1362*). Достоверно наименьшие значения признака «диаметр пыльцы» были отмечены у гибридов, где в качестве отцовского генотипа была использована линия Rf7. В то же время, достоверно наибольшие значения изучаемого признака (в нормальных условиях) были отмечены у гибридов с материнской линией XL12. Достоверно лучшим оказался гибрид XL12xP101. В стрессовых условиях эта линия также была достоверно лучшим материнским генотипом вместе с линией Мо17, которая несущественно ей уступала. В обеих схемах зависимость от стрессового фактора была достоверной и составила для схемы 3х4 -28,74%***, а для схемы 2х5–26,4%***. Однако, достоверная зависимость от фактора «генотип» и от взаимодействия факторов «генотип» х «стрессовая температура» была найдена только в схеме 3х4, причем величина степени влияния фактора «генотип» в общей дисперсии признака была примерно в 5 раз меньше, чем аналогичный показатель взаимодействия факторов. Определение коэффициента наследуемости признака «диаметр пыльцы» (в нормальных и стрессовых условиях) в однофакторном дисперсионном комплексе показало, что величина этого показателя для отцовских генотипов (W47, B73, L276, W23, N6, Rf7, Mo17) в нормальных условиях составила h2=0,4866***, а в стрессовых условиях была меньше - h2=0,3362**. Следует отметить, что величины скорректированных коэффициентов детерминации, показывающих долю варьирования изучаемого признака в зависимости от фактора «генотип», в нормальных и стрессовых условиях (43,76%*** и 52,42%***) различались на 8,7%, но при воздействии пониженных температур значение данного показателя было больше. Лучшим отцовским генотипом, как в нормальных, так и в стрессовых условиях, оказалась линия W47. В стрессовых условиях также выделились отцовские генотипы N6 и Mo17. При этом материнский генотип (линия МК01) в нормальных условиях достоверно превосходил два своих гибрида (МК01хМо17 и МК01хRf7). В стрессовых условиях все семь гибридов достоверно превосходили свой материнский генотип по изучаемому признаку. Кроме того, согласно результатам двухфакторного дисперсионного анализа, у данных гибридов изменчивость признака «диаметр пыльцы» (в среднем по двум схемам) зависела от фактора «генотип» на 18,12%***, от фактора «стресс» на 14,74%*** и от взаимодействия этих факторов на 23,37%***. Таким образом, отобран ценный исходный материал для дальнейшего создания гибридов устойчивых к пониженным температурам.

14 ELABORAREA PRIMERILOR SPECIFICI PENTRU IDENTIFICAREA MOLECULARĂ A FUNGILOR DIN G. Gaeumannomyces

Deaghileva Angela, Mitin V., Tumanova Lidia, Grăjdieru Cristina Institutul de Genetică, Fiziologie şi Protecţie a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail: [email protected]

Maladiile radiculare, care determină pierderea de 10-30% a producţiei anuale de cereale, sunt cauzate de un complex de agenţi patogeni, cel mai frecvent, fiind identificaţi fungii din g. Fusarium, Rhizoctonia, Pythium şi Gaeumannomyces, care manifestând simptome asemănătoare, deseori sunt prezenţi pe acelaşi câmp sau chiar pe aceeaşi plantă. În Republica Moldova bolile radiculare ale grâului au fost studiate prin metode clasice, printre agenţii cauzali fiind identificaţi preponderent Fusarium, frecvent Gliocladium, Helminthosporium, etc. Gaeumannomyces graminis, care provoacă îngenuncherea grâului, este pe larg răspândit în Eurasia, inclusiv în ţara vecină Ucraina, iar în Republica Moldova unde condiţiile sunt favorabile pentru dezvoltarea lui nu se cunosc date despre prezența la culturile cerealiere. Astfel, acest patogen prezintă un risc semnificativ pentru agricultura naţională. Pentru a permite luarea măsurilor adecvate de control, care vor fi utilizate în beneficiul randamentului culturilor, este crucial ca aceest patogen să fie identificat corect şi la timp. Identificarea Gaeumannomyces graminis a fost efectuată prin metodele PCR şi nested-PCR cu perechi de primeri specifici, creaţi pe baza fragmentului genei MnLOX, care este comun pentru speciile din genul Gaeumannomyces (GenBank). Testarea seturilor de primeri creaţi a fost efectuată pe ADN-ul extras din cultura mixtă de G. graminis şi din material vegetal infectat, care a fost furnizată de catedra Fitopatologie, Universitatea Naţională de Viaţă şi Ştiinţă a Mediului din Ucraina. Caracteristicile primerilor sunt următoarele: gg1 – Forward, start/stop 239 p.b. - 258 p.b., lungimea - 20 p.b., GC – 55%; gg2 – Reverse, start/stop 1249 p.b. - 1230 p.b., lungimea – 20 p.b., GC - 60%; gg3 – F, start/stop 362 p.b. - 381 p.b., lungimea – 20 p.b., GC – 55%; gg4 – R, start/stop 952 p.b. - 934 p.b., lungimea – 19 p.b., GC – 58%. Tm pentru toţi primeri este 60°C. În cazul utilizării diferitor combinaţii de primeri specifici cu ADN-ul extras din G. graminis în reacţia PCR au fost sintetizate următoarele fragmente: gg1-gg2 – fragmentul cu lungima 1011 p.b.; gg3-gg4 – fragmentul cu lungimea 591 p.b.; gg1-gg4 – 717 p.b.; gg3-gg2 - 888 p.b. Toate fragmentele obţinute în urma PCR corespund parametrilor calculați cu utilizarea aplicaţiei soft BLAST. Pentru nested-PCR au fost alese următoarele perechi de primeri: runda I - gg1-gg2; runda II – gg3-gg4. Parametrii PCR au inclus: predenaturarea 95° C – 3', urmată de 40 cicluri: denaturarea 95° C – 1', alinierea primerilor 65° C – 1', elongarea 72° C – 1', elongarea finală 72° C – 7'. Parametrii nested-PCR pe ADN extras din cultură de fungi au inclus în I rundă: predenaturarea 95° C – 3', urmată de 20 cicluri: denaturarea 95° C – 1', alinierea primerilor 65° C – 1', elongarea 72° C – 1', elongarea finală 72° C – 7', iar în a II-a rundă 20 cicluri: denaturarea 95° C – 1', alinierea primerilor 65° C – 1', elongarea 72° C – 1', elongarea finală 72° C – 7'. Parametrii nested-PCR pe ADN extras din material vegetal au inclus în I rundă: predenaturarea 95° C – 3', urmată de 30 cicluri: denaturarea 95° C – 1', alinierea primerilor 60° C – 1', elongarea 72° C – 1', elongarea finală 72° C – 7', iar în a II-a rundă 30 cicluri: denaturarea 95° C – 1', alinierea primerilor 60° C – 1', elongarea 72° C – 1', elongarea finală 72° C – 7'. Astfel, datele obţinute au demonstrat, că în rezultatul efectuării PCR şi nested-PCR primerii creaţi pot fi utilizaţi pentru identificarea moleculară a Gaeumannomyces spp. în material vegetal. Analiza BLAST a primerilor creaţi a demonstrat că parametrii lor respectă standardele internaţionale a Comitetului European de Standardizare (ISO 24276:2006(E)). Cercetările au fost realizate în cadrul proiectului comun AŞM-ASŞIIU „Diagnosticul maladiilor rădăcinii grâului” (2017-2018).

15 PARTICULARITĂŢILE MODIFICĂRILOR STRUCTURALE ALE FRUNZEI PLANTELOR DE GRÂU (C3 PLANTE) SUB ACŢIUNEA ACIDULUI ABSCIZIC

Mereniuc Lilia, Balaur N., Voronţov V. Institutul de Genetică, Fiziologie şi Protecţie a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail: [email protected]

Se consideră, că acidul abscizic (ABA) este un fitohormon, sinteza căruia este indusă de factorii stresogeni, de exemplu a unui stres subit (apa sau temperatura). De rând cu modificarea multiplelor reacţii fiziologice, se presupune că ABA poate avea şi un rol de trigger a unor procese, care conduc spre formarea anatomiei Kranţ (caracteristice C4 plantelor), la plantele cu C3 tip de fotosinteză, demonstrând prin aceasta, că reacţia plantelor la tratarea cu ABA nu este datorată închiderii stomatelor (mecanismul de bază a acţiunii ABA), dar că ABA poate iniţia inducerea expresiei genelor, care codifică enzimele aparatului fotosintetic la plantele hidrofile – Eleocharis vivipara (Ueno 1998, Taiyn Chen et al., 2011) şi care, la rândul său, se manifestă pe uscat ca plante cu C4 tip de fotosinteză, iar în apă ca plante cu C3 tip de fotosinteză. În acest context s-a studiat posibilitatea inducerii modificărilor în formarea Kranţ anatomiei la frunza plantelor de grâu (C3 plante) prin tratarea seminţelor soiului Kuialnic (Tr. aestivum L.) cu soluţii de ABA de diferite concentraţii (1,25; 2,5; 5,0; 7,5 µM). Plantulele au fost crescute în condiţii 0 controlate (vase vegetative): umiditatea solului - 60 % - 70% CTAS, temperatura aerului +10-20 C la întuneric şi +27-290C– în perioada de iluminare, fotoperiodicitatea (iluminare - întuneric), fiind respectiv de 16 şi 8 ore. S-au evidenţiat schimbările structurale, care indică faptul, că diferite concentraţii de acid abscizic, pe fondalul diferitor perioade de călire, induc în dezvoltarea sindromului C4 aceleaşi particularităţi: se micşorează distanţa între vasele conducătoare, se majorează volumul celulelor din jurul vasului conducător (celulele de tip Kranţ) şi are loc „încărcarea” acestor celule cu cloroplaste, activând în aşa mod funcţia fotosintetică a celulelor din jurul vasului conducător. Aceste schimbări, induse de acidul abscizic, în frunzele plantelor de grâu (Tr. aestivum L., soiul Kuialnic) sunt analogice schimbărilor filogenetice în traiectoria evoluţiei C4 tipului de fotosinteză, care caracterizează începutul procesului de formare a precondiţiilor de trecere de la C3 tip de fotosinteză la C4 tip de fotosinteză.

16 MOLECULAR GENETIC ANALYSIS THREE TYPES OF CYTOPLASMIC MALE STERILITY IN MAIZE

Prysiazhniuk Larysa1, Otroshko Snizhana1, Honcharov Yu. 2, Melnyk S.1, Tahantsova Maryna1 1Ukrainian Institute for Plant Variety Examination, 2Research Institute of Agrarian Business e-mail: [email protected]

The commercial production of hybrid seed involves the using of cytoplasmic male sterility (CMS). There are several types of CMS associated with different mitochondrial regions and Rf (restorer of fertility) genes. The most common are T-type CMS (Texas), C-type (Charrua), and S- type (USDA). The using of T-type has been reducing since 1970s because it confers susceptibility to Helminthosporium maydis. It is known, that test crossing is the most common method for investigation maize cytoplasm. This approach requires a lot of field work and time. Knowledge about the molecular structures and the mechanisms underlying CMS increased considerably with the development of molecular approaches. The method of polymerase chain reaction (PCR) developed for this purpose is reliable and faster. The aim of our research was to study of the molecular genetic polymorphism of mitochondrial regions associated with CSF in maize of Ukrainian origin. Thirty four inbred lines of maize developed in Ukraine by Research Institute of Agrarian Business were used. Inbred lines were divided into groups according to types of sterility. There were five inbred lines with S-type of cytoplasm, five with C-type and four – probably T-type. Also, five pairs of lines with normal cytoplasm and their sterile analogs of S-type and five pairs of C-type were investigated. All samples of S- and C-types of CMS were taken in the field according to morphological characteristics; the samples of T-type were got from collection of this source. DNA isolation was extracted from 100 mg of leafs and 5-day maize sprouts using CTAB and dissolving DNA in TE buffer. PCR reactions were performed by Liu et al. (2002). To visualize the amplification products, electrophoresis was performed in 2% agarose gel. All five lines of maize of S-type CMS have shown the bands of an expected size 799 bp. The sterility of the inbred lines, which are sterile analogs with S-type of cytoplasm, was confirmed. However, the one line, which was announced as line with normal cytoplasm, proved the sterile one. It is proved with the presence the allele of 799 bp. Considering the fact that leafs were obtained from growing plant, it can be explained that the plants of maize have the anthers, but they were not to be able to disperse the pollen. According to obtained results, the inbred lines, which had a normal cytoplasm, were characterized of presence from two to three alleles. The sizes of these alleles were 632, 855, 1088 and 1145 bp. It should be noticed, that three lines had the same alleles of sizes 632, 855 and 1088, but the one had the alleles of sizes 855 and 1145 bp. In all inbred lines with C-type of CMS the alleles of expected size 398 bp were identified. On the other hand, in lines with normal cytoplasm two alleles were determined: 383 and 424 bp. The similar situation was watched in lines with T-type of CMS. In one inbred line the allele of expected size 440 bp was identify; other three lines shown the presence of alleles of different size – 659 bp. It should be noticed, that this allele was characterized for all lines which proved nonsterile. There is some scientific works which dedicate to research of mitochondrial genes, in particular, chimeric genes C-, S- and T-type cytoplasm. The presence of another sizes alleles, two or three alleles in inbred lines with normal cytoplasm can be connected with specificity of mitochondrial genome organization. On the other hand, these alleles can be presented in the nuclear genome because they were not identified in the lines with sterile cytoplasm. Thus, the explanation of this phenomenon requires more detail investigation. Therefore, PCR based methods provide for breeding with a quick and simple tool for screening cytoplasm when mitochondrial DNA is used as the template. In any case, our results can be useful for identifying not only the major male sterile cytoplasm types, but the fertile genotypes.

17 ИСПОЛЬЗОВАНИЕ БЕЛКОВЫХ МАРКЕРОВ В СЕЛЕКЦИИ НА ЗАСУХОУСТОЙЧИВОСТЬ

Ротарь А.И.*, Комарова Г.Е.**, Ротарь Е.А.*, Боунегру С.В.* *ИР «Порумбень», Порумбень, Республика Молдова **ГАУМ, Кишинэу, Республика Молдова e-mail: [email protected], [email protected]

В настоящее время климатические изменения являются одной из угроз для существования человечества. Непосредственно для нашей страны она выражается в аридизации климата, которая приводит к учащению числа засушливых лет. В связи с этим ИР «Порумбень» был предложен и реализован институциональный проект «Создание алгоритма отбора засухоустойчивых форм кукурузы на основе проведения физиолого-биохимической диагностики в условиях Республики Молдова», главная цель которого создание алгоритма отбора засухоустойчивых генотипов кукурузы и создание на их базе засухоустойчивых гибридов. При разработке и реализации данного проекта широко применялся метод белковых маркеров. Сейчас основное его применение - это определение биологической чистоты семенного материала, однако, во время реализации проекта, были найдены дополнительные резервы данного метода. На начальных этапах алгоритма метод белковых маркеров применяется для опреде- ления биологической чистоты линий, которые будут тестированы на засухоустойчивость. Затем данный метод использовался для получения оптимальных гибридных комбинаций, для чего была проведена паспортизация линий и определен коэффициент межлиниарной дистанции зеиновых зон. Используя этот коэффициент подбираются оптимальные комбинации засухоустойчивых линий. На последнем этапе метод белковых маркеров используется для определения степени гибридности семян полученных гибридов с целью получения объективных данных полевых опытов. Таким образом, использование метода белковых маркеров в «алгоритме создания гибридов кукурузы для богарного семеноводства», являющимся результатом реализации институционального проекта «Создание алгоритма отбора засухоустойчивых форм кукурузы на основе проведения физиолого-биохимической диагностики в условиях Республики Молдова», позволяет получить объективные данные по тестированию линий и гибридов на засухоустойчивость, что, в свою очередь, позволяет объективно оценить тестируемые линии, сократить время создания гибридов и сократить площади экспериментальных участков.

18 IDENTIFICATION OF DNA OF PATHOGENS FROM Fusarium GENUS IN MAIZE PLANTS (Zea mays L.)

Tumanova Lidia, Grajdieru Cristina, Mitin V. Institute de Genetics, Physiology and Plant Protection, Chisinau, Republic of Moldova e-mail: [email protected]

Fungal infestation of maize fields with Fusarium species leads to yield loss and affects grain quality. Main factors that define grain infection rate are species composition of Fusarium microflora, host-plant genotype and grade of it’s resistance. Main interest present Fusarium species that produce mycotoxins, which can be present in unsafe background concentrations in symptomless of affected grain. That is why plant state monitoring and early diagnostic have an important significance for preventing pathogen dissemination. PCR-based assays of molecular diagnostic allow fast and precise phytopathogens identification, including cases of mixed contamination, differentiate species that provoke similar symptoms, minimize the risks of pathogen dissemination during work process. Current paper outlines the results of Fusarium spp. DNA identification on several maize genotypes. Nested-PCR for Fusarium fungi identification was performed using primers designed for amplification of TEF1 gene partial sequence common for species of Fusarium genus and TEF1 gene partial sequence specific for F. oxysporum, F. avenaceum, F. verticillioides. Maize plants of 3 genotypes were analyzed for mixed contamination with Fusarium fungi. Samples of bottom part of the cobs at the silking stage, kernels at the dough stage and stage of physiological maturity were analyzed. For enhancing the efficiency of simultaneous phytopathogen detection parameters of multiplex-PCR were optimized (temperature of alignment, primer mix, number of cycles in the first and second round). Primarily, DNA samples were analyzed for presence of Fusarium spp. In case of positive signal (apparition of specific amplicons corresponding to F. spp.) samples were further analyzed for differentiation of Fusarium species. In the same way simultaneous detection of F. avenaceum, F. oxysporum, F. verticillioides was performed. Molecular analysis demonstrates that propagation of fungi depends on plant genotype and phase of development. Fusarium species were not identified in cobs prior to silk emerging. Mass infestation of plants was ascertained at the dough stage. Analyzed genotypes showed a different grade of infection for certain Fusarium species at the dough stage. Mixed infections of F. oxysporum, F. avenaceum, F. verticillioides were detected in all ‘KY123’ samples and in several samples of ‘RF7’ genotype. Molecular analysis as well showed that ‘MK01’ genotype was infected only with F. oxysporum, but infection rate constituted 30% of ‘KY123’ and ‘RF7’ infection rate (100%). Mixed infection of F. oxysporum, F. avenaceum, F. verticillioides was identified in about all samples of mature kernels of the studied genotypes. Obtained data allows to presume that ‘MK01’ is the most resistant to Fusarium spp. among the three genotypes. Analyzing of cob bottom part at the dough phase can be proposed as reliable method for corn genotype resistance estimation to Fusarium species. Outlined approach can be used for corn varieties and commercial hybrids’ screening based on their susceptibility to Fusarium fungi.

19 ПРИМЕНЕНИЕ БИО- и ДНК-ТЕХНОЛОГИЙ В ННЦ «ИВиВ им. В.Е. Таирова»

Власов В., Мулюкина Нина, Зеленянская Наталия, Герецкий Р. Национальный научный центр «Институт виноградарства и виноделия им. В.Е. Таирова»,Одесса,Украина e-mail: [email protected]

Молекулярно-генетические и биотехнологические исследования в области виноградарства в настоящее время включают изучение в качестве объекта как непосредственно вида Vitis vinifera, так и ряда его патогенов. Исследования последних трех лет, проводимые в ННЦ «ИВиВ им. В.Е. Таирова», были сосредоточены на основных трех направлениях. На первом из них совместно с доктором Алешем Эйхмейером (Менделевский университет, Брно, Чехия) при помощи ПЦР и секвенирования ДНК впервые в Украине была проведена диагностика грибных патогенов, ассоциированых с эской винограда. Для амплификации ITS области использовали праймеры ITS1 и ITS4. Продукты ПЦР, соответствующие размеру около 550 bp, секвенировали и полученные нуклеотидные последовательности анализировали с помощью CLC Main Workbench 5.0 (CLC bio, Aarhus, Denmark). Определение видового состава потенциальных возбудителей комплекса эски показало присутствие видов, связанных с болезнями многолетней древесины винограда. При этом было выявлено 3 изолята вида Cadophora luteo-olivacea, которая относится к специфическим патогенам комплекса эски. Образцы, пораженные эской, показали также присутствие вида Eutypa lata (возбудитель отмирания винограда - эутипоза - еutipa dieback) и Botryosphaeria dothidea (возбудитель отмирания - botrioshaeria dieback). При этом ни в одном из образцов не были обнаружены типичные для европейских виноградарских стран виды, ассоциированные с эской - Phaeomoniella chlamydospora, Phaeoacremonium aleophilum, Fomitiporia mediterranea. Второе направление связано с поиском биохимических маркеров устойчивости к эске и другим грибным болезням многолетней древесины винограда, перспективных для использования в селекции сортов, устойчивых к этим болезням. На примере сортов винограда селекции ННЦ «ИВиВ им. В.Е. Таирова» было показано, что наличие в геноме технических сортов винограда генетического материала Vitis amurensis и Vitis rupestris увеличивает содержание общих полифенолов в сусле. Продемонстрировано, что разная степень поражения эской коррелирует с уровнями содержания ряда групп полифенолов винограда, в частности, меньшее проявление симптомов соответствует большему количеству полифенольных соединений из групп флавонолов, флаванонов, флавонов, антоцианов и большему суммарному содержанию полифенолов. Анализ отдельных соединений показал, что здоровые (бессимптомные) кусты характеризуются большим содержанием хлорогеновой кислоты, в то время как в кустах с симптомами эски повышено содержание кверцетина, нарингенина и лютеолина. Выявленные зависимости могут стать основой для разработки метода ранней диагностики устойчивости винограда к грибным болезням в процессе селекции. Третье направление исследований представлено разработкой методов ускоренного скрининга подвойных сортов винограда при помощи разработанных в отделе размножения питательных сред для оценки на соле- и засухоустойчивость в культуре in vitro.

20 ESTIMATION OF PHYTOPLASMOSIS AND PRODUCTIVITY IN SOME MOLDAVIAN TOMATO VARIETIES

Zamorzaeva Irina, Bahsiev Aighiuni, Mihnea Nadejda Institute of Genetics, Physiology and Plant Protection, Chisinau, Republic of Moldova e-mail: [email protected]

Phytoplasmosis is a widespread disease of tomato in Moldova. Its distribution in tomato fields is controlled by the climatic conditions of the year, being more or less abundant in different growing seasons. However, this disease is presented in Moldavian tomato varieties every year and has a negative effect on the productivity and quality of fruits. It is known that ‘Candidatus Phytoplasma solani’ causes the phytoplasmosis in tomatoes in the experimental lots of IGPPP. The degree of damage, as well as the percentage of infected plants, vary from one variety to another. The aim of this study was to detect the spread of ‘Ca. P. solani’ in the Moldavian tomato varieties Elvira, Cerasus, Desteptarea and Mary Gratefully and to evaluate their productivity and fruits quality during the growing season of 2018. The phytoplasma presence was identified using nested-PCR analysis at DNA isolated from individual plants (10-20 plants in each variety) from the period of mass fruit ripening (August) to the end of the season of vegetation (September). Productivity (t/ha) and the percentage of marketable fruits were registered. A statistical processing of the data obtained by molecular methods and quantitative measurements were carried out. The most significant difference in the percentage of infected tomato plants between studied varieties was recorded at the stage of mass fruit ripening. The varieties Elvira and Desteptarea were found to be more susceptible to ‘Ca. P. solani’ (85% and 80% of infected plants, respectively) compared with Cerasus (35% of infected plants) and Mary Gratefully (50% of infected plants). The difference at the end of the period of vegetation was less pronounced: 80-85% of plants were infected with phytoplasma in varieties Elvira, Desteptarea and Mary Gratefully; about half of the plants (55%) were infected in Cerasus. The variability of the traits of productivity and fruits quality in studied tomato varieties was established in conditions of 2018. In general, varieties that were more resistant to phytoplasma infection, respectively, had a higher yield. Productivity is, firstly, a characteristic of the genotype; secondly, it is influenced by the climatic conditions of the year (changes in temperature, humidity, number of sunny or cloudy days during the growing season, etc.). Diseases of tomato plants other than phytoplasmosis can also affect the productivity and fruit quality. On the other hand, it is known that ‘Ca. P. solani’ infection negatively influences on productivity and, especially, reduces the quality of tomato fruits. The correlation between the degree of phytoplasma infection in a variety in August and the yield of marketable fruits was perceptible. Namely, the percentage of marketable fruits in varieties Cerasus and Mary Gratefully that were more resistant to phytoplasma was above 80%. This character in more susceptible to phytoplasma variety Desteptarea consisted of 75%; most susceptible to phytoplasma infection variety Elvira manifested worst index of the yield of marketable fruits, it was less than 70%. The correlation between the degree of the phytoplasma presence in tomato field in September, at the end of the growing season, and the yield of marketable fruits in the variety was not significantly pronounced. This fact is not surprising because infection of tomato at the later stages of plants development, after a period of mass fruit ripening, does not affect the quantity and quality of fruits. Tomato harvest mainly takes place in August. Significant spread of ‘Ca. P. solani’ in a tomato field in September is not important in terms of productivity of varieties and the yield of marketable fruits. This indicator can be useful for the assessing the degree of resistance of tomato varieties to ‘Ca. P. solani’.

21 Sectiunea II. DISTINCTIVITATEA PLANTELOR DUBLU-HAPLOIDE DE ORZ DE PRIMĂVARĂ FAȚĂ DE FORMA INIȚIALĂ

Andronic Larisa, Smerea Svetlana, Schin Victoria, Mărîi Liliana, Racu V. Institutul de Genetică, Fiziologie și Protecție a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail:[email protected]

Embriogeneza polinică este o cale de perspectivă în ameliorarea și crearea liniilor pure la cereale, dar reușita acestei tehnici este influențată în primul rând de factorii genetici, care determină frecvența formării embrionilor/calusurilor, regenerarea plantelor și obținerea liniilor haploide și dublu-haploide. Plantele dublu-haploide dețin importanță majoră pentru ameliorare, prezentând homozigoție, precum și în calitate de obiect pentru studiile de genetică a caracterelor în special cantitative. În lucrarea de față ne-am propus drept scop evaluarea expresiei caracterelor cantitative la plantele de orz de primăvară a s. Unirea obținute pe cale androgenă. În scopul aprecierii distinctivității descendenților plantelor dublu-haploide de orz a s. Unirea față de forma inițială au fost evaluați 11 parametri cantitativi și analizată varianța caracterelor valoroase. Studiile au fost realizate în a.2018 (populația descendenței III), iar în cercetare au fost analizate linii din selectări individuale rezultate din autopolenizări. În baza estimărilor biometrice s-au constatat diferențe semnificative ale valorilor medii pentru 8 caractere în diferite intervale de confidență: numărul de frați total și fertili/plantă (99,9%), talia plantei (99,9%), numărul de internoduri (95%), lungimea spicului principal (95%), numărul de spiculețe în spicul principal (95%), numărul de boabe dezvoltate în spicul principal (95%), și greutatea medie a boabelor la frați (95%). La populația plantelor dublu-haploide de orz de primăvară au fost notificate devieri semnificative, în direcția micșorării valorilor fată de forma inițială pentru talia plantei și numărul de internoduri, fapt care din punct de vedere ameliorativ este considerat rezultat pozitiv. S-a stabilit că, amplasarea compactizată a spiculețelor spicului principal la dublu- haploizi s-a înregistrat și în generația a III-a și s-a soldat cu o majorare ușoară, dar semnificativă a numărului de spiculețe în spicul principal, în pofida reducerii lungimii spicului principal de 1,03 ori, pentru un suport statistic P≤0,05. Tendințele de modificare a gradului de expresie a unor caractere cantitative și calitative au fost similare comparativ cu cele atestate în populația generației a II-a a dublu-haploizilor (anul evaluării 2017). Clusterizarea descendenților dublu-haploizilor de orz după caractere agronomic valoroase a permis evidențierea unor linii care îmbină caractere cantitative și calitative distinctive comparativ cu forma inițială. În populația plantelor de orz dublu-hapliode au fost selectate linii deosebite după talia plantelor, numărul de internoduri și lungimea ultimului internod, fiind notificată apariția exemplarelor cu o înălțime diminuată a plantelor (atât cu 5, cât și cu 6 internoduri). Analizând interrelațiile dintre unele caractere cantitative la orzul de primăvară, în varianta martor (forma ințială), caracterele numărul de frați total și fertili se află în aceiași grupă de conexiuni, însă la descendenții dublu-haploizi, un moment important este aflarea în aceiași grupă de interrelații a 3 caractere (lungimea ultimului internod, număr de boabe dezvoltate și număr de spiculețe în spicul principal), ceea ce indică utilitatea caracterelor valoroase pentru ameliorarea plantelor de orz. Heritabilitatea în sens larg este exprimată prin raportul dintre varianța genetică și fenotipică, iar corelarea asociativă directă dintre heritabilitate și răspunsul la selecție este definită ca contribuția genetică. Heritabilitatea înaltă suplinită de un indice sporit al contribuției genetice (>20%) indică asupra efectelor aditive în controlul genetic al caracterelor și oferă înalte garanții lucrărilor de selecție. Studiul realizat pe populația plantelor de orz dublu-hapliode în baza heritatbilității (H2) și a contribuției genetice (CG) au scos în evidență valori majore pentru numărul total de frați (H2=0,964, CG=33,29%), frați fertili per plantă (H2=0,977, CG=61,22%) și greutatea medie a boabelor fraților fertili (H2=0,939, CG=45,25%), ceea ce denotă moștenirea lor asociată și eficiența androgenezei în inducerea de genotipuri cu potențial superior.

22 THE EFFECT OF THE POLYSACCHARIDE FRACTION FROM Hericium erinaceus ON POTATO IN VITRO AND EX VITRO

Bakulina Anna, Nazarova Yanina, Shirokikh Irina, Shirokikh Al. Federal Agricultural Research Center of the North-East named N.V. Rudnitsky, Russia e-mail: [email protected]

Culture of plant cells and tissues is the basis of traditional (clonal micropropagation, cell selection, etc.) and modern (genetic engineering, genome editing) methods of agrobiotechnology. When cultivated in vitro, plant cells are under stress, and the actual problem of plant biotechnology is still the search for substances that have a positive effect on plant cells and tissues, which contribute to reducing stress, as well as increase the regeneration of plants from explants. Among the variety of substances that have physiological activity against cells of living organisms, polysaccharides of basidial fungi are of interest, which are now widely used in medicine, but their effect on plant tissues has not been previously studied. The aim of this work was to study the effect of the polysaccharide fraction (PF) of fruiting bodies of basidiomycetous mushroom Hericium erinaceus on the morphological, biochemical characteristics and productivity of potato during its cultivation in vitro and ex vitro. The object of the study was H. erinaceus BP19 PF №4, isolated by extraction with water at 70°C (Nazarova et al., 2018) from dry fruit bodies obtained by cultivation of the fungus in the laboratory of biotechnology of plants and microorganisms FARC North-East. Identification of the natural isolate BP19 was carried out by sequencing of ITS1-5.8S-ITS2 region (GenBank Accession number MK809367). We used potato variety of Pransa. In vitro meristem plants were grown on Murashige-Skoog medium without hormones. In passage to fresh medium nodal cuttings dipped in a solution of PF (0.5 mg/ml) in control PF not used. Experimental and control plants were cultivated for 7 weeks then transferred to ex vitro. Treatment of potatoes with PF from H. erinaceus BP19 virtually no influence on morphometric parameters microplants, causing a slight (7.0 and 9.0%) compared to the control elongation of the stem 20 and 30 days of cultivation. At the same time, the study of biochemical parameters of potatoes in vitro exposed to PF revealed a decrease in the level of lipid peroxidation in treated PF plants relative to the control (MDA content of 14.7±1.33 and 18.8±1.58 nmol g-1 dry wt., respectively). The evaluation of this parameter in ex vitro plants show that after 4 weeks of growing in the soil, peroxide homeostasis of plants exposed to PF treatment did not differ from that in the control, but significantly decreased after 5 and 6 weeks of growing: the MDA content in leaf tissues in experimental plants was 8.1±0.64 and 9.3±0.30 nmol g-1 dry wt., and in control plants – 9.7±0.80 and 10.2±0.55 nmol g-1 dry wt. In addition, differences in potato productivity were revealed. Plants treated with PF were characterized by an increase in the number of minitubers per plant (3,6±0,20) in comparison with the control (2.0±0.67), as well as an increase in their size: the fraction ≥40 mm increased to 28%, while in the control was only 22%. It was revealed a significant increase in the average yield per plant as a result of PF treatment (48.6±9.06 g) in comparison with the control (25.0±1.37 g). Thus, on the example of potatoes it was found that PF from H. erinaceus BP19 has a positive effect on plant tissue. According to the biochemical assessment, the treated PF plants were less stressed than the control plants in vitro and ex vitro, and the potato productivity under the influence of PF increased 1.9 times. The data obtained indicate the need for further study of the effect of PF from H. erinaceus on plants, it is planned to assess the activity of PF on the callus culture of monocotyledons, for which the search for substances - inducers of morphogenesis is particularly relevant.

23 MICROMORPHOLOGY STUDIES OF ENDANGERED FERN SPECIES Marsilea quadrifolia

Banciu C., Maria Gabriel-Mihai, Mihnea Vladimirescu, Paica Ioana, Catană Rodica, Manole Anca Institute of Biology Bucharest of Romanian Academy, Romania e-mail: [email protected]

The Marsilea genus comprises almonst 45 species spread around the globe, mostly in wetlands with slow flowing waters. Marsilea quadrifolia is a protected fern species according to Habitat Directive Annex II and Bern Convention and vulnerable according to the Red List of Vascular Plants of Romania (Olteanu et al. 1994). It has, according to previous studies, pharmacological properties against alzheimer disease (Aswini et al. 2012) and the crude extract has antimicrobial, cytotoxic and antioxydant activity (Farhana et. al 2009). In Romania, M. quadrifolia is spread in multiple locations in the southern and western parts of the country, from Tulcea and Buzau counties to Giurgiu, Dolj, Arad and Satu Mare counties (Strat, 2012), mostly in protected areas. Previous researches have been performed concerning ex situ conservation of rhizome phragments by in vitro cultures (Banciu et. al 2007) and the stability of the regenerants using histological (Banciu and Paunescu, 2011) and molecular markers (Banciu et. al. 2013). The present study concerns revealing the structural particularities of the sporocarp from adult plants of M. quadrifolia. Our researches had the purpose of establishing new taxonomic characteristics of samples of M. quadrifolia, based on rezistance forms (sporocarps) that is the only part of the plant found in the cold season. Using the standard methodology for SEM, several images of entire and sectioned sporocarps and spores have been analyzed and described. Specific ornamentations and structures of the sporocarps have been described, that may be used as taxonomical markers in lack of other plant organs available.

Bibliography 1. Ashwini .G, Pranay. P, Thrinath.G, Karnaker Reddy. T, Giri Prasad. V. S “Pharmacological evolution of Marsilea qudrifolia plant extracts against Alzheimer’s disease”, Int. J. Drug Dev. & Res., April-June 2012, 4(2): 153-158 2. Banciu C. Păunescu A., 2011, Studii privind constanța unor caractere fenotipice morfo-anatomice la plante regenerate in vitro de Marsilea quadrifolia L., în vol. Structura și funcționalitatea sistemelor biologice-diversitate și universalitate, editura Print CARO SRL, Chișinău, 61-64. 3. Banciu C., Brezeanu A., Paucă-Comănecu M., 2007, The in vitro morphogenetic potential of Marsilea quadrifolia species, Acta Horti Botanici Bucurestiensis, vol. 34, Ed.Universității București, 5-12. 4. Banciu C., Mitoi M., Helepciuc F.E., Manole-Aiftimie A., 2013, Molecular analysis on intrapopulational variability of Marsilea quadrifolia L., Bul. Acad. de Ştiinţe a Moldovei, Ştiinţele vieţii, 3(321): 79-83 5. Farhana Alam Ripa, Laizuman Nahar, Mahmuda Haque, Monirul Islam, Antibacterial, Cytotoxic and Antioxidant Activity of Crude Extract of Marsilea quadrifolia, European Journal of Scientific Research, Vol.33 No.1 (2009), pp.123-129 6. Oltean M., Negrean G., Popescu A., Dihoru G., Sanda V., Mihăilescu S., 1994. Lista Roșie a plantelor superioare din România. Stud. Sint. Doc. Ecol., Acad. Rom., I Biol., 1: 1-52 7. Strat Daniela, Marsilea quadrifolia L. in the protected wetlands from Romania, Water resources and wetlands, Editors: Petre Gâştescu, William Lewis Jr., Petre Breţcan, Conference Proceedings, 14-16 September 2012, Tulcea – Romania, pp. 449-457.

24 INFLUENŢA EXTRACTELOR BIOACTIVE DIN SPIRULINĂ ASUPRA CONSERVĂRII MICROORGANISMELOR

Batîr Ludmila, Slanina Valerina Institutul de Microbiologie şi Biotehnologie, Chișinău, Republica Moldova e-mail:[email protected]

Tulpinile de microorganisme, utilizate în biotehnologie prezintă valoare economică şi comercială, iar problema menţinerii cât mai îndelungate a proprietăţilor biosintetice a microorganismelor şi celor economic valoroase este permanent în atenţia savanţilor. Păstrarea microorganismelor şi proprietăţilor acestora necesită utilizarea metodelor eficiente de conservare şi monitorizare permanentă a eficacităţii acestor metode. Metodele de conservare şi depozitare a microorganismelor sunt importante pentru orice investigaţie microbiologică, însă cel mai important rol în procesul de liofilizare a microorganismelor este selectarea mediului optimal de protecţie (conservantului). Astfel, pentru noi a prezentat interes studiul acţiunii conservanţilor naturali extraşi din biomasa cianobacteriei Spirulina platensis în calitate de agenţi de protecţie a microorganismelor din colecţie în vederea menţinerii cît mai îndelungate a proprietăţilor culturale caracteristice, deoarece, cu utilizarea mediilor standard de menţinere a microorganismelor are loc pierderea în timp a capacităţii şi activităţii caracteristice acestora. Utilizarea în acest sens a complexelor policomponente extrase din biomasa de spirulină ce posedă activitate antioxidantă şi antiradicalică înaltă prezintă interes datorită substanţelor bioactive pe care le conţine spirulina, recunoscute ca conservanţi naturali. În baza biomasei cianobacteriei Spirulina platensis au fost obţinute 5 extracte bioactive cu activitatea antioxidantă şi antiradicalică sporită utilizate în calitate de agenți protectori în procesul de liofilizare a unor tulpini de bacterii din CNMN de interes biotehnologic. Rezultatele obţinute au permis de a stabili că acţiune benefică de stimulare posedă majoritatea extractelor bioactive atât până, cât şi după liofilizare. Astfel, în urma cercetărilor efectuate, asupra determinării viabilităţii tulpinilor de bacterii din g. Pseudomonas până şi după liofilizare, cu şi fără utilizarea extractelor bioactive obţinute din biomasa de spirulină, am stabilit că toate extractele au efect pozitiv, cu excepţia extractelor etanolice, care după liofilizare duc la scăderea viabilităţii cu până la 7,6 – 9,3%, în dependenţă de tulpina studiată. Cel mai eficient extract în protejarea culturilor date s-a dovedit a fi cel glucidic care menţine valorile viabilităţii majorate atât până la liofilizare cât şi după acest proces, sporul fiind de cca 9,0%. Un alt grup de bacterii testate, de interes biotehnologic, au fost cele din g. Bacillus. Datele obţinute asupra cultivării tulpinii Bacillus subtilis CNMN-BB-01 în prezenţa extractelor bioactive, până la liofilizare au permis de a conchide şi în acest caz că toate preparatele policomponente posedă efect pozitiv, extractele etanolice variind în limita martorului celelalte tinzând spre o creştere neesenţială în dependenţă de concentraţia utilizată în studiu. Spre deosebire de tulpina Bacillus subtilis CNMN-BB-01, tulpina Bacillus cereus var. fluorescens CNMN-BB-07 a reacţionat diferit la prezenţa în mediu a extractelor bioactive. Astfel, viabilitatea acesteia până la liofilizare cu utilizarea extractelor etanolice a tins spre o scădere neesenţială cu până la 4,9%, faţă de proba martor. Extractele proteo-glucidic (5%) şi glucidic (de 5 şi 10%) au avut efect stimulator asupra viabilităţii valorile date crescând cu până la 5,5%. Rezultatele obţinute după liofilizare au demonstrat că extractul proteic de 5% a avut cel mai bun efect ce a dus la sporirea viabilităţii cu până la 7,7%, faţă de control. În final putem conchide că extractele biologic active extrase din biomasa cianobacteriei Spirulina platensis CNMN-CB-11 pot fi utilizate în calitate de protectori ai tulpinilor de bacterii însă activitatea lor depinde de concentraţia utilizată şi tulpina testată.

25 EFECTUL NANOPARTICULELOR ZnO ASUPRA CONȚINUTULUI DE PIGMENȚI CAROTENOIZI LA TULPINA DE LEVURI Rhodotorula gracilis CNMN-Y-30

Beșliu Alina, Usatîi Agafia, Efremova Nadejda Institutul de Microbiologie și Biotehnologie, Chișinău, Republica Moldova e-mail: [email protected]

În ultimele decenii microorganismele sunt folosite pe larg de comunitatea științifică pentru studierea biodiversității și ca obiecte biotehnologice de valoare. Obținerea preparatelor microbiologice reprezintă un domeniu actual care necesită noi surse de materie primă pentru elaborarea produselor alimentare biologic active, medicamentoase, cosmetologice, profilactice și farmaceutice. În calitate de surse cu potențial înalt sunt studiate levurile pigmentate din genul Rhodosporidium, care au capacitatea de a sintetiza importante substanțe bioactive și în special pigmenți carotenoizi. Carotenoizii sunt un grup omnipresent de pigmenți izoprenoizi, formați din 40 atomi de carbon derivați prin biosinteza a două generații de geranil-transferaza pirofosfat, structura ciclică a atomilor de carbon le oferă proprietăți antioxidante înalte care protejează membrana, captând radicalii O2 și peroxil (Porter și colab., 1981). Mai mult, unele carotenoide sunt precursori ai vitaminei A, în ceea ce privește sănătatea umană, au fost creditate pentru reducerea bolilor precum cancerul, bolile cardiovasculare, degenerescența maculară și cataracta (Oguz, 2017). De asemenea, carotenoizii dețin un rol important pentru utilizarea ca coloranți naturali în industria alimentară (Ibrahim și colab., 2015). Nu mai puțin actuală însă este selectarea factorilor care ar putea exercita efect stimulator asupra biosintezei carotenoizilor. În ultimii ani o atenție deosebită se oferă cercetărilor utilizării nanoparticulelor oxizilor metalici, în special oxidului de zinc (ZnO) în procesul de cultivare a microorganismelor. Conform datelor din literatura de specialitate nanoparticulele pot exercita efecte stimulatorii dar și inhibitorii asupra microrganismelor, care însă depind de compoziția chimică, dimensiunea, concentrația, tipul și forma nanoparticulelor (Johnson et. al., 2015; Cheng et. al., 2017). În această lucrare sunt prezentate rezultatele influenței nanoparticulelor ZnO cu dimensiunea de <50 nm și <100 nm în concentrații de la 0.5 mg/L la 10 mg/L asupra conținutului de pigmenți carotenoizi intracelulari β – caroten, torulina și torularodina la tulpina de levuri pigmentate Rhodosporidium toruloides CNMN-Y-30. Cantitatea de pigmenți carotenoizi din biomasa levuriană s-a determinat spectrofotometric la lungimile de undă: beta-carotenul 453 nm, torulina 480 nm, torularodină 507 nm (Tamaș și colab., 1986; Fregova și colab., 1994). Experiențele efectuate au demonstrat că conținutul de pigmenți carotenoizi ai tulpinii de interes biotehnologic, la cultivare pe mediul YPD în prezența nanoparticulelor ZnO se modifică în funcție de dimensiune și concentrațiile utilizate. Cercetările au pus în evidență efect pozitiv al procesului de biosinteză al pigmenților carotenoizi în variantele în care s-au aplicat nanoparticule ZnO (<50 nm) în concentrațiile de la 5 mg/L până la 10 mg/L. Cantitatea de pigmenți acumulați în biomasa levuriană crește cu până la 29%, față de proba control. Analiza efectului nanoparticulelor ZnO (<50 nm) asupra conținutului de β-caroten la aplicarea concentrațiilor de 5.0-10 mg/L, demonstrează o creștere de 12- 39%. Un răspuns similar a fost obținut pentru ceilalți doi pigmenți analizați torulina și torularodina cantitatea cărora crește cu 10-38% și respectiv 6-36%, comparativ cu proba martor. Analizând rezultatele obținute putem deduce, că pentru stimularea procesului de biosinteză a pigmenților carotenoizi concentrația eficientă a nanoparticulelor ZnO (<50 nm) este de 10 mg/L. În cazul monitorizării valorilor cantitative a pigmenților carotenoizi sub influența nanoparticulelor ZnO (<100 nm) s-a constatat efect pozitiv asupra biosintezei pigmenților carotenoizi la aplicarea concentrației 10 mg/L care induc o creștere moderată cu 10%, comparativ cu varianta control. Generalizând rezultatele obţinute în acest studiu putem menţiona, că nanoparticule ZnO (<50 nm) în concentrații de 10 mg/L prezintă un factor preferențial de aplicare în tehnologia de cultivare a levurii Rhodosporidium toruloides CNMN-Y-30, din punct de vedere al sporirii cantităţii de pigmenți carotenoizi.

26 BIOTEHNOLOGII FARMACEUTICE MODERNE IN VITRO APLICATE ÎN MEDICINĂ

Calalb Tatiana Universitatea de Stat de Medicină și Farmacie ”Nicolae Testemițanu”, Chișinău, Republica Moldova e-mail: [email protected] Astăzi suntem martorii și beneficiarii aplicării în producere a rezultatelor cercetărilor fundamentale și experimentale biotehnologice in vitro în diverse laboratoare științifice ale lumii, care au evoluat într-un nou domeniu – bioindustrie aplicată. Biotehnologiile in vitro, asociate cu progresele cercetărilor moderne, în secolul XXI au devenit adevărate bioindustrii, fiind parte componentă a economiei multor țări avansate. Conform datelor statistice, domeniile de aplicare a biotehnologiilor in vitro sunt: sănătate (farmacie, medicină, cosmetică) – 51%, nutriție umană și animalieră – 14%, agricultură – 12%, ecologie și energie câte – 6%, alte domenii – 11%. Companii biotehnologice pe glob cu linii industriale active în anul 2010 erau cca 5000 cu următoarea distribuție: în Europa – 2185, America – 1880, Asia – 750, Australia – 185. Majoritatea companiilor biotehnologice investesc în cercetări biotehnologice fundamentale și aplicative mai mult de jumatate din venitul obținut. Renumite companii biofarmaceutice in vitro în SUA sunt: Amgen (cea mai mare după numarul colaboratorilor, veniturilor și liniilor de producere cu spectru larg de produse biotehnologice), Genentech, Genzyme și Biogen. Veniturile și bioprodusele la 2 grupuri biotehnologice (San Diego-La Jolla și Bay Area) din California constituie a parta parte a celor din SUA. Cele mai renumite companii biotehnologice în Europa sunt: Seronto (Elveția) – recunoscută în producerea hormonilor, enzimelor, anticorpilor pentru domeniu endocrinologic, imunologic și soluționarea problemelor infertilității; filiala Seronto din Spania – producator global al hormonului de creștere; Oryzont Genomics din Barselona – medicamente pentru Parkinson și Alzheimer; Biotech GPS (Germania) – lider biotehnologic în Europa cu 400 filiale; Celltech (Marea Britanie) – produce 40% din produsele biotehnologice pentru medicină; Sang Stat, Drug Abuse Science și Eurofins (Franța) lucrează cca 40 ani cu mai mult de 300 de filiale în domeniul medicinei, cosmeticii și alimentației. Companii biotehnologice nipone cu aplicare în medicină: Fujitsu's Biotechnology Division (cercetări ale genelor implicate în cancer, procese inflamatorii, hipertensiune), Japan Bioindustry Association (JBA) – dislocată în 3 regiuni biotehnologice (Kanto, include și Tokyo – a 3 parte din tot venitul national, Kinki/Kansai și Hokkaido) produc biofarmaceutice pentru diagnostic (94), biofarmaceutice ca proteine, secvente de AND etc. (78) bioinformatice (41) și consumabile (38). Proiectul Millenium lansat în Japonia (anul 2000) cu 3 direcții de cercetare (Genetica orezului; Genetica umană și medicina regenerativă; Inițierea centrului de analiză a infromației obținute în cercetarea biologică și elaborarea liniilor de producere industrială) a avut obiectivele: studiul genelor pentru tratarea cancerului, demenței, diabetului și hipertensiunii; producerea secvențelor de ADN, producerea biopreparatelor prin microorganisme cu genomul ameliorat. În Australia companiile biotehnologice: Arch Oncology – producătoare de biomedicale și Ernst&Young – cu 67% din biotehnologiile in vitro a regiunii Asia-Pacific. În farmacie apare o generație nouă de medicamente, produse via in vitro în baza E.coli cu genomul modificat genetic sau recombinant. Astfel, apare insulina umană via in vitro sub diferite denumiri comerciale la nivel global: Lantus, produs de Novo Nordisk (Danemarca) și – Bioton (Polonia); Humulong – Sanofi (Franța) și Wockhardt (India); Januvia – Eli Lily (SUA). Prima producție industrială in vitro a hormonului creșterii somatotropina a fost în 1979, firma Genentech (California), iar astăzi 59% produce SUA, 23% – Europa, 10% – Asia. Hormonul eritropoietina a fost produs I dată de Epogen (SUA) în anul 1989. Interferonul gama uman in vitro a fost lansat în anul 1982 de firma CellGenix (Germania). Deceniile secolului XXI au fost marcate prin generația nouă de medicamente în terapia cancerului: Nartograstim (Sanofi, Franța), Leucentis (Novartis, Suedia), Neulasta (Eli Lily, SUA), Endostatin (Amgen, SUA). Astăzi biotehnologiile moderne in vitro reprezintă o parte componentă în obținerea produselor inovatoare, eficiente, rentabile și cu noi însușiri, iar, în viitorul apropiat vor constitui componentul de bază al industriilor farmaceutice, alimentare şi cosmetice.

27 STUDIUL ACȚIUNII DE SCURTĂ DURATĂ A TEMPERATURILOR JOASE POZITIVE ASUPRA ACUMULĂRII BIOMASEI ȘI H2O2 ÎN CULTURA IN VITRO DE Rhodiola rosea L.

Călugăru-Spătaru Tatiana, Cauș Maria Institutul de Genetică, Fiziologie şi Protecție a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail: [email protected]

Unul dintre principalii factori care determină posibilitatea existenţei plantelor într-un anumit habitat este temperatura. Schimbările de temperatură provoacă modificări ale proceselor metabolice din celula vegetală, iar condiţiile ce provoacă stresul pronunțat pot duce la deteriorarea sau chiar moartea plantelor. În dependență de specia plantelor, intervalul de temperaturi favorabile pentru creştere şi dezvoltare este cuprins între 10 şi 35oC. Temperaturile mai înalte de 35oC şi mai joase de 10oC sunt considerate temperaturile pragului critic de tranziție de la condițiile favorabile la condițiile nefavorabile. Mulţi cercetători au examinat efectul acţiunii temperaturilor joase asupra creșterii diferitor specii de plante atât în cultura in vivo, cât şi în cultura in vitro. Se ştie că habitatele naturale ale plantelor de R. rosea L. constituie zonele cu condiţii climaterice dure şi accidentale, în care plantele sunt expuse diferitor condiţii de stres, inclusiv altitudini înalte, temperaturi extreme, radiații ultraviolete intense etc. Modificările celulare induse de către oricare dintre temperaturile extreme (ridicate sau joase), includ acumularea în exces a compuşilor toxici, în special a speciilor reactive de oxigen (SRO), inclusiv a peroxidului de hidrogen (H2O2). Scopul cercetărilor noastre a constituit în studierea influenţei temperaturilor joase pozitive de o o +4 C, +8 C pe parcursul a 3 şi 6 ore asupra acumulării biomasei şi a conținutului de H2O2 în celulele calusului de R. rosea. Rezultatele aprecierii influenţei temperaturilor de +4oC şi +8oC pe parcursul a 3 şi 6 ore asupra acumulării biomasei calusului de R. rosea, aplicate în ziua a 20-a de cultivare, au demonstrat că calusul de R. rosea este bine adaptat la condiţiile de cultivare in vitro. Aceasta a relevat indicele de creştere, care în varianta calusului expus la temperatura de +4oC, pe parcursul a 3 ore a fost de 1,56 ori mai mare în comparaţie cu cel a calusului din varianta martor. Menționăm, că indicele de creştere al culturilor celulare şi ţesuturilor cultivate in vitro este unul din factorii limitativi pentru implementarea în practică a acestora. Rezultatele obţinute sugerează, că în cazul dat calusul de R. rosea manifestă caracteristici de adaptare pentru supravieţuire, care ar putea fi evaluate ca un sistem de cultură model pentru speciile de aceeași natură. Aceste rezultate, în opinia noastră, sunt de interes practic în legătură cu problema sporirii creşterii biomasei atât a culturilor celulare, cât şi a ţesuturilor producătoare de principii active. A fost demonstrat, că cea mai mare cantitate de H2O2 a fost determinată în varianta calusului tratat cu temperatura de +4oC pe parcursul a 3 şi, respectiv, 6 ore, comparativ cu calusul din varianta martor. Cantitatea de H2O2 înregistrată în variantele experimentale a crescut cu 92% şi, respectiv, 52% faţă de martor. De remarcat, că conţinutul relativ al H2O2 în celulele calusului de R. rosea a fost la un nivel mai înalt în variantele cu acumulare mai intensivă a biomasei calusului. E cunoscut faptul, că ciclurile metabolice se activează în celulele cu proliferare activă ce duce la mărirea conţinutului de H2O2. Datele obţinute demonstrează, că conţinutul H2O2 în biomasa calusului este cu atât mai mare, cu cât acumularea biomasei este mai înaltă. De aici rezultă, că conţinutul H2O2 în cultura calusului de R. rosea poate fi un indice al activităţii proceselor proliferative ale celulelor. În aşa fel, putem conclude că şocul cu temperaturi joase pozitive activează procesele de proliferare ale celulelor, deci manifestă tendința de rejuvenilizare a celulelor calusului de R. rosea.

28 PROCEDEU DE OBŢINERE A PREPARATULUI DIN SPIRULINĂ CU PROPRIETĂŢI ANTIRADICALICE PERFORMANTE

Carauș Vl., Rudic V. Institutul de Microbiologie și Biotehnologie, Chișinău, Republica Moldova e-mail: [email protected]

În ultimii 10-20 ani a crescut interesul cercetătorilor faţă de substanțele cu proprietăți antiradicalice de origine vegetală, obținute din plante, fructe, seminţe. Antioxidanţii naturali se găsesc nu doar în sursele terestre, ci şi în organisme acvatice, bogate în asemenea substanţe. Microalgele şi cianobacteriile sunt deja recunoscute ca surse de substanţe cu efect antiradicalic şi antioxidativ. În 1988 s-a propus utilizarea beta-carotenului extras din Dunaliella în calitate de supliment în alimentaţia copiilor supuşi radiaţiei la Cernobîl. Tot în acea perioadă savanţii bieloruşi propun în alimentaţia copiilor afectaţi de impactul de la Cernobâl Spirulina în calitate de remediu antiradicalic. În cadrul cercetărilor fundamentale au fost efectuate diferite tipuri de extracţii din biomasa de spirulină care au fost testate din punct de vedere al activităţii antiradicalice. Variantele care au fost selectate ca fiind cele mai bune au fost luate ca bază pentru cercetările de mai departe şi au avut drept scop elaborarea procedeului de obţinere a preparatelor cu proprietăţi antiradicalice. Pentru a realiza obiectivul propus s-a lucrat asupra optimizării procedurii de extragere a principiilor antiradicalice, pornind de la două variabile: concentraţia alcoolului şi timpul de extragere. Valorile minimale şi maximale ale variabilelor au fost stabilite din preplanificare şi constituie: pentru concentraţia de alcool – 10 şi 65%; iar pentru timpul de extragere - 40 şi 120 min. Experienţa conform Planului factorial deplin 22 a permis a stabili următoarea ecuaţie de regresie: . . . Y= 26,75 + 0,94 X1+1,73 X2 + 0,09 X1 X2 Pornind de la această ecuaţie a fost efectuată experienţa mişcarea pe gradient, în care conform calculelor a fost stabilit pasul în creştere de la nivelul de bază pentru timpul de extragere de 10 min, iar pentru % etanolului în soluţia extractivă - de 12%. Au fost planificaţi 5 paşi ai experienţei, creşterea numărului lor fiind limitată de concentaţia maximă a alcoolului etilic, care se atinge la pasul 5: Pasul1. extragere cu 40% etanol timp de 70 min; Pasul 2. extragere cu 52% etanol timp de 80 min; Pasul 3. extragere cu 64% etanol timp de 90 min; Pasul 4. extragere cu 76% etanol timp de 100 min; Pasul 5. extragere cu 88 % etanol timp de110 min. Rezultatele obţinute au permis de a selecta în calitate de variantă optimă procedura de extragere a principiilor bioactive din biomasa de spirulină cu alcool etilic 76%, durata contactului soluţiei extractive cu biomasa nativă fiind de 100 min. În această experienţă a fost depistat cel mai înalt nivel al 48,5% inhibiţie. Astfel, investigaţiile efectuate au soldat cu elaborarea procedeului de obţinere a preparatului din spirulină cu proprietăţi antiradicalice: Spirulina se cultivă în condiţii standard, pe mediu Gromov 16 timp de 10 zile. Biomasa se separă prin filtrare. La biomasa separată se adaugă etanol de 76 % (la 1 g BAU 20 ml); se pune pe agitator orbital la temperatura de 18-20oC. Agitarea se petrece timp de 100 min, după ce extractul se separă centrifugare la 5000g timp de 10 min. Extractul dat se standardizează după masă, apoi se face determinarea activităţii antiradicalice prin metoda descrisă.

29 MICROPROPAGAREA SPECIEI Vaccinium macrocarpon AITON (soiul Piligrim)

Chiţan Raisa Grădina Botanică Națională (Institut) „Alexandru Ciubotaru”, Chișinău, Republica Moldova e-mail: [email protected]

Merişorul cranberry (nord-american) Vaccinium macrocarpon Aiton soiul 'Piligrim', un soi foarte productiv cu fructul mare pană la 2,0 cm, originar din America de Sud, este un arbust cu înălţimea circa 20 - 30 cm, cu fructele roşii, frunzele veşnic verzi si florile de culoare albă sau roz pal. Crește cu dificultate în zonele cu veri caniculare, preferând zonele montane și submontane, areal împădurit și solurile acide, constant umede. Nu tolerează solurile alcaline. Fructele au un conţinut sporit de proteine, contin Provitamina A, vitamine B1, B2, C, (retinol, acid ascorbic, tocoferol, niacina, piridoxina), minerale (potasiu, fosfor, calciu), tanine (substanţe antibacteriene si antimicotice), fibre, flavonoide (substanţe cu efect antioxidant), saponine, fenoli si acizi graşi esenţiali Omega 3, 6 si 9, uleiuri si zahăruri, ele ofera energie, ajuta la eliminarea stresului, depresiei, oferind sănătate mentala şi îmbunătăţirea memoriei. Merişorul cranberry se înmulţeşte în mod natural prin stoloni (tulpini plagiotrope). Cercetările au fost efectuate în cadrul Laboratorului de Embriologie şi Biotehnologie a Grădinii Botanice Naţionale (Institut) „Alexandru Ciubotaru”. Scopul cercetărilor elaborarea tehnologiilor de înmulţire prin microclonare şi micropropagare a speciei Vaccinium macrocarpon Aiton, aclimatizarea şi adaptarea plantelor multiplicate prin cultura in vitro la condiţiile ex vitro. Pentru microclonarea plantelor de Vaccinium macrocarpon Aiton a fost folosit mediu nutritiv Woody Plant Medium gelificat cu agar, WPM – 100% suplinit cu zeatină – 0,5 mg/l, zaharoză – 30 g/l, agar – 5 g/l, pH – 5,0. După o perioadă de incubare în camera de creştere (circa o lună) s-a observat alungirea lăstarilor axilari şi apariţia noilor lăstari, totuşi (spre deosebire de Vaccinium vitis- idaea L.) majoritatea plantulelor nu au format microcloni (dezvoltându-se doar în înălţime), sau doar 1-3 microcloni la un inocul. Pentru rizogeneza microbutaşilor s-au folosit două variante de medii:1) WPM -100% adiţionat cu AIA – 0,2 mg/l, zahăr alimentar – 30 g/l, pH – 5,0 şi 2) WPM -100% adiţionat cu AIB – 0,5 mg/l, zahăr alimentar – 30 g/l, pH – 5,0. Procesul de rizogeneză a avut loc în partea bazală a minibutaşilor şi a fost influenţat de temperatura din camera de incubare (la 25oC procesul de formare a rădăcinilor durează 2-3 luni, la circa 30oC doar o lună). Minibutaşii de Vaccinium macrocarpon Aiton (soiul 'Piligrim') au avut un randament de înrădăcinarea de circa 90 – 100% pe ambele medii rizogene. Aclimatizarea şi înrădăcinarea ex vitro a plantulelor de Vaccinium macrocarpon Aiton (soiul 'Piligrim') provenite din cultura in vitro, a fost efectuată în terenul protejat al Laboratorului de Embriologie şi Biotehnologie. Vitroplantulele înrădăcinate au fost spălate cu soluţie slabă de permanganat de potasiu (KMnO4 – 0,03%) şi înserate în containere cu amestec de turbă acidă (pH 3,5-5,0) şi perlit, moderat umezit, în raport 2:1. Fragmentele de lăstari neînrădăcinaţi au fost plantate în containere cu perlit. Aceste containere, în prima fază de aclimatizare, pentru menţinerea umidităţii corespunzătoare, au fost acoperite cu folie transparentă perforată pulverizată cu apa distilată. Pentru ca plantulele de merişor să se adapteze treptat la condițiile ex vitro e necesar menţinerea lor sub folii transparente timp de 30-35 zile. În această perioadă este necesar de aerisit plantulele de câteva ori pe parcursul zilei (de la 10-15 min. la începutul perioadei de aclimatizare până la câteva ore la sfîrşitul ei). Aclimatizarea s-a produs mai bine în lunile de primăvară şi începutul verii (în comparaţie cu lunile de iarnă).

30 MICROPROPAGAREA SPECIEI Vaccinium vitis-idaea L.

Chiţan Raisa, Lozinschii Mariana, Sofronii Maria Grădina Botanică Națională (Institut) „Alexandru Ciubotaru”, Chișinău, Republica Moldova e-mail: [email protected]

Merişorul (Vaccinium vitis-idaea L.), plantă medicinală din familia Ericaceae, arbust tufos, cu înălţimea 10-40 cm. Tulpina de formă cilindrică şi ramificată. Frunzele sunt alterne, eliptice, cu margini uşor răsfrânte, sunt lucioase şi cu puncte negre pe spate. Florile campanulate de culoarea albă sau roz pal sunt formate din 4 petale. Fructele (0,5-1,0 cm) сu forma rotundă de o culoare roşie rubinie, puțin mai mari decât afinele. Merişorul este o plantă nativă din Europa, Asia şi America de Nord. În Europa, specia creşte în păduri de conifiere, în zone îmlaştinite, montane şi submontane, pe soluri schelete, puternic acide, având cerinţe mici faţă de fertilitatea solului. În scopuri medicale se pot colecta atât frunzele cât şi fructele. Planta este foarte bogată în antioxidanţi, care protejează organismul de procesele degenerative de oxidare. Conţine vitaminele A, B, C şi E o serie de minerale şi flavonoide. Frunzele conţin taninuri şi arbutină. Cercetările au fost realizate în cadrul Laboratorului de Embriologie şi Biotehnologie a Grădinii Botanice Naţionale (Institut) „Alexandru Ciubotaru”. Pentru micropropagarea plantelor de merişor – Vaccinium vitis-idaea L. (soiul Grintesegen) în cultura in vitro, au fost excizate fragmente de tulpini semilignificate de circa 3-4 cm. Minibutaşii au fost modelaţi şi inoculaţi în eprubete prin inserarea în mediu nutritiv agarizat (solid). Cultivarea explantelor în cultura in vitro necesită condiţii speciale: fotoperiodismul 16 ore lumină/8 ore obscuritate; temperatura aerului de 25ºC şi intensitatea luminii de 2500 lucşi, umiditatea aerului 70%. Pentru microclonarea plantelor de merişor s-a aplicat de bază mediu nutritiv Woody Plant Medium gelificat cu agar (WPM), WPM – 100% suplinit cu zeatină – 0,5 mg/l, zaharoză – 30 g/l, agar – 5 g/l, pH – 5,0. Inocularea pe mediul de cultură suplinit cu zeatină, la Vaccinium vitis-idaea L. (soiul Grintesegen) a favorizat inducerea mugurilor laterali pe axul central a plantulei, cea ce a condus la o lăstărire multiplă: s-au format în jur de 5-9 lăstari per inocul. Pentru înrădăcinarea plantulelor s-au folosit două variante de medii cu însuşiri rizogene:1) WPM -100% adiţionat cu AIA – 0,2 mg/l, zahăr alimentar – 30 g/l, pH – 5,0 şi 2) WPM -100% adiţionat cu AIB – 0,5 mg/l, zahăr alimentar – 30 g/l, pH – 5,0. Procesul de rizogeneză a avut loc în partea bazală a minibutaşilor şi a fost influenţat de temperatura din camera de incubare, în lunile de iarnă (circa 250C) rădăcinile s-au format în 2-3 luni, în timpul verii (circa 300C) deja după o lună de incubare în camera de creştere, se observă rădăcinile. Minibutaşii de Vaccinium vitis-idaea L. (soiul Grintesegen) au avut un randament de înrădăcinare de circa 50% pe ambele medii rizogene. Dimensiunile optime ale explantului pentru microclonare este de 1,5-2,0 cm, pentru rizogeneză – 2,0-2,5 cm. Plantulele obţinute in vitro înrădăcinate au fost transferate la condiţii ex vitro, pentru aclimatizare. Pentru ca procesul de aclimatizare să parcurgă bine, e necesar de asigurat un şir de factori: un substrat solid, steril, ce menţine umiditatea şi cu o aerisire favorabilă, un factor important este pH solului (merişorul nu tolerează solurile alcaline), la fel de importantă este şi menţinerea umidităţii (75-90%), intensităţii luminii şi temperaturii optime de dezvoltare. Microbutașii înrădăcinaţi, proveniţi din cultura in vitro au fost înseraţi în containere cu amestec de turbă acidă (pH 3,5-5,0) şi perlit, în raport 2:1. Lăstarii lungi au fost fragmentaţi (3-5 cm) şi plantaţi în perlit pentru înrădăcinare. Aceste containere, în prima fază de aclimatizare (30-35 zile) au fost acoperite cu folie transparentă perforată. În prima faza de adaptare este necesar de aerisit plantulele de câteva ori pe parcursul zilei. În urma cercetărilor efectuate putem constata că Vaccinium vitis-idaea L. în calitate de cultură nouă, reacţionează pozitiv la cultivarea şi multiplicarea prin metode biotehnologice in vitro, cea ce ne va permite micropropagarea rapidă a plantelor şi obţinerea materialului săditor robust și sănătos.

31 MULTIPLICAREA SOIULUI DE MACEȘ CAN PRIN VITROCULTURI

Ciorchină Nina, Roșca I., Sofronii Maria, Cuzmina Elvira Grădina Botanică Națională (Institut) „Alexandru Ciubotaru”, Chișinău, Republica Moldova e-mail: [email protected]

Măceșul (Rosa canina) face parte din genul Rosa care include circa 400 de specii răspândite pe larg în zonele temperate şi subtropicale ale Emisferei de Nord. Speciile din genul Rosa L. reprezintă arbuști târâtori, erecți cățărători și semierecți, sunt prezentate de forme agăţătoare serpente şi volubile de diferită lungime. Importanța culturii. Conținutul de vitamina C în fructele de măceș este de zece ori mai mare decât în bacele de coacăz-negru și de cincizeci de ori mai mare decât în mere. Miezul fructelor de măceș mai conține provitamina A (caroten), vitamina B2 (riboflavină), vitamina P (citrin), vitamina K, vitamina E. Așadar, putem afirma că măceșul este un rezervor de vitamine pentru organismul uman. Măceșele sunt bogate și în zaharuri, acizi organici, substanțe pectice și tanante, săruri minerale. Introducerea măceșului în cultură va asigura cu vitamine populația tării. Din sortimentul fără spini fac parte soiurile ’Piros’ 1 și ’Piros 2’, dar sunt sensibile la secetă şi temperaturi scăzute, ce nu în tocmai corespunde zonei noastre cu clima temperată. Din circa 15 soiuri productive fără spini sau cu spini puțini și de interes economic cu conținut de substanțe biologic active sporit sunt preponderent de proveniența rusă. Atenția noastră a fost atrasă la două soiuri de origine română: ’BRAŞOV-2’ - soi omologat în anul 1991 la Staţiunea Montană Cisnădie. Plantele sunt viguroase, productive, rezistente la ger, secetă şi făinare. Din cele două a fost selectat soiul ‘CAN’, ca fiind caracteristic zonei Republica Moldova. ‘CAN’ - ICPP Pitești Mărăcineni soi românesc cu tufa viguroasă, de până la 3 m înălțime, cu 5-6 tulpini multianuale crescute din zona bazală. Fructul mare (5,5 g), forma alungită, culoarea roșie- intensă, lucioasă, conţinutul de vitamina C mediu (cca. 580-600 mg%). Epoca de maturare a fructelor timpurie, la începutul lunii septembrie. Producția 4-5 kg/tufă. Speciile măceșului vitaminos pot fi multiplicate generativ și vegetativ. Măceșul, obținut prin metoda generativă, începe să fructifice mai târziu decât cel obținut din multiplicarea vegetativă. Puieții de măceș, obținuți din semințe, începând cu anul 3-4 de viață, se disting printr-o mare rezistență față de condițiile climatice nefavorabile, dar se pronunță puternic descendența puieților, materialul săditor obținut este neuniform. Reeșind din acest fapt, noi am considerat că multiplicarea vegetativă prin vitroculturi este o soluție rezonabilă din mai multe puncte de vedere: material obținut este copie plantei-mama (donor), obținerea materialului săditor la anumit termen în cantități nelimitate, multiplicarea anul împrejur, reducerea simțitoare a costului unei plante, devirozarea și obținerea materialului săditor robust și sănătos. Pentru inoculare a fost utilizat mediul nutritiv Murashige-Skoog (1962) modificat MS 100% + agar 5 g/l, zaharoză 30 g/l, acid ascorbic 1,0 mg/l, IBA 0,1 mg/l, BAP 0,5 mg/l, pH-5,8. Pentru inițiera vitroplantulelor a fost necesare 40-45 zile, după care vitroplantulele, cu dimensiunea 2,0-2,5 cm au fost trecute pe alt tip de mediu nutritiv (mediu pentru rizogeneză) cu următoarea componență chimică: MS 100% + zahăr comercial 30 g/l, acid ascorbic 2 mg/l, IBA 0,1 mg/l, pH-5,8. Pe această balanță nuritivă mini butașii introduși în mediu se dezvoltă 30-35 de zile, până ating dimensiuni de 11-12 cm și formează rădăcini. Aclimatizarea plantulelor de măceș soiul ‘Can’ se realizează în 3 etape. Substrat: turba cu pH 5,8-6,0, nisip de râu, sol de gazon, perlit, în proporții 2:1:2:1.

32 ASPECTE BIOTEHNOLOGICE DE ÎNMULȚIRE A ARONIEI Melanocarpa (MICHX.) ELLIOTT PRIN VITROCULTURI

Ciorchină Nina1, Calalb Tatiana2, Onica Elizaveta1 1Grădina Botanică Națională (Institut) „Alexandru Ciubotaru”, Chișinău, Republica Moldova 2Universitatea de Stat de Medicină și Farmacie „Nicolae Testemițanu”, Chișinău, Republica Moldova e-mail: [email protected], [email protected]

Scorușul negru Aronia melanocarpa (Michx.) Elliott aparține familiei Rosaceae, genul Aronia, nativă din estul Americii de Nord. Planta prezintă un arbust multianual cu numeroase ramuri, de la 10-15 per planta tânără, și circa la 50-60 lăstari la plantele mature, cu o înălțime între 1,5-3,0 m, iar fructele au diametrul de 10-12 mm. Fructele proaspete sunt sursă bogată de antociani, substanțe tanante, vitaminele C, E, acizi organici, microelemente, carotenoide, zaharuri, etc. Fructele de aronia conțin de 15 ori mai mulți antioxidanți decât afinele. Pentru producția de fructe, soiul cel mai productiv este soiul Nero. Aronia, face parte dintre culturile arbuștilor fructiferi din R. Moldova care aduc profituri mari fiind cultivate pe suprafețe mici. Fructele mici și negre sunt solicitate, astfel plantațiile în R. Moldova au demarat în extindere. Amelioratorii și cercetătorii sunt orientați pentru selectarea și obținerea soiurilor de aronie cu proprietăți decorative și fructe de înaltă calitate și productivitate sporită. Aronia tradițional se înmulțește prin butași, dar această metodă are o rată de prindere mică, de 5 la sută. O altă variantă este înmulțirea generativă prin semințe. Pentru aceasta un fermier are de așteptat 2-3 ani, totodată materialul săditor (puieții) obținuți sunt neomogeni, neuniformi. O metodă de înmulțire rentabilă pentru aronie este cultura in vitro. În Grădina Botanică Națională (Institut) „Alexandru Ciubotaru” (GBNI), lab. de Embriologie și Biotehnologie se cercetează 2 soiuri de aronie: Nero și Alexandrina. Soiul Alexandrina, este un soi creat de un grup de cercetători din GBNI (Palancean A., Roșca I., Onica E.), soiul Nero, este soi înregistrat în catalogul de plante a R. Moldova. Pentru a obține material inițial, meristemele lăstarilor au fost prelevate din colecția GBNI. În urma cercetărilor efectuate asupra soiurilor de aronia pentru inocularea plantelor în cultura in vitro se recomandă prelevarea fragmentelor de lăstari vegetativi apicali și laterali în perioada de creștere intensă a țesuturilor. Meristemele inoculate pe medii nutritive au supraviețuit și au dat naștere vitroculturilor la 88,9%. Pentru microclonarea vitroplantulelor obținute au fost testate mediile de cultură suplinite cu BAP (1,0 mg/l) și 2ip (10 mg/l). Pe aceste medii nutritive timp de 60 zile, se măreşte considerabil inducerea mugurilor laterali pe partea bazală a axului plantulei, ceea ce favorizează o lăstărire multiplă care mai apoi serveşte drept sursă de material biologic pentru micropropagare şi sporirea masei vegetale. Pe mediul cu 2ip se formează în jur de 12,0 lăstari în eprubete la soiul Alexandrina, cu o lungime a lăstarilor de 8 cm, iar pe mediul cu BAP, formează în jur de 5,0 lăstari per inoculi. La soiul Nero procesul de microclonare este mai anevoios, rata de formare a microclonilor este mai diminuată, per explant se formează circa 5 microcloni, pe mediul suplinit cu 2ip și 2-3 microcloni pe mediul suplinit cu BAP în concentrație de 1,0 mg/l cu o lungime a microclonilor de maxim 3 cm. Microclonii obținuti sunt butășiți în dimensiuni de 2,5 cm sunt pasați pe medii nutritive de bază MS, modificat, lichid (AIA 0,2 mg/l, zahăr alimentar 30 g/l). Pe acest mediul în perioada de 30 zile butașii soiului Alexandrina cresc de 10-12 cm, formează sistem radicular, butașii soiului Nerro, formează sisitem radicular, însă lungimea lăstarului nu depășește 4 cm. Plantulele obținute in vitro sunt trecute la condiții ex vitro pentru aclimatizate. Compoziția substratului: sol de gazon, turbă, nisip, pierlit în raport de 2:1:1:1.

33 THE BIO-MORPHOLOGICAL FEATURES OF THE AROMATIC SPECIES Elsholtzia stauntonii Benth. UNDER THE CONDITIONS OF THE REPUBLIC OF MOLDOVA

Colţun Maricica, Cutcovschi-Muștuc Alina National Botanical Garden (Institute) “Alexandru Ciubotaru” e-mail: [email protected]

The research on new species of aromatic and medicinal plants and their introduction in the flora of other regions as industrial crops help extending the range of essential oils, which are main ingredients in fragrances and skin-care products, alcoholic beverages and soft drinks, as well as non- toxic pharmaceutical products. The use of new plant species opens up new ways to identify effective measures to promote health and prevent diseases naturally, to produce plant-derived medicines, which can cure some diseases and have a complex action on the body, stimulating its defense mechanism. The species Elsholtzia stauntonii Benth., of the family Lamiaceae, is particularly interesting in this field. It was introduced in the NBGI in 2014 and has since been researched as an aromatic and medicinal plant. It is naturally common in China and Pakistan. The initial material was received by seed exchange from Hortus Botanicus Latvia. Under the conditions of R. Moldova, it grows as a perennial shrub, which typically reaches 60-90 cm in height, 60 cm in diameter and its shoots are about 65-70 cm long. The leaves are opposite, elongated-ovate, 9-12 cm long and 4-5 cm wide, they fall off at the end of the growing season, in november. The inflorescences are large spikes. The length of the central inflorescence is 4-17 cm. There are more flowers in the lower spiral and less in the upper spiral. The flowers are about 6-9 mm long and 2.5-3.0 mm in diameter. The mass of 1000 seeds is 0.2 g. The life cycle of a plant, in the first year, is complete, however, the onset of phenological stages is delayed and thus the fruits do not fully ripen. The plants grow the most rapidly in the second half of June and the beginning of July. At the end of august - beginning of september, inflorescences are formed in the upper part of the main and lateral buds. In the second and subsequent years, the growing season begins at the end of March. Up to 50 perennial shoots with a length of 35-70 cm develop, the most active growth is observed in May. The mass flowering stage begins at the end of July and lasts for 31-42 days. The plants are very beautiful at the time of flowering, when they are completely covered with spike inflorescences of purple flowers, at the ends of the branches. At the end of September, the fruit ripening stage starts. The growing season lasts for 125-145 days, depending on the weather conditions. Elsholtzia stauntonii Benth. prefers sunny areas with light, fertile soils. It shouldn’t be cultivated in areas where groundwater is close and in areas with heavy, clay soil. The shrub is shaped by pruning it yearly, which also helps improve the productivity of the plant. The load of the bushes must not exceed 35-40 % of shoots with a nutrition area of 80 x 40 cm. Plants can be pruned annually in the spring, starting with the second year after planting. Once every five years, the plant needs to be rejuvenated by cutting the shoots at a height of 15-20 cm from the surface of the soil. The biologically active substance is essential oil, the content of which increases before the flowering begins, reaching its peak in this phase and then begins to decrease. A similar picture was also observed in previous years. The maximum concentration of essential oil was found at the beginning of the flowering stage and constituted 0.5-1.65 %. According to literature data, the essential oil of the studied species has strong antibacterial activity, being effective against pathogenic bacteria. The dry matter contains a series of vital micro- and macronutrients: iron, manganese, molybdenum etc., which make it useful in the treatment of anemia, as a diuretic and stimulant for digestion, as well as in the treatment of diseases of the respiratory system. This plant has not yet revealed all its secrets. It is very promising for further study – there are great prospects for researchers and amateurs of new natural products.

34 A NEW APPROACH TO REMEDIATION OF SOILS CONTAMINATED BY PERSISTENT ORGANIC POLLUTANTS

Corcimaru S.1, Tanase Ana1, Cozma V.1, Rastimeșina Inna1, Postolachi Olga1, Sîrbu Tamara1, Slănina Valerina1, Batîr Ludmila1, Chiseliță O.1, Guțul Tatiana2 1The Institute of Microbiology and Biotechnology, Chisinau, Republic of Moldova 2The Institute of Electronic Engineering and Nanotechnologies 'D.Ghitu', Chisinau, Republic of Moldova e-mail: [email protected]

Nano- and bioremediation technologies are widely studied and used among the most advanced means of environmental remediation, including in cases of soil contamination by persistent organic pollutants (POPs). However, the limitations known for each technology still prevent their full scale implementation. Relatively high economical costs and potential ecotoxicity of nanoparticles on the one hand, and relatively slow rates of bioremediation (especially in cases of heavy pollution) on the other, are just a few examples among the deficiencies that could be mentioned. The combined use of nanoparticles and bioremediation is currently suggested as a viable practical way to increase the efficiency of soil remediation via reducing its economical costs, increasing the sustainability, and shortening the time needed for decontamination. This new approach is known as Nanobioremediation, and the purpose of this work was to evaluate its potential for the Moldavian soils contaminated with trifluralin. The polluted soil was sampled from a former pesticide deposit site near the town of Singera, and contained 30 mg/kg of trifluralin (and 2 mg/kg of DDTs). The nanomaterials used in the study were nanoscale zero-valent iron (1.5-4 nm) and nanomagnetite (17-25 nm). Nanoscale zero-valent iron was prepared from iron (III) chloride by the chemical reduction method in the presence of poly- N-vinylpyrrolidone as a stabilizer. Nanomagnetite was prepared according to the chemical co- precipitation method using iron (II) sulfate and iron (III) chloride in the presence of poly-N- vinylpyrrolidone as a stabilizer. The resulting nanomaterials were characterized by X-ray powder diffraction analysis, X-ray fluorescence analysis, scanning electron microscopyand FT-IR- spectroscopy. The combination of nano- and bioremediation techniques permitted to significantly increase the effectiveness of soil decontamination comparing to the controls with nanoremediation only and bioremediation only. The concentration of trifluralin left in the soil of the best variant of nanobioremediation was by many times smaller than in the best variants of nanoremediation and bioremediation. Moreover, comparing to the best case of bioremediation, nanobioremediation permitted to radically decrease the number of remediation manipulations and to considerably shorten the time needed for decontamination. It was found that the studied nanoparticles were able (a) to decrease the toxicity of trifluralin for many single microbial strains (from bacteria, actinomycetes and micromycetes) grown in liquid and/or on solid media, (b) to stimulate active growth of some microorganisms in media with high concentrations of trifluralin (in some cases the growth rate was comparable to and even surpassing the one in the standard cultivation media), (c) to increase the ability of different consortia of bacteria and micromycetes to grow in the media with trifluralin as the only source of carbon, nitrogen and energy, (d) to increase the survival and activity of soil microbial biomass in virgin soils artificially contaminated with trifluralin, (e) to stimulatethe survival and activity of exogenous microorganisms introduced into the polluted soil for the purpose of remediation, (f) to stimulate the activity of soil microbial biomass in the polluted soil including after introduction of exogenous microorganisms for the purpose of remediation, (g) to cause no observable toxic effects upon the soil microbial biomass when applied in concentrations below 400 mg/kg.

35 OPTIMIZAREA MEDIILOR DE CULTURĂ PENTRU MICROPROPAGAREA SPECIILOR DE Actinidia kolomikta MAX ȘI Actinidia arguta PLANCH

Cutcovschi-Muștuc Alina, Trofim Mariana Grădina Botanică Națională (Institut) „Alexandru Ciubotaru”, Chișinău, Republica Moldova e-mail:[email protected]

Biotehnologiile moderne bazate pe culturile in vitro sunt cu succes utilizate în diferite faze ale procesului de ameliorare a plantelor. Cultura de ţesuturi este cu succes utilizată în obţinerea plantelor iniţiale perfect sănătoase. Pe parcursul anilor această metodă a devenit o tehnică modernă de multiplicare rapidă a speciilor ce prezintă interes pentri ţară. Plantele s-au dovedit a fi potrivite pentru cultura prin metode biotehnologice in vitro, iar realizările în această direcţie au progresat cu paşi rapizi. Ca obiect final al acestor cercetări este multiplicarea şi propagarea rapidă a plantelor, obţinerea materialului săditor devirozat, crearea genotipurilor cu caractere dorite, și rezistenţa la boli şi la agenţii stresogeni fizici şi chimici. În ultimii ani dintre plantele netradiționale cercetate în cadrul Grădinii Botanice se studiază 2 specii de actinidie: Actinidia kolomikta Max și Actinidia arguta Planch, fructele cărora sunt cunoscute printr-un conținut înalt de substanțe biologic active, vitamine și antioxidanți. Actinidia este o liană, partea aeriană a căreia poate fi divizată în patru componente: trunchi, ramura principală, ramuri de ordinul I, II, III etc, lăstari. Pentru inocularea plantelor în cultura in vitro au fost testate şi cerectate explantele ca: meristeme apicale și laterale. Explantele au fost dezinfectate cu anumiţi sterilizanţi chimici, după care a fost posibilă inocularea pe mediile nutritive. Pentru iniţierea proceselor morfogene ale plantei, în cultura in vitro, în primul rând, este nevoie de selectarea mediilor. Calitatea şi cantitatea regulatorilor de creştere şi a mediului de cultură influenţează dezvoltărea proceselor morfogene al explantelor inoculate. Pentru dezvoltarea acestor procese a fost selectat mediul MS 100% și Standarte. Este necesar de a alege corect şi regulatorii de creştere şi este important de menţionat că, procesele regenerative sunt condiţionate de un anumit raport auxine-citochinine, citochinină-citochinină caracteristice pentru fiecare specie de plante în parte. Mediile utilizate au fost cele agarizate cu cantitate diferită de agar- agar. Dintre regulatorii de creștere pentru mediul MS 100 % s-a folosit BAP (0,5 mg/l) + α ANA (0,25 mg/l), iar pentru mediul Standarte s-au utilizat regulatorii de creștere Zeatin (1,0 mg/l) + α ANA (0,02 mg/l). Ambele specii de actinidie au fost inoculate pe mediile date. Principalul parametru este pH-ul care s-a stabilit a fi optim 6,8-7. Dezvoltarea pe ambele medii s-a făcut observată după o lună. Odată cu dezvoltarea plantulelor pe medii s-a produs formarea masei calusare. S-a constatat că, din meristeme s-a dezvoltat caulogeneza iar la baza inoculului s-a format calusul morfogen. Ca rezultat al cercetărilor efectuate asupra mediilor s-a dovedit că plantele pe mediul Standarte suplinit cu Zeatin, au o dezvoltare mai vertiginoasă formând rizogeneza la baza lăstarului și masa calusară. În procesul de micropropagare la Actinidia kolomikta s-a observat și o diferență dintre plantele masculine și cele feminine. S-a constatat că, explantele de gen masculin cresc mai repede și cantitatea obținută de la un inocul este mai mare în comparație cu explantele de gen feminin. Ca rezultat al cercetărilor efectuate s-a constatat că, inoculii eficienți pentru micropropagarea Actinidiei kolomikta și Actinidia arguta în cultura in vitro sunt meristemele apicale și laterale cultivate pe mediile MS și Standarde suplinite cu regulatori de creștere.

36 SPECTRUL MUTAȚIILOR INDUSE LA INUL DE CULTURĂ PRIN UTILIZAREA RAZELOR GAMA

Cuţitaru Doina Institutul de Genetică, Fiziologie şi Protecție a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail:[email protected]

Inul de cultură (Linum usitatissimum L.) reprezintă un important obiect de studiu grație caracteristicilor sale unicale. Din punct de vedere al direcției de utilizare această cultură este divizată, de regulă, în două grupuri distincte - inul pentru ulei şi inul pentru fibre. În scopul satisfacerii necesităţilor de produse extrase din in cercetătorii apelează la diverse procedee de ameliorare, astfel au fost create noi forme rezistente la factorii stresogeni ai mediului. Una din metodele utilizate ține de iradierea seminţelor cu razele γ, fapt ce conduce la sporirea variabilităţii genetice şi obţinerea unor noi soiuri economic valoroase. În studiul nostru s-a utilizat materialul semincer a trei genotipuri de in, care diferă după un complex de caractere morfobiologice şi agronomice. Pentru soiurile Dichl 8 şi Kaufmann este caracteristică apartenența la tipul de in pentru ulei, culoarea albastră a corolei. Soiul Belinka, însă, are corola de culoare albă şi aparţine tipului de in pentru fibre, a cărui importanţă este orientată spre producţia de tulpini. Seminţele de in au fost tratate cu diferite doze de iradiere (400- 700 Gy), folosindu-se ca sursă izotopul 60Co. S-a întrebuinţat un număr stabil de seminţe, câte 500 pentru fiecare probă. În calitate de martor au servit seminţele neprelucrate. Experienţele au fost montate în teren deschis. Începând cu generaţia M1 s-a observat un grad sporit de eliminare a plantelor. La etapa inițială de dezvoltare procentul de răsărire a variat semnificativ, constituind la s. Dichl 8 29,8% (doza 400 Gy), 31,0% (500 Gy), 45,0% (600 Gy) și 27,4% (700 Gy), Pentru soiul Belinka iradiat cu dozele menționate mai sus răsărirea a fost, corespunzător, la nivelul de 21,8%, 16,6%, 14,4% și 16,2%. Soiul Kaufmann a înregistrat următoarele date: 30,2% (400 Gy), 28,2% (500 Gy), 45,2% (600 Gy), 35,4% (700 Gy). La această etapă plantele s-au dovedit a fi mai rezistente faţă de s. Dichl 8 cu 6,1% şi cu 70,0% față s. Belinka. Totuşi, pe parcursul perioadei de vegetaţie s-a produs o eliminare substanţială a materialului iradiat. Sub influenţa iradierii şi a factorilor limitativi ai mediului soiul Belinka s-a dovedit a fi cel mai puţin rezistent, plantele iradiate fiind eliminate în totalitate. Procentajul de plante rămase fusese foarte mic atât pentru s. Dichl 8 (cuprins între 0,2- 1,6%), cât şi pentru s. Kaufmann 0,6-3,8%. Înălţimea plantelor soiului Dichl 8 a înregistrat o valoare de 59,0 cm (500 Gy), fiind la acelaşi nivel cu martorul (58,4 cm). Ultimul, însă, a depăşit în înălţime cu 19,4 cm plantele obținute din iradierea cu doza 400 Gy şi cu 13,5 cm pe cele cu doza de 600 Gy. După acest parametru soiul martor Kaufmann a înregistrat valori de 43,2 cm, fiind depăşit de plantele din varianta 500 Gy cu 5,5 cm şi cu 1,73 cm (varianta 600 Gy). Plantele obținute în urma tratării cu doza de 400 Gy au demonstrat valori similare cu martorul (42,8 cm), iar cele mai joase exemplare s- au semnalat în varianta 700 Gy (36,8 cm). După parametrul numărul de ramificaţii martorii Dichl 8 (10,8) şi Kaufmann (12,2) nu au fost depăşiţi de nici o formă iradiată. După numărul de flori şi fructe per plantă, însă, s. Dichl 8 sub influenţa dozei de 500 Gy a înregistrat cele mai mari valori (152,5 flori), respectiv 73,5 fructe, iar martorul - 105,4 şi 77,0. În același timp, la Kaufmann martorul a avut cele mai mici valori (de 78,8 şi 48,8) comparativ cu formele iradiate, numărul maxim de flori şi capsule au fost semnalate la plantele obținute din aplicarea dozei de 700 Gy - 186,9 flori şi 76,6 capsule. După caracterul numărul de seminţe valoarea maximă s-a evidențiat la forma Dichl 8 (doza 400 Gy) - 7,9 comparativ cu martorul (6,6), iar valorile obținute la genotipul Kaufmann (6,8) în varianta 600 Gy nu diferă semnificativ de cele ale martorului. Screening-ul formelor mutante se va efectua și în generațiile M2-3. Utilizarea factorilor mutageni fizici permite de a obține forme noi de in cu caractere agronomice valoroase utile pentru includerea în schemele de ameliorare genetică a culturii.

37 АККЛИМАТИЗАЦИЯ ВИТРОКУЛЬТУРЫ ЛАВАНДЫ УЗКОЛИСТНОЙ (Lavadula angustifolia MILL.)

Кузьмина Эльвира, Грати В. Ботанический Сад (Институт) им. Александру Чуботару, Кишинев, Республика Молдова e-mail: [email protected]

Род лаванда относится к семейству Lamiaceae и включает около 30 видов, растение имеет очень стойкий и сильный аромат. Растет повсеместно на территории Канарских островов в восточной Африке, на юге Европы, в Аравии и Индии. Это вечнозелёный полушаровидной формы кустарник, высотой 40-60 см. Корень деревянистый стержневой на нижних одревесневающих ветвях развиваются многочисленные побеги: цветоносные побеги четырехгранные с длинным верхним междоузлием. L.angustifolia имеет сидячие супротивные листья, продолговато-линейной формы, цвета серо-зеленого из-за опушения, длиной до 6 см. Цветет лаванда с мая по август, цветки лаванды образуют колосовидное соцветие, собранные в ложные мутовки с палитрой от бело-голубого до лилово-фиолетового цвета. Переносит морозы не ниже чем -18оС, не боится засухи. Спектр применения у неё очень широк: косметология, медицина и кулинария. Эфирное масло лаванды находит применение как универсальное средство в косметологии, ароматерапии. Лавандовый мед один из самых целебных сортов меда. С давних пор применение лаванды оправдано как противовоспалительное, противосудорожное и нормализующее деятельность нервной системы средство. Полезные свойства лаванды применяют и используют в качестве отваров, чаев из цветов лаванды, компрессов и ванн с целительным лавандовым маслом. В лаборатории Эмбриологии и биотехнологии Ботанического сада (Институт) им. А.Чуботару разработали технологию размножения и выращивания этого вида посредством витрокультуры. Метод культуры in vitro давно уже стал массовым методом размножения ценных сортов различных культур, в том числе и лаванды. Для адаптации и акклиматизации растений, полученных in vitro, в открытом грунте им требуются совершенно новые условия, то есть необходим промежуточный этап для последовательной адаптации. Цель настоящей работы была разработка технологии выращивания и подбор субстратов для эксплантов лаванды в условиях ex vitro и определение оптимальных климатических условий их закаливания. Нами были протестированы четыре варианта субстратов, с использованием дерновой почвы, речного песка, торфа и перлита, в различных весовых соотношениях. При этом важно было определить, какой вариант субстрата больше подходит для растений, полученных in vitro, без корней и с их наличием. Экспериментально определяли приживаемость растений, выращенные в in vitro совершенно без корней и со слабой корневой системой, сформированной в in vitro. При приготовлении субстрата, многократно промытый песок, вместе с торфом стерилизуем при Tо 110оC. Экспланты, субстрат и контейнер предварительно обработали водным раствором перманганата калия в концентрации 0,2%. Посаженные экспланты, размещали в специальное помещение и держали под плёнкой. Ежедневно, на протяжении месяца 3-4 в течении дня по 5-10 минут их проветривали, спрыскивали водой и оставляли их при комнатной температуре. Через месяц хорошо развитые растения, с 2-3 боковыми побегами и хорошо развитой корневой системой, пересаживали в контейнеры, для дальнейшего развития с субстратом из дерновой почвы, торфа, речного песка и листовой подстилки (2:1:1:1). Проведенные нами исследования показали, что лучшим субстратом для адаптации и укоренения растений, полученных в in vitro, служит смесь, состоящая из речного песка и перлита (1:1). Приживаемость растений-эксплантов, выращенных в условиях in vitro без сформировавшихся корней, составило 70%, а с корневой системой, составило 90%.

38 PROCEDEU DE ÎNMULŢIRE ÎN MASĂ A ENTOMOFAGULUI Trichogramma evanescens W.

Gorban V., Gavriliţa Lidia, Voineac V., Nastas T. Institutul de Genetică, Fiziologie şi Protecţie a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail: vgorban.alimeco@ yahoo.com

În prezent, multe țări ale lumii sunt preocupate de căutarea metodelor nonchimice și a mijloacelor de protecție a plantelor împotriva dăunătorilor și bolilor. În multe cazuri, utilizarea insectelor entomofage utile pentru combaterea insectelor dăunătoare culturilor de câmp, livezilor și pădurilor este destul de eficientă. Pentru aceasta este important obținerea unui material biologic de calitate înaltă, care va servi în procesul tehnologic ca substrat nutritiv pentru reproducerea eficientă în masă a entomofagului Trichogramma evanescens W. În procesul elaborării tehnologiei de reproducere în masă a trichogramei, s-a constatat că utilizarea ouălor gazdă sterilizate, în acest scop, duce la majorarea eficienței procesului cu 10-15%. Este cunoscut modul de sterilizare prin utilizarea mutagenilor fizici (radiaţie gama, izotopi de cobalt, cesiu şi alte elemente) sau chimici (anumiţi agenţi de alchilare, în special derivații etilendiamina şi anumiţi antimetaboliţi), care induc mutaţii letale dominante pupelor sau adulţilor insectelor dăunătoare. Unul din aceste moduri este procedeul de producere în masã a Trichogramma evanescens W pe ouă de molia cerealelor (Sitotroga Cerealella Oliv) iradiate în prealabil cu raze gama. Dezavantajul procedeelor cu utilizarea mutagenilor enumăraţi constă în faptul, că ei au o toxicitate ridicată, uneori şi o acţiune cancerogenă şi nu pot fi aplicate pe larg atât timp cât nu vor avea un efect selectiv şi relativ sigur pentru personalul de lucru. Cu scopul majorârii eficacităţi procesului de înmulţire în masă a entomofagului Trichogramma s-a propus utilizarea razelor infraroşii cu efectul de sterilizare a ouălor de insecte- gazdă (molia cerealelor Sitotroga Cerealella Oliv) care sunt folosite în calitate de substrat nutritiv pentru reproducerea entomofagului dat (Brevet de invenție MD1003Z 2016.09.27). Procedeul de sterilizare a ouălor de insecte are loc în rezultatul iradierii ouălor gazdei cu raze infraroşii cu lungime de undă 750-1000 nm emanate de sursa cu o putere de 250Wt situată deasupra vasului la înălţimea de 250-300 mm, timp de 4-5 min. Razele infraroşii au proprietăţi fizice de a pătrunde sub corionul ouălor şi de a fi absorbite de compusul lor lichid, acţionând termic asupra embrionului, în rezultat încetează dezvoltarea de mai departe a larvelor în acelaşi timp ouăle sterilizate îşi păstrează calităţile nutritive necesare pentru creşterea în masă a entomofagului Trichogramma sau păstrate un timp îndelungat în condiţii optimale şi utilizate după necesitate. Rezultatul tehnic obţinut se datorează faptului, că procedeul propus asigură sterilizarea ouălor insectelor-gazdă (moliei cerealelor - Sitotroga Cerealella Oliv) cu un randament de 80-85%, păstrând calităţile nutritive ale ouălor utilizate în calitate de gazdă alternativă la creşterea în masă a entomofagului Trichogramma. Procedeul propus de sterilizare, spre deosebire de procedeele cunoscute este uşor de utilizat, nu necesită operator special, nu acţionează agresiv asupra materialului biologic ori a personalului de lucru, prin urmare el se referă la tehnologiile ecologic inofensive, în acelaşi timp necesită un consum redus de energie.

39 EFECTUL RADIAȚIEI GAMA ȘI INFECȚIEI VIRALE ASUPRA UNOR

CARACTERE DE INTERES AGRONOMIC LA SOMACLONELE (SC0) DE ORZ DE PRIMĂVARĂ

Grigorov Tatiana Institutul de Genetică, Fiziologie și Protecție a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail: [email protected]

Variațiile atestate la plantele regenerate in vitro, obținute prin cultura de calus, au un potențial agricol semnificativ. Eventualele beneficii ale variabilității somaclonale (VS), caracteristice regeneranților în crearea diversității genetice suplimentare la plantele de cultură au fost confirmate prin crearea soiurilor noi selectate din regeneranții cu însușiri utile. La graminee, frecvența VS este relativ scăzută și pentru extinderea variației caracterelor importante la somaclone este necesară utilizarea agenților mutageni în complex cu cultura in vitro. Prin urmare, prezintă interes evaluarea acțiunii commune și separate a radiației gama și virusul mozaicului dungat al orzului (VMDO, Barley Stripe Mosaic Virus), în calitate de modificatori genetici, asupra unor caractere de interes agronomic la somaclonele (SC0) de orz de primăvară. Somaclonele evaluate au fost obţinute din embrioni imaturi prelevaţi de la cele 3 soiuri de orz de primăvară: Sonor, Unirea, Galactic, seminţele cărora au fost supuse iradierii gama cu dozele de 100, 150, 250 Gy la instalaţia gama RXM-V-20, sursa radiaţiilor - 60Co (0,16gr/sec). Plantulele ulterior obținute în faza de 2-3 frunzuliţe au fost infectate cu VMDO. Plantele sănătoase au servit drept martor. Regeneranţii au fost obţinuţi prin morfogeneză indirectă pe medii de cultură de iniţiere, menţinere şi regenerare optimizate pentru soiurile respective. În calitate de mediu nutritiv de bază a servit mediu Murashige-Skoog (1962). Regeneranții au fost transferați în substrat sol în ghivece, menținuți în camera de aclimatizare în condiţii controlate de lumină şi temperatură, apoi cultivați în condiții de solarii pentru a obţine seminţe. Conform datelor din literatură, printre indicii ce determină productivitatea sunt numărul de spiculețe fertile în spic și frați fertili/plantă iar valorile joase ale caracterelor talia plantei și lungimea ultimului internod contribuie la prevenirea gradului de polignire. În rezultatul analizei datelor experimentale s-a evidenţiat o variaţie considerabilă a valorilor caracterelor biomorfologice respective la somaclonele de orz în dependenţă de genotip, indicele analizat și sursa de variaţie. Astfel, infecția virală a micșorat semnificativ (de 1,2 ori; la nivel de 95-99%) valorile medii ale caracterelor talia plantei (s. Unirea) și lungimea ultimului internod (s. Unirea, Galactic, Sonor). În același timp, VMDO a majorat de 1,4 ori numărul de frați fertili/plantă (s. Galactic) și numărul de spiculețe fertile în spicul principal (s. Galactic, Sonor) în comparație cu varianta martor, datele fiind veridice pentru P0,05; 0,01; 0,001. Razele gama au redus semnificativ (95-99,9%) de 1,2-1,6 ori media indicilor: talia plantelor (s. Unirea; 150, 250Gy), lungimea ultimului internod (s. Unirea, 150 Gy; s. Galactic, 250Gy), frați fertili/plantă (s. Unirea, 250Gy) și numărul de spiculețe fertile în spicul principal (s. Galactic, 150Gy). La s. Sonor, radiația gama a mărit semnificativ (95-99%) numărul de spiculeţe fertile/plantă (150Gy; 1,5 ori) şi frați fertili/plantă (100Gy; 1,7 ori). Asocierea factorilor evaluaţi a contribuit la atenuarea efectului evidențiat anterior asupra caracterelor lungimea ultimului internod (s. Unirea, Sonor, 150Gy) și spiculețe fertile în spic (s. Unirea, 250Gy) și a majorat semnificativ valorile medii de 1-2,1 ori (95-99,9%) comparativ cu acțiunea solitară a virusului. Analiza datelor experimentale prin aplicarea testului ANOVA denotă că contribuţia procentuală a radiaţiei gama asupra indicilor talia plantei, lungimea ultimului internod, spiculeţe fertile, constituie 1,52-1,6% (P0,05; 0,01). Acţiune maximă a manifestat genotipul, puterea de influenţă constituind 15,73- 49,8%, în dependenţă de caracter (99,9%). Puterea de influenţă a VMDO asupra caracterelor analizate este maximă pentru indicii numărul de spiculeţe fertile (2,31%) şi lungimea ultimului internod (3,25%) fiind semnificativă la nivel 95-99%. Rezultatele obținute indică despre necesitatea analizei descendenților (SC1) și confirmă eficacitatea factorilor cercetați în extinderea variabilității genetice la plantele de cultură.

40 SINTEZA COMPONENŢILOR ACTIVI AI FEROMONULUI SEXUAL SINTETIC AL MOLIEI VĂRGATE Anarsia lineatella ZELLER E-5- DECA-5-EN-1-OL ŞI E-5-DECA-5-EN-1-IL ACETAT

Jalbă Svetlana, Odobescu Vasilisa, Erhan Tatiana, Neguţă A. Institutul de Genetică, Fiziologie şi Protecţie a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail:[email protected]

Necesitatea combaterii dăunătorilor culturilor agricole este determinată de faptul că acestea sunt atacate de o gamă largă de dăunatori. Pierderile de recoltă constituie 25-30%, uneori depăşesc 40- 50% sau totalmente compromit recolta. Invaziile de dăunători sunt cauzate de schimbările climaterice, adaptabilitatea acestora şi lipsa unui program complex de combatere. Problema obţinerii culturilor agricole ecologice şi competitive vizează trecerea la o agricultură ecologică şi inofensivă. Molia vărgată Anarsia lineatella Zeller, este o specie polifagă, care atacă diferite specii de sâmburoase ca piersicul, caisul, vişinul, cireşul, prunul şi migdalul, însă pagube mai mari produce în plantaţiile de piersic. Cercetările privind identificarea compoziţiei feromonului sexual al moliei vărgate Anarsia lineatella Zeller au fost efectuate de către Anthon și colab. în anul 1971, în Washington, SUA. A fost stabilit ca componentele majore, şi ulterior active ale feromonului sexual sunt E-5-deca-5-en-1-ol (100μg) şi E-5-deca-5-en-1-il acetat (1000μg), raportul de1:5. Capcanele cu feromon sexual sintetic al moliei vărgate se folosesc cu succes pentru determinarea numărului şi tipurilor de dăunători, focarele, perioada de zbor, sterilizarea şi captarea în masă a dăunătorilor, precum şi stabilirea cu precizie a timpului de prelucrare chimică sau biologică și îmbunătăţesc eficacitatea luptei, prin reducerea cu 25-30% a cantităţii de insecticid. Astfel, ţinând cont de informaţia ştiinţifică studiată este actuală elaborarea unei metode de sinteză care să îmbine aşa avantaje precum: utilizarea substanţelor iniţiale şi intermediare accesibile, mărirea randamentului produşilor intermediari şi finali, facilitarea purificării în vederea obţinerii produşilor intermediari şi finali cu o puritate de 93-97% a feromonului sexual sintetic al moliei vărgate, iar preparatul biologic în baza lui poate fi utilizat cu succes în protecţia plantaţiilor de piersic, cais, vişin, cireş, prun şi migdal etc. Schema de sinteză organică elaborată cuprinde 6 etape de sinteză: deciclizarea tetrahidrofuranului (THF) cu bromură de acetil, reducerea 1-brombutanol-4-acetat-ului cu LiAlH4, protejarea grupei hidroxile cu 3,4-dihidropiran, alchilarea în NH3 lichid cu hexinil-1-litiu, în vederea alungirii catenei, deprotejarea grupe hidroxile, trans-reducere cu Na, terţ-butanol, în NH3 lichid urmată de alchilare cu clorură de acetil în prezenţa piridinei. Substanţele obţinute au fost purificate pe coloana cu silicagel, eluent eter-acetonă şi ulterior a fost analizată puritatea acestora cu ajutorul cromatografiei gaz-lichid. Substanţele sintetizate E-5-deca-5-en-1-olul şi E-5-deca-5-en-1-il acetatul, reprezintă substanţe lichide, incolore, cu miros specific, cu puritatea de 95%. Ulterior substanţele sintetizate au fost impregnate pe capsule din cauciuc sintetic, raportul componenţilor de 1:5, în diferite doze: 1, 2 şi 3 mg. Capsulele cu feromon sexual sintetic al moliei vărgate Anarsia lineatella Zeller, au fost fixate de placa cu adeziv entomologic, din interiorul capcanei tip „Delta” şi apoi plasate în câmp, fiind atârnate direct pe copacii de cais şi piersic, în vederea testării activităţii substanţelor şi totodată monitorizării populaţiei de dăunători.

41 EFFICIENCY OF CYANOBACTERIAL INOCULATION OF WHEAT SEEDS TO REDUCE THE PHYTOTOXIC EFFECT OF GLYPHOSAT

Koval E.V.1, Ogorodnikova S. Yu. 2 1Vyatka state university, 2 Institute of Biology, Komi Scientific Center, Ural Branch of the Russian Academy of Sciences, Russia e-mail: [email protected]

Glyphosate is one of the most popular pesticides on the modern market, but it is highly toxic to many plants, is absorbed by the leaves and moves to the roots, suppressing the vital activity of plants for a long time. Currently, the development of methods for reducing the phytotoxicity of contaminated substrates using microbial cultures is relevant. The aim of the work was to study the effect of inoculation of wheat seeds with the cyanobacterium Nostoc paludosum Kutz. on glyphosate toxicity for plants. Seeds of wheat (sort Iren) were germinated for a week with cyanobacteria and without them. Subsequently, the seedlings were transplanted to a solution of glyphosate (1·10-4 mol/l) prepared on a Knop nutrient solution. In the phase of two leaves, the intensity of lipid peroxidation (LPO) processes in wheat roots and leaves, the accumulation of plastid pigments, substances with antioxidant properties, ascorbic acid and anthocyanins, and the length of seedling organs were evaluated. The age of cyanobacteria culture is 1.5 months, the titer is 6.5·107 cells / ml. It was established that pre-sowing inoculation of seeds with cyanobacterium N. paludosum activated LPO processes in wheat leaves at 17% of the control level, which was determined by the accumulation of malonic dialdehyde – the main LPO reactions product. But its amount in the roots in this variant was extremely small (no more than 10% of the control). Significant changes in the content of plastid pigments (chlorophylls and carotenoids), anthocyanins, and ascorbic acid in the leaves of plants grown with cyanobacterial inoculation of seeds were not detected. In addition, cyanobacteria favorably influenced the growth of wheat roots, which exceeded control by 30%. Glyphosate had a toxic effect on wheat. The intensity of lipid peroxidation processes in leaves increased by 2.3 times compared with the control level. The content of anthocyanins and ascorbic acid, substances with antioxidant properties, increased in leaves by 90% and 50% times the control level, respectively. Their increased number indicates the activation of antioxidant protection in plant cells and is aimed at adapting plants to the action of the pesticide. The content of plastid pigments, in contrast, decreased. The toxic effect of glyphosate was also reflected in the length of the wheat organs, the length of the roots was lower than the control by 30%, and the shoots - by 10%. Inoculation of seeds with cyanobacterium N. paludosum had a protective effect on plants that were grown in the presence of glyphosate. There was a decrease in the intensity of LPO processes in the roots and leaves of wheat grown using cyanobacteria on the glyphosate solution compared to the action of glyphosate without treatment with cyanobacteria. Under conditions of contamination of the growing environment with glyphosate, inoculation of seeds with cyanobacteria contributed to the accumulation of anthocyanins and ascorbic acid in wheat leaves, but to a lesser extent than without inoculation. A hign correlation was found between the content of malonic dialdehyde in wheat leaves and the amount of ascorbic acid (r = 0.87). An increase in the content of chlorophylls in the leaves of plants that were treated with N. paludosum was noted, compared with plants that were grown on a substrate contaminated with glyphosate without inoculation. The length of the experimental plants treated with cyanobacteria and grown on glyphosate solution was higher than in the variant without cyanobacterial inoculation and returned to the control value. Thus, inoculation of seeds with cyanobacterium N. paludosum had a phytoprotective effect on wheat plants in a glyphosate pollution. Cyanobacterial inoculation of seeds reduced the intensity of POL processes in leaves and roots of plants, caused an increase in chlorophyll content, stimulated the efficiency of the antioxidant system. As a result of biochemical rearrangements, linear growth is activated in plant inoculated with cyanobacteria.

42 OBTAINING OF THE IN VITRO Solanum tuberosum CALLUSES WITH HIGH α -SOLANINE CONTENT IN THE CELLS THAT MANIFEST ANTIMICROBIAL ACTIVITY

Kuznetsova Elena, Fomicheva Anna, Kuznetsova Elena, Stelmashchuk Olga, Seregina Evgenia, Dunaev A. Oryol State University named after I.S. Turgenev, Russia e-mail: [email protected]

To combat diseases and insects in agricultural production, synthetic drugs are widely used. However, the use of many known pesticides has a negative impact on the environment. As a result, the search for producers of biological agents with a fungicidal and insecticidal action continues. A number of researchers have found that α-solanine has a fungicidal effect. As a producer of glycoalcaloids, especially α-solanine it Solanum tuberosum has attracted the attention of researchers. In vitro cell cultures, which allow the production of synthetic products of secondary metabolites throughout the year and in a more concentrated form compared to a whole plant, are of particular interest. Callus culture of Solanum tuberosum was performed by the solid phase method on our Murasige-Skoog modified medium at a temperature of 26 0C, air humidity of 60-70% and illumination of 1000 lux. The results of the study show that the modification of the nutrient medium by the addition of tryptophan and cholesterol contributed to the acceleration of the regeneration of the callus culture. Using a ZeissDiscovery V20 microscope, we studied the morphology of callus cells, which showed that the modification of the nutrient medium increases the number of cells, the cells are smaller, but the number of chloroplasts increases. noticeably. With an increase in the growth index, a specific growth rate of 25-29% and a decrease in biomass doubling time of 22-28%, solanine yield increases. A rapid method for the determination of solanine in Solanum tuberosum callus by fluorescence spectroscopy was developed. By evaluating the fluorescence contrast coefficient, we can evaluate the contribution of various fluorophores to the spectrum of the total signal. The spectrum of solanine was detected at a wavelength of 530 nm. The characteristic peak of the glycoside in the spectrogram can be used to quantify it. On the basis of the callus culture, planting material containing up to 0.56% solanine was obtained, calculated on a perfectly dry mass of raw material resistant to fungal infections caused by fungi of the genus Fusarium. Solanin powder was obtained from the solanum tuberosum callus biomass by extraction with 5% acetic acid, followed by precipitation with 25% ammonia solution, cooling and drying. extraction with 95% ethanol, which was then evaporated to dryness. Experiments on pure cultures of microorganisms have shown that the use of solanine powder as a fungicidal preparation inhibits fungi Aspergillus candida, Penicillium expansion, Mucor mucedo, Rhizopus stolonifer, certain species of Fusarium and bacteria of the species Bacillus subtilis. Thus, a technology has been developed for the production of Solanum tuberosum callus biomass containing an increased amount of solanine. On the basis of callus culture, a seed resistant to certain fungal infections and a fungicidal solanine preparation was obtained. A method for rapid diagnosis of solanine in plant material has also been developed.

43 SOIURI DE MUR DE PERSPECTIVĂ ÎN REPUBLICA MOLDOVA

Lozinschii Mariana, Ciorchină Nina, Pompuș Irina, Grati V. Grădina Botanică Națională (Institut) „Alexandru Ciubotaru”, Chișinău, Republica Moldova e-mail:[email protected], [email protected]

Murul arbust fructifer productiv, cu fructe de calitate nutrițională avansată. Fructele de mur dispun de un conținut bogat de compuși naturali prețioși, sunt solicitate pe piață, nu doar în calitate de aliment cu conținut sporit de substanțe nutritive și antioxidante, dar și pentru calitățile gustative, aromă, aspectul atrăgător și apetisant. Principalii cultivatori de mur la nivel mondial rămân a fi cultivatorii din Serbia, Polonia, SUA, Rusia. Cultivarea murului este o activitate relativ nouă în lume, iar în Republica Moldova a început să fie practicată în ultimii 5-6 ani, în mare parte de către pomicultorii amatori în grădinile de pe lângă casă, ulterior la nivel industrial. În Republica Moldova potrivit estimărilor, sunt peste 150 ha de plantații de mur. Soiurile, varietățile și speciile de mur, după portul creșterii lăstarilor, forma tufei se împart în 3 grupe: erecte (cu creștere dreaptă) semierecte și târâtoare. Majoritatea fermierilor în R. Moldova optează pentru două soiuri fără spini ‘Arapaho’ și ‘Triple Crown’. Ambele sunt de selecție americană, cu creștere erectă și semierectă. Soiul ‘Arapaho’ − moderat de viguros, fără spini, productiv. Planta prezintă creștere erectă și compactă. Arbust de talie medie. Necesită susținere pe spalier (2 sârme) sau araci. Înflorește în a doua decadă a lunii mai. Florile albe sunt grupate în inflorescențe. Fructele ̶ formă conică, dimensiuni mari, masa ̶ 6-7 g la coacere, de culoare negricios, lucioase, gust dulcișor, ferme la manipulări și la transportare, se păstrează bine și au aspect comercial atrăgător, coacere uniformă a bacelor, recolta per plantă este de 3-4 kg. Este foarte apreciat de fermieri și antreprenori având o epoca de coacere timpurie, ultima decadă a lunii iunie până în a doua decadă a lunii iulie (21 zile), este soi timpuriu cu rezistență sporită la geruri (-24ºC), secetă, sensibil la boli. Soiul ‘Triple Crown’ – viguros, robust, fără spini, foarte productiv. Planta prezintă creștere semierectă, necesită atașare pe spalieri, sub formă de evantai, formează lăstari lungi (3-6 m) viguroși. Considerat soi autofertil, rodește și în lipsa polenizatorilor. ’Triple Crown’ înflorește în a doua jumătate a lunii mai, prima decadă a lunii iunie cu flori de culoare albă. Fructele acestui soi sunt mari, dulci care pot depăși 10-12 g, se caracterizează prin echilibrul bine ajustat al zahărului și acidității. Fructele sunt dulci, aromate, ferme, cu rezistența bună la manipulare și transport. Rodește din abundență, 8,0-10 kg per plantă (peste 15 t fructe/ha) în fiecare an, cu începere din al 2-lea an de la plantare. Epoca de coacere ̶ din a doua decadă a lunii iulie până în prima decadă a lunii septembrie (45-50 zile), este considerat un soi semitimpuriu. Particularitățile agrobiologice ̶ rezistență sporită la îngheț (-25 ºC), secetă, boli. În zonele mai reci este indicată protejarea plantelor cu paie sau folie în primii 2 ani de la plantare. Soiurile ‘Arapaho’ și ‘Triple Crown’ sunt cercetate în Laboratorul de Embriologie și Biotehnologie a Grădinei Botanice Națională (Institut) „Alexandru Ciubotaru” (GBNI), materialul săditor de calitate fiind obținut prin micropropagare și multiplicare in vitro, din materialul săditor multiplicat in vitro a fost înființată colecția cu soiuri de mur pe lotul experimental al GBNI. Multiplicarea plantelor prin microtehnici in vitro, asigură obţinerea plantelor sănătoase și viguroase cu o pondere scăzută a bolilor, o rată de multiplicare și rentabilitate economică sporită, pentru sectorul agrar din R. Moldova. Soiurile ‘Arapaho’ și ‘Triple Crown’ multiplicate prin vitroculturi au fost utilizate în calitate de material săditor la înființarea plantațiilor moderne din raionul Dubăsari, Fălești, Criuleni, Orhei, asigurând lociutorii R. Moldova pe perioada lunilor iulie și septembrie (70 zile) cu fructe proaspete bogate în compuși chimici valoroși și calități organoleptice înalt apreciate.

44

MULTIPLICAREA TRANDAFIRULUI PRIN VIRTROCULTURI

Lozinschii Mariana, Cutcovschi-Muștuc Alina, Sofroni Maria Grădina Botanică Națională (Institut) „Alexandru Ciubotaru”, Chișinău, Republica Moldova e-mail:[email protected], [email protected]

Rosa L. gen de plante perene ornamentale din familia Rosaceae,considerat regina plantelor decorative, originar din regiunile continentale și subtropicale ale emisferei nordice, cuprinzând peste 200 de specii de arbuști erecți, deseori spinoși, se înmulțește atât pe cale sexuată cât și pe cale asexuată (drajoni, butași, marcotaj, altoire, etc.). Tandafirul este din ce în ce mai prezent și toate manifestările vieții omului, atât pentru amenajarea grădinilor și parcurilor, cât și pentru ornamentarea și decorarea interioarelor, ca floare tăiată. Inocularea trandafirilor și introducerea lor în cultura in vitro s-a efectuat cu scopul de a diversifica și a completata colecția de trandafiri din GBNI cu soiuri mini din genul Rosa și amenajarea spațiilor verzi. Fiind adus în condiţii de laborator, materialul vegetal a fost supus unei proceduri de sterilizare, după care s-a transferat în încăpere aseptică pentru a fi inoculate. Explantele apicale au fost supuse unor proceduri de asepsizare și plasate pe medii nutritive de creștere. Inițierea vitroplantulei și formarea organelor vegetative au fost obținute la cultivarea explanților din mugurii apicali ai plantelor tinere. Pentru inoculare a fost utilizat mediul nutritiv Murashige-Skoog (1962) modificat cu un conținut de 1)MS 100% , agar 5 g/l, zaharoză 30 g/l, acid ascorbic 1,0 mg/l, IBA 0,1 mg/l, BAP 0,5 mg/l, pH-5,8. Capacitatea regenerativă a explanților depinde atât de calitatea mediului nutritiv cât și de condițiile de cultivare bine controlate (temperatură, umiditate, intensitatea lminiii). Pentru inițiera vitroplantulelor a fost necesar 45-50 zile, după care vitroplantulele de trandafir, cu dimensiunea 2,0-2,5 cm au fost trecute pe al tip de mediu nutritiv (mediu pentru rizogeneză) cu următoarea componență chimică: de 2) MS 100%, zahăr comercial 30 g/l, acid ascorbic 2 mg/l, IBA 0,1 mg/l, pH-5,8, pe această balanță nuritivă mini butașii introduși în mediu se dezvoltă 30-35 de zile, până ating dimensiuni de 11-12 cm, formează rădăcini. Un alt mediu eficient pentru micropropagarea trandafirului este cu următoarea componență nutritivă: 3)MS 100%, FeNaEDTA-36,6 mg/l, zahăr comercial 30 g/l, acid ascorbic 2,0 mg/l, vitamina B1- 1,0 mg/l, IBA - 0,1 mg/l, BAP - 0,05 mg/l, pH- 5,8. Mediu Nr.2. și Nr.3 se alternează, pentru creșterea eficacității micropropagării, drept scop fiind calitatea plantulei care este cultivată in vitro. Pe mediile nutritive Nr2. și Nr.3 plantulele de trandafir ating dimensiuni de 12 cm, ulterior plantulele sunt butășite în segmente de 2,5-3,0 cm, alcătuite din 2-3 internoduri și sunt plasate pe mediul Nr.2 sau Nr.3 pentru creștere și rizogeneză. Partea bazală, înrădăcinată a lăstarului este transferată la procesul de aclimatizare ex vitro. În urma cercetărilor, putem concluziona că: aclimatizarea plantulelor de trandafir este un proces lent, care permite trecerea treptată a plantelor de la condiții in vitro la condiții ex vitro; adaptarea la o umiditate relativ scăzută; dezvoltarea mecanismelor de închidere și deschidere a stomatelor, accelerarea procesului fotosintetic. Procesul de aclimatizare ex vitro a trandafirului este divizat în 3 etape consecutive. Pentru fiecare etapă este specific un anumit tip de substrat nutritiv. În prima etapă, plantele se mențin sub carcase de peliculă, pe un substrat alcătuit din: sol de gazon, turbă, perlit și nisip în raport de 1:1: 0,25:0,25. Pentru adaptarea treptată a plantelor de la condiții ex vitro, zilnic se face aerisirea plantulelor, timp de 10-15 minute, pe un termen de 15 zile. În a doua etapă plantulele se mențin pe acelaș substrat, însă lipsite de carcasă. În etapa a treia plantulele se transferă în containere (volum 500ml) pe un substrat alcătuit din sol de gazon, turbă, nisip în raport 2:0,5:0,25.

45 LINII DE SOIA OBȚINUTE ÎN REZULTATUL MUTAGENEZEI INDUSE CU RAZE GAMA

Malii Aliona Institutul de Genetică, Fiziologie și Protecție a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail: [email protected]

Schimbările climatice din ultimii ani reprezintă o provocare prioritară cu care se confruntă întreaga umanitate. Frecvenţa sporită şi intensitatea mai mare a calamităţilor naturale – este deja resimţită și în Republica Moldova. Fenomenele meteorologice extreme, care se manifestă prin ierni calde, primăveri scurte, creșterea și scăderea bruscă a temperaturii, precipitații rare, neregulate și torențiale, inundații, secete frecvente, arșițe - ca urmare afectează în mod negativ starea morfologică, fiziologică, biochimică și moleculară a culturilor agricole ce duc la diminuarea productivității lor. Din acest motiv, scopul cercetătorilor este de a obține soiuri cu randament ridicat, capabile să realizeze potențialul de productivitate încorporat genetic, cu o calitate ridicată a semințelor în alte condiții decât cele optime, cu rezistență sporită la stres abiotic prin aplicarea metodelor avansate. Soluția acestei probleme depinde în mare măsură de sursa variabilității existente în materialul inițial. În cadrul comunității științifice pe parcursul ultimului deceniu, a crescut interesul către mutageneza indusă, care este utilizată pe scară largă în ameliorarea culturilor agricole pentru a obține materialul inițial valoros. Îmbunătățirea culturilor alimentare din lume se bazează în principal pe mutație. Mutageneza indusă la soia, este un supliment dovedit și un înlocuitor eficient al reproducerii convenționale pentru a conferi o îmbunătățire specifică într-o varietate fără a afecta în mod semnificativ fenotipul său acceptabil. În studiile noastre, s-a utilizat mutageneza indusă cu raze gama, urmată de selectarea individuală a formelor valoroase dorite. Materialul cercetat prezintă linii obținute în generația M6. Pentru analiza comparativă au fost folosite două soiuri - martor de soia (s. Zodiac și s. Alina), omologate în R. Moldova. Boabele uscate au fost iradiate cu raze gama, cu doze de 100, 150, 200 și 250 Gy, și semănate în câmpul experimental conform metodelor generale acceptate pentru această cultură. Studiile au fost realizate în perioada anilor 2013-2015. Din descendența M3-M6, individual au fost selectate linii, care prin randament total, diferă semnificativ de plantele martor. Pe parcursul celor trei ani de cercetare (2013-2015), în condiții de câmp și laborator, aceste linii au demonstrat o mare variație a productivității per plantă și a masei 1000 boabe. Rezultatele obținute la productivitatea per plantă au arătat că unele linii, în funcție de condițiile anului, au depășit valorile martorului, în timp ce altele erau inferioare. Rezultate similare au fost obținute și la indicii masei 1000 boabe. Aceste diferențe sunt mai pronunțate în anii 2014-2015, care s-au caracterizat prin secetă severă. Rezultatele cercetărilor au arătat, că utilizarea mutagenezei induse cu raze gama la soia a făcut posibilă obținerea de noi linii caracterizate prin rate mai mari, atât în productivitate, cât și în calitatea boabelor. Liniile selectate vor fi incluse în programele de lucru pentru studii de reproducere și studii genetice ulterioare. Pe baza lor se vor obține noi soiuri cu productivitate înaltă, rezistente la boli, vătămători, secetă şi la diverși factori climatici care prezintă o problema de risc major pentru agricultura Republicii Moldova.

46 THE RELATIONSHIP BETWEEN THE STRUCTURE OF PEAR FRUITS (Pyrus communis L.) AND THEIR QUALITY

Marinescu Marina, Kolesnicova Ludmila The Institute of Genetics, Physiology and Plant Protection, Chisinau, Republic of Moldova e-mail: [email protected]

The flavor and nutritional values of pears are appreciated by consumers worldwide, who demand specific fruit quality, that is, attractive appearance, firmness, flavor and health safety as well as long-term shelf life and storability. Pear trees have higher climatic and soil requirements than apple trees and their fruit is more difficult to store. Moreover, pears transpire more intensively than apples and are more susceptible to mechanical damage. Pear storability is associated with the cultivar, fruit harvest maturity, and storage conditions. The storage time of winter cultivars extends over several months, particularly in controlled-atmosphere conditions. Fruit quality is influenced by external conditions, for example, temperature, humidity, and fruit health, and by internal factors related to the fruit structure. A particularly important function is ascribed to the structure of the fruit surface layer and the structure of parenchymal cells. The micromorphology, anatomy, and structure of Noyabrskaya fruits in the harvest maturity stage were investigated under light microscope. In the harvest maturity stage, the fruit surface was characterized by a great number of microcracks, which formed a specific reticulate network. The microcracks can be relatively shallow and superficial, or reached deeper layers of the cuticle Additionally, a considerable part of the fruit surface was covered by russeting. The presence of a wax coating on fruits is important feature determining their good and long storage. No forms of epicuticular wax were found in the lenticels and microcracks present within the russeting. Hypodermal cells formed of patches of collenchyma with thickened walls were elongated along the periclinal walls, likewise the epidermis cells. In the hypodermal vacuoles, there were numerous, different-sized deposits of phenols compounds. Additionally, numerous plastids containing starch grains were visible in the cytoplasm of the hypodermal cells. In the pear fruits sclereid aggregates formed 15-45-cell clusters, however, single or several cells are also found. The largest number of sclereids was located in the inner, 3-5 mm thick pericarp layer. The analyses indicate that firmness and durability of pear fruits are largely influenced by the presence of russeting, the proportion of closed lenticels and number of stone cells, and the content of starch grains and tannin and phenols compounds. The thickness of the cuticle and presence of epicuticular waxes as well as the number of lenticels and the number and depth of microcracks play a minor role. Russetings are sites on the fruit surface that are covered by cork cells instead of epidermis. They are associated with the activity of phellogen deposited in subepidermal cells typically at the microcrack formation site. Due to its limited permeability and relatively high plasticity, the cork tissue protects the fruit interior against water loss, infections, adverse climatic conditions, and physical factors more efficiently than the epidermis with the cuticle. Found that the number of sclereids in pear parenchyma determines long-term storability of fruits. Cultivars with stone cells lose lower amounts of water through microcracks and lenticels than these with non-lignified cells. The presence of semi-crystalline starch (polysaccharides in the form of starch grains) contributes to the maintenance of proper fruit texture. Concurrently, during the ripening period, there is an increase in the activity of enzymes responsible not only for disintegration of carbohydrates but also for degradation of the cell wall (enzymatic degradation and dissolution of protopectins) and increased ethylene production.

47 REZULTATE PRELIMINARE PRIVIND REGENERAREA IN VITRO ÎN SCOP CONSERVATIV LA SPECIA ENDEMICĂ Achillea schurii Schultz Bip.

Mihnea Vladimirescu, Paica Ioana, Maria Gabriel-Mihai, Manole Anca, Banciu C. Departamentul de Citobiologie Vegetală și Animală, Institutul de Biologie București, România e-mail:[email protected]

Una dintre direcțiile de cercetare ale departamentului de Citobiologie Vegetală și Animală din cadrul Institutului de Biologie București, este dezvoltarea unor colecții in vitro de țesuturi regenerative provenite de la unele specii de plante periclitate din flora României. Colecțiile obținute pot fi utilizate în scop conservativ, ca adevărate bănci de germoplasmă sau pot fi utilizate în cercetări care urmăresc identificarea și caracterizarea unor metaboliți cu importanță biotehnologică. Achillea schurii Schultz Bip. (syn.: A. atrata Baumg, A. oxyloba (DC.) Schultz Bip. ssp. schurii (Schultz Bip.) Heimerl, Anthemis schurii Schultz Bip.) este o specie erbacee, perenă, din familia Asteraceae, întâlnită în etajul alpin și subalpin, fiind încadrată în listele roșii naționale ca endemit al Carpaților Orientali și Meridionali (Oltean, 1994; Sârbu, 2013) ceea ce o recomandă pentru conservare. De asemenea, potențialul biotehnologic al speciei este confirmat de substanțele identificate în cadrul genului Achillea cu proprietăți farmaceutice cu spectru larg cum ar fi: antiseptice, tonice gastrice, antiinflamatoare, antispastice, stimulante pentru funcției hepatică, etc. Până în prezent nu au fost întreprinse studii privind conservarea ex situ a acestei specii și nici asupra potențialului său biotehnologic. Prin prezentul studiu ne-am propus inițierea unei culturi in vitro în scop conservativ la această specie. Materialul vegetal a fost reprezentat de indivizi colectați din etajul subalpin al masivului Pietrei Craiului, Valea Pădurilor, în luna iulie 2019. Au fost inoculate pe diverse variante de mediu de regenerare, explante foliare reprezentate de fragmente de limb și caulinare reprezentate de segmente de nodii. Pe variantele de mediu testate a fost obținută atât organogeneză indirectă cât și calusogeneză. Aceste rezultate constituie baza studiilor ulterioare privind posibilitatea introducerii acestei specii în culturi in vitro în scop conservativ (răspunsul organogen), cât și a identificăriii de metaboliți cu proprietăți farmaceutice (răspunsul calusogen).

Bibliografie selectivă

1. Benedec, D., Vlase, L., Oniga, I., Mot, A.C., Damian G., Hanganu, D.,…Silaghi-Dumitrescu, R. (2013). Polyphenolic composition, antioxidant and antibacterial activities for two Romanian subspecies of Achillea distansWaldst. et Kit. ex Willd. Molecules, 18, 8725-8739. 2. Benedec, D., Hanganu, D.,Oniga, I., Filip, L., Bischin, C., Silaghi-Dumitrescu, R.,…Vlase, L. (2016). Achillea schurii Flowers: Chemical, Antioxidant, and Antimicrobial Investigations. Molecules, 21(8), 1050. 3. Manole-Paunescu, A. (2014). Biotechnology for Endangered Plant Conservation. In Ahuja M.R, Ramawat K.G.(Eds.), Biotechnology and Biodiversity, Springer International Publishing, Switzerland, ISBN 978-3-319-09380-2, 181-202. 4. Oltean, M., Negrean, G., Popescu, A., Dihoru, G., Sanda, V., & Mihăilescu, S. (1994) Lista Roșie a plantelor superioare din România, Studii, sinteze, documentații de ecologie. Acad. Rom., Inst. De Biol., 1, 1-52. 5. Sârbu, I., Ștefan, N., Oprea, A. (2013) Plante Vasculare din România: determinator ilustrat de teren. București, Editura Victor B Victor.

48 НЕАЛЛЕЛЬНЫЕ ВЗАИМОДЕЙСТВИЙ У ДИГАПЛОИДНЫХ ЛИНИЙ КУКУРУЗЫ: ФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ КОРРЕЛЯЦИИ

Михайлов М. Институт генетики, физиологии и защиты растений, Кишинэу, Республика Молдова e-mail:[email protected]

Проводимая в наших экспериментах дигаплоидная селекция кукурузы была осложнена неаллельными генетическими взаимодействиями. Внешне они проявлялись в асимметрии распределения дигаплоидных (DH)-линий, полученных из гибридов Rf7xКу123 и МК01хА619, относительно среднего родительского значения MP=(P1+P2)/2. Число линий, у которых продуктивность превышает MP, значительно меньше половины от общего их количества. Данный результат свидетельствует о том, что значительная часть генов, контролирующих продуктивность, взаимодействует по комплементарному типу, когда результирующий эффект благоприятных генов не пропорционален их количеству: для полного эффекта необходимо совместное присутствие взаимодействующих генов, а неполное их присутствие не сопровождается соразмерной прибавкой продуктивности. Некоторые выводы о физиологическом характере действия данных генов можно сделать, изучая распределение DH-линий не только по продуктивности, но и по другим количественным признакам. Для DH-линий, полученных из гибрида Rf7xКу123 оказалось, что асимметрия распределения в той или иной степени характерно для большинства признаков, но сильнее всего она проявляется для продуктивности, длины початка, длины метелки и диаметра стебля, для которых частота превышений над MP равна, соответственно, 0,2, 0,02, 0,21 и 0,19. Для длины початка неаллельные взаимодействия даже более выражены, чем для продуктивности, что может указывать на то, что неаллельно взаимодействующие генетические факторы, влияющие на продуктивность, действуют в первую очередь через длину початка. Обращает также на себя внимание согласованность показателей асимметрии для длины початка и длины метелки и значительная генотипическая корреляция между ними (r=0,48, P<0,001). Это позволяет предположить общность соответствующих генетических факторов, которые действуют на пролиферацию цветочной меристемы на ранних стадиях развития. Надо полагать, что именно эти факторы и отвечают за значительную часть неаллельной компоненты в генетической вариации продуктивности. В другой гибридной комбинации, МК01хА619, характер распределения DH-линий по количественным признакам также указывает на неаллельные взаимодействия. Но в отличие от комбинации Rf7xКу123, здесь асимметрии по продуктивности (частота превышений 0,14) сопутствует асимметрия не по длине початка и метелки, а по диаметру початка и озерненности (часто превышений 0,11 и 0,30). Из этого следует, что комплементарно взаимодействующие факторы, влияющие на продуктивность, здесь имеют другую природу и действуют, вероятно, на более поздних стадиях, влияя на озерненность и диаметр початка. В данной комбинации велика генетическая изменчивость по озерненности початка, вызванная тем, что у многих DH- линий недостаточно развиты пестичные нити, и данными различиями в большой степени определяются и различия DH-линий по продуктивности (корреляция r=0,76). В значительной мере различия по продуктивности определяются и различиями в диаметре початка (r=0,71). Значимая корреляция между озерненностью початка и его диаметром (r=0,42) позволяет предположить общность соответствующих генетических факторов. Результаты показывают, что комплементарно взаимодействующие генетические факторы, влияющие на продуктивность, могут быть специфичными для разных гибридных комбинаций и проявляться в разных сопутствующих признаках. В дигаплоидной селекции следует обращать внимание не только на продуктивность, но и на сопутствующие признаки, так как с их помощью можно отслеживать накопление взаимодействующих генов.

49 ПРОЯВЛЕНИЕ НЕАЛЛЕЛЬНЫХ ВЗАИМОДЕЙСТВИЙ В СЕЛЕКЦИИ ДИГАПЛОИДНЫХ ЛИНИЙ КУКУРУЗЫ

Михайлов М. Институт генетики, физиологии и защиты растений, Кишинэу, Республика Молдова e-mail:[email protected]

В селекции многих культурных растений в настоящее время широко применяется получение дигаплоидных (DH) линий из гетерозиготного материала. Как и в рекомбинантных инбредных линиях, в DH-линиях гены исходных форм комбинируются с образованием разнообразных генетических вариантов, но DH-линии выгодно отличаются тем, что не требуют для своего создания многолетнего инбридинга. Наш опыт дигаплоидной селекции кукурузы показал, что отбор на продуктивность DH- линий осложняется неаллельными взаимодействиями. Если дигаплоидные линии производятся из простого гибрида F1, то при отсутствии неаллельных взаимодействий следует ожидать, что среднее значение DH-линий по какому-либо признаку будет совпадать со средним родительским значением (MP). Однако большинство DH-линий, выведенных нами из гибрида Rf7xКу123, имеют продуктивность ниже, чем среднее между родительскими формами Rf7 и Ку123. Среднее родительское значение превысила не половина DH-линий, а 3 из 23, 3 из 19 и 5 из 13 в разные годы, общая частота превышений составила 11/55=0,2 вместо ожидаемой 0,5. Это свидетельствует о том, что гены, контролирующие продуктивность, взаимодействуют по комплиментарному типу: для полноценного фенотипического эффекта необходимо совместное присутствие взаимодействующих генов, а единичные гены не обеспечивают соразмерной прибавки продуктивности. Для селекции это создает определенные сложности, так как затруднительно отслеживать по фенотипу постепенное накопление комплиментарно взаимодействующих генов: продуктивность при этом не растет или растет непропорционально слабо. Подобное явление наблюдалось и в другой гибридной комбинации – МК01хА619, из которой также были выведены DH-линии. Число DH-линий с продуктивностью выше, чем среднее между МК01 и А619, составило 3 из 40, 6 из 41 и 7 из 30 в разные годы, а общая частота превышений составила 16/111=0,14. Для дальнейшего накопления благоприятных генов в DH-линиях был проведен второй цикл селекции. В комбинации Rf7xКу123 были отобраны три перспективные DH-линии и скрещены с исходным материалом – Rf7 и F1. Из полученных трех генотипов были произведены три набора DH-линий второго цикла. Частота превышений над MP=(Rf7+Ку123)/2 составила для первого набора 25/50 и 16/43 в разные годы, для второго набора 21/40 и для третьего 7/15. Совокупная частота равна 69/148=0,47. В другой комбинации, МК01хА619, было получено 20 DH-линий второго цикла, частота превышений над MP=(МК01+А619)/2 составила 8/20=0,4. Таким образом, во втором цикле селекции частота DH-линий, превышающих по продуктивности MP, заметно повысилась по сравнению с первым циклом и близко подошла к 0,5 – значению, ожидаемому для первого цикла в отсутствие неаллельных взаимодействий. В комбинации Rf7xКу123 был проведен также третий цикл селекции. Перспективная линия второго цикла была скрещена с родительской формой Rf7 и от этого гибрида было произведено 24 DH-линии, 14 из которых превысили по продуктивности среднее значение между Rf7 и Ку123. Частота превышений составила 14/24=0,58. Результаты показывают, что неаллельные взаимодействия задерживают селекционный прогресс (в данном случае задержали на один цикл), но не являются для дигаплоидной селекции непреодолимым препятствием. Повышение продуктивности дигаплоидных линий возможно и при неаллельных взаимодействиях, если проводить ступенчатую селекцию цикл за циклом.

50 METODĂ DE SINTEZĂ A 8-METILDECAN-2-IL PROPIONATULUI, COMPONENTĂ ACTIVĂ A FEROMONULUI SEXUAL AL VIERMELUI VESTIC AL RĂDĂCINILOR DE PORUMB Diabrotica virgifera virgifera LE CONTE

Neguţa A., Neguţa Elena Institutul de Genetică, Fiziologie şi Protecţie a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail:[email protected]

Specia Diabrotica virgifera virgifera Le Conte este originară din America Centrală, dar în a doua jumătate a secolului trecut, a dezvoltat populaţii extrem de numeroase în cordonul porumbului din Statele Unite, unde a devenit un dăunător cu o importanţă economică deosebită. În prezent, viermele vestic al rădăcinilor de porumb a devenit o prezenţă obişnuită şi în culturile de porumb din Europa. Feromonul sexual produs de femelele Diabrotica virgifera virgifera a fost izolat și identificat de către Guss și col. în 1982 ca (2R,8R)-8-metildecan-2-il-propionat. În literatura de specialitate se întîlnesc aproximativ 6 metode de sinteză a acestei substanţe atât sub formă de racemat, cât şi sub formă de izomeri separaţi. La testarea amestecurilor de diferiți stereoizomeri 8-metildecan-2-il propionat nu au fost detectate efecte de sinergism sau inhibare a atracției. Aceste rezultate justifică utilizarea unui amestec stereoizomeric de 8-metildecan-2-il-propionat ca agent de atracție. Având ca scop eficacitatea economică şi ecologică de sinteză a substanţei date am realizat următoarea schemă care poate fi uşor scalabilă la nivel industrial, conţinînd doar 3 etape de sinteză, conform schemei care constă din: cuplarea în prezenţă de Li2CuCl4 a 2-brombutanului cu reactivul Grignard format din 6-clorhexan-1-ol şi magneziu, care dă ca produs de reacţie 7-metilnonan-1-olul, care a fost oxidat cu piridinclorcromat pînă la 7-metilnonanal. În ultima etapă aldehida a fost cuplată cu reactivul Grinard format din iodură de metil şi magneziu, la sfîrşitul reacţiei amestecul a fost distrus cu anhidridă propionică unde se capătă componenta feromonală.

În cazul aplicării schemei la nivel industrial, reacțiile pot fi optimizate pentru marimea randamentului, iar iodura de metil poate fi înlocuită cu clorură sau bromură de metil.

51 SINTEZA Z-11-HEXADECENALULUI ȘI E-11-HEXADECENALULUI - COMPONENTE DE BAZĂ ALE FEROMONULUI SEXUAL A OMIDEI PĂROASE A BUXUSULUI Cydalima perspectalis

Neguţa A, Neguţa Elena Institutul de Genetică, Fiziologie şi Protecţie a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail: [email protected]

Omida păroasă a buxusului (Cydalima perspectalis) - este o specie invazivă de fluturi, un dăunător deosebit de periculoas datorită răspândirii rapide şi agresivităţii cu care atacă plantele de Buxus Sempervirens, provocând daune grave plantatiilor acestui arbust, afectînd puternic valoarea estetică a plantelor. Kawazu și colab., analizînd extractele din glandele feromonale ale omidei păroase a buxusului prin mai multe metode instrumentale, au obținut ca componente de bază următoarele 3 substanțe: (Z)- 11-hexadecenal, (E)-11-hexadecenal și (Z)-11-hexadecenol cu următorul raport 5:1,25:1. În urma biotestelor de laborator, numai (Z)-11-hexadecenalul a prezentat atractivitate semnificativă pentru masculi, iar în studiile de teren, acest compus aplicat singur în capcane nu a provocat capturi a masculilor de Cydalima perspectalis. În schimb, amestecul de (Z)-11-hexadecenal, (E)-11- hexadecenal în raport egal cu acel natural a dat rezultate bune, iar adaosul de (Z)-11-hexadecenol semnificativ reducea din atractivitatea. În scopul obținerii componentelor active ale feromonului sexual a omidei păroase a buxusului a fost elaborată următoarea schemă de sinteză care constă în: alchilarea alcoolului propargilic dilitiat cu 1-bromnonan în amoniac lichid folosind ca solvent tetrahidrofuranul, a dat ca produs de reacție dodecan-2-in-1-ol. Aplicînd reacția Zipper de izomerizare a alchinelor interioare în alchine terminale folosind în calitate de bază puternică 3-aminopropilamida de potasiu a fost transformat dodecan-2- in-1-ol în dodecan-11-in-1-ol. Ultimul a fost protejat la grupul –OH cu 3,4-Dihidro-2H-piran și apoi a fost alchilat în aceleași condiții cu 1-brombutan, după extracție și scoaterea protecției s-a obținut hexadecan-11-in-1-olul, care a fost împarțit în două porții. Prima porție a fost redusă cu hydrogen, folosind ca catalizator P-2Nikelul în prezență de etilendiamină unde s-a obținut (Z)-11-hexadecenol, iar a doua porție a fost redusă cu LiAlH4 în diglimă până la (E)-11-hexadecenol. Ambii alchenoli au fost oxidați cu piridinclorcromat până la aldehidele (Z)-11-hexadecenal, (E)-11-hexadecenal.

CH≡CH-CH2-OH + CH3-(CH2)8-Br → CH3-(CH2)8-CH≡CH-CH2-OH → CH≡CH-(CH2)10-OH → CH≡CH-(CH2)10-OPy→CH3-(CH2)4-CH≡CH-(CH2)10-OPy→ CH3-(CH2)4-CH≡CH-(CH2)10-OH→ a) CH3-(CH2)4-CH≡CH-(CH2)10-OH → Z-CH3-(CH2)4-CH=CH-(CH2)10-OH → Z-CH3-(CH2)4-CH=CH-(CH2)10=O b) CH3-(CH2)4-CH≡CH-(CH2)10-OH → E-CH3-(CH2)4-CH=CH-(CH2)10-OH → E-CH3-(CH2)4-CH=CH-(CH2)10=O

Substanțele sintetizate au fost impregnate pe dopuri de cauciuc pentru a fi testate în teren deschis.

52 SINTEZA Z-8-DODECENILACETAT ŞI A E-8-DODECENILACETAT – COMPONENŢII ACTIVI AL FEROMONULUI SEXUAL SINTETIC A MOLIEI ORIENTALE A FRUCTELOR Grapholita molesta BUSK.

Odobescu Vasilisa, Jalbă Svetlana Institutul de Genetică, Fiziologie şi Protecţie a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail:[email protected]

Molia orientală a fructelor Grapholita molesta Busk, numită şi molia orientală a piersicului este originară din nord-estul Chinei, unde pentru prima dată a fost studiată în anul 1902. În prezent este răspândită în majoritatea statelor din Europa, Asia şi America de Nord şi Sud. În Republica Moldova a fost depistată pentru prima dată, în anul 1968 în satul Giurgiuleşti, raionul Vulcăneşt, iar după eşecul de a preveni răspândirea dăunătorului, a primit statutul de dăunător de carantină, care este menţinut şi în prezent. Molia orientală a fructelor Grapholita molesta Busk atacă numeroase specii de pomi fructiferi (piersic, păr, gutui, măr, cais, vişin, prun, migdal, cireş s.a.) cât şi arbori forestieri (corn, păducel, moşmon ş.a.). Pagube mai mari produce în plantaţii de piersic, cais, prun, măr iar uneori şi gutui. Larvele atacă lăstarii, frunzele şi fructele. În lăstari larvele rod galerii de 5-18 cm lungime, din care cauză lăstarii se curbează, se brunifică, iar frunzele se ofilesc şi se usucă, din pomii afectaţi de larvele moliei orientale nu se mai pot recolta ramuri de calitate pentru altoiri. Fructele parazitate de larva moliei orientale a fructelor nu mai cresc şi, adesea, cad pe sol, sfârşind prin a putrezi. În cazul piersicilor de dimensiuni mari se poate întâmpla ca larva să pătrundă în interior fără a lăsa nici o urmă. Capcanele cu feromon sexual sintetic al moliei orientale a fructelor Grapholita molesta Busk, se folosesc cu succes pentru determinarea numărului şi tipurilor de dăunători, focarele acestora, perioada de zbor, sterilizarea şi captarea în masă a dăunătorilor, precum şi stabilirea cu precizie a timpului de prelucrare chimică sau biologică, ce îmbunătăţeşte eficacitatea luptei, prin reducerea cu 25-30% a cantităţii de insecticid. Feromonul sexual a moliei orientale Grapholita molesta Busk, secretat de femele a fost decoperit în anul 1965 de către J. A. George. În anul 1969 a fost identificat componentul principal al feromonului sexual feminin a moliei orientale - Z-8-dodecenilacetat de către Roelofs W.L. şi colaboratorii săi, mai târziu Carde R. T. şi Roelofs W. L. în anul 1974 au identificat componenţi minoritari ai feromonului sexual sintetic precum E-8-dodecenilacetatul şi dodeca-1-ol-ul, necesari pentru prinderea eficientă a masculilor în capcane feromonale cu plăci cu adeziv entomologic, studiile ulterioare au stabilit că prezenţa acestor componenţi minoritari ajută la atragerea femelelor de la distanţe mici, raportul cel mai eficient al compoziţiei feromonale fiind de 200 mg de amestec de izomeri Z-8-dodecenilacetat: E-8-dodecenilacetat = 94: 6, sinergizat de 600 mg de dodeca-1-ol. Introducerea în schema de sinteză a etapei izomerizării duce la ieftinirea produsului final păstrând calitatea acestuia. HC≡CCH2OH → C6H13C≡CCH2OH (1) → HC≡C(CH2)7OH (2)→ HC≡C(CH2)7OR (3) → C3H7C≡C(CH2)7OR (4) → C3H7C≡C(CH2)7OH (5) → Z-C3H7CH=CH(CH2)7OH (6)→ Z-C3H7CH=CH(CH2)7OCOCH3 (7) (I component ) 1 1 E-C3H7CH=CH(CH2)7OH (6 )→ E-C3H7CH=CH(CH2)7OCOCH3 (7 ) (II component )

Substanţele sintetizate au fost impregnate pe capsule din cauciuc sintetic, raportul componenţilor de 94:6, în doză de 0,33 mg, care ulterior au fost fixate de placa cu adeziv entomologic, din interiorul capcanei tip „Delta” şi apoi plasate în câmp, fiind atârnate direct pe copacii de piersic, în vederea testării activităţii substanţelor şi totodată monitorizării populaţiei de dăunători.

53 ВЛИЯНИЕ НАНОЧАСТИЦ НА ОСНОВЕ ЖЕЛЕЗА НА РОСТ РАСТЕНИЙ ВИКИ В ЗАГРЯЗНЕННОЙ ТРИФЛУРАЛИНОМ ПОЧВЕ

Присакарь С. И. 1, Корчмару С.С. 1, Тодираш В.Т. 1, Гуцул Т.Д. 2 1Институт микробиологии и биотехнологии, Кишинэу, Республика Молдова 2 Институт электронной инженерии и нанотехнологий «Д. Гицу», Кишинэу, Республика Молдова e-mail:[email protected]

В настоящее время в Республике Молдова существует острая проблема загрязнения почв стойкими органическими загрязнителами (СОЗ) – в особенности вокруг бывших складских помещений для пестицидов. В стране насчитывается не менее 1604 мест, содержащих СОЗ (среди которых присутствует и трифлуралин), оказывающих негативное влияние на людей и окружающую среду. Препараты на основе трифлуралина относятся ко 2 классу опасности для человека и 3 классу опасности для пчел. С 2007 года Евросоюз отозвал лицензию на его использование по причине его высокой токсичности для рыб и водных организмов, а в Республике Молдова он запрещен с 2012 года. Среди наиболее перспективных технологий детоксикации загрязненных почв – технологии с применением наночастиц на основе железа (наноремедиация) и биоремедиация. Однако, их успешное применение до сих пор сдерживается наличием ряда нерешённых проблем. В связи с этим, относительно недавно был предложен новый подход– нанобиоремедиация – который предполагает использование наночастиц не только и не столько для детоксикации СОЗ в почвах, сколько для стимулирования процессов их биологической ремедиации. Предполагается, что совместное применение нано- и биотехнологий может существенно ускорить темпы ремедиации и при этом уменьшить экологические риски от применения наночастиц. Исследования в данной области всё ещё находятся на начальных стадиях, и очень мало известно о реальных возможностях нанобиоремедиации. В связи с этим, целью нашей работы было протестировать возможность использования наночастиц на основе железа для стимулирования роста растений вики (как потенциального фиторемедианта) в условиях загрязненной трифлуралином почвы. Наночастицы магнетита и нольвалентного железа были получены методом соосаждения в присутствии полимера поли-N-винилпирролидона (ПВП), используемого в качестве стабилизатора. При этом наномагнетит (размер частиц 20,0-25,0 нм) был получен с использованием сульфата железа (II) и хлорида железа (III), а наножелезо (размер частиц 4,0- 5,0 нм) – восстановлением хлорида железа (III). Установлено, что внесение в почву 20 мг/кг трифлуралина, существенно ушудшило показатели роста растений: средняя длина растений вики (3-х недельных проростков, выращиваемых в климокамере в чашках Петри с 50 г почвы в каждой) уменьшилась в 5,6-9,6 раз, а общая длина растений – в 5,8-9,8 раз. Внесение в загрязнённую трифлуралином почву наночастиц на основе железа оказало положительное влияние на оба показателя роста растений. При этом выраженность эффектов зависела как от природы наночастиц, так и от их концентраций. Наномагнетит оказал максимальное стимулирование в концентрации 25 мг/кг (+63,4% и +52,0% к контролю с трифлуралином, соответственно, по средней и общей длине растений). Нольвалентное наножелезо было более действенным в концентрации 75 мг/кг (соответственно, +51,1% и +58,3%). Полученные результаты указывают на перспективность дальнейших, более детальных исследований по изучению и реализации потенциала нанобиоремедиации в случаях с почвами с высоким содержанием СОЗ.

54 OPTIMIZAREA PROCESELOR DE INIŢIERE A GERMINĂRII SEMINŢELOR DE GRÂU

Ralea T., Zdioruk Nina, Jelev Natalia Institutul de Genetică, Fiziologie şi Protecţie a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail:[email protected]

Sporirea productivităţi şi calităţii grâului comun de toamnă a fost şi rămâne una din prerogativele agriculturii. Din acest punct de vedere faţă de amelioratori sunt înaintate cerinţe concrete de a obţine soiuri cu rezistenţă sporită la acţiunea factorilor nefavorabili, productivitate şi calitate înaltă a boabelor. Implementarea lor în producere, ca regulă, are loc după aprecierea productivităţii, calităţii şi rezistenţii genotipurilor selectate ca soi pe câmpurile de concurs. Practica de ameliorare demonstrează că obţinerea unui soi cu calităţi înalte prevede utilizarea combinată a formelor iniţiale performante, selectate după parametrii scontaţi. Pentru selectarea prealabilă a unor astfel de forme este necesar de a elabora şi aplica metode accelerate de apreciere preventivă a materialului genetic planificat pentru utilizarea în procesul de ameliorare a grâului. Cu acest scop au fost iniţiate cercetări de elaborare a unor metode de apreciere accelerată a formelor de grâu pronosticate pentru ameliorare, prin determinarea nivelului de rezistenţă relativă primară la acţiunea factorilor de stres. Scopul cercetărilor a constat în aprecierea timpului necesar de îmbibare a apei în seminţele de grâu, precum şi valorii dozelor de stres cu temperaturi negative pentru distribuţia raţională a diferitor genotipuri după rezistenţa relativă a lor la ger. Este cunoscut că, cu cât este mai lungă perioada de menţinere a seminţelor în mediul de îmbibare, cu atât mai multă apă este acumulată de ele. Acest proces se derulează cu diferită intensitate până la saturaţia lor cu apă. Anterior a fost stabilit că durata de 36 ore de menţinere a seminţelor în apă la temperatura de 4 – 6oC asigură nivelul de îmbibare optimală pentru iniţierea proceselor germinării seminţelor de grâu. Sporirea sau diminuarea acestei durate de îmbibare în aceste condiţii diminuează valorile parametrilor ce caracterizează capacitatea germinativă a seminţelor. Valoarea optimală a acestei durate de îmbibare a fost confirmată şi prin supunerea seminţelor îmbibate pe parcursul a 12, 24, 36 ore diferitor doze ale şocului cu temperaturi negative. Realizând cercetări în diferite condiţii experimentale s-aobţinut distribuţia a mai multor genotipuri de grâu, procentul de germinare a cărora după o doză specifică a şocului cu temperaturi negative se distribuia între 25 şi 75 procente. Ca urmare a fost demonstrat că cu ajutorul acestei metode accelerate este posibilă divizarea genotipurilor de grâu după rezistenţa lor primară (fără includerea proceselor de adaptare care se petrec în ontogeneză) la ger. Din datele obținute se poate concluziona: A fost demonstarat, că durata de 36 ore de îmbibare a seminţelor de grâu în apă la temperatura +4oC este optimală pentru a iniţia desfăşurarea proceselor de germinare a lor în condiţii optimale; S-a stabilit, că incubarea seminţelor îmbibate timp de 8 ore la temperatura de -8oC dă posibilitatea de a repartiza diferite genotipuri de grâu în conformitate cu rezistenţa lor primară la ger.

55 BIOSYNTHETIC ACTIVITY OF Spirulina platensis (Nordst) GEITL CNMN CB-02 UNDER THE ACTION OF HIGH CONCENTRATIONS OF SILVER (Ag) AND GOLD (Au) NANOPARTICLES

1Rudi L., 1Chiriac T., 1Cepoi L., 1Djur S., 2Rotari I., 2Plângău E., 2Tașca I., 1Valuța A., 1Miscu V., 1Dumbrăveanu V. 1Institute of Microbiology and Biotechnology, Chișinău, Republic of Moldova 2Doctoral school Biological Sciences, State University „Dimitrie Cantemir”, Chisinau, Republic of Moldova e-mail: [email protected]

Nanotechnologies have rapidly migrated from the technical field into biotechnology, creating a new scientific-practical domain - bionanotechnology. Thus, the scope of application of nanoparticles has expanded. The positive effect of nanoparticles on cell growth and metabolism has been demonstrated. Nanoparticles can be an alternative source of trace elements that act as stimulators of biosynthetic activity in cyanobacteria and microalgae. It was studied the action of high concentrations (from 1.0 µM/L to 10.0 µM/L) of AgNPs (5nm) and AuPEGNPs (5nm) in coating of polyethylene glycol on biosynthetic activity of cyanobacterial strain Spirulina platensis CNMN CB-02. AgPEGNPs did not alter the process of protein biosynthesis, their content in biomass clearly oscillated within the normal physiological limits for the given strain. A slight decrease (by about 13%) of protein content occurred in the presence of AuPEGNPs in concentration of 10.0 μM. Carbohydrate biosynthesis in spirulina was positively influenced by both AgNPs and AuNPs. The highest increase in carbohydrate content occurred at 1.25 μM and 5 μM concentrations of AgPEGNPs (with 33-49%) and 3.75 μM and 10.0 μM concentrations of AuPEGNPs (with about 90%). The significant increase of carbohydrate content in spirulina biomass, on a relatively normal amount of proteins, indicated on changing the direction of biosynthetic processes towards the formation of carbon reserves in order to stabilize the membrane structural components. Phycobilins are biomass components that react to compounds with a pronounced toxic effect by drastically reducing their content into biomass. Phycobilin content was altered less evident under AgPEGNPs action, indicating the lack of toxic effect of these nanoparticles on spirulina biomass. Phycobilin content was reduced under the action of AuPEGNPs, indicating their toxic effect on spirulina biomass. The synthesis of chlorophyll a and β-carotene had a different response to the action of high concentrations of applied AgPEGNPs and AuPEGNPs. Thus, the chlorophyll content varied between 0.71 and 0.93% in biomass, being significantly reduced (except for 10.0 μM concentration that kept the chlorophyll at the control level). The levels of β-carotene synthesis ranged from 0.17 to 0.24% for AgPEGNPs (1.0-5.0 μM/L). These increased by about 17% at 10.0 μM/L concentration of AgPEGNPs. In the case of AuPEGNPs, β-carotene content was reduced by about 26% (within 2.5-5.0 μM/L). Concentrations of 1.0 and 1.25 μM AuPEGNPs reduced the content of chlorophyll a, but maintained the level of β-carotene in biomass. By these changes, spirulina responded promptly to stress caused by high concentrations of nanoparticles. A similar picture of β-carotene oscillations was also determined for AuPEGNPs. In the presence of AuPEGNPs (10.0 μM/L) an increase with 34% in β- carotene content was determined on the background of normal chlorophyll values. Lipid content did not change significantly under the action of AgPEGNPs. The content of lipid oxidation end products determined increasing MDA values by 44-70%. Oxidative degradation of lipids indicated on the accumulation of reactive oxygen species as a result of the toxic effect caused by high concentrations of AgPEGNPs. Under the action of AuPEGNPs, lipid content decreased by about 20% and the level of oxidation end products of these components increased by up to 70% depending on the applied concentration.

56 Spirulina (Arthrospira) platensis – SURSĂ DE NUTRACEUTICE

1 1 1 1 2 1 Rudic Valeriu , Chiriac Tatiana Rudi Ludmila , Cepoi Liliana , Rotari Ion , Djur Svetlana 1Institutul de Microbiologie and Biotechnologie, Chișinău, Republica Moldova 2Școala doctorală „Științe biologice”, Universitatea de Stat „Dmitrie Cantemir”, Chișinău, Republica Moldova e-mail:[email protected]

Progresul rapid al ultimilor ani a afectat scenariul alimentar, implicând apariția mai multor noi produse, astfel ca nutraceuticele. Prin natura lor hibridă, plasate între alimentele obișnuite și medicamentele, nutraceuticele au influențat profund situația în domeniu care este una complexă, dinamică și supusă modificărilor și interpretărilor noi. Nutraceuticele și-au ocupat ferm pozițiile în consumul uman prin oportunitatea fundamentală pentru menținerea sănătății și ameliorarea stilului de viață. Microalgele și cianobacteriile constituie în prezent un enorm potențial tehnologic (de la alimente la biodiesel) în expansiune rapidă pe mapamond. Datorită compoziției chimice valoroase – un mix complex de minerale, vitamine și produse primare și secundare, acestea oferă un spectru larg de posibile aplicații și utilizări pentru organismul uman - de la proprietăți nutriționale până la cele de antioxidanți, anti-îmbătrânire, imunomodulatori, antiaterogeni, antivirali, antimicrobieni, etc. Cianobacteria Spirulina (Arthrospira) este, timp de peste treizeci de ani, lider în producere și comercializare pentru utilizări care includ: hrana pentru pești și animale, suplimentele de vitamine, coloranții alimentari, produsele alimentare. De-a lungul itinerarului său în calitate de aliment și supliment alimentar, Spirulina (Arthrospira) a asistat diverse domenii ale alimentației, iar progresul impresionant în domeniul științelor sănătății a scos în prim plan valoarea componentelor sale biologic active în calitate de compuși funcționali cu beneficii asupra sănătății. Tulpinile Spirulina platensis CNMN–CB 01, Spirulina platensis CNMN–CB 02 și Spirulina platensis CNMN-CB-11 sunt trei dintre obiectele biotehnologice de interes „industrial”, care au demonstrat oportunitatea obținerii pe cale biotehnologică a compușilor săi cu rol nutracetic: nutritiv și crucial în menținerea sănătății și documentat în studiile din ultimele decenii. Pentru tulpinile menționate au fost elaborate medii cu o compoziție echilibrată a macro- și micronutrienților, au fost stabiliți parametrii optimali de proces, astfel ca pH-ul mediului, iluminarea și temperatura de cultivare în condiții tehnologice. În condiții controlate de creștere s-a demonstrat labilitatea înaltă a proceselor metabolice la spirulină, s-a confirmat posibilitatea modificării căilor biosintetice și au fost stabiliți vectorii de dirijare în scopul acumulării a compușilor cu rol funcțional, dar şi a bioelementelor cu efecte sinergiste acestora ca componente efective, amplificând valoarea nutraceutică a biomasei. Au fost stabilite condițiile și create modelele de evitare a stresului oxidativ indus de condițiile tehnologice. Toate acestea au constituit elementele – cheie ale procedeelor noi elaborate de obținere prin sinteză orientată a compușilor din spirulina cu rol de nutraceutice, astfel ca proteinele, polizaharidele, lipidele, ficobiliproteinele, acizii grași polinesaturați etc. Au fost dezvoltate tehnici mai puțin exigente și necostisitoare de extracție și purificare cu aplicarea solvenților non – toxici pentru a reduce costurile de producție, dar și pentru a asigura inofensivitatea compușilor nutraceutici cu acțiune target. Studiile efectuate asupra tulpinilor cianobacteriene Spirulina platensis CNMN–CB 01, Spirulina platensis CNMN–CB 02 și Spirulina platensis CNMN-CB-11 au condus la elaborarea unor tehnologii complexe inovative care asigură obținerea prin extragerea treptată dintr-o singură sursă/ materie primă, în cazul nostru din biomasa de spirulină a compușilor nutraceutici.

57 THE HERITABILITY OF THE CALLUSOGENESIS OF COMMON WHEAT UNDER THE INFLUENCE OF Drechslera sorokiniana METABOLITIES

Sashco Elena Institute of Genetics, Physiology and Plant Protection, Chisinau, Republic of Moldova e-mail: [email protected]

The common autumn wheat (Triticum aestivum L.) exhibits a relatively high ecological plasticity and is one of the most widespread cultivated grasses. D. sorokiniana is a soil and seed borne pathogen and is considered the most important pathogen of wheat in warmer areas of the world. The pathogen has been largely established on various cereal crops in Bulgaria, Romania, but also in weather conditions from Republic of Moldova. Plant breeding resistant to biotic stressors addresses the increase in recurrent hybrid generations of quantitative resistance that manifests a partial phenotype and is controlled by several genes with moderate or small effects, but effective against all pathogenic strains. In vitro technology can be used both in inducing somaclonal variation and as a screening method, effective approach to detect and select improved offspring resistance, prediction of heterosis, favorable transgressions in breeding programs and improvement of autumn wheat resistance to the D. sorokiniana pathogen. In the present study, genetic analysis of callus induction (%), callus area surface (mm2) and callus fresh weight (mg) were investigated for two inbred lines of common winter wheat Basarabeanca/Moldova 11 (B/M), Moldova/Moldova 3 (M/M) and F1, F2 hybrids populations derived from mutual crosses, using callus derived from apical merestem of the mature embryo in Murashige and Skoog (MS) nutrient medium, supplemented with 50% culture filtrate (CF) D. sorokiniana. In the witness version, the F1 mutual hybrids obtained intermediate values for the characters of the two parents, being shown total dominance for the surface of the callus, but partial dominance – in the case of the callus biomass. The heterogeneity favorable to the average of the parents, but also to the best parent in the case of the surface of the callus phenotype, was exploited when implicating the maternal effect of the parent B/M (8.5% and 4.3%). At the same time, the heterosis relative to the parents average for the callus biomass index was exploited by the paternal factor B/M. The quantitative differences between the calibration frequencies of the two parents were low, attesting the non-significant deviation of the phenotype in the F1 generations, but also the lack of heterosis. In the F2 generation hybrids have been the decrease of the causation index, higher values for the callus surface, but intermediate in the case of the callus biomass in relation to the characters of the two parents. The rate of favorable transgressions was calculated as a standard percentage of individuals from the normal distribution of the F2 population that show superiority to the parent with the highest value in the hybrid combination. The rate of transgressions estimated in the control variant suggests that only in the combination M/M x B/M, so when involving the parent B/M there is the probability of occurrence of lines with the transgressive value of the callus surface index (10.7%), but also callus biomass (6.6%). Under the pressure of the selective factor D. sorokiniana, the parents of B/M and M/M were classified, respectively, in the categories of high resistance (RR) and medium resistance (MR) for the characteristics of the frequency of calusage and the surface of the callus. For the accumulation of callus biomass both parents showed high resistance (RR) (109.2% and 102.4%). In the reaction to CF D. sorokiniana the hybrids of the F1 generation showed intermediate values, but also lower (RR...MS) to the resistance obtained by the parents. Thus, the total dominance, but also the parents dominance with the low values of the character (-0.8...-2.4) led to the lack of heterosis in the F1 descendants. In the F2 generation the amplitude of variation of the calusogenesis characters increased, at the same time in the response to CF the indices of the callus surface and the callus biomass showed high and medium resistance. Transgressive segregation indicates the presence of non-allelic relationships. The rate of favorable transgressions, calculated from the normal distribution of the character of the callus surface (8.0%), but also the value of the indices confirms the involvement of the paternal parent B/M in the valorization of all the characters in the response of the F2 hybrids to CF pathogen D. sorokiniana.

58 INDUCEREA MUTAȚIILOR LA Kniphofia triangularis KUNTH.

Sfeclă Irina, Sîrbu Tatiana Grădina Botanică Națională (Institut) ”Alexandru Ciubotaru”, Chișinău, Republica Moldova e-mail:[email protected]

În procesul de ameliorare a plantelor sunt utilizate diverse metode, inclusiv mutageneza experimentală (Palii A., 2014). Această lucrare cuprinde rezultatele cercetărilor privind inducerea mutațiilor la knifofie prin utilizarea radiației electromagnetice (raze gama - γ). Perspectiva utilizării razelor γ, ca metodă a ameliorării plantelor ornamentale, este reflectată în lucrările multor cercetători (Sîrbu T., Manole A., Cernei E., și alții). Mutabilitatea plantelor variază în funcție de perioada ciclului ontogenetic în care se tratează cu radiație. Cea mai comună, simplă și comodă metodă de iradiere este considerată tratarea în perioada embrionară, etapa latentă (sămânță) (Каушанский Д., Березина Н., 1975). Kniphofia triangularis Kunth., obiectul acestui studiu, reprezintă plante erbacee, perene, hemicriptofite, mezofile, rizomifere, înalte de până la 1,4 m. Caracteristic acestei specii este decorativitatea frunzelor și a florilor, fapt ce permite utilizarea ei în arta peisajeră și cea buchetieră. Paralel cu decorativitatea accentuată, determinată de grația și cromatica inflorescențelor, knifofia posedă și alte calități de valoare, cum ar fi: plantă meliferă, posibilități de a extrage antrachinone, flavonoide și alcaloizi (Sfeclă, 2017). Experiența a fost inițiată în anul 2009. Ca material pentru cercetare au servit semințe de knifofie colectate în anul precedent. Masa uscată a 1000 de semințe constituie 2,413 g. Sursa fluxului de raze γ a servit instalația RXM-20, izvorul ionizant 60Co, cu intensitatea de 1000 R/min. Loturi a câte 100 semințe fiecare, în trei repetări, au fost tratate cu următoarele doze de radiație (variante): martor; 50 Gy; 100 Gy; 150 Gy; 200 Gy; 300 Gy. Ca martor au servit loturi de semințe netratate. Procentul de germinare și vivacitatea plantulelor a fost determinată în teren protejat, cu condiții de umiditate și temperatură constante. Semințele au fost semănate în lădițe cu amestec din pământ de țelină, turbă neagră și nisip (3:2:1). Semințele tratate cu doza 50 Gy au început să germineze la a 18-a zi de la încorporare în sol. Două zile mai târziu au răsărit plantule din semințele netratate și cele tratate cu dozele 100 și 150 Gy. În decursul următoarelor 30-35 zile au fost înregistrate datele privind răsarirea plantulelor după cum urmează: martor – 54%; 50 Gy – 25%; 100 Gy – 21,6%; 150 Gy – 7%; 200 Gy – 0%; 300 Gy – 0%. Dozele de 200 şi 300 Gy s-au adeverit a fi letale pentru seminţele de K. triangularis. În momentul când fitoindivizii au trecut în etapa juvenilă (rozeta prezintă 2-3 frunze), a fost determinată vivacitatea plantelor. Aceasta constituie ponderea exemplarelor stadial dezvoltate din numărul total de semințe germinate: martor – 98%; 50 Gy – 90,6%; 100 Gy – 87,6%; 150 Gy – 95,2%. Chiar din primele etape ale programului ontogenetic au fost observate deosebiri esențiale între indivizii dezvoltați din semințe neiradiate și cele iradiate cu doza 100 și 150 Gy, printre care: extinderea etapelor plantulă și juvenilă ale perioadei pregenerative; lățimea frunzelor aproape dublă față de martor; martorul prezintă margine a frunzei serulată, exemplarele provenite din semințe tratate au marginea frunzei întreagă până la pronunțat dințată. Din anul 2016 plantele au trecut în perioda generativă. Ca rezultat al studiului putem concluziona, că dozele optime pentru inducerea mutațiilor la knifofie este de 100 și 150 Gy. Din totalitatea exemplarelor obținute din semințele tratate a fost selectată o formă cu caractere decorative deosebite, care prezintă următoarele devieri de la specia tip: lungimea tijei florale – 40-45 cm/ martor – 100-120 cm; lungimea inflorescenței 7-8 cm/ martor – 20-25 cm; culoarea frunzei verde/ martor – verde-glaucă; culoare butonului floral este roșu/ martor – cărămiziu; culoarea florii este galben-oranj/ martor – galben-verziu. Bibliografie: Palii A., Ameliorarea plantelor. Tip. ”Foxtrot”, Chișinău, 2014, 216 p. Каушанский Д., Березина Н., Эффективность предпосевного облучения семян. Из. Россельхозиздат, Москва, 1975, 93 с.

59 MEDII DE PROTECŢIE ÎN BAZA SUBSTANȚELOR DE ORIGINE BIOLOGICĂ PENTRU LIOFILIZAREA MICROORGANISMELOR

Sîrbu Tamara, Moldovan Cristina, Țurcan Olga, Burțeva Svetlana., Bîrsa M. Institutul de Microbiologie și Biotehnologie, Chișinău, Republica Moldova e-mail:[email protected].

Activitatea de cercetare în cadrul Colecției Naționale de Microorganisme Nepatogene (CNMN) din R. Moldova se axează pe conservarea și păstrarea genofondului microbian autohton, extinderea colecției de microorganisme cu potential înalt de sinteză a substanțelor bioactive, dar și îmbunătățirea metodelor pentru stabilizarea și menținerea proprietăților și caracterelor inițiale a tulpinilor de referință. Metoda de bază utilizată pentru conservarea microorganismelor în CNMN este liofilizarea. Un rol important în procesul de liofilizare, pentru viabilitatea și stabilitatea proprietăților inițiale ale culturilor, îi verine mediului de protecție utilizat. Scopul cercetărilor: Selectarea mediilor de protecţie în baza substanțelor de origine biologică pentru liofilizarea tulpinilor de microorganisme. Ca obiect de studiu au servit: (1) - 3 tulpini de microorganisme din CNMN selectate ca potențiali distructori POP: Penicillium sp.11; Streptomyces sp. 205 și Bacillus sp. 2; (2) 2 extracte de origine cianobacteriană cu potențial lioprotector (BioR și Psh*ZnS). Pentru obţinerea materialului biologic supus liofilizării tulpinile au fost cultivate în tuburi de sticlă, Penicillium sp. 11 și Streptomyces sp. 205 pe mediul agarizat Czapek cu glucoză, timp de 7- 14 zile, la t°= +30°C și respectiv +27oC [Гаузе 1983, Филиппова 2007], iar tulpina Bacillus sp. 2 timp de 48 la +350C. Pentru liofilizare au fost utilizate tulpinile în faza staţionară de creştere. În calitate de mediu protector a servit: pentru tulpina Penicillium sp 11 – lapte degresat+7 % glucoză; Streptomyces sp. 205 - gelatină 2.5% + glucoză 7.5%; Bacillus sp. 2 - lapte degresat + 12% zaharoză (mediul martor) şi variantele acestora, utilizând în calitate de supliment extractul de aminoacizi şi oligopeptide din cianobacteria Arthrospira (Spirulina) platensis CNMN-CB-02 (BioR și Psh*ZnS) în diverse concentrații, (%): 1, 5, 10. Liofilizarea a fost efectuată la liofilizatorul „LABCONCO” FreeZone Plus 6 Liter Cascade Console Freeze Dry System (SUA), la temperatura condensorului de -88 ... -94ºC, în vid 6-7 Pa, temperatura de precongelare pentru Penicillium sp. 11 și Streptomyces sp. 205 a fost de -50°C, iar pentru tulpina Bacillus sp. 2 de -20oC, timp de 12 ore. A fost determinat titrul suspensiei supuse liofilizării și viabilitatea culturilor pînă la și după -1 - liofilizare.Viabilitatea culturilor a fos calculată conform formulei c % = (logUFCml fin / logUFCml 1 -1 in) × 100% unde logUFC ml in este logoritmul numărului unităţilor formatoare de coloniil înainte de -1 liofilizare, logUFC ml fin - logoritmul numărului unităţilor formatoare de coloniil după liofilizare sau păstrare şi c – viabilitatea culturilor în procente. (Jesús Muñoz-Rojas et all, 2006). Toate experienţele vor fi efectuate în minim 3 repetări. Calculul indicilor statistici a fos efectuat prin utilizarea programului MS Excel 2010. Rezultatele obținute în cercetările date au demonstrat că, substanțele de natură cianobacteriană (BioR și Psh*ZnS) au acționat diferit asupra microorganismelor luate în studiu. Substanțele de origine cioanobacteriană suplimentate în mediile protectore ale tulpinilor menționate au acționat în felul următor: viabilitatea tulpinii Penicillium sp. 11 a diminuat după liofilizare, iar viabilitatea tulpinii Bacillus. sp. 2 s-a menţinut la limita probei martor, iar concentraţiile mici (1%) au sporit numărul de celule viabile cu până la 5%. Rezultate mult mai înalte au fost stabilite la tulpina Streptomyces sp. 205. Suplimentat cu BioR cele mai bune rezultate au fost obținute în varianta cu concentrația de 1,0% (viabilitatea fiind mai mare față de martor cu cca. 17,0%). Viabilitatea maximală a tulpinii studiate a fost înregistrată în cazul utilizării Psh*ZnS în concentrația de 5,0% (viabilitatea fiind mai mare față de martor cu cca. 19,0%). Astfel, a fost demonstrat că, substanțele de origine cianobacteriană BioR și Pskh*ZnS utilizate ca lioprotectori influenţează diferit asupra viabilității culturilor studiate: pot acționa inhibitor (Penicillium sp. 11), neutru (Bacillus sp. Nr. 2) sau stimulator (Streptomyces sp 205). Deci aceste substanțe pot servi ca lioprotectori pentru conservarea unor microorganisme.

60 INFLUENȚA RADIAŢIEI GAMA ȘI CULTURII IN VITRO ASUPRA PROCESELOR MORFOGENETICE LA TOMATE Solanum lycopersicon

Sîromeatnicov Iulia, Cotenco Eugenia, Lîsii Dana, Ștefăneț P. Institutul de Genetică, Fiziologie și Protecție a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail:[email protected]

Din datele prezentate de unii autori, pentru diferite nivele de organizare а materialului iniţial (ţesut, celule, organism integru) doza efect a radiațiilor ionizante se deosebeşte esenţial, cu cât nivelul de organizare a materialului iniţial este mai avansat, cu atât radiorezistenţa este mai sporită. O metodă efectivă de sporire а variabilităţii genetice este mutageneza indusă de factorii fizici, prin acestă metodă s-au obţinut succese remarcabile în ameliorarea plantelor de cultură, inclusiv și la tomate. Actualmente mutageneza indusă şi cultura in vitro sunt larg răspândite în cercetările de genetică şi ameliorare a tomatelor. Particularitățile mutagene a razelor gama asupra organismelor vii au deschis o cale importantă de utilizare în procesul de ameliorare pentru obținerea materialului divesrificat. În cercetările științifice realizate s-au iradiat semințe de tomate cu doze de 100; 150; 200 și 250Gy și au fost amplasate pe medii aseptice de bază Murashige - Skoog (1962), pentru obținerea materialului inițial steril. După 12 zile de inoculare din plantulele sterile obținute s-au derivat segmente din frunze și hipocotil, inoculându-se pe mediul de cultură pentru inițierea proceselor morfogenetice de calusogeneză și embriogeneză somatică. S-a demonstrat, că capacitatea de formare a calusului obținut din segmente din frunze la acțiunea razelor gama au influențat semnificativ în diapazonul 100-200Gy. Concomitent cu majorarea dozelor razelor gama, masa calusală la genotipul L.40 diminuează față de varianta control cu 7,7%, la iradierea cu 250Gy cu 26,8%. Acumularea biomasei calusale la linia 41 în varianta martor a fost mai majoră față de variantele iradiate cu 14,2%. Influența radiației ionizante de 100-150Gy asupra formării calusului din segmente de hipocotil a prezentat pentru linia 40 efect stimulator comparativ cu varianta control cu 19,5%-100Gy și cu 9,2% la iradierea cu 150Gy. Studiul, privind influența razelor gama în doze de 200-250Gy a demnstrat o diminuare a masei calusale. În rezultatul cercetărilor științifice efectuate, două linii (41 și 42) au realizat valori maxime față de variantele experimentale iradiate. Calusul obținut а fost de culoare verde-deschis, cu o consistență de tip mixt. Ulterior s-а observat formarea de zone meristematice cu o dezvoltare neuniformă a unor plantule cu tulpini groase de culoare verde închisă. Este cunoscut faptul că, datorită efectului de ionizare este determinată modificarea procesului de expresie şi interacţiune а genelor modificatoare, care inhibă sau stimulează unele procese fiziologice. S-а stabilit și efectul dozelor gama asupra capacității de intensificare a embriogenezei somatice și regenerării de plantule. În rezultatul evaluării acestor indici s-a demonstrat, că dozele încadrate în limita 100-150Gy au un efect stimulator asupra procesului de embriogeneză somatică. Embriogeneza somatică la liniile luate în studiu a atins cotele 10,5 embrion/explant la doza de 100Gy, martorul fiind de 6,1 embrion/explant (58,1%). Acest fapt prezintă interes deosebit, deoarece embriogeneza somatică constituie cea mai eficientă cale de majorare a randamentului de multiplicare а plantelor in vitro, pornind de la calusul friabil rezultat din segmente de hipocotil. În concluzie s-a evidențiat faptul că, procesele de calusogeneză și organogeneză la tomate, se diferențiază în funcție de mediile de cultură și raportul reglatorilor de creștere utilizați, acest fapt este bine reflectat în diferența explantelor din segmente din hipocotil și frunze, derivate din vitroculturi germinate din semințe iradiate. În așa mod, selectarea corectă a materialului biologic, în vederea iniţierii de vitroculturi vegetale, reprezintă un factor decisiv, din punctul de vedere al calităţilor naturale pe care le deţin celulele viitorilor fitoinoculi, în marcarea unei reacții pozitive a acestora la regimul de vitrocultură şi tratamentele aplicate, întrucât procedurile de asepsizare pot afecta profund vitalitatea şi capacitatea regenerativă a celulelor sau a ţesuturilor cultivate in vitro.

61 DEȘEURILE DE LA PRODUCEREA BĂUTURILOR ALCOOLICE – SURSE IMPORTANTE DE MATERIE ORGANICĂ

Siuris A. Institutul de Pedologie, Agrochimie și Protecție a Solului „Nicolae Dimo”, Chișinău, Republica Moldova e-mail: [email protected]

În calitate de surse locale de îngrășăminte organice pentru refacerea fertilității solurilor pot servi deșeurile de la producerea băuturilor alcoolice. În două experiențe de câmp la Stațiunea Tehnologico-Experimentală „Codru” în anii 2011-2018 au fost testate câteva deșeuri necercetate până în prezent în Republica Moldova, care se deversează de la unitățile de producere a băuturilor alcoolice: drojdiile de vin, vinasa (de la fabricile vinicole) și borhoturile de cereale (de la întreprinderile de producere a alcoolului etilic). Deșeurile menționate își au originea din agricultură, deci toate elementele ce se conțin în ele au fost luate din sol. Astfel, echitabil față de sol ar fi faptul că ele să se returneze solului prin fertilizare. Cantitățile deșeurilor luate în studiu alcătuiesc circa 100 mii tone anual. În aceste deșeuri se conțin 28 mii tone de substanță organică, 180 tone de azot, 82 tone de fosfor și 257 tone de potasiu. Deșeurile de la producerea băuturilor alcoolice, cu conținutul lor de elemente nutritive și imensa cantitate de materie organică, trebuie să fie incluse în circuitul agricol prin folosirea lor ca îngrășământ. Deșeurile încorporate în sol ca îngrășământ contribuie la îmbunătățirea fertilității cernoziomului cambic și creșterea productivității culturilor agricole. Fertilizarea cu deșeuri de la producerea băuturilor alcoolice a condus la majorarea semnificativă a conținutului de materie organică (0,15-0,39%). S-a constatat o sporire semnificativă a azotului nitric (0,47-5,50 mg/kg), a fosforului mobil (0,20-0,64 mg/100g) și potasiului schimbabil (6,0-15,0 mg/100g). Deșeurile încorporate modifică esențial conținutul de săruri solubile, reacția solului, dar nu însă și compoziția extractului apos. Stabilitatea indicilor salini și a reacției actuale a cernoziomului cambic la acțiunea deșeurilor se explică prin capacitatea de tamponare înaltă a solului. Aplicarea drojdiilor de vin asigură un spor semnificativ al producției de struguri (Sauvignon) în medie pe opt ani de 1,4-2,4 t/ha. Sporul de recoltă la încorporarea vinasei a fost în medie pe opt ani de 1,0-1,1 t/ha. Borhotul de cereale aplicat în sol a determinat obținerea unor sporuri medii de producție vegetală pe șapte ani de 1200-1600 kg/ha unități cereale sau 50-65% fașă de martorul nefertilizat. Compoziția fizico-chimică a vinurilor obținute din soiul Sauvignon corespunde cerințelor înaintate față de vinurile de calitate. Vinurile cercetate se caracterizează prin calități organoleptice bune și după tipicitate corespund actelor normative în vigoare. Fertilizarea cu borhot de cereale majorează considerabil masa recoltată de proteină și grăsime. Comparativ cu plantele de referință masa colectată de proteină în șapte ani s-a ridicat cu 115-927 kg/ha sau cu 86-97%. În baza cercetărilor sunt elaborate tehnologii inovaționale de valorificare a deșeurilor de la producerea băuturilor alcoolice ca îngrășăminte organice locale. Tehnologiile pot fi utilizate atât de micii producători, cât și de unitățile specializate cu profil vini-viticol și de cultivare a plantelor de cultură anuală. În urma aplicării acestor tehnologii se obțin beneficii financiare, demne de luat în calcul, beneficii datorate reducerii costurilor de procurare a îngrășămintelor chimice. Prin aplicarea tehnologiilor menționate se va diminua substanțial nivelul de poluare al mediului și al producției de struguri, vinuri, cereale. Aplicarea tehnologiilor este recomandată și datorită efectului ecologic pe care îl au îngrășămintele organice, manifestat prin numărului redus de lucrări a solului și îmbunătățirea însușirilor fizico-chimice a acestuia.

62 VIABILITATEA UNOR TULPINI DE BACTERII LA CULTIVARE ÎN PREZENŢA NANOPARTICULELOR DE FIER ŞI A TRIFLURALINEI

Slanina Valerina, Batîr Ludmila Institutul de Microbiologie şi Biotehnologie, Chișinău, Republica Moldova e-mail:[email protected]

Pentru remedierea zonelor contaminate cu substanţe nocive, ca poluanţii organici persistenţi, biotehnologiile sunt cele mai preferate datorită siguranţei lor ecologice, costurilor reduse şi eficienţei înalte, care au fost demonstrate în mod repetat în soluţionarea diverselor probleme ecologice. Utilizarea microorganismelor în degradarea, detoxifierea, mineralizarea sau transformarea poluanţilor din mediul ambiant este cunoscută sub denumirea de bioremediere. Bioremedierea este o strategie de utilizare a microorganismelor pentru transformarea completă sau parţială a poluanţilor toxici în produse finale inofensive sau cu toxicitate şi mobilitate scăzută. Evaluarea potenţialului nanotehnologic în bioremedierea solului contaminat cu poluanţi organici persistenţi (POPs) ar fi una din metodele eficiente de decontaminare. În acest sens cercetările efectuate de noi au iniţiat cu testarea nanoparticulelor oxidului de fier Fe3O4, care în ultimii ani au demonstrat că posedă capacitate de distrugere a POPs. Cercetările noastre s-au axat pe determinarea capacităţii NP oxidului de fier, cu dimensiuni variabile între 50 – 70 nm, de a reduce toxicitatea trifluralinei (TF) (unul dintre POPs) prin intermediul microorganismelor (bacteriilor din sol), în vederea sporirii eficienţei de remediere a solului dar şi a estimării riscului utilizării NP în condiţiile solurilor Moldovei. Ca obiect de studiu au servit două tulpini de bacterii Bacillus subtilis CNMN-BB-01 şi Bacillus cereus var. fluorescens CNMN-BB-07 izolate din solurile R. Moldova şi depozitate în Colecţia Naţională de Microorganisme Nepatogene din cadrul Institutului de Microbiologie şi Biotehnologie ca agenţi cu activitate antifungică şi antimicrobiană înaltă. În calitate de poluant organic persistent a servit trifluralina (TF), iar ca nanomateriale au fost utilizate nanoparticulele oxidului de fier Fe3O4, cu dimensiuni variabile între 50 – 70 nm, sintetizate de către colaboratorul ştiinţific Tatiana Guţul, Institutul de Inginerie Electronică și Nanotehnologii „D. Ghiţu”. Investigaţiile întreprinse asupra cultivării tulpinii Bacillus subtilis CNMN-BB-01 în prezenţa a 300 şi 500 mg/L TF şi diferite concentraţii de NP (25, 50 şi 100 mg/L) demonstrează că, utilizarea poluantului în comun cu NP oxidului de fier, posedă activitate mai toxică asupra creşterii şi dezvoltării bacteriei date, decît în cazul utilizării TF în lipsa NP. Astfel, odată cu administrarea concomitentă a POPs şi NP are loc scăderea viabilităţii tulpinii Bacillus subtilis CNMN-BB-01, valorile fiind mai mici cu pînă la 6,7% – 10,4% faţă de probele cu TF sau cu pînă la 15,0% faţă de proba martor. Rezultatele obţinute asupra cultivării tulpinii Bacillus cereus var. fluorescens CNMN-BB-07 în prezenţa concentraţiilor înalte (300 şi 500 mg/L) de POPs, au demonstrat şi în acest caz că viabilitatea se reduce cu pînă la 15,0% faţă de proba martor, ceea ce putem constata că şi această tulpină este destul de rezistentă la concentraţiile înalte de toxicant. Administrarea concomitentă a TF cu diferite concentraţii de NP duce la scăderea viabilităţii odată cu majorarea concentraţiei NP cu cca 21,0% faţă de proba martor. În rezultatul testării acţiunii NP oxidului de fier, ce cuprind dimensiuni între 50 – 70 nm, privind reducerea toxicităţii TF în prezenţa microorganismelor am constatat că, prezenţa în mediul de cultivare a NP oxidului de fier cu dimensiuni ce cuprind valori de la 50 – 70 nm, nu duc la reducerea toxicităţii poluanţilor organici persistenţi. Astfel, ulterior vor fi întreprinse şi alte cercetări în acest domeniu unde vom utiliza NP cu dimensiuni şi mai mici pentru a determina efectul scontat.

63 IMPACTUL SURSELOR DE VARIAȚIE (INFECȚIE VIRALĂ, EXPLANT) ÎN INDUCEREA VARIABILITĂȚII LA SOMACLONELE SC0 DE TOMATE

Smerea Svetlana Institutul de Genetică, Fiziologie și Protecție a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail:[email protected]

Regeneranții obținuți în baza diferitor sisteme citopatice prin procedee biotehnologice (cultura de țesuturi, cultura in vitro a embrionilor imaturi) pot servi drept surse importante pentru obținerea și selectarea genotipurilor cu însușiri valoroase, inclusiv potențial defensiv sporit față de agenții virali. Studiul de față reprezintă evaluarea biomorfologică a somaclonelor primare de tomate (SC0), generate prin culturi de calus din explante de frunză, sepale și embrioni imaturi prelevare de la plantele infectate cu virusuri (Virusul aspermiei tomatelor -VAT și Virusul mozaicului tutunului - VMT) a 4 genotipuri de tomate (soiuri deținătoare de gene de rezistență la VMT: Craigella (Tm- 1/Tm-1), Craigella (Tm-22/Tm-22); forma spontană ce manifestă toleranță S.pimpinellifolium și soiul local susceptibil Elvira). Scopul constă în estimarea impactului surselor de variație (infecție virală, explant) în inducerea variațiilor somaclonale. Regeneranții obținuți prin culturi in vitro au fost aclimatizați și cultivați în condiții de solarii în a.2016. A fost evaluat aspectul morfologic al plantelor în diferite faze ontogenetice. Evaluările biometrice au vizat talia plantei, numărul de noduri pe tulpina principală, numărul de inflorescențe pe axul principal, poziția I ciorchine, numărul de flori/fructe pe ciorchina I, II și III, legarea fructelor, parametrii frunzei (lungimea, lățimea, numărul de segmente) și indicii fructului (masa, forma, grosimea pericarpului, diametrul mezocarpului, numărul de loje). Pentru fiecare variantă au fost utilizate câte 15-20 plante. Datele au fost prelucrate statistic cu pachetul de programe STATGRAPHICS Plus2.1, prin aplicarea testului Anova și Student şi opțiunile Excel.Evaluarea aspectului morfologic al plantelor în diferite faze ontogenetice a scos în evidență plante deținătoare de mutații ce determină forma tulpinii, amplasarea frunzelor pe tulpină, forma frunzelor și segmentelor foliare, ramificarea la nivelul vârfului de creștere, tipul inflorescenței și componentelor florii, amplasarea inflorescențelor pe axul principal, forma fructului. Totodată somaclonele lotului experimental obținute de la plantele infectate cu VAT a genotipului Craigella (Tm-1/Tm-1), în funcție de originea explantului, au manifestat diferență după tipul de creștere a plantei: determinat atestat la somaclonele derivate din explante de sepale și semideterminat - la cele obținute din explante de frunză. Analiza monofactorială a acestui lot a stabilit o contribuție procentuală semnificativă a explantului asupra variațiilor parametrilor: talia plantei (79,84%, P≤0,001); număr de segmente foliare mici (23,02%, P≤0,001), mijlocii și mari (29,75 și 25,90%, P≤0,05); lungimea (39,53%, P≤0,01) și lățimea frunzei (53,08%, P≤0,001); număr de inflorescențe pe axul principal (31,84%, P≤0,05) și număr de noduri pe tulpina principală (22,72%, P≤0,05). Impactul interacțiunii factorilor infecție virală-tipul explantului a fost analizat în cadrul patosistemei virus (VAT/VMT) - explant (frunză/sepale) a somaclonelor Craigella (Tm-1/Tm-1) după indicii fructului. În baza testului ANOVA s-a evidențiat o influență puternică a infecției virale asupra grosimii pericarpului (F=18,54, P≤0,001), masei fructului (F=8,31, P≤0,01) și diametrului mezocarpului (F=4,65, P≤0,05). Interacțiunea virus-explant determină variații semnificative ale grosimii pericarpului (F=4,10, P≤0,05) și numărului de loje (F=5,86, P≤0,05), iar tipul explantului - respectiv doar a grosimii pericarpului (F=4,10, P≤0,05). În cadrul soiului susceptibil Elvira au fost analizați indicii fructului la somaclonele obținute din explante de frunză a loturilor experimentale (VAT, VMT) față de lotul martor derivat de la plantele sănătoase. S-a constatat că, contribuția procentuală a infecției virale este semnificativă în variația diametrului mezocarpului (42,78%, P≤0,001), masei fructului (41,93%, P≤0,001) și grosimii pericarpului (9,61, P≤0,05). În concluzie, variabilitatea somaclonală indusă la tomate, prin culturi de calus din explante de frunză, sepale și embrioni imaturi, prelevate de la plante infectate cu virusuri, este determinată de originea citopatică a explantelor, iar impactul surselor de variație este specific parametrului analizat al plantei sau indicelui fructului luat în studiu.

64 INFLUENŢA HORMONILOR DE CREŞTERE ASUPRA PROCESULUI DE ORGANOGENEZĂ IN VITRO LA Lycium barbarm L.

Tabăra (Gorceag) Maria Grădina Botanică Națională (I) Alexandru Ciubotaru, Chișinău, Republica Moldova e-mail: [email protected]

Lycium barbarum L. – goji, devine o specie din ce în ce mai cunoscută și îndrăgită în țara noastră dar și în întreaga Europă pentru proprietățile sale nutraceutice deosebite, aparţinând familiei Solonaceae. Goji este considerat un aliment-medicament în cultura chineză, acest super-fruct este recomandat ca adjuvant în tratamentele contra: diabetului (hipoglicemic), bolilor cardiace (hipotensor, reglare a colesterolului), tuberculozei, pneumoniei infantile, anemiei, debilității generale sau tulburărilor de vedere provocate de malnutriţie. Fructele de goji conțin cantități mari de antioxidanți, carotenoizi, vitamina A, cantități mari de vitamina B si C precum și polizaharide. Aceste fructe au cca. 10% conținut proteic și furnizează 18 aminoacizi diferiți dintre care 8 esențiali. Este bogat în glutationă care este printre cei mai eficienți antioxidanți cu rol în funcționarea optimă a celulelor umane De asemenea, atunci când este asociat cu alţi arbuşti fructiferi, goji are efect anti- aging (de încetinire a îmbătrânirii) prevenind albirea părului, apariţia ridurilor şi a pigmentării pielii. Cultura de celule şi ţesuturi in vitro este o metodă extrem de utilă pentru producerea la scară largă a unui număr mare de plante libere de organisme patogene. Obiectivul principal al prezentului studiu se concentreză în determinarea variantei hormonale optime pentru obținerea unui materialului săditor sănătos și omogen. Cercetările expuse în prezenta lucrare au fost realizate în laboratorul de Biotehnologie și Embriologie a GBNI. În calitate de material biologic au fost utilizat cultivarul Erma, care a fost oferit de Staţiunea de cercetări pomicole din Cluj, România. Au fost prelevate meristeme apicale din teren experimental deschis și seră, prealabil explantele fiind sterilizate conform metodelor optimizate din laborator. Explantele au fost cultivate pe medii de cultură solide realizate după Murashige Skoog, 1962 suplimentate cu diferite concentraţii de citochinina BAP (0,3; 0,5; 0,7 mg/l). S-a analizat atât rata de multiplicare cât și cea de proliferare, iar pentru rizogeneza micropropagulelor a fost testat mediul lichid Murashige-Skoog (MS) în două variante experimentale: 100% şi 50% (înjumătățită canitatea de vitamine, micro-, macroelemente) lipsite de regulatori de creștere. Pe mediul cu o concentraţie diminuată de citochinine BAP 0,3 mg/l a generat un număr mare de lăstari, cu o rată 70 % acestea dezvoltînd lăstari cu frunze mici, de câţiva mm lungime, internoduri scurte. Cele mai bune rezultate s-au obţinut pe mediul MS cu citochinina BAP în concentraţii de 0,5 mg/l, asigurând rate de proliferare mare de 95 % lăstari bine dezvoltaţi. Mărirea concentraţiei de BAP la 0,7 mg/l a mărit rata de multiplicare dar a cauzat deformări în creştere. S-au testat și cantități mai sporite de citochinină (1,0 şi 1,5 mg/l) dar ele provoacă creșteri neregulate ale lăstarului Lăstarii au fost multiplicaţi prin subcultivări periodice pe medii de cultură proaspete, înrădăcinarea acestora realizându-se consecutiv cu procesul de dezvoltare a noilor structuri regenerative. Neoplantulele înrădăcinate au fost aclimatizate cu succes şi plasate în ghivece cu substrat nutritiv de sol, procentul de supravieţuire situânduse în jurul valorii de 85%. Rezultatele cercetărilor efectuate asupra dezvoltării înrădăcinării pe mediu MS 50% se observă o înrădăcinare îndelungată. După 20 de zile doar 16% din explante s-au înrădăcinat. După 30 de zile s-a observat o creştere sporită a procesului de înrădăcinare. Rădăcinile la început sunt scurte şi subţiri. O dezvoltare mult mai amplă s-a observat pe mediu MS 100% suplinit de regulatori de creştere BAP, NAA şi AIA. După 10 zile s-a observat un potenţial de înrădăcinare de 91,6 % de explanţi pe mediu MS 100%+ BAP (0,2mg/l) + ANA (0,1 mg/l), iar după 30 de zile se observă un potenţial de înrădăcinare de 100% la explantele de tip meristematic. Pe celelalte medii potenţialul de înrădăcinare este mai mic.

65 ВВЕДЕНИЕ В КУЛЬТУРУ IN VITRO Adonis vernalis L.

Тимина О.О., Чупрун А.А. Приднестровский Государственный университет, Тирасполь, Республика Молдова e-mail:[email protected]

Adonis vernalis L. еще недавно был широко распространён в Европе, России и в Молдове и является видом с двойным назначением: декоративным и лекарственным и разрешён к медицинскому применению. Растения относятся к ресурсным видам, заготовка которого ведется на основе естественных природных плантаций, которые очень быстро истощаются. В связи с этим в Российской Федерации, в Приднестровье, в Украине, в Молдове и др. странах адонисы внесены в Красные книги со статусом VU, уязвимый вид либо вид, находящийся в опасном состоянии, EN. Востребованность этого лекарственного растения и истощение естественных природных плантаций обуславливают необходимость планируемых исследований. На сегодняшний день очень актуальны биотехнологии на основе клеточных биофабрик по производству лекарств из редких растений в биореакторах. Это могут быть как иммобилизованные суспензионные культуры самого лекарственного растения, так и генно- инженерные конструкции обеспечивающие наработку нужного продукта. В обоих случаях актуальной остается и плантационное выращивание подходящих растений, связанное с наработкой необходимого растительного материала на первых порах для проведения всего объема запланированных исследований. Цель исследований - определение условий введения в культуру in vitro A. vernalis. Задачи исследований: повысить всхожесть свежих семян адониса весеннего и вырастить достаточное количество растительного материала в различных возрастных состояниях для проведения всего объема запланированных исследований; уточнить причины низкой всхожести семян адониса, определив прецизионный состав эмбрионов в многоорешке; определить морфогенную активность эксплантов адониса весеннего в зависимости от возрастного и физиологического состояний. Методы исследований - общепринятые в работе с культурами тканей in vitro. Эксплантами служили: апексы, пазушные почки вегетативных и генеративных побегов, семядоли, гипокотили, почки возобновления. Анализ плодов адониса выявил высокую зараженность семян грибной инфекцией и варьирование семян в многоорешках по размерам и зародышей по стадиям развития. В плодах выделяется две фракции семян: крупные (61%) и мелкие (39%).В крупной фракции семян зародыши находятся на стадии глобулярной (14%), сердечковидной(36%) и торпедовидной (45%). В мелкой фракции отмечается наличие зародышей только в фазе глобулярной (43%) и сердечковидной (57%). Невыравненность стадий развития зародышей обуславливает неравномерную всхожесть и необходимость периода покоя для доразвития зародышей. Для получения гарантированных проростков следует использовать крупную фракцию семян, предварительно обработанную регуляторами роста и протравителями для снятия грибной инфекции. Этапы получения эмбриокультуры состояли из следующих манипуляций: удаление присемянников, вскрытие первичной оболочки, удаления вторичной оболочки, изъятия зародыша и помещение его на питательную среду. Для индуцирования органогенеза извлекали почки возобновления у предварительно стратифицированных растений в генеративном возрастном состоянии. У ювенильных растений вычленяли апексы, пазушные почки из зоны основания, средней и апикальной частей стебля. Морфогенными эксплантами с формированием побегов оказались апексы (47%) и пазушныхе почки из зоны основания (50%). Использование маточных растений в генеративном возрастном состоянии для изъятия эксплантов сопряжено с интенсивным фенолообразованием и последующей некротизацией тканей, поэтому в среду необходимо вводить соответствующие адсорбенты. Для побегообразования оптимальны экспланты ювенильных маточных растений.

66 МОРФОГЕНЕЗ НЕКОТОРЫХ ПРЕДСТАВИТЕЛЕЙ РОДА Pisum L. В КУЛЬТУРЕ IN VITRO 1Тимина О.О., 2Костерин О.Э., 1Касай Л.Н., 3Ротарь В.Ф. 1.Приднестровский государственный университет им. Т.Г.Шевченко, Тирасполь, Республика Молдова, 2.Новосибирский институт генетики и цитологии, Новосибирск, Россия 3. Приднестровский институт сельского хозяйства, Тирасполь, Республика Молдова, e-mail: [email protected]:

Горох - экономически важная культура, занимающая четвертое место в мире среди бобовых. Создание высокоинтенсивных сортов, адаптивных к биотическим и абиотическим стрессорам, остается очень актуальной задачей. Одним из возможных подходов по созданию новых сортов является использование всего потенциала генофонда на инновационной основе, включая мутантный пул. Дикие формы гороха - это перспективные генетические ресурсы не только для преодоления абиотического и биотического стресса, но и лучшей усвояемости белка, которые, однако, мало востребованы и недостаточно изучены. Скрытый генетический потенциал можно выявить в условиях in vitro. Целью настоящей работы является изучение в культуре in vitro коллекционного материала рода Pisum и возможного выявления новых целевых генов, определяющих хозяйственно-ценные признаки овощного гороха. Первоочередными задачами исследований является определение путей морфогенеза и регенерационного потенциала коллекционных образцов в условиях in vitro. Для первичной оценки были взяты дикий горох P. sativum subsp. elatius WG10925, P. fulvum 705, сорт безлисточковый (afaf) овощного гороха Монарх и листочковый сорт Горн. Исследования проводили по традиционной методике, используемой для условий in vitro. Семена дезинфицировались и проращивались на безгормональной среде MS для получения стерильных растений, которые в возрасте двух месяцев использовались для вычленения эксплантов. Эксплантами служили: апексы, узлы с прилистниками, прилистники и листочки, выращиваемые на среде Соболевой (Соболева, 2016) для получения первичного каллуса, который пассировали на этой же среде. Для контроля морфогенеза проводили гистологические срезы с окраской гематоксилин - эозином по общепринятой методике. Через два месяца проводили окончательные учеты. Полученные результаты выявили дифференциацию морфогенеза в зависимости от генотипа в контролируемых условиях in vitro. Все изучаемые генотипы формировали каллус. На гистологических срезах тридцатидневного каллуса выявили хорошо сформированные меристематические зоны, которые, явились центрами формирования развитых побегов через 30 дней. Максимальное количество эксплантов, сформировавших побеги, отмечено у P. fulvum 705 (79%), с наибольшим числом побегов в пересчете на эксплант (3,5 шт.) возможно, за счет характерного для него признака ветвления стебля. Однако, число недоразвитых побегов также значительно (128%), и отсутствовал ризогенез. Экспланты дикого гороха WG10925 сформировали вызревшие (67%) и недоразвитые побеги (138%), с числом побегов на эксплант 1,6 штук. Данный генотип оказался единственным из испытанных, способным к ризогенезу (25%) на среде Соболевой. У эксплантов безлисточкового сорта Монарх способность к формированию побегов оказалась в два раза ниже (37%), у них также отмечалось образование недоразвитых побегов (16%), с минимальным количеством побегов на эксплант (1 шт./эксплант). Экспланты сорта Горн формировали только каллус и недоразвитые побеги. Таким образом, наиболее разнообразен морфогенный потенциал дикаря WG10925, с которым будут проведены более детальные исследования.

67 MICROPROPAGAREA SPECIEI Paulownia elongata PRIN CULTURA IN VITRO Trofim Mariana, Tabăra Maria Grădina Botanică Națională (Institut) Alexandru Ciubotaru, Chișinău, Republica Moldova e-mail: [email protected]

Paulownia, provine din familia de plante Scrophulariaceae, de origine din China, dar cultivată masiv în Vietnam, Japonia şi Koreea. Este populară în ţara sa nativă, China datorită utilizării sale pentru împădurire, plantată de-a lungul drumurilor în calitate de arbore ornamental şi producerea de biomasă. Paulownia este arborele cunoscut şi sub numele de "Copacul Păsării Pheonix", fiind copacul de esenţă tare cu cea mai rapidă creştere. Cultivat în condiţii corespunzătoare, poate atinge o înălţime de 20 m în 3 ani, fiind recoltat pentru cherestea, paulownia este puţin pretenţioasă în ceea ce priveşte calitatea solului, se adaptează uşor la diferitele tipuri de sol şi unica cerinţă este umiditatea excesivă a solului în primii ani după plantare, arborele atingând vârsta de 70-100 de ani și rezistă la temperaturi joase cuprinse între -16-27°C. De asemenea, este o plantă medicinală folosita datorită substanţelor chimice pe care le conţine cu efecte terapeutice, cum ar fi: anti-microbian, anti-viral, anti-hepatic, anti-inflamator, pentru tratamentul tumorilor şi ulcerului. Testările farmacologice au arătat că extractele din fructele de Paulownia pot uşura tusea, astmul şi reduce tensiunea arterială. Conţinutul de azot din frunze, poate fi comparat cu cel al leguminoaselor. Frunzele mari şi pubescente de Paulownia joacă un rol important în purificarea aerului de fum şi particole de praf. Înflorește abundent la sfârșitul lunii aprilie pe parcursul a 30 - 35 zile, cu numar mare de flori cu secreţie abundentă de nectar, polenul de calitate, culorile placute şi parfumul fin al florilor atrag puternic albinele, conferind acestei specii o mare valoare meliferă. Datorită numeroaselor calități prețioase în laboartorul de Biotehnologie și Embriologie a Grădinii Botanice (I) a fost studiată și elaborat protocolul de micropropagare a unor specii și hibrizi de Paulownia ca: Șantong, ST -4, Clon in Vitro - 112. Materialul biologic pentru propagarea in vitro este prelevat de la plante identificate în calitate de plante-donor, urmând pregătirea materialului biologic în vederea inoculării, care se realizează prin: o procedee de sterilizare conform metodei optimizate în laborator; o modelarea inoculilor din explante meristematice pe mediul de cultură nutritiv aseptic; o dimensionarea explantelor meristematice; o detaşarea şi inocularea explantelor în recipientul cu mediul de cultură aseptic. Principalul obiectiv al microclonării este obţinerea unui număr mare de clone în vederea testării. Pentru un pasaj şi un ciclu de dezvoltare sunt necesare, în general, 28 - 30 zile. Multiplicarea vegetativă in vitro s-a realizat prin parcurgerea mai multor etape pînă la produsului final: obţinerea unei plante cu rădăcină viguroasă şi cu frunze bine dezvoltate, capabila sa fie transferată din mediul steril în condiţii ex vitro de adaptare. Aclimatizarea vitroculturilor este una din cele mai anevoioase etape din procesul de producere a materialului săditor prin micropropagare. În aceasta etapă lăstarii înrădăcinați sau cu primordii de rădăcini sunt transferați în amestecuri de substrat nutritiv solid alcătuit din turbă comercială, sol de gazon, mraniță și nisip sau perlită în raport de 1:1:0,5:0,25. Vitroculturile sunt amplasate în locuri special amenajate fie camere de vegetație, solarii, sere sau tuneluri în care sunt asigurate condiții controlate de temperatură, ventilație și lumină. Pe parcursul aclimatizării are loc dezvoltarea normală a neoplantulelor și dobândirea de caractere fiziologice care le asigură supravețuirea în condiții de mediu necontrolate artificial. Principalul factor de mediu care trebuie controlat în mod artificial în faza de aclimatizare este umiditatea aerului, pentru a preveni deshidratarea plantulelor, constituind 95-100%, cu reducere treptată pe măsura dezvoltării plantulelor pe parcursul fazei I de aclimatizare. Fiind create condiții corespunzătoare pentru aclimatizarea vitroculturilor de Paulownia putem obține 85-90% de plante aclimatizate, care se recomandă de a fi plantate în teren neprotejat. cu lunile de iarnă).

68 Sectiunea III ЭКОТЕХНОЛОГИИ И ВИНОГРАДАРСТВО

Александров Е. 1, Ботнарь В.1, Гаина Б.2 1Институт генетики, физиологии и защиты растений, Кишинэу, Республикa Молдова 2Академия Наук Молдовы, Кишинэу, Республикa Молдова е-mail: [email protected]; [email protected], [email protected]

Экотехнологии способствуют созданию разнообразных устойчивых сбалансированных агроэкосистем, рациональному использованию природных ресурсов, снижению применения загрязняющих технологий, ограничению использования химико-синтетических веществ и сокращению потенциально разрушительных сельскохозяйственных работ. Увеличение разнообразия путем выбора новых генотипов может способствовать гармонизации экологического сельскохозяйственного производства с учетом естественного потенциала почвы. Для получения определенных результатов в современном сельском хозяйстве, в том числе в виноградарстве, согласно экологическим технологиям необходимо соблюдать устойчивые методы обработки почвы и культивации, способствующие сохранению или увеличению количества органических веществ в почве, повышающие ее устойчивость и биоразнообразие, предупреждающие уплотнение и эрозию почвы. Допустимая норма использования биодинамических препаратов, в состав которых входит медь составляет до 3 кг, а для серы - до 6 кг на гектар в год. В то же время, не рекомендуется использовать неорганические удобрения на основе азота. Во всем мире экологическое виноградарство приобретает все большее значение. В его основе лежит система технологических приемов, нацеленных на уменьшение загрязнения винограда остаточным содержанием средств защиты от болезней и вредителей, а с другой стороны снижение степени загрязнения окружающей среды. Среди преимуществ указанной экологической технологии следует отметить и существенное снижение расходов на приобретение и использование дорогих химических препаратов. Лидерами по площадям и производстве экологического винограда являются Испания с 85 тыс. га, Франция - 75 тыс. га, Италия - 65 тыс. га, Мексика - 35 тыс. га, Китай - 20 тыс. га. Выращивание экологического винограда в Республике Молдова сопряжено с определенными трудностями, например, отсутствие биопрепаратов промышленного производства. Другой проблемой экологического виноградарства является изоляция участков в стадиях конверсии (в течение 3-х лет) от ближайших массивов винограда, возделываемых по традиционной технологии. Также, весьма важно учитывать особенности климата данного региона, так как условия влажной весенней погоды с обильными дождями, способствуют образованию очагов болезней, усложняя тем самым своевременное и эффективное применение химических средств защиты в технологическом процессе. Во второй половине лета и начале осени погода способствует развитию других болезней, среди которых наибольшую опасность представляют оидиум и серая гниль винограда. Виноградарский сектор нуждается в создании новых сортов винограда, со стабильным продуктивным потенциалом, для получения высококачественных производных продуктов. Европейские сорта винограда группы Vitis vinifera L. ssp. Sativa D.C., зарегистрированные в Республике Молдова, а также и в других винодельческих странах, восприимчивы к воздействию филлоксеры, что обуславливает создание виноградников из посадочного материала, привитого на подвое устойчивого к филлоксере. Также, неустойчивость к низким температурам зимнего периода требует принятия дополнительных мер защиты растений в период вегетативного покоя. Для получения конкурентоспособной продукции необходимо применение обязательных химических обработок для предупреждения или уничтожения вредителей, микромицетов и других патогенных агентов. В результате скрещивания видов V. vinifera L. ssp. sativa Muscadinia rotundifolia Michx. были получены корнесобственные генотипы винограда, к которым можно применить экологические технологии выращивания, например: Малена, Нистряна и Алгумакс как столовые сорта и Августина, Александрина и Аметист для употребления в свежем виде и для виноделия.

69 ИСПОЛЬЗОВАНИЕ СТЕРОИДНЫХ ГЛИКОЗИДОВ ДЛЯ ПОВЫШЕНИЯ ПОТЕНЦИАЛА ПРОДУКТИВНОСТИ У РЕДИСА

Балашова Ирина1, Степанов В. 1, Пинчук Елена1, Сирота С. 1, Мащенко Наталия2 1Федеральное Государственное Бюджетное Научное Учреждение «Федеральный научный центр овощеводства», Москва, Россия 2Институт генетики, физиологии и защиты растений, Кишинэу, Республикa Молдова е-mail: [email protected], [email protected]

Вторичные метаболиты растений, и в частности, стероидные гликозиды, известны своими антистрессовыми свойствами. Они обусловлены высокой подвижностью атома водорода при С22 – агликона у фуростаноловых соединений, который нейтрализует свободные перекисные радикалы, выделяющиеся живыми системами в результате перекисного окисления ненасыщенных липидов при стрессах различной природы. В итоге повышаются неспецифическая устойчивость и, как правило, продуктивность растений. В настоящее время всё большее внимание исследователей привлекают вторичные метаболиты растений флавоноидной природы как соединения, участвующие в формировании продуктивности растений. Показано, что они являются частью метаболических регуляторных систем, обусловливающих процесс формирования и созревания плода у томата. В связи с этим мы исследовали влияние стероидных и флавоноидных гликозидов на формирование корнеплода у редиса - Raphanus sativus L. Материалом исследований служили 2 образца редиса посевного – селекционный образец №103 и сорт Королева Марго. Семена исследуемых образцов обработали 0,001%-ными водными растворами гликозидов линарозида и молдстима в течение 24 часов. После этого семена подсушили и высеяли в горшочки, наполненные смесью торф-перлит. На 20-ый день оценили высоту розетки листьев и выставили растения на установку многоярусной узкостеллажной гидропоники. На 55-й день от посева оценили массу корнеплода у растений редиса. Статистический анализ экспериментальных данных позволил сделать следующие выводы: 1) обработка семян соединениями гликозидной природы не влияет на формирование розетки листьев у редиса и 2) гликозиды, как стероидные (молдстим), так и флавоноидные (линарозид) при экзогенном их применении способствуют существенному повышению средней массы корнеплода у сорта Королева Марго (на 49%). Таким образом, было установлено, что обработка семян редиса водными растворами гликозидов способствует повышению потенциала продуктивности растений редиса.

70 PROCEDEE BIORAȚIONALE DE AMELIORARE A HABITATULUI SPECIILOR ENTOMOFAGE ÎN AGROCENOZELE POMICOLE

Batco M., Iordosopol Elena, Sumencov Victoria, Eliseev S., Feodor Galina Institutul de Genetică, Fiziologie și Protecție a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail:[email protected]

În cercetarea și practica avansată contemporană este trasată o nouă paradigmă pentru optimizarea stării fitosanitare a agroecosistemelor, având la bază abordarea biocenotică pentru concretizarea măsurilor de protecție. Această abordare este posibilă prin controlul densității numerice a speciilor dăunătoare și benefice în agrocenoză, dar și impactul acestora, în primul rând, asupra mecanismelor de interacțiune în populațiile speciilor biotrofe din agrocenoză. În contextul acestor relatări și protecţia integrată a plantelor se caracterizează prin tendinţa utilizării pe larg a tehnologiilor, tehnicilor şi metodelor bazate pe controlul biologic al dăunătorilor şi conservarea biodiversităţii în agrocenoze. În cadrul cercetărilor noastre am avut ca obiective elaborarea metodelor de activizare şi sporire a viabilităţii populaţiilor naturale de entomoacarifagi în agrocenozele multianuale de piersic și prun, ce se înscrie perfect în conceptul protecţiei bioraţionale a culturilor agricole contra artropodelor dăunătoare, care ar putea deveni o opţiune contemporană în agricultura Republicii Moldova. Au fost elaborate procedeele controlului biologic conservativ al densităţii populaţiilor artropodelor fitofage aşa ca localizarea în agrocenoză, cu aplicarea semiochemicilor ca stimulatori atractivi, asigurarea cu hrană suplimentară (nectar şi polen), utilizând ierburile nectarifere semănate selectiv între rândurile de pomi, de asemenea şi a compuşilor proteico-glucidici ca hrană suplimentară, aplicaţi în perioada de vegetaţie după necesitate. Pe parcursul cercetărilor (2018-2019) în agrocenoza livezii de prun, pe fundalul aplicării procedeelor menționate, au fost semnalaţi reprezentanţi ai 31 familii de parazitoizi din ord. Hymenoptera. Cele mai numeroase s-au dovedit a fi familiile Encyrtidae, Scelionidae, Mymaridae şi Trichogrammatidae. În arealul Republicii Moldova au fost semnalate anterior 181 specii, care se atribuie la 88 genuri ai acestei familii (Talickhij, V. I., Kuslickiy, V. S., 1990), astfel devenind una din cele mai cercetate familii de parazitoizi în această regiune. În colecţia de entomofagi a Institutului de Genetică, Fiziologie şi Protecţie a Plantelor sunt prezente 66 specii, care se atribuie la 41 genuri ai familiei Encyrtidae. A fost stabilit, că reprezentanţii familiei Encyrtidae predomină numeric în toate variantele de aplicare a componentului atractiv (semiochemici, culturi nectarifere semănate, compuși proteico- glucidici). A fost evidențiat, că unele specii din familiile Encyrtidae și Trichogrammatidae constituie suportul principal al mecanismului de control natural al speciilor dăunătoare culturilor sâmburoase ca Grafolita funebrana, G. molestae, G. janthinana, Anarsia lineatella, Hyalopterus pruni, Myzodes persicae,la diferite stadii ontogenetice. Astfel, în rezultatul aplicării procedeelor bioraționale (semiochemici ca stimulatori atractivi, ierburile nectarifere semănate, compuşii proteico-glucidici), s-a obținut o creștere semnificativă a densității numerice a speciilor benefice, care la rândul ei s-a soldat cu o creștere a eficienţei complexului parazitico-prădător, exprimat prin diminuarea numărului de fructe atacate de moliile carpofage (G. molestae,G. funebrana, G. janthinana şi A. lineatella) şi o expresie a eficienței biologice de 52% față de martor cu 19%. Aplicarea permanentă a procedeelor bioraționale de stimulare și mobilizare a potențialului biodiversității speciilor benefice naturale în agrocenose, asigură sporirea controlului biologic conservativ și limitarea factorului chimic în sistemele de protecție integrată a prunului.

71 ПЕРСПЕКТИВЫ ПРИМЕНЕНИЯ БИОРЕГУЛЯТОРОВ ИЗ РАСТЕНИЙ СЕМЕЙСТВА Veronica SPP.

Боровская Алла, Мащенко Наталия Институт генетики, физиологии и защиты растений, Кишинэу, Республикa Молдова e-mail: [email protected].

Veronica - самый большой род цветковых растений семейства Подорожниковые (Plantaginaceae). Растения содержат дубильные вещества, гликозиды (аукубин, вероницин), следы алкалоидов, сапонины, каротин, аскорбиновую кислоту, флавоноиды, микроэлементы. В траве вероники также обнаружены углеводы, маннит, иридоиды, карденолиды, стероидные, холин, фенолкарбоновые кислоты и их производные. Целесообразность использования данных соединений, полученных из растений некоторых вероник объясняется тем, что продукты вторичного метаболизма – флавоноиды, иридоиды, стероиды в свободном и гликозилированном состоянии в последние десятилетия привлекают пристальное внимание исследователей в связи с широким спектром их действия. Именно БАВы при экзогенном их применении способны в малых концентрациях влиять на интенсивность протекания физиологических процессов в растении, особенно при неблагоприятных условиях выращивания последних. Повышение устойчивости овощных культур к неблагоприятным условиям произрастания является существенным резервом увеличения урожайности при уже достигнутом уровне интенсификации их производства. В связи с этим, целью данной работы было использование в качестве регуляторов роста перца сладкого комплекса биологически активных веществ, выделенных из некоторых представителей Veronica spp., а именно V. officinalis, V. spuria, V. spicata и V.teucrium. Суммы физиологически активных веществ из указанных растений были получены методом исчерпывающей экстракции водным этанолом с последующей очисткой адсорбционно-распределительной хроматографией на колонках с силикагелем и полиамидом. Контроль за разделением осуществляли с помощью тонкослойной хроматографии. Установлено, что полученные вещества содержат стероидные, иридоидные и флавоноидные соединения. В эксперименте для замачивания семян перца сладкого использовали водные растворы БАВов в концентрациях 0,0001.....0,01%. Время и температуру проращивания определяли согласно общепринятой методике. Контролем служили семена, замоченные в дистиллированной воде. Изучались морфометрические параметры: энергия прорастания, общая всхожесть и длина зародышевых корешков. Применение указанных водных растворов для предпосевной обработки семян положительно влияло на энергию прорастания и общую всхожесть перца. По показателям энергии прорастания опытные варианты превышали контроль на 20%-60%, а по влиянию на всхожесть семян выделился вариант с применением БАВов из V. officinalis. В этом случае данные энергии прорастания были выше контрольных на 24,4%-41,6%. Для приживаемости рассады перца важное значение имеет рост и развитие зародышевого корешка. Следует отметить положительное влияние на указанный признак суммы веществ из V. officinalis. Растворы данных веществ во всех концентрациях стимулировали рост корешков, которые к концу опыта достигали 4,2-4,5 см и превышали контрольные варианты на 23,5%-32,4%. Обработка семян перца растворами БАВов из V. spuria, V. spicata и V. teucrium незначительно ингибировала рост и развитие зародышевого корешка. Положительные результаты получены только в случае их применения в концентрации 0,01%. Таким образом, установлено, что применение БАВов из V. officinalis для предпосевной обработки создает наиболее благоприятные условия для роста и развития перца сладкого, существенно повышая энергию прорастания, всхожесть семян и стимулируя процессы корнеобразования.

72 EFICACITATEA INSECTICIDULUI ACTUAL 480, SC ÎN COMBATEREA COMPLEXULUI DE DĂUNĂTORI ÎN PLANTAŢIILE DE MĂR

Boubătrîn I.,Musleh M. Institutul de Genetică, Fiziologie şi Protecţie a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail: [email protected]

Una din principalele ramuri ale agriculturii în Republica Moldova este pomicultura, care la momentul actual dispune de circa 150 mii ha de plantaţii. Din speciile pomicole mărul ocupă peste 50 la sută din suprafeţile pomicole cultivate în Moldova. Condiţiile climatice au o acţiune benefică, atât pentru dezvoltarea plantaţilor pomicole, cât şi pentru răspândirea unui complex de dăunători, cum ar fi vermele merelor (Cydia pomonella L), vespea cu ferăstrău (Haplocampa testudinea Klug.), gândacul păros (Epicometis hirta Poda.) şi alţii. Dat fiind faptului, că gândacul păros, care ese din sol primăvara devreme, la începutul înfloririi pomilor, el populeză florile, nimicind pistilul şi staminile. Răspândirea acestui dăunător în condiţii favorabile de dezvoltare poate afecta considerabil plantaţiile pomicole şi aduce pierderi de roadă până la 70 – 80%. Pentru combaterea gândacului păros, în acestă perioadă, se permite de aplicat preparatul Calipso 480, SC. Scopul cercetărilor a fost de a testa în perioada de înflorire a mărului insecticidul Actual 480, SC (substanţa activă-tiacloprid, 480 g/l). Experienţile au fost montate în 2018 în gospodăria experimentală a Institutului de Horticultură şi Tehnologii pentru Alimentaţie în patru variante (martor ne tratat, standard-Calipso 480, SC şi Actual 480,SC în două doze - 0,2 şi 0,3 l/ha). Eficacitatea biologică a insecticidului Actual 480 contra vermele merelor cu doza de consum 0,2 l/ha a constituit 65,9% şi 80,8% cu doza de consum 0,3 l/ha pentru prima generaţie a dăunătorului, iar eficacitatea biologică a peparatului Calipso 480 cu doza de consum 0,25 l/ha a constituit 81,3%. Prelucrarea matematică a rezultatelor obţinute în experienţe demonstrează o diferenţă semnificativă a eficacităţii biologice obţinute în variantele cu doza de consum 0,2 l/ha în comparaţie cu standard în doză de 0,3 l/ha Aceiaşi tendinţă sa stabilit şi în combaterea vermele merelor din generaţia a doua. Eficacitatea biologică a produsului testat în această perioadă a constituit 76,8% cu doza de consum 0,2 l/ha şi respectv 86,3%, pentru doza de 0,3 l/ha –în comparaţie cu standard – 85,5%. Deiferenţa este semnificativă între varianta cu doza de aplicare de 0,2 l/ha şi doza de 0,3 l/ha în comparaţie cu preparatul standard cu doza de consum de 0,25 l/ha. Datorită faptului, că densitatea numerică a gândacului păros (Epicometis hirta Poda.) în 2018, pe lotul experimental, a fost foarte mică, nu a fost posibil de apreciat eficacitatea biologică a insecticidului Actual 480, SC în combaterea acestui dăunător. Luând în cosiderare cele expuse mai sus, în anul 2019, cu scopul de a apreciea eficacitatea biologică a produsului Actual 480, SC în combaterea gândacului păros la măr, pe lotul experimental al Institutului de Genetică, Fiziologie şi Protecţia Plantelor, la începutul înfloririi, sa efectuat lucrări legate de aprecierea densităţii dăunătorului, care s-a constatat a fi în mediu 5,5 – 6,3 adulţi la 100 de flori. Pe parcursul desfacerii a 30% din mugurii florali, numărul gâdacilor a crescut semnificativ şi a constituit în mediu 15-17 adulţi la 100 de flori. În această perioadă sa efectuat tratamentul cu insecticidul Actual 480, SC cu doza de consum 0,3 l/ha. Evidenţa efectuată peste trei zile după tratament ne-a demonstrat, că numărul adulţilor la 100 de flori sa micşorat cu 70,6%, iar peste şapte zile eficacitatea biologică a constituit 83,3%. Analizând datele obţinute se poate de menţionat, că aplicarea insecticidului Actual 480, SC cu doza de consum 0,3 l/ha poate reduce semnificativ densitatea numerică a gândacului păros şi poate fi recomandat pentru aplicare în perioada de înflorire a plantaţile de măr.

73 UTILIZAREA PREPARATULUI REGLALG PENTRU SPORIREA TERMOREZITENȚEI PLANTULELOR DE CASTRAVETE LA TEMPERATURI RIDICATE

Cauș Maria, Dascaliuc Al. Institutul de Genetică, Fiziologie şi Protecţie a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail:[email protected]

Actualmente, în condițiile încălzirii climei globale, creşterea, viabilitatea şi productivitatea plantelor este influenţată considerabil de acțiunea factorilor stresogeni, inclusiv de acţiunea temperaturilor ridicate. Daunele rezultate în urma expunerii plantelor acţiunii temperaturilor ridicate în mare măsură se datorează stresului oxidativ, cauzat de formarea în exces a speciilor reactive de oxigen (SRO), inclusiv al peroxidului de hidrogen, precum și de scăderea antioxidanţilor cu greutate moleculară mică şi a celor lipo-solubili, perturbațiile balanţei redox celulare, alterarea oxidativă a componentelor celulare. Pentru limitarea, contracararea efectelor nocive ale excesului de SRO și protejarea biomoleculelor celulare de daunele produse de procesele oxidative, în plante se desfăşoară activarea unei protecţii complexe, reprezentată de sistemul antioxidant. Acest sistem este constituit din antioxidanţi enzimatici (catalaza, peroxidaza, superoxid dismutaza etc.) şi antioxidanţi neenzimatici, o mare parte, reprezentanți ai metaboliților secundari. Datorită activării defensive endogene antioxidante proprie organismului vegetal, enzimatică sau non-enzimatică, se realizează sporirea toleranţei plantelor faţă de acțiunea temperaturilor extreme. Printre acestea menţionăm în mod deosebit procesele de menținere a stabilității membranelor celulare şi de detoxifiere a SRO. Efectele negative ale stresului oxidativ pot fi atenuate atât datorită cultivării genotipurilor de plante cu termotoleranţă sporită, cât şi prin sporirea capacităţii lor adaptive cu ajutorul regulatorilor naturali de creştere de origine vegetală şi substanţelor cu proprietăţi antioxidante. Cercetările realizate de noi au avut ca scop studiul efectelor biostimulatorului Reglalg asupra seminţelor de castravete‚ determinând efectele preparatului asupra creşterii şi dezvoltării plantulelor, precum şi schimbărilor parametrilor ce caracterizează starea de stres oxidativ la plantulele martor şi la cele supuse șocului termic (ŞT). Experiențele au fost efectuate în condiții de laborator cu semințe de castravete soiul Concurent, care au fost incubate la temperatura 5°C în apă distilată, sau în soluție apoasă de 5x 105% a preparatului Reglalg. După 24 ore semințele au fost plasate în termostat la +25⁰C, întuneric şi umiditatea aerului de 70…80% pentru germinare. Seminţele germinate cu lungimea radiculei de ≈ 1 cm au fost expuse acţiunii ȘT cu temperatura de +43⁰C în decurs de 10 şi 20 minute, ulterior fiind plasate din nou în termostat la +25⁰C, întuneric şi umiditatea aerului de 70…80% pentru continuarea creşterii plantelor. Rezultatele cercetărilor au demonstrat, că expunerea seminţelor de castravete proaspăt germinate acţiunii ŞT cu +43⁰C provoacă inducerea stresului oxidativ, efectele căruia se detectează la plantulele martor cu vârsta de 4 zile prin reducerea parametrilor de creştere, sporirea considerabilă a activității catalazei şi a conţinutului dialdehidei malonice (DAM). De asemenea, s-a înregistrat majorarea conţinutului total de polifenoli, inclusiv al flavonoidelor, ca răspuns la acţiunea temperaturii ridicate, cea ce denotă rolul acestor compuşi în diminuarea proceselor oxidative provocate de ŞT. Tratarea seminţelor de castravete înainte de germinare cu soluţie apoasă a preparatului Reglalg şi expunerea ulterioară a plantulelor germinate la ŞT cu temperatura de +43oC a avut efecte benefice asupra parametrilor de creştere şi a proceselor, ce determină recuperarea deteriorărilor provocate de ŞT, datorită modularii componentelor sistemului antioxidant de protecţie ce asigură detoxifierea SRO. Astfel, aplicarea preparatului Reglalg pentru tratarea semințelor de castravete înainte de germinare reprezintă un procedeu eficient pentru sporirea termotoleranţei plantelor faţă de acţiunea temperaturilor ridicate.

74 КАПСУЛА ДЛЯ РАЗМНОЖЕНИЯ И РАССЕЛЕНИЯ НАСЕКОМЫХ

Кику Б., Горбан В., Гаврилица Лидия Институт генетики, физиологии и защиты растений, Кишинэу, Республикa Молдова e-mail. в[email protected]

Известно эффективное применение капсул для расселения трихограммы, используемой для биологической защиты растений от вредителей. Обычно трихограмму разводят на яйцах зерновой моли или эфестии. При этом для её массового размножения используют довольно сложную технологию, которая реализуется с помощью громоздкого нестандартного оборудования (боксы, устройства для откладки, транспортировки, очистки, дозирования и упаковки яиц и др.). С целью существенного упрощения технологии, было предложено проводить размножение трихограммы непосредственно в той же капсуле, которая предназначена для её расселения. Для этого разработана специальная конструкция капсулы, новизна и приоритет которой подтверждены патентом MD-1162 от 2 февраля 1917 г. Капсула выполнена в виде шарообразной ёмкости и состоит из двух разъёмных частей с отверстиями на стыковочном пояске, которые совмещаются для выхода имаго трихограммы. Капсула включает основной и дополнительный отсеки, разделенные перегородкой из фильтровальной бумаги со сквозными отверстиями диаметром 1 мм. В нижней части предусмотрены цилиндрические ячейки, радиально и равномерно расположенные относительно друг друга и закрытые кольцевой перегородкой из тонкой фильтровальной бумаги. Внутри основного отсека имеется тампон, пропитанный питательной средой. Капсула изготовлена из пористого, непрозрачного и водоотталкивающего материала. Предлагаемая капсула используется следующим образом. В каждую ячейку нижней части капсулы загружается пшеничная крупа и яйцо хозяина, в частности эфестии. Затем нижняя часть капсулы содержится при температуре 24±10С и влажности 75-80%. При таком режиме в ячейках происходит полный цикл биологического развития эфестии от стадии яйца до бабочки. Личинка эфестии прогрызает перегородку, затем превращается в куколку, после окукливания, отродившаяся бабочка, через образовавшееся отверстие выходит из ячейки в основной отсек и откладывает там яйца на его внутреннюю поверхность. Предварительно, перед появлением бабочек, в дополнительный отсек загружаются куколки трихограммы, в преимагинальной стадии. Нижняя часть капсулы закрывается верхней частью. Имаго трихограммы отрождается в дополнительном отсеке и переходит в основной отсек, где находит свежие, близко расположенные яйца эфестии и паразитирует их. Там же имаго трихограммы находит углеводную подкормку, которая активизирует её жизненный потенциал. Учитывая половой индекс 1:1 и среднюю плодовитость эфестии в среднем 200 яиц на одну самку, степень паразитирования яиц эфестии трихограммой 80…90% и соотношение паразит-хозяин не менее 1:10, можно заключить, что в одной капсуле можно размножить как минимум 800 имаго трихограммы. Таким образом, в капсулах может быть эффективно размножена исходная партия трихограммы. с увеличением не менее чем в 10 раз.

75 ИЗМЕНЕНИЕ СОДЕРЖАНИЯ ПЕКТИНОВЫХ ВЕЩЕСТВ ПЛОДОВ ГРУШИ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ УСЛОВИЙ ХРАНЕНИЯ

Колесникова Людмила, Светличенко Валентина, Маринеску Марина Институт генетики, физиологии и защиты растений, Кишинэу, Республикa Молдова e-mail: [email protected]

Свежие плоды груши обладают великолепными вкусовыми качествами и являются источником питательных веществ для организма человека. Исходя из этого, важен подбор оптимальных условий для их длительного хранения. Одной из основных функций пектиновых веществ является обеспечение механической прочности растительных тканей. С изменением содержания пектина уменьшается твердость плодов, что отражается на их товарном качестве. Определение количества пектиновых веществ в сочетании с возможностью контроля их локализации в тканях плодов за счет цитохимических реакций, позволяет прогнозировать динамику в зависимости от условий хранения. Объектом служили плоды груши сортов Ноябрьская и Выставочная, которые хранили в течение 180 дней в боксах научно – экспериментального комплекса «Карпотрон» ИГФЗР Молдовы. На хранение они были заложены по следующей схеме: а) плоды с деревьев, обработанных препаратом SBA Reglalg (стимулятор роста растений), в концентрации 0,05%; б) - препаратом SBA Verbascozid (стимулятор роста растений), в концентрации 0,01%; в) контроль - без обработки. Локализацию пектина определяли по методу Дефо, а количественное содержание по методу Ермакова (1987). Для хранения плодов груши применяли три метода: РГС - регулируемая газовая среда (концентрация газовой смеси составила - 5%СО2+3%О2), t хранения 3º C; обработка плодов препаратом «Фитомаг», в дозе 0,44г/ 1м3, T хранения 2ºC; контрольные плоды хранились при T 2º C в условиях обычной атмосферы (ОА). Количественное содержание пектиновых веществ в плодах в начале хранения составило: 1,74 - 3,12 %. Наибольшее содержание исследуемых веществ наблюдалось в плодах, обработанных препаратом SBA Reglalg. В зависимости от сорта и способа хранения, содержание пектиновых веществ в плодах изменялось с разной интенсивностью. Разница между контрольными и опытными плодами с. Ноябрьская хранившихся в условиях РГС, наиболее очевидна. Одним из важнейших индикаторов состояния паренхимы плодов, является изменение объема межклетников и толщины клеточных стенок. В период хранения содержание растворимого пектина увеличивалось, а количество протопектина уменьшалось. Такое распределение фракционного состава влияло на изменение структуры мякоти плодов. При переходе протопектина в растворимый пектин происходит мацерация, или разрыхление тканей. Увеличивающиеся межклетники способствуют лучшей аэрации всей толщи плодов и биохимические процессы идут гораздо активней. Минимальные изменения объемов межклетников наблюдаются у обоих сортов при хранении в РГС. Объем межклетников при хранении в ОА у с. Ноябрьская изменяется в 16,2 раза, у с. Выставочная в - 15,1 раза. Уменьшение толщины клеточной стенки при хранении в ОА, происходит за счет изменения в комплексе пектиновых веществ и вместе с изменениями защитно - покровного комплекса приводит к потере влаги плодами. Таким образом, обработка деревьев в саду SBA Reglalg и Verbascozid не улучшает лежкость плодов, несмотря на то, что перед съемом в них обнаружено высокое содержание пектиновых веществ. А применяемые методы хранения (РГС и Fitomag) позволили сократить расход пектиновых веществ в плодах груши сортов Ноябрьская и Выставочная.

76 ОЦЕНКА ИНБРЕДНЫХ ЛИНИЙ МЕТОДАМИ ГАМЕТОФИТНОГО АНАЛИЗА ДЛЯ ГЕТЕРОЗИСНОЙ СЕЛЕКЦИИ КУКУРУЗЫ

Кравченко А.Н. Институт генетики, физиологии и защиты растений, Кишинэу, Республикa Молдова

Современные методы гаметофитного анализа могут быть использованы для оптимизации схем гетерозисной селекции кукурузы. В наших исследованиях использовали 22 инбредные линии кукурузы: L1362, L1866, P523, F2, Mo17, B73, A285, P346wx1wx1, M11, P502,P343, A239,MK390,092,N6,W47,4nW23,P346, L276,Rf7,W23,L459. Оценивались такие признаки мужского гаметофита как «диаметр пыльцевого зерна», «фертильность», «стерильность», «жизнеспособность», а также водопоглощающая и водоудерживающая способности. На основе показателей «диаметр пыльцевого зерна» и «стерильность» рассчитывался индекс адаптивности генотипа. О генетической совместимости линий судили по показателю жизнеспособности пыльцы на искусственной питательной среде, дополненной водными экстрактами из рылец. Все полученные результаты обрабатывали дисперсионным анализом c помощью программы Statgraphics 5.1. Выяснено, что изменчивость изучаемых признаков достоверно зависела от фактора «генотип», но в разной степени. Так, доля его влияния в дисперсии признака «диаметр пыльцевого зерна» (определяемого у свежей пыльцы) составила 79,74%***, но в условиях осмотического давления доля влияния этого фактора в дисперсии данного признака была в 3,2 раза меньше (25,1%***). При этом стрессовый фактор обуславливал 73,5%*** изменчивости признака «диаметр пыльцевого зерна» (определяемого в осмотическом растворе). В 2018 году по признаку «диаметр пыльцевого зерна» были выделены 4 генотипа (Мо17,N6,Р523,W23) с самой мелкой пыльцой (от 83,16 мкм до 90 мкм). Три линии (4nW23, P346,W47) характеризовались самыми большими показателями диаметра пыльцевых зерен (от 101,6 мкм до 123,9 мкм). С помощью осмотических фонов (27 атм, 54 атм, 81 атм) оценивали водопоглощающую и водоудерживающую способности пыльцы инбредных линий и были выделены такие генотипы как В73, N6, W23, 092, F2, которые обладают хорошим потенциалом устойчивости к засухе. Наиболее адаптивными к условиям выращивания 2018 года оказались линии Р502, L276, M11, P346, 4nW23 (индексы адаптивности имели значения в пределах 7-10%, что говорит о небольшом количестве стерильной пыльцы). Высокие показатели фертильности мужского гаметофита у генотипа говорят о наличии хороших систем аттракции. Установлено, что среднее значение данного показателя по всем изученным генотипам составило 63,7±5,27%, при этом коэффициент вариации оказался довольно высоким 38,8%. Анализ частоты распределения показал преобладание генотипов с высокой фертильностью, а наибольшими значениями данного признака характеризовались такие линии как: L276 (89,2±1,85%), P502 (88,9±1,57%), M11 (88,3±1,82%), 4nW23 (80±2,29%), P346 (86,4±2,07%), W23 (83,7±1,71%), L459 (82,6±2,4%). Следует отметить, что дальнейшая разработка метода подбора линий для гибридизации показала хорошую совместимость генотипов 4nW23 и P502 (65,8%), В73 и Ку123 (34,3%). У линий W47, W23 и 4nW23 совместимость с линией N6 составила 13,8%, 18,9% и 4,8%, соответственно. У линии W23 и её тетраплоидного налога совместимость с линией М11 оказалась 8,8% и 2,7%, соответственно. Этот подход позволяет дифференцировать генотипы при составлении пар для скрещиваний. Количество пыльцы, которое образует каждый генотип, является важным, как в практическом, так и в эволюционном плане (для генерации спектра новой генетической изменчивости). Среди использованных в опыте инбредных линий были выделены генотипы с высокой пыльцевой продуктивностью: N6, P523, Rf7 и А285. Также проводилось фракционирование пыльцы по весу и выполнены самоопыления 10 линий наиболее тяжелыми фракциями мужского гаметофита. Таким образом, методы оценки признаков мужского гаметофита являются эффективными для выявления родительских линий гетерозисных гибридов.

77 ВЛИЯНИЕ ПРЕДПОСЕВНОЙ ОБРАБОТКИ НА ИНФИЦИРОВАННОСТЬ СЕМЯН НЕКОТОРЫХ ГЕНОТИПОВ ОЗИМОЙ ПШЕНИЦЫ ГРИБКАМИ РОДОВ Fusarium И Penicillium

Кузнецова Ирина, Грэждиеру Кристина, Игнатова Зоя Институт генетики, физиологии и защиты растений, Кишинэу, Республикa Молдова e-mail:[email protected]

Проблема качества зерна озимой пшеницы стоит довольно остро. Установлено, что через семена передается до 70% болезней растений. Как показывает практика, непораженных инфекцией семян практически не бывает. Особенно это касается зараженности его плесневыми грибами, в число которых входят представители родов Fusarium и Penicillium, которые повсеместно присутствуют в зернохранилищах, вызывая порчу урожая и делая его источником последующего заражения новых посевов. Кроме того, продукты жизнедеятельности данных грибков - микотоксины, являются опасными метаболитами, которые способны вызывать серьезные интоксикации человека и животных, нарушение функций внутренних органов, аллергические реакции и др. Также некоторые микотоксины, в частности патулин, продуцируемый грибками рода Penicillium, обладают канцерогенным эффектом. Поэтому обязательным условием продовольственной безопасности является проведение диагностики и мониторинга патогенных организмов. Целью данной работы было выявление влияния предпосевной обработки семян озимой пшеницы сортов Молдова 5, Молдова 11, Молдова 66, Молдова 79, Молдова 614 и Куяльник, используемый селекционерами Института генетики, физиологии и защиты растений как сорт- стандарт продуктивности и устойчивости к инфекционным болезням. Семена были разделены на две группы: необработанные и семена, предварительно обработанные смесью фунгицида Shell и биостимулятора Reglalg (0,05%), полученный сотрудниками лаборатории Биохимии растений Института генетики, физиологии и защиты растений. Анализ состава грибковой микрофлоры семян проводился методом ПЦР со вложенной парой праймеров, специфичных для представителей родов Fusarium и Penicillium. P. brevicompactum и F.oxysporum не были выявлены ни в одном образце. P. chrysogenum был обнаружен в необработанных семенах Молдова 5, Молдова 66, Молдова 79, Молдова 614 и Куяльник, а в группе обработанных семян – в образцах Молдова 5, Молдова 614 и Куяльник. F. verticillioides был обнаружен во всех необработанных и обработанных образцах зерновок исследуемых сортов. F. avenaceum был обнаружен всего в трех образцах: Молдова 11 и Молдова 614 (первая группа), Молдова 79 (вторая группа, обработанные семена). Изучение состава микофлоры свидетельствует о снижении инфицированности семян исследуемых генотипов озимой пшеницы патогенными грибами родов Fusarium (за исключением F. verticillioides) и Penicillium по сравнению с контролем (необработанными семенами). Таким образом, комплексная обработка семян смесью фунгицида Shell и биостимулятора Reglalg (0,05%) может быть предложена как способ снижения последующей зараженности посевов озимой пшеницы грибковыми патогенами и сохранения качества зерновой продукции.

78 COMPARATIVE STUDY OF HYMENOPTERA COMPLEX IN TWO PLUM ECOSYSTEMS BASED ON ORCHARDS’ DIFFERENT AGE

Eliseev S., Sumencova Victoria Institute of Genetics, Physiology and Plant Protection, Chisinau, Republic of Moldova e-mail:[email protected]

In ecologically safe plum protection, Hymenoptera order play a significant role containing many parasitoid species which can cause severe damage to numerous pests. Our goal was to compare the difference in Hymenoptera fauna composition of two plum orchards based on age. We had been working in two plum orchards – the old orchard in Bacioi village (vicinity of Chisinau) and the young orchard of the Institute of Genetics, Physiology and Plant Protection throughout 2017 – 2018. Both orchards were treated with pesticides. We had been studying Hymenoptera fauna using yellow sticky traps placed in a middle of a tree crown from which the biologic material was collected once in two weeks from April to August. The collected insects were studied in the laboratory keying them till the family level. Thus, 436 exemplars of Hymenoptera from the old orchard and 1895 from the young one were collected showing the great numerical difference between these ecosystems. All further data point out this trend in two orchards with the young one being richer both in number and taxa diversity. There were 16 families identified in the old orchard comparing to 23 in the young one. The first top five families in the old orchard were Mymaridae, Ceraphronidae, Platygastridae, Encyrtidae and Aphelinidae. In contrast, the first top five families in the young orchard were Ceraphronidae, Platygastridae, Mymaridae, Encyrtidae and Trichogrammatidae. All these families are important in the fruit trees’ protection, some of them (Encyrtidae, Aphelinidae and Trichogrammatidae) are used in plant protection programs on a large scale. Just two families in both orchards are exclusively herbivorous (Cynipidae and Tenthredinidae), the rest are all either parasitoid or with mixed type of nutrition. Family Colletidae are pollinators and were found just in young orchard. Thus, the vast majority of Hymenoptera exemplars collected in the yellow sticky traps are useful as pests populations’control agents. The growth rate throughout the whole vegetation season in the old orchard rise more uniform than in the young orchard. In the latter in 2018, between 25.05 and 08.06 the growth rate begins to rise exponentially, then slows down and again rises exponentially between 06.08 and 20.08 (especially in Ceraphronidae, Trichogrammatidae, Mymaridae and Encyrtidae). Both orchards show the maximal growth values at the end of the vegetation season. This effect is manifested, probably, due to quitting using the pesticides. The faunistic diversity of two orchards differs drastically with the young orchard containing seven families more than the old one. These families are Colletidae, Torymidae, Diapriidae, Chrysididae, Formicidae, Perilampidae and Figitidae. It appears that late snowfalls in April 2017 didn’t influenced significantly Hymenoptera populations and growth rate continued to rise uniformly after this weather phenomenon ended. The explanation of the fact that the young orchard is richer in number and taxa diversity than the old one is, probably, due to ecotone effect. The young ecosystem is surrounded by the soybean and lavender fields, wasteland and apple orchard. The vicinity of State Botanical Garden is also of great importance here. The old ecosystem neighbors the apple orchard. As a result of this position the old orchard has fewer contact spots with neighboring ecosystems. Another reason for the young orchard being richer than the old one is because the young ecosystem is in formation process with all structures just appearing. In contrast to young ecosystem, the old orchard has all parts meticulously balanced in an equilibrium state.

79 ПРИМЕНЕНИЕ РАСТИТЕЛЬНЫХ ПРЕПАРАТОВ ДЛЯ УКОРЕНЕНИЯ ЛЕТНИХ ЧЕРЕНКОВ Cornus mas L.

Елисовецкая Дина, Иванова Раиса, Мащенко Наталия, Кисничан Лилия Институт генетики, физиологии и защиты растений, Кишинэу, Республика Молдова e-mail: [email protected], [email protected]

Кизил обыкновенный Cornus mas L. (Cornaceae) является ценным плодовым, лекарственным и техническим растением. Высокое содержание полифенолов, легко усвояемых сахаров (глюкозы и фруктозы), органических кислот, пектиновых и дубильных веществ, минеральных веществ (калия, кальция и фосфора), аскорбиновой кислоты, катехинов, антоцианов и флавонолов – это далеко не полный перечень веществ, входящих в состав плодов кизила, благодаря которому он уникален также для детского и диетического питания. В Республике Молдова кизил широко распространен на высоте от 150 до 300 м над уровнем моря, в лесах из дуба скального и дуба черешчатого на плакорах и преимущественно южных склонах. В молдавских кодрах кизил входит в состав подлеска как доминирующий или сопутствующий вид. В природе кизил представлен большим количеством разнообразных форм. При создании промышленных насаждений необходимо размножение перспективных форм вегетативным путем, так как семенной способ не обеспечивает закрепления в потомстве всех хозяйственно-ценных признаков размножаемого сорта. Кроме того, при вегетативном способе размножения кизил на 4-5 лет раньше вступает в плодоношение (на 2-3 год) в отличие от семенного способа. С целью размножение окультуренного кизила летними черенками нами были отобраны черенки в июне, в состоянии активного роста – однолетний прирост. Черенки обрезали длиной 10-15 см, лишние пары листьев удаляли, оставляли верхушечные почки и две пары листьев. Срез в нижней части побега делали на 0,5 см ниже почки. Черенки выдерживали в течение 24 часов в биопрепаратах: генистифолиозид 0,01 %, верофозид 0,01 %, экстракт из Juniperus sabina 0,001 и 0,0001 %. Контролем служили черенки, выдержанные в течение 24 ч в воде. В качестве эталона использовали 0,02 % раствор гетероауксина. Для высаживания черенков был подготовлен парник – наземный стеллаж: слой земли 12-15 см, сверху (3-4 см) субстрат из смеси песка и торфа в соотношении 1:1. От поверхности субстрата до парниковой рамы оставили 15-20 см пространства. Черенки накрывали спанбондом с плотностью 17- 30 г/м2. Отмечено, что первые двое суток черенки чувствовали себя отлично. Первые признаки увядания и почернения листьев отмечены на третьи сутки опыта – в контрольном варианте. Через три недели после обработки в вариантах с применением биопрепаратов выжило от 30 до 60 % черенков (наиболее высокий процент выживших растений – в варианте с обработкой 0,001 % экстрактом J. sabina); в контроле – 10 % и в варианте обработки гетероауксином – 50 % черенков. Таким образом установлено, что обработка растительными препаратами – генистифолиозидом, верофозидом и J. sabina способствует лучшему укоренению черенков (на уровне эталона гетероауксина). Однако, для развития корневой системы черенков кизила необходимо в среднем от 60 до 70 дней, иногда и более. Все это время черенки должны находиться в условиях высокой влажности. Проблема заключается в том, что большинство из них за такой длительный период содержания в условиях высокой влажности гибнут от грибных инфекций. Обработки фунгицидами отсрочивали гибель черенков на одну-две недели, но не решали проблему полностью. Поэтому наши усилия направлены на предотвращение преждевременной гибели черенков от болезней в условиях высокой влажности в течение длительного времени. Огромную роль играет биологический материал – черенки необходимо получать со здоровых растений и, возможно, не только однолетнего прироста. Полученные данные являются результатом экспериментов одного года, поэтому исследования в этом направлении предполагается продолжить.

80 SINTEZA 8-METIL-2-DECILPROPANOATULUI – COMPONENTUL ACTIV AL FEROMONULUI SEXUAL SINTETIC AL VIERMELUI VESTIC AL RĂDĂCINILOR DE PORUMB, DIABROTICA VIRGIFERA VIRGIFERA LE CONTE

Erhan Tatiana, Odobescu Vasilisa, Răileanu Natalia Institutul de Genetică, Fiziologie şi Protecţie a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail:[email protected]

Porumbul este una dintre cele mai importante culturi cerealiere pentru industria alimentară și rezervele pentru furaje al Republicii Moldova. Anual, această cultură ocupă o zonă considerabilă și constituie a 5-a parte din suprafața terenurilor arabile. Viermele vestic al rădăcinilor de porumb, Diabrotica virgifera virgifera LeConte, 1868 (Coleoptera: Chrysomelidae) (DVV), este unul dintre cei mai mari dăunători ai culturii de porumb (Zea mays L). În Europa, această specie a fost depistată pentru prima dată în 1992, lângă Belgrad (Bača 1994) care s-a răspândit rapid şi s-a extins la aproape toate cul turile de porumb. După eşecul de a preveni răspândirea, în 2014, Comisia Europeană a abrogat Decizia 2003/766/CE şi a ridicat statutul de carantina a acestei specii. Potrivit Comisiei de Recomandarea 2014/63/UE, managementul integrat al dăunătorului DVV ar trebui să se bazeze pe aplicarea de rotaţie a culturilor, utilizarea hibrizilor de porumb timpurii, curățarea mașinilor agricole utilizate la lucrările agricole pe câmpurile de porumb, prelucrarea arborilor adiacenţi câmpurilor, monitorizare adecvată a populației dăunătoare prin intermediul capcanelor cu feromoni, capcane colorate de culoare galbenă şi alte măsuri relevante privind prevenirea răspândirii organismelor dăunătoare, revizuite de Furlan şi Kreutzweiser (2015). Conform literaturii ştiinţifice, monitorizarea şi reglementarea densităţii populaţiei de Diabrotica virgifera virgifera LeConte cu capcane cu feromoni sexual sintetic, se efectuează începând cu luna iunie şi până la recoltarea porumbului, prin plasarea diferitor tipuri de capcane cu capsule impregnate cu feromon sexual sintetic, cu distanţa de aproximativ 20m dintre ele, cu verificare ulterioară 1-3 ori pe săptămână. Ca de obicei „primele capturi”se înregistrează în a doua jumătate a lunii iunie, cele mai multe se înregistrează în prima jumătatea a lunii august, cu scădere considerabilă a numărului de dăunători capturaţi până la mijlocul lunii septembrie. În scopul sintezei componentului activ al feromonului sexual sintetic 8-metil-2- decilpropanoatului al Diabrotica virgifera virgifera LeConte, a fost elaborată o schemă de sinteză în care au fost prevăzute avantajele unei sinteze chimice organice fine, cum sunt: utilizarea substanţelor iniţiale şi intermediare accesibile, mărirea randamentului produşilor intermediari şi finali, facilitarea purificării în vederea obţinerii produşilor intermediari şi finali cu o puritate de 93-97%. Schema de sinteză elaborată cuprinde 6 etape de sinteză: bromurarea 2-metil-butan-1-ol-ului cu tribromura de fosfor, lungirea catenei cu alilbromid prin reacţia Grignard, bromurarea 3-metil-hept-1-en-ei, în prezenţă de peroxid de benzoil, conform reacţiei anti-Markovnikov, alchilarea cu esterul acetilacetic, în mediul bazic, reducerea 8-metil-deca-2-onei cu LiAlH4 în eter absolut, urmată de alchilare cu clorură de propionil în prezenţa piridinei. Substanţa obţinută a fost purificătă pe coloana cu silicagel, eluent eter-acetonă şi ulterior a fost analizată puritatea acesteia cu ajutorul cromatografiei gaz-lichid. 8-metil-2-decilpropanoatul reprezintă o substanţă lichidă, incoloră cu miros specific, cu puritatea de 94%, racemat. Ulterior substanţa sintetizată a fost impregnată pe capsule din cauciuc sintetic cu doza de: 1mg pe capsulă, solvent eter. Capsulele cu feromon sexual sintetic al dăunătorului Diabrotica virgifera virgifera LeConte, au fost fixate pe tipul de capcană "open-type" - bucată de carton laminat "Tetrapac” cu adeziv entomologic şi ulterior ataşate direct de plantă, în câmp cu porumb, în vederea monitorizării şi reglementarii densităţii populaţiei de dăunători.

81 CARACTERISTICILE BIOCHIMICE ALE PERELOR SOIUL NOIABRISKAIA,TRATATE ÎN VEGETAȚIE CU SBA REGLALG ÎN COMUN CU MICROELEMENTELE B, Zn, Mn, Mo

Gaviuc Ludmila, Bejan Nina Institutul de Genetică, Fiziologie și Protecție a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail: [email protected]

Sporirea productivității pomilor fructiferi, calității şi capacității de păstrare a fructelor în perioada de vegetație, precum şi reducerea pierderilor produse de bolile fungice, dereglările funcționale şi deshidratarea țesuturilor în perioada postrecoltă, reprezintă una din prioritățile pomiculturii autohtone. Calitatea fructelor proaspete diferă de la o specie pomicolă la alta, fiind influenţată de acţiunea multiplă şi conjugată a numeroşi factori: specie, soi, compoziţia chimică, condiţiile climatice ale perioadei de vegetaţie etc, unde nu cel din urmă loc îl deține agrotehnica aplicată. Din informațiile de specialitate e recunoscută lipsa unei tehnologii de creștere direcționată a fructelor de par pentru păstrare îndelungată. În acest scop a fost inițiat studiul preparatului Reglalg – un reglator de creștere de origine naturală, acțiunea căruia stimulează procesele formogenezei, asigură diminuarea pierderilor roadei și sporirea productivității datorită includerii unor mecanisme naturale specifice. Cercetările de ultima oră au dovedit efectul pozitiv al utilizării reglatorilor de creștere exogeni în comun cu microelemente, deoarece administrarea elementelor minerale în livadă influențează în mare măsură recolta, calitatea și capacitatea de păstrare a fructelor. Microelementele acționează și asupra metabolismului diferiților compuși chimici din plante. Este de menționat efectul pozitiv al borului și zincului în sporirea conținutului în glucide, al molibdenului și zincului în acumularea acidului ascorbic (Burzo, 1970). Reieșind din aceste considerente, studiul curent a inclus cercetarea influenței preparatului Reglalg în amestec cu microelementele B, Zn, Mn, Mo asupra acumulării glucidelor totale, acizilor organici, vitaminei C și masei uscate în fructele de păr, soiul tardiv Noiabriskaia - unii din cei mai informativi indici, respondenți de calitatea fructelor. S-a dovedit, că prelucrarea pomilor în vegetație cu SBA Reglalg în comun cu microelementele B, Zn, Mn, Mo sporește acumularea masei uscate, glucidelor totale și vitaminei C în fructe. Astfel cantitatea de glucide în fructele tratate în vegetație, în raport cu cele netratate, a sporit cu 1,63%, masei uscate – cu 1,55% și vitaminei C – cu 0,97 mg/100g. Acest lucru se explică prin efectul favorabil al tratamentelor asupra activității fotosintetice, stimulării creșterii intensității ei, acumulării de asimilate la pomii de păr. Tratamentele au contribuit la o scădere nesemnificativă a conținutului de acizi organici - cu cca 0,2%. Ținând cont de faptul, că raportul dintre zaharuri și aciditate (indicele gluco-acidic), numit și armonie gustativă, este un indiciu, care conduce în final la realizarea gustului caracteristic pentru soiul sau specia respectivă, iar modificarea acestuia corelează cu valoarea comercială și alimentară a fructelor (Gherghi, 2001). Cercetările noastre au dovedit, că după recoltarea perelor indicele gluco-acidic în fructele tratate în vegetație a fost mai sporit cu 4,65 unități în raport cu fructele netratate. Ca urmare a sporirii conținutului de glucide solubile și diminuării acidității titrabile s-a modificat raportul zahăr/aciditate și prin aceasta s-a realizat gustul mai armonizat al fructelor. În sumar putem concluziona, că există o corelație pozitivă între tratările pomilor de păr soiul Noiabriskaia pe perioada vegetației cu SBA Reglalg în amestec cu microelementele B, Zn, Mn, Mo, compoziția chimică a fructelor de păr și formarea condiționată, calitatea și, respectiv, prognozarea capacității lor de păstrare.

82 PROTECŢIA CULTURII DE SOIA PRIN APLICAREA ENTOMOFAGULUI Trichogramma ÎN COMBATEREA COMPLEXULUI DE DĂUNĂTORI

Gavriliţa Lidia Institutul de Genetică, Fiziologie şi Protecţie a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail: [email protected]

Europa în prezent se confruntă cu insuficienţă în aprovizionare cu soia, de aceea se importă cantităţi mari al acestui produs. În Republica Moldova în ultimii 10 ani se cultivă anual cultura de soia pe o suprafaţă totală de circa 55-60 mii hectare. Valoarea pierderilor medii din cauza complexului de dăunători, care atacă această cultură, este menţionată de mulţi autori şi se regăseşte în multe lucrări din literatura de specialitate. Protecţia integrată a culturii de soia permite aplicarea consecutivă a diferitor mijloace biologice atacă feromonii sexuali, extracte vegetale şi diferite specii de entomofagi –Trichogramma la stadia de ou, parazitul Bracon la stadia de larvă a dăunătorilor. Scopul lucrării constă în implementarea tehnologiilor de aplicare a entomofagului Trichogramma spp. pentru protecţia culturii de soia în combaterea complexului de buhe şi molii pentru obţinerea producţiei ecologice. Cercetările fundamentale s-au efectuat în condiţii de laborator, cele aplicative s-au efectuat în condiţii de câmp în IGFPP la cultura de soia. Alegerea incorectă a speciilor de Trichogramma poate deveni cauza eficacităţii joase a parazitului, deoarece cerinţele ecologice a diferitor specii sunt diferite: în ţările din Europa de Vest se utilizează pentru combaterea buha fructificaţiilor (Helcoverpa armigera Hb.) specia T. chilonis, în Republica Moldova, cea mai potrivită şi răspândită specie la culturile anuale este Trichogramma evanescens West. Obiectul cercetărilor a fost Trichogramma evanescens Westw. – colectată de la cultura de soia. Pe parcursul anilor 2015-2018 s-a efectuat evidenţa entomofagului natural în câmp, începând cu luna mai până în luna septembrie, unde s-a înregistrat prezenţa Trichogramma, care a variat de la 0,5%-8,5% ouă parazitate. Din speciile colectate la cultura de soia s-au identificat următoarele: T. evanescens Westw.–45-50%, T. dendrolimi Mats.–10-15%, T. pintoi Voeg. –15-20%, T.semblidis Auriv.–10-15%, care s-au înmulţit, pentru cercetările ulterioare. Temperaturile medii în lunile mai-septembrie în cei patru ani (2015-2018), au fost mai ridicate, decât temperaturile medii multianuale. Aceste schimbări climatice s-au reflectat asupra prezenţei maximale a entomofagului Trichogramma în natură. Un rol foarte important în reducerea densităţii dăunătorilor o are populaţia naturală de Trichogramma. Însă numărul lor este insuficient pentru protecţia culturilor de dăunători. Agentul biologic Trichogramma spp. se utilizează la stadiul de ou al dăunătorilor la culturile agricole. Densitatea medie a ouălor a complexului de buhe la 100 plante în perioadă anilor 2015-2018 în lunile mai-septembrie la cultura de soia în mediu pe 3 generaţii a variat de la 70,0-361,0. Media pe 4 ani a fost de 215,5 de ouă de dăunători la 100 plante. Procentul de ouă parazitate în perioada anilor 2015-2018, în lunile mai-septembrie la cultura de soia în mediu pe 3 generaţii a variat de la 45,0% până la 76,5%, după 4-5 lansări. Media numarului de ouă parazitate a fost de 56,0% pe 3 generaţii în varianta biologică. Atacul mediu a păstăilor la cultura de soia pe 4 ani a fost de 2,8% la 100 plante în trei generaţii. Acest indice în perioada dată a variat de la 1,8 până la 3,9% în varianta cu lansări a Trichogramma (în varianta cu mijloace biologice). În martor atacul păstăilor a variat de la 16,0 % până la 30,0%. Media pe 4 ani a fost de 23,0% la 100 plante. În martor atacul mediu în această perioadă a fost de 8,2 ori mai mare, decât în varianta cu aplicarea mijloacelor biologice (Capcane feromonale, entomofagii Trichogramma şi Bracon). În rezultatul efectuării cercetărilor au fost elaborate principiile metodologice de aplicare a entomofagului T. evanescens pentru diminuarea densităţii complexului de buhe în protecţia culturii de soia, în baza determinării repartizării spaţiale a ouălor complexului de buhe.

83 PERSPECTIVE DE UTILIZARE A CAPCANELOR CU LUMINĂ PENTRU MONITORIZAREA ŞI COMBATEREA INSECTELOR DĂUNĂTOARE

Gorban V. Institutul de Genetică, Fiziologie şi Protecţie a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail: vgorban.alimeco@ yahoo.com

Сonform datelor oficiale ale Organizaţiei pentru Alimentaţie şi Agricultură (FAO), pierderile anuale pricinuite agriculturii de dăunători şi boli plantelor, constituie aproximativ 20-25%. Prin urmare protecţia culturilor agricole de dăunători şi de boli este una din cele mai stringente sarcini. În prezent cea mai răspândită metodă de protecţie a plantelor rămâne cea chimică. Cu toate că sunt elaborate şi se utilizează pe larg noi mijloace de protecţie, însă ele nu asigură nivelul necesar de eficacitate a măsurilor efectuate. Eficienţa redusă a acestor mijloace se explică şi prin faptul, că lipsesc metode moderne de obţinere a informaţiei primare pentru elaborarea prognozelor de dezvoltare şi răspândire a organismelor dăunătoare şi efectuarea în timp optimal al măsurilor de protecţie. Reeşind din aceasta, în prezent se acordă o mai mare atenţie metodelor ecologic inofensive, utilizând preparate bioraţionale şi a altor noi metode cu utilizarea factorilor biofizici. Importantă este posibilitatea de a obţine, cu aceste metode, date complete privind identificarea şi densitatea speciilor de insecte dăunătoare în circumstanţele specifice ale câmpurilor protejate. Este cunoscut efectul de atragere a insectelor noctuide de razele de lumină ultavioletă al spectrului optic. Efectul atractiv al razelor de lumină ultravioletă a fost confirmat prin rezultatele cercetărilor efectuate în ultimii ani. Datele obţinute ne-au permis să elaborăm diferite modele noi de capcane cu surse de lumină cu anumită lungime de undă, care pe viitor pot deveni un instrument impotant pentru colectarea şi exterminarea în masă a insectelor dăunătoare culturilor agricole Modelele experimentale ale capcanelor sunt executatate în două variante - cu conectarea la rețelele electrice existente în apropriere terenurilor protejate și autonome cu acumulator. Ele au fost testate prin amplasarea lor atât pe loturile experimentale ale institutului, cât şi în condiţii de producere pe câmpurile de tomate, în livezi de prune, mere şi plantaţii de viţă de vie ale SRL „Agrobrio” com. Băcioi. Aceste lucrări au fost efectuate în perioada de vegetaţie a culturilor respective în lunile mai- octombrie, timp în care s-a supravegheat lucrul capcanelor, elementele lor funcţionale de bază, siguranţa de lucru a schemei electrice şi proprietatea de atracţie a surselor de lumină. În această perioadă sa efectuat evidenţa materialului capturat, s-au determinat speciile de insecte dăunătoare culturilor respective. Pe baza datelor obţinute s-a elaborat instrucţiuni pentru implementarea şi utilizarea capcanelor cu lumină în producere şi utilizarea lor în calitate de elemente a sistemelor de protecţie integrată a plantelor. Dispozitivele elaborate se recomandă pentru utilizare atât în scopuri ştiinţifice la efectuarea colectărilor faunistice, cât şi pentru semnalizarea, monitorizarea şi diminuarea densităţii populaţiilor dăunătorilor culturilor agricole prin capturarea lor în masă. Aplicarea capcanelor cu lumină ultravioletă pentru capturarea sistematică a insectelor dăunătoare aduce la reducerea substanţială a indiciilor numerici ai populaţiei dăunătorilor şi crează condiţii pentru sporirea eficienţei insectelor benefice, atât a celor din natură cât şi a celor lansate cu scopul reglării densităţii dăunătorilor sub nivelul pragului economic de dăunare (PED). Capcanele cu lumină ultravioletă sunt recomandate Direcţiilor Raionale pentru Siguranţa Alimentelor pentru semnalizarea, monitorizarea şi elaborarea prognozelor de dezvoltăre a dăunătorilor culturilor agricole, care vor contribui la perfecţionarea măsurilor de protecţie în zonele respective ale Republicii Moldova. Protecția chimică, în viitor, va rămâne deasemenea un element important al sistemelor de protecție integrată a plantelor și va fi solicitată mai mult atunci când organismele dăunătoare vor crea o amenințare reală de dăunare a culturilor cultivate.

84 РЕЗУЛЬТАТЫ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ БИОПРЕПАРАТОВ ДЛЯ ЗАЩИТЫ РОЗ В РОЗАРИИ ДЕНДРОПАРКА «АЛЕКСАНДРИЯ» НАН УКРАИНЫ

Гордиенко Дария Государственный дендрологический парк «Александрия» НАН Украины e-mail:[email protected]

В насаждениях дендрологического парка «Александрия» произрастает 13 видов и более 250 сортов роз. Основными участками, где высажена розы являются «Остров роз» и коллекционный участок «Розарий». Государственный дендрологический парк «Александрия» НАН Украины относится к природно-заповедном фонду, а также является зоной повышенной рекреации, а это значит, что здесь нельзя использовать препараты повышенной токсичности. Поэтому единственным выходом есть своевременное и правильное проведение агротехнических приемов с использованием малотоксичных веществ либо биопрепаратов. Из вредителей роз ежегодно встречаются зеленая розанная тля (Macrosiphum rosae L.), иногда листоеды, обычный паутинный клещ (Tetranychus urticae Koch), розанные златки, пчелы-листорезы, бронзовка мохнатая (Tropinota hirta Poda) бронзовка золотистая (Cetonia aurata L.), розанный пильшик (Hartigia trimaculata Say), цикада белая (Metcalfa pruinosa Say), листовертка. Из болезней, чаще всего на территории розария проявляются ложная мучнистая роса (возбудитель – гриб Pseudoperonospora sparsa Berk), мучнистая роса (возбудитель Sphaerotheca pannosa Lew. var. Rosae), ржавчина (Phragmidium spec. Berk.), инфекционный ожог роз (возбудитель Nectria galligena Bres.), серая гниль (возбудитель гриб Botrytis cinerea Pers.), а также чёрная пятнистость, или марсонина розы (Marssonina rosae Lib.) Залогом здоровых насаждений изначально является здоровый посадочный материал, поэтому для посадки мы выбираем здоровые куст без видимых признаков болезней или вредителей. Готовим посадочную яму и высаживаем розы согласно с общепринятой методикой посадки садовых роз. После ранневесенней или позднеосенней посадки проводим обработку кроны 3%-м раствором бордоской смеси или железным купоросом. Такую же обработку мы проводим перед укрытием кустов на зиму и после раскрытия весной. Такие мероприятия позволяют убрать большинство возбудителей, а значит получить более здоровые насаждения. Наши наблюдения показали, что своевременное проведение профилактических обработок фактически полностью убирает риск заражения насаждений болезнями или вредителями. Для этой цели мы используем биопрепараты: биоинсектицид «Актофит» и биофунгицид «Трихофит». Эти препараты эффективны и на начальных стадиях заболеваний. Так, «Актофит» убирает вредителей не протяжении 2-3 часов, но требует повторной обработки через 3-4 дня. «Актофит» мы берем в пропорции 120 мл препарата на 10 л воды. «Трихофит» разводим в пропорции 100 мл на 10 л воды. В случае поражения насаждений мучнистой росой мы используем раствор: 200 г пищевой соды и 50 г хозяйственного мыла на 10 л воды. Данный раствор полностью убирает очаги и даже видимый налет. Для обеспечения достаточного количества питательных веществ мы проводим внесение компоста и золы под зимнее укрытие. Больше никаких подкормок на протяжении сезона не проводится. По нашему наблюдению, одним из самых важных факторов здорового состояния роз есть своевременный полив, особенно в период засухи. Таким способом при соблюдении и своевременном проведении агротехнических мероприятий можно получить здоровые насаждения без использования высокотоксичных препаратов для защиты растений.

85 APPLE-TREE ECOLOGICALLY- FRIENDLY PROTECTION FROM PESTS

Gunchak M.V. Ukrainian scientific-research plant quarantine station Institute of plant protection NAAS e-mail: [email protected]

The chemical method for plant protection takes the basic role in modern conditions for intensification system of apple-tree protection. This method allows to inhibit the pest development and to save yield. The chemical protection method optimization and biological preparations include into the protection technologies will allow to avoid the pesticide’s unfavourable ecological action. So the protection system strategy must be the environmental regulation the quantity of pests by the maximal usage of biological protection matters, decrease the chemical treatments number and improve the pesticide’s assortment. The purpose of research was to study the chemical and biological pesticide’s impact on apple-tree main pests in the system of integrated pest management. The researches were provided in garden of UkrSRPQS IPP NAAS (Chernivtsi region, v.Boiany, Novoselitsa district) during 2016-2018 years according to the approved techniques. The apple-tree protection research system is consisted of 2 treatings by chemical preparations at the beginning of apple – tree growing at the low daily average temperature, when microorganisms activity is not high and 5 treatings by biological preparations. The chemical origin pesticide’s mode of action and ecotoxicological properties were considered during the choice. So the low toxic polar pesticides with non- high utilization rate were used. The first treating by chemical preparation was provided during the phenophase “buds swell” by 4% solution of preparation 30-B (industrial oil І-20а). It allows to eliminate pests on winter stage (scale insect, aphids, pea moth, mites) at the level 94-97%. The following treating was provided during the phenophase “rosebud” by preparation Kalipso 480SC (thiacloprid), coefficient-suspension at rate 0.3 l/ha. It allows to decrease the quantity of sawflies, moths, aphids, blossom feeders on 97.8%. The biological control method was used during the daily average temperature increase after blossoming. It is based upon the live organisms or their metabolite’s usage with aim to decrease their quantity and limitation the pest’s harmfulness. The treating was provided in phenophase “fruit forming” by tank mixture: bioinsecticides Actofit (Aversectin C, 0.2 %), coefficient emulsion in rate 2.0 l/ha and Gaupsin (bacterium Pseudomonas aureofaciens В-111 and В-306,viable titer of cells 1х104 μg of preparation), P (6.0 l/ha). It decreased the number of green apple aphid and mites on 80.4%. Leafroller moths and moth’s number was decreased on 71.0%. The following treating was provided in phenophase “fruit growing”, when fruit had a size of common hazel. It was treated by biological insecticides Actofit, coefficient –emulsion at the rate 2 l/ha and Lepidocid (bacterium acillus thuringiensis var. Kurstaki, 3 serotype, titer 1.5х109 spores/ml), solution (4.0 l/ha). This treating was inhibited the damaged of green apple aphids and mites on the level 78,0%, Lepidoptera phitophages of codling moths, leafroller moths, mites are decreased on 73.3%. The fifth treating was provided on phenophase “fruit’s growing” (fruit in walnut’s size). It was decreased the quantity of codling moths, leafroller moths, moths on 67.5%, aphides and mites were decreased on 71.1% by Gaupsin solution at the rate 6,0 l/ha and koloradocid (bacterium Bacillus thuringiensis, titer not less than 1х109 CFU/ml), powder (3.0 kg/ha) usage. Then apple-trees plantation were spread at phenophase “fruit ripening” (third July’s ten-days) by bioinsecticide Lepidocide solution at the rate 4.0 l/ha. It’s technical efficiency was on the level 69.8%. The last treating was provided in phenophase “fruit’s ripening”(at the end of August) by biological preparation Gaupsin solution (6.0 l/ha). It allows to receive the technical efficiency against codling moth on the level 69.7%. The present system yield was consisted of in average 22.8 t/ha including 13.33 t/ha for 1st sort, 7.1 t/ha for 2nd sort and 2.37 t/ha for non-standard fruits. The change of some chemical treating on biological preparation usage allows seriously to decrease the chemical preparations’s usage with minimizing pesticide’s negative impact on apple-tree agrocenosis.

86 ОПРЕДЕЛЕНИЕ ВОДНОГО СТАТУСА И ГАЗООБМЕНА ЛИСТЬЕВ РАСТЕНИЙ СОИ В ПОЛЕВЫХ УСЛОВИЯХ

Харчук О., Брынза Лилия, Баштовая Светлана Институт генетики, физиологии и защиты растений, Кишинэу, Республика Молдова e-mail: [email protected]

С увеличением дефицита доступных водных ресурсов разумной целью является увеличение эффективности использования воды (ЭИВ) растениями. При оценке использования воды листьями часто используют характеристическую (“intrinsic”) величину ЭИВ за короткие временные периоды: мгновенные (instantaneous, i) и суточные (daily, d), при этом для оценки ЭИВ листом используют отношение веса ассимилированного СО2 (общая ассимиляция СО2 минус дыхание) к весу транспирированной воды [Sinclair et al., 1984]. Для «мгновенных» определений ЭИВi предложено использовать и другие параметры, например, отношение фотосинтеза к устьичной проводимости. Bunce (2016) измерил параметры газообмена 15 сортов сои, включая СО2-ассимиляцию, концентрацию СО2 в подустьичной полости, устьичную проводимость и ЭИВi, в связи с возможным генетическим улучшением использования воды листьями растений сои. Объект исследования – растения районированного в Республике Молдова сорта сои Аура. Исследования проводили в 2019 г. на растениях, выращенных в полевых условиях на участке Института генетики, физиологии и защиты растений Молдовы, плотность фитоценоза сои 200 тыс. растений на гектар при междурядьях 50 см. Измерения параметров газообмена листа проводили портативным газоанализатором ADC BioScientific LCpro-SD (Great Britain). Для тестирования чувствительности прибора к изменению водного режима растений создали делянки с разной влагообеспеченностью растений: неполивные и с локальным увлажнением в ряду растений. К сроку тестирования прибора (1 августа 2019 г., или 97 дней после сева), по данным гравитометрических измерений влажности почвы, в неорошаемом ценозе во всех горизонтах слоя 0-100 см влажность не превышала 10% сухой массы почвы, что близко к влажности завядания растений. В то же время в слое 100-150 см имелась доступная влага для поддержания транспирации растений за счет воды глубоких почвенных горизонтов (на глубине 150 см влажность почвы была равна влажности на черном пару, 14% сухой массы -2 почвы). Локальное увлажнение проводили минимальной поливной нормой, 5 литров Н2О м поверхности почвы, всего было проведено три полива. ФАР на поверхности листа при измерениях газообмена 1000 μмоль квантов м-2 сек-1. По результатам измерений были получены достоверные различия по таким показателям: устьичная проводимость – 0,22±0,02 -2 -1 -2 -1 ммоль Н2О м сек после полива против 0,16±0,02 ммоль Н2О м сек без орошения; -2 -1 интенсивность транспирации - 2,37±0,10 ммоль Н2О м сек после полива против 2,09±0,12 -2 -1 ммоль Н2О м сек без орошения; транспирационный коэффициент - 68±2 г Н2О/г СО2 после полива против 64±1 г Н2О/г СО2 без орошения (изменение скорости фотосинтеза при этом -2 -1 -2 -1 было 14,42±0,79 μмоль СО2 м сек после полива против 13,33±0,86 μмоль СО2 м сек без орошения). В целом, газоанализатор ADC BioScientific LCpro-SD (Great Britain) высоко чувствителен к изменению водного режима растений при незначительных изменениях водного баланса в ценозе сои.

87 АКТИВНОСТЬ ФОТОСИНТЕТИЧЕСКОГО АППАРАТА ЛИСТЬЕВ РАСТЕНИЙ СОИ В УСЛОВИЯХ ОГРАНИЧЕННОЙ ВЛАГООБЕСПЕЧЕННОСТИ

Харчук О., Раля Т. Институт генетики, физиологии и защиты растений, Кишинэу, Республика Молдова e-mail: [email protected]

Улучшенный фотосинтез считается фактором увеличения продуктивности растений [Zu et al., 2010]. Для определения активности фотосинтетического аппарата растений применимы методы исследований на разных уровнях биологической организации, от первичных квантовых и молекулярных процессов до определений листовой поверхности растений и ценоза в качестве меры их фотосинтетического потенциала. Объект исследования – растения районированного в Республике Молдова сорта сои Аура. Исследования проводили в 2019 г. на растениях, выращенных в полевых условиях на участке Института генетики, физиологии и защиты растений Молдовы, плотность фитоценоза сои 200 тыс. растений на гектар при междурядьях 50 см. Для измерений использовали растения сои, выращенные при разной влагообеспеченности: неполивные и с локальным увлажнением в ряду растений. Водный дефицит листьев определяли по методике Turner (1981). Индекс хлорофилла (CI) определяли с помощью хлорофиллометра модель SPAD-502 [Loh et al., 2002]. Квантовый выход фотосистемы II (Y) определяли флуориметром PAM 2100 (ФРГ) [Dascaliuc et al., 2007]. В качестве меры фотосинтетического потенциала растений определяли их листовую поверхность (ЛП); измерения проводили недеструктивным методом с расчетом площади каждого тройчатого листа по формуле Bakhshandeh et al. (2011). Определяли количество бобов в каждом узле изучаемых растений, также учитывали стадии онтогенеза растений по Fehr, Caviness (1977). В качестве меры активности фотосинтетического аппарата листьев растений использовали как непосредственно индекс хлорофилла (CI) и квантовый выход фотосистемы II (Y), так и их произведение (CIхY). В качестве меры фотосинтетической эффективности хлорофилла также использовали отношение величины квантового выхода фотосистемы II к величине индекса хлорофилла (Y/CI). Установлено, что разнокачественность растений в ценозе (в неорошаеых условиях и при поливе) существенно зависит от Y, ЛП и количества бобов на растении. В стадии наполнения семян в условиях полива растения характеризовались стабильной нагрузкой (до 3 бобов на дм2 ЛП), а опад листьев не превышал 5% ЛП (оставшаяся ЛП=16,5±1,1 дм2): при этом активность фотосинтетического аппарата растений (CIхY) и эффективность хлорофилла (Y/CI) стабильны, соответственно 0,039±0,002 и 1,62±0,04, даже в условиях дневного повышения водного дефицита листьев до 20%. В неорошаемых условиях у отдельных растений опад достигал 50% ЛП (с оставшейся ЛП до 10,8 дм2) при широком диапазоне нагрузки листовой поверхности растений (2÷4 боба на дм2 ЛП), максимально до 10 семян на дм2 ЛП. С уменьшением оставшейся ЛП и ростом водного дефицита листьев снижаются активность фотосинтетического аппарата и, особенно, эффективность хлорофилла: до 1,13 против 2,51 при малом опаде и минимальной (до 2 бобов на дм2 ЛП) нагрузке единицы ЛП бобами как потребителями фотоассимилятов. В целом, определение активности фотосинтетического аппарата растений и эффективности хлорофилла в совокупности с определениями фотосинтетического потенциала растений на уровне растений и ценоза являются информативным компонентом исследований продуктивности растений в условиях ограниченной влагообеспеченности и в связи с эффективностью использования воды.

88 УЧАСТИЕ ВОДЫ ГЛУБОКИХ ПОЧВЕННЫХ ГОРИЗОНТОВ ВО ВЛАГООБЕСПЕЧЕНИИ РАСТЕНИЙ СОИ

Харчук О., Будак Ал., Кириллов Ал. Институт генетики, физиологии и защиты растений, Кишинэу, Республика Молдова e-mail: [email protected]

В условиях ограниченных водных ресурсов важной целью является увеличение эффективности использования воды растениями (Borlaug, 2000); в свою очередь, эффективное использование воды связано с эффективностью (физиологической и агрономической) минерального питания растений, и хотя для получения воды и питательных веществ корневая система в основном использует верхний слой почвы, но также может использовать и более глубокие слои, до 1 м или даже глубже (Roy et al., 2006). Известно, что для сои глубина распространения корней может превышать 150 см (Fageria et al., 1997; Fan et al., 2016), что говорит о возможностях потребления воды растениями сои из разных зон в большом почвенном объеме. Исследование архитектуры таких объемных корневых систем является сложной задачей. При ограниченной влагообеспеченности урожай является результатом взаимодействия трех факторов: количества использованной воды, эффективности использования воды и индекса урожая; при этом в поле могут иметь место достаточно строгие отрицательные взаимоотношения этих факторов с урожаем (Passiora, 1977). Анализ опубликованных полевых экспериментов Board and Modali (2005) показывает, что при увеличении продуктивности ценоза сои выше 300 г зерна/м2 почвы (30 ц/га) индекс урожая уменьшается. При оценке возможных условий эффективности использования воды, которые могут приводить к уменьшению урожая, обсуждаются как корневая система растений, так и их листовая поверхность: селекция на глубокое укоренение в подпочве, использование сорта, который чувствует себя хорошо при очень больших влагозапасах, а также способность к быстрому и равномерному развитию листовой поверхности (Passiora, 1977). Целью настоящего исследования являлось определение вклада воды глубоких (60-150 см) горизонтов почвы в сезонное водопотребление ценоза сои. Объект исследования – фитоценозы растений сои районированного в Республике Молдова сорта Аура. Исследования проводили в 2016-2018 гг. на полях Института генетики, физиологии и защиты растений. Определяли влажность почвы в слое 0-160 см при севе и при уборке урожая, образцы почвы брали раздельно по горизонтам, через 10 см по глубине. Установлено, что сезонное уменьшение почвенных влагозапасов глубоких (60-150 см) горизонтов составляло 46-63% от общего (в слое 0-150 см) сезонного снижения запасов почвенной влаги. Сезонное уменьшение почвенных влагозапасов глубоких (60-150 см) горизонтов составляло от 15 до 49% эвапотранспирации и находилось в обратной зависимости от количества сезонных осадков: максимальный расход почвенных влагозапасов приходится на год с меньшим количеством осадков; минимальный расход почвенных влагозапасов приходится на год с большим количеством осадков. В целом, участие глубоких почвенных горизонтов в водопотреблении ценоза может быть существенным фактором, влияющим на эффективность использования воды и элементов минерального питания растений в полевых условиях.

89 ЛОВЧИЕ ПОЯСА - ИНСТРУМЕНТ ДЛЯ ОЦЕНКИ СОСТОЯНИЯ САДОВЫХ ПОПУЛЯЦИЙ ЯБЛОННОЙ ПЛОДОЖОРКИ В ИХ ПЕРВОЙ ГЕНЕРАЦИИ

Язловецкий И. 1, Негреску М. 2 1Институт генетики, физиологии и защиты растений, Кишинэу, Республика Молдова 2Агропромышленная фирма Fundaţia Prod SRL, Кишинэу, Республика Молдова e-mail:[email protected]

Использование ловчих поясов - один из лучших известных приемов беспестицидного контроля численности вредных членистоногих в садовых агроценозах. По литературным данным и результатам наших многолетних наблюдений, применение ловчих поясов позволяет оценить и существенно (на 30-50%) снизить численность гусениц второго поколения яблонной плодожорки, уходящих на зимовку. Получаемая при этом информация важна для оценки потенциальной вредоносности яблонной плодожорки и при планировании мероприятий по защите сада от нее в следующем полевом сезоне. Однако в литературе отсутствуют сведения о контроле с помощью ловчих поясов состояния популяций первого поколения этого вредителя. Это может быть объяснено следующими причинами: 1. Первое поколение яблонной плодожорки значительно уступает по численности второму. 2. Основная часть гусениц I поколения, в отличие от второго, завершив питание, не уходят в почву, а ищет убежища в трещинах и углублениях коры на скелетных ветвях и штамбах деревьев. Поэтому лишь немногие гусеницы I поколения попадают в ловчие пояса. 3. Склонность к агрегации гусениц I поколения яблонной плодожорки, завершивших питание, выражена в гораздо меньшей степени, чем у гусениц II поколения. 4. Нимфальная стадия в I поколении длится всего 5-10 дней, в течение которых гусеницы окукливаются, а из образовавшихся куколок уже в середине июля начинают отрождаться бабочки II поколения. Цель работы состоит в анализ результатов отлова гусениц первого поколения садовых популяций яблонной плодожорки ловчими поясами. В 9–летнем интенсивном саду грецкого ореха на штамбах деревьев в 50 см от поверхности почвы устанавливали 100 ловчих поясов из полос двойного гофрированного картона шириной 7 – 8 см. Сад расположен в селе Князевка (район Леово) и принадлежит агропромышленной фирме Fundaţia Prod SRL. Пояса экспонировали с середины июня по середину августа 2018 и 2019 гг. Ежегодно в этот период по пять раз (26 июня, 12, 30 июля, 9, 13 августа) часть ловчих поясов (10 - 50 шт) снимали, обнаруженных в них насекомых подсчитывали, группируя их по фазам развития. В итоге установлено: 1. Общая численность особей I поколения яблонной плодожорки, отловленных 100 ловчими поясами, составила в среднем 480 шт, что соответствует плотности популяции II поколения вредителя около 480 особей/га .сада. 2. Доля гусениц яблонной плодожорки в ловчих поясах в течение всего периода наблюдений была близка к 35% от количества отловленных насекомых. 3. Доля куколок в анализируемом биоматериале уменьшалась во времени примерно в 30 раз (от 61 % 12 июля до 2% 13 августа). За этот же период доля экзувиев в ловчих поясах значительно увеличивалась (от 5% до 64 %). Приведенные результаты позволяют заключить, что с помощью ловчих поясов можно оценивать численность и контролировать состояние. первой генерации садовых популяций яблонной плодожорки.

90 ROLUL LITIEREI IERBOASE IN ACTIVIZAREA COMPLEXULUI DE INSECTE BENEFICE LA CULTURILE SAMBUROASE

Iordosopol Elena, Maevschii V. Institutul de Genetica, Fiziologie si Protectie a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail:[email protected]

În practica protecţiei plantelor conveierele florale atît artificiale cît şi cele naturale au demonstrate eficacităţi destul de inseminate, în reglarea populaţiilor dăunătorilor. În decursul a 8 ani de investigări, în direcţia ecologizării agriculturii, au fost evaluate culturi nectarifere solitare şi mixate. S-a observat că, cele mixate asigură un conveier floral mai stabil şi mai aproape de cel natural. Nu-şi pierd valoarea nici culturile solitare, însă ele necesită de acţiuni repetate de însămînţare pentru a asigura perioada de primavară-toamnă cu alimentare primară sau secundară a întregului complex de paraziţi şi prădători în culturile agricole. În prizma situaţie fitosanitare şi alertei Europene spre răsărit înaintează 2 specii de molii (Grapholitha lobarzevschii şi G. inopinata) şi 2 (G. pakardi şi G. prunivora) din continentul American, care ataca culturile sîmburoase. Se ştie, ca moliile (Grapholitha molesta, G. funebrana şi G. jantinana) sînt oligofage şi sînt reglate de un număr de variat de paraziţi, printre care domină reprezetanţii familiei Ichneumonidae. În cercetările noastre ele au lipsit în mixurile artificiale, dar sau observat în acele naturale. Scopul a constat în evidenţirea paraziţilor dăunătorilor principali la prun sub influienţa mixurilor artificiale. Analiza indicilor obţinuţi la prun, în anul 2017, a evidenţiat 8 familii de paraziţi din superfamilia Chalcidoidea. În rezultat, paraziţii oofagi din familia Mymaridae acumulaţi pe baza cicadelor, în mixul natural (conveier de ierburi) şi mix artificial (conveier de culturi) au fost în medie de 3 ori mai mari în raport cu coronamentul, iar ulterior migrând în coronament au avut valori de 2 ori mai mari în variantă, faţa de martor. O altă familie de oofagi importantă - Trichogrammatidae, în mixuri a progresat pe baza ouălor de noctuide şi alte lepidoptere, iar migrînd în coronament au fost de 5 ori mai mari în varianta experimentală, față de martor. Paraziţii larvelor şi pupelor au fost reprezentate de 3 familii. Familia Encertydae a avut valori în medie de 3,3 ori mai mari în mixuri, în raport cu coronamentul. Aceasta denotă, ca speciile acestei familii depind de covorul ierbos, atât natural cât şi artificial. În coronament au fost de 2 ori mai mulţi în varianta, faţă de martor. Speciile din fam. Pteromalidae, în mixuri, au avut valori în medie de 11 ori mai mari, faţă de coronament. Reprezentanţii acestei familii sânt paraziţi şi fitofagi, deacea este important, de a diviza aceste două grupuri. Aceeaşi situaţie este şi la fam. Eulophiidae, care au fost cei mai numeroşi şi au avut valori în medie de 18 ori mai mari în mixuri, faţă de coronament. S-au notat alte două familii de paraziţi ai dăunătorilor sugători din superfamiliile Coccidea şi Aphydoidea. Familia Aphelinidae a avut valori în medie de 5 ori mai mari în coronament, faţă de mixuri. Aceasta denotă dependenţa acestei familii de populaţiile păduchelui lînos şi a altor păduchi ţestoşi şi falşi. Familia Aphidiidae a avut valori în medie în mixuri de 1,2 ori mai mari, faţă de coronament. Numărul speciilor acestora depinde de coloniile de afide. După cum se observa, din 8 familii doar 5 familii au avut valori mari în mixul natural, raport cu cel artificial. În concluzie s-a conchis, că un element important în astfel de cercetari este diagnoza pînă la specie a indivizilor colectaţi pentru evidenţierea ratei procentuale (indicile principal al eficacităţii paraziţilor), care poate fi obţinut anume prin eclozări individuale. Procesul acesta este anevoios, însă mai elocvent redă rolul speciilor parazite asupra unui grup anumit de dăunători. În cercetări a ramas un gol legat anume de crearea acestui conveier floral, important, care prevede sa activeze în perioada cînd complexul dăunător acumulat (perioada temperaturilor înalte şi umiditatea scăzută în lunile iulie- august (perioada fatală pentru insectele benefice)) pleaca la iernat în cantităţi enorme. Conveierul floral apărut în primăvară poate influienţa populaţiile dăunătoare acumulate din toamna. Iar cel de toamnă nu permite de a întra în iarna în cantităţi numeroase. Prin urmare, conveierul floral natural a demonstrate o stabilitate în toţi acesti ani de investigare, prin un număr enorm de artropode per 1 metru patrat şi cu un complex destul de variat de specii atât benefice, cât şi neutre.

91 НОВЫЙ ПОХОД В ИССЛЕДОВАНИЯХ С ИСПОЛЬЗОВАНИИ СМЕСЕЙ НЕКТАРОНОСОВ ДЛЯ РЕГУЛЯЦИИ ЧИСЛЕННОСТИ ВРЕДИТЕЛЕЙ

Иордосопол Е. И., Маевский В. П., Феодор Г. С. Институт генетики, физиологии и защиты растений, Кишинэу, Республика Молдова e-mail: [email protected].

В Республике Молдова система защиты многолетних культур от вредителей и болезней включает до 15 обработок химическими веществами за сезон. Ранее благодаря биологическому методу защиты растений они снизились до 5, и смогли привести к положительной экологической обстановке и защите окружающей среды. Известен тот факт, что хищники и паразиты в интенсивных садах восстанавливаются после обработки в 2 -3 год, только в том случае если воздействие химических веществ снижен до минимума. Содержание и массовое разведение полезных насекомых в искусственных условиях затратная и дорогостоящая из-за стоимости энергоресурсов. В сельскохозяйственной практике часто используют культуры растений нектароносных трав как субстрат для дополнительного питания некоторых полезных насекомых. Про функции в качестве первичного субстрат для формирования комплекса полезных насекомых в условиях Р. Молдова сообщил исследователь Коренев А. в 1988 г. На сегодняшний день, в практике защиты растений, для создания меженных полос близости сельскохозяйственных плантации, фирмы Bayer и Syngenta предлагают разновидности смесей нектароносных трав с количеством видов растений от 11 до 32. Во Франции используется так называемые меланжи, в состав которых входят от 4 до 15 растений. В нашем случае предлагается мультифункциональный прием нектароносной смеси как для первичного, дополнительного питания, так и для сохранения и удержания фаунистического комплекса насекомых, которые способствует регуляции численности вредителе на 50-100%. Первоначально для таких исследований создаются диагностические списки, особенно по паразитам, что способствует в дальнейшем анализировать глубже и получить достоверные данные по проценту паразитирования плодожорок и тлей. В дальнейшем приступают к выбору растений для создания смеси, которые были бы совместимы. В нашем случае в качестве материала исследований использовали 3 смеси нектароносных трав из них 2 эталона фирмы Bayer и Syngenta, которых сравнивали с природным контролем. В тоже время провели учет лета самцов плодожорок на ловушку с феромоном и анализ поврежденных побегов и плодов. В смесях проводили учеты полезной фауны путем кошений и желтых клеевых ловушках. В результате, в 2013-2015 гг., созданная нами смесь, было испытана в персиковом саду разных возрастов, где наблюдали воздействие климактерических условий на жизнедеятельности смесей. Опыт был размешен в плантации персика в близости очагов паутинного клеща Tetranychus urticae Koch и Myzus persicae L. по-разному. Созданная нами смесь привлекала на 52% (паразиты – 35%, хищников – 60% и зоофитофагов 5%) больше полезной фауны, чем в контроле. Процент повреждения побегов восточной плодожоркой и фруктовой полосатой молью был ниже на 17%, чем в контроле. В климатических условиях 2015 года, доминирующим видом был клещ Allotrobium. pulvinum на 59%. В 2016 году опыт был заложен в индустриальном сливовом саду, в близости многолетних очагов клещей, тлей и плодожорок. Во втором году (2017), после весенней регенерации путем самосева, провели картирование и определяли процент регенерации смесей, который составил 80%. В 2017-2018 гг. опыт был заложен латинским квадратом в молодом сливовом саду современного типа, на поздний сорт, Анжелино, где смогли получить от 40 до 81 % биологическую эффективность против тлей. Самый высокий процент обеспечила смесь разработанный нами и культура чернушки (Nigella sativa L.).

92 ОТБОР ВЫСОКОАКТИВНЫХ МИКРООРГАНИЗМОВ С АНТАГОНИСТИЧЕСКИМИ И ЦЕЛЛЮЛОЗОЛИТИЧЕСКИМИ СВОЙСТВАМИ ПРИ РАЗРАБОТКЕ ПРЕПАРАТА ДЛЯ ОЗДОРОВЛЕНИЯ ПОЧВЫ

Юзефович Елена, Войтка Д. Институт защиты растений, Национальная академия наук Беларуси, Прилуки, Беларусь e-mail: [email protected], [email protected]

Пожнивные остатки пораженных растений служат одним из основных источников инфекции. В почве пожнивные остатки подвергаются минерализации под воздействием сапротрофов. Однако в интенсивных технологиях сельскохозяйственного производства для сохранения супрессивных свойств почвы необходима интродукция агрономически полезных микроорганизмов. Известно, что среди почвенных микроскопических грибов имеются виды, способные продуцировать полные внеклеточные целлюлолитические системы (эндо- и экзоглюканазы, β-глюкозидазу), – это представители рода Trichoderma Pers. (T. viride, T. reesei, T. koningii и др.), Penicillium Link (P. funiculosum), Fusarium Link (F. solani). Использование грибов, обладающих антагонистическими и целлюлозолитическими свойствами, способствует ускорению разложения растительных остатков и одновременно приводит к снижению фитопатогенной нагрузки. Целью наших исследований являлся скрининг высокоактивных микроорганизмов – антагонистов и целлюлозолитиков – для создания на их основе микробиологического препарата, обеспечивающего оздоровление почвы и повышение продуктивности сельскохозяйственных культур. В ходе исследований из проб почвы с растительными остатками, подвергшимися разложению в природных условиях, нами изолированы микромицеты рода Trichoderma. Оценка целлюлозолитической активности отобранных изолятов показала, что все исследуемые микромицеты интенсивно разрушали целлюлозу. Степень ферментативной активности варьировала в зависимости от изолята. Наибольшей целлюлозолитической активностью обладали изоляты грибов Trichoderma sp. L-3 (интенсивность разложения целлюлозы – 17,1-51,9 %) и Trichoderma sp. P-1 (14,9-64,7 %). Изучение их роста и развития на различных органических растительных субстратах (солома пшеницы, овса, ячменя, размолотые стручки рапса), а также фильтровальной бумаге (тесты FPA) показало, что на всех средах, кроме среды с добавлением соломы ячменя, отмечена прямая зависимость между скоростью роста, продуктивностью грибов и количеством растительных остатков. Гриб Trichoderma sp. L-3 показал более высокую целлюлозолитическую активность на четырех субстратах – в тесте FPA, на растительных остатках пшеницы, овса и рапса. Скрининг антагонистической активности грибов рода Trichoderma позволил выявить наиболее активные в отношении фитопатогенных грибов изоляты – Trichoderma sp. L и Trichoderma sp. L-6. В отношении гриба F. oxysporum ингибирование роста данными изолятами на 7-е сутки совместного культивирования составило 66,7-69,4 %, F. graminearum – 57,5-63,8 %, R. solani – 60,7-65,5 %, Alternaria sp. – 72,3-82,4 %, A. alternata – 65,3-70,9 %. Проведенная оценка совместимости наиболее активных по целевым свойствам изолятов грибов рода Trichoderma показала наличие различных реакций вегетативной совместимости: образование мицелиального валика, нейтральную (индифферентную) реакцию, мелдинг-реакцию, бордюр, ограничение роста. По результатам комплексной оценки целлюлозолитической, антагонистической активности, вегетативной совместимости в качестве основы микробного инокулянта для оздоровления почвы отобраны штаммы грибов Trichoderma sp. L-6 и Trichoderma sp. L-3.

93 APRECIEREA INFLUENȚEI BIOSTIMULATORULUI REGLALG ASUPRA COSTULUI REZISTENȚEI DIFERITOR GENOTIPURI DE GRÂU (Triticum aestivum L.) LA ȘOCUL TERMIC

Jelev Natalia, Badașco Sabina Institutul de Genetică, Fiziologie și Protecție a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail:[email protected]

Astăzi, în condițiile ecologice determinate de schimbările climatice globale, savanții și specialiștii practicieni recunosc necesitatea aplicării în complex a metodelor de selecție și dirijare a creșterii și dezvoltării plantelor. Printre aceste metode se numără și metodele expres de triere a genotipurilor după rezistența lor specifică la temperaturi extreme, precum și a metodelor de inducere a rezistenței prin aplicarea biostimulatorilor, tratând semințele înainte de semănat. În laboratorul de Biochimia Plantelor din cadrul Institutului de Genetică, Fiziologie și Protecție a Plantelor deja de mai mulți ani se efectuează cercetări, privind aprecierea rapidă a rezistenței diferitor genotipuri de grâu la temperaturi înalte și ger. La fel se testează influența biostimulatorului Reglalg asupra rezistenței și sporirea productivității grâului comun de toamnă. În urma acestor cercetări a fost demonstrat că expunerea semințelor a 50 genotipuri cultivate în regiunea Haricov, Ucraina, la doze specifice a temperaturilor joase, sau înalte, a dat posibilitatea de a le distribui după rezistență în trei grupe: cu rezistență înaltă (1), medie (2), și joasă (3). Ulterior a fost demonstrat că tratarea semințelor a nouă genotipuri cu rezistență diferită faţă de temperaturi extreme cu biostimulatorul Reglalg a sporit procentul de germinare a semințelor cu rezistență mică, medie și înaltă respectiv cu 20%, 15% și 10%. Utilizând metoda accelerată de determinare a rezistenței plantelor la temperaturi înalte, a fost demonstrat că aplicarea șocului termic asupra semințelor de grâu a nouă genotipuri (Blogadarca, Moldova 11, Pisanca, Misia, Cuialnic, Nufic, Moldova 77, Moldova 5, Moldova 66) duce la diminuarea masei plantulelor germinate și a eficacității utilizării substanțelor de rezervă din endosperm cu atât mai pronunțat, cu cât rezistența genotipului este mai joasă. În așa fel, dacă în biomasa plantulelor soiurilor de grâu detectate ca soiuri rezistente la șocul termic (Moldova 66, Moldova 5, și Moldova 77) în vârsta de 5 zile se acumulează 22, 19 și 17% din masa consumată de semințe pentru creștere, atunci la plantulele soiurilor de grâu cu rezistență medie (Nufic, Cuialnic, Misia) se acumulează 16, 14 și 13% și la cele a genotipurilor sensibile (Pisanca, Moldova 11 și Blogadarca) această rată atinge doar 12, 11, sau 6%. Cercetările noastre au demonstrat că rezistența genotipului la temperaturi extreme este cu atât mai joasă, cu cât procentul de substanțe de rezervă „cheltuite” pentru biosinteza unei unităţi a masei vegetale a plantulelor este mai mare. În același timp a fost testată influența biostimulatorului Reglalg utilizat pentru tratarea semințelor înainte de semănat asupra costului rezistenței genotipurilor de grâu la temperaturi extreme. Rezultatele obținute au dovedit că valoarea costului alocat de plantă, pentru a obține o unitate a biomasei, a diminuat la semințele tratate cu soluție a biostimulatorului Reglalg. Influența acestui biostimulator a fost specific în dependenţă de rezistenţa genotipurilor; la genotipurile sensibile la șocul termic acest cost a diminuat cu 11%, atunci când la genotipurile rezistente - doar 3% în comparație cu plantele martor. Aceste date relevă că aplicarea preparatului Reglalg pentru tratarea semințelor de grâu înainte de semănat nu numai sporește rezistența plantulelor față de stresul termic, dar totodată optimizează procesele de alocare a substanțelor nutritive pentru germinare și creștere. În concluzie menționăm că, utilizând diferite genotipuri de grâu comun de toamnă, a fost demonstrată eficacitatea metodelor accelerate de determinare a rezistenţei genotipurilor la temperaturi extreme , iar tratarea semințelor înainte de semănat cu soluții ale biostimulatorului Reglalg asigură nu numai sporirea rezistenţei primare a plantulelor, dar şi diminuarea costului alocat de plantă pentru creșterea unei unități ale biomasei ei. Astfel, a fost constatat că apreciind valorile costului rezistenței, apar perspective de apreciere corectă a rezistenței genotipurilor înrudite la temperaturi excesive, la fel ca și optimizarea procedeelor de utilizare practică a biostimulatorilor.

94 EVALUAREA EFICIENȚEI TEHNOLOGIEI CU DOUĂ COASE LA Passiflora incarnata L. ÎN PRIMUL AN DE VEGETAŢIE

Jelezneac Tamara, Baranova Natalia, Vornicu Zinaida Institutul de Genetică, Fiziologie și Protecţie a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail: [email protected]

Pasiflora este o plantă erbacee perenă din familia Passifloraceae, originară din zonele tropicale ale Americii, Asiei și Australiei. Aspectul său deosebit i-a asigurat un succes mare ca plantă ornamentală, însă proprietăţile sale medicinale fac ca pasiflora să fie o plantă specială cu proprietăţi sedative puternice și calmante, antispastice, hipotensive. În scop terapeutic se utilizează frunze, fructe, flori, ramuri tinere. Fructele sunt comestibilе, bogate în vitamina C, minerale, fibre. Planta Passiflora incarnata L. este inclusă în Farmacopeea Europeană, Registrul de Stat al medicamentelor din Federaţia Rusă. Ca componentul de bază pasiflora intră în compoziţia ceaiurilor curative cu însușiri calmante „Ceai de seară” și „Pasiune”, produse în Moldova de firma Doctor Farm.Cercetările s-au efectuat pe teren deschis izolat, în condiţii de irigare a IGFPP. În cercetare s-au aflat două variante: V1–obţinerea unei recolte la pasiflora în faza maturizării fructelor –martor; V2-tehnologia cu 2 recolte: prima la înflorire, a doua în faza începutului formarii fructelor la otavă. Răsadul a fost obţinut din seminţe populației bonificate, crescut în seră, în lizimetre. Semănatul s-a efectuat la începutul lui aprilie, peste 48 de zile răsadul a format 5-7 frunze și a fost plantat în câmp. Sistemul de îngrijire a plantelor a inclus 3 irigări și o hrană suplimentară cu N30. În așa condiții plantele s-au dezvoltat bine, masa unei plante fiind în medie de peste 170 g, lungimea lăstarului axial depășea 70 cm, cu 5-6 lăstari laterali formați. Recoltarea s-a efectuat în prima decada a lunii august în faza înfloririi și începutului formării fructelor. În I coasă s-a obținut 5,0 t/ha materie primă de calitate înaltă, alcatuită din lăstari bine înfrunziți, cota frunzelor fiind de 54%, practic fără fructe. Către sfârșitul lunei octombrie otava de la plantele tăiate la prima recoltare, în coasa a doua consta din lăstari tineri bine înfrunziți, pe care s-au dezvoltat și organe reproductive - flori și fructe cu dimensiuni 5-7 mm. La a doua coasă s-a obținut 4,7 t/ha materie primă. În decada a doua a lunii octombrie plantele din varianta martor, aflate în faza măturizării fructelor, au format o producție de materie primă proaspătă de 9,2 t/ha și 1,8 t/ha fructe cu creștere finisată, inclusiv peste 50% din care aveau semințe brune viabile. Conform cerințelor de calitate în herba farmaceutica de pasiflora este inadmisibilă prezența fructelor cu dimensiuni peste 8 mm. În tehnologia cu 2 recolte pe sezon producția de materie primă proaspătă a constituit în total 9,7 t/ha materie primă, ori 106% față de martor, inclusiv 54% revinea primei coase și 52% coasei a doua. În tehnologia cu două recolte plantele erau bine înfrunzite (50-54% frunze) fără fructe mature,care sunt inutile pentru obținerea herba farmaceutica. Masa vegetativă totală în tehnologia cu o singură coasă s-a arătat mai mare cu 9%, însă producţia utilă pentru scop farmaceutic este mai mare în tehnologia cu 2 coase. Producţia de Herba farmaceutica uscată la 13% umiditate s-a arătat mai mică cu 6% la martor – 2,7 t/ha, contra la 2,9 t/ha în tehnologia cu 2 coase. Materia primă recoltată conţine 23-26% substanţe extractive, contra la minimum 18%, conform cerinţelor de calitate în vigoare. Passiflora incarnata L. adoptată condiţiilor climaterice din R.Moldova cultivată prin răsad în primul an de vegetaţie în tehnologia cu 2 coase pe sezon, realizează o producţie de 9,7 t/ha materie primă farmaceutică de calitate superioară, din care se obține 2,7 t/ha herba uscată. Aplicând tehnologia cu o singură recoltă putem obţine 9,0 t/ha herba proaspătă ori 2,6 t/ha herba uscată și 1,8 t/ha fructe cu creştere finisată, din care putem căpăta 47 kg/ha seminţe mature.

95 EFICIENȚA METODEI DE CAPTARE ÎN MASĂ A MASCULILOR Heliothis armigera ÎN AGROCENOZA CULTURII DE PORUMB ZAHARAT

Jelezneac Elizaveta, Nastas T. Institutul de Genetică Fiziologie şi Protecţie a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail:[email protected]

În Republica Moldova suprafeţele cultivate cu cultura de porumb zaharat constituie anual circa 3000 ha și se află în continuă creştere. Cultura corespunzătoare este atacată anual de mai multe specii de dăunători, dar unul din cei mai importanţi, din punct de vedere economic este Heliothis armigera. Dauna provocată culturii de porumb zaharat de către larvele acestei specii este destul de esenţială. Abordarea problemelor protecţiei biologice a plantelor şi elaborarea sistemelor de obţinere a produselor ecologice poate fi făcută ţinând cont de cele 3 mari grupe de agenţi biologici: insecte utile, microorganisme (virusuri, ciuperci şi bacterii) şi substanţe biologic active (în primul rând feromonii sexuali al insectelor dăunătoare). Utilizarea pe larg a pesticidelor duce nemijl ocit şi la reducerea numărului de specii benefice. Situaţia creată poate fi soluţionată doar prin elaborarea metodelor, la baza cărora vor sta mecanismele naturale de control a relaţiilor dintre organismele dăunătoare şi plantele de cultură – una din ele este aplicarea feromonilor sexuali. Buha fructificaţilor (Heliothis armigera), este un dăunător, larvele căruia se hrănesc cu un spectru larg de plante, inclusiv multe culturi importante cultivate (porumb, tomate, soia). Pentru protejarea recoltei se aplică anual un număr impunător de pesticide (3-4 tratamente chimice). Scopul cercetărilor în lucrarea dată a fost estimarea eficienţei metodei de captare în masă a masculilor de H. armigera în reducerea densității populaţiei dăunătorului la cultura de porumb zaharat. Pe lotul experimental cu porumb zaharat (S=1,0 ha) au fost montate 10 capcane cu feromonul de sinteză a dăunătorului H. armigera. Formele preparative conțineau feromonul ”ArmiGALI” – elaborat în Institutul de Genetică, Fiziologie și Protecție a Plantelor (certificatul de înregistrare în Registrul de Stat nr.09-0887 din 22.09.2011). Înălțimea de amplasare a capcanelor feromonale a fost ajustată în funcție de perioada de maturare a plantelor de porumb zaharat (1,2-1,5m). Capcanele au fost montate în schema tabelei de șah la o distanță de circa 50 m între ele. Evidenţa și înlăturarea masculilor capturaţi a fost efectuată săptămânal, cu aceeași frecvență au fost înlocuite suporturile adezive, iar formele preparative feromonale au fost înlocuite o dată la 2 săptămâni. Pe parcursul perioadei de vegetație a culturii de porumb au fost evidențiate dezvoltarea a trei generații a dăunătorului H. armigera. S-a constatat, că potenţialul reproductiv în mare măsură se află în dependenţă de consecutivitatea generaţiilor. Astfel, pentru prima generaţie potenţialul de reproducere a constituit 12%, pentru generaţia II – 11%, pentru generaţia III – 77%, ceia ce și corespunde perioadei celei mai favorabile pentru dezvoltarea populației dăunătorului dat. Pe parcursul perioadei de vegetație a culturii de porumb zaharat au fost eliminați din populația, care a habitat pe suprafața lotului experimental de 1 ha, circa 152 masculi activi a dăunătorului H. armigera. Acest fapt a permis ca un număr impunător de femele să rămână neacuplate și numărul de ouă în pontă să fie redus semnificativ. Astfel, aplicarea metodei de captare în masă a masculilor H. armigera a influențat esențial asupra reduceri (cu circa 50% față de martor) a numărului de ouă pe plantele de porumb zaharat și corespunzător, asupra reducerii daunei provocate de către larvele acestui dăunător. Astfel, metoda elaborată reprezintă un element tehnologic eficient în diminuarea populației dăunătorului corespunzător, care își are efectul asupra fazei imago, reducând semnificativ potențialul de a majorarea densității populației și a daunei provocate.

96 ROLUL LUCERNEI ÎN ACUMULAREA AZOTULUI BIOLOGIC ŞI MATERIEI ORGANICE ÎN CERNOZIOMUL LEVIGAT

Leah N. Institutul de Pedologie, Agrochimie şi Protecție a Solului “Nicolae Dimo”, Chișinău, Republica Moldova e-mail: [email protected]

Lucerna (Medicago sativa) este o plantă furajeră perenă, din familia leguminoaselor, cu rădăcina pivotantă, care ajunge la 1-2 metri în sol. Lucerna fixează azotul din atmosferă prin intermediul bacteriilor simbiotante, îmbogăţind astfel solul cu azot biologic. Aceasta permite de a micşora doza de azot chimic în asolamentul de câmp, de a obţine producţie pur ecologică. Contribuie la îmbogăţirea solului cu materie organică - sursă pentru sinteza humusului. Actualmente, capacitatea de fixare a azotului biologic şi acumularea materie organice în sol la cultivarea lucernei în funcţie de condiţiile pedoclimatice este o problemă încă nerezolvată.. Cercetările efectuate la Staţiunea Experimentală ”Ivancea, Orhei” pe cernoziom levigat, pe variantele: nefertilizat (martor), P3,0K28 (fond), fond + N30-150. S-a constatat, că la martor recolta de masă verde a lucernei în medie pentru cinci ani a constituit 217 q/ha. Aplicarea îngrăşămintelor a contribuit la dublarea recoltei de lucernă de la 217 până la 436 q/ha. Pe nivelul optim de nutriţie cu fosfor şi potasiu (P3,0K28) formate în sol s-a obţinut în medie o recoltă de 341 q/ha. Administrarea îngrăşămintelor cu azot pe fondul optim de fosfor şi potasiu a majorat recolta de lucernă cu 7-27%. Pentru formarea recoltei, lucerna foloseşte din atmosferă în medie 60% de azot din necesarul total. Pe varianta martor, în medie anual lucerna a fixat din atmosferă 113 kg/ha de azot. Încorporarea în sol a îngrăşămintelor cu fosfor şi potasiu au contribuit la majorarea capacităţii de fixare a azotului cu 21% faţă de martor. Aplicarea azotului în doze de 30-60 kg/ha pe fondul optim de P3,0K28 a majorat cantitatea de azot fixat din atmosferă cu 55-73% faţă de martor. Mărirea dozelor de azot de la 60 până la 150 kg/ha pe fondul optim de fosfor şi potasiu nu a condus la sporirea capacităţii de fixare a azotului din atmosferă de către lucernă. Prin urmare, aplicarea îngrăşămintelor în doze optime a majorat cantitatea azotului biologic cu 73% in producţia obţinută. În scopul determinării parametrilor de formare a humusului, după al 5-lea an de cultivare a lucernei, a fost determinată cantitatea de masă organică a miriștii şi sistemului radicular. Pe varianta martor masa organică rămasă in sol a constituit 14,4 t/ha, inclusiv 1,8 t din contul miriştei şi 12,6 t/ha al rădăcinilor. Îngrăşămintele chimice au majorat cantitatea masei organice, atât a miriştei, cît şi a rădăcinilor. Masa organică rămasă în sol după cultivarea lucernei pe varianta N60P3,0K28 s-a mărit de 1,9 ori faţă de cel nefertilizat, constituind 27,3 t/ha. Din masa totală rămasă în sol, cota miriştei constituie 10-13%, iar a sistemului radicular 87-90%. Conform datelor experimentale, masa principală a sistemului radicular (76-81%) se formează în stratul activ al solului – 0-100 cm. În al doilea şi al treilea metru de sol s-a format, respectiv: 5,4-6,8% şi 2,2-4,7% din masa totală. Aşadar, la cultivarea lucernei optim fertilizată (N60 P3,0K28) într-un ciclu de cinci ani, anual în sol rămân câte 2,8 t de masă organică în formă de mirişte, iar la terminarea cultivării câte 24,5 t/ha de rădăcini. Utilizând coeficientul de humificare a masei organice (0,15) s-a calculat cantitatea de humus, care poate fi sintetizată. Rezultatele au arătat, că din resturile vegetale ale miriştei anual se formează de la 270 kg/ha de humus pe varianta nefertilizată până la 380-420 kg/ha pe variantele fertilizate. Din masa radiculară pe varianta martor se formează 1880 kg/ha de humus, iar pe variantele cu îngrăşăminte 2660-3680 kg/ha. Cantitatea de humus (78,2-81,2%) formată din resturile sistemului radicular este amplasată în stratul activ al solului (0-100 cm), în deosebi în stratul arabil (62,9-66,5%). S-a stabilit, că din masa organică a miriștii şi a sistemului radicular poate fi sintetizat în total de la 2150 kg/ha humus pe varianta nefertilizat până la 4100 pe varianta optim fertilizat. Aplicarea îngrăşămintelor au contribuit la mărirea cantităţii de humus cu 890-1950 kg/ha sau cu 41-91% mai mult decât la martor.

97 UTILIZAREA ÎNGRĂȘĂMINTELOR VERZI - METODĂ DE REMEDIERE A STRATULUI ARABIL COMPACTAT AL SOLURILOR

Leah Tamara, Cerbari V. Institutul de Pedologie, Agrochimie și Protecție a Solului ”N. Dimo”, Chișinău, Republica Moldova e-mail: [email protected]

Starea actuală de degradare a solurilor din Republica Moldova (compactare, rezerve reduse de humus și elemente nutritive, eroziune, etc.) extinsă pe întreaga suprafața agricolă impune aprofundarea cercetărilor pentru îmbunătățirea tehnologiilor ameliorative și extinderea activităților de monitorizare a stării de calitate a solurilor (cernoziomurilor). Sistemul clasic de lucrare a solului, utilizat până în prezent, a condus la creşterea treptată a producţiei agricole, dar a determinat apariţia degradării prin compactare și destructurare a stratului arabil de sol. Ca alternativă a acestui sistem, o largă răspândire a căpătat sistemul de lucrări pentru conservarea solului, care este componentul principal al Sistemului de Agricultură Conservativă. Agricultura conservativă urmăreşte intensificarea producţiei agricole prin optimizarea utilizării resurselor agricole şi prin contribuirea la reducerea degradării terenurilor prin gestionarea integrată a solului, a apelor şi a resurselor biologice. Fertilitatea solului (substanţele nutritive şi apa) este controlată prin gestionarea acoperii solului, rotaţia culturilor şi controlul buruienilor. Sistemul de agricultură conservativă nu este adecvat pentru solurile compactate, care necesită mai întâi afânare, fapt confirmat prin cercetările efectuate anterior. Scopul cercetărilor a fost testarea-demonstrarea metodei de refacere preventivă a însuşirilor stratului arabil degradat prin compactare al cernoziomurilor obişnuite din Moldova de Sud (SRL „Natcubi Agro”, com. Larga Nouă, r-l Cahul) prin utilizarea sistemică a îngrăşămintelor verzi (măzărichii) în cuplu cu diferite procedee agrotehnice, pentru implementarea cu succes a agriculturii conservative, bazată pe sistemul no-till de lucrare a solului. Introducerea prin discuire și arătură în sol a 2 recolte de masă verde de măzăriche de toamnă şi de primăvară în anul agricol 2014-2015, pe un câmp utilizat ca ogor ocupat, a condus la refacerea însuşirilor fizice şi chimice ale stratului arabil 0-20 cm. Calitatea și cantitatea producției agricole s-a majorat, conținutul de gluten în anul 2018 la grâu a crescut de la 17-18% pe parcela martor până la 25% pe parcela experimentală. În anul 2016 recolta orzului de toamnă a atins mărimea de 7,1 t/ha, sporul de recoltă - 2,2 t/ha/an. Profitul brut: 2,2 t orz x 2200 lei = 4840 lei. În anul 2017 recolta rapiței a atins mărimea de 4,1 t/ha, sporul de recoltă - 1,0 t/ha/an, Profitul brut: 1t rapiță x 7100 lei = 7100 lei. În anul 2018 recolta grâului de toamnă a atins mărimea de 4,6 t/ha, sporul de recoltă - 0,8 t/ha/an. Profitul brut: 0,8 t grâu x 3300 lei = 2640 lei. Total profitul brut: 4840 lei +7100 lei +2640 lei = 14540 lei. Cheltuielile totale pentru organizarea câmpului experimental, procurarea materialului semincer, semănatul, încorporarea în sol a masei verzi a 2 recolte de măzăriche a constituie 6000 lei. Profitul net: 14 540 lei – 6000 lei = 8540 lei. Rezultatele cercetărilor efectuate în anii 2015-2018 au confirmat că lucrarea solului no-till împreună cu aplicarea îngrăşămintelor verzi a determinat o mai bună conservare a solului, prin creșterea rezervei de humus și de elemente nutritive din sol, ceea ce a condus la reducerea în timp a necesarului de îngrășăminte cu azot pentru culturile agricole, a condus la îmbunătățirea structurii solului și la creșterea capacității de reținere a apei în sol. Refacerea preventivă a stării de calitate a stratului arabil degradat este absolut necesară de efectuat până la implementarea sau în procesul de utilizare a sistemului de agricultură conservativă, bazat pe tehnologia no-till sau mini-till de lucrare a solului.

98 СВОЙСТВА БАКТЕРИАЛЬНЫХ ШТАММОВ ДЛЯ ПОВЫШЕНИЯ СУПРЕССИВНОСТИ ПОЧВЫ

Леманова Наталия, Горбунова Валентина Институт генетики, физиологии и защиты растений, Кишинэу, Республика Молдова e-mail: [email protected]

В растениеводстве использование биопрепаратов имеет рациональный смысл и большие перспективы (Петровский А.С., 2017). Применение микробных биопрепаратов должно быть направлено на введение в состав почвенной микрофлоры полезных микроорганизмов, создание супрессивных почв, где полезные виды доминируют над вредными, отсутствует зависимость возделываемых растений от внесения минеральных удобрений, пестицидов и гербицидов (Иванчина Н.В., 2011). Применение бактериальных штаммов снижает прессинг патогенов и гербицидов в период вегетации растений (Пусенкова Л.И., 2010). На основе бактерий Bacillus thuringiensis ssp kurstaki, ssp.thuringiensis известны биоинсектициды в борьбе с вредителями сада (совки, пяденицы, листовертки),овощных культур-капустная моль, капустная совка (Кожевникова И.В., 2018; Калмыкова Г.В.,2018), c хлопковой совкой (Коваленков В.Г., 2018). Задачей исследований было установление возможности применения вышеуказанных видов бактерий для обработки семян сахарной свеклы в целях защиты всходов от свекловичной моли Scrobipalpa ocelatella Boid и их взаимоотношений с патогенными грибами рода Fusarium sp.Лабораторные опыты осуществляли по общепринятым в микробиологической практике методам (Большой практикум по микробиологии, 1990). Бактерии культивировали в жидкой минеральной питательной среде 48 часов при 290С до титра 109 КОЕ\мл. Разведение суспензий со стерильной водой 1:100 использовали для замачивания семян сахарной свеклы сорта «Marribo» в течение 1 часа. Семена размещали во влажных камерах чашек Петри. Через неделю в вариантах обработки бактериальными суспензиями количество проросших семян было в 6-8раз больше по сравнению с необработанными,что объясняется способностью метаболитов бактерий Bacillus thuringiensis стимулировать прорастание семян сахарной свеклы.Определение взаимоотношений суспензий Bacillus thuringiensis ssp kurstaki(Bt) и Васillus thur.ssp.thuringiensis (BT) с возбудителями корневых гнилей сахарной свеклы грибами рода Fusarium sp.проводили в чашках Петри на твердой питательной среде КГА. Чистую культуру грибов Fusarium gibbosum(1)и Fusarium oxysporum (2) размещали в центре газона; диски стерильной фильтровальной бумаги, смоченные в бактериальных суспензиях Bt, BT, располагали по периферии питательной среды. Через 8 дней измеряли зоны угнетения роста грибов под воздействием бактериальных суспензий: 8-10 мм в варианте Вt и 7-12 мм в варианте ВT, что подтверждает антагонистические свойства бактериальных штаммов по отношению к возбудителям корневых гнилей - почвообитающим патогенам рода Fusarium sp. Полученные результаты согласуются с данными микробиологов ИЗР Белорусии (Voitka D.,2014) о полифункциональных свойствах биологически-активных метаболитов штаммов Bacillus thuringiensis, их способности ингибировать развитие грибных патогенов растений родов Fusarium sp., Rhizoctonia sp.,Alternaria sp.Антагонистические свойства суспензий бактерий Bacillus thuringiensis Bt ,BT по отношению к грибным патогенам-возбудителям корневых гнилей растений, их ростстимулирующая способность позволяют их использовать для внесения в почву с бактеризованными семенами сахарной свеклы в качестве полезной микрофлоры, обогащающей грунт стимуляторами роста и развития растений, а также в качестве биофунгицида и биоинсектицида.Активизировать вегетацию растений без дополнительного внесения удобрений возможно с использованием метаболитов бактериальных штаммов, обогащающих субстрат элементами питания, стимулирующими фотосинтез, рост и развитие зеленого прироста, способствующих оздоровлению инфицированных патогенами почв, влияющих на количество и качество урожая.

99 ACUMULAREA PROLINEI ÎN FRUNZELE PLANTELOR DE SFECLĂ DE ZAHĂR ŞI SOIA ÎN FUNCŢIE DE DOZELE CRESCĂNDE DE AZOT, FOSFOR, POTASIU, MANGAN ŞI ZINC ÎN MEDIU

Lisnic S. Institutul de Genetică, Fiziologie şi Protecţie a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail:[email protected]

Plantele din natură sunt expuse constant la diverse stresuri abiotice și biotice. Stresurile abiotice ca seceta și temperaturile extreme (ridicate şi joase pe parcursul vegetaţiei), dezechilibru nutritiv sunt factori critici care reduc semnificativ recolta pentru majoritatea culturilor agricole din întreaga lume. Un fenomen foarte răspândit atribuit răspunsurilor la stresurile abiotice și biotice este acumularea semnificativă a speciilor reactive de oxigen (SRO) în celulele plantelor, ceea ce poate duce la disfuncție metabolică ireparabilă în plante. SRO sunt generate în mod continuu ca urmare a proceselor metabolice ale plantelor datorită reducerii incomplete a oxigenului. Anterior considerate a fi doar produse secundare toxice ale metabolismului, SRO sunt acum cunoscute pentru a acționa ca al doilea mesager în cascadele de semnalizare intracelulare pentru a declanșa toleranța la diverse stresuri abiotice și biotice. Prolină este adesea privită ca o strategie de bază în anihilarea excesului de SRO, pentru protecția și supraviețuirea plantelor la acţiunea stresului abiotic. Scopul cercetărilor - de a evidenţia modificările în conţinutul de prolină în frunzele plantelor de sfeclă de zahăr (hibridul Vilia, s.Victoria) şi soia (s.Clavera) în funcţie de gradul de aprovizionare a plantelor cu elementele nutritive de bază (NPK) şi microelemente Mn şi Zn în condiţii optimale de umiditate a solului şi de stres hidric temporar. În experimentul cu sfecla de zahăr s-a stabilit,că în intervalul dozelor de 0-300mg de NPK/kg de sol conţinutul de prolină în frunze se majorează nesemnificativ ceea ce, probabil, confirmă, că aceste doze nu provoacă dereglări semnificative în metabolismul plantelor, iar starea fiziologică a plantulelor este în limita normei reacţiei la dozele menţionate. Cu majorarea de mai departe a dozelor de NPK în sol se evidenţiază creşterea semnificativă a conţinutului de prolină în frunze şi diminuarea acumulării masei vegetative de către plante (îndeosebi la doza maximală de 1200mg/kg). De menţionat, însă, lipsa interdependenţei strânse dintre conţinutul de prolină în frunze şi aplicarea dozelor crescânde de NPK în sol. Sporirea conţinutului de prolină în frunze în experimentul dat în mare măsură poate fi legat nu atât de excesul de fosfor şi potasiu, cât nemijlocit de azot în mediu. La faza timpurie de creştere şi dezvoltare a soiei (ramificării) la dozele minimale şi, probabil, optimale de Zn în sol (5 şi 50mg Zn/kg sol) conţinutul de prolină în frunze s-a menţinut la un nivel mai jos comparativ cu martorul ceea ce demonstrează, probabil, de intensificarea sintezei compuşilor organici de azot în plante. De la doza de 150 mg Zn/kg de sol conţinutul de prolină s-a majorat şi acest conţinut s-a menţinut relativ stabil până la doza de 600 mg Zn/kg de sol. Aceste date demonstrează de gradul înalt de toleranţă a plantelor de soia la poluarea mediului cu acest poluant. Conţinutul de prolină s-a majorat mai semnificativ la doza maximă de Zn - 1200 mg Zn/kg de sol. Majorarea conţinutului de prolină a fost urmată de diminuarea acumulării masei vegetative de către plante. Aceleaşi legităţi în acumularea prolinei s-a evidenţiat la cultura sfeclei de zahăr la aplicarea dozelor separate de Mn şi Zn în sol. S-a stabilit conţinutul mai înalt al prolinei în frunzele plantelor supuse stresului hidric comparativ cu conţinutul acestuia în condiţii optimale de umiditate a solului. Pe acest fondal dozele moderate de Mn şi Zn în sol au contribuit la menţinerea proceselor metabolice la un nivel mai stabil, la sporirea potenţialului adaptiv şi de productivitate a plantelor. Aşa dar, la fazele timpurii de dezvoltare a plantelor de sfeclă de zahăr (6 – 7 frunze) şi soia (faza ramificării) dozele optimale de NPK, Mn şi Zn în sol conduc la diminuarea nesemnificativă a conţinutului de prolină în frunze, la acumularea mai intensă a masei vegetative de către plante ceea ce denotă ameliorarea stării fiziologice a plantelor în astfel de condiţii. Excesul de NPK, Mn şi Zn conduc la creşterea conţinutului de prolină în frunze, însă lipseşte corelarea strânsă dintre creşterea dozelor de NPK, Mn şi Zn şi conţinutul de prolină în plante.

100 CONŢINUTUL DE Fe, Cu, Mn, Zn ŞI PROLINĂ, ACTIVITATEA NITRATREDUCTAZEI ŞI PEROXIDAZEI ÎN FRUNZELE SFECLEI DE ZAHĂR (Beta vulgaris L.) ÎN FUNCŢIE DE APROVIZIONAREA PLANTELOR CU MANGAN ŞI UMIDITATEA SOLULUI

Lisnic S., Coreţcaia Iulia Institutul de Genetică, Fiziologie şi Protecţie a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail:[email protected]

Seceta este cel mai important factor de stres, care limitează viața plantelor. Menţinerea la un nivel mai stabil a conținutului apei din plante şi ameliorarea creşterii plantelor în condiții de secetă se poate de obţinut prin reglarea nutriţiei minerale a plantelor. Manganul ca element esenţial pentru plante se include în mai multe procese metabolice în principal în fotosinteză, este în componenţa enzimei antioxidante superoxidismutaza responsabilă de detoxifierea radicalilor liberi distructivi şi deci joacă un rol important în îmbunătăţirea toleranţei plantelor la diferiţi factori de stres de mediu, cum ar fi rezistenta la temperaturi negative, salinitate si stresul de seceta. Scopul cercetărilor - de a evidenţia rolul Mn ca microelement esențial și ca poluant administrat separat şi în complex cu suspensiile rizobacteriene Azotobacter chroococcum, Bacillus subtilis, Pseudomonas putida asupra distribuirii Fe, Mn, Zn şi Cu în frunzele sfeclei de zahăr, modificărilor în activitatea nitratreductazei, peroxidazei, conţinutului de prolină în frunze şi acumulării masei vegetative de către plante în funcţie de condiţiile de umiditate a solului Experienţa cu sfecla de zahăr (hibridul Vilia) s-a efectuat în condiţii dirijate de umiditate a solului în casa de vegetaţie a institutului. Dozele crescânde de mangan (substanţă activă/kg sol) au fost administrate sub formă de sulfat de mangan după schema: Martor-0; Mn – 50; Mn – 600; Mn – 1200 mg/kg sol. Pe acest fondal la o parte din variante s-au administrat suspensiile bacteriene Azotobacter chroococcum, Bacillus subtilis, şi Pseudomonas putida. Stresul hidric temporar (35% CAS) s-a creat la faza creşterii intensive a plantelor. Activitatea nitratreductazei in vivo s-a determinat după Mulder, peroxidazei - după Boiarchin, conţinutul de prolină – după Bates et al., conţinutul de carbohidraţi după Bertran, conţinutul de microelemente – la AAS-1. Dozele moderate de Mn în sol (50 mg/kg) conduc la majorarea activităţii nitratreductazei şi diminuării nesemnificative a activităţii peroxidazei în frunze, la diminuarea nesemnificativă a conţinutului de monozaharide în frunze şi majorarea masei vegetative de către plante în condiţii de stres hidric temporar ce denotă de realizarea mai deplină a potenţialului adaptiv a plantelor în astfel de condiţii. Excesul de Mn în sol majorează conţinutul de prolină şi activitatea peroxidazei în frunze, diminuează nesemnificativ activitatea nitratreductazei şi masa unei plante ce demonstrează de toleranţa înaltă a sfeclei de zahăr la excesul de acest poluant în mediu. Pe fondalul dozelor moderate de Mn (50 mg/kg de sol) suspensiile de rizobacterii au condus la stimularea procesului primar de reducere a nitraţilor din frunze atât în condiţii optimale de umiditate a solului, cât şi de stres hidric temporar. Activitatea peroxidazei şi conţinutul de prolină în frunze se diminuează nesemnificativ sub influenţa dozelor crescânde de Mn şi aplicarea suspensiilor de rizobacterii. În condiţii de stres hidric dozele moderate de Mn administrate separat şi în complex cu rizobacteriile au majorat toleranţa plantelor la secetă manifestată prin sporirea masei vegetative a unei plante. Concomitent se diminuează conţinutul de Zn, Mn, Cu şi Fe în frunze pe ambele fondaluri de umiditate a solului în variantele fără administrarea Mn în sol cu aplicarea suspensiilor rizobacteriene ce poate fi cauzată de efectul „diluării” creşterii plantelor. Cu creşterea dozelor de Mn în sol se majorează semnificativ conţinutul lui indiferent (de la 262,4 până la780,7 mg/kg) de condiţiile de umiditate a solului. La doza moderată de 50 mg Mn/kg de sol s-a evidenţiat antagonismul dintre Mn şi Zn şi Cu în frunze. Influenţa rizobacteriilor asupra conţinutului de microelemente la doza de 1200 mg Mn/kg este mai puţin semnificativă atât în condiţii optimale de umiditate, cât şi de stres hidric. Aceste date arată că sfecla de zahăr poate fi un model bun pentru studierea mecanismelor homeostazei Mn la plante şi ca o specie eficientă pentru fitoremedierea Mn.

101 MANIFESTAREA FACTORILOR GENETICI ÎN REACŢIA HIBRIZILOR F1 ŞI F2 DE GRÂU COMUN LA Fusarium oxysporum

Lupaşcu Galina, Gavzer Svetlana, Coşalîc Cristina Institutul de Genetică, Fiziologie şi Protecţie a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail: [email protected]

Specia de fung Fusarium oxysporum (Schlecht) Snyd. et Hans este agentul cauzal al numeroaselor maladii la culturile cerealiere, inclusiv la grâul comun de toamnă – putrefacţia sistemului radicular, bazei tulpinii, ofilirea şi frângerea plantelor, şiştăvirea boabelor, etc. Patogenul manifestă o adaptibilitate înaltă pentru cei mai diverşi factori – temperatură, umiditate, raze UV, condiţii pedologice, substrat biologic, etc. Din aceste considerente, F. oxysporum deţine un înalt potenţial patogenic, producând îmbolnăviri în diverse condiţii la diferite specii de plante (Mielniczuk, Kiecana, Cegiełko, 2012; Lupaşcu şi colab., 2015). Metodele chimice de combatere a fungului adesea sunt ineficiente, dar şi nedorite sub aspect toxicologic şi ecologic. Identificarea factorilor genetici responsabili de reacţia plantelor la patogeni prezintă oportunităţi sigure la crearea genotipurilor rezistente. Cercetarile noastre au fost efectuate în condiţii controlate, la temperatura suboptimală 15- 17°C pentru germinaţia boabelor. Cariopsele de grâu a formelor parentale şi hibride – P1, P2, F1 (1 x 2), F1 (2 x 1), F2 (1 x 2), F2 (2 x 1) ce reprezentau 6 combinaţii, au fost tratate timp de 18 ore cu filtrat de cultură (FC) F. oxysporum. De menţionat că formele parentale sunt linii de perspectivă sau soiuri. Peste 6 zile de la tratare s-au făcut măsurări ale caracterelor de creştere şi dezvoltare. S-a constatat că în varianta martor lungimea rădăciniței la cele 5 forme parentale aflate în studiu a variat în limitele 62,8 … 102,3 mm, iar în varianta cu FC – 52,5 … 96,7 mm, reacţia acestora fiind destul de specifică. De exemplu la linia Bas./M 30, FC s-a produs stimularea creşterii rădăciniței cu 22,3% în raport cu martorul. La linia M.30/M3 şi soiul M16 lungimea rădăciniței în varianta FC a constituit 74, 7 … 87,7%, iar soiurile M 11 şi Basarabeanca practic n-au reacţionat la tratament – 94,5 … 109,4% faţă de martor. Cercetarea manifestării factorilor genetici la nivelul hibrizilor reciproci F1 a demonstrat că gradul de dominaţie (hp) a caracterelor de germinaţie, lungimea rădăciniței, lungimea tulpiniţei a variat în limite largi – de la supradominanţă pozitivă până la supradominanţă negativă, ceea ce denotă existenţa interacţiunilor specifice a alelelor celor 2 genomuri, funcţie de caracter şi combinaţie. Totodată, hp a depins mult de părintele matern al hibridului. Prin calculul efectelor reciprocităţii (re – reciprocal effect) la hibrizii omologi F1, s-a constatat manifestarea puternică, dar totodată, diferenţiată, a factorului parental, fenomen ce depinde mult de combinaţie, organ de creştere, variantă (martor/FC). De exemplu la combinaţia M 16 x M 11, pentru caracterele aflate în studiu, în ambele variante a avut o importanţă decisivă factorul matern, la Basarabeanca x M30/M3 – forma paternă, iar la L Bas/M30 x LM30/M3 s-au manifestat plenar ambii factori, funcţie de caracter şi variantă. Un mare rol ştiinţifico-practic îl are potenţialul transgresiv al populaţiei segregante (Riesseberg, 2003). S-a constatat că sub influenţa FC gradul (Tg) şi frecvenţa (Tf) transgresiilor positive pentru lungimea rădăcinii şi a tulpinii s-a manifestat mult mai puternic decât în varianta martor. La 4 din 6 combinaţii – L Bas/M30 x LM30/M3, LM30/M3 x L Bas/M30, M11 x M16 şi L M30/M3 x Bas. în varianta cu FC Tg a variat în limitele 3,47 … 17,06%, iar Tf: 10,28 … 27,50%. Astfel aceste combinaţii prezintă interes în vederea obţinerii segreganţilor rezistenţi la patogenul F. oxysporum. Datele obţinute denotă complexitatea controlului genetic şi epigenetic al reacţiei genotipurilor de grâu la F. oxysporum şi, totodată, influenţa interacţiunilor plantă x patogen asupra plasticităţii fenotipice a organelor de creştere a plantei.

102 ВИДЫ СЕМЕЙСТВО (Tortricidae) - ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ ХОЗЯЕВА ПАРАЗИТОВ ДРУГИХ ВРЕДИТЕЛЕЙ

Маевский В. П. Институт генетики, физиологии и защиты растений, Кишинэу, Республика Молдова e-mail:[email protected]

В данной работе, представлен список дополнительных хозяев для некоторых паразитов, собранных на Территории Молдовы и не вошедших в каталог «Паразитические перепончатокрылые Молдавии» изданный Талицким В.И. и Куслицким В. С. в 1990 г. Сбор информации выполнен Маевской В. с 1993-2006 и 2011-2017гг и Иордосопол Е. 2018-2019 гг. К этому времени у розанной листовертки отмечено 72 вида паразитов, мы этот список дополняем еще 30-ю видами: Семейство ICHNEUMONIDAE -12 видов (Camposcopus canaliculatus, Cteniscus sp., Ischnus inquisitorius, Itoplectis viduata, Glypta extincta, Lissonota mutanda, L. bistrigata, L. segmentellator, Phaegenes semivulpinus, Scambus elegans, S. brevicornis, Triclistis globulipes); сем. BRACONIDAE – 13 видов (Ascogaster rufidens, Apanteles laevigatus, A. brunnistigma, Charmon extensor, Habrobracon stabilis, Meteorus rubricens, Microplitis sordipe, Microgaster caris, Microdus dimidiator, Meteorus luridis, Oncophanes lauceolator, Rogas testaceus, Zele testaceator); сем. EULOPHIIDAE – 3 вида (Eulophus larvarum, Euplectrus flavipes, Pediobius facialis); сем. EUPELMIDAE – 1 вид (Eupelmus urozonus); сем. TACHINIDAE – 1 (Strumia bella). К приведенными в каталоге виды для сливовой плодожорки, нами добавлено еще 21: Семейство ICHNEUMONIDAE - 4 вида (Lyotryphon punctulatus, Pristomerus orbitalis, Baeognatha armeniaca, Pimpla spuria); сем. BRACONIDAE – 9 (Ascogaster rufidens, A. ruficeps, A. rufipes, Apanteles ater, A. carpatus, A. colchicus, A. lacteicolor, A laspeyresiella, A. xanthostigma); сем. EULOPHIIDAE – 1 (Elachertus nigritulus); сем. ENCYRTIDAE – 1 (Copidosoma varicorne); сем. CHALCIDIDAE – 3 (Brachymeria rugulosa, Hockeria bifasciata, H. micula); сем. PTEROMALIDAE – 1 (Dibrachys cavus); сем. TRICHOGRAMMATIDAE – 2 (Trichogramma evanescens, T. euproctidis). В том числе для боярышниковой плодожорки, которая сопутствует сливовой плодожорке в саду, приведено в каталоге 16 видов. Нами, найдено в литературных источниках еще 13 (Itoplectis maculator, Phytodietus polyronias, Apechtis rufata, Scambus calobatus, Venturia canescens, Lissonota dubia, Brachymeria intermedia, Habrocytres sp., Tetrastichus sp. Mesochorus velox, Apophua bipunctorius, A. cicatricosa). Восточная плодожорка является карантинным объектом, для которой был отмечен всего один паразитирующий вид. Нами список дополнен 68 видами. Перечень видов опубликован в 2015 г. В предыдущем году путем индивидуальных выведений и осмотру плодов падалицы, разного калибра, на сливе удалось внести в список новых видов из сем. BRACONIDAE, ELASMIDAE, EULOPHIIDAE, PTEROMALIDAE и EURYTOMIDAE.Список вредных молей повреждающих сливу и других косточковых и семечковых культур дополняется еще тремя карантинными видами (Grapholitha pakardi, G. lobarzewschii и G. inopinata), для которых в условиях страны еще не изучен паразитический комплекс. Вышеуказанные списки, связаны с материалом сохранившийся в научно-практической энтомологической коллекции лаборатории, и всегда помогала в точности диагноза насекомых. Она часто была посещена сотрудниками других институтов для сравнения собранного биологического материала и создания аннотированных списков по разными группами насекомых. Данная научно-практическая коллекция лаборатории Энтомологии и Биоценологии нуждается поддержке для дальнейшего сохранения биоматериала, опубликования инвентаризационного каталога с существующими видами и с добавлениями, как инвазивными, так и карантинными экземплярами, в том числе и в мини ремонте.

103 BIOLOGICAL PREPARATIONS EFFICIENCY RESEARCH AGAINST ALTERNARIA BLIGHT POTATO IN TERMS OF WESTERN UKRAINIAN FORESTEPPE

Melnyk A. T. 1, Kyryk M. M. 2 1Ukrainian scientific-research plant quarantine station Institute of plant protection National Academy of Agrarian Sciences, Ucraine 2National University of Life and Environmental Sciences of Ukraine, Ucraine e-mail: [email protected]

Potato Solanum tuberosum L. is important agricultural crop. It takes an important place in the man’s nutrition list. It is also used for the feed and industry. The struggle against potato disease is actual problem for potato growing. The phytopathogenic organisms (fungi, viruses, bacterium) are causative agents for them. Alternaria blight (dry blight) is a serious disease of fungal nature. It takes seroius spread in Ukraine every year. So it makes seroius economic losses to potato growing. The disease decreases yield to 50%. The quantity yield decreases, goods quality decrease, stickness and agrocenosis phitosanitary state dergradation is observed. The areas is defeated during weather conditions and pathogenic fungi defeat, the absence of quality seedling material, optimal terms of planting, non- following the agrotechnical requirements to the rotation, uncontrol fertillizer’s usage and plant nutrition. The new biological technologies are actual. They are based upon the biological control preparations (biofungicides, microbiocides, biostimulants). They allow to increase plant’s resistance to phytopathogens, quality and productivity of production and environment protection from negative impact of anthropogenic factors, groundwater pollution, negative impact on plant’s growing and developing and destroy of microbiological processes in soil. We have provided the biological preparations efficiency research for alternaria blight potato harmfulness decrease. The study was provided on the base of Ukrainian scientific-research plant quarantine station IPP NAAS (UkrSRPQS IPP NAAS) during the way of field trials and laboratory analysis providing. The following potato varieties: Serpanok, Svitanok Kyivsky, Slovyanka and Chervona Ruta were used for researches. The biological preparations: Planrise (2 l/t/ha) and PhytoDoctor (5kg/ha) were used (by potato spraying) during the research process, The biological preparations usage researches results were shown that the potato plants during the growing period the following results were by Planrise treating for Serpanok 58,8 %, Svitanok Kyivsky – 56,4 %, Slovyanka – 51,7 %, Chervona Ruta – 42,3 %. The inspection part was considered from 75,3 % through 89,6 %. The biological preparation PhytoDoctor efficiency for varieties Serpanok, Svitanok Kyivskyi, Slovyanka, Chervona Ruta was consisted of 65,7 %; 62,0 %; 53,5 %; 47,2 %, respectively. The biological preparation Planrise technical efficiency for variety Serpanok was consisted of 34,3 %, and PhytoDoctor was 26,7 %, respectively. The Planrise efficiency was 34,6 %, and PhytoDoctor efficiency was 28,2 % for variety Svitanok Kyivsky. The Planrise technical efficiency was 37,2 %, but the PhytoDoctor technical efficiency was 34,8 % for variety Slovyanka. The variety Chervona Ruta has the following efficiency indexes 42,7 % and 37,3 %. The researches results confirmed about the necessary of biological preparations usage against potato alternaria blight. The activity technical efficiency was consisted of 26,7-42,7 % for all researched varieties.

104 РАСПРОСТРАНЕНИЕ ОЛЕНКИ МОХНАТОЙ (Epicometis hirta PODA) НА ПРОМЫШЛЕННЫХ ВИНОГРАДНЫХ НАСАЖДЕНИЯХ ЮГА УКРИНЫ

Мезернюк Т. Н. Национальный научный центр "Институт виноградарства и виноделия им. В.Е. Таирова", Одесса,Украина e-mail: [email protected]

Потепление климата, которое наблюдается в условиях юга Украины, оптимизирует для насекомых благоприятные экологические условия окружающей среды, активное их размножение и распространение. В результате основным негативным эффектом потепления становится увеличение численности фитофагов, изменение структуры их популяций, уровня вредоносности и зон акклиматизации. Ежегодные наблюдения за развитием вредных объектов в агроценозах юга Украины приводят к выводу о значительных изменениях видового состава и численности вредителей-полифагов на виноградных насаждениях, вредоносность которых приобретает угрожающий характер. Примером расширения списка фитофагов на винограде за счет многоядных видов с высокой потенциальной вредоносностью могут служить участившиеся случаи массового распространения оленки мохнатой на промышленных виноградниках юга Украины, из-за которой из года в год ухудшается фитосанитарное состояние агроценозов. Взрослые жуки вредителя пробуждаются ранней весной и питаются цветками различных травянистых и древесных растений, выедая тычинки и пестики, а в последние годы все чаще появляются на винограде, где увеличивается их вредоносность. Таким образом, мониторинг видового разнообразия членистоногих в виноградных экосистемах с целью выявления новых вредных видов и своевременная разработка защитных мероприятий по снижению их численности является актуальным. Для решения данной проблемы сотрудниками лаборатории молекулярной генетики и защиты растений ННЦ «ИВиВ им. В. Е. Таирова» проводятся исследования регионального мониторинга основных болезней и вредителей винограда с целью создания современной системы прогноза их развития и оптимизации системы защиты насаждений. Многолетним мониторингом развития и распространения оленки мохнатой на виноградных насаждениях появление жуков отмечено со второй-третьей декады апреля до начала мая (фаза развития 1-3 листа – период выдвижения соцветий винограда), когда среднесуточная температура воздуха превышает 14,4°C, а влажность воздуха составляет 63- 85%. Массовый лет продолжается до середины июня, а отдельных жуков – до середины августа. Жуки наносят большой вред, питаясь генеративными органами растений. Повреждения проявляются в виде обгрызания или «измочаливания» листьев и молодых соцветий винограда, что существенно влияет на уровень потенциального урожая, особенно столовых сортов винограда с большой массой грозди. С первой декады до конца июня самки откладывают по 15-20 яиц, размещая их по 3-4 штуки в почву на глубину 2-5 см. Отродившиеся личинки развиваются в течение 2-3 месяцев (до конца августа – начала сентября), питаясь растительными остатками. В отличие от личинок майских жуков, личинки оленки мохнатой корни растений не повреждают. Ее окукливание начинается с конца августа и длится до середины октября. Из куколок появляются молодые жуки, которые остаются зимовать в почве на глубине 15-40 см. Ранее в практике выращивания винограда не было необходимости в дополнительной защите насаждений от вредителя оленки мохнатой, поскольку сроки активизации взрослых жуков наступают раньше, чем начало роста побегов растений винограда. Как правило, в это время вредители питаются цветками плодовых культур, у которых цветение происходит в период выхода жуков из зимовки. Однако в последние годы в связи с ранней весной, что

105 обусловлено погодными условиями, фитофаг все чаще стал появляться на виноградных насаждениях. Например, в 2016 году дата перехода среднесуточных температур воздуха +10°С (биологический ноль для винограда) опережала средние многолетние значения на две недели. В результате с началом активной вегетации произошло ускоренное распускания глазков, особенно на ранних сортах столовых сортов (Восторг, Иршаи Оливер, Аркадия, Таврия и др.), где молодые побеги достигали 3-5 см длиной, тогда как на насаждениях технических сортов (Шардоне, Каберне-Совиньон, Одесский черный и др.) глазки только начинали распускаться. В результате наблюдений сделан вывод, что при совпадении сроков активизации жуков и раннего начала вегетации винограда, в случае непосредственной угрозы массовой заселенности вредителя, экономически целесообразно проводить дополнительную защиту насаждений столовых сортов винограда с ранним созреванием ягод. В настоящее время в периодическом издании «Перечень пестицидов и агрохимикатов, разрешенных к использованию в Украине» не зарегистрировано ни одного инсектицида для защиты винограда от оленки мохнатой. Однако практика борьбы с этим вредителем показывает, что на виноградниках возможно применять инсектициды, которые разрешены для использования на плодовых насаждениях. Наибольшую эффективность (92,7%) от оленки мохнатой получили при применении инсектицида Калипсо КС (0,250 л/га). Его высокая эффективность сохранялась в течение 25 дней (с начала распускания 1-3 листа и до конца цветения). Повреждения соцветий не превышало 0,4-1,2%, одновременно гибель трипсов и цикадок достигала 88,7-98,8%. По сравнению с другими инсектицидами эффективность Моспилана ВП (0,2 кг/га) в период цветения винограда составила 84,4%, Золона КЭ (2,5 л/га) – 79,3%. При проведении защитных мероприятий следует учитывать, что инсектициды с контактным действием не эффективны в борьбе с данным видом вредителя, так как жуки постоянно перемещаются с растения на растение, поэтому для их уничтожения следует применять системные препараты и обязательно до начала питания вредителя.

106 ЭФФЕКТИВНОСТЬ МИКОБАКТЕРИАЛЬНОЙ КОМПОЗИЦИИ В ПОСЕВАХ ЗЕРНОВЫХ КУЛЬТУР

Михайловская Наталья,1 Войтка Д.,2 Цыбулько Н., Юзефович Елена2 1Институт почвоведения и агрохимии НАН Беларуси, Минск, Беларусь 2Институт защиты растений НАН Беларуси, Прилуки, Беларусь e-mail:[email protected]

Экологизация растениеводства предполагает применение микробных препаратов для активизации природных механизмов стимуляции роста, минерального питания и защиты растений. Современным направлением является создание многокомпонентных микробных препаратов для обеспечения полифункционального положительного действия на растения. Учитывая значимость азотного, калийного питания растений и их синергетический эффект, приоритетно включение в состав инокулянтов нового поколения азотфиксирующих и калиймобилизующих бактерий, а также грибов-антагонистов для биологического контроля фитопатогенов. Разработан состав микобактериальной композиции (МБК) на основе штаммов гриба- антагониста Trichoderma longibrachiatum, азотфиксирующей (Azospirillum brasilеnse) и калиймобилизующей (Bacilus circulans) бактерий. В полевых экспериментах установлено положительное действие МБК на урожайность зерновых культур. На дерново-подзолистых суглинистых почвах прибавки зерна ячменя ярового Стратус (N90+30Р50К90) составляли 5,2 и 4,9 ц/га при урожайности 61,4 и 57,9 ц/га; ржи озимой Пламя (N90+30 P50K100) – 3,8 и 3,9 ц/га при урожайности 57,8 и 55,1 ц/га соответственно. Повышение урожайности зерновых культур обусловлено полифункциональностью МБК, сочетающей свойства биофунгицида, регулятора роста и биоудобрения. Эффективный контроль возбудителей гнили обеспечивал грибной компонент МБК – T. longibrachiatum с высокой антагонистической активностью. Обработка посевов ячменя ярового МБК в фазе всходы – начало кущения способствовала снижению распространенности корневой гнили на 52%, развития болезни – в 2,9 раза, биологическая эффективность МБК достигала 69,5% (восковая спелость зерна). Применение МБК в посевах ржи озимой весной в фазе кущения обеспечило снижение показателя распространенности болезни на 45%, развития болезни – в 2,6 раза при достижении биологической эффективности 61,2% (молочная спелость зерна). Бактериальные компоненты МБК повышали адаптационный потенциал растений. При совместном действии A. brasilense и B. сirculans суммарная длина корней растения увеличивается на 25%, число корней – на 10%, их сухая масса – на 28%, что гарантирует улучшение их минерального и водного питания. При дефиците элементов питания A. brasilense и B. сirculans способны частично компенсировать физиологические потребности растений за счет азотфиксации и мобилизации калия и фосфора из труднодоступных почвенных форм в прикорневой зоне. Аддитивное действие составных компонентов МБК обеспечивает повышение адаптационного потенциала растений за счет стимуляции развития корневой системы, защиты от корневой инфекции, фиксации атмосферного азота, мобилизации калия и растворения труднодоступных фосфатов почвы, улучшая продуктивный статус растений. Вклад перечисленных факторов варьирует в зависимости от экологических условий. Результаты исследований свидетельствуют о высоком потенциале микобактериальной композиции и перспективе ее использования, как в интенсивных технологиях возделывания зерновых культур, так и в органическом земледелии.

107 ДЕЙСТВИЕ НЕКОТОРЫХ ЭФИРНЫХ МАСЕЛ И МОНОТЕРПЕНОИДОВ НА ОБЫКНОВЕННОГО ПАУТИННОГО КЛЕЩА

Мунтян Е.М., Батко М.Г., Плачинта В.В. Институт генетики, физиологии и защиты растений, Кишинэу, Республика Молдова e-mail: [email protected]

Интерес к использованию против паутинных клещей экстрактов вторичных метаболитов растений, в том числе эфирных масел и их отдельных компонентов, связан с их малой токсичностью для нецелевых организмов, низкой персистентностью в окружающей среде, и возможностью применения незадолго до сбора урожая. Многие из них проявляют в отношении клещей широкий спектр биологической активности: акарицидную, репеллентную, детеррентную, антифидантную [Regnault-Roger, 2012]. Целью данной работы было изучение акарицидного (фумигантного) и репеллентного действия некоторых эфирных масел и индивидуальных монотерпеноидов на взрослых особей обыкновенного паутинного клеща как возможных компонентов биорациональных средств защиты от этого вредителя. Эксперименты проводили с самками лабораторной чувствительной к инсектоакарицидам популяции Tetrachychus urticae Koch. Испытывали эфирное масло Eucalyptus spp., Mentha piperita L., Salvia sclarea L., Santalum spp. («Düllberg Konzentra», Германия), а также индивидуальные компоненты эфирных масел: карвакрол, линалоол, лимонен («Sigma-Aldrich», Германия). Оценку фумигантной и семиохимической активности эфирных масел и монотерпеноидов в отношении клещей проводили согласно раннее опубликованным методикам [Мунтян, Батко, 2015]. Полученные результаты обрабатывали статистически. Во всех случаях был принят 5% уровень значимости [Лакин, 1980]. Изученные нами эфирные масла, за исключением масла сандалового дерева, проявили фумигантные свойства по отношению к T. urticae. Концентрация летучих паров, равная 27 мкг/см3 (при 24-часовой экспозиции) обеспечивала 100% гибели вредителей. Эфирное масло M. piperita характеризовалось самым сильным и быстрым токсическим действием на взрослых 3 особей клещей: величина среднелетальной концентрации (СК50) , равная 5.1 ±0.03 мкг/см была в 4 раза меньше, чем при использовании других эфирных масел, а среднелетальное время 3 (СВ50) при концентрации 7,0 мкг/см составляло всего 120 минут. Для изучения семиохимической активности эфирных масел и монотерпеноидов были получены препаративные формы, содержащие изучаемые компоненты в сублетальных концентрациях, которыми обрабатывали листья кормового субстрата. Масло M. piperita, лимонен и линалоолом не влияли на заселение листьев фасоли клещами и откладку самками яиц. Масло Santalum и карвакрол, при концентрации 0.25% и 0.5%, соответственно, нанесенные на листья фасоли, достоверно отпугивали самок T. urticae. В условиях свободного выбора на обработанных листьях фасоли было обнаружено в 3 раза меньше самок и яиц вредителя. Таким образом, как показали токсикологические исследования, для разработки экологически безопасных акарицидных препаратов на основе эфирных масел наиболее пригодным компонентом является масло перечной мяты. Масло Santalum и монотерпеноид карвакрол являются перспективными компонентами для создания средств защиты от клещей репеллентного действия. Однако следует отметить, что применение репеллентов обосновано только в комбинации с биоцидными методами контроля вредителей. Например, при использовании « push-pull» тактики, когда изгнанных с помощью репеллента с защищаемого растения клещей привлекают на растения-ловушки, где их впоследствии уничтожают.

108 ВЛИЯНИЕ СТИМУЛЯТОРОВ УСТОЙЧИВОСТИ РОСТА РАСТЕНИИ НА ФОРМИРОВАНИЕ ПЛОДОВЫХ ПОЧЕК СЛИВЫ СОРТ КАБАРДИНКА, В ЦЕНТРАЛЬНОЙ ЗОНЕ МОЛДОВЫ

Муслех М., Шляхтич В., Гладей Диана Институт генетики, физиологи и защиты растений, Кишинэу, Республикa Молдова e-mail: [email protected]

При решении задач получения экологически чистой сельскохозяйственной продукции и оздоровления окружающей среды возникает необходимость разработки экологически безопасных систем интегрированной защиты растений, базирующихся на преимущественном использовании средств биологического происхождения, а также систем, позволяющих активизацию природных защитных ресурсов агробиоценозов, направленных на снижение затрат энергетических и финансовых средств на проведение защитных мероприятий. Среди биологических методов и безопасных средств защиты растений важное место отводится биологическим агентам и бирациональным препаратам, созданным на основе биологически активных веществ, выделенных из растений. Объектами исследований служили: - препараты Рекол - 0,8 л/га как стимулятор роста и устойчивости роста растении, Реглалг-0,5л/га и микробиологической препарат Паурин-10 л/га. Эти препараты использовались в сливовом саду АОО «АгроБрио» с. Бачой-2014, площадью 3 га, который послужил базой для проведения экспериментов на протяжение всего вегетационного периода 2014 года. В качестве эталона был использован препарат Фунекол 4 л/га. Оценку фитосанитарной обстановки, до и после обработки, проводили по общепринятым методикам. Погодные условия 2014 года были благоприятны для всех фаз развитие сливы. Опыты проводились в пяти вариантах - три варианта с использованием препаратов растительного происхождения пестициды, стимулятор роста и устойчивости растений, Рекол, Реглалг и микробиологические препарат Паурин, контроль и в качестве эталона был использован препарат Фунекол. Обработка деревьев сливы приводили перед цветением, после цветения и через 10-12 дней после второй обработки стимуляторами роста и устойчивости растений, растительного происхождения - Рекол, Реглалг, и микробиологического - Паурин. Стимуляторы устойчивости и роста растений способствуют закладке большего числа плодовых почек особенно двойных и тройных : так на 100 учётных растений обработанных Паурином двойных почек -10%, а тройных -83%; обработанных Реколом – 21% и 70%; обработанных Реглалгом – 15% и 75%, в варианте обработанном Фунеколом – 13% и 69%. Оценка эффективности в борьбе с основными болезнями показала, что в борьбе с бактериальными пятнами Паурин достиг 99,1%; Реглалг - 66,6% и Рекол - 66,6%. В борьбе с соответствующим монилиозом - 60,0%; 50,0% и 42,2%. Известно, что слива производит 1, 2, 3-я цветочные почки. Оценка, проведенная весной 2015 года на стадии размножения, показала, что на 100 побегов, в каждом варианте, наибольший процент тройных и двойных плодовых почек вызвал препарат-Paurin - 83,0%, Реглалг, достиг - 75,0% и Рекол - 70%, тогда как в стандартных вариантах - 65% и в контроле - 50%.

109

ВОЗБУДИТЕЛЬ МУЧНИСТОЙ РОСЫ ТЫКВЕННЫХ КУЛЬТУР НА ПОЛЯХ ИНСТИТУТА ГЕНЕТИКИ, ФИЗИОЛОГИИ И ЗАЩИТЫ РАСТЕНИЙ В 2019 ГОДУ

Николаев А.Н. Институт генетики, физиологии и защиты растений, Кишинэу, Республика Молдова e-mail: [email protected]

В качестве возбудителей мучнистой росы тыквенных культур чаще всего упоминаются два вида Podosphaera xanthii и Golovinomyces Оба патогена принадлежат к семейству Erysiphaceae, состоящему из 16 родов и примерно 650 видов (Braun U. и др..2002). В литературе прошлых лет два главных вида возбудителей часто путали и считали синонимами. Организм, который сейчас называют P. xanthii ранее относили к Sphaerotheca fuliginea. Другими синонимами этого вида являются Sphaerotheca fusca, Sphaerotheca cucurbitae и Podosphaera fusca. Второй патоген Golovinomyces cichoracearum ранее относили к Erysiphe orontii, Erysiphe cichoracearum и Golovinomyces orontii. Систематические исследования в начале 21 века позволили обнаружить в 84 регионах Чешской Республики 22 расы у G. cichoracearum и 4 расы у P. xanthii. Кроме этого они идентифицировали 9 различных патотипов (6 у G. cichoracearum и 3 у P. xanthii). Изучая временную дифференциацию популяций с 2001 по 2004 годы у 180 изолятов было обнаружено 16 патотипов (10 у G. cichoracearum и 6 у P. xanthii), 63 расы у G. cichoracearum и 26 рас у P. xanthii (Lebeda A. et al. 2008). Дифференциация возбудителей мучнистой росы может происходить и по признаку устойчивости к применяемым фунгицидам. Это имеет особенное значение в случаях применения нового поколения системных фунгицидов. Устойчивость к таким фунгицидам определяется одним или несколькими генами. Поэтому мутации этого признака происходят часто и легко закрепляются на фоне регулярных применений таких фунгицидов. Нами в 2018 году также было показано, что по совокупности различных критериев ананаморфной стадии можно успешно дифференцировать представителей Erysiphe cichoracearum и Sphaerotheca fuliginea на тыквенных культурах в Молдове (Николаев А.Н., Николаева С.И., 2018). Отличительной особенностью изолятов возбудителей мучнистых рос, выделенных нами из кабачков в 2019 году, является то, что среди них не было представителей рода Sphaerotheca. Ни один из выделенных нами изолятов не формировал сумчатую стадию цикла развития. В то же время в 2018 году нами было показано, что в Молдове оба возбудителя могут развиваться одновременно и даже вызывать смешанные заражения огурцов (Николаев А.Н., Николаева С.И., 2018). Изученные нами изоляты G. cichoracearum не могли заразить сорт огурцов Конкурент, но заражали другой восприимчивый сорт, кабачки и дыню. В условиях Молдовы данный вопрос требует более пристального внимания и изучения. Определение вида возбудителя следует учитывать и принимать во внимание селекционерам при селекции тыквенных культур на устойчивость растений к отдельным видам возбудителей или их комплексу. Так как устойчивость к фунгицидам у разных видов возбудителей мучнистой росы может формироваться независимо, то это может иметь значение также для грамотного подбора фунгицидов при построении системы эффективной борьбы с болезнями этого типа.

110 EFECTUL PREPARATULUI FITOMAG ASUPRA UNOR CARACTERISTICI FIZIOLOGO-BIOCHIMICE ŞI TEHNOLOGICE ALE FRUCTELOR DE MĂR ÎN TIMPUL PĂSTRĂRII

Nicuţă Al. Institutul de Genetică, Fiziologie şi Protecţie a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail: [email protected]

Fructele de măr sunt produse care au o importantă valoare nutritivă şi terapeutică. Fiind valoroase din punct de vedere biologic, necesită în acelaşi timp şi condiţii speciale de păstrare. O caracteristică aparte a fructelor de măr este capacitatea de păstrare pe termen îndelungat. Necătând la aceasta, în timpul păstrării, fructele sunt afectate de boli fungice şi dereglări fiziologice, care cauzează pierderi. Factorii principali care influenţează calitatea fructelor de măr pe parcursul perioadei postrecolte sunt: condiţiile pedoclimaterice din perioada de vegetaţie, particularităţile biologice ale soiului, gradul de maturare, condiţiile de transportare şi metoda de păstrare aplicată. Aplicarea tehnologiilor performante de creştere a fructelor, sporirea calităţii şi termenului de păstrare a lor, reprezintă la momentul de faţă una din priorităţile pomiculturii autohtone. Una din tehnologiile de păstrare de perspectivă este tratarea postrecoltă a fructelor cu inhibitorul de sinteză a etilenei 'Fitomag', în rezultatul căreia are loc încetinirea proceselor metabolice, ceea ce asigură menţinerea calităţii fructelor la un nivel înalt şi prelungirea perioadei de păstrare. Ca obiect de studiu au servit fructele soiurilor tardive de măr Golden Delicious, Florina, Idared şi Renet Simirenko. Recoltarea fructelor s-a efectuat în termenii optimi. Cercetările au fost efectuate în condiţiile bazei experimentale “Carpotron” a Institutului de Genetică, Fiziologie şi Protecţie a Plantelor. Fructele au fost tratate cu preparatul 'Fitomag' în doza de 0,44 g/m3 şi păstrate ulterior o perioadă de 150 zile în aceleaşi condiţii ca şi varianta martor (atmosferă obişnuită - 21% O2, temperatura de 1°C şi umiditatea relativă a aerului de 85-90 %). În rezultatul păstrării fructelor de măr la soiurile sus-menţionate s-a constatat, că metoda de păstrare prin aplicarea preparatului 'Fitomag' a avut o influenţă semnificativă asupra intensităţii proceselor metabolice. Astfel, cele mai sporite pierderi ale substanţelor plastice (glucidele, acizii titrabili, acidul ascorbic, substanţa uscată), le-au înregistrat fructele din varianta martor. Cercetând conţinutul glucidelor, s-au observat deosebiri atât între soiurile de măr luate în studiu, cât şi între fructele de unul şi acelaşi soi, păstrate prin aplicarea diferitor metode. Aceste diferenţe se datorează gradului de hidroliză a amidonului şi a polizaharidelor din membrana celulară, care au fost condiţionate în funcţie de metoda de păstrare aplicată. La finele perioadei de păstrare, cel mai sporit conţinut de glucide s-a înregistrat la fructele de soiul Golden Delicious, atât în varianta martor (11,80 %), cât şi în varianta prin aplicarea preparatului 'Fitomag' (12,05 %). La rândul său, în dependenţă de soiul cercetat, conţinutul acizilor titrabili în varianta cu fructe tratate, a fost mai sporit faţă de fructele din varianta martor cu 0,01-0,23 %, conţinutul acidului ascorbic cu 0,98-1,11 mg/%, iar conţinutul substanţei uscate cu 0,07-1,25 %. Pe durata păstrării, la soiurile de măr tratate cu preparatul 'Fitomag' s-a înregistrat şi un grad mai redus de deshidratare a ţesuturilor, cele mai mici pierderi în greutate înregistrând fructele de soiul Idared (2,47 %). Această legitate a fost valabilă pentru ambele metode de păstrare. Eficacitatea preparatului a fost determinată şi în cazul fermităţii structo-texturale a fructului. Cele mai bune rezultate au fost înregistrate la fructele tratate, cea mai înaltă valoare la finele păstrării fiind atestată la fructele soiului Florina - 8,09 kg/cm2. Eficacitatea preparatului a fost demonstrată şi în cazul pierderilor produse de bolile fungice şi dereglările fiziologice. Cel mai avansat grad de afectare cu boli fungice s-a înregistrat în cazul fructelor martor, cele mai mari pierderi fiind înregistrate la fructele de soiul Golden Delicious (20 %), cauzate de putregaiul cenuşiu (Botrytis Cinerea Pers.). La momentul externării de la păstrare cele mai înalte valori ai indicilor ce caracterizează calitatea, le-au înregistrat fructele tratate cu preparatul Fitomag, evidenţiindu-se printr-o fermitate mai sporită a ţesuturilor, prospeţime, gust mai pronunţat şi un grad mai redus de afectare cu boli.

111 YIELD AND PHYSIOLOGICAL PARAMETERS OF TOMATO UNDER UNCONVENTIONAL AND CONVENTIONAL STIMULANTS

Peres C.1, Cazacu A.1, Bodale I.1, Mihalache G.1,2, Teliban G.C.1, Cojocaru A.1, Munteanu N.1, Iurea D.3, Stoleru V.1,* 1University of Agricultural Sciences and Veterinary Medicine “Ion Ionescu de la Brad”, Faculty of Horticulture, Iasi, Romania, 2Integrated Center of Environmental Science Studies in the North East Region (CERNESIM), The “Alexandru Ioan Cuza” University of Iasi, Romania 3Institute of Biological Research, Iasi, Romania e-mail: [email protected];

Tomato (Lycopersicon esculentum Mill), is a leading vegetable crop, in terms of global cultivation (open field and protected area) and consumption. The chemical nutrients of plants serve as critical factors that determine plant growth, vigour besides crop yield and these nutrients play a particular role in contributing to the survival of crop plants under environmental stress conditions. Under climatic or nutritional stress, the productivity is affected in a percentage that range between 45-70%. In order to achieve this goal, at the UASVM Iasi carried out an experiment on a tomato crop from the Syriana F1 hybrid, where eight treatments were tested compared to a control version. The experiment consisted of 9 experimental variants, each variant comprised a number of 9 plants, were used as follows: V1 (control), V2 (citrate), V3 (C-2 Au-citrate) , V4 (Au- citrate C), V5 (chitosan 0.1), V6 (Au- chit 25), V7 (Au -chit 50), V8 (GA 3), V9 (BNOA). The tomato crop was established in the greenhouse, on February 10 of each year. The tomatoes were grown by seedlings produced in individual pots. The treatment with biostimulators was applied foliar, using an amount of 2.5 ml solution / plant. The first treatment was performed on February 20. Every week measurements were made regarding the height, the number of flowers, the number of inflorescences and the number of fruits on each plant. The measurements were made starting with the 28th of February. The care work carried out for the experience was as follows: picking sprouts to favor the ripening of fruits. This work was done weekly or whenever needed. Fertilization was carried out phasially, every week starting with February 20, for seven weeks, and for this I used Orgevit fertilizer and applied 5 g / plant each. The defoliation was done in order to remove the old or diseased leaves from the base of the plant. Harvesting was carried out on 8.04.2019 and the culture was canceled in mid-July. The lowest values of the physiological and production indicators were realized in the version treated with citrate and the highest value in the conventional version where the BNOA stimulator was used.

112 PRODUSELE MICROBIOLOGICE ÎN COMBATEREA AGENȚILOR PATOGENI LA CULTURA PORUMBULUI

1Pînzaru B., 1Șcerbacova Tatiana,1Lemanova Natalia, 1Lungu A.,2Maticiuc V., 2Meleca A. 1Institutul de Genetică, Fiziologie și Protecție a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova 2Institutul de Fitotehnie “Porumbeni”, Porumbeni, Republica Moldova e-mail: [email protected]

Porumbul în perioada de vegetație este atacat frecvent de un spectru larg de boli și daunatori care diminuează semnificativ recolta. La cercetare au fost produsele biologice Trichodermin - SC, Gliocladin- SC și Paurin. Experiențele cu scopul determinării rolului aplicării produselor date au fost efectuate la hibridul de porumb zaharat „Prumbeni 280, pe loturile experimentale în GE a IP IF „Porumbeni”, și la IGFPP, în două variante, lot cu infecțe de Fusarium sp., încorporată în sol și lot cu infecție naturală. Indicii biometrici la momentul efectuării evidențelor ca înălțimea plantelor de porumb pe lotul natural în variantele cu aplicarea preparatelor Trichodermin - SC și Paurin - SC, s-a depistat aceleași demensiuni (159,6 cm). În varianta etalon cu aplicarea preparatului Vitavax 200 FF înălțimea plantelor de porumb a constituit 155,2 cm, fiind mai scăzută față de variantele cu aplicarea produselor bioloigce. În varianta martorului netratat indicile dat a constituit - 145,3 cm. În varianta cu încorporarea infecției dimensiunile plantelor au fost mai mici în comparație cu varianta cercetată anterior, și au variat de la 154,0 cm în etalonul chimic (Vitavax 200 FF) până la 157,1 cm în varianta cu aplicarea produsului Paurin. Cele mai mici rezultate au fost înregistrate în varianta martorul - 137,0 cm. Mărimea a unui știulete pe lotul natural, variază de la 17,7 cm în etalonul chimic până la 18,5 cm în varianta cu utilizarea produsului Gliocladin-SC. În variantele cu aplicarea preparatelor Trichodermin-SC și Paurin indicii respectivi sunt la acelaşi nivel, și au constituit 18,1 cm şi 18,4 cm. În varianta martor demensiunea unui știulete a atins mărimea de 15,3 cm. Mărimea știleților în varianta cu încorporarea infecției în sol a variat de la 17,1 cm în varianta etalon până la 18,0-18,2 cm în variantele cu aplicarea preparatelor Gliocladin – SC și Trichodermin - SC. În variante martor – 14,2 cm. Prelucrarea statistică a materialelor obținune, ne demonstrează o diferență semnificativă privind rezultatele obținute. La martorul netratat - lotul cu infecție naturală Freal > F95% = 21,04 > 3,84 – și lotul cu încorporarea infecției în sol Freal > F95% = 17,7 > 3,84. În schimb în variantele cercetate cu aplicarea produselor microbiologice la tratarea semințelor de porumb ne demonstrează lipsa diferențeii semnificative între variantele cercetate – lotul cu fon natural - Freal < F95% = 1,99 < 4,76, lotul cu încorporarea infecției - Freal < F95% = 2,37 < 4,76. Pe lotul cu infecție naturală masa madie a unui știulete era de la 269,7 g în varianta cu aplicarea preparatului Trichodermin- SC. În varianta cu aplicarea preparatului Gliocladin – SC, greutatea medie a unui știulete a costituit 268,8 g și 267,8 g în varianta cu aplicarea produsului Paurin. În etalonul chimic masa medie a unui știulete a costituit 254,9 g. Cea mai scăzută greutate a unui știulete a fost în martorul netratat - 242,0 g. În varianta cu încorporarea infecției în sol masa medie a unui știulete a fost practic aceeaşi în toate variantele cercetate. Greutatea medie a variat de la 265,1 g în varianta cu aplicarea produsului Paurin până la 266,1 g în varianta cu aplicarea preparatului Gliocladin – SC. În varianta etalonului chimic indicele respectiv a constituit – 248,9 g. Cea mai mică greutate a fost remarcată în varianta martorului netratat - 231,9 g Aplicarea preparatelor microbiologice la tratarea semințelor de porumb în combaterea agenților patogeni care provoacă putregaiurile radiculare în condițiile climatice ale anului curent au înfluențat pozitiv la dezvoltarea plantelor de porumb pe ambele loturi experimentale. S-a determinat o diferență semnificativă dintre indicii biometrici între loturi, ceea ce confirmă eficacitatea aplicării produselor biologice în combaterea agenților patogeni la cultura de porumb.

113 ПРИМЕНЕНИЕ ПРИРОДНЫХ БИОРЕГУЛЯТОРОВ РОСТА В СОВРЕМЕННОЙ ИНТЕГРИРОВАННОЙ ЗАЩИТЕ РАСТЕНИЙ ПШЕНИЦЫ

Платовский Н. Институт генетики, физиологии и защиты растений, Кишинэу, Республикa Молдова e-mail:[email protected]

С проявлением все наибольшего интереса к экологическому сельскому хозяйству возникает необходимость в изучении систем защиты растений под действием внешних биотических и абиотических факторов среды без использования синтетических препаратов. Системы биологической защиты растений включают в себя множественный комплекс технологических приемов, которые направлены на увеличение природных механизмов устойчивости и адаптации растений. Поэтому возникает необходимость четко выделить параметры, которые характеризуют первичные компоненты адаптационной устойчивости растений к действию внешних факторов среды. Целью исследования являлось установление эффекта от применения препарата Реглалг, который направлен на повышение урожайности сельскохозяйственной продукции и увеличение адаптационных механизмов в биологической защите растений. Объектом исследования являлись растения пшеницы сортов Молдова 5 и Миссия. Перед посевом семена растений обрабатывали биорегулятором Реглалг в концентрации 1/200 против необработанных (Н2О) и высевали на экспериментальном участке Института генетики, физиологии и защиты растений по схеме «латинский квадрат» с площадью делянок 5м2 в трех повторностях. Установлено, что при обработке биорегулятором Реглалг происходит укорачивание длины эпикотиля, в среднем на 1,5 см, что, несомненно, приводит к заглублению узла кущения растений глубже в почву. На протяжении осенне-зимнего периода исследований было выявлено, что активность перекись-расщепляющих соединений в узлах кущения растений, полученных из обработанных Реглалгом семян, в среднем на 0,15-0,20 мМ Н2О2/мин *1мг белка ниже, чем у необработанных растений. От момента появления 2-го розеточного листа (ноябрь) и до наступления зимнего покоя растений (февраль) активность перекись- расщепляющих соединений в узле кущения постепенно снижалась от 1,46 до 0,18 мМ Н2О2/мин*1мг белка у обработанных Реглалгом растений против необработанных от 1,18 до 0,42 мМ Н2О2/мин*1мг белка. Возможно, эффект от обработки препаратом Реглалг приводит к протеканию более интенсивных начальных этапов роста и большему накоплению метаболитов. Это отражается на повышении устойчивости растений при действии стресса в зимний период. С наступлением весеннего периода активность перекись-расщепляющих соединений в узле кущения экспоненциально увеличивается. У растений, полученных из семян, обработанных препаратом Реглалг, она увеличивается от 0,18 до 2,46 мМ Н2О2/мин*1мг белка против необработанных: от 0,42 до 2,28 мМ Н2О2/мин*1мг белка до фазы появления 5- го розеточного листа. Возможно, в зимний период растения, обработанные препаратом Реглалг, испытали меньшее воздействия холода на узел кущения за счет углубления его в почву. Более интенсивное развитие растений сказывается на раннем выходе из зимнего покоя. Обработка семян растений пшеницы биорегулятором роста Реглалг приводит к быстрому развитию растений в начальный период роста, что непосредственно сказывается на дальнейшем развитии всего растения в целом. Растения способны лучше переносить действие низких температур в зимний период времени и за счет раннего пробуждения развиваются более длительный период во влажной почве до наступления засушливого периода года. Хорошо развитые растения пшеницы лучше противостоят действию внешних биотических и абиотических факторов среды, что непременно отражается на показателях развития и урожайности. Следовательно, препарат Реглалг можно отнести к группе антистрессовых препаратов, способствующих регулированию биохимических процессов, направленных для поддержания гомеостаза развития растений пшеницы.

114 EVALUAREA INFLUENȚEI BIOSTIMULATORULUI REGLALG ASUPRA PRODUCTIVITĂȚII DIFERITOR SOIURI DE GRÂU ȘI SECARĂ

Platovschii N., Badașco Sabina, Jelev Natalia Institutul de Genetică, Fiziologie și Protecție a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail: [email protected] În agricultură se utilizează, frecvent substanțele biologic active sintetice și de origină vegetală pentru a spori rezistența plantelor la factorii de stres și productivitatea plantelor cerealiere. Printre acestea menţionăm grâul și secara, care reprezintă una din principalele surse în asigurarea securității alimentare atât pentru oameni, cât și pentru animale. La ora actuală în agricultura mondială se pune accentul pe ecologizarea produselor alimentare deaceea o atenție deosebită se oferă biostimulatorilor ecologici inofensivi, care corespund cerinţelor agriculturii organice. Acestor cerinţe corespunde preparatul Reglalg, utilizat în cercetările noastre pentru tratarea semințelor înainte de semănat, precum și pentru tratarea pe parcursul vegetației. În această teză vom prezenta efectul biostimulatorului Reglalg utilizat pentru tratarea înainte de semănat a semințelor diferitor soiuri de grâu și secară. Cercetările au fost realizate pe câmpul experimental al Institutului de Genetică, Fiziologie și Protecție a Plantelor pe perioada de vegetaţie în anul 2018 - 2019. Experimentele au inclus lotul martor şi experimental însămânţat cu seminţe respectiv netratate şi tratate înainte de semănat cu soluţie a preparatului Reglalg. Suprafața totală pe care a fost amplasată experiența a fost de 800 m2. Semănăturile cu semințele soiului Moldova 5 au ocupat 300 m2, din care 60 m2 iau revenit variantei martor, iar 240 m2 – loturilor experimentale constituite din patru suprafeţe egale însămânţate cu semințe tratate cu biostimulatoruil Reglalg diluat cu apă în raportul 1/800, 1/600, 1/400 şi 1/200. Semănăturile de pe lotul martor, cât și cel experimental, au fost repartizate randomizat pe 15 parcele câte 20 m2 fiecare. Pe alți 500 m2 din suprafața totală a câmpului experimental loturile martor şi experimentale au ocupat câte 60 și 40 m2, fiind însămânţate cu seminţele soiurilor de grâu Moldova 77, Moldova 11, Moldova 66 şi de secară T34/19, Z70. Menţionăm că înainte de semănatul loturilor experimentale, seminţele au fost tratate cu soluţia biostimulatorului Reglalg diluat cu apă în raport de 1/200. Observările fenologice efectuate pe parcursul perioadei de vegetație au confirmat efectele benefice ale biostimulatorului Reglalg, constatate și în anii precedenți, asupra creșterii și dezvoltării plantelor. Influența biostimulatorului s-a evidențiat la plante în toate fazele ontogenezei, începând cu emergența uniformă a plantulelor la suprafața solului (încolțirea), ceea ce sugerează despre utilizarea mai eficientă de plantulele din variantele experimentale a substanțelor de rezevă a semințelor şi atenuarea efectelor de stres provocate de trecere a plantelor de la nutriția heterotrofă la cea autotrofă. La plantele experimentale sistemul radicular era mai dezvoltat, iar ulterior nodul de înfrățire s-a format cu 1,5-1,8 cm mai profund în sol. În așa fel, datorită diminuării lungimii epicotilului la plantele crescute din semințele tratate cu biostimulatorul Reglalg rădăcinile şi nodul de înfrăţire s-a format mai profund în sol, astfel ele erau mai bine protejate de gerurile din timpul iernii şi arşiţa din timpul verii. Totodată, vigoarea plantelor experimentale era mai înaltă, iar durata fazelor de formare a boabelor s-a extins cu aproximativ 5-7 zile. Ca urmare a efectelor menţionate mai sus la plantele din variantele experimentale numărul de spice productive la m2 a sporit cu 3-5%, iar numărul de spice mari și medii a depășit cu 13-58 % și respectiv cu 9-23 % parametrii caracteristici pentru plantele de pe loturile martor. Masa și numărul boabelor din spice a sporit odată cu creșterea dozei preparatului, fiind maximală în varianta tratării semințelor cu preparatul Reglalg diluat cu apă în raportul 1/200. La fel, la plantele din această variantă, numărul de boabe în spic a crescut cel mai semnificativ (cu 14% depășind numărul boabelor în spicele din variantele martor). În consecință productivitatea plantelor experimentale a depăşit cea a plantelor martor. Ea a fost determinată atât de doza Reglalgului cât și de genotip. Surplusul recoltei obţinute de pe loturile experimentale, în dependenţă de doza biostimulatorului Reglalg a depăşit cu 13-16 % recolta de pe loturile martor. Totodată, productivitatea plantelor obţinute din seminţele diferitor genotipuri de grâu comun de toamnă şi secară tratate înainte de semănat cu biostimulatorul Reglalg a sporit în mediu cu 200 kg/ha (grâu) şi 400 kg/ha (secară).

115 MODIFICAREA ACTIVITĂȚII PEROXIDAZEI ÎN FRUCTELE DE PĂR ÎN FUNCȚIE DE INFLUENȚA SBA ȘI A METODELOR DE PĂSTRARE

Popovici Ana, Bujoreanu N. Institutul de Genetică, Fiziologie și Protecție a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail:[email protected]

Creșterea și maturarea fructelor reprezintă rezultatul unui complex de reacții biochimice catalizate de enzime și sisteme enzimatice. Toate modificările fiziologo-biochimice, care au loc în fructe, sunt caracterizate prin transformări intense și continue. Maturarea fructelor reprezintă un proces complex, reglat genetic prin care se realizează însușirile calitative, caracteristice speciei și soiului cercetat. În perioada de păstrare a fructelor de păr au loc modificări în conținutul biochimic al acestora, coordonate de activitatea enzimelor. Acestea pot influența însușirile senzoriale ale fructelor (gustul, culoarea, mirosul ș.a.). Peroxidaza (PO) deține un rol important în procesul de păstrare, influențând în mare parte sinteza etilenei și intensitatea proceselor de oxidare a polifenolilor în țesuturile fructelor. În perioada creșterii intensive a lăstarilor, pomii și fructele de păr (soiul de toamnă Vâstavocinaia și soiul de iarnă Noiabriskaia) au fost tratați cu substanțe biologic active (SBA) Verbascozidă - 0,01% și Reglalg - 0,05%. În calitate de martor a servit varianta netratată. Fructele au fost supuse păstrării îndelungate în camera frigorifică experimentală în atmosfera controlată (AC) (3% CO2 /5% O2), prin aplicarea inhibitorului de sinteză a etilenei - Fitomag și varianta martor - atmosfera obișnuită (AO). În rezultatul cercetărilor efectuate s-a stabilit, că la începutul perioadei de păstrare a fructelor soiului Noiabriscaia în AO, activitatea peroxidazei a fost înaltă, iar pe durata următoarei perioade, s- a atestat o diminuare în dependență de variantele experiențelor montate: cu 20% în varianta martor, iar în variantele aplicării Verbascozidei cu 26,0% și Reglalg-ului, respectiv cu 25,0%. Pe durata perioadei ulterioare de păstrare activitatea PO a crescut nesemnificativ și s-a menținut până la finele păstrării. La fructele păstrate prin aplicarea Fitomag-ului, activitatea PO a fost mai scăzută în raport cu cea înregistrată la fructele păstrate în varianta martor. De menționat, că la fel ca și în AO, pe perioada păstrării se atestă o diminuare treptată a activității enzimei PO cu 11,0-18,0%, față de faza inițială de păstrare, fiind puțin mai sporită în variantele tratate cu Verbascozidă și Reglalg, comparativ cu martorul netratat în perioada de vegetație. La fructele păstrate în atmosfera controlată activitatea peroxidazei la finele păstrării a fost mai scăzută comparativ cu celelalte două metode de păstrare aplicate. Față de variantele păstrate în AO, activitatea acesteia a fost redusă cu 32-39%, iar comparativ cu cele păstrate în mediul aplicării inhibitorului de sinteză a etilenei Fitomag - cu 19- 25%. Activitatea PO la fructele de păr tratate cu Verbascozidă și Reglalg a fost nesemnificativ mai înaltă comparativ cu cea a martorului. La fructele soiului de toamnă Vâstavocinaia, păstrate prin aplicarea celor 3 metode de păstrare s-a constatat aceiași legitate a activității peroxidazei. La finele perioadei de păstrare în fructele de păr activitatea enzimei în variantele aplicării inhibitorului de sinteză a etilenei Fitomag a fost cu 5-6% mai joasă comparativ cu aceleași variante ale atmosferei obișnuite. În același timp, fructele păstrate în AC au avut o activitate a peroxidazei mai scăzută cu 26-39% comparativ cu cele păstrate în AO. Activitatea enzimei cercetate a fost cu mult mai joasă comparativ cu cea a soiului Noiabriscaia. Peroxidaza a avut un rol important în procesul de maturare a fructelor, participând la sinteza etilenei, cât și în procesul de respirație prin neutralizarea surplusului de peroxid de hidrogen și protejarea oxidării peroxidice a celulelor fructelor, intensificându-și activitatea în timpul maximului respirator. În perioada postrecoltare, activitatea peroxidazei în fructele ambelor soiuri de păr a depins de particularitățile fiziologice ale soiului, metoda și durata de păstrare și mai puțin de reglatorii de creștere, aplicați pe durata perioadei de vegetație a pomilor de păr. Cea mai efectivă metodă de păstrare a fructelor de păr s-a dovedit a fi AC, unde procesele de oxido-reducere au decurs mai lent, fiind urmată de metoda aplicării la inițierea păstrării a inhibitorului de sinteză a etilenei - Fitomag. În metoda de păstrare obișnuită procesele de maturare-senescență a fructelor a derulat mai intens, reflectându-se în mare parte asupra calității și duratei de păstrare a lor.

116 MODIFICAREA ACTIVITĂȚII POLIFENOLOXIDAZEI ÎN FRUCTELE DE PĂR ÎN DEPENDENȚĂ DE INFLUENȚA SBA ȘI A METODELOR DE PĂSTRARE APLICATE

Popovici Ana, Bujoreanu N. Institutul de Genetică, Fiziologie și Protecție a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail:[email protected]

Polifenoloxidaza (PFO) reprezintă una din oxidazele terminale ale celulei vegetale, care participă activ în procesele fiziologo-biochimice ce au loc în fructe pe parcursul păstrării îndelungate. Activitatea PFO în fructele de păr de soiul Noiabriscaia este contrară activității peroxidazei (PO), a cărei activitate este scăzută la inițierea procesului de păstrare de lungă durată. Activitatea acestei enzime în perioada de păstrare crește până la începutul lunii decembrie în dependență de condițiile de păstrare și intensității proceselor metabolice. In cazul experiențelor de față activitatea acestei enzime a avut o creștere bruscă în fructele de păr din toate variantele cercetate și păstrate în atmosfera obișnuită (AO), atmosfera controlată (AC - 3% CO2 / 5%O2) și în mediul cu aplicarea inhibitorului de sinteză a etilenei Fitomag. În AO activitatea acestei enzime a sporit de 1,7 ori, iar în mediul aplicării inhibitorului de sinteză a etilenei Fitomag a crescut la toate variantele de 1,4-1,5 ori. La începutul lunii ianuarie a avut loc o scădere semnificativă a activității PFO în toate variantele experienței. În fructele păstrate în AO activitatea acesteia s-a diminuat de 2,3-2,5 ori, iar la fructele păstrate în mediul cu aplicarea Fitomag activitatea acesteia s-a redus respectiv de1,7-1,8 ori. La finele perioadei de păstrare, când a finisat procesul de maturare și a început senescența fructelor a avut loc o creștere nesemnificativă a activității PFO, responsabilă de catalizarea procesului oxidativ (a substanțelor fenolice) cu participarea oxigenului molecular. În AC activitatea PFO în fructele de păr a fost mai joasă față de cele păstrate în celelalte două metode de păstrare aplicate. Activitatea PFO în fructele păstrate în AC comparativ cu cele păstrate în AO a fost mai scăzută cu 19-20%, iar față de fructele păstrate prin metoda aplicării Fitomagului cu 10-12%. Astfel, procesele ox-red la maturarea fructelor au decurs mai lent, astfel, păstrându-se mai bine calitățile lor gustative și, fiind ca cea mai efectivă metodă de păstrare. La soiul de toamnă Vâstovocinaia s-a depistat aceiași legitate în activitatea PFO ca și la soiul Noiabrscaia. Activitatea PFO în fructele acestui soi a fost mai lentă decât la soiul Noiabriscaia. Deosebirile referitoare activității PFO în fructele de păr din variantele aplicării SBA Verbascozidă 0,01% și a SBA Reglalg 0,05%, la ambele soiuri păstrate prin aplicarea celor trei metode au fost nesemnificativ mai înalte comparativ cu martorul. Așadar, procesele de ox-red ce au decurs cu modificarea activității PFO la aceste două soiuri au depins de metoda și durata păstrării fructelor, de particularitățile fiziologice ale soiurilor studiate, de procesele metabolic ce au avut loc la maturarea lor și mai puțin de reglatorii de creștere aplicați prin tratarea pomilor în perioada de vegetație. Concomitent cu creșterea activității PO scade activitatea PFO și invers. De aici rezultă și rolul lor diferențiat în procesele metabolice. Enzimele în cauză mai au un rol important și la formarea aromei, gustului și culorii fructelor mature. În procesul de maturare în fructele de păr s-au intensificat procesele fiziologo-biochimice, care au determinat gradul de modificare a proprietății diferitor compuși chimici, precum și a însușirilor fizice și organoleptice ale fructelor. S-a constatat, că enzimele PO și PFO intervin și la brunificarea țesuturilor fructelor de păr. Brunificarea este rezultatul oxidării fenolilor sub acțiunea acestor enzime. Pe parcursul păstrării fructelor de păr, ca urmare a activității enzimatice (oxidării, polimerizării sau a transformării în alți compuși organici), are loc scăderea treptată a proprietății fenolilor ceia ce determină modificarea gustului astrigent al fructelor și căderea rezistenței lor la atacul patogenilor. În concluzie s-a constatat, că procedeul de păstrare a avut o influență decisivă asupra modificării activității enzimelor PO și PFO. Păstrarea fructelor de păr în atmosfera controlată și aplicarea inhibitorului de sinteză a etilenei Fitomag în atmosfera camerei frigorifice au fost mai benefice asupra conservării calității fructelor și rezistenței lor la agenții patogeni ce produc bolile fungice și dereglările funcționale față de păstrarea lor în atmosfera obișnuită.

117 APLICAREA RIZOBACTERIILOR BENEFICE – OPŢIUNE BIOTEHNOLOGICĂ DE SPORIRE A PRODUCTIVITĂŢII PRIMARE A PLANTELOR Glycine max. (L.) ÎN CONDIŢII OPTIME ŞI INSUFICIENTE DE UMIDITATE

Rotaru Vl. Institutul de Genetică, Fiziologie şi Protecţie a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail: [email protected]

Biotehnologiile moderne trebuie să contribuie nu numai la sporirea productivităţii plantelor de cultură dar şi la minimalizarea presingului asupra agrosistemelor agricole şi naturale. Ele sunt din ce în ce mai larg utilizate în producţia agricolă. Un rol important în acest context îi revine aplicării rizobacteriilor benefice pentru creşterea şi dezvoltarea plantelor. Pentru implementarea managementului efectiv al utilizării fertilizanţilor organici şi minerali în biotehnologia culturilor este necesar de a cunoaşte impactul rizobacteriilor asupra productivităţii primare a plantelor. În prezent există dovezi convingătoare că utilizarea microorganismelor rizosferice are efect benefic asupra productivităţii culturilor şi contribuie la îmbunătăţirea fertilităţii solului. Scopul cercetărilor a constat în evaluarea efectului aplicării tulpinilor de rizobacterii Bradyrhizobium japonicum separat sau în combinare cu tulpina de rizobacterii Pseudomonas putida asupra productivităţii primare a plantelor de soia. Experienţele s-au efectuat în condiţii dirijate de umiditate şi nutriţie minerală. Plantele de soia (soiul Horboveanca) s-au cultivat în vase de vegetaţie folosindu-se un amestec de nisip şi sol (chernoziom carbonatic). O parte de plante s-au cultivat pe întreaga perioada de vegetaţie la umiditatea optimă – 70% CTA (capacitatea de apă a solului), iar altă parte de plante - la deficit de umiditate (35% CTA). Regimul suboptim de umiditate a fost instalat în faza de înflorire deplină a plantelor pe o perioadă de 12 zile. Rezultatele cercetărilor au stabilit că creşterea plantelor a fost influenţată semnificativ de acţiunea în complex a insuficienţei de fosfor şi secetă moderată. Efectul lor combinat a redus evident productivitatea plantelor comparativ cu cea înregistrată la plantele afectate de un singur factor abiotic. Aplicarea rizobacteriilor la plantele de soia a contribuit la modificări pozitive în creşterea şi dezvoltarea plantelor atât în condiţii optime, cât şi în condiţii insuficiente de umiditate a solului. Impactul biofertilizanţilor a corelat cu nivelul de umiditate din sol. S-a stabilit că utilizarea microorganismelor a majorat cantitatea de substanţe uscate acumulate (faza începerii formării păstăilor) pe ambele nivele de umiditate a solului însă efectul lor a fost mai pronunţat la plantele nesupuse secetei. Prin urmare, cu certitudine se poate de confirmat că microorganismele asigură o creştere mai bună a plantelor şi contribuie la atenuarea efectelor negative ale factorilor abiotici nefavorabili (disbalanță nutritivă, secetă moderată) asupra productivităţii plantelor de soia. Analiza comparativă a datelor obţinute a relevat faptul că aplicarea separată a Bradyrhizobium japonicum a stimulat creşterea plantelor comparativ cu varianta netratată însă efect mai pronunţat s-a înregistrat în varianta cu aplicarea combinată a bacteriilor Bradyrhizobium japonicum şi Pseudomonas putida. În baza rezultatelor experimentale ale acestui studiu, se poate de tras concluzia că utilizarea tulpinilor de rizobacterii Bradyrhizobium japonicum şi Pseudomonas putida ca bioferilizatori în tehnologia cultivării soiei este o strategie de îmbunătăţire a nutriţiei minerale şi atenuare a efectului insuficienţei de fosfor şi secetă moderată asupra productivităţii plantelor.

118 ЭФФЕКТИВНОСТЬ МЕТОДА МАССОВОГО ОТЛОВА САМЦОВ В СНИЖЕНИИ ЧИСЛЕННОСТИ ПОПУЛЯЦИИ ВРЕДИТЕЛЯ A. segetum НА СОЕ

Русу Юлиана, Настас Т. Институт генетики, физиологии и защиты растений, Кишинэу, Республикa Молдова e-mail: [email protected]

Соя – одна из основных сельскохозяйственных культур, имеющих огромное экономическое значение во всем мире. В Республике Молдова для выращивания сои ежегодно выделяется около 50 тыс. гектар. Данная культура ежегодно подвергается воздействию множества видов вредителей, но один из наиболее экономически важных вредителей является озимая совка (Agrotis segetum). A. segetum наибольший вред наносит таким культурам как кукуруза, соя, томаты и др. Для защиты урожая и подавления численности данного вредителя ежегодно применяются минимум 3-4 химические обработки. Подобные обработки не всегда оправдывают ожидаемый результат, так как гусеницы ведут скрытый образ жизни. Кроме этого, они вызывают экологические проблемы, которые сказываются как прямым, так и косвенным негативным эффектом. Создаваемая ситуация может быть решена только путем разработки методов, на основе которых будут сохраняться естественные механизмы контроля отношений между вредными организмами и с/х растениями − одним из них является применение половых феромонов. Одно из самых наибольших преимуществ использования феромонов это то, что они являются природными химическими веществами, строго характерными для определенного вида, не затрагивая поведения других видов насекомых, безопасны для человека и окружающей среды в целом. Целью работы являлось дать оценку биологической эффективности метода массового отлова самцов в снижении численности популяции вредителя A. segetum на сое. Опыт по определению эффективности метода проводился на опытных полях Института генетики, физиологии и защиты растений (ИГФЗР) в 2018 году, на участке сои S = 1 га (сорт Лэдуца). Феромонные ловушки были расположены в шахматном порядке исходя из 10/га. Расстояние между ними составляло не менее 50 метров друг от друга. Высота расположения ловушек регулировалась по мере роста культуры (1,2-1,5 м). Учеты и изъятие отловленных самцов из ловушек проводили каждые 3 дня на протяжении всего вегетационного периода. Клеевые вкладыши заменялись по мере загрязнения, а феромонная капсула − один раз в 30 дней. Контрольный участок находился на расстоянии не менее чем 200 м от опытного. В нашем опыте использовался 4-х компонентный половой феромон озимой совки синтезированный в ИГФЗР. Доза используемого феромона – 2,5 мг/1 диспенсер. В результате полученных данных было установлено, что наибольшее количество самцов отлавливались именно в краевые ловушки. В ловушках размещенных по центру поля отлавливалось лишь незначительное количество самцов. Наибольший процент отловленных самцов на краевые ловушки был отмечен в третьем поколении, что составило 90,8 % от общего отлова. На опытном участке сои, за весь вегетационный период было отловлено 304 самца A. segetum. Это повлияло на существенное снижение количества спаренных самок, в результате чего на растениях было отложено на 50% меньше яиц, чем на растениях в контрольном варианте. Таким образом, применение метода массового отлова самцов может значительно снизить плотность популяции и применяться наряду с другими биологическими методами в интегрированной системе защиты сои от данного вредителя.

119 EVALUAREA EFICACITĂȚII BIOLOGICE A EXSTRASULUI DIN Sophora flavenscens ÎN COMBATEREA AFIDELOR LA CULTURA DE CASTRAVEȚI DIN SPAȚIILE PROTEJATE

Savranschii D., Todiraș Vl., Tretiacova Tatiana Institutul de Genetică, Fiziologie și Protecție a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail: [email protected]

Utilizarea intensivă în sectorul agricol a unor cantităţi sporite de substanţe chimice, pentru tratarea culturilor de castraveți din spațiile protejate, a condus la apariţia pe piaţă a unei cereri pentru produsele ecologice. Necesitatea micşorării pierderii de recoltă pune la ordinea zilei problema elaborării unor măsuri eficiente de protecţie a plantelor care ar diminua dinamica dezvoltării organismelor dăunătoare cu un număr minim de tratamente chimice şi reducerea poluării mediului. Culturile de castraveți din spațiile protejate suportă pierderi enorme din cauza daunelor aduse de afide. Acești dăunători pot fi prezenți pe întreaga perioadă de vegetație dacă nu sunt luate la timp măsuri de prevenire. Scopul lucrării este de a demonstra eficacitatea biologică a extrasului din planta Sofhora flavenscens folosit pentru combaterea afidelor la culturile de castaveți din spațiile protejate. Pentru aceasta au fost montate expeeriențele în trei variante. Prima variantă a fost luată drept Martor, a doua variantă a fost luat ca etalon, insecticidul Pelicol, și în a treia variantă s-a folosit extrasul din planta Sophora flavenscens de 0,3%. Plantele din varianta martor n-au suportat nici un tratament, astfel dezvoltarea și răspândirea acestui dăunător a fost foarte rapidă. Fiecare din variante au avut câte 4 repetări. Gradul de atac a plantelor și intesitatea dezvoltării afidelor au fost determinate conform metodei descrise de A.Hrapova. Primul tratament în combaterea dăunătorului a fost efectuat pe data de 03.07.2019. La evidenţa efectuată înainte de stropire pe plantele de castraveți au fost înregistraţi câte 10-24 de exemplari pe frunză, în urma careia plantele nu se mai dezvoltau normal și stopau din creștere. Aplicarea tratamentului a contribuit la mortalitatea fazelor mobile ale dăunătorului atât pe plantele din varianta preparatului testat, cât şi la cel din varianta etalon. Evaluând datele obţinute după primul tratament s-a observat micşorarea numărului de dăunători în raport cu martorul netratat. Astfel eficacitatea biologică a exstrasului din Sophora flavenscens după a 3-a, 7-a și a 14-a zi in medie a fost de 87%, la varianta Etalon, (Pelicol–10,0l/ha) a fost de 93%. Din aceste date rezultă, ca tratarea plantelor de castraveți cu extrasul din planta Sophora flavenscens în spațiile protejate reduce simțitor răspândirea dăunătorului, deși a demonstrat o eficacitate biologică mai joasă în comparație cu etalonul. Cercetarile efectuate asupra extrasului din Sophora flavenscens au mai demonstrat că acesta este un preparat ecologic cu perspectiva în sistemul de măsuri de protecție a plantelor.

120 НЕКОТОРЫЕ АСПЕКТЫ СОЗДАНИЯ БИОПРЕПАРАТОВ НА ОСНОВЕ МИКРООРГАНИЗМОВ ДЛЯ ЗАЩИТЫ РАСТЕНИЙ

Щербакова Татьяна Институт генетики, физиологии и защиты растений, Кишинэу, Республика Молдова e-mail: [email protected]

Актуальность применения микробиологических препаратов в защите растений постоянно возрастает в связи с повышением продовольственной значимости экологически безопасных продуктов питания и кормов. Основой микробных средств защиты растений от болезней являются живые культуры микроорганизмов с высокой вирулентностью и продукты их метаболизма (антибиотики, токсины, ферменты и др.). Наибόльшее практическое применение в биологическом контроле болезней растений отводится микроскопическим грибам, и ведущую роль занимает род Trichoderma Pers. ex Fr. (Harman G.E., 2011, Oros G., Naár Z., 2017). Подбор оптимальной питательной среды для культивирования биологических агентов является важным этапом в получении эффективных биопрепаратов. Модификация питательных сред по основным источникам питания микроорганизмов – углерода и азота способствует образованию биологически активных веществ, оказывающих действие на фитопатогены, в отношении которых проявляется антагонизм и гиперпаразитизм. Эти свойства могут усиливаться, либо ослабляться. Технология производства биопрепарата представляет собой культивирование гриба-продуцента в жидкой питательной среде на микробиологической качалке в течение 90-96 часов. Для снижения стоимости биопрепаратов в состав сред вводят более дешевое сырье, по сравнению с синтетическими питательными средами, и обычно это отходы производства – свекловичная меласса, кукурузный экстракт, пивные дрожжи, пшеничные отруби, соевая мука, кукурузная патока и др. Проведенные нами исследования по изучению спектра фунгицидного действия разработанного нами жидкого биологического препарата Gliocladin-SC, действующим веществом которого является гриб Trichoderma virens Miller, Giddens and Foster, определили 18 патогенных агентов возбудителей заболеваний сельскохозяйственных культур (Щербакова Т., 2019) и в работе было использовано несколько жидких питательных сред. При определении фунгицидной активности биопрепарата на отдельные патогены было отмечено, что изменение весового состава питательной среды по источнику углерода приводило к увеличению биомассы и сокращению процесса культивирования препарата на 8- 10 часов. При изменении состава среды по источнику углерода кроме мицелия и хламидоспор происходило образование конидий и бластоспор, зоны подавления роста патогенов Sclerotinia sclerotiorum и Botrytis cinerea увеличивались, а также усилилось антифунгальное действие в отношении патогенов плодовых культур Monilia cinerea и M.fructigena. Испытания препарата, изготовленного на такой среде для подавления монилиоза в черешневом саду при двух обработках 1%-ой концентрацией – первая за 3 недели, вторая за 7 дней до сбора урожая показали эффективность 91,8%. При одной обработке сада за 7 дней до сбора урожая эффективность препарата составила 88,0% (Щербакова Т. и др., 2015). При определении антагонистической активности продуцента T.virens на твердых питательных средах в отношении патогена Thielaviopsis basicola, вызывающего корневые гнили рассады капусты, колонизации культуры патогена отмечено не было, тогда как при изменении состава среды по источнику азота и тестировании биопрепарата методом диффузии в агар, происходило образование стерильных зон подавления роста. При изменении состава среды по источнику азота антифунгальное действие усиливалось и в отношении грибов рода Fusarium. В результате проведенных исследований было определено, что для успешного применения биопрепарата Gliocladin-SC в защите растений от широкого спектра заболеваний, необходимы отдельные сбалансированные питательные среды для разных групп патогенов.

121 ЭФФЕКТИВНОСТЬ БИОПРЕПАРАТОВ НА ОСНОВЕ Trichoderma В БИОКОНТРОЛЕ КОРНЕВЫХ ГНИЛЕЙ КУКУРУЗЫ НА ИСКУССТВЕННОМ ФОНЕ ЗАРАЖЕНИЯ СЕМЯН В ЛАБОРАТОРНЫХ УСЛОВИЯХ

Щербакова Т.1, Пынзару Б.1, Лунгу А.1, Матичук В.2 1Институт генетики, физиологии и защиты растений, Кишинэу, Республикa Молдова 2Институт растениеводства «Порумбень», Porumbeni, Республикa Молдова e-mail: [email protected]

Для получения надежных данных об эффективности биологических препаратов решающее значение приобретает создание инфекционного фона с регулируемой инфекционной нагрузкой в лабораторных условиях, так как факторы внешней среды и комплекс возбудителей с широкой специализацией не позволяют этого сделать в полевых условиях при естественном заражении. Поэтому целью исследований являлось определение эффективности предпосевной обработки семян биопрепаратами Gliocladin-SC и Trichodermin- SC с действующим началом грибов-антагонистов Trichoderma virens Miller, Giddens and Foster, штамм 3Х и T.lignorum (Tode) Harz. штамм М-10, соответственно, в биоконтроле корневых гнилей методом инфицирования семян патогенными грибами Fusarium verticillioides (Sacc.) Nirenberg и F.graminearum Shwabe, доминирующими на кукурузе. Материалом для исследований служили семена сахарной кукурузы гибрида Porumbeni- 280. Для создания инфекционных фонов семена замачивали в водных суспензиях 7-ми дневных культур грибов F.verticillioides с титром 2,9×106 спор/мл и F.graminearum в течение 90 мин. Высохшие семена 30 минут выдерживали в 10%-х водных суспензиях биопрепаратов Gliocladin-SC и Trichodermin-SC. Посев подготовленных семян проводили в кюветы со стерильным субстратом (чернозем + 15% песка). Варианты опыта: 1) контроль 1 – замачивание здоровых семян в воде, 2) контроль 2 – инфицирование семян F.verticillioides, 3) обработка инфицированных семян биопрепаратом Gliocladin-SC, 4) обработка инфицированных семян биопрепаратом Trichodermin-SC. Такие же варианты при инфицировании семян патогеном F.graminearum. В каждом варианте по 4 повторности, продолжительность эксперимента 5 недель, после чего учитывали поражаемость проростков корневыми гнилями. Данные эксперимента показали, что на жестком инфекционном фоне заражения семян патогеном F. verticillioides интенсивность развития корневых гнилей в контроле 2 (зараженные семена) составила 80,3%, при обработке зараженных семян биопрепаратом Gliocladin-SC интенсивность заболевания снизилась до 49,5%, при обработке зараженных семян биопрепаратом Trichodermin-SC – до 48,8%. Биологическая эффективность биопрепаратов составила 38,3% и 39,25%, соответственно. Степень развития болезни в варианте контроль 1 без заражения и без обработки составила 42,7%, что свидетельствует о изначально высокой инфекционной нагрузке семян и необходимости предпосевных обработок. Биологическая эффективность биопрепаратов Gliocladin-SC и Trichodermin-SC в снижении развития корневых гнилей, вызванных патогеном F.graminearum на жестком инфекционном фоне составила 42,8% и 56,6%, соответственно. Интенсивность развития заболевания в контроле 2 (зараженные семена) составила 41,5%, при обработке зараженных семян биопрепаратом Gliocladin-SC – 23,8%, при обработке зараженных семян биопрепаратом Trichodermin-SC – 18,0%. В варианте контроль 1 (без заражения) интенсивность заболевания составила 29,3%. Биопрепараты Gliocladin-SC и Trichodermin-SC на жестком инфекционном фоне в стерильном субстрате показали высокую эффективность в снижении развития корневых гнилей кукурузы и их можно рекомендовать для предпосевной обработки семян.

122 Streptomyces castelarensis A4 КАК АГЕНТ БИОЛОГИЧЕСКОГО КОНТРОЛЯ ФИТОПАТОГЕНОВ

Широких И. Г. 1, Фокина А. И. 2 1Федеральный аграрный научный центр Северо-Востока им. Н.В. Рудницкого, Россия 2Вятский государственный университет, Россия e-mail: [email protected], [email protected]

Из ризосферы овса выделен актиномицетный изолят А4, проявивший способность подавлять развитие фитопатогенных грибов Fusarium avenaceum, F. culmorum, Alternaria sp. и Bipolaris sorokiniana в чистых культурах и в вегетационных экспериментах с растениями. В полевых условиях обработка растений в фазу кущения суспензией клеток А4 из расчета 1.0 л/га (титр 106 – 107 КОЕ/мл) достоверно снижала (р≥0.95) поражение пшеницы листовой и стеблевой ржавчинами, септориозом, ячменя – листовой ржавчиной и септориозом, овса – корневыми гнилями, листовой и корончатой ржавчинами и красно-бурой пятнистостью. Таксономическое положение штамма А4 установлено на основании анализа фрагментов 16S рРНК, микроскопии и изучения культуральных свойств на диагностических средах. Результаты сиквенса в сочетании с фенотипическими признаками свидетельствуют о принадлежности изолята к виду Streptomyces castelarensis семейства Streptomycetaceae, порядка Streptomycetales, класса Actinobacteria. Полученная при секвенировании фрагмента генома S. castelarensis А4 последовательность нуклеотидов депонирована в международной информационной базе NCBI GenBank (https://www/ncbi.nlm.nih.gov), учётный номер − MK784817. Из культуральной жидкости (КЖ) S. castelarensis А4, выращенного в течение 7 сут при 20○C и 120 об./мин в жидкой среде Беннета, экстрагированы и очищены путем высокоэффективной жидкостной хроматографии (GILSON, Великобритания) c использованием колонки Ultrasil-Si (250×7.8; 10 мкм) три растворимых в гексане метаболита. Основные физико-химические свойства и данные УФ-спектров показали, что один из них идентичен борофицину − нерибосомальному пептиду цианобактерий с противомикробным действием (Кокшарова, 2010). Нерибосомальные пептиды синтезируются благодаря работе мультиэнзимных комплексов – нерибосомальных пептидсинтетаз и поликетидсинтетаз, широко распространенных у стрептомицетов (Doroghazi, Metcalf, 2013). Антимикробные пептиды могут нарушать жизненно важные звенья метаболизма фитопатогенов, а также активировать механизмы индуцированной устойчивости самих растений. Другой экзометаболит S. castelarensis А4 представлял собой 1-(азабензимидазол-2-ил)-2,5-дигидро- 3H-пирроло[2,1-a]изоиндол, производные которого обладают свойствами ингибиторов АТФ- азной активности белков-шаперонов, играющих в клетке ключевую роль в ответе на стресс. В частности, белки шапероны участвуют в регуляции ряда важных для клетки функций, путем сочетания с различными белками-клиентами, вовлеченными в клеточную пролиферацию или апоптоз (Nollen, Morimoto, 2002). Третий идентифицированный в КЖ S. castelarensis А4 метаболит – индол-3-уксусная кислота − один из широко распространённых в природе фитогормонов, наиболее активный в группе ауксинов, которые рассматриваются сегодня как важное условие ассоциативного взаимодействия микроорганизмов с растением. Такое сочетание в одном штамме одновременного синтеза различных метаболитов с антифунгальным действием и продукции ауксинов делает S. castelarensis А4 весьма привлекательным с точки зрения производства новых экологически приемлемых биопрепаратов. Литература. Кокшарова О.А. Применение методов молекулярной генетики и микробиологии в экологии и биотехнологии цианобактерий //Микробиология. 2010. 79(6): 734-747. Doroghazi J. R., Metcalf W. W. Comparative genomics of actinomycetes with a focus on natural product biosynthetic genes //BMC genomics. 2013. 14(1): 611. Nollen E.A.A., Morimoto R. I. Chaperoning signaling pathways: molecular chaperones as stress-sensingheat shock'proteins //Journal of cell science. 2002. 115(14): 2809-2816.

123 EFICACITATEA METODEI DE AUTOSTERILIZARE A MASCULILOR Grapholitha molesta Busck IN CAPCANELE FEROMONALE

Șleahtic Vl., Musleh M., Gladei Diana Institutul de Genetică, Fiziologie și Protecție a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail: [email protected]

Cercetările ştiinţifice a fost efectuat în anul 2016, zona de Centru a Republicii Moldova, în livada de prun gospodăria SRL Agro “Ialoveneni“, r. Ialoveni. Pentru testare a fost selectată plantaţia de prun, soiul Stanley pe o suprafață de 4 ha. In experienţă au fost incluse 4 variante: varianta I- experienţa pe care s-au instalat 10 capcane/ha tratate cu sterilizatorul Admiral, varianta II- experienţa pe care s-au instalat 20 capcane/h tratate cu sterilizatorul Admiral 10 EC ; varianta III – etalon chimic(schema omologată pentru zona dată), varianta IV – martor netratat. Сercetările estimării eficacităţii măsurilor de protecţie sau efectuat după metodele omologate în Republica Moldova. Iar estimarea eficacității metodei de autosterilizare după metodele primite (Voineac, 2011). În perioada de vegetaţie a anului 2016, în cultura de prun s-au creat condiţii favorabile pentru dezvoltarea Grapholita molesta, Grapholita funebrana, Hoplocampa minuta şi Eurytoma schreineri. Cercetările efectuate au dovedit, că molia orientală (Grapholita molesta Busck) în zona de Centru a Republicii Moldova în a. 2016 a început zborul în a III-decadă a lunii aprilie şi se dezvoltă până la sfârşitul lunii septembrie în trei generaţii depline. Analizând gradul de atac a dăunătorului Grapholitha molesta Busck, pe variante, cei mai reduşi indici de dăunare a fructelor de prun au fost marcaţi în varianta I– 0,5% şi în varianta II– 0,4% cu o diferență nesemnificativă între variante. În varianta martor netratat putem observa o diferenţă vizibilă, fructele din coroana pomilor au fost atacate la nivelul de 4,9%, iar numărul fructelor atacate din etalonul chimic a constituit 1,5 %. În baza cercetărilor efectuate, eficacitatea procedeului de sterilizare a masculilor în capcanele feromonale la cultura prunului în combaterea moliei orientale (Grapholita molesta Busck), a demonstrat o reducere a atacului fructelor comparativ cu martorul netratat. Aceşti indici depăşesc esenţial etalonul chimic care a constituit 69,3%. Eficacitatea biologică a metodei de sterilizare a constituit 89,8-91,8%. S-a estimat eficacitatea comparativă a procedeului de sterilizare în expunerea a 10 capcane/ha și a 20 capcane/ha la cultura prunului și s-a stabilit că diferența dintre aceste două variante nu este semnificativă și luând în considerare o densitate scăzută a dăunătorului, se propune instalarea a unui număr mai redus de capcane feromonale la hectar. În legătura cu rezultatele obținute ar fi suficient instalarea a 10 cap/ha pentru protejarea culturei de dăunători. Reeșind din rezultatele obținute s-a stabilit că etalonul chimic contribuie la reducerea numărului entomofagilor, iar între variantele I, II și martor se observă o diferență nesemnificativă între variante. S-a constatat că utilizarea preparatului bioraţional sterilizator Admiral 10EC în protecţia prunului în condiţiile Republicii Moldova a contribuit la conservarea entomofaunei naturale în livada de prun şi creşterea numărului de prădători, favorizând astfel calitatea şi cantitatea recoltei obţinute. La un pom în mediu se întâlneau insecte folositoare în stadiul imago din Familiile: Coccinellidae - 0,8%, Chrisopidae – 0,7% şi Arachnoidea - 0,4%. S-a stabilit că pentru protecţia biologică a unui hectar de prun de dăunători, ulilizând preparatul sterilizator Admiral 10 EC şi a capcanelor cu feromoni pe parcursul anului de vegetaţie s- au cheltuit 2060 lei iar pentru protecţia chimică a unui hectar de prun folosită de gospodăria SRL „Ialoveneni” s-a cheltuit 3281 lei. Analizând evaluarea economică s-a constatat că metoda de autosterilizare la prun este mai eficientă cu 37% decât protecţia chimică folosită de gospodărie.

124 PREPARATIONS CHARACTERISTICS ON THE BACTERIA BASE Pseudomonas fluorescens IN COMBINATION WITH STIMULATING NATURE MATTERS

Solomiychuk M.1, Kordulyan Yulia1, Panimarchuk Oxana2 1Ukrainian Scientific-Research Plant Quarantine Station IPP NAAS, Ucraina 2Bukovinian State Medical university, Ucraina e-mail: [email protected]

The system of organic farming is very propagated last time. The biological plant protection method is alternative to chemical control method. It is an integral component for pest management and disease pathogen control. The microbe-antagonist play important role in disease suppression. There is a bacteria of Pseudomonas sp genus. The biological agents matter and the new preparations’ receiving on their base need strengthening their impact on the new quality level. The rather high antioxidant property has low concentrations of cathiogenic derivatives methoxycarbonyl dihydropyromidine by the studies’ results. The present substances are low toxic. It allows to research it in combination with other preparations. The derivatives of 3,4-dihydropyromidine-2(1Н) takes much researchers attention as expressed system of stimulating andantioxidant activity complex. We have provided the preparation’s usage trials on the bacteria base Pseudomonas fluоrescens in combination with different dihydropyromidine ammonium salt derivatives. The combination forming with preparation’s researched substances had not come to concentration decrease of viable bacteria cells Pseudomonas fluоrescens less than norm (2,7-3,0*109 cells/cm3) by the researchers results.The combination of Pseudomonas fluоrescens with 0,5 % Xymedone solution + urea solution +2 ml ДМSО. The titer of viable cells was consisted 2,98*109 cells/cm3 even on the 20th day of control in the present variant. So the high titer viable cells concentrations of Pseudomonas fluorescens has shown the combination with 1 % Xymedone solution + 2 % Succinic acid solution + 2 ml DMSO + 2 ml DMAE. These concentrations were consisted of 2,82*109 cells/cm3, and 0,25 % Xymedone solution + 2 ml DМSО + 8 ml 1 % solution КОН – 2,68*109 cells/cm3. The usage of all combinations came to increase the range of soybean growing and physiological indexes were determined during the efficiency research of soybean complex treating. The number of beans forming in 1,94 times was recorded during the Planrise usage, (bacteria Pseudomonas fluorenscens) – 10 g/l + dihydropyromidine derivatives(0,5 % Xymedone solution + 0,5 % urea solution + 2 ml DМSО).The best mass indexes 100 seeds was received the combination Planrise, (bacteria Pseudomonas fluorenscens)-10 g/l + dihydropyromidine derivatives (1 % Xymedone solution +2 % Succinic acid solution+2 ml ДМSО+2 ml ДМАЕ). The yields were lower in some variants in comparison with chemical preparations usage, except variants with combinations 1% Xymedone solution +2 % succinic acid +2 ml DMSO+2 ml DMAE. The yield was consisted 2,40 t/ha. The yield was consisted 2,20 t/ha in the variant with 0,5 % xymedone solution + 0,5 % urea solution + 2 ml ДМSО. The yield index was consisted of 1,74 t/ha on control (non-treated). All biocomplex Planrise combinations usage (bacterium Pseudomonas fluorenscens) + dihydropyromidine derivatives preparations efficiency was in the scope 65,4-86,9 % against fungi disease. The efficiency of lonely Pseudomonas fluorenscens bacterium usage was consisted of 57,8 %. The efficiency of chemical control was 88,9 %. So it is perspective to use preparations on the base of Pseudomonas fluorenscens cathiogenic derivatives methoxycarbonyl dihydropyromidine in low concentrations

125 ВЛИЯНИЕ ФУНГИЦИДОВ, ПРИМЕНЯЕМЫХ В ПЕРИОД ВЕГЕТАЦИИ МОРКОВИ СТОЛОВОЙ, НА СРОКИ ПРОЯВЛЕНИЯ ГНИЛЕЙ КОРНЕПЛОДОВ ПРИ ХРАНЕНИИ

Станчук Ал. Институт защиты растений, Прилуки, Беларусь e-mail: [email protected]

Значительная подверженность корнеплодов моркови поражению гнилями в период хранения составляет основную трудность в ее сохранности в зимний период. По экспертным оценкам, потери составляют более 30% от выращенного урожая. Мировая практика свидетельствует, что применение пестицидов при хранении корнеплодов весьма ограничено, что особенно актуально при использовании продукции в свежем виде. Поэтому, на наш взгляд, одним из путей решения проблемы является проведение фунгицидных обработок в период вегетации растений. Это позволит повысить устойчивость растений к болезням, улучшить лежкость корнеплодов и, следовательно, снизить потери при хранении. Поэтому целью наших исследований являлось изучение влияния фунгицидных обработок, проводимых в период вегетации моркови столовой, на пораженность болезнями и лежкость корнеплодов в период хранения. Закладка полевых опытов проведена в соответствии с Методикой опытного дела в овощеводстве и бахчеводстве (М., Агропромиздат, 1992). Опыты по хранению моркови столовой осуществляли в 2018-2019 гг. в соответствии с Методическими указаниями по проведению научно исследовательских работ по хранению овощей (М., ВАСХНИЛ, 1982). Первую обработку проводили к моменту завершения формирования вегетативной массы листьев моркови, при массовом опускании нижних листьев и касании ими почвы и оголившихся верхушек корнеплодов. Вторая обработка – за 14 дней до уборки урожая. Хранили корнеплоды в холодильной камере в контролируемых условиях при температуре 0...1 ̊C и относительной влажности воздуха 90-95%. В процессе хранения были выявлены следующие гнили корнеплодов моркови: белая (Sclerotinia sclerotiorum), серая (Botrytis cinerea), черная (Alternaria radicina), фузариозная (Fusarium spp). В контроле проявление белой и черной гнилей наблюдали в более ранние сроки – уже на 2 месяце хранения (январь), распространенность к концу периода хранения составляла 17,5 и 0,5% при развитии 12,9 и 0,13% соответственно. Проявление серой и фузариозной гнилей на корнеплодах отмечали в марте: развитие гнилей составило 1,87 и 0,37% соответственно. Сроки проявления различных видов гнилей различались в зависимости от применяемых фунгицидов. Фунгициды Кустодия, КС (азоксистробин, 120 г/л + тебуконазол, 200 г/л) и Догода, КЭ (тебуконазол, 125 г/л + дифениконазол, 125 г/л) сдерживали развитие всех видов гнилей. Первые признаки поражения белой гнили были отмечены на 3 месяце хранения корнеплодов (февраль), после 6 месяцев хранения распространенность болезни составила 8,0 и 6,0% при развитии 4,0 и 2,75% соответственно. Черная и фузариозная гниль в вариантах с фунгицидной защитой не отмечены. Первые симптомы серой гнили в варианте с применением фунгицида Кустодия, КС отмечены в апреле, в то время как фунгицид Догода, КЭ сдерживал развитие серой гнили до последнего месяца хранения (первые проявления болезни наблюдали в мае). К концу периода хранения распространенность серой гнили не превышала 0,5% при развитии болезни 0,13%. Результаты наших исследований показали, что использование фунгицидов Догода, КЭ и Кустодия, КС в период вегетации моркови столовой обеспечивает биологическую эффективность в защите корнеплодов от гнилей при хранении на уровне 68,9-100% в зависимости от вида болезни.

126 EFECTUL UNOR COMPUȘI DE TIP CITOKININIC ASUPRA STATUS- ULUI APEI ŞI PROTECŢIEI ANTIOXIDANTE LA PLANTELE DE SOIA ÎN CONDIŢII DE SECETĂ

Ștefîrță Anastasia, Brînză Lilia, Bulhac I., Coropceanu Ed., Buceaceaia Svetlana Institutul de Genetică, Fiziologie şi Protecție a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail: [email protected], [email protected]

În condiţii naturale plantele foarte des sunt supuse acţiunii factorilor nefavorabili, în particular secetei. Tensionarea regimului de umiditate provoacă, în primul rând, dereglarea echilibrului dintre absorbţia şi consumul apei prin transpiraţie şi apariţia unui deficit de saturaţie, care condiţionează perturbarea tuturor proceselor fiziologice cu repercusiune asupra recoltei. Pentru sporirea rezistenţei la secetă a plantelor şi realizarea mai deplină a potenţialului genetic de productivitate sunt folosite diferite măsuri agrotehnice. Impactul secetei poate fi atenuat prin utilizarea substanţelor fiziologic active (SFA), cu efect de atracţie a apei în cele mai importante organe pentru supravieţuire şi formare a recoltei. Utilizarea regulatorilor de creștere, îndeosebi citokininilor, reprezintă o rezervă de majorare a activității fiziologice, rezistenței și productivității plantelor. Se știe, că citokininele (CK) influențează un spectru larg de procese fiziologice și biochimice, cu efect pozitiv asupra procesului de producție: formarea și funcționarea aparatului fotosintetic, transportul și distribuirea asimilatelor, creșterii, dezvoltării, depozitării substanțelor de rezervă, etc. Scopul lucrării curente a constat în elucidarea unor mecanisme asociate cu toleranța, creșterea și productivitatea plantelor în condiții fluctuante de mediu și stres hidric, prin administrarea exogenă a unor compuși fiziologic activi cu acțiune citokininică. Au fost realizate experienţe în condiții de laborator, vegetație și câmp unde s-a verificat posibilitatea reglării exogene a status-ului apei, activității enzimelor antioxidante, creșterii şi productivității la umiditate redusă a plantelor de Glycine max (L.) Merr., soiurile: Enigma, Indra și Nadejda. S-a efectuat tratarea seminţelor înainte de semănat şi aparatului foliar pe parcursul vegetației cu: CK, tiouree (TU) și compozit (C). Compozit este un compus coordinativ cu acțiune citokininică în componența căruia intră micro- și macroelemente. S-a stabilit că, utilizarea SFA a condiţionat optimizarea parametrilor status-ului apei în organele plantelor atât în condiții de umiditate optimă, cât și de secetă prin majorarea gradului de hidratare, turgescenței și capacității de reținere a apei. Compusul „compozit” pozitiv influenţează conductanţa stomatelor, stimulează transpiraţia, și fotosinteza, are efect de activare a sistemelor de autoreglare a status-ului apei în organismul vegetal în condiţii de deficit de umiditate. Un rol semnificativ în activarea mecanismelor adaptării şi toleranţei la condiţiile nefavorabile revine sistemului antioxidant. În marea majoritate de cazuri status-ul înalt antioxidant este în corelaţie cu rezistenţa înaltă la factorul nefavorabil. Tratarea plantelor cu TU și C condiționează majorarea activității superoxid dismutazei, catalazei, ascorbatperoxidazei, glutationreductazei și glutationperoxidazei comparativ cu cele prelucrate cu CK și, îndeosebi, cu plantele martor. Activitatea înaltă a enzimelor antioxidante este asociată cu diminuarea conținutului di-aldehidei malonice. Efectul fiziologic pozitiv al TU și compusului C este confirmat și de nivelul mai înalt al pigmenților de asimilație și fotosintezei. Din rezultatele studiului urmează că, starea funcţională a plantelor în condiţii suboptimale de umiditate poate fi reglată cu ajutorul substanţelor fiziologic active, care condiţionează consumul mai economicos şi utilizarea mai productivă a rezervelor de apă din sol. SFA măresc capacitatea ţesuturilor plantei de a reţine apa, activează biosintezele şi acumularea fitomasei, ceea ce asigură formarea unor plante mai viguroase şi reduc pierderile de recoltă în condiţii secetă. În concluzie: utilizarea preparatului C pentru tratarea semințelor pentru semănat și aparatului foliar este veridic mai efectivă pentru ameliorarea performanțelor biologice ale plantelor de soia prin stabilizarea mediului apos intern, majorarea activității enzimelor antioxidante, fotosintezei și productivității plantelor.

127 BACULOVIRUS BIOPESTICIDE IN PROTECTING Lepidoptera DIVERSITY IN THE REPUBLIC OF MOLDOVA

Stingaci Aurelia Institute of Genetics, Physiology and Plant Protection, Chisinau, Republic of Moldova e-mail: [email protected]

Baculoviruses only infect insects, are ubiquitous in the environment and are known to be important in the regulation of many insect populations. Baculoviruses are host specific, infecting only one or a few closely-related species, helping to make them good candidates for management of crop and forest insect pests with minimal off-target impacts In fact, baculoviruses have been recognized as being amongst the safest of pesticides (Black et al., 1997). Biopesticides are being used on increasing scales and there is considerable interest in their potential as alternatives to conventional pesticides. The agricultural biologicals market was valued at USD 6.75 billion in 2017 and is projected to grow at a CAGR of 13.80% from 2017 to reach USD 14.65 billion by 2023 (Hewson et al., 2011). In this review we discuss how baculoviruses, host range determination and pathogenesis have contributed to their inherent safety for non-target organisms. In the Republic of Moldova, there are several chemical insecticides available and authorized for the current regulation of H.cunea. Wan et al. (2014) reviewed control strategies in its native range of Japan and Asia and pointed out, that regulation in parks, green belts or nurseries relies mainly on chemical insecticides, such as pyrethroids. But due to the large-scale application of broad-spectrum insecticides, H.cunea has already developed some level of resistance in the Republic of Moldova. Furthermore, frequent applications of pyrethroids and neonicotinoids may cause severe negative effects on organisms that provide ecosystem services including pollination and natural pest control (EASAC 2015a). Our investigations were focused on biological control methods with the intention of an easy and quick practicability and the aim of making chemical treatments avoidable, since their use is problematic in both planted and natural occurring. Biological control methods are of great advantage for regulating harmful lepidopteran pests and seem to be appropriate and promising for the eco- friendly regulation of H.cunea. Advantages are the specific effects on targets and thus only slight impairment of non-target organisms; insignificant influence on ecosystems and no long-term effects on soil, water and air; little or no relevant residual traces occurring on plants as well as no waiting for bystander. In addition, biological control methods can close gaps in circumstances where chemical plant protection products may not be used. Furthermore, they might benefit the natural regulation of field populations by the preservation of natural enemies. In our researches show the difference between the parameters of biological activity of biological mass obtained on the different days from the infection with baculoviruses There are not noticed any substantial differences of biological activity in the case of viral suspension with the same concentration (109 pol /ml). Good results were registered at the analysis of lethal time necessary for obtaining a death rate of 50% of larvae (TL50). That parameter has minimal value the first 5 days from infection. In the terms of that aspect, biological mass obtained from dead larvae after these days is characterized by parameters specific to wild strains obtained from natural conditions, that aspect induces the difference of biological activity of biological mass obtained from dead larvae on different days of infection and denotes the possibility of application of that measure in the process of improving bacterium strains applied for elaboration of entomopatogenic insecticides. Other authors also have confirmed the results of the investigations.

128 CONTENT OF CHLORPYRIFOS IN LOCAL CROPS SAMPLED IN SOME DISTRICTS OF THE REPUBLIC OF MOLDOVA

Stratulat Tatiana1, Cadar Oana2, Popa Al.1, Gușan Ana1, Hoaghia Alexandra2 1-Institute of Genetics, Physiology and Plant Protection, Chisinau, Republic of Moldova 2- Research Institute for Analytical Instrumentation subsidiary ICIA, Romania e-mail: [email protected]

Chlorpyrifos is a chlorinated organophosphate insecticide. It is described as one of the most widely used insecticides in the world, on a wide range of crops and in numerous non-agricultural situations. Chlorpyrifos (ChP) has at least three main modes of action in mammals:  It inhibits the enzyme acetylcholinesterase (AChE) causing overstimulation of the nervous system.  It causes oxidative stress, a process involved in many human diseases, including cancer, Parkinson’s disease, Alzheimer’s disease, diabetes, and heart failure.  It also causes endocrine disruption. ChP is pervasive in the environment. Adults and children are widely exposed through occupational use, contact with treated surfaces, breathing air in treated buildings or near treated fields or orchards. It is a widespread contaminant of fruit and vegetables, but is also found in grains, beans, dairy products, meat, fish, tea, and soft drinks. It is even found in processed products such as bread, hamburgers, jam, meat pies, muesli, olive oil, pasta, pizza, sausages, and snack bars. Chlorpyrifos is one of the most widely used insecticides in the world. Republic of Moldova has 29 registered products containing chlorpyrifos. The aim of this study is to determine ChP contamination level in local most commonly consumed foods of plant origin. Sample preparation & analysis: a total of seventy-five samples of local most commonly consumed foods of plant origin (apples, grapes, potatoes, onion, carrot, lettuce, tomatoes, cucumbers, beets) were collected from markets, food deposits, farms and homesteads in the 8 villages for the study. Analytical method for the determination of residues of ChP in crops: GC/MS. Results: The basic structure of the food ration of a consumer from the Republic of Moldova consists of about 30-40 food products of plant origin. Scientific research has shown that vegetable products such as tomatoes, potatoes, peppers, green salad, strawberries, green beans, celery, grapes, pears, peaches and apples are at major risk of being contaminated with pesticide residues based on technologies of cultivation. The analytical results showed that ChP were detectable practically in all types of studied samples. Chlorpyrifos residues were determined in:- 57% of the onion samples; - 55 % of the carrot samples; - 42% of the apple samples; - 33% of the lettuce samples; - 10% of the potato samples. The apples contained the highest concentration of the ChP: 0.132 mg/kg (MRL= 0/05 mg/kg). The carrot contained 0.023-0.052 mg/kg (MRL=0.05 mg/kg); lettuce - 0.023 mg/kg (MRL= 1.0 mg/kg); onion - 0.022-0.029 mg/kg (MRL= 0.05 mg/kg); potato - 0,027 mg/kg (MRL= 0.05 mg/kg). However, samples of the grapes were free from residuals of ChP. Considering that, in these vegetables and fruits, residues of chlorpyrifos contained pesticides have been detected; it can be assumed that one of the main sources of penetration into the human body of organophosphorus pesticides is serving the products of plant origin which may present a high risk to human health. Acknowledgement. This study was funded by National Authority for Scientific Research under Grant PN 16.40.02.01 and Academy of Science of Moldova under Grant 19/Ro 2016.

129 EVALUAREA CONTINUTULUI METALELOR GRELE IN PRODUSE VEGETALE AUTOHTONE

Stratulat Tatiana1, Cadar Oana2, Popa Al.1, Gușan Ana1, Hoaghia Alexandra2 1-Institutul de Genetică, Fiziologie și Protecție a Plantelor , Chișinău, Republica Moldova 2- Institutul de Cercetări pentru Instrumentaţie Analitică (ICAI), România e-mail: [email protected]

Poluarea mediului înconjurător cu metale grele a atras atenţia, în special în ultima vreme, datorită problematicii deosebit de complexe datorate acestui fenomen. Metalele grele (MG) reprezintă un grup de elemente chimice cu o masă atomică relativă mai mare de 40. Cele mai frecvente și potenţial periculoase pentru sănătatea umană sunt 12 metale grele: cupru (Cu), cadmiu (Cd), mercur (Hg), staniu (Sn), plumb (Pb), stibiu (Sb), vanadiu (V), crom (Cr), molibden (Mo), mangan (Mn), cobalt (Co) şi nichel (Ni), care, ca şi elemente esenţiale, sunt vitale în menţinerea metabolismului corpului uman. În ciuda efectelor benefice a metalelor grele esenţiale (ca ex. Co, Cu, Zn, Fe, Mn, Mo) în cazul în care concentraţia lor depăşeşte limita fiziologică, ele devin toxice. Alte metale sunt toxice în orice concentraţie (As, Hg). Efectele nedorite ale prezenţei metalelor grele impun stricteţea monitorizării nivelurilor lor în alimente, în scopul aprecierii gradului de poluare, precum şi a riscurilor potenţiale pentru sănătatea umană. Scopul: Evaluarea nivelului de contaminare a produselor alimentare autohtone cu reziduuri de metale grele in raioanele pilot din Republica Moldova și România. Metode de cercetare: Uscarea probelor vegetale în etuvă; Mineralizarea probelor vegetale cu HNO3 (65%) şi H2O2 (20%) (Marinussen and Van der Zee, 1997); Determinarea metalelor grele prin metoda GF-AAS, ICP-OES, CV-AFS. Rezultate: În perioada mai 2017- august 2018 în raioanele pilot din Republica Moldova și din Romînia a fost prelevate 24 probe și 42 de probe, respectiv, ale produselor vegetale în starea proaspetă de la producătorii autohtoni pentru determinarea reziduurilor de MG. S-a stabilit următoarele nivelurile de continutul ale MG:

Fe Ni Cr Co Cu Zn Cd Pb Mn Hg Republica Moldova Media, 26,2 0,78 0,086 0,04 5,57 13,28 0,5 0,126 6,25 0 mg/kg culturile cele Ardei Ardei Sfeclă morcov Ardei Morcov, Ardei roşii sfeclă - mai dulce, dulce de dulce, castraveţi dulce, contaminate sfeclă masă cartof vinete de masa România Media, 18,71 0,003 0,13 0,0 5,50 14,76 0,0 0,0 n/d 0 mg/kg culturile cele cartof fasole ardei - ţelină ţelină - - - mai contaminate LMA, 50 0,5 0,2 n/a 5,0 10,0 0,03 0,5 n/a 0.02 mg/kg /0,1 /0,4

Concluzii: 1) Rezultatele obținute ne denotă că conținutul rezidual al Ni, Cu, Zn și Cd în produsele vegetale, colectate din raioanele pilot a Republicii Moldova au depășit limitele admise (LMA) stabilite. Aceasta ar putea rezulta din utilizarea excesivă a îngrășămintelor cu conținut de fosfor. 2) În raioanele pilot din România numai reziduurile de Cu și Zn au depășit LMA. Acknowledgement. Această lucrare a fost finanțată de Autoritatea Națională de Cercetare Științifică din Grant PN 16.40.02.01 și Academia de Științe a Moldovei în cadrul Grant 19 / Ro 2016.

130 ВОЗМОЖНОСТИ ПРИМЕНЕНИЯ Bacillus subtilis CNMN-BB-09 В ВОЗДЕЛЫВАНИИ ТОМАТОВ В ОТКРЫТОМ ГРУНТЕ

Шубина Виктория, Волощук Л., Бурцева Светлана Институт генетики, физиологии и защиты растений, Кишинэу, Республика Молдова e-mail: [email protected]

Биологические препараты для защиты растений от вредителей и болезней являются экологически безопасной альтернативой химическим пестицидам. Однако замещение химических пестицидов биопрепаратами происходит не столь быстро. Это связано с тем, что химические препараты имеют более скорую реакцию действия и широкий спектр влияния. С этой точки зрения следует искать подходы к усилению роли микробных агентов биоконтроля в защите растений. Резервом такого подхода является исследования по расширению функций микроорганизмов, составляющих основу потенциальных биопрепаратов. В этом отношении представляют интерес исследования по одновременному проявлению одним штаммом не только фунгицидных свойств, а также ростстимулирующих и их способность индуцировать устойчивость растений к действию повреждающих факторов. В настоящее время стали широко применять биопрепараты на основе живых клеток бактерий. Среди антагонистов фитопатогенов привлекают внимание представители Bacillus subtilis, благодаря их способности продуцировать различные биологически активные вещества, способные подавлять рост фитопатогенных грибов и бактерий. Включение биопрепаратов в системы защиты овощных культур открытого грунта позволяет снизить пестицидную нагрузку на агроценоз и получить более высокий урожай экологической продукции (Байделюк Е.С. 2015, Grosch R. Et al., 2005) и повысить фитосанитарное состояние почвы (Турусов В.И. и др., 2012, Турусов В.И. и др., 2016, Whipps J.M., 2001). Урожай томатов открытого грунта без полива за период 2016-2017 гг. в среднем составил: в контроле – 16,7 т/га, в варианте с применением химического препарата Cupromax - 20,9 т/га, с применением Bacillus subtilis CNMN-BB-09 с нормой расхода 5л/га - 31,9 т/га, с нормой расхода 10л/га – 27,9 т/га. В создавшихся условиях 2018 года применение биопрепарата на основе Bacillus subtilis CNMN-BB-09 показало хороший стабильный защитный эффект на протяжении всего вегетационного периода. При сборе урожая был проведен учет по состоянию спелых плодов томата. Так в контроле здоровых спелых плодов было 32,2%, в варианте с применением химического препарата Cupromax 83,3%, с применением Bacillus subtilis CNMN-BB-09 с нормой расхода 5л/га – 80,3%, с нормой расхода 10л/га – 88,1%. Биологическая эффективность биопрепарата на основе Bacillus subtilis CNMN- BB-09 в фазе массового созревания плодов (учет 3.09) в контроле составила 72,7%, в варианте с применением химического препарата – 79,0%, в вариантах с применением Bacillus subtilis CNMN-BB-09 с нормой расхода 5л/га – 72,7%, с нормой расхода 10л/га – 70,5%. В мелкоделяночном опыте перед посевом также проводилась бактеризация семян. Опыт проводился в естественных условиях без полива и внесения удобрений. В варианте, где семена обрабатывались суспензией исследуемого штамма Bacillus subtilis CNMN-BB-09 с нормой расхода 5л/га, всхожесть повысилась в 2 раза, при использовании суспензии Bacillus subtilis CNMN-BB-09 с нормой расхода 2л/га всхожесть была выше на 66.6%, а при обработке семян суспензией продуцента фитоспорина на 64.7%, относительно контроля. Даже кратковременное воздействие на семена запускает биохимические процессы, которые протекающие в фазу прорастания семян, связаны цепной реакцией с последующим ходом обмена веществ в развивающихся растениях. Таким образом, применения микроорганизмов, которые обладают как защитным эффектом, так и стимуляторным действием является одним из перспективных направлений в растениеводстве.

131 ОСОБЕННОСТИ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ МЕТИЛСАЛИЦИЛАТА В АГРОЦЕНОЗАХ ПЕРСИКОВОГО И СЛИВОВОГО САДОВ

Суменкова В., Батко М., Елисеев С. Институт генетики, физиологии и защиты растений, Кишинэу, Республика Молдова e-mail: [email protected]

Семиохемики, привлекающие насекомых-энтомофагов в агроценоз, широко исследуются с целью использования их в программах сохраняющего биологического контроля. Синтетические аналоги семиохемиков рассматриваются сейчас как инструмент заманивания в агроценозы и удержания там полезных членистоногих, способных сдерживать рост численности вредителей. Наиболее интенсивно и успешно в этих целях исследуется метилсалицилат (MeSA). Показан его высокий потенциал в привлечении полезных насекомых в различных агроценозах. С накоплением экспериментальных данных стало ясно, что в разных агроэкосистемах реакция насекомых на действие семиохемика варьирует и зависит от многих факторов. Вид и сорт возделываемой культуры, ее возраст, стадии вегетации, видовой состав вредителей и сорняков, влияют на аттрактивность MeСА для насекомых-энтомофагов Целью настоящей работы является оценка эффективности использования MeSA для привлечения энтомофагов в агроценозы косточковых культур персика и сливы. Работу проводили в персиковых и сливовых садах хозяйства ООО "Агробрио" (окрестности г. Кишинева). MeSA вносили в агроценоз, используя диспенсер, изготовленный на базе пробирки Эппедорфа. Оценку эффективности семиохемика проводили путем мониторинга энтомофауны с помощью желтых клеевых ловушек. В исследуемых агроценозах нами не было обнаружено привлечения MeSA вредителей персика и сливы Grapholita funebrana Treit, Grapholita molesta Busck, Anarsia lineatella Zeller., а также Hoplocampa minuta Christ., H. flava L и Eurytoma schreineri Schr. MeSA более эффективен в агроценозе персикового сада, где возможно получить приемлемый урожай без использования инсектицидов. Здесь семиохемик привлекает полезных насекомых в 2,0 раза, а паразитических микро-Hymenoptera в 2,6 раза больше, чем в контроле. Эффективность применения MeSA на этой культуре повышалась, если дополнительно обрабатывать деревья белково-углеводной смесью. Чередование этих двух приемов обеспечило значительное (в среднем в 3,1 раза) увеличение численности энтомофагов на опытном участке, что сказалось на уменьшении поврежденности побегов восточной плодожоркой в 4.5 раза весной и в 1.3 раза в конце сезона, а фруктовой полосатой молью - в 2.4 раза в течение всего вегетационного периода. На сливе увеличение количества полезных насекомым под действием MeSA не превышало 1,4 раза, микро-Hymenoptera – 1,5 раза. Сливу повреждают больше вредителей, чем персик. Особенно опасен комплекс ранневесенних вредителей, таких как черный и желтый пилильщики, а также толстоножка и тля. Борьба с ними увеличивает пестицидную нагрузку на агроэкосистему сливовых садов в начале сезона и приводит к последующему снижению численности энтомофагов, способных сдерживать вредителей. На этом фоне использование семиохемика способствовало привлечению в сад паразитоидов яиц, личинок и куколок основных вредителей сливы в 1,5-1.8 раза больше, чем в контроле. Это позволило снизить в опыте количество плодов сливы, поврежденных первым поколением плодожорок с 31 до 20%. Следует отметить, что на сливе нам пришлось отказаться от использования совместно с семиохемиком дополнительного питания для энтомофагов в виде опрыскиваний деревьев белково-углеводной смесью, так как это стимулировало развитие клястероспориоза. На персике такого влияния дополнительного белково-углеводного питания на клястероспориоз мы не наблюдали.

132 ВЛИЯНИЕ ПРИРОДНЫХ БИОРЕГУЛЯТОРОВ НА ФОТОСИНТЕТИЧЕСКУЮ ДЕЯТЕЛЬНОСТЬ РАСТЕНИЙ ГРУШИ

Титова Нина, Бужоряну Н., Шишкану Г., Скурту Г. Институт генетики, физиологии и защиты растений, Кишинев, Республика Молдова e-mail: [email protected]

Известно, что применение природных и синтетических регуляторов роста в определенные периоды онтогенеза растений может обеспечить оптимальную реализацию взаимоотношений роста, фотосинтеза, дыхания и получение максимальной продуктивности. Связь таких важнейших фотосинтетических показателей как содержание хлорофилла, хлорофилльный индекс и фотосинтетический потенциал с интенсивностью газообмена СО2, дыханием, транспирацией и продукционным процессом больше изучена на однолетних растениях. Что касается плодовых культур, имеется информация в отношении черешни, яблони, абрикоса и персика, отзывчивых на экзогенное воздействие биологически активных соединений, проявивших себя как стимуляторы процессов фотосинтеза, метаболизма и урожая. Научные данные в таком направлении с растениями груши практически отсутствуют. Такие исследования с целью поиска нанотехнических приёмов регуляции основополагающих процессов жизнедеятельности растений (роста, фотосинтеза и дыхания) как основы получения урожая высокого качества у разных сортов груши представляют интерес в теоретическом и практическом плане. В течение 2015-2018 г.г. исследовали физиолого-биохимические особенности разных сортов груши в промышленном саду (4-6 летние деревья груши сорта Выставочная осеннего срока созревания плодов и Ноябрьская позднего срока созревания) и в контролируемых условиях лизиметров Института (трехлетние растения поздних сортов груши Ноябрьская и Сокровище). Изучали влияние натурального биологически активного соединения стероидного типа Вербаскозид, а также природного биопрепарата Реглалг, выделенного из биомассы водоросли рода Spirogira, и смеси Реглалга с комплексом микроэлементов (B, Zn, Mn și Mo) на фотосинтетическую активность груши. Была установлена оптимальная концентрация БАВ для повышения фотосинтеза и метаболизма исследуемых растений. Исследования показали высокую отзывчивость растений груши на обработку изучае- мыми препаратами и микроэлементами, стимулирование ими метаболизма, роста, накопления пигментов, фотосинтеза, транспирации, дыхания. Выявлена сезонная синхронность и тесная корелляционная связь этих процессов с хлорофилльным индексом, хлорофилльным потенциалом и чистой продуктивностью фотосинтеза, что обеспечивает единый ритм роста, развития растений и их продуктивность. Показана тесная связь реализации фотосинте- тической функции с эпигенетическими процессами развития, сменой донорной и акцепторной функций листа. В период интенсивных ростовых процессов в растениях, роста побегов и развертывания листовой поверхности, когда листовой аппарат становится особенно активным донором для растущих плодов, наиболее четко проявилось стимулирующее действие использованных биологически активных препаратов. Выявлены объективные критерии оценки фотосинтетической деятельности растений груши: формирование оптимального фотосинтетического потенциала и структуры листа, фотосинтетическая активность и транспирация, интенсивность дыхания, хлорофилльные индекс и фотосинтетический потенциал, чистая продуктивность фотосинтеза в наиболее ответственные периоды вегетационного сезона. Эти результаты имеют большое значение для оценки состояния насаждения, выяснения путей оптимизации продукционных процессов растения и прогнозирования урожайности. Анализ литературных и полученных нами данных показывает, что применение природных регуляторов необходимо с учетом особенностей роста и развития конкретных видов и сортов плодовых растений.

133 AUTOSTERILIZAREA MASCULILOR DĂUNĂTORILOR PIERSICULUI Grapholitha molest BUSK ȘI Anarsia liniatella ZELLER

Voineac V., Șleahtic Vl. Institutul de Genetică, Fiziologie şi Protecţie a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail: [email protected]

Sterilitatea, ca metodă de combatere a dăunătorilor, a fost propusă în 1953 de Knipling. Metoda se bazează pe lansarea de masculi sterili şi constă în creşterea şi lansarea acestor masculi sterili din punct de vedere sexual. Cu apariția feromonilor sexuali ai insectelor a fost elaborată metoda de autosterilizare care constă în atragerea masculilor în capcană tratastă cu sterilizator unde masculul acumulează sterilizatorii și în momentul coapulării transmite femelei ce aduce la blocarea dezvoltării embrioanelor și in rezultat femele depun ouă sterile. Exsperimentele, privind estimarea eficacității metodei de autosterilzare a masculilor Grapholitha molesta Busck și Anarsia liniatella Zeller au fost montate în livezi de piersic, „G.Ț” Ilie Sîle, Nicolae Borș și Ion Schinu s.Băcoi rn. Ialoveni, zona de centru a Moldovei, cu soiuri Colins, Retheivin, Moldovenesc pecoce, plantate în anul 2013, după schema 4x3 m. În aceste livezi ambele specii dăunătoare au fost prezente. Livada „GȚ Ilie Sile” de 1 ha a fost inpărțită în două variante: V1 -20 capcane/ha; V2-10 cap./ha. Ca varianta martor în acest experiment a servit parcela de 0,25 ari din livada „GȚ Nicolae Borș”, iar varianta etalon chimic 1ha din livada „GȚ.Ion Schinu”. Înainte de amplasarea capcanele feromonale se tratau cu sterilizator biorațional Admiral 10 E, apoi se tratau în câmp permanent cu interval de 10 zile pe parcursul perioadei de dezvoltare a populațielor. Autosterilizarea masculilor s-a efectuat pe fonul aplicării fungicidelor omologate contra boliliilor. Adăugător, la fiecare varianta a fost instalate cite 3 capcane feromonale lepicioase pentru estimarea comparativă a densității populațielor pe variante, pe parcursul dezvoltării populațiilor. In a doua livadă „GȚ Nicolae Borș” de 1ha, s-au instalat capcanele feromonale 10 buc./ha pentru capturarea în masă a masculilor ale ambelor specii. În livada „ GȚ. Ion Schinu” de 4 ha, pe un hectar a fost amplasată varianta etalon chimic, unde s-au efectuat tratamente cu fungicide și insectecide omologate. Estimarea stării fitosanitare în prima jumate a anului s-a efectuat permanent, odată în 5 zile, în toate variantele planificate pe parcursul perioadei de dezvoltare a populațielor. Evidența capturilor în capcanele de control, în toate livezile, a demonstrat, că primii masculi ai Grapholita molesta au fost capturați pe data de 02.05.2019, zborul masculilor în masă a inceput peste 7 zile și a durat pînă pe data de 20.05.2019, în acest răstimp numărul masulilor capturați a atins cifra de 34 indivizi, care semneficativ a depășit PED (5-7-masculi/capcana/5 zile), apoi a urmat o perioadă, pînă la 30 .05.2019, când erau capturați doar câte un mascul. Zborul masculilor Anarsia liniatella s-a început pe data de 06.05.2019 și a durat pînă pe data de 08.06.2019, perioadă în care numărul masculilor a crescut de la 3 ind./cap până la 42 indivizi. S-a constatat, că densitate de populații la ambele specii de dăunători este mai mare, la pomii marginali, mai ales din partea fășiei forestiere. Aceasta s-a constatat și prin numărul de masculii capturați și prin numărul de lăstari atacați (6-11 lâstari /pom față de 1-3 lăstari/ pom în centrul plantației). Experiențele efectuate în livada „GȚ Ilie Sile” în două variante: V1 -20 capcane/ha au fost atacate numai 2- 3 fructe, iar V2-10 cap./ha 2-5 fructe. In livezile cu variantele -capturarea in masă și etalon termenii de apariție și de dezvoltare a ambelor specii și de atacuri au fos practic identice: lăstari 3- 5 /pom , 2-3 fucte. În livada cu varianta etalon chimic 2-6 lăstariși 2-3 fructe. Rezultă, că pentru combaterea dăunătorilor culturii de piersic, prin metoda de autosterilizare, este rațional de a utiliza doar 10 capcane cu feromoni și sterilizant la un hectar de livadă.

134 EFICACITATEA INSECTICIDULUI FORCE 1,5 G ÎN COMBATEREA LARVELOR VIERMELUI VESTIC Diabrotica virgifera le Conte AL RĂDĂCINELOR DE PORUMB

Voineac V., Elisovețcaia Dina, Cristman Diana, Voineac I. Institutul de Genetică, Fiziologie şi Protecţie a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail: [email protected]

Porumbul este o cultură importantă pentru industria alimentară şi furajeră a Republicii Moldova, anual semănăturile de porumb ocupă suprafețe de circa 400...600 mii de hectare. Obţinerea roadei bogate şi calitative depinde de menținerea situației fitosanitare a câmpurilor și controlul densității dănătorilor la nivelul PED. Cei mai periculoşi dăunatorii din sol sunt sârmarii şi pseudosârmarii precum și compexul de buhe, care pot reduce numărul plantulelor la 80-90%. În prezent situația se agravează în legătura cu pătrunderea pe teritoriul Republicii Moldova a dăunătorului invaziv de carantină - Diabrotica virgifera Le Conte. Acest dăunător este originar din America, unde începînd cu anii 40, într-o perioadă scurtă, s-a răspăndit pe aria a 24 de state ale SUA şi aduce pagube anuale de circa un miliard de dolari. Nimerind în condiţiile climaterice favorabile ale Europei în anul 1992, Diabrotica virgifera Le Conte până în anul 2012 s-a răspândit, practic, peste toate semănăturile porumbului din țările Evropene, inlusiv Ucrainei și Belarusiei. Primul focar de Diabrotica virgifera Le Conte,pe teritoriul Republicii Moldova, a fost depistat de către cercetătorii IGFPP în zona de Nord, pe data de 07.08.2013 pe semănăturile de porumb ale colegiului din c.Bratușei raionul Edineț. Apoi pe data de 8-9 august 2013, împreună cu specialiștii ANSA au fost depistate focare și în localitățile din raioanele Briceni și Rîșcani. Răspândirea acestui dăunător pe teritoriul Republicii Moldova are loc foarte răpede, deja în anul 2018 au fost depistate focare noi și în zona de Centru pe semănăturile de porumb ale Institului de Porumb r. Orhei” și loturile experimentale ale Institutul de Genetica, Fiziologia și Protecția Plantelor al MECC. În Registrul de Stat a produselor de uz fitosanitar al Moldovei, până anul 2016, nu a fost omologat nici un produs pentru exterminarea larvelor și adulților dăunătoruilui Diabrotica virgifera Le Conte. Din aceste considerente, în afară de monitorizarea răspăndirii dăunătorului, în anul 2016, a fost efectuată și testarea preparatului Force 1,5G (teflutrin,15g/kg) al firmei „Syngenta Crop Protection AG”, Elveţia, în forma granulată, menit pentru combaterea larvelor dăunătorilor din sol: - sârmarii și pseudosârmarii (Elateridae, Tenebroide) și viermelui vestic al rădăcinelor de porumb Diabrotica virgifera Le Conte. (Chrysomelidae). Preparatul Force 1,5G - este un insecticid pentru aplicare la controlul rezidual al principalilor daunatori de sol în agricultura. Prin acțiunea unica de vaporizare, Force 1,5G patrunde în sol și străpunge cuticula insectei, distrugand legaturile nervoase, cauzand încetarea hrănii și implicit moartea acestea. Acțiunea preparatului este de lungă durată -circa 35-45 de zile. Teflutrinul nu actioneaza sistemic în plante și nu este mobil în sol. Produsul se aplica odata cu semanatul seminţelor, cu microgranulatoare destinate acestui tip special de aplicare. Preparatul Force 1,5 G nu se folosește în mod repetat, ori ca unica metoda de combatere. Este recomandat sa se foloseasca în alternanta cu produse, care au moduri de actiune diferite. Produsul a fost testat la cultura de porumb în combaterea dăunătoriilor din sol: Elateridae, Tenebroide, Chrysomelidae”, pe câmpul de porumb hibrid Moldovenesc 455 pe o suprafață de 40 ha ai SRL„Vardan Agro” s. Sturzeni raionul Rîşcani. Fiecare variantă în 4 repetări (varianta-3 rânduri de 200 m lungime -aproximativ 0,25 ari). Tesările preparatului Force 1.5 G (teflutrin,15 g/kg) sa efectuat conform Îndrumărilor metodice ale Centrului de Stat pentru Atestarea Produselor Chimice şi Biologice şi recomandărilor firmei” Syngenta. În rezultatul testărilor, preparatul Force 1.5 G în dozele examinate nu provoacă acţiuni negative vizibile la plantele de porumb.

135 INDISPENSABIL AL PROTECŢIEI INTEGRATE A PLANTELOR

Voloșciuc L. Institutul de Genetică, Fiziologie și Protecţie a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail: [email protected]

Managementul integrat al dăunătorilor înregistrează ritmuri considerabile prin extinderea gamei de mijloace biologice propuse ca urmare a necesităţii soluționării problemelor complexe determinate de agravarea presiunii fitosanitare asupra segmentului agricol de producție și a mediului înconjurător. Optimizarea condițiilor de implementare a controlului populaţiilor insectelor dăunătoare și sporirea eficacității protecției biologice în sistemele de agricultură convențională și ecologică, necesită:  determinarea corectă a stării fitosanitare cu stabilirea pragului economic de dăunare și identificarea organismelor utile în vederea aplicării metodelor biologice de control al dăunătorilor;  obţinerea şi extinderea gamei de preparate microbiologice entomopatogene noi și determinarea rolului și locului lor în agricultura convențională și ecologică;  elaborarea procedeelor tehnologice de producere și aplicare a mijloacelor biologice de combatere a insectelor și acarienilor fitofagi şi corelarea momentelor de lansare a lor cu densitatea şi particularitățile biologice ale dăunătorilor. Determinarea particularităților microorganismelor și relațiilor acestora cu dăunătorii agricoli constituie fundamentul elaborării unor mijloace eficiente, îndeosebi a preparatelor entomopatogene în combaterea insectelor dăunătoare a principalelor grupe de culturi agricole. Aceasta poate fi realizat prin aplicarea mijloacelor elaborate de noi și centrele internaționale de profil. Bacteriile entomopatogene și Васillus thuringiensis. Actualmente au fost identificate 84 de serovariante de В.thuringiensis în baza cărora au fost elaborate și se utilizează mai multe biopreparate: entobacterin, dendrobacilin, bitoxibacilin, gomelin, insectin, BIP, turingin, bactoculicid, lepidocid, baxin, sonit, bactospein, dipel, biotrol, tecnar, bactimos, vectobac, moschitur, bactospein, insectin, alestin. Utilizarea preparatelor micotice în combaterea biologică a insectelor a devenit realitate chiar de la fazele inițiale de cercetare a posibilităților de combatere microbiologică a organismelor dăunătoare. Preparatul Boverin, obținut din Beauveria bassiana (Bals), este aplicat cu succes în regiunile cu umiditate sporită pentru combaterea coleopterelor dăunătoare. Preparatele obținute din ciuperca Aschersonia se aplică pentru combaterea musculiței-albe-de-seră. Baculovirusurile, ca agenți patogeni ai insectelor dăunătoare, grație particularităților biologice deosebite determinate de transmiterea transovarială și orizontală, precum și de gradul înalt de specificitate, au stat la baza investigațiilor profunde de la nivelul populaţiilor naturale la elaborarea și implementarea preparatelor omologate. Printre preparatele virale eficiente sunt recunoscute: VIRIN-ABB-3 – pentru combaterea H.cunea; VIRIN-KS – împotriva Mamestra brassicae; VIRIN- OS – Buhei-semănăturilor; VIRIN-HS-2 – Buhei fructificațiilor; VIRIN-CP – Viermelui-merelor. Actualmente se produce o serie impunătoare de preparate virale: Elcar, Djipchec, Polivirocid, Viron- H, Biotrol-VHZ, Biocontrol, Вирин-ЭНШ, Вирин-КШ, Вирин-ЭКС, Вирин-ГЯП, Вирин- Диприон, Вирин-НШ, Virusin-МВ, Mațukemin, Carpovirusin. Nematozii entomopatogeni au devenit cei mai investigați agenți ai protecției biologice. Acțiunea lor se bazează pe 2 sușe (Cp4 și Pi10) de arhebacterii aflate în relații simbiotice cu nematozii entomopatogeni, care pe parcursul activității vitale elimină o gamă largă de substanțe biologic active cu acțiune letală asupra diferitor insecte dăunătoare, inclusiv a celor care nu pot fi combătute cu ajutorul altor agenți de protecție biologică. Actualmente au fost omologate preparatele biologice: Biovector – bazat pe acțiune sinergică a nematozilor entomopatogeni Steinernema carpocapsae și Heterorhabdites heliothides; Nemabact constituit în baza Steinernema carpocapsae, sau Entonem-F – la producerea căruia se utilizează S. feltiae.

136 PRODUSE BACULOVIRALE ÎN COMBATEREA DĂUNĂTORILOR ÎN LEGUMICULTURĂ

Zavtoni P., Voloșciuc L., Pînzaru B. Institutul de Genetică, Fiziologie și Protecție a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail:[email protected]

Agricultura ecologică – se bazează exclusiv pe folosirea materialelor organice sau biologice degradabile, care asigură echilibrul ecologic al sistemului agricol. Agricultura ecologică – reduce la maxim folosirea de produse chimice poluante, nu foloseşte plantele modificate genetic şi astfel se asigură menţinerea unei biodiversităţi cu productivitate biologică ridicată. Folosirea pe scară largă a pesticidelor in agricultură pe lângă aspectele pozitive a evidențiat și o serie de cazuri negative, cele mai importante fiind producerea de perturbări din biocenoză, prin distrugerea în masă a insectelor entomofage, apariția de forme rezistente la pesticide și tratamente duble la prelucrarea culturilor, la poluarea mediului și acumularea unor pesticide în produsele alimentare și în final pesticidele utilizate în agricultură duc la degradarea solului. Virusurile entomopatogene, mai ales din familia Baculoviridae, exclusive la nevertebrate, în special la insecte, se pot folosi cu success la obţinerea preparatelor virale care provoacă epizootii natural contribuind la reglarea densităţii populaţiilor acestora. Printre metodele microbiologice de protecţie a plantelor, care se folosesc în combaterea organismelor dăunătoare, un loc deosebit revine preparatelor baculovirale. Avantajele serioase ale agriculturii ecologice şi luând în consideraţie accentele strategiei generale a politicii agrare, e important ca una din căile primordiale a dezvoltării Republicii Moldova să devină obţinerea şi procesarea produselor ecologice. Testarea insecticidului Virin-HS-P, s-a efectuat la Institutul de Genetică, Fiziologie și Protecția Plantelor la tomate Soiul- „RioGrand”, coacere mijlocie, conform recomendaţiei Centrului de Stat pentru Atestarea şi Omologarea Produselor de uz Fitosanitar şi a Fertilizanţilor «Îndrumări metodice pentru testarea produselor chimice şi biologice de protecţie a plantelor de dăunători, boli şi buruiene în Republica Moldova. Chişinău: F.E.P. Tipografia Centrală. 2002. Schema experienţei, variantele şi repetiţiile: Cultivarea prin seminţe, Soiul- „RioGrand”. Schema de plantare – 0,3 х 0,7m. Distanţa între variante-1,0 m.Variante – 3: Varianta chimică – Actara 25WG – 0,06kg/ha ; Varianta biologică – Virin-HS-P - 0,15 kg/ha ; Varianta Martor – fără tratament. Experienţa a fost efectuată în 4 repetiţii a câte 50m2, rendomizat. Eficacitatea prelucrării o efectuam după criteriu, 100 plante analizate pe diagonală în fiecare variantă. În perioada de vegetaţie s-au efectuat două prelucrări. Eficacitatea biologică a preparatului Virin-HS-P în diminuarea buhei fructificaţiilor, generația II la prima prelucrare a fost de 75,4%, faţă de varianta etalonului chimic Actara 25WG, care a avut o eficacitate biologică de 80,8%. Dar la prelucrarea a doua, eficacitatea biologică a preparatului Virin-HS-P în diminuarea buhei fructificaţiilor, generația.II a indicat 78,1%, faţă de varianta etalonului chimic Actara25WG, care are o eficacitate biologică de 82,7%. Temperaturile înalte influenţază rapid la dezvoltarea H. armigera în legumicultură. Numărul de tomate atacate după tratare, soiul „RioGrand” în varianta chimică Actara 25WG a constituit 7,0%, iar gradul de atac în varianta biologică Virin-HS-P a constituit 11,%. Din datele obţinute putem face următoarele concluzii:Testarea preparatului Virin-HS-P în controlul dezvoltării buhei fructificaţiilor, generaţia II, la tomate, soiul „RioGrand”, a avut o eficacitate biologică esenţială, faţă de etalonul chimic Actara. Pentru combaterea dăunătorului Helicoverpa armigera este necesar de efectuat două prelucrări cu interval de 10-15 zile. A fost recomandat Comisiei de Stat pentru Aprobarea Preparatelor Fitosanitare și înregistrat sub numărul 08-1-0363 în Registru de Stat pentru Atestarea şi Omologarea Produselor de uz Fitosanitar şi a Fertilizanţilor insecticidul Virin-HS-P cu norma de consum 0,15kg/ha în controlul dezvoltării buhei fructificaţiilor ( Helicoverpa armigera) la tomate.

137 Sectiunea IV

ГЕНЕТИЧЕСКИЕ РЕСУРСЫ ЗЕЛЕННЫХ КУЛЬТУР ДЛЯ ВЕРТИКАЛЬНОГО ОВОЩЕВОДСТВА

Балашова Ирина Т. 1, Харченко В. А. 1, Шевченко Ю.П. 1, Сирота С. М. 1, Боровская Алла Д.2 1Федеральное Государственное Бюджетное Научное Учреждение «Федеральный научный центр овощеводства», Московская область, Россия 2Институт генетики, физиологии и защиты растений, Кишинэу, Республикa Молдова e-mail: [email protected]

Вертикальное овощеводство – это передовое направление современного овощеводства защищённого грунта, позволяющее экономить энергетические и водные ресурсы за счёт использования вертикального пространства теплиц. Урожай зеленных культур на вертикальной гидропонике в 530 раз выше, чем в открытом грунте. Рынок вертикального овощеводства в мире растёт в геометрической прогрессии, и к 2025 году ожидается увеличение его объёмов до 6,0-9,0 млрд. долларов (1,2). Программа по вертикальному овощеводству в Российской Федерации стартовала в Федеральном научном центре овощеводства в 2011 году. К 2015 году разработана технология целевой селекции, и впервые в мире созданы новые сорта томата для вертикального овощеводства Наташа и Тимоша, переданные в производство. Продолжение исследований связано с необходимостью получения новых сортов зеленных культур для вертикального овощеводства. Проведены испытания генетических ресурсов зеленных культур ФГБНУ ФНЦО на многоярусной узкостеллажной гидропонике. Объекты исследований - растения семейства Apiaceae:  кориандр посевной Coriandrum sativum L., селекционный образец №21, зелень которого богата витаминами: С-140 мг%, Р-145 мг%, А-10 мг%, В1, В2, Р; макроэлементами – К, Са, Мg, Fe и микроэлементами Mn, Cu, Fn, Cr, Al, Ba, Ni, Sr, Pb, B, накапливает Se;  укроп пахучий Anethum graveolens L., сорт Русич, в листьях которого содержится 24,5 % сухого вещества и 65,1 мг% аскорбиновой кислоты, ароматичность сильная;  сельдерей листовой Apium graveolens L., сорт Эликсир, характеризуется высокой урожайностью с высоким выходом товарной зелени, вертикальным расположением листьев в розетке. Растения семейства Apiaceae содержат много летучих соединений. Этим, отчасти, объясняется пониженная всхожесть их семян. Учитывая предыдущий положительный опыт, семена генетических ресурсов семейства Apiaceae обработали 0,001%-ными водными растворами вторичных метаболитов растений – стероидных гликозидов (СГ) линарозида и молдстима. Статистический анализ экспериментальных данных выявил неоднозначную реакцию сельдерейных растений на обработку СГ: кориандр практически не реагировал на обработку – всхожесть его не повышалась, а урожай зелени снижался. Укроп и сельдерей реагировали на обработку существенным повышением всхожести семян (на 44 и 26%, соответственно), а у сельдерея наблюдалось существенное повышение урожая зелени при срезке (на 20%). Негативную реакцию кориандра на обработку можно объяснить наличием у него эндогенного «запаса» соединений флавоноидной природы, которых достаточно для реализации потенциала биологической активности, и которые могут «препятствовать» внедрению экзогенных аналогов. 1. Global Industry Report, 2014-2025, April, 2017, Report ID: IVR 1-68038-797-1. 2. http://www.grandviewresearch.com/industry-analysis/vertical-farming-market.

138 PARFUM PERFECT SOI NOU DE Salvia sclarea L. CREAT ÎN REPUBLICA MOLDOVA

Balmuş Zinaida Institutul de Genetică, Fiziologie şi Protecţie a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail: [email protected]

Salvia sclarea L.(șerlai) este o specie cu o valoare economică deosebită, determinată de uleiul esențial care are multiple utilizări în parfumerie, cosmetică, aromaterapie, alimentaţie etc. Cultivarea şi procesarea plantelor aromatice şi medicinale pentru menţinerea şi fortificarea sănătăţii sunt în continuă dezvoltare, extindere în ţara noastră. Genetica și ameliorarea, crearea de soiuri și hibrizi noi este un proces continuu. Fiecare soi nou omologat, brevetat este mai performant decât cele precedente. Soiurile de provenienţă hibridă create sunt rezultatul multiplelor cercetări pe parcursul a câtorva generaţii de hibrizi, care au servit ca bază în elaborarea soiurilor. Schimbările climatice impun crearea soiurilor care ar suporta seceta. Condițiile pedoclimatice, parametrii de temperatură a aerului și cantitatea depunerilor atmosferice înregistrate în perioada de cercetare (2014–2018) au fost variate. Instabilitatea condiţiilor climatice a permis evaluarea obiectivă și multilaterală a soiului nou. Experiențele au fost montate conform metodicilor validate la șerlai. Evaluarea s-a realizat în baza caracterelor care influențează direct productivitatea. Soiul nou a fost evaluat conform cerinţelor CSTSP şi UPOV. Soiul timpuriu, Parfum Perfect, (S–3xM– 69)F2xS–1122 4S3)F11, reprezintă un hibrid triplu F11, forma maternă a căruia a fost selectată în generaţia F2 a hibridului (S–3xM–69)F2, ca forma paternă a fost linia consangvinizată (S–11224S3) derivată de la soiul Crâmskii rannii. Rezultatele cercetărilor demonstrează, că anii secetoși sunt favorabili culturii șerlaiului prin acumularea și sinteza uleiului esențial. Rezistența sporită la ger și iernare a soiului Parfum Perfect, evaluată în Culturi Comparative de Concurs se exprimă prin numărul de tulpini florale la unitate de suprafaţă în limitele 46,3–53,1 în anul al doilea de vegetaţie. Soiul înflorește şi realizează producţie de materie primă şi ulei esenţial din primul an de vegetaţie. Studiind indicii caracterelor cantitative în anul I– îi de vegetaţie s-a constat, că plantele sunt bine dezvoltate, cu talia de peste 125,0 cm şi au format inflorescenţe lungi de la 52,7 cm până la 70,0 cm. Inflorescenţele sunt compacte cu (14.,4–16,1) ramificaţii de gradul întâi şi (20,1– 25,9) ramificaţii de gradul al doilea. Soiul timpuriu, Parfum Perfect în anul întâi de vegetație sintezează și acumulează în medie pe sezon 0,935–1,271% ulei esențial, depășind standardul. În anul 2014, soiul Parfum Perfect a înregistrat cel mai mare conţinut de ulei esenţial (1,271%). Testat în culturi comparative de concurs, soiul nou asigură producţie de materie primă în limitele 2,1–7,8 t/ha și 5,9–26,5kg/ha de ulei esenţial. În a.2015, în condiţii de secetă plantele au avut inflorescențe lungi, compacte, rata cestora în masa tulpinii florale fiind de peste 45%, conţinut ridicat de ulei esenţial – 1,049% (s.u.). Randamentul soiului Parfum Perfect, în anul I–îi de vegetaţie (2015), exprimat în producţia de ulei este de 5,9kg/ha. Determinând valoarea indicilor caracterelor cantitative la soiul Parfum Perfect, în anul al doilea de vegetaţie putem conclude, că caracterele cantitative au indici destul de buni. Plantele sunt bine dezvoltate, cu talia de peste 120.9–143.2 cm, cu inflorescenţe lungi, compacte. Raportul dintre talia plantei şi lungimea inflorescenţei fiind foarte avantajos pentru obţinerea unei producţii mari de inflorescenţe. În anul al II–lea de vegetaţie, la caracterul de bază conţinutul în ulei esenţial a fost 1,211% (s.u.). În doi ani de exploatare a plantaţiei (2014–2015) soiul Parfum Perfect a asigurat cea mai înaltă producţie de inflorescențe – 22,4t/ha şi de ulei esențial – 73,1kg/ha. Soiul Parfum Perfect, în a.2016, a asigurat obţinerea unei producţii de materie primă de 8,7t/ha şi de ulei esenţial 31,7kg/ha. Productivitatea soiului în 2 ani de exploatare a plantaţiei (2017– 2018) a fost de 20,0 t/ha materie primă cu conţinut ridicat (1,132%) de ulei esenţial, asigurând obținerea de pe fiecare hectar câte 66,4 kg/ha ulei esenţial. Randamentul soiului constituie 3,3–3,4kg ulei esenţial din o tonă inflorescenţe proaspete.

139 EVALUAREA CARACTERELOR PRODUCTIVE LA SOIURI DE TRANDAFIR AROMATIC (Rosa damascena x Rosa gallica)

Botnarenco P. Institutul de Genetică, Fiziologie și Protecție a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail: [email protected]

Plantele medicinale şi aromatice constituie sursa de bază de materie primă vegetală şi de principii active. Ele se utilizează în diferite ramuri ale economiei: industria farmaceutică, alimentară, parfumerie şi cosmetică. Petalele de trandafir au o acțiune antipiretică, antiinflamatoare, antiseptică și astringentă. Ele se utilizează la tratarea diareii cronice, gripei. De asemenea, apa de trandafir și petalele se folosesc în industria alimentară, la prepararea băuturilor răcoritoare și a dulcețurilor. Uleiul de trandafir se utilizează, în parfumerie; în producerea articolelor cosmetice; la fabricarea medicamentelor; aromatizarea vinurilor, produselor de cofetărie, etc. Trandafirul a fost introdus în țara noastră în 1940. Cultivarea pe scară industrială a început în 1948. Actualmente, în republică sunt cultivate soiurile de trandafir Ucraina, Lani și Raduga, selectate în Crimeea, precum și soiul autohton Roșu Moldovenesc. Soiul Ucraina este cel mai productiv, dar cu rezistență scăzută la atacul ruginii (Phragmidium disciflorum), care se manifestă în perioadele cu umiditatea relativă ridicată a aerului. Astfel, producția de materie primă (flori), la acest soi scade semnificativ. Anume în aceste condiții se evidențiază soiurile Lani și Raduga. La rândul său soiul Raduga este foarte sensibil la secetă, deci după un an secetos urmează o cădere bruscă a recoltei de materie primă. Ca rezultat, productivitatea soiurilor variază de la an la an. Cercetările au fost efectuate în laboratorul Plante Aromatice și Medicinale al Institutului de Genetică, Fiziologie și Protecție a Plantelor. Scopul cercetărilor constau în evaluarea productivității soiurilor de trandafir în condițiile pedoclimatice din anul de vegetație 2017. Pentru calcularea recoltei potențiale ale petalelor de trandafir au fost evaluate caracterele: masa florilor, masa petalelor, numărul de flori (butoni florali per/plantă). Condiţiile climaterice din anul 2017 au fost favorabile pentru cultura trandafirului. De aceia toţi butonii florali au avut posibilitatea să formeze flori bine dezvoltate. Numărul de flori formate la o tufă a constituit 212 flori la soiul Raduga, 216 – la soiul Roşu Moldovenesc și 248 la soiul Ucraina. Cel mai mare număr – 296 flori a avut soiul Lani. La soiurile Ucraina, Lani, Raduga şi Roşu Moldovenesc a fost determinată masa medie a florilor. Pentru aceasta a fost cântărite câte 100 flori în faza începutului înfloririi, înfloririi în masă şi la sfârşitul înfloririi. Media acestor trei evaluări a constituit 490 g la soiul Ucraina și 432 g - la Lani. A fost determinată prin aceeaşi procedură şi cota medie a petalelor din materia primă. La soiul Ucraina ea a constituit 80,0%, la soiul Lani – 83.0% şi la Raduga - 78 %. Recolta potențială de flori la plantă în anul 2017 a constituit, 1,260 kg la soiul Lani. La soiul Ucraina - 1,215 kg. Soiurile Raduga şi Roşu Moldovenesc au avut în medie o producţie de două ori mai mică. Acesta este efectul secetei din lunile de vară a anului precedent. Menţionăm, că pe parcursul întregii perioade de vegetaţie atacul de rugină la trandafir nu a fost depistat. Rezultatele obținute demonstrează, că productivitatea soiului Ucraina a fost mai redusă față de a soiului Lani, deoarece el a reacționat mult mai tare la seceta din vara anului precedent. De această secetă au fost și mai afectate soiurile Raduga și Roșu Moldovenesc, a căror recoltă practic este de două ori mai mică față de soiurile Lani și Ucraina.

140 YIELD OF NON-SHOOTING GARLIC, DEPENDING ON THE POSITION OF THE CLOVES IN THE BULBS

Botnari V., Chilinciuc Al. Institute of Genetics, Physiology and Plant Protection, Chisinau, Republic of Moldova e-mail:[email protected], [email protected]

In the culture, there are two types of garlic: shooter and non-shooter. The latter, due to the complexity of growing the planting material, occupies relatively small areas, although it has advantages in the storage process. The need to grow of the non-shooting garlic is due to the content in it of useful components for human nutrition. In addition, this species is characterized by a relatively greater resistance to diseases and pests and a longer storage period compared to shooter. The areas occupied by non-shooting garlic are very small, there is no production planting, however, it is cultivated mainly in household plots, while mainly local varieties are used not for varietal material. The lack of specially designated sites and recommendations for growing planting material, as well as non-shooting garlic itself, is one of the reasons for low yields and its limited distribution. Planting material imported from other geographical areas often does not fully correspond to the soil and climatic conditions of our republic, and the yield, when planted, is significantly lower than the actually possible level. Therefore, the study of the issues associated with the production of planting stock of non-shooting garlic is currently very relevant. In this regard, the main goal of the studies was to identify the influence of the location of the cloves in the bulb as planting material (peripheral and internal cloves) on leaf formation processes, bulb size, yield quantity and quality, and planting material yield. Field experiments were started in 2014 and 2015. The objects of the study were the cloves from the population of non-shooting garlic removed by selecting it from local forms. Non-shooting garlic was characterized by a dense onion with a spiral-shaped arrangement of cloves The cloves were of various shapes and sizes, unequal in weight, peripheral - large (3-7 g), internal - small (0.5-3 g). When they were used as planting material between plants, differences appeared in growth, leaf formation, bulb formation, number of cloves, and crop size. The growth, development and yield of garlic largely depended on the quality of planting material. It was found that when peripheral and internal cloves were used for planting in comparison with unselected cloves without mass calibration, differences in the size of the leaf surface were revealed between the plants during the growth process. The location of the cloves affected the growth and development of plants, as well as the formation of bulb mass. Peripheral had higher commercial and planting qualities than internal ones (the ratio of their mass in the bulb is within 60 and 40%), Studies also revealed that the use of planting cloves of different locations without calibration by weight led to the ripening of bulbs at different times, which complicated the harvesting process and contributed to the deterioration of the quality of garlic. Sorting, in order to use for planting the same mass of cloves, ensures uniform development of plants, friendly ripening of bulbs and obtaining better products.

141 УПРАВЛЕНИЕ ЧИСЛЕННОСТЬЮ БОБОВОЙ ОГНЕВКИ (Etiella zinckenella Tr.) В СИСТЕМЕ ПАРАЗИТ-ХОЗЯИН

Брадовская Наталия, Брадовский В. Институт генетики, физиологии и защиты растений, Кишинэу, Республикa Молдова e-mail: [email protected]

В связи с хозяйственной деятельностью человека, интенсивным преобразованием биоты, введением в практику химических препаратов различного назначения проблема использованием энтомофагов, как «чистого и бесшумного» метода не наносящего вреда природе приобрела особое звучание в настоящее время. Проблема успешного использования энтомофагов является составным звеном мероприятий по реализации биоорганического земледелия. Совершенно очевидно, что проблема борьбы с вредными насекомыми при помощи энтомофагов комплексна и требует переосмысления современных подходов и привлечения методов из других направлений научной мысли. Настоятельной потребностью сегодняшнего дня и ближайшего будущего является переход от метода «проб и ошибок» к планируемому эксперименту, от полного уничтожения вредителя – к управлению его численностью. Одним из перспективных и безопасных методов контроля численности бобовой огневки является способ колонизации эффективного энтомофага бракона. Для этого необходимо было: 1. Искусственное разведение энтомофага путем усовершенствования питательной среды при разведении большой вощинной моли для получения высокоэффективного паразита. 2. Экспериментально определить возможность разведения лабораторного хозяина бракона – галлерии на модернизированных искусственных питательных средах для оптимизации разведения энтомофага. 3. Определить влияние переменных температур на важнейшие популяционные характеристики вощинной моли и разработать метод аппроксимации полученной зависимости, позволяющий содержательно интерпретировать прогноз развития на ней энтомофага бракона. 4. Составление биотехнических требований для метода расселения бракона в агроценозе сои при контроле численности бобовой огневки. 5. Разработать и реализовать систему управления численностью вредителя применительно к конкретной системе паразит-хозяин. Исследования осуществляли при оптимальных условиях содержания галлерии, составляющих температуру 30оС и 70% относительной влажности при 4-х вариантах по 300 яиц в повторности: Проведенные исследования по оценке биологических показателей энтомофага бракона при содержании его на гусеницах большой вощинной моли, воспитанных на усовершенствованных питательных средах показали, что выход, как куколок, так и имаго существенен в первом поколении на трех предложенных вариантах среды. Так, выход куколок по вариантам в среднем составил от 67.7 до 109 экземпляров на одну самку паразита. Количество имаго на одну самку в этом случае составило от 62.6 до 90.1 экземпляров. В контроле по количеству куколок и имаго эти величины составляли соответственно 138.1 и 132.4 экземпляра. Следует отметить, что соотношение полов в третьем варианте по сравнению с контролем (1:2.8) превышало количество самцов в шесть раз и составило 1:16.9.

142 ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ОБОСНОВАНИЕ ПОЛОВОЙ СТЕРИЛАЦИИ ПРИРОДНОЙ ПОПУЛЯЦИИ БОБОВОЙ ОГНЕВКИ (Etiella zinckenella Tr.)

Брадовский В., Брадовская Наталия Институт генетики, физиологии и защиты растений, Кишинэу, Республикa Молдова e-mail: [email protected]

Хемостерилизация димилином является инструментом, пригодным для индуцирования наследственной летальности у бобовой огневки. При контакте самцов с обработанной поверхностью на протяжении от 5 до 10 минут была получена рецессивная имагинальная леталь, сцепленная с жизнеспособностью. Установленное целенаправленное изменение выживаемости огневки является существенным инструментом для разработки технологии применения бесплодных самцов в регулировании численности бобовой огневки. Комбинированное использование в ловушке полового аттрактанта и хемостерилянта позволит получить значительный эффект в снижения вредоносности бобовой огневки от стерилизации привлекаемых природных самцов. Возможность стерилизации огневок, вредящих зернобобовым культурам, как за рубежом, так и в Молдове не изучалась и сообщения по этому вопросу в литературе отсутствует. Распространение бобовой огневки совки на соевых полях Молдовы носит локальный характер в виде отдельных очагов площадью от 1 до 50 га каждый, поэтому уничтожение её путем химической стерилизации на изолированных участках не будет представлять особой трудности. В процессе разработки генетического метода борьбы возникла необходимость определения влияние димилина на биологические показатели самцов бобовой огневки в зависимости от времени нахождения их на обработанной поверхности аттрактантной ловушки. Пятиминутный контакт самцов бобовой огневки с внутренней поверхностью феромонной ловушки, обработанной димилином, существенно влияло на стерилизующую эффективность ловушек. Самки, спаривавшиеся с такими самцами по плодовитости сравнимы с контрольными самками. Увеличение времени до 10 минут нахождения самцов на поверхности, обработанной 10% раствором хемостерилянта, существенно снижало как плодовитость, так и фертильность яиц, спаривавшихся самок. Стерилизующее влияние димилина на фертильность яиц, отложенных спаривавшимися самками, отмечено как при экспозиции в 5, так и 10 минут. При эмбриональном развитии яиц и выживаемости, как гусениц, так и куколок установлено, существенное отличие от контроля при всех экспозициях контакта. Развитие от яйца до имаго после спаривания подвергшихся стерилизации самцов с нормальными природными самками бобовой огневки свидетельствует, что процент их выживаемости существенно отличается по сравнению с контролем и максимума достигает при нахождении самцов на обработанной поверхности в течение 10 минут и составляет 15.7% и при 75,3% выживания в контрольном варианте. Применение половых стерилизующих ловушек является новым перспективным аспектом химической стерилизации. Высокая избирательность действия ловушек позволяет рассчитывать на их полную безопасность полезных видов. Установленное целенаправленное изменение выживаемости бобовой огневки является существенным инструментом для разработки технологии применения бесплодных самцов в регулировании контроля численности бобовой огневки в агроценозах соевых полей Молдовы. При контакте самцов с обработанной поверхностью на протяжении от 5 до 15 минут впервые была получена леталь, определяющая низкую жизнеспособность на стадии имаго. Установленное целенаправленное изменение выживаемости совки является существенным инструментом для разработки технологии применения бесплодных самцов в регулировании численности хлопковой совки в агроценозах соевых полей.

143 ПРОЯВЛЕНИЕ КОЛИЧЕСТВЕННЫХ ПРИЗНАКОВ В F2 У СОИ

Будак А.Б. Институт генетики физиологии и защиты растений, Кишинэу, Республикa Молдова e-mail: [email protected]

Длина междоузлий представляет собой важный таксономический, селекционный и хозяйственный показатель. Число междоузлий определяет степень ограниченности роста стебле, общую высоту растений, продолжительность вегетационного периода и, в конечном итоге, продуктивность растения сои. Целью исследований являлось изучение наследования признака - средняя длина междоузлия и сопряженных с ним признаков продуктивности (число бобов, семян на растении и веса семян с растения), а также высоты растения и высоты прикреплении первого боба. Представлены результаты изучения трансгрессии и коэффициентов наследуемости в F2 гибридных популяций от 5 растений F1 раздельно по потомству растений и в общем по комбинации. Почему взята именно эта гибридная комбинация, так как родительские формы резко отличаются как по высоте растения, так и по длине междоузлий почти в 2 раза. По признакам продуктивности степень трансгрессии положительная, с частотой 10-15 %, в общем, по всей комбинации. Хотя по таким признакам как число бобов и число семян отмечается и отрицательная степень трансгрессии в потомстве от некоторых растений. В потомстве от 3-х растений из 5-ти отмечена отрицательная степень трансгрессии по признаку средняя длина междоузлия, хотя, в общем, по комбинации положительная. Коэффициент наследуемости по этому признаку довольно высок 0,72, что говорит о том, что отбор по этому признаку по фенотипу наиболее эффективен, т.к. доля генетически обусловленной изменчивости в общей фенотипической довольно высока. Анализ характера наследования гибридов второго поколения по числу семян показал, что средние значение у родителей было равно 70,77. У потомков эта величина равнялась 76,16±1,54, и она близка к среднему отцовской формы. По распределению растений второго поколения этой гибридной популяции можно заключить, что наблюдается аддитивное действие генов. Следует отметить, что при аддитивном действии генов фенотип, верно, отражает генотип (в случае постоянства внешних условии). Таким образом, в этой популяции можно проводить отбор какого-то отдельного генотипа с точностью, лимитируемой лишь степенью однородности внешних условий. В данной гибридной комбинации эффективность отбора по числу семян будет высокой. Основная часть растений по числу семян гомозиготная. Коэффициент наследуемости на 2 среднем уровне (Н =0,39). Трансгрессия - положительная (Tg = 81,52) с частотой (Tf = 11,41). Подобное отмечается и по основному признаку продуктивности - вес семян с растения. Следовательно, в этой гибридной популяции можно отобрать генотипы с высокими показателями по продуктивности. Растения с короткими междоузлиями более продуктивны. Отбор растений с укороченными междоузлиями эффективен, так как существует отрицательная зависимость между длиной междоузлия и продуктивностью растения. Отмечены также различия в проявлении признаков в потомстве отдельных растений первого поколения во втором поколении. Выделены потомства, в которых наиболее эффективен отбор по высоте растения и высоте прикрепления нижнего боба, а также по числу и весу семян с растения.

144 CARACTERISTICA HIBIRIZLOR DE LAVANDĂ CU CONŢINUT RIDICAT DE ULEI ESENŢIAL

Butnaraş Violeta Institutul de Genetică, Fiziologie şi Protecţie a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail:butnaraş[email protected]

Lavanda este o planta originara din bazinul Mediteranean. Din măruntele flori mov-albăstrui care ne încântă prin parfumul lor se extrage uleiul esenţial, poate cel mai răspândit şi utilizat în întreaga lume. Termenul ulei esenţial a apărut la mijlocul secolului III şi se foloseşte până în prezent. Pentru prima dată uleiul esenţial de lavandă s-a extras în secolul al XVI. Actualmente acest produs este înalt apreciat şi utilizat cu succes atât în tratamente şi aromaterapie, cât şi la fabricarea articolelor de parfumerie şi produselor cosmetice. Ulei esenţial în inflorescenţele de lavandă se acumulează timp de 8-10 zile după începutul înfloririi. Conţinutul de ulei în decursul zilelor senine este totdeauna mai ridicat, de cât în zilele cu cer acoperit cu nori. Pentru a obţine ulei esenţial de calitate superioară, este necesară ca materia primă de levănţică să fie calitativă şi să corespundă cerinţelor standardului care prevede următoarele: - inflorescenţele trebuie să fie proaspete, recoltate în faza înfloririi, să nu conţină impurităţi de frunze şi alte părţi mai mult de 10 %; - conţinutul de buruieni şi alte plante tehnice să fie cel mult de 1 %; - cantităţi de flori nematurizate şi mature brunificate cel mult 5 %. Extragerea uleiului esenţial la specia Lavandula angustifolia Mill. se bazează pe proprietatea vaporilor fierbinţi de apă de a extrage şi transporta uleiurile esenţiale. Conţinutul înalt şi calitatea uleiului esenţial sunt una din sarcinile principale în ameliorarea levănţicăi. Cerinţele crescânde în ulei de lavandă au impulsionat lucrări de ameliorare a speciei. În scopul evidenţierii celor mai valoroşi hibrizi de levănţică în faza înfloririi depline a plantelor, s-a determinat conţinutul de ulei esenţial. Conţinutul de ulei esenţial a fost evaluat la majoritatea hibrizilor din anul VI, VII şi VIII de vegetaţie. Ca martor a fost utilizată forma maternă de provenienţă franceză – Fr. 8. Conţinutul de ulei esenţial în anul al VI-lea de vegetaţie (2016) la hibrizii F1 de lavandă este de la 3.866 până la 5,947 %. Această grupă de hibrizi se caracterizează printr-un conţinut de ulei esenţial şi mai ridicat. Valori net superioare la acest caracter au înregistrat hibrizii: Fr.8-5-7- 1V- 5,455% (s.u.) şi Fr.8-5-7-47V cu 5,947 % (s.u.). Conţinutul de ulei esenţial în inflorescenţe la forma maternă este semnificativ mai scăzut şi a constituit numai 2,867% (s.u.). In anul al VII-lea de vegetaţie (2017) majoritatea hibrizilor au acumulat si sintetizat un conţinut mai mare de 4 %, comparaţie cu standardul la care acest indice a indicat valori de 3,675% (s.u.). Variaţia conţinutul de ulei esenţial la hibrizii de lavandă din anul al VIII-lea (2018) este accentuată, cu un conţinut ridicat de ulei de la 4,545% până la 5,594% (s.u.). Forma maternă Fr.8 în perioada menţionată a înregistrat un conţinut de 3,565% (s.u.). Cei mai perspectivi, în ce priveşte acumularea conţinutul de ulei esenţial, pe parcursul anilor 2016-2018 au fost hibrizii: Fr.8-5-7-36V(4.826%), Fr.8-5-7-3V(4.648), Fr.8-5-7-14V (5.006%), Fr.8-5-7-1V(5.380%) şi Fr.8-5-7-47V care în aceşti ani de studiu a posedat un conţinut ridicat de ulei esenţial în medie de 5,584 % (s.u). Forma maternă au avut un conţinut de ulei esenţial in medie de 3,337% (s.u.). Rezultatele obţinute la hibrizii evaluaţi au fost superioare conţinutului de ulei esenţial înregistrat de cât forma maternă (Fr. 8). Caracterul menţionat este un indice de performanţă pentru hibrizii de levănţică din anii VI,VII şi VIII de vegetaţie. Conţinutul de ulei esenţial, în trei ani de evaluare la aceşti hibrizi a crescut considerabil. Evaluarea detaliată a hibrizilor cercetaţi pe parcursul anilor 2015-2018 demonstrează, că majoritatea posedă un conţinut înalt de ulei esenţial care pot fi utilizaţi la crearea soiurilor-clone noi de levănţica cu o productivitate înaltă, adaptate la condiţiile pedoclimatice de cultivare din Republica Moldova, pentru extinderea considerabilă a suprafeţelor cu specia menţionată.

145 ОЦЕНКА ИСХОДНОГО МАТЕРИАЛА ПО КОМПЛЕКСНОЙ УСТОЙЧИВОСТИ КУКУРУЗЫ К БОЛЕЗНЯМ

Былич Елена Институт генетики физиологии и защиты растений, Кишинэу, Республика Молдова e-mail: [email protected]

Пополнение специализированных коллекций кукурузы донорами ценных признаков происходит в результате многолетнего мониторинга первичного материала на естественных фонах. При этом проводят изучение иммунологических свойств генофонда и выявление источников групповой устойчивости к основным болезням. Эффективность оценок определяет наличие инфекционного фона и условий его формирующих. Так, резкие перепады сезонных и суточных температур, а также дождливые месяцы май и июнь в 2019 году, способствовали проявлению и распространению ряда заболеваний. При полевой идентификации патогенов использовали рекомендации по оценке устойчивости кукурузы к болезням и вредителям (Иващенко, 2016). Материалом служили 15 мутантных, 12 инбредных линий и 8 местных сортов из активной коллекции лаборатории генетических ресурсов. В фазе цветения растений были выявлены типичные симптомы заболевания пузырчатой и пыльной головней. При проведении учетов оценивали по баллам уровень поражения каждого растения, а затем определяли развитие болезни по следующей формуле: Рб =∑(a · b)·100/(n · e). В числителе - сумма произведений числа больных растений на соответствующий каждому растению балл поражения, в знаменателе – произведение количества учетных растений на максимальный балл шкалы. Результаты оценок всех генотипов по степени распространенности Ustilago maydis выявили в среднем невысокий уровень (6,5%) этого показателя с интенсивностью поражения 7-9 баллов. При этом, у наименее устойчивой линии МАН 2518 развитие болезни составило 28%. Достаточно высокий уровень поражения (18%) фиксировали у сорта Молдавский желтый (К11639). Необходимо отметить, что в основном очаги поражения наблюдали на пасынковых початках в местах повреждения их хлопковой совкой и кукурузным стеблевым мотыльком. Симптомы пыльной головни были выявлены у сортов Молдавский (К11627) и Молдавский желтый (К11597), распространенность Sporisorium reilianum для этих генотипов составила 15% при максимальной интенсивности поражения по девяти бальной шкале. У остальных образцов коллекции симптомов болезни на этой стадии развития растений не обнаружено. Проявление бурой пятнистости листьев (северный гельминтоспориоз) было отмечено у трех линий (ygl5, Chisinau о2 419-2 и Chisinau о2 235-2). Высокий уровень поражения растений мутантной линии ygl5 Нelminthosporium turcicum способствовал высыханию листьев в период цветения и редукции продуктивных початков. Для обеих линий Chisinau уровень развития болезни не превышал 20%. Предполагаемой причиной развития фитопатогенов у трех генотипов являлась сохранившаяся инфекция в семенах, так как симптомов заболевания у остальных образцов коллекционного питомника не наблюдали. Оценку заселенности посевов кукурузным мотыльком Ostrina nubilalis (первое поколение) проводили, начиная с периода формирования растениями 7-8 листа. В среднем для всех форм показатель составил 25,8%, что на 6% выше прошлогоднего. При этом у 5 мутантных линий и сорта Молдавский желтый (К11645) он составил 75% (с элиминацией 5% пораженных растений). Используя мониторинг, основанный на данных одновременного учета как наличия и интенсивности болезни, так и повреждений вызывающих их вредителями, позволил выявить источники устойчивости. В составе мутантных линий были выделены линии: W153ae, W64lg, В37su, el. Из местных сортов как перспективная отобрана форма MDI00445, из с/о линий - МАН2284 и МАН2016.

146 GENETIC STABILITY OF Asplenium adulterinum FROM MEDIUM TERM CONSERVATION Catana Rodica, Aldea Florentina, Paica Ioana Institute of Biology Bucharest, Romanian Academy e-mail: [email protected]

There are many reports indicate a decline in the fern population, maybe linked to the vulnerability of their habitats due to the human impact and/or climate change. In the Red List of Threatened Species (IUCN, 2012) were included 167 species of fern and fern allies in the differenet threatened category (critically, endangered or vulnerable), 2 of them being extinct and 19 near- threatened. Only 3% of described species were evaluated (Ibars & Estrelles, 2012). The ex situ conservation methods applied to ferns are represented by artificial spore banks, wet storage, dry storage, cryopreservation and in vitro techniques. Genetic analysis of the in vitro regenerated individuals and ex situ conserved for medium and long time represents an important step of fern conservation programs. Asplenium adulterinum, a glaciar relict (Holderegger, 1994), represent one of the most threatened representatives of the Aspleniaceae family in the Carpathians (Bartók & Irimia, 2015). At european level is mentioned as a vulnerable species in a continuing decline of subpopulations (Christenhusz et al., 2017). In Romania, was mentioned in Red Book of the Vascular Plant in Romania as critically endangered (Dihoru & Negrean, 2009). Despite its ecological role in maintaining biodiversity and conservation importance, few studies regarding the ex situ conservation of A. adulterinum were done. An in vitro culture optimization method starting from spores was established (Aldea et al., 2016). After spore germination, different media variants were tested for gametofites development. Best results were obtained on the Murashige & Skoog, 1962 media variant added with IAA, kinetin and active charcoal. All the samples used for genetic stability (10 samples of A. adulterinum and 1 - A. trichomanes) were maintained for 5 years on the same conditions of culture media variant, temperature (24±2°C) and photoperiod (16h light/8h dark with the light intensity of 27μmol*m-2*sec-1). A. trichomanes was used as an outlier, the interest species being a natural hybrid between A. trichomanes and A. viride. The cluster analysis based on the genetic distance matrix showed an 80-90 % similarity among in vitro maintained gametophytes from medium term conservation.

Selective references: 1. Aldea F., Banciu C., Brezeanu A., Helepciuc F. E., Soare L.C., 2016, In vitro micropropagation of fern species (pteridophyta) of biotechnological interest, for ex situ conservation, Muzeul Olteniei Craiova. Oltenia. Studii şi comunicări. Ştiinţele Naturii. 32(2): 27-35. 2. Bartók A., Irimia I., 2015, Present or Absent? About a Threatened Fern, Asplenium adulterinum Milde, in South-Eastern Carpathians (Romania), Not Sci Biol, 7(3): 299-307. DOI: 10.15835/nsb.7.3.9566 3. Christenhusz M., Bento Elias R., Dyer R., Ivanenko Y., Rouhan G., Rumsey F., Väre H. 2017. Asplenium adulterinum. The IUCN Red List of Threatened Species 2017: e.T162081A84789488. Downloaded on 14 February 2019. 4. Holderegger R (1994). Zur Farnflora des Pfannenstils, Kt. Zurich, [The ferns from Pfannenstils, Kt. Zurich]. Farnblätter 25:3-21. 5. Murashige, T; Skoog, F (1962). "A Revised Medium for Rapid Growth and Bio Assays with Tobacco Tissue Cultures". Physiologia Plantarum. 15 (3): 473–497.

147 APRECIEREA ERIDITĂŢII ŞI A VARIABILITĂŢII GENOTIPICE A CARACTERELOR BIOLOGICE ŞI ECONOMICE LA DESCENDENŢELE SOIULUI DE SOIA ALBIŞOARA

Celac V., Budac Al. Institutul de Genetică, Fiziologie şi Protecţie a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail: [email protected]

Este cunoscut, că pe parcursul cultivării soiul culturilor autogame în timp de 6-7 generaţii îşi modifică puritatea biologică şi capacitatea de producţie. Cauza diversificării genotipice a populaţiei are loc sub influenţa factorilor biologici: mutaţie, hibridizaţie, selecţia naturală, drifului genetic, migraţiei genelor şi a proceselor tehnologice: utilizarea erbicidelor, funghicidelor, impurificării mecanice şi a influenţei factorilor biotici şi abiotici. Soiul de soia Albişoara, omologat în anul 2010 şi cultivat la producere este eterogen, actualmente se caracterizează cu unele caractere biologice şi economice diminuate în comparaţie cu soiurile noi cultivate. Scopul cercetărilor a fost de a ameliora acest genotip prin aplicarea selecţiei individuale repetate. În procesul ameliorării (2015 – 2019) a fost utilizată schema generală a selecţiei. Pe parcurs au fost implicate în cercetare următoarele caractere fenotipice: talia plantei, înălţimea de inserţie a primei păstăi, numărul de lăstari/plantă, culoarea pubescenţei, numărul nodurilor/plantă, numărul de flori la nod, culoarea florilor, numărul de păstăi/plantă, numărul de boabe/plantă, numărul de boabe/păstaie, greutatea boabelor/plantă; caractertele morfobiologice ale seminţilor: culoarea tegumentului seminal, culoarea hilului, forma bobului, MMB; particularităţile fenologice ale genotipului, rezistenţă sporită la maladii , dăunători şi perioada de vegetaţie. Câmpul de alegere a soiului Albişoara a fost semănat în anul 2015 pe o suprafaţă de 10 ari cu o densitate de cca 50000 plante. Din câmpul de alegere la maturizare a plantelor în procesul selecţiei fenotipice au fost alese 300 genotipuri elită, la care în laborator a fost apreciată sructura recoltei. În baza indicilor de producţie au fost selectate 139 linii mai valoroase cu seminţe tipice fiecărui genotip şi greutatea boabelor per plantă în limitele de 5,3 - 17,2 g şi au fost selectate pentru semănat în 2016 în câmpul de selecţie. Pe parcursul vegetaţiei şi evaluârii caracterelor fenotipice la descendenţele din câmpul de selecţie au fost selectate 30 linii mai performante destinate pentru amplasare în câmpul de control. După caracterele fenotipice şi producţia de boabe în limitele de 58 – 96 g/m2 şi cu MMB de la 136,3 g până la 172,4 g au fost alese 8 linii mai valoroase (l – 60 – 16, l - 74 – 16, l - 98 – 16, l - 104 -1 6, l - 114 -16, l – 124 - 16, l- 139-16, l - 156 - 16) cu perioada de vegetaţie de la 105 zile până la 116 zile şi semănate în 2017, apreciate ca linii de perspectivă. Producţia de boabe a fost de la 1448 kg/ha până la 2660 kg/ha. În câmpul de înmulţire a liniilor selectate în a. 2018 producţia de boabe a fost în limitele de 2070 kg/ha – 2770 kg/ha. În câmpul de culturi comparative de orientare a liniilor de perspectivă selectate in 2019 recolta a variat de la 2100 kg/ha până la 2700 kg/ha. Producţia medie de seminţe la culturile comparative (2017 – 2019) a fost de la 2029 kg/ha până la 2510 kg/ha. Masa medie la 1000 boabe a fost în limitele de 136,2 g la linia l-139 – 16 până la 169,7 g la linia l – 156 – 16. Rezultatele obţinute în culturile comparative arată că genotipul cu nivelul de producţie mai mare – 2510 kg/ha este linia l– 156 – 16 şi se caracterizează cu talia medie a plantei de 82,5 cm, cu producţia medie de boabe 2510 kg/ha, MMB 169,7 g, perioada medie de vegataţie 107 zile, cu flori de culoare violet, pubescenţă gri, hil de culoare gri şi bobul cu forma rotundă. Variabilitatea mare a caracterelor: talia plantei, producţia de boabe, MMB este exercitată de presiunea condiţiilor climatice, însă au spăorit la selectarea unor genotipuri mai rezistente la seceta solului şi la seceta atmosferică. Este indicat că genotipurile de soia cu flori de culoare violet, pubescenţă gri şi hil de culoare maro posedă o capacitate de producţie mai înaltă. Această opinie este confirmată în resultatul cercetărilor expuse.

148 NEGRILICA DE DAMASC (Nigella damascena L.) – SURSĂ DE SUBSTANȚE BIOLOGIC ACTIVE

Chisnicean Lilia Institutul de Genetică, Fiziologie și Protecție a Plantelor,Chișinău, Republica Moldova e-mail: [email protected], [email protected]

Nigella damascena L. (Negrilica de Damasc) este o specie anuală, reprezentant al familiei Ranunculaceae, fiind utilizată în practica mondială în calitate de plantă medicinală și alimentară. Se folosesc semințele de Nigella damascena L., care conțin, glucide, ulei gras (circa 35%), ulei volatil (0,5-1,5%), vitaminele B1, B2, B3, proteine, săruri minerale - Ca, Fe, Cu, Zn, P, flavone, saponine, steroizi. Semințele de Negrilică sunt folosite în industria farmaceutică la producerea fitofermentului lipolitic - Nighedaza. După E. Păun şi colab. semințele sunt utilizate în industria alimentară pentru condimentarea brânzeturilor telemea, la panificație (Evdochia Coiciu şi Racz), la conservarea legumelor (Zemlinskis), sub formă de ceai pentru reglementarea activității cardiace (Zolotnitkaia). Rakesh şi colaboratorii au evidenţiat acţiunea antimicrobiană şi antihelmintică a uleiului volatil, care mai este folosit în parfumerie (aromă de muscat şi camfor), uleiului gras (circa 35%) la fabricarea săpunului (Topalov). Din ulei a fost separată nigelona - activă în brohospasmele histaminice. Semințele mai dețin proprietăți anticancerigene, antiglicemiante, energizante, afrodiziace, antimicrobiane, antivirale, antimicotice, imunostimulatoare, vasoprotectoare, antialergice, detoxifiante, metabolice. În cercetările efectute pe parcursul mai multor ani, ca rezultat al selectării, a fost evidențiată din populația inițială (NPI) o formă nouă (NSN), care diferă prin producția sporită de semințe, cât și a MMB. În rezultatul continuării testărilor în CCC la IGFPP a fost confirmată prioritatea formei noi (NSN), care a acumulat producții de 0,59 t/ha în anul 2018, și de 0,65 t/ha în anul 2019, iar martorul (NPI) a atins valori de 0,48 t/ha ce este mai puțin cu 0,19 t/ha semințe. Fondarea plantațiilor din cadrul testărilor, a fost efectuată cu semințe selectate după MMB. Au fost luate pentru semănat mostre de semințe ale soiului nou NSN cu MMB de 1,9 (masa minimă) și 2,3 (masa maximă), iar pentru matror cu 1,76 (masa minimă) și 1,86 (masa maximă) gr. Atât în cazul soiului nou (NSN), cât și la martor (NPI) , acest caracter a influențat termenul de răsărire al plantelor. Perioada de răsărire a fost cu 5-7 zile mai devreme la semănăturile efectuate cu semințe cu MMB mai mare - 2,3 la soiul nou și 1,86 gr la martor, decât în cazul semănăturilor efectuate cu semințe cu masa de 1,9 - soiul nou și 1,76 gr la martor. De asemenea, acest caracter (MMB) avut influență pozitivă și asupra uniformității răsăririi plantulelor. Plantele răsărite din semințe cu cu masa mai mare au fost mai uniforme, atât la soiul nou creat, cât și la martor, însă n-a avut vreun impact asupra producției de boabe. Pe parcursul cercetărilor s-a observat că, in orice lot de semințe nou reproduse, la selectarea lor prin mașina de sortat, se obțin trei s-au patru fracții de semințe, având cea mai mare cotă - parte în partidă - fracția doi, cu valori ale MMB medii de 2,1 la soiului nou (NSN) și de 1,8 gr la martor (NPI). Pentru utilizarea semințelor sortate, în calitate de material semincer are importanță primordială facultatea germinativă înaltă. Semințele cu MMB cea mai mică, facultatea germinativă scăzută, care sunt șiștave, de formă neregulată (fracția trei și patru), pot servi drept materie primă pentru farmaceutică, la extragerea uleiului gras, cât și în calitate de condiment pentru panificație, având aromă și gust plăcut. Semințele obținute și stocate î-și mențin facultatea germinativă înaltă de 92 - 98% pe parcursul a trei ani, scăzând treptat la 70% egală în clasa a III-ia la al patpatrulea și cincilea an de păstrare. Pe parcursul cercetărilor, n-au fost observate atacuri ale dăunătorilor s-au boli asupra plantelor de Nigella damascena, atât la martor, cât și la soiul nou creat. Datele obținute sunt preventive și necesită continuarea cercetărilor, Nigella damascena fiind o specie de perspectivă pentru farmaceutica republicii noastre.

149 DETERMINATION OF STORAGE POTENTIAL OF CUCUMBER COLLECTION ACCESSIONS (Cucumis sativus L.)

Corlateanu Liudmila, Ganea A. Institute of Genetics, Physiology and Plant Protection, Chisinau, Republic of Moldova e-mail: [email protected]

Prior to placement of collection accessions for long-term storage in plant gene bank (ex situ conservation), it is necessary to determine storage potential (SP) of seeds. Two main tests are used for determination of this important parameter: accelerated aging (AA) test and test for electrical conductivity (EC), which are included in the International Rules for Seed Testing. These tests enable monitoring of the plant gene pool that allows continuous recording of viability of seed accessions and classification of genotypes according to the parameters of seed aging. Purpose of this research was to study storage potential of the cucumber collection accessions from the active collection of the gene bank after the accelerated aging of seeds for further long-term ex situ conservation. Test objects were cucumber accessions provided by the Transnistrian Research Institute of Agriculture and from the collection of the plant gene bank. To perform the accelerated aging test of seeds, we used methods widely accepted in global practice, according to which this parameter for cucumber crop is measured after the influence of temperature of 45°С, relative air humidity of 90- 100% during the aging period of 96 hours. In some cases temperature conditions were corrected for aging of specific genotype (43-45°С). This article presents the data on testing of 8 collection accessions of cucumber (cultivars: Foton, Kruiz, Rodnichok, Strumok, Konkurent, Feniks, Vzglyad, and Chechel). Then the seeds were sprouted in thermostat at 25°С, in each variant 300 seeds were used in quadruplicates. Data were processed using the software package Statistica. After conduction of AA-test of seeds, different morphophysiological (germinating power and germinability of seeds, radicle length, fresh and dry biomass of rootlets, electrical conductivity of solutions with seeds) and biochemical (content of peroxidase enzyme in rootlets) parameters of cucumber seeds and seedlings were measured. Decrease of germinating power and germinability of seeds after the accelerated aging test of seeds was 5.7-77.9% and 15.5-62.9% in different cucumber genotypes, respectively, as compared to control that is indicative of genotypic specificity of tested accessions. After AA-test of seeds of different cucumber genotypes, the decrease in other parameters was also observed (radicle length, fresh and dry biomass of rootlets, length of seedlings, change of peroxidase enzyme activity). Radicle length of cucumber seeds decreased after test by 1.0-11.3 mm at average, depending on genotype, and fresh biomass of rootlets decreased by 30-220 mg as compared to control. Electrolyte release from seeds was evaluated by electrical conductivity of solutions with normal and aged seeds. After accelerated aging test of seeds, electrical conductivity of solutions increased after 24-h swelling of seeds by 1.3-1.8 times in different genotypes, respectively, as compared to control. Solutions with aged seeds of all cucumber genotypes always had the increased electrical conductivity as compared to control that was probably connected with the increase of permeability of cell membranes in seeds after their aging. Use of the tests for accelerated aging and electrical conductivity of seeds of the collective accessions of cucumber allows determination of storage potential of each specific genotype by morphophysiological and biochemical characteristics of seeds and seedlings as well as ranking of genotypes by this complex parameter that characterizes capability of seeds for long-term conservation in plant gene bank. Determination of storage potential of seeds under the conditions of ex situ conservation allows: * Identification of accessions unsuitable for long-term storage that enables saving funds for conservation; * Formulation of recommendations on the terms of reproduction of seed material; * Indication of the necessity to restore viability of collection accessions.

150 EFECTUL HETEROZIS LA HIBRIZI F1 ÎN TREPTE ȘI COMPLECȘI DE Salvia sclarea L.

Cotelea Ludmila Institutul de Genetică, Fiziologie și Protecția a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail:[email protected]

Fenomenul heterozis este utilizat cu succes în ameliorarea multor specii de plante, inclusiv la specii de plante aromatice și medicinale. În ameliorarea şerlaiului (Salvia sclarea L.), heterozisul este de asemenea folosit cu succes. Denumirea de”heterozis” se datorează lui G. Shull, care a utilizat pentru prima data acest termen in anul 1914, desemnând fenomenul de creşterea vitalității, vigurozității şi productivităţii la hibrizii din prima generaţie. Cercetările efectuate de noi au rezultat crearea unui număr mare de hibrizi de diferite tipuri, care manifestă heterozis în generaţia F1. De cele mai multe ori pentru a întruni în acelaşi genotip mai multe caractere şi însuşiri, s-au efectuat pe rând un şir de hibridări în trepte care s-au soldat cu obţinerea unor hibrizi foarte complecşi. Materialul biologic utilizat a constituit 18 hibrizi F1 în trepte şi complecși de Salvia sclarea, in anul al doilea de vegetaţie şi formele parentale ale acestora. Evaluarea hibrizilor F1 a demonstrat, că aceștia sunt valoroşi printr-un şir de caractere cantitative, ce asigură o productivitate sporită și conţinut înalt de ulei esenţial. La majoritatea din aceste caractere hibrizii F1 manifestă heterozis. Astfel, la caracterul ”talia plantei”, șapte hibrizi au înregistrat heterozis în raport cu ambele forme parentale, (de la +1.9% până la +86.8%), șase din ei manifestă heterozis în raport cu unul din părinți. Cel mai înalt efect al heterozisului (+86.8%) în raport cu forma maternă, a fost înregistrat la hibridul [(S-3 x H2S3)F2 x 0-32S3)F8 x NC 11-11S2]F1. La caracterul ”lungimea inflorescenţei”, patru hibrizi manifestă heterozis în raport cu una din formele parentale, efectul heterozis variind de la +5.1% până la +39.9%. Heterozis nesemnificativ în raport cu ambele forme a fost înregistrat la 2 genotipuri hibride. Cel mai înalt efect al heterozisului a fost înregistrat la hibridul în trepte [(S-3xH2S3)F2 x 0-32S3)F8 x NC 11-11S2]F1–+57.3% în raport cu forma maternă și +4.4%– cu cea paternă. Tot la acest hibrid, a fost înregistrat cel mai înalt heterozis la caracterul talia plantei.Numărul de ramificaţii de gradul întâi al inflorescenței a variat în limitele 12.6-18.0. Cel mai înalt efect al heterozisului (+43.4%) în raport cu forma maternă, a fost înregistrat la un hibrid în trepte, iar la hibridul [AP 38-11 S2 x (S-3 x H2S3)F2 x 0-32 S3)F1 efectul heterozisului manifestat a fost +44.3%– în raport cu forma paternă. Numărul de ramificații de gradul al doilea al inflorescenței a variat de la 16.8 până la 38.6. Manifestă heterozis în raport cu ambele forme parentale patru genotipuri. Dintre aceștia, cel mai înalt indice a fost înregistrat la hibridul complecs [(M-69 429-82S3 x S.s.Turkmen/N)F1 x S-1122 172S3)F9]F1 x (M-69 429-82S3 x M-69 10S4)F1 x K-17)F6]F1, +52.0% în raport cu forma maternă și +75.4% – cu cea paternă. Inflorescențe mari, compacte, cu număr mare de ramificații de gradul întâi și doi, contribuie la sinteza și acumularea uleiului esențial în concentrații ridicate. Conţinutul de ulei esențial recalculat la substanța uscată, a variat în limitele 0.692–1.750% (s.u.). Heterozisul manifestat la acest caracter în raport cu ambele forme parentale a constituit +0.5% –+105.4%. Cinci genotipuri hibride depăşesc considerabil ambele forme parentale, înregistrând valori ridicate ale heterozisului, [AP 38-11S2 x (S-3xH2S3)F2 x 0-32S3)F1, [NC11-11S2 x (M-69429-82S3 x S.s.Turkmen/N)F1 x S-1122 172S3)F9]F1, [AP42-11S2 x (V-24-86 809 S3 x 0- 33S6)F7 x (Rubin x S-1122 9S3)F1 x (0-56 x V-24)F1)F7]F3]F1, [(V-24-86 809 S3 x 0-33 S6)F7 x (Rubin x S-1122 9S3)F1 x (0-56 x V-24)F1)F7]]F2 x AP 42-11 S2]F1 și hibridul [(M-69429-82S3 x S.s.Turkmen/N)F1 x S-1122172S3)F9]F1 x (M-69429-82S3 x M-6910S4)F1 x K-17)F6]F1. Cel mai înalt efect al heterozisului în raport cu forma maternă (+105.4%) a înregistrat hibridul în trepte [(S-3 x H2S3)F2 x 0-32 S3)F8 x NC 11-11 S2]F1 și tot acest genotip a atestat cel mai înalt conţinut de ulei esenţial –1.750% (s.u.). Hibrizii F1 în trepte și complecși, de Salvia sclarea, manifestă heterozis la un șir de caractere cantitative, în raport cu una ori cu ambele forme parentale. Aceste genotipuri constituie un valoros material de ameliorare pentru elaborarea soiurilor noi de provenienţă hibridă.

151 HIBRIZI PERSPECTIVI DE Salvia sclarea L., CU CONȚINUT ÎNALT DE ULEI ESENȚIAL

Cotelea Ludmila Institutul de Genetică Fiziologie şi Protecţie a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail:[email protected]

Salvia sclarea L. este o specie aromatică şi medicinală valoroasă, datorită uleiului esenţial pe care îl conţine în inflorescenţe. Acesta este utilizat în medicină, parfumerie, industria de fabricare a vinurilor de tip muscat, etc. În Moldova specia se cultivă din 1948. În scopul elaborării soiurilor noi, mai performante, au fost creați hibrizi de diferite tipuri de Salvia sclarea. Unul din obiectivele de bază în ameliorarea șerlaiului, este selectarea şi reproducerea materialului iniţial de ameliorare, ce include genotipuride provenienţă genetică şi geografică diferită, cu caractere cantitative performante, conținut înalt de ulei esențial în materia primă. Ulterior, aceste genotipurivor fi utilizate în crearea soiurilor, hibrizilor de diferite tipuri, cu caractere cantitative valoroase. Evaluând diversitatea caracterelor biomorfologice (cantitative) la 42 hibrizi de diferite tipuri F4-F5 de Salvia sclarea,în anul al doilea de vegetaţie,s-a demonstrat, că aceştea posedă o variabilitate excesivă.Talia plantelor a variat de la 102,4 până la 125,2 cm, în dependenţă de genotip, iar lungimea inflorescenței,caracter de care în mare măsură depinde randamentul hibriduluia fost de 59,2 - 78,0 cm, ultimul indice aparținând hibridului complex [(M-69 655 S9x (S-1122 528 S3 x (Rubin x S-786)F1 x (0-33 S3 x L-15)F7)]F5.Raportul lungimea inflorescenței/talia plantei, a fost de peste 60% la 10 din genotipurile evaluate. Cota parte, raportul lungimea inflorescenţei/talia plantei la unii hibrizi triliniari [M-69 655 S9 x (M-69 429-82 S3 x 0-40 S5)F7]F5precum şi la cei în trepte [(M-69 655 S9 x (S-1122 528 S3 x (Rubin x S-786)F1 x (0-33 S3 x L-15)F7)]a fost de 60.8-62.4%. La hibrizii [(0-42 x Rubin)F1 x S-786) B6 x 0-48 S12)]F5 și [M-69 655 S9 x (K-36 x 0-41)F2 x 0-19)B5]F5 rata inflorescenței a fost la același nivel și a constituit 62,9%. Cea mai bună corelație lungimea inflorescenţei/talia plantei - 63,1%, s-a înregistrat la hibridul simplu [(S-1122 60 S10 x (S.s.Turkmen/N)S7)F4.Inflorescenţele lungi, compacte, puternic ramificate sunt caractere importante pentru şerlai. Atât ramificaţiile de gradul întâi, cât şi al doilea ale inflorescenţei, influenţează direct producția de materie prima si conţinutul de ulei esenţial, deoarece glandele oleifere la Salvia sclarea sunt exogene, amplasate pe epiderma ramificaţiilor inflorescenţei şi a sepalelor concrescute ale florilor.Numărul de ramificații de gradul întâi al inflorescenței a variat de la 13,6 la 18,6, iar la cele de gradul doi –de la 18,2 până la 53,7. Hibridul dublu [(V-24-86 809 S3 x 0-33 S6)F7x (S-1122 528 S3 x S.s.Tien-Shan/S)B5)]F4, a înregistrat indici exceptionali la caracterul ”numărul de ramificații” de gradul I și II al inflorescenței, care în sumă a fost de 57.9.La hibridul simplu [(V-24-86 809 S3 x 0-33 S6)F7 XCr.p 160 S11]F5 numărul lor a constituit 65.8. Cel mai mare număr de ramificații -73,1, a fost înregistratla genotipul [(V-24-86 809 S3 x 0-33 S6)F7 X (S-1122 528S3 x S.s.Tien-Shan/sud)B5)]F4. Toate aceste caractere, precum şi numărul mare de ramificaţii de gradul I şi II ale inflorescenței, care la unii hibrizi au constituit în sumă peste 32-73, au favorizat acumularea unui conţinut ridicat de ulei esenţial, care a variat în limitele 0.600 - 1.460% s.u.Șaisprezece din combinațiile hibride evaluate se evidenţiază prin conţinut în ulei esenţial foarte înalt, de peste 1% s.u. Conținut ridicat de ulei esențial a acumulat hibridul simplu (Cr. P. 11 S11 X (S.s.Turkmen/N)S7 )F4 – 1,138% s.u. Hibridul în trepte [(M-44S4 x L-15)F1 x L-15)B5 x Dacia 50]F5,precum și hibridul complecs [(S-1122 528S3 x (Rubin xS-786)F1 x (0-33 S3 xL-15)F7)F7 X M-69 655 S9]F4, au acumulat și sintezat 1.344% s.u. și1.372% s.u. respectiv. Cel mai înalt conținut de ulei esențial -1.460% s.u.s-a înregistrat la hibridul [(M-55+130S4 x (K-44 x L-15)F2 x 0-47)F6 x (M-44S4 x L-15)F1 x L-15)B6]F5. Hibrizii perspectivi de Salvia sclarea creați și evaluați, cu conținut de ulei esențial ridicat, sunt un valoros material de ameliorare pentru elaborarea soiurilor noi de provenienţă hibridă.

152 ВЗАИМОСВЯЗЬ МЕЖДУ ОСНОВНЫМИ МОРФОБИОЛОГИЧЕСКИМИ ПРИЗНАКАМИ У DESI И KABULI ГЕНОТИПОВ НУТА

Куршунжи Д., Чебан Анна Институт генетики физиологии и защиты растений, Кишинэу, Республикa Молдова e-mail: [email protected]

В данном сообщении представлены исследования по основным морфобиологическим признакам генотипов нута с семенами типа desi (47 генотипов) и kabuli (53 генотипа) из коллекционного материала института (2018 года), отражены некоторые признаки продуктивности, общая характеристика в аспекте адаптации и корреляционные связи между ними. Целью исследования было – определение значения корреляционных связей у генотипов нута для desi и kabuli типов, а также указать основные причины различий между группами. Наиболее значимые корреляционные связи были выявлены в парах между длиной, шириной бобов и массой 100 семян; высотой растений и периодом вегетации; между массой 100 семян и высотой растений; массой 100 семян и периодом вегетации; масса 100 семян и количество семян в бобе; всходы - начало цветения и продолжительностью цветения. В паре признаков длина, ширина бобов и масса 100 семян у генотипов группы desi составило (r = 0,91; 0,90), у kabuli ( r = 0,91; 0,87), у следующей пары признаков – высота растений и период вегетации, для desi (r = 0,8), для kabuli (r = 0,81). В desi группе корреляция между массой 100 семян и высотой растений отмечена на уровне предыдущей пары (r = 0,79). Между предыдущей парой признаков в группе kabuli генотипов связь не выявлена и основной причиной может служить то, что генотипы с наиболее крупными семенами (36-45г/100 семян) характеризуются средней высотой растений (45-55 см), а генотипы со средней массой семян (29-35г/100 семян) наиболее высокорослые (60-70 см). По массе 100 семян и периоду вегетации, корреляционная связь для desi генотипов составила значение (r = 0,66). Для генотипов kabuli связь между данной парой признаков не выявлена в виду того, что генотипы с наиболее крупными семенами по сроку созревания являются среднеспелыми, а генотипы со средними по размерам семенами в основном позднеспелые. Обратная корреляционная связь наблюдается между признаками массы 100 семян и количеством семян в бобе – в группе desi она составила (r = - 0,34) и в группе kabuli (r = - 0,73). Разница в полученных значениях между группами объясняется тем, что kabuli генотипы по размеру семян крупнее desi, следовательно, связь у них более значительна. Средняя корреляционная связь определена между фазами всходы - начало цветения и продолжительностью цветения: для desi (r = 0.53), kabuli (r = 0.46). Учитывая, что первая половина вегетации растений проходила при определенной засушливости и высокой температуре окружающей среды, изученные признаки отражаются на продуктивности. Наиболее урожайные генотипы позднеспелые с преобладанием kabuli со средними массами семян (28-34г/100с), со средней или высокой адаптацией к стрессам – это наиболее высокорослые растения. По продолжительности вегетационного периода генотипы можно разделить на 22 раннеспелых, 10 среднеспелых и 20 позднеспелых генотипов из них 28 desi и 24 kabuli. Многие из раннеспелых генотипов нута характеризуются средней или высокой адаптацией к сезонным стрессам (засухе и высоким температурам), из них значительную часть составляют desi – низкие или средние по высоте растения с массой семян 16-24г/100с. Среднеспелые генотипы нута desi с незначительным преобладанием kabuli с наиболее крупными семенами уступают в адаптации к стрессам. И так по количеству связей на 2-е пары признаков desi превосходят тип kabuli, а по силе связи в паре масса 100 семян и количество семян в бобе в группе desi она составила (r = - 0,34), а в группе kabuli (r = - 0,73) из чего видно, что генотипы desi уступают типу kabuli.

153 CULTIVAREA SOIURILOR DE PLANTE MEDICINALE ŞI AROMATICE ÎN SCOPUL DIMINUĂRII IMPACTULUI NEGATIV AL SECETEI

Gonceariuc Maria Institutul de Genetică, Fiziologie şi Protecţie a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail: [email protected]

Cultivarea plantelor medicinale, aromatice garantează o producție constantă de materie primă pentru industria de parfumerie şi cosmetică de înaltă calitate cu un conținut sporit de principii active. Pe de altă parte, acestea sunt o sursă importantă de venit în zonele rurale. Toate acestea au influențat constant studiile privind compoziția chimică, calitatea și beneficiile utilizării derivaților din aceste plante. Un domeniu aparte sunt studiile realizate pentru elaborarea de hibrizi și soiuri de plante medicinale şi aromatice rezistente la factorii abiotici care ar asigura o producție înaltă cu un conținut mai ridicat de ulei esențial și o calitate care corespunde scopului propus pentru utilizare. Astfel de studii s-au intensificat în mod evident în ultimele decenii ca urmare a modificărilor climatice, a proceselor lente, dar constante de încălzire globală, deşertizare a unor zone, inclusiv în sud-estul Europei, unde culturile agricole sunt afectate de secetă, temperaturi ridicate critice tot mai frecvent. Astfel de schimbări climatice impun cultivarea soiurilor de plante adaptate condițiilor de secetă care asigură productivitate şi calitate înaltă. Cercetările noastre demonstrează că impactul negativ al secetei poate fi diminuat substanțial prin cultivarea soiurilor rezistente la secetă de plante medicinale şi aromatice, cum ar fi Salvia sclarea, Lavandula angustifolia, Salvia officinalis etc. Soiurile Ambra Plus, Balsam, Parfum Perfect etc. de S.sclarea în anii secetoşi acumulează un conţinut înalt de ulei esențial, asigură o producție de 15,1-22,4 t/ha de inflorescențe în doi ani de exploatare a plantației și garantează obţinerea a 41,1-77,4 kg/ha de ulei esențial în funcție de soi, randamentul, fiind de 2,8–3,6 kg de ulei esenţial din tona de materie prima. La soiurile de lavandă Moldoveanca 4, Vis Magic 10, Alba 7 etc. în anii secetoşi conținutul de ulei esențial este mai ridicat (5.103-6.164%) decât în anii obişnuiţi (4,318-5,915%), producţia de inflorescenţe, fiind înaltă (7-12 t/ha), precum şi cea de ulei esențial - 132-245 kg/ha, eficiența constituind 16-21,5 kg/t, în funcţie de soi. Soiul de S.officinalis Miracol, asigură o producție de 850- 990 kg/ha de frunze uscate în anii secetoşi și 960-1070 kg/ha în anii obișnuiţi. Producția de ulei esențial, fiind de 18,7-18,9 kg /ha în condiţii de secetă şi 17,2-17,6 kg /ha în anii obişnuiţi.

154 CONSERVAREA IN-SITU A SPECIEI Telekia speciosa (Schreber) Baumg. (asteraceae) ÎN REPUBLICA MOLDOVA

Ionița Olga, Tofan-Dorofeev Elena, Ghendov V. Grădina Botanică Națională (Institut) „Alexandru Ciubotaru” , Chișinău, Republica Moldova e-mail:[email protected]

Genul Telekia Baumg. din familia Asteraceae include 2 specii, raspândite în Europa, regiunea Mediteraneană, Caucaz și Asia Mică. În flora spontană a Republicii Moldova genul Telekia este reprezentat de către o singură specie – Telekia speciosa (Schreber) Baumg. – Brustan. Arealul natural al speciei cuprinde Europa Centrală și de Est, regiunea Mediteraneană, Caucaz, Asia Mică. Pentru prima dată în Republica Moldova Brustanul a fost semnalat în anul 1987, în limitele rezervației științifice ˮPlaiul Faguluiˮ (parcela 41). Telekia speciosa (Schreber) Baumg. crește în apropierea com. Rădenii-Vechi, r-nul Ungheni, în cadrul unui arboret de fag (Fagus sylvatica L.) cu gorun (Quercus petraea L. ex Liebl.), în amestec cu frasin (Fraxinus excelsior L.), carpen (Carpinus betulus L.), tei argintiu (Tilia tomentosa Moench) ș.a., ce se încadrează (conform sistemului de clasificare NATURA 2000) în Habitatul 9130 – Păduri de fag de tip Asperulo-Fagetum. Aceste făgete central-europene sunt destul de bogate în specii și prezintă un habitat rar întâlnit în pădurile țării. În decursul anilor 2011-2019, în cadrul cercetărilor speciilor rare din familia Asteraceae, a fost studiată populația speciei Telekia speciosa (Schreber) Baumg., evidențiată starea actuală, condițiile de creștere, parametrii populaționali și efectuat studiul dinamicii acesteia. Populația vegetează pe o pantă cu expoziție nord-estică, în proximitatea mai multor izvoare mici, ocupă circa 300 m2, iar efectivul numeric este constituit din 21 de exemplare generative și 8 fitoindivizi juvenili, care cresc în grupuri difuze, a câte 2-5 exemplare. Stratul arbuștilor este slab dezvoltat și format din Sambucus nigra L., Swida sanguinea (L.) Opiz, Viburnum lantana L. ș.a. În pătura ierbacee au fost semnalate speciile: Aegopodium podagraria L., Actaea spicata L., Ajuga reptans L., Asarum europaeum L., Carex pendula Huds, Equisetum telmatea Ehrh., Epipactis helleborine (L.) Crantz, Galium odoratum (L.) Scop., Impatiens noli-tangere L., Geranium robertianum L., Paris quadrifolia L., Parietaria officinalis L., Poligonatum multiflorum (L.) All., Pulmonaria officinalis L., Sanicola europaea L., Salvia glutinosa L., Stachys sylvatica L., Tussilago farfara L., Viola reihenbachiana Jord. ex Boreau. ș.a. Starea de conservare a populației este favorabilă. Telekia speciosa în Republica Moldova este ocrotită prin lege, în rezultatul cercetărilor recente a fost evaluat gradul de periclitare al speciei, conform cerințelor elaborate de Uniunea Internațională pentru Conservarea Naturii, atribuindu-i-se categoria de specie Critic periclitată [Critically Endangered]. [CR] B2ab(ii, iii, v). Teritorial Telekia speciosa este protejată în rezervația științifică ˮPlaiul Faguluiˮ. Ca măsură eficientă de protecție propunem respectarea riguroasă a regimului de rezervație, condiție esențială pentru conservarea in-situ a populațiilor speciilor periclitate, ocrotirea unicului loc de creștere, monitorizarea stării populației, includerea speciei în Cartea Roșie a Republicii Moldova, ed. a IV-a.

155 ИНТРОДУКЦИЯ И ОЦЕНКА ЗОНАЛЬНОГО СОРТИМЕНТА ТЮЛЬПАНОВ В УСЛОВИЯХ ПРИДНЕСТРОВЬЯ

Ионова Л.Г. Приднестровский государственный университет им. Т.Г.Шевченко, Тирасполь, Республикa Молдова e-mail: [email protected]

Тюльпаны (Tulipa L.) - одна из наиболее популярных и разнообразных в культуре групп декоративных цветочных растений, которые широко используются в ландшафтном строительстве и на срезку. Первенство в тюльпановодстве принадлежит Голландии, реализующей цветы и луковицы по всему миру, однако далеко не всегда голландские сорта успешно возделываются в других странах. Подборка и селекция тюльпанов, адаптированных к местным условиям конкретного региона является актуальной задачей цветоводства. В целях качественного обновления и улучшения ассортимента культуры тюльпанов путем оценки и отбора сортов/видов, наиболее перспективных для Приднестровья, в 2013-19 гг. проводились интродукционные исследования 48 сортообразцов, принадлежащих к 13 садовым группам, включая сорта на основе видов Кауфмана, Грейга, а также некоторые видовые тюльпаны: Tulipa tarda Stapf, T. turkestanica (Regel) Regel, T. biebersteiniana Schult.& Schult.fil, T. urumiensis Stapf, T. iliensis Regel. Лучшими среди сортов по совокупности признаков и наиболее перспективными для культивирования в урбанизированном ландшафте Приднестровья оказались представители: махровых ранних (Император и др.); триумф тюльпанов (Tom Pouce, Princes Irene и др.); тюльпан Кауфмана (сорт Иоганн Штраус) - устойчивый к вирусу пестролистности (Tulip breaking virus), фузариозной гнили (Fusarium spp.) и самым высоким коэффициентом размножения (5.5) среди всех исследованных генотипов. Особую актуальность для нашего региона имеет селекция поздних тюльпанов, устойчивых к высоким температурам, засухам и вирусным заболеваниям. К таким сортам относятся крымские сорта Никитского ботанического сада РАН (Скиф, Золото Скифов, Домик для дюймовочки и др.), хорошо проявившие себя в условиях Южного Приднестровья без искусственного полива, подкормок и при минимальном количестве атмосферных осадков. Весьма существенной проблемой для тюльпанов является развитие вирусных инфекций. Видовой состав вирусов изучался по характерным симптомам на больных растениях, а также с помощью растений индикаторов и иммунно-хроматографически с использованием диагностических наборов стрип - полосок производства фирмы Agdia biofords (США). Раннецветущие тюльпаны мало подвержены вирусной инфекции, так как при весенних невысоких температурах вирусы слабо распространяются векторами инфекции. Со второй декады апреля и далее наш регион испытывает воздействие высоких температур и изобилия осадков, при этих условиях средне и позднее цветущие сорта (группы II, III) оказываются наиболее уязвимыми объектами для инфекции вируса пестролистности (Tulip breaking virus). Уровень заражения пестролистностью, которых составил 10-25%, в отличие от раннецветущих и видовых тюльпанов (группы I, IV) имеющих 0% заражения. Для получения массового посадочного материала тюльпанов целесообразно использовать размножение in vitro (удалось получить полный цикл развития проростков тюльпана из соматических эмбриоидов, формирующихся прямым способом в пролиферирующей культуре), а также применять регуляторы роста. Коэффициенты размножения (опытный сорт Парад) при использовании регуляторов роста: Диметил 2- оксо- глутарат, «Дымная вода», Мицефит, составляли от 1,7±0.1 до 2,8±0,07. И только при использовании 0,2% раствора гиббереллина А3 получены более высокие показатели коэффициенты размножения – 3,7±0,1-4,1±0,1. Проводятся исследования по сохранению ex situ Tulipa biebersteiniana редкого декоративного вида, включенного в Красную книгу Приднестровья (2009).

156 ИЗМЕНЕНИЕ ХОЗЯЙСТВЕННЫХ ПРИЗНАКОВ У ЧАБЕРА ГОРНОГО (Satureja montana L.) ПРИ РАЗЛИЧНЫХ СПОСОБАХ ИНИЦИИРОВАНИЯ ПОСАДОК

Jelezneac Tamara, Vornicu Zinaida, Baranova Natalia Institutul de Genetică, Fiziologie și Protecţie a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail: [email protected]

Среди множества растений, акклиматизированных в Республике Молдова, особый интерес представляет чабер горный (Satureja montana L.). Его возделывают как эфиромасличное, лекарственное и пряное растение. Основой лечебного действия чабера горного является его эфирное масло, содержащее большую гамму ценных компонентов. Сырье и эфирное масло используются в медицинской практике как бактерицидное, антигельминтное, спазмолитическое, отхаркивающее средство. Чабер горный входит в состав фиточаев ‘Multivitamin’, ‘Tonizant plus’, ‘Imuno plus’, ‘Savoare’ и др., производимых в Молдове фирмой Doctor Farm. Для расширения плантаций этой культуры необходимо наличие дешевого и качественного посадочного материала высоко - масличных клонов. Самым простым и дешевым способом является семенное размножение, однако, его вегетативное размножение более предпочтительно, так как позволяет получить материал, обладающий всеми качественными признаками материнского растения. Целью работы было исследование изменения хозяйственных признаков у чабера горного при различных способах инициирования посадок. Были использованы материнские высокомасличные клоны С70 и С54 с содержанием эфирного масла 0,548-0,699% и 0,525- 0,536%, отселектированных ранее в питомнике оценки клонов. Опыт включал следующие варианты: V1 - посадка однолетними сеянцами, полученными из семян возделываемой улучшенной популяции – Контроль; V2 - посадка укорененными отводками клона С70; V3 - посадка рассадой из семян клона С70; V4 - посадка укорененными отводками клона С54; V5 - посадка рассадой из семян клона С54; V6 - посев на постоянное место семенами клонов С70 и С54, нормой 4,0 кг/га семян. Полученные данные статистически обрабатывались по Доспехову. Содержание эфирного масла определялось гидродистилляцией по методу Гинзберга Наибольшее содержание эфирного масла было отмечено на клоновых посадках С70 и С54 и составило 0,589% и 0,531% соответственно, в сырье на сеянцевых посадках эти показатели были ниже - 0,571% и 0,496%. Наибольшее содержание эфирного масла показал клон С70, превысив контроль на 16% и клоновую посадку С54 на 10% . На сеянцевой посадке С70 и С54 урожайность сырья составила 7,4т/га и 9,1т/га против 6,8т/га и 8,4т/га на клоновой соответственно. Сеянцевая посадка С54 превысила по урожайности контроль на 21%. В варианте с посевом на постоянное место урожайность составила 14 т/га, что превысило контроль на 86% и на 54% наилучший из вариантов посадки 2 – сеянцами С54. Это объясняется густотой стояния растений – 2,9 ед./м в этом варианте, против 2,0 ед./м2 в других вариантах. Наибольший сбор эфирного масла был отмечен при посеве на постоянное место и составил 73,7 кг/га, что на 44% выше самой продуктивной сеянцевой посадки С54 со сбором 51,1кг/га и почти вдвое выше контрольного варианта со сбором 36,9кг/га. Вегетативное и генеративное потомство сохранило свойства материнских форм по содержанию эфирного масла, значение которого было в пределах 0,571-0,589% для клона С70 и 0,496-0,531% для клона С54. Во все годы исследований содержание эфирного масла на клоновых посадках С70 и С54 было несколько выше, чем на подобных сеянцевых, превышение составляло 10-15%.

157 ASPECTELE ECOLOGO-GENETICE ALE MULTIVARIANȚEI DIMENSIONALE A SEMINȚELOR Cucurbito pepo VAR. giramontia DUCH.

Khlebnikov V. F. 1, Smurova N. V. 1, Balashova I. T. 2 1Universitatea de Stat din Transnistria. T.G. Shevchenko, Chișinău, Republica Moldova 2FGBNU «Vserossiiskii NII selektsii i semenovodstva ovoshchnykh kultur», Rusia e-mail: [email protected]

În tehnologiile moderne de cultivare a plantelor cultivate, o atenție deosebită este acordată semințelor ca purtători de proprietăți productive și de altă natură. Atunci când se dezvoltă o strategie de utilizare a resurselor genetice ale plantelor cultivate, problema studierii multivarianței dimensionale a semințelor este acută. Polivarianța semințelor este o condiție necesară pentru strategia adaptivă a plantelor. Aceasta reflectă în mare măsură starea proceselor de dezvoltare generativă a plantei mamă și permite prezicerea naturii posibilelor procese de producție în culture. Necesitatea de a studia polivarianța semințelor se datorează specificului agrocenozelor, a căror funcționare este supusă legilor fundamentale ale ecologiei. Semnele morfometrice sunt unul dintre principalii indicatori ai stării semințelor. Variabilitatea lor este determinată, în primul rând, de condițiile hidrotermice și agrotehnice ale anului de reproducere (factori preventivi), factorii genotipici și natura interacțiunii "genotip-mediu". Cunoașterea semințelor ca un sistem viu complex de autoreglementare este relevantă pentru dezvoltarea de noi tehnici de influență asupra plantelor materne și semințelor pentru a-și îmbunătăți calitățile. Studiul ecologo-genetic al manifestării multivarianței dimensionale a semințelor de dovlecei nu a fost studiat suficient, ceea ce a fost scopul acestor studii. Pentru analiză au fost utilizate 5 forme de selecție Cucurbito pepo var. giramontia Duch. 7 ani de reproducere. Următoarele semne dimensionale au fost determinate de masă, lungime, lățime și grosime semințelor. Condițiile de prevegetare au fost estimate după indicatorul coeficientului hidrotermic (CHT). Datele au fost analizate prin metode de analiză de regresie, dispersie și cluster. Se consteaza că natura distribuției semnelor liniare și de greutate ale semințelor are loc în conformitate cu legea normală de distribuție. Variația semnelor a fost independentă. Se observă că variabilitatea semnelor liniare la toate genotipurile și în toți anii de cercetare a fost mai mică în comparație cu semnul greutate semințelor. Complexul dimensionale parametrii de semințe studiate forme de dovlecei a fost supus analiză de cluster și au identificat 3 grupuri morfometrice: o grupa de semincele mici (f.19/84 și 48/20), o grupa de semincele mijlocii (98/5) și o grupa de semincele mari (166/5 și 5B). Se arată, că variația semnelor morfometrice semințelor a crescut odată cu creșterea parametrilor lor dimensionali, a căror valoare a fost determinată de factorii hidrotermici ai anului de reproducere a semințelor. Se observă că factorii hidrotermici au variat semnificativ în funcție de ani și de fazele de creștere a plantelor de semințe de dovlecelului. S-a constatat că cel mai mare efect asupra polivarianței dimensionale a semințelor a fost factorii hidrotermici care au avut loc în faza formării lor. S-a constatat că variația semnelor morfometrice și a coeficientului de variație la modificarea coeficientului hidrotermic al perioadei de creștere a dovlecelului are un caracter neliniar și este condiționată genotipic.

158 ИЗУЧЕНИЕ И СОЗДАНИЕ НОВЫХ СОРТОВ ТРИТИКАЛЕ В МОЛДОВЕ

Лятамборг С., Веверицэ Е., Ротарь С. Институт генетики, физиологии и защиты растений, Кишинэу, Республикa Молдова e-mail: [email protected]

Главной задачей современной селекции растений является дальнейшее повышение урожайности, ее стабилизация и улучшение качества зерна создаваемых сортов. Это также относится и к культуре озимой тритикале. За последние годы климатические условия сильно изменились, и выращивание зерновых культур требуют новых технологий возделывания. Так как тритикале является новой культурой созданной человеком, в условиях Молдовы выращивается на больших производственных площадях совсем недавно. Занимаемые площади под эту культуру из года в год растут. Она обладает высоким потенциалом урожайности, повышенной морозостойкостью, устойчива к вирусам и грибам и имеет высокую питательную ценность. Селекционная работа по тритикале в Молдове ведётся по двум направлениям: кормовое и зерновое. Для получения новых гибридов тритикале за период 2015–2018 гг. нами были проведены 186 комбинаций скрещивания, из которых 94 внутривидовые и 92 межвидовые. В зависимости от типа скрещивания и индивидуальных особенностей родительских пар завязываемость гибридных семян была 48,4% при внутривидовой гибридизации (42х42) и 38,7% при межвидовой - (42х56). По годам вариация составляет 1,6 до 80,0%. Процент вариации при скрещивании гексаплоидных тритикале с октоплоидными составляет от 13,5 до 72,8%. В межвидовых комбинациях тритикале (42) и пшеница (42) и обратные, средний процент завязывания – 11,2 и 23,8 соответственно. Гексаплоидные тритикале легко скрещиваются между собой, дают жизнеспособные гибридные зерновки и константные формы можем отобрать уже в третьем поколении. При скрещивании с пшеницей зерно немного морщинистое, колос менее выполнен и растения не выровненные. Отборы проводили повторно в расщепляющихся популяциях F3 или F4, где существенно повышается выход морфологически выровненных линий по комплексу хозяйственно-ценных признаков и величине зерновой продуктивности. Таким образом, за 4 года был создан новый исходный селекционный материал для получения новых сортов тритикале. Все сорта тритикале нашей селекции изучались по комплексу хозяйственно-ценных признаков. Высота растений у всех сортов была выше 100 см, продуктивная кустистость довольно высокая и колеблется от 3,8 (Костел) до 4,92 (Инген 93). По признакам главного колоса длина варьирует между значениями 10,23 (Инген 54) и 14,04 (Инген 33), по числу развитых колосков все сорта находятся примерно на одном уровне (28,2 Инген 40 и 33,6 Инген 35), по числу зерен - 81,0 (Костел) и 51,1 (Инген 54), масса зерна главного колоса 1,94 (Инген 54) и 3,38 (Инген 40). Урожайность зерна по сортам с участков размножения ИГФЗР колеблется в приделах 1,7 до 3,8 т/га. По результатам 2018 года сорт Костел был передан в Госкомиссию по сортоиспытанию с/х культур РМ. На участках Госкомиссии эти же сорта демонстрировали высокую урожайность, что составляет 6,2 – 6,4 т/га. В результате этого, сорт Инген 40 в 2015 году был районирован в Республике Молдова на зерно для использования в продовольственных целях - выпечки хлеба. Сорт Инген 54 находится на тестировании 3-й год и его урожайность за 2017 и 2018 год составляет 6,37 и 6,27 т/га соответственно. За период многолетней работы создано ряд сортов с ценными биолого-хозяйственными признаками. Новые созданные сорта тритикале (Инген 40, Инген 54, Костел) отличаются высокой продуктивностью, морозостойкостью и устойчивы к засухе и болезням. Таким образом, в результате проведенных исследований установлено увеличение эффективности возделывания озимой тритикале по сравнению с пшеницей в аномальные, по климатическим условиям годы.

159 ГЕНЕТИЧЕСКАЯ КОЛЛЕКЦИЯ МЕЙОТИЧЕСКИХ МУТАНТОВ ТОМАТА

Лисовская Татьяна Восточноевропейский национальный университет имени Леси Украинки, Волынская областная Малая академия наук Украины, г. Луцк, Украина e-mail: [email protected]

Одним из подходов к изучению генетического контроля мейоза является анализ мутантных организмов с измененным процессом мейоза, так называемых мейотических мутантов. В лаборатории генетики и селекции биологического факультета ВНУ имени Леси Украинки собрана коллекция мейотических мутантов томата, которая насчитывает девять линий. По цитологическому проявлению большинство мутаций характеризуется преждевременным распадом бивалентов на униваленты с различной степенью десинапсиса. Такие мутации нарушают регулярное расхождение гомологичных хромосом к полюсам в анафазе первого деления мейоза, что приводит к появлению анеуплоидных гамет со сниженной жизнеспособностью. Кроме цитологических наблюдений (нормальное начало мейоза вплоть до диплотены), десинаптический характер этих мутаций подверждает отсутствие влияния на частоту кроссинговера между маркерными генами. Преобладание синаптических мутантов среди мейотических мутантов других видов растений (кукуруза, рожь, арабидопсис) свидетельствует об огромном значении процесса равномерного распределения хромосом в дочерние клетки в норме, который контролируется большим числом генов. Два мутанта - аs4 и sti, характеризуются неравномерной конденсацией хромосом, переплетением хроматина между бивалентами, негомологичными хромосомами и унивалентами, которые трудно различить. Значительные нарушения мейоза вызывают полную мужскую стерильность растений, которые несут мутацию в гомозиготном состоянии. Мутации не алельны друг другу. Установлено, что мутации, нарушающие конденсацию хроматина, повышают частоту кроссинговера в маркированных зонах хромосом. Одна мутантная линия характеризуется нарушением выхода их мейоза в микроспорогенезе. Цитологически нормальный мейоз не завершается цитокинезом, а мейоциты переходят к дополнительному третьему делению дочерних ядер. Вследствие того, что этому делению не предшествует редупликация ДНК и удвоение хромосом, к противоположным полюсам случайным образом расходятся хромосомы гаплоидного набора. Как результат дополнительного деления образуются от 4 до 8 микроспор вместо четырех в норме. Мутация проявляется только в мужском мейозе и не влияет на женский. Таким образом мутантные растения характеризуется полной мужской стерильностью и полной женской фертильностью. Для всех изученных мутаций был установлен моногенный рецессивный характер наследования, для большинства мутаций установлено отсутствие аллелизма между ними. Тест на аллелизм позволил установить наличие межалельной комплементации трех синаптических мутаций – dsm1, asb и dsm3, которые имеют различное происхождение, а также отличаются по степени десинапсиса. Дальнейшее изучение коллекции мейотических мутантов томата с использованием цитологических, генетических, молекулярно-генетических методов представляется перспективным для понимания основных этапов генетического контроля процессов, которые происходят во время мейотического деления. Изучение закономерностей генетического контроля мейоза позволит разработать механизм предотвращения появления нежелательных нарушений мейоза в процессе гаметогенеза. Для селекционеров представляет интерес управление процессом рекомбинационной изменчивости с целью расширения спектра доступной для отбора изменчивости.

160 CONCEPTUL „RESURSE GENETICE” ÎN CONTEXTUL PROPRIETĂŢII INTELECTUALE

Lupan Aurelia Agenţia de Stat pentru Proprietatea Intelectuală, Chișinău, Republica Moldova e-mail: [email protected]

În lumea contemporană o mare importanta se atribuie dezvoltării biotehnologiei, ingineriei genetice, farmacologiei şi altor tehnologii strict legate de resursele genetice de circulație liberă pe Terra. În legătură cu faptul dat trebuie de avut în vedere că resursele genetice (RG) care se găsesc în mediu (in situ) sunt o proprietate unică anumitor regiuni, bunul național a unor sau altor ţari şi adeseori sunt în concordanţă cu tradițiile popoarelor băștinașe. Păstrarea si menținerea resurselor genetice care nu se regăsesc in mediu natural (ex situ) se efectuează în bănci de gene, colecții și depozite speciale. Aceste organizaţii ştiinţifice păstrează bunul național - resursele genetice ale ţării. În conformitate cu definiţia care este stipulată în Convenția pentru Diversitatea Biologică din 1992: material genetic înseamnă orice material de origine vegetală, animală, microbiană sau altele care conține unități funcționale de ereditate; iar resurse genetice înseamnă materialul genetic de valoare actuală sau potențială. Ca exemplu de resurse genetice pot servi plantele medicinale, culturile agricole rase de animale. Deoarece resursele genetice se regăsesc în natura şi nu sunt produsul minţii omului, ele nu pot fi obiect de proprietate intelectuală (PI) si nu pot fi protejate nemijlocit, aplicând legislația privind PI. Totodată invenţiile obţinute în baza folosirii RG pot fi văzute în calitate de obiecte ai PI şi pot fi protejate prin sistemul PI de brevetare sau prin sistemul sui generis, care reglementează drepturile amelioratorului în cazul obţinerii unor noi soiuri de plante. În cazul dat o mare importanţă revine modului de protejare a RG ca bun naţional al ţarii. Din altă parte pentru a obţine un brevet de invenţie este nevoie de îndeplinit anumite cerinţe stipulate în legislaţia privind brevetele, care se reduce la îndeplinirea aşa criteriilor de brevetabilitate ca noutatea şi activitatea inventivă. Aici şi apare problema dezvăluirii originii şi provenienței RG utilizate. În cererea de brevet de invenţie sau de brevet de soi de plantă ar fi necesar de indicat locul (ţara) concret de găsire si acordul de utilizare în comun a beneficiilor (UCB) în fiecare caz concret. Aceste întrebări importante sunt reglementate de mai multe tratate internaționale: Convenția pentru Diversitatea Biologică din 1992; Protocolul de la Nagoya din 2010; Tratatul internaţional privind resursele genetice vegetale pentru alimentaţie şi agricultură din 2001 şi altele. Organizaţia Mondială a Proprietăţii Intelectuale şi in special Comitetul interguvernamental pentru proprietate intelectuală, resurse genetice, cunoștințe tradiționale și folclor, Uniunea pentru Protecţia Noilor Soiuri de Plante, la moment, au determinat doua căi de reglementare a interacţiunii dintre proprietatea intelectuală şi accesul la resursele genetice prin utilizarea în comun. Aceste sunt: respectarea legislaţiei naţionale şi internaţionale şi asigurarea ca oficiile de PI să posede informaţia privind RG corespunzătoare pentru a primi hotărâri argumentate cu referinţă la oferirea drepturilor PI. Deci principalele probleme sunt prevenirea acordarea eronată a brevetelor şi coerenţa şi sinergia între sistemul PI şi UCB. Pentru rezolvarea acestor probleme au fost determinate anumite modalități și mecanisme. Printre ele pot fi menţionate: utilizarea bazelor de date și a sistemelor informaționale, dezvoltarea de noi cerințe la dezvăluirea informațiilor legate de RG, abordând problema PI în contextul Acordului UCB, elaborarea orientărilor și recomandărilor în domeniul protecției defensive, perfectarea metodelor de clasificare internaţională a brevetelor, căutare și examinare cererilor de brevet. Aceste metode și mecanisme nu se contrazic reciproc și pot fi complementare. În concluzie putem menţiona ca utilizarea RG trebuie să se bazeze pe interesele naționale ale tarilor unde ele se regăsesc şi folosirea lor în sfera PI (brevetarea invenţiilor, obţinerea soiurilor noi şi altele) să fie executată prin acorduri UCB.

161 REZISTENŢA COMPLEXĂ A NOILOR LINII ŞI SOIURI DE GRÂU COMUN DE TOAMNĂ LA TEMPERATURI LIMITATIVE

Lupaşcu Galina, Dascaliuc A., Ralea T., Gavzer Svetlana Institutul de Genetică, Fiziologie şi Protecţie a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail: [email protected]

Grâul (Triticum aestivum L.), una dintre primele plante luate în cultură încă circa 10000 de ani în urmă, este în prezent cea mai importantă cultură cerealieră din întreaga lume. Spre deosebire de orez şi porumb care preferă condiţii tropicale, grâul creşte extensiv în regiuni cu diferite temperaturi, ocupând 17% din suprafeţele arabile de pe Terra şi fiind produsul alimentar de bază pentru 40% din populaţia globului (Peng et al., 2011). Însuşirile de productivitate ale spicului variază la unele şi aceleaşi soiuri în diferiţi ani ceea ce denotă influenţa factorilor de mediu asupra expresiei acestora (Singh, Chaudhary, 2006; Dakhim et al., 2012). Pentru testarea stabilităţii soiului se recomandă aprecierea reacţiei componenţilor roadei care sunt sensibili la factorii de mediu (Dimitrijevic et al., 2011). Printre aceștea menționăm factorii de stres termic și hidric în perioada postanteză care determină reducerea dezvoltării şi umplerii boabelor la grâu (Mohammadi et al., 2011). Deşi grâul comun de toamnă se cultivă în cele mai diverse zone ecologo-geografice ceea ce denotă înalta lui adaptibilitate la condiţiile de mediu, soiurile create şi implementate adesea sunt vulnerabile la unii importanţi factori biotici şi abiotici. Crearea genotipurilor de culturi agricole care îmbină însuşirea de rezistenţă pentru un număr cât mai mare de factori limitativi este un deziderat de anvergură pentru programele de ameliorare. În cercetările noastre, la testarea în condiţii de câmp a liniilor şi soiurilor nou create de grâu, o atenție deosebită a fost acordata rezistenţei acestora la maladiile fungice (septorioză, rugină brună, fuzarioză, alternarioză) şi capacităţii de formare a unui număr mare de boabe în spic în condiţii de secetă. Dacă în anul 2018, cu condiţii relativ bune pentru creşterea şi dezvoltarea plantelor de grâu, numărul boabelor per spic, greutatea a 1000 de boabe şi masa boabelor per spic la 12 genotipuri (linii, soiuri) au înregistrat valori între 56,5 - 72,0; 44,6 - 54,2 g și 2,8 - 3,4 g, atunci în anul 2015, marcat de secetă severă, elementele de productivitate ale spicului au înregistrat următoarele nivele: 58,5 - 75,4; 37,3 - 47,3 g, 2,52 - 3,28 g, respectiv. Valorile destul de înalte ale indicilor de productivitate la genotipurile create în condiţii de secetă denotă adaptibilitatea specifică a acestora la deficitul de umiditate şi temperatura înaltă a aerului. Ulterior, liniile/soiurile au fost testate în condiţii de laborator în vederea determinării capacităţii de germinaţie la șocul cu temperaturi înalte: 50, 52, 53°C şi joase: -7, -9°C. Datele au demonstrat că după șocul cu temperaturile pozitive de 50, 52, 53°C, nivelul de germinaţie au variat în limitele 45,1 - 100%, 3,4 - 81,8% și 0 - 59,2%, iar la temperaturile negative de -7, -9ºC: 16,3 - 65,1% și 6,7 - 30,4%, respectiv. Deci diapazonul de variaţie a capacităţii de germinaţie a boabelor pe fondalul diferitelor temperaturi a fost destul de larg, ceea ce denotă specificitatea de reacţie a genotipurilor nou create la factorul stresant de temperatură. Analiza corelaţională a demonstrat dependenţa medie între rezistenţa la temperaturi înalte şi joase. De exemplu, între capacitatea de germinare a boabelor de grâu la temperaturile de 53°C şi - 9°C coeficientul de corelaţie (r) a fost egal cu 0,56* (*- p≤0,05). Prin analiză clusteriană (dendrogramă, k-medii) a fost stabilit modul de repartiţie a liniilor/soiurilor nou create în baza rezistenţei complexe la aceste 5 niveluri de temperaturi limitative. Conform analizei centroide a k-mediilor, clusterul sub numărul 2 a fost reprezentat de 5 genotipuri – L Cub 101/Bas, L M30/M3, L Bas./M30, L Sel./Acc. şi soiul Moldova 66 care au înregistrat cele mai înalte valori ale capacităţii de germinaţie: 96,5; 70,4; 50,8; 49,5; şi 22,3% după şocul cu temperaturile 50, 52, 53, -7, -9°C, respectiv. Aceste genotipuri prezintă interes pentru programele de ameliorare în calitate de posibili donori ai rezistenţei complexe la factorii termici limitativi – însuşire deosebit de importantă pentru condiţiile Republicii Moldova.

162 PECULIAR FEATURES OF THE INHERITANCE OF THE TRAIT VEGETATION DURATION BY F1 HYBRIDS DERIVED FROM CROSSING OF RIN AND NOR MUTANT GENE FORMS

Makovei Milania Institute of Genetics, Physiology and Plant Protection, Chisinau, Republic of Moldova e-mail: [email protected]

Vegetation duration is a trait responsible for the possibility to cultivate a genotype in particular environment. The knowledge of the peculiar features of its inheritance will allow intensification of the activities to develop cultivars and hybrids belonging to different ripening groups. Lines with various mutant gene sets - L 8 (sp±, u, nor), L 28 (sp, Mi, gs, Tm-2, rin), L 111 (ssp, nor, u, hp-1, j-2) and L 11069 (sp+ , u, nor, Tm-2a,ls ,j-2), have been included into the crossing scheme to produce F1 hybrids. Records of the peculiar features of interphase period occurrences in the plants from different crossing combinations were made according to standard methods for tomato. Dominance degree (Breubaker, 1966) and the influence of the ripening-related genes rin and nor on the trait inheritance pattern in F1 hybrids have been determined. Analysis of trait inheritance by the F1 hybrids L 111 х L11069, L11069 х L111, L111 х L28, L28 х L111, L111 х L8 and L8 х L 11069 that are carriers of mutant genes has proved positive dominance (hp = 0,83…1,0) and superdominance (hp = 1,4….2,3). The combination L 111 x L 28 and, vice versa, L 28 x L 111 where the parental forms are carriers of two different genes nor and rin in both direct and reciprocal crossings showed positive dominance hp = 1.8 … 2.3 and hp = 1.66 …2.2, respectively. The average heterotic effect made 103.3% and 100.4%. The indices are lower but the trend is similar as for the hybrid combination (L 111 x L 11069) where the both parental forms are carriers of one nor gene. The dominance degree in the direct crossing is hp = 1.24 …1.0, while in the backcrossing hp = 1.0…1.51, with the heterotic effect making 100.4% and 100.0%. The crossing direction (direct and reciprocal) reveals no differences in the pattern of the trait inheritance. The combinations with nonmutative mid-ripening forms L 111 x MaKrista 111 x MlOranj display negative dominance (hp = -1.0…-3.0). The crossing of the line 111 (nor) with the early- ripening forms L 1185 and L 135, cv Zagadka manifests intermediate dominance (hp = 0.12…0.64) of the trait in F1 combinations. The fruits of these hybrids were very firm, highly marketable, and didn’t crack. The findings demonstrate that this trait is inherited in different ways from intermediate dominance with deviations towards negative or positive one to overdominance towards both positive and negative dominance. No differences in the pattern of trait inheritance depending on plant growth conditions have been found. The difference did occur just between hybrid combinations, which points to the dependence of the trait dominance direction on the crossing component. It has been also shown that the aggregated action of heterozygots for the ripening-related genes results in more tardy fruit ripening by 3-9 days in comparison with the hybrids derived from non mutative forms.

163 СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ ВЛИЯНИЯ МЕТОДА ОТБОРА НА ПОЛУЧЕНИЕ УСТОЙЧИВЫХ К ВЫСОКОЙ ТЕМПЕРАТУРЕ ГЕНОТИПОВ ТОМАТА

Маковей М.Д. Институт генетики, физиологии и защиты растений, Кишинэу, Республикa Молдова e-mail: [email protected] Ведущим направлением в селекции томата продолжает оставаться высокая продуктивность и качество плодов в сочетании с высокой экологической пластичностью. Целесообразность изучения и сравнительной оценки влияния разных методов на эффективность отбора таких форм весьма актуальна. В связи с этим, для отбора устойчивых к высокой температуре генотипов использовали три разных методических подхода: 1 - чередование спорофитно-гаметофитных отборов под давлением высокотемпературных режимов (43ºС и 45ºС) с одновременным учетом характера проявления признаков устойчивости на разных стадиях онтогенеза (спорофит-гаметофит), и ряда селекционно- ценных признаков у взрослых растений (опыт 1) в сравнении с использованием - 2 только гаметофитных отборов (опыление термообработанной пыльцой - опыт 2); и традиционного метода отбора - 3 (по высокому значению исследуемых признаков без дополнительного воздействия фактором стресса – контроль). Объектом исследований служили 11 гибридных комбинаций. Оценку и отборы проводили, начиная с генерации F1. Результатами исследований показана дифференцирующая способность изученных методических приемов: 1. Применение комбинированного отбора по спорофиту и гаметофиту в F1 - F3 приводит к получению более устойчивых потомств (F4–F6) как по энергии прорастания семян, так и по длине проростка в сравнении с отбором только по гаметофиту и сильнее выражены различия относительно контроля. Аналогичные результаты получены и по ряду других селекционно-ценных признаков. 2. Анализ жаростойкости линий по признакам гаметофита, показывает, что использование чередования спорофитно-гаметофитных отборов приводит к значительному увеличению устойчивости по длине пыльцевых трубок, которые на 3% - 167,6% выше, чем в контроле и на 1% - 78,3% относительно варианта гаметофитного отбора. 3. Использование только гаметофитного отбора влияет на жаростойкость пыльцы полученных линий (F4–F6), который на 0,7% - 22,9% выше по сравнению с вариантом спорофитно- гаметофитного и на 3,4% - 33,5% относительно контроля, но при этом устойчивость пыльцевых трубок у линий ниже (58,9% - 108,3%), чем у таковых от варианта спорофитно- гаметофитных отборов (61,9% -121,4%). 4. Совпадают высокие показатели устойчивости признаков, как на стадии спорофита, так и гаметофита у линий (135/1-2, 124/1-2, 110/1-2), полученных при использовании чередования спорофитно-гаметофитных отборов. Эффективным по всем признакам на разных стадиях онтогенеза (семена, проростки, пыльца, длина пыльцевых трубок) оказалось использование только гаметофитных отборов для линий – 118/2, 124/2 и 7/2. Более стабильное проявление устойчивости генотипов в исследуемых популяциях разных поколений выявлено по признакам спорофита. В потомствах генераций F4 - F6 отмечается высокое совпадение показателей под давлением высокотемпературного фактора, как по энергии прорастания семян, так и по длине проростка. Анализ признаков мужского гаметофита – жаростойкость пыльцы и устойчивость трубок выявляет высокую изменчивость показателей этих признаков у линий поколений F4 - F6. Следовательно, высокое совпадение показателей изученных признаков на стадии спорофита при выращивании линий в разные годы показывает, что роль диплоидного поколения в формировании устойчивости к изученному фактору стресса (жара) более выражена, чем гаплоидного. Сравнительный анализ результатов последовательного чередования при отборах классических и современных методов гаметной селекции, направленных на изучение генотипической изменчивости в популяциях, позволяет проследить процесс формирования устойчивости и отбирать жаростойкие генотипы с высокой продуктивностью.

164 VALORIFICAREA MOŞTENIRII CARACTERELOR CANTITATIVE ÎN POPULAŢIILE INTRA-ŞI INTERSPECIFICE DE TOMATE

Mărîi Liliana Institutul de Genetică, Fiziologie şi Protecţie a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail: [email protected]

Capacitatea de selecție în cadrul unei populații se bazează în principiu pe cantitatea de variabilitate ereditară prezentă și gradul în care aceasta este transmisă de la o generație la alta. Studiul curent a avut ca scop evaluarea moştenirii unor caractere asociate cu productivitatea în populațiile descendente de la hibrizi F1 sănătoşi sau infectaţi cu virus (Virusul Mozaicului Tutunului (VMT)+Virusul X al Cartofului şi VMT). Au fost analizate 5 combinaţii hibride interspecifice (Nistru x S. cheesmaniae, Nistru x S. pimpinellifolium var. racemigerum, Nistru x S. pimpinellifolium, Novicioc x S. cheesmaniae, Novicioc x S. pimpinellifolium) şi 2 combinaţii intraspecifice (Nota x Crasnoiarschii rannii şi Novicioc x Colocolcic). În populaţiile interspecifice F2 au fost selectate plante individuale si analizată descendenţa lor în F3-F4. În cazul combinaţiilor intraspecifice în F2 a fost aplicată selecţia de grup după masa fructului, iar grupele au fost evaluate în F3-F4. Varianţa genotipica şi fenotipică au fost calculate în baza analizei varianţei, iar în cu ajutorul lor şi heritabilitatea în sens larg-H2. Pentru analiza moştenirii caracterului masa fructului în asociere cu alte caractere valoroase pentru ameliorare (creştere determinată a plantei, conţinut sporit de substanţe uscate solubile (SUS) din fruct, aciditatea fructelor (pH), număr mare de fructe per plantă) s-au studiat 3 generaţii consecutive F2-F4 din cadrul a 5 combinaţii hibride interspecifice. Astfel, selectarea formelor potrivite fenotipic pentru caracterul masa fructului asociat cu alte caractere valoroase, indică 2 asupra unei probabilităţi mari de moştenire în generaţii consecutive F2-F3 (H 0,54-0,96). În mod similar, probabilitatea de transmitere a manifestării caracterului este destul de mare în generaţiile F3- F4, valorile coeficienţilor de heritabilitate încadrându-se în limitele 0,45-0,96. Deşi per total factorul infecţia virală a avut o contribuţie statistic semnificativă asupra variabilităţii caracterului masa fructului, aportul lui a fost devansat de factorul genotip. Astfel, în cazul populaţiilor hibride F2 care au avut in calitate de formă materna soiul Nistru (3 combinaţii) valorile H2 au fost similare în variantele descendente de la plantele infectate şi cele sănătoase, dar în funcţie de forma paternă plus aplicarea infecţiei virale H2 a variat între 0,53-0,91 comparativ cu 0,72-0,89 în lipsa infecţiei. În ceea ce priveşte caracterul SUS, selectarea formelor cu indici valorici mai mari de regulă determină o manifestare scontată şi în următoarele generaţii. Analiza formelor individuale în generaţiile F3-F4 ne indică valori relativ mari ale H2 -0,51-0,91 pentru SUS. În cazul formelor selectate cu soiul Novicioc 2 (F2-F3) variantele descendente de la plantele martor au indicat pentru H valori de 0,42 şi 0,38 pentru SUS şi indicele pH, respectiv, şi 0,96 şi 0,99 respectiv, pentru experienţă. Pentru indicele pH coeficientul de heritabilitate în cazul unor forme a indicat valori mici în generaţiile F3-F4. Selecţia unor grupuri fenotipice din cadrul populaţiei intraspecifice şi analiza ulterioară a moştenirii caracterului selectat a determinat unele momente specifice în funcţie de originea plantelor. Astfel, în cazul generaţiilor consecutive F3-F4 descendente de la plantele F2 cu o anumită masă a fructului - fracţia 20-50 şi 50-100 g – s-a stabilit că în funcţie de factorul fracţie – H2 a indicat valori de 0,67 şi 0,79, pentru Nota x Crasnoiarschii rannii şi Novicioc x Colocolcic, respectiv şi mult diminuat, 0,11 şi 0,13, în cazul în care s-a estimat prin prisma interacţiunii factorilor fracţie x generaţie. O tendinţă diferită s-a observat în cazul evaluării populaţiilor F3-F4 descendente de la variantele infectate cu virus în F1. În mod similar variantelor martor, analiza populaţiilor hibride F3-F4 dispersate conform 2 provenienței din fracţii în F2, dar descendente de la hibrizi F1 infectaţi, H a constituit 0,10 şi 0,84,în funcţie de factorul generaţie pentru populaţiile Nota x Crasnoiarschii rannii şi Novicioc x Colocolcic şi 0,63 şi 0,10 respectiv dacă se ia în calcul selectarea diferenţiată după caracterul masa fructului în generaţii consecutive – fracţie x generaţie. Pentru populaţiile descendente de la hibrizii infectaţi cu virus manifestarea unor valori mai mari ale caracterului masa fructului este în proporţie de 63% – 94% determinată de interacţiunea factorilor fracţie x generaţie.

165 PARTICULARITĂȚILE BIOLOGICE ȘI DE PRODUCȚIE LA TOMATE CU CREȘTERE INDETERMINATĂ

Mihnea Nadejda, Cristea N. Institutul de Genetică, Fiziologie și Protecție a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail: [email protected]

Obţinerea unor producţii mari şi constante de tomate şi asigurarea consumului lor pe parcursul întregului an se poate realiza, pe de o parte, prin aplicarea unei agrotehnici avansate şi, pe de altă parte, prin folosirea unor soiuri cu diferit grad de precocitate, productive, rezistente la boli şi dăunători, cu fructe de calitate înaltă. Scopul cercetărilor a constat în elucidarea formelor perspective de tomate, stabile după un complex de caractere utile (precocitate, productivitate, mărimea şi calitatea fructelor) şi selectarea celor mai performante pentru includerea lor în procesul de ameliorare. În rezultatul evaluării formelor de tomate în baza precocității s-a constatat o variabilitate destul de înaltă a perioadelor interfazice. S-au observat deosebiri semnificative între perioada interfazică apariția plantulelor în masă - începutul înfloririi care s-a încadrat în 37-64, iar pentru perioada a doua interfazică 40-52 zile. Soiurile au format două grupe de precocitate: foarte precoce -< 105 zile și precoce – 106- 110 zile. Acest fapt se datorează temperaturilor înalte pe parcursul vegetației și secetei îndelungate care au stimulat coacerea fructelor. La mostrele studiate amplituda de variaţie a înălţimii plantelor s – a încadrat în limitele 78,6-154,2 cm. Variabilitatea fenotipică a înălțimii plantelor a fost în limitele 7,8…34,6%, cu media de 16,5%, astfel caracterul manifestând o normă de reacție restrânsă. Un rol important se acordă însușirilor fructului de tomate. Datele au demonstrat deosebiri esenţiale ale genotipurilor conform masei medii a fructului. Au fost puse în evidenţă 10 forme cu fructe mari 149,2…268,3 g. Diapazonul de variația a caracterului a fost de 15,0-52,9, iar coeficientul de variaţie a masei fructului la grupul de tomate analizat a fost de 27,3%, ceea ce indică asupra variabilităţii pronunțate a caracterului. S-a constatat variabilitatea nesemnificativă a lungimii și lățimii fructului la formele studiate (4,7…18,2% și 6,4…18,5%, corespunzător). Majoritatea formelor au înregistrat un coeficient de variaţie ce nu a depăşit 10%. Variabilitatea medie a mostrelor evaluate a constituit 9,6% pentru lungime fructului și 11,3% - lățimea fructului, ceea ce permite calificarea caracterelor ca fiind cu heterogenitate joasă. Formele evaluate în baza grosimii pericarpului s-au deosebit esențial, indicele variind în limitele 3,0…7,0 mm. Calculul coeficientului de variație a demonstrat o variabilitate pronunțată a caracterului evaluat – 26,7%. Datele au demonstrat un diapazon larg al variabilităţii grosimea mezocarpului la mostrele analizate: V= 6,8-22,2%, media parametrului constituind 14,8% ceea ce demonstrează o variabilitate medie a lotului în studiu, conform caracterului analizat. Studierea numărului de loje în fruct a demonstrat că la majoritatea soiurilor a fost mai mult de 4 -5 cu așezare regulată, iar media coeficientului de variație a fost de 24,5%. Testarea soiurilor de tomate a permis elucidarea unei variabilități semnificative a productivității care depinde atât de genotip, cât şi de condiţiile climatice. Conform datelor obţinute, recolta generală a variat între 19,1 t/ha (Oranjevîe sosulki) și 71,7 t/ha (Buzău 22), iar producţia marfă – între 16,3 – 58,3 t/ha la soiurile respective. Prin construirea dendogramelor de repartiție a formelor, ca indici de clasificare servind masa fructului, lungimea și lățimea fructului, grosimea pericarpului, grosimea mezocarpului, numărul de loje seminale s-a constatat separarea genotipurilor în 2 branșe bine distincte. Cea mai înaltă similitudine a fost înregistrate la formele Doci de barao și Rufinna. Astfel, analiza caracterelor utile ale formelor studiate din colecție a evidenţiat o variabilitate largă privind durata perioadelor interfazice, forma tufei, fructului, productivitatea generală, cota fructelor marfă, etc, ceea ce permite recomandarea celor mai performante ca forme iniţiale pentru hibridare şi obţinerea soiurilor şi hibrizilor noi cu diferită destinaţie.

166 EVALUAREA COMPARATIVĂ A MOSTRELOR DIN COLECȚIA DE SUSAN DUPĂ CONȚINUTUL DE ULEI ÎN SEMINȚE

Mogîlda A. Institutul de Genetică, Fiziologie și Protecție a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail: [email protected] Susanul (Sesamum indicum L.) face parte din familia Pedaliaceae. Fiind o cultură importantă din punct de vedere economic, este cultivată pe scară largă în multe țări ale lumii, în special, în zonele tropicale și cele subtropicale. Pe parcursul a mii de ani semințele de susan fusese utilizate nemijlocit în hrană, mai târziu, însă, au devenit sursă prețioasă pentru obținerea uleiului alimentar, pastei, prăjiturilor, articolelor de cofetărie și făinii. Utilizarea extinsă a susanului se datorește conținutului stabil în ulei vegetal, precum și proteine nutritive. Compoziția chimică a susanului demonstrează că semințele lui reprezintă o sursă importantă de uleiuri (44-58%), proteine (18-25%), carbohidrați (11- 13,5 %) și cenușă (± 5%). Uleiul are un gust leger, conține acizi grași nesaturați în proporție de aproximativ 85%. Este cunoscut faptul că uleiul de susan rezistă deteriorării oxidative în comparație cu alte uleiuri alimentare, deoarece conține în mod natural antioxidanți, cum ar fi tocoferolii și lignanii. Conținutul ridicat de acizi linoleici și linolenic esențiali reprezintă un alt merit al uleiului de susan în calitate de sursă alimentară. În complexul de metode privind evaluarea fondului genetic de susan, de rând cu cele, spre exemplu, morfo-botanice, se implică serios și investigațiile biochimice. Caracterizarea genotipurilor după indici biochimici permite de a obține o descriere mai completă a mostrelor, fapt necesar pentru conservare, dar și pentru ameliorare. Ca o alternativă de analiza biochimică convențională, metoda de spectrometrie de rezonantă magnetică nucleară (RMN) a apărut drept un instrument foarte puternic și versatil pentru caracterizare. Spre deosebire de cele mai utilizate metode de caracterizare, cum ar fi cromatografia și spectrometria de masă, RMN permite investigațiile atât în corpuri solide, cât și în soluții. Metoda RMN este, de asemenea, capabilă să detecteze simultan și să cuantifice un număr de constituenți într-un singur spectru. Metoda cantitativă prin spectrometrie RMN prezintă avantaje față de unele metode de rutină prin simplitate, rapiditate, recunoaștere selectivă și prin determinarea cantitativă a metaboliților în matricele biologice complexe. Scopul acestei investigații a fost de a determina conținutul de ulei în semințele mostrelor din colecția de susan prin metoda RMN. Materialul semincer utilizat pentru aceste analize a fost obținut în anul 2018 în experiențele din câmpul experimental al Institutului de Genetică, Fiziologie și Protecție a Plantelor. Semințele au fost colectate de la bază spre vârful plantelor. Experimentul s-a realizat în trei reperări, pentru fiecare repetare s-au întrebuințat câte 25 de semințe la aceeași temperarură de 190C. In cadrul studiului efectuat a fost determinat conținutul de ulei la 40 de genotipuri din colecția de susan. Valorile acestui indice la mostrele elucidate au variat de la 47% (UCR/82 n 209-SUAT) până la 57% (Кubaneț 57, Kadet). Pentru 26 de genotipuri s-a constatat că conținutul uleiului (53- 57%) este mai ridicat comparativ cu martorul (Solnecinâi, 52%), pentru 8 mostre cunținutul de ulei (47-51%) s-a dovedit a fi mai mic față de martor, iar pentru 7 forme n-au fost semnalate schimbări în raport cu soiul martor. Din numărul total de mostre ale colecției, 8 genotipuri au semințe de culoare întunecată (maro închis, maro deschis, bej închis) cu un conținut de ulei ce variază între 47-56 %, iar 32 de genotipuri au seminte de culoare albă cu conținut de ulei de la 49 până la 57%. S-a observat că la martorul (Solnecinâi) conținutul de ulei era cu 5% mai ridicat și cu 5% mai scăzut față de cele 32 mostre. Avantajul metodei de rezonanță magnetică nucleară folosite constă în faptul că materialul semincer rămâne neafectat și poate fi reutilizat prin semănare sau alte experiențe de laborator. Prin urmare, în urma efectuării experienței s-au obținut date experimentale privind conținutul uleiului în semințele mostrelor din colecția de susan. Rezultatele demonstrează valori destul de ridicate ale indicelui studiat la diferite genotipuri. Unele forme prezintă interes pentru a fi utilizate în programele de ameliorare ale caracterelor biochimice.

167 HIBRIZI AUTOHTONI DE SORG ZAHARAT PENTRU OBȚINEREA PRODUSELOR ALIMENTARE, NUTREȚURILOR ȘI RESURSELOR BIOENERGETICE

Moraru Gh. Institutul de Genetică, Fiziologie şi Protecţie a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail: [email protected]

În Republica Moldova sunt creaţi hibrizi de sorg zaharat: Porumbeni 4, Porumbeni 5, SAŞM 1 şi SAŞM 2, care conform proprietăţilor lor morfologice şi agronomice: grosimea tulpinii 30-45 mm şi înălţimea ei 3,7-4,5 m, precum şi dimensiunile majorate ale frunzelor, conţinutul de celuloză 35- 38 % în masa uscată (MU) şi cantitatea de zahăr în sucul tulpinii până la 18-22%, devin analogi trestiei de zahăr. Acești hibrizi, omologaţi în RM şi în alte ţări, asigură productivitatea biomasei de până la 90-100 t/ha/an în condiţii neirigabile şi peste 150-160 t/ha/an la irigare, nu sunt pretențioși la fertilitatea solului, concomitent fiind rezistenți la secetă și la atacul agenților patogeni și dăunătorilor. Din 100 t de biomasa hibrizilor pot fi obținute: a) prin procesare cu utilizarea liniei tehnologice de prelucrare a trestiei de zahăr până la 50-55 t de suc (must) cu conţinutul de glucide de 14-16% şi 25-30 t MU de biomasă (bagasă), ori b) prin însilozare cu obținerea furajelor cu capacitatea de 19-23 t unităţi nutritive, sau mai mult de 25 mii m³ de biogaz. Prelucrarea sucului extras din biomasă asigură obţinerea a 4,5-5 t/ha de bioetanol sau 8-10 t/ha de sirop glucidic, care după calitate este similar cu mierea de albini. Din 30 t MU de begasă de sorg pot fi obţinute 16-18 mii m³ de biogaz, sau peleţi pentru a produce 15-17 mii kwh de energie electrică şi suplimentar aceeaşi cantitate de energie termică.

Hibrizii autohtoni pe parcursul perioadei de vegetaţie absorb din atmosferă până la 55 t CO2, pe când pădurea de foioase pe latitudini temperate - 16-18 t/ha/an. Descompunerea a rădăcinilor (14- 16 t/ha/an) îmbunătăţeşte fertilitatea solului, asigurând bilanţul pozitiv al humusului de până la 1,5 - 2 t/ha/an (echivalentul introducerii -100 t/ha gunoi de grajd). Tehnologia de cultivare a acestor hibrizi este similară celei de cultivare a porumbului pentru siloz. Preţul de cost a unei tone de biomasă a acestor hibrizi, cultivați în condițiile Republicii Moldova şi transportată la punctul de procesare în raza 10-15 km, constituie circa 180 lei MD (10,3 $) în preţurile anului 2017. Din biomasa hibrizilor cultivați în condițiile diferitor zone ale Republicii Moldova, au fost obţinute în liniile tehnologice industriale: bioetanol, sirop glucidic alimentar, nutrețuri valoroase şi peleţi energetici. Actualmente, la unele din produsele enumerate este elaborată documentaţia tehnică şi tehnologică, însușită multiplicarea formelor parentale şi producerea industrială a seminţelor hibride de generaţia întâi. În prealabil a fost testat procedeul de cultivare a hibridului SAȘM-1 în benzi (18 cm între două rânduri apropiate) cu majorarea distanței dintre benzi de la 70 la 90 cm. În rezultatul testării sunt înregistrate următoarele majorări: cu 23,5% (38,5 t/ha) producția de biomasă (din 202,45 t/ha obținute), cu 1,5% conținutul glucidelor în sucul tulpinilor (15,1%) și cu 28,7% (2,6 t/ha) randamentul zaharului absolut (100%), posibil de extras din tulpini - 11,67 t/ha. Drept rezultat s-a mărit grosimea tulpinilor și s-au fortificat țesuturile mecanice, ceea ce minimizează polignirea plantelor în condiții cu vânturi intensive, însoțite cu ploi torențiale și în cazuri de întârziere cu recoltarea.

168 ENRICHMENT OF PLANT GENETIC RESOURCES EX SITU COLLECTIONS IN BULGARIA

Nikolaya Velcheva Institute of Plant Genetic Resources – Sadovo, Bulgaria e-mail: [email protected]

During the period 1982-2019 the fund of National Genebank in IPGR Sadovo is enriched with 52,105 accessions. Electronic register Phyto 2000 optimizes the management of plant genetic resources in order to their targeted storage, study, reproduction, free exchange and use. 9,838 accessions are collected from expeditions, included local varieties and populations of home gardens and small farms and wild forms from their natural habitats. There are 36,392 genotypes, introduced by international free exchange. 5,875 breeding materials – lines and varieties, are registered. Collections from cereals, leguminous, technical and fodder crops, vegetables, medicinal and aromatic plants are created. All seed samples are recorded, according to the international standards of FAO and Bioversity International. Passport data includes taxonomic descriptions, biological status and eco-geographical origin of the accessions. There is a higher percentage (70 %) of accessions from foreign genebanks, centers for plant genetic resources and botanical gardens. The introduced germplasm is used as a source of valuable qualities in crop breeding. The organised datasets show the presence of valuable local germplasm in preserved collections, which are occupying 19 % of enrichment during the period. In response of National and International focuses the sustainable preservation and conservation of local germplasm is a main priority of the research activities of the Institute. A comparative low (11 %) is the number of stored materials from breeding programs in the country. This requires promoting the benefits of long-term storage of the new Bulgarian varieties and breeding lines, according to regulated access and intellectual property rights of breeders. Enrichment and documentation of plant genеfund, stored in the Genebank of IPGR Sadovo, is carried out under the Project "Preservation and Management of Plant Genetic Resources in Bulgaria" of Agricultural Academy.

169 ВНУТРИВИДОВОЙ ПОЛИХИМИЗМ ДИКОРАСТУЩИХ МЯТ МОЛДОВЫ

Пелях Елена, Мельник В. Государственный Университет, Кишинэу, Республикa Молдова e-mail: [email protected]

Нами проводилось сравнительное изучение экотипов и хемотипов дикорастущих видов мяты, собранных из естественных популяций на территории Молдовы : M.x verticillata nL., M. spicata L., M.longofolia (L.)Huds, M sylvestris L., M. arvensisL., M.arvensis var Vcrispata L., M.viridisL., M х.piperita L. (всего 22 экотипа). Растения, собранные в естественной среде обитания, высаживались на Биологической станции Университета корневищами и в последующие годы размножались вегетативно. В результате проведенных исследований было обнаружено значительное разнообразие экотипов по эфиромасличности, по компонентному составу эфирных масел и по их количественным соотношениям. При этом изученные мяты можно разделить на 3 группы хемотипов. Первую группу представляют три экотипа из центральной зоны Молдовы : M.longifolia (L.)Huds, (2 ) M.spicata L. которые син6тезируют ациклические компоненты – линалоол (5,0% - 64,2%)и линеалилацетат (1,4% - 41,2%), а так же сопутствующие ациклические спирты и сложные эфиры до (13,4%) - гераниол, геранидацетат, цитронеллол цитраль. Высокая эфиромасличность экотипов этой группы делает их привлекательными для дальнейшей селекции. Вторую группу составляют M.sylvestris L., M.arvensis var.crispata L. M.spicata L. , которые накаливают в основном соединения группы карвона до 72,9%, а M.spicata L. (район Хынчешть) отличается высокой эфиромасличностью (до 3,5%). В третью группу входят мяты M.x verticillata L., M.viridis L. M.piperita L. (все экотипы) один из экотипов M.longifolia (L.)Huds, которые синтезируют монотерпеноиды группы ментола в различных количественных соотношениях. Представляет большой интерес M.x verticillata L. с эфиромасличностью до 3,8% и содержащая до 75% ментола в эфирном масле. У всех экотипов основные количественные показатели варьируют в значительных пределах: эфиромасличность 1,9-3,2%, содержание ментола 23,2-64,1%. Особый интерес представляют экотипы M.viridis L. (Южная зона) и M.arvensis L. (Центральная зона), так как синтезируют значительное количество окиси пперитона и пиперитенона (до 57%), которые обладают сильными бактерицидными свойствами. Химическое разнообразие дикорастущих мят местной флоры открывает широкие возможности для использования в селекции. Мята как эфиромасличная культура хорошо адаптирована к почвенно-климатическим условиям Молдовы, и местные мяты с традиционным и нетипичным составом эфирного масла определенно могут представлять интерес для расширения ассортимента эфиромасличных и лекарственных растений.

170 STUDIES OF APRICOT (Prunus armeniaca L.) CHILLING UNITS REQUIREMENTS WITHIN LOCAL CONDITIONS OF CULTURE IN REPUBLIC OF MOLDOVA

Pintea Maria Research and Practical Institute for Horticulture and Alimentary Technologies, Chisinau, Republic of Moldova e-mail: [email protected]

Breeding, as well as introduction of new apricot varieties for the development of acceptable low-chill genotypes, began more than 100 years ago. Actually the demands of the global produce market include new characteristic for fresh apricot fruits. There are established that if the flower buds of apricot and other termophil species do not receive sufficient chilling temperatures during the completely release dormancy, trees will develop one or more of the physiological symptoms associated with insufficient chilling: delayed foliation, reduced fruit set and increased buttoning and, finally reduced fruit quality. The chilling requirements of selected temperate tree fruits and nuts expressed as the number of hours < 7°C needed to break dormancy of sexual reproductive system. December and January are usually the most critical months. If each of these two months has approximately 400 hours of temperatures below 7°C distributed fairly evenly, then troubles related to mild winters are less likely. Chilling requirements (CR) for breaking of dormancy and heat requirements for flowering were studied for 30 apricot cultivars, including 7 local and 20 introduced from different ecologo-geographic zones varieties which spanned the range of flowering times in this species. The studied varieties showed a range of chilling requirements (chill units, CU), between 400- 450 CU (Robada, Castleton, Lorna, Apache, etc. ) and 1400 CU (Costiujenskii, Nadejda, Krasnosciokii, Codrean, Harcot, Stark Early Orange, Patterson, Orange Red), though most of them showed chilling requirements between 800 and 1300 CU. The studied apricot varieties showed same differences concerning flowering date (for exemple: early flowering – Italian varieties and late flowering –some Romanian and Ukrainian) and the results indicate a high positive correlation between chilling requirements and flowering date, as well as a negative correlation between chilling requirements for breaking of dormancy and heat requirements for flowering. The number of hours below 7°C is a fair index of the adequacy of winter chilling. Both the absolute number and distribution of the hours below 7°C need to be considered. Apricot develop their vegetative and flowers (fruiting) buds in the summer in the frame of different kind of fruiting formations, depending of variety. As winter approaches, the already developed flower buds go dormant in response to both shorter day lengths and cooler temperatures. This dormancy or sleeping stage protects flower buds from oncoming cold weather. Once buds have entered dormancy, they will be tolerant to temperatures much below freezing and will not grow in response to mid-winter warm spells. These buds remain dormant until they have accumulated sufficient chilling units of cold weather. When enough chilling accumulates, the flower buds are ready to grow in response to warm temperatures. As long as there have been enough CUs the flower and leaf buds develop normally. Our embryological investigations demonstrate that varieties with short period of endodormancy have an accelerate rithm of microsporogenesis processes during January. In the years when during February there are only some days with cold of 15-degree majority of flowers of respective buds are killed. It should be noticed that after milder winters it takes longer time to collect the necessary chilling units and same introduced varieties with short chilling requirements could develop high flowering and respective fructification.

171 STUDIES OF LOCAL WALNUT (Juglans regia L.) VARIETIES AND BIOTYPES REGARDING POMOLOGICAL ZONES OF REP. MOLDOVA

Pintea Maria, Cozmic R., Borozan E., Sakali Natalia Research and Practical Institute for Horticulture and Alimentary Technologies, Chisinau, Republic of Moldova e-mail: [email protected]

Republic of Moldova is a country with permanent walnut culture tradition. This obtained crop (mainly from local bearing trees originated from seed) has good productive potential within central pomological zone of Republic of Moldova. Actually it is indispensable to cultivate adequate varieties (local as well as introduced from similar areas) in concordance with the specific ecological conditions and market demands. It is indispensable to notice that a lot of local registered varieties set nuts in, or before, the third growing season, even during the first year after grafting. Another useful reproductive trait in some of them is relatively long period of flowering, which could be a valuable aid in avoiding spring frost damage. The trait of multiple-nut clusters, commonly 6 to 9 nuts on spikes as compared to main varieties with 2 to 3 per cluster, offers the potential for greatly increased yields, but this characteristic is rarely expressed (for example for variety Calarash). Particular importance for walnut varieties, created in Research and Practical Institute for Horticulture and Alimentary Technologies is resistance or tolerance to important diseases, e.g., walnut blight, anthracnose, and various leaf fungal diseases. Evaluation and exploitation of such local varieties like Kishinevskii, Skinoskii, Cogalniceanu, Cazacu, Costiujeni, etc. within industrial plantations demonstrate theirs relatively high vigor, early flowering, protoginous type of dichogamy and low manifestation of lateral bearing capacity. According the orchards investigations, provided by president of Moldovan Union of Producers of Nuts Crop Associations, mr Tirsina Oleg new explored variety Pescianski is very interesting. “It is a half-lateral variety that enters into production by the 6th year and, if care is well taken of, it is very fruitful. As a well-known Italian walnut grower put it, Pescianski is a very Hartley- like variety. In addition to high yield potential, this variety is famous for its excellent kernel quality and easiness of shelling. It has a 57% kernel ratio and its very thin shell that makes it suitable for the kernel production, but also for in shell sale as customers love to crack it open”. Preliminary temporary tests of introduction in culture of protandrous with lateral bearing capacity varieties like Lara, Fernor, Chandler shows that they are well adapted for central pomological zone. For nominated varieties there are very common comparatively late and long flowering period of pistilate flowers. In the same time our studies were focused also on evaluation of local walnut biotypes from different natural populations of local pomological zones comparatively to autochthonous and some introduced registered varieties. The assessment enclosed walnut main descriptors, and sensory attributes including nut form, weight, structure (including index of shape form, total weight, index of kernel/endocarp relation), kernel structure, flavor, texture, eating qualities, etc. The nut shape of the biotypes, selected as important ones was mainly rated oblate to ovate. Biotypes of north zone were recorded to have the whitest shell color and high index of kernel/endocarp relation: 45-59% of kernel were noticed at 13 biotypes. Most of the biotypes had a moderate kernel fill and shriveling score. The highest score of aroma, flavor and sweetness intensity was noted in central pomological zone (1Cmd, 2Cmd, 3Cmd, 17Cmd, while bitterness, puckeriness and sweetness assessments greatly changing among varieties and biotypes. Crispness rating of the cultivars/types was almost the same in all zones. Thus, on the basis of obtained data we suppose the existence of genetically important native trees all around the Moldovan area. We are considering that there is necessary to conduct in-situ and on-farm inventories also for profound assessment and future utilization of the mentioned walnut gene fond.

172 COMPREHENSIVE ONLINE DATABASE OF MEDICINAL AND AROMATIC PLANTS

Romanciuc Gabriela Institute of Genetics, Physiology and Plant Protection, Chisinau, Republic of Moldova e-mail:[email protected]

Genetic biodiversity of medicinal and aromatic plants is under the threat of extinction as a result of urbanization of natural and agricultural areas, habitat loss due to harvesting of raw material and changes in land use and agricultural practice. According to the International Union for Conservation of Nature and the World Wildlife Fund, there are between 50,000 and 80,000 flowering plant species used for medicinal purposes worldwide. Among these, about 15,000 species are threatened with extinction from overharvesting and habitat destruction and 20 % of their wild resources have already been nearly exhausted with the increasing human population and plant consumption (Schippmann et al., 2015). However, the distribution of medicinal plants is not uniform across the world. For example, China and India have the highest numbers of medicinal plants used, with 11,146 and 7500 species, respectively, followed by Colombia, South Africa, the United States, and another 16 countries with percentages of medicinal plants ranging from 7 % in Malaysia to 44 % in India versus their total numbers of plant species (Chen et al. 2016).While the importance of medicinal plants is widely accepted, there is a serious lack of comprehensive information on the existing collections.This paper presents in brief, activities in documentation of plant genetic resources (PGR) relevant to medicinal and aromatic plants (MAPs).Information for medicinal plants is available from the various database, such as GRIN database in USA (http://www.ars-grin.gov/cgi-bin/npgs), the Multiscript Plant Name Database in Australia (http://www.grm.landfood.unimelb.edu.au/ plantnames) and Vedic Life Sciences Herbal Consultancy and Research (http://www.ayuherbal.com), at the European level can be mentioned EURISCO catalogue etc. Actually, GRIN contains information on 243 family, 2563 genera, 16016 species and 596909 accessions, from which MAP is represented by 3391 species. GRIN database contains information on MAP collections from different countries. The countries with a rich collection of MAPs recorded in GRIN are: China are recorded 113 family, 346 genus and 583 species of MAP, India is represented by the 91 family, 255 genus and 318 species, followed by Vietnam with 56 family, 113 genus and 292 species, and Republic of Korea with 53 family, 108 genus and 130 species etc. In EURISCO catalogue are recorded 6393 genera, 43160 species and 2008116 accessions. The catalogue contains an important minimum set of passport data, frequently and automatically updated from the national inventories. These data are based on the revised version of the FAO/Bioversity Multi-crop passport descriptor list (MCPD), finalized in December 2015. The usefulness of this catalogue specifically for medicinal and aromatic plants (MAPs) is dependent on decisions taken at national level to provide EURISCO with ex situ collection data for MAPs, through the national inventory. The largest MAPs collections uploaded to EURISCO are from following genus Linum (20661 accessions), Papaver (5 072 accessions), Rosa (4550), Salvia (1643), Petroselinum (1573), Coriandrum (1163), Mentha (1130), Hypericum (1045), Ocimum (931), Origanum (619), Thymus (579), Carum (454), Tagetes (416), Calendula (367), Lavandula (357) etc.Currently, the number of accessions related to MAPs available from EURISCO is not so high compared to other genus such as Triticum (194,780 accessions), Hordeum (122,619), Zea (65,576) etc. The important constraints related to documentation of MAPs include: plants with medicinal values not fully identified, inventoried and characterized, information and knowledge not being adequately documented and disseminated, and consequent genetic erosion of medicinal plants.

173 STUDIEREA ŞI CREAREA SOIURILOR NOI DE GRÂU DURUM DE TOAMNĂ ÎN MOLDOVA

Rotari Silvia, Leatamborg Svetlana, Gore A. Institutul de Genetică, Fiziologie și Protecția Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail: [email protected]

Actualmente grâul durum de toamnă pentru producţia comercială şi consumul uman este a doua specie de Triticum ca importanţă după grâul comun. În Moldova această cultură este cultivată pe suprafeţe mici deoarece există pericolul îngheţului. De aceea în unii ani nefavorabili are loc pierirea plantelor acestei culturi, ceea ce duce la un grad înalt de rărire a semănăturilor. Sporirea productivităţii grâului durum de toamnă este una din cele mai importante sarcini ale ştiinţei şi practicii agricole. Prin urmare este necesar de a crea soiuri noi cu un înalt nivel de productivitate, rezistente la iernare şi la alţi factori abiotici şi biotici ai mediului înconjurător. În baza studierii materialului iniţial după caracterele valoroase au fost selectate cele mai bune soiuri după caracterele care ne interesează şi au fost utilizate în hibridări ca forme parentale. Pentru obținerea unor hibrizi noi de grâu dur de toamnă am utilizat două metode de hibridare: intraspecifică și interspecifică. În anii 2016-2018 am obţinut 100 hibrizi intraspecifici cu o rată de prindere ce a variat în limitele de 5% şi 84,5% şi 140 interspecifici cu o rată de prindere ce a variat în limitele de 0 şi 82,2% . În rezultatul studierii procentului de legare a hibrizilor F0 interspecifici şi intraspecifici, am constatat că rata de prindere a boabelor a fost foarte variată şi depinde de tipul combinaţiei hibride, de condiţiile mediului ambiant cât şi de compatibilitatea soiurilor utilizate ca forme parentale. Cel mai mare procent de germinaţie s-a înregistrat la hibrizii intraspecifici şi a variat în limitele de 55,5 şi 64,5%. La hibrizii interspecifici a variat în limetile de 32 şi 50%. Prin urmare boabele hibrizilor interspecifici în comparaţie cu a celor intraspecifici au un procent de germinaţie mai mic. Rezistenţa la iernare este mai mare la hibrizii F1 la care ca formă maternă s-a utilizat grâul comun şi anume soiurile Cosoviţa, Plutos, Scagen şi al. Genitorii au iernat comparativ bine, la grâul durum 83–90% şi comun 85–95%. Cercetările efectuate asupra comportării hibrizilor interspecifici au demonstrat, că în F1 se manifestă un heterozis somatic pronunţat în ceea ce priveşte înălţimea plantei, lungimea spicului şi numărului de spiculeţe. La hibrizii intraspecifici vigoarea hibridă este mai accentuată şi anume se manifestă mai bine heterozisul reproductiv după numărul de boabe în spic, greutatea lor şi greutatea la 1000 boabe. Selecţia individuală s-a început din generaţia a treiea şi a fost prelungită în generaţiile ulterioare. În ultimii 3 ani sau studiat în câmpul de selecţie 7500 linii selectate din peste 200 combinaţii hibride. În câmpul de control s-au studiat 150 linii. Cele mai bune depășesc soiul martor cu 0,1-1,6 t/ha în anul 2016, cu 0,86-2,36t/ha şi cu 1,5-3,16 în anul 2018. Cea mai bună productivitate în cîmpul de control s-a obținut în anul 2018. Soiurile de grâu durum de toamnă din câmpul de concurs, în anii 2016- 2018, au demonstrat un potențial de productivitate variat. Recolta soiurilor de grâu durum, în anul 2016, variază între 3,3 și 4,8 t/ha, pe când în anul 2017, ea atinge nivelul de 6,1şi 6,8 t/ha şi în anul 2018 5,3 şi 6,8 t/ha.Toate soiurile studiate în câmpul de concurs, în anul secetos 2016 au demonstrat un surplus de boabe față de martorul Hordeiforme 335, de la + 0,1-1,1 t/ha. În câmpul de multiplicare s-au studiat soiurile de perspectivă de grâu durum de toamnă: Auriu 2, Sofidurum, Leucurum 2 şi soiul martor Hordeiforme 335. Cele mai bune după productivitate sunt soiurile Auriu 2 şi Sofidurum, care pe parcursul anilor de cercetări au depăşit soiul martor cu 0,1-0,5 t/ha în anul 2016, cu 0,1-0,5 t/ha 2017 şi 0,6-1,6 t/ha în anul 2018. Aceste soiuri având rezultate înalte atât după productivitate cât şi după rezistenţa la factorii abiotici şi biotici ai mediului ambiant au fost transmise la Comisia de Stat pentru încercarea soiurilor la diferite sectoare detestare a soiurilor.

174 ОЦЕНКА ЖАРОСТОЙКОСТИ ГИБРИДОВ ТОМАТА, ПОЛУЧЕННЫХ МЕТОДАМИ ГАМЕТОФИТНОЙ СЕЛЕКЦИИ

Салтанович Т.И., Дончилэ А.Н. Институт генетики, физиологии и защиты растений, Кишинэу, Республика Молдова e-mail:[email protected] Процесс создания новых современных сортов для конкретных почвенно-климатических условий предполагает использование сочетания различных методов диагностики устойчивости с целью характеристики их адаптивных возможностей. Для оценки устойчивости генотипов селекционеры используют комплекс таких показателей как способность семян к прорастанию, всхожесть и выживаемость семян после их прогревания, жизнеспособность и устойчивость мужского гаметофита и др. Все эти методы диагностики применяют в лабораторных условиях, т.к. они позволяют легко моделировать и воспроизводить повторно условия внешней среды. Одним из способов определения термоустойчивости генотипов может быть оценка их жаростойкости по ростовой реакции проростков после прогревания их при высокой температуре (Ивакин, 1979). На основе использования этого метода нами проведены исследования, цель которых состояла в оценке жаростойкости гибридов томата, полученных методами гаметофитной селекции по ростовой реакции проростков. Для проведения экспериментов использовали набор из 10 гибридных комбинаций F4, которые были предварительно отселектированы в результате 4-х циклов гаметного отбора. Анализ качества мужского гаметофита этих генотипов показал, что среднее значение жизнеспособности их пыльцы в условиях высокой температуры было довольно высоким и превышало уровень 50,0%, более того у половины гибридов значения этого показателя достигали уровня 65,1%. Обработка полученных результатов в едином дисперсионном комплексе показала, что выявленная изменчивость определяется достоверно (P<0,001) генотипом на 6,0…18,1%, температурой – 75,3…82,0% и их взаимодействием. Отселектированные комбинации проявили также довольно высокий уровень термоустойчивости пыльцы – 56,0…62,2%. Для оценки эффективности гаметофитного отбора проведено определение жаростойкости генотипов и на стадии спорофита по ростовой реакции проростков после прогревания их при высокой температуре. Как показали результаты наших исследований, у анализируемых гибридных комбинаций отмечен высокий процент прорастания семян. Так, у половины генотипов значения этого показателя превышали 90,0%, тогда как у некоторых комбинаций отмечено варьирование в пределах 77,5…88.0%. Одновременно показано, что средняя длина проростков до их прогревания изменялась незначительно (0,5…1,5см) в зависимости от комбинации скрещивания. Действие прогревания оказывало существенное влияние на проростки, длина которых по сравнению с контрольными значениями уменьшилась на 16,7…33,5%. Результаты применения теста ANOVA показали достоверность ( Р<0,001) влияния генотипа и температуры на изменчивость длины проростков, вклад этих факторов составлял соответственно 10,1 и 88,5%. Таким образом, действие температуры было ключевым фактором изменчивости анализируемого показателя. Cреди изученных гибридов как наиболее устойчивые выделенны четыре комбинации F4 JubiliarxMilenium, JubilarxTomis, JubiliarxPrestij, MileniumxMihaela. Таким образом, в результате совместного использования серии циклов гаметофитного отбора, определения жаростойкости гибридов на стадии проростков и генетико-статистического анализа выделены и рекомендуются жаростойкие генотипы для использования в селекции.

175 ВАРИАБЕЛЬНОСТЬ КАЧЕСТВА МУЖСКОГО ГАМЕТОФИТА СОРТОВ ТОМАТА В УСЛОВИЯХ ВОДНОГО ДЕФИЦИТА

Салтанович Т.И. Институт генетики,физиологии и защиты растений, Кишинэу, Республикa Молдова [email protected]

Известно, одним из факторов окружающей среды, ограничивающих продуктивность большинства сельскохозяйственных культур, является засуха, действие которой весьма негативно и на репродуктивных стадиях развития (Вasu, Kumar, 2016). Установлено, что процесс селекции засухоустойчивых генотипов затруднен ввиду сложного полигенного контроля признака и его низкой наследуемости (Senapati, Stratonovitch et al.,2018). Цель проведенных исследований состояла в идентификации и выделении засухоустойчивых генотипов томата на основе изменчивости качества мужского гаметофита томата в условиях водного дефицита. Исследования проводили с сортами томата; качество мужского гаметофита оценивали в лабораторных условиях по вариабельности ряда функционльных признаков пыльцы на селективных питательных средах, моделирующих действие недостатка влаги. Результаты экспериментов показали, что действие водого дефицита снижало жизнеспособность мужского гаметофита в среднем на 25,1% по сравнению с контролем. В этих же условиях формировались пыльцевые трубки, длина которых уменьшилась на 36,7% по сравнению с контрольными значениями, что может свидетельствовать о высокой чувствительность генотипов к действию водного дефицита на этапе прорастания пыльцы и роста пыльцевых трубок. Для выявления основных источников изменчивости анализируемых показателей проведена их обработка в двухфакторном дисперсионном комплексе. Установлено, что действие генотипа, водного дефицита, а также их взаимодействие было статистически значимыми (Р<0,001), при этом в общей структуре изменчивости водный дефицит был главным фактором детерминирующим вариабельность жизнеспособности пыльцы и длины пыльцевых трубок. Доля влияния генотипа в изменчивости этих признаков была более низкой и составляла 24,4 и 10,7 % соответственно. Среди изученных генотипов следует выделить 3 сорта Юбиляр, Милениум и Престиж, уровень устойчивости которых составлял 50,6…70,4%. Средним уровнем устойчивости характеризовались сорта Томиш и Эльвира, у которых значения этого показателя превышали 40,0%, наиболее низкая устойчивость пыльцы в наших экспериментах была отмечена у сорта Михаела (32,7%), что может указывать на высокую чувствительность зрелой пыльцы этого сорта к водному дефициту. При анализе устойчивости длины пыльцевых трубок выделился сорт Милениум, у которого значения данного признака были составляли 89,6%, что значительно выше по сравнению с другими генотипами. Следовательно, в условиях недостатка влаги пыльцевые трубки этого сорта могут успешно прорастать, формировать длинные пыльцевые трубки и принимать участи в оплодотворении. Два сорта (Престиж и Юбиляр) обнаружили средний уровень устойчивости этого показателя 46,5 и 27,4% соответственно, тогда как у остальных трех сортов значения признака были более низкими, что указывает на высокую их чувствительность к стрессу. Обобщая полученные результаты, можно заключить, что сорта Милениум и Престиж сочетали устойчивость пыльцы и устойчивость пыльцевых трубок. Анализ корреляций между признаками мужского гаметофита в оптимальный и стрессовых условиях выявил наличие достоверных положительных соотношений в 16% случаев, в том числе в 30,8 и 69,2% случаев отмечен высокий и средний уровень корреляций. Таким образом, действие водного дефицита детерминировало значительную часть изменчивости признаков мужского гаметофита; выявленная неравноценность пыльцевых зерен по уровню устойчивости позволила провести дифференциацию генотипов, а также выделить сорта, которые могут быть рекомендованы для выращивания в засушливых зонах.

176 Dentaria quinquefolia M. BIEB (brassicaceae) ÎN REZERVAȚIA PEISAJERĂ „DOBRUȘA”

Sfeclă V. Universitatea Agrară de Stat din Moldova, Chișinău, Republica Moldova e-mail:[email protected]

Problema conservării diversității organismelor vii, prezintă două aspecte distincte: identificarea speciilor rare, amenințate cu dispariția și elaborarea măsurilor necesare de salvare a lor; aplicarea acestor măsuri în cadrul sistemelor biocenotice periclitate. În cadrul cercetărilor floristice, efectuate în decursul anilor 2009-2019 în limitele rezervației peisajere „Dobrușa”, a fost identificată o specie nouă pentru flora acestei arii protejate, Dentaria quinquefolia M. Bieb. (=Cardamine quinquefolia (M. Bieb.) Schmalh.). Acest punct de creștere este nou și pentru Republica Moldova, amplasat la limita nord-estică pe teritoriul țării noastre. Specie rară inclusă în lista operațională a speciilor rare din flora spontană a R. Moldova [1], protejată prin Legea privind fondul ariilor naturale protejate de stat (Legea nr. 1538 din 25.02.1998), inclusă în Cartea Roșie a R. Moldova (ediția a 2-a și a 3-a), cu categoria de raritate – periclitată [Endangered (EN)]. Dentaria quinquefolia este o plantă perenă, cu rizom cărnos, orizontal, ramificat, de 5-7 mm în diametru, cu scvame triunghiulare. Tulpină de 20-40 cm înălțime, erectă, simplă, glabră. Frunze, de regulă 3, foarte rar 5, dispuse apropiat spre vârful tulpinii, imparipenat-sectate, din 5-7 foliole, lanceolat-liniare s-au oblanceolate, pe margine obtuz-dințate și scurt ciliate. Inflorescență racemoasă, formată din 5-7 flori actinomorfe, bisexuate, lung-pedicelate, cu petale purpuriu-violete. Fruct – silicvă erectă, de 35-50 mm lungime. Înflorește în aprilie-mai. Se înmulțește prin semințe și prin divizarea rizomului. Fructifică în iunie; semințele încolțesc primăvara. Specie mezofilă, mezotermă, slab acid-neutrofilă. Elementul geografic – pontic-caucazian, cu arealul natural de răspândire în țările Europei de sud-est, în Caucaz, Asia Mică și Iran [2, 3, 4]. Pe teritoriul Republicii Moldova, se întâlnește foarte rar în podișul Central Moldovenesc r- nele Ungheni (loc. Rădenii Vechi și Cornești) și Călărași (loc. Bahmut și Sadova), ocrotită teritorial în rezervația științifică „Plaiul Fagului”. Vegetează în păduri de stejar pedunculat cu carpen, în gorunete și făgete, crește în grupuri izolate a câte 5-7 exemplare, preponderent mature. Populația identificată în aria protejată „Dobrușa” este amplasată în subparcela 19G (47°49'10.5"N, 28°36'34.9"E). Vegetează pe un versant mijlociu, ondulat, cu expoziție nord-vestică, la altitudine de 260 m, în arboret natural fundamental de productivitate mijlocie, cu compoziția 60% – stejar pedunculat, 20% – frasin și 20% carpen, consistență aproape plină (K=0,8) și vârsta medie de 80 de ani. Această populație se extinde pe aproximativ 80-90 m2, constituită din 34 de fitoindivizi repartizați neuniform. Ponderea exemplarelor vegetative este de 40% și generative – 60%. Actualmente populația vegetează în condiții de dezvoltare relativ stabile. Factorii limitativi pentru habitatul acestei specii sunt: defrişările pădurilor, rărirea excesivă a arboretelor (prin lucrări silvoculturale), activităţi recreative ș.a. În preajma acestei populații, au fost identificate și alte specii rare: Galanthus nivalis L., Lilium martagon L., Veratrum nigrum L. și Tulipa biebersteiniana Schult. & Schult.f. Dat fiind faptul că acest punct de creștere este identificat pentru prima dată, respectiva populație necesită a fi ocrotită și monitorizată constant pentru a evidenția evoluția stării acesteia.

1. Ghendov V., Izverscaia T., Shabanova G. Pre-Identified Red List of vascular plants in the flora of Republic of Moldova. In: Revista Botanică. 2012, nr. 1 (5), p. 41-52. 2. Izverscaia T. Dentaria quinquefolia M. Bieb. În: Cartea Roşie a Republicii Moldova, ed. a III-a. Chișinău: Ştiinţa, 2015, p. 39. 3. Negru A., Șabanov G., Cantemir V., Gânju Gh., Ghendov V., Baclanov V. Plante rare din flora spontană a Republicii Moldova. Chişinău: CEP USM, 2002, 198 p. 4. Pînzaru P., Negru A., Izverscaia T. Taxoni rari din flora R. Moldova. Chișinău, 2002, 148 p.

177 Santolina etrusca (LACAITA) MARCHI & D’AMMATO IN EX SITU CONDITIONS

Sîrbu Tatiana, Şabarov Doina, Dica Ana National Botanical Garden (Institute) “Alexandru Ciubotaru”, Chisinau, Republic of Moldova e-mail:[email protected]

Santolina etrusca (Lacaita) Marchi & D’Ammato, family Asteraceae, is an endemic species, occurring in the central areas of Italy, particularly in Tuscany (that is why, in Italian, it is called Crespolina toscana). It is an evergreen subshrub, identified for the first time in the commune Radicofani, on the bank of the Orcia River, and described as a variety of S. chamaecyparisus L. (S. chamaecyparisus var. etrusca Lacaita, 1923) and then – as S. pinnata subsp. etrusca (Lacaita) C. Jeffrey. Later, in 1973, after some karyological (2n=18) and chorological research, it was raised to the rank of species by the researchers P. Marchi and G. D’Amamato. It occurs on arid hills, on clay soil, at altitudes of 100-800m. In its natural habitat, Santolina etrusca grows in association with Satureja montana L., Linum tenuifolium L., Fumana procumbens (Dunal) Green. Et Godr., Globularia punctata Lapeyr., Sedum sp. and some therophytes: Crupina crupinastrum (Moris) Visisani, Campanula erinus L., Chaenorhinum rubrifolium (Robill&Cast. Ex DC.) Fourr. etc. Because it is an endemic species, over 200 thousand seeds are stored in the Germplasm Bank of Tuscia. Besides, there are some specimens in the collections of living plants of botanical gardens (M. Fonk, A. Scoppola etc., 2007; Pignatti S., 1982). The NBGI received achenes of Santolina etrusca (23 pieces) by Delectus Seminum, from Munich Botanical Garden, in March 2017. The tests on the germination capacity, carried out in our laboratory, showed a coefficient of 57%, at a temperature of 20 C. Germination lasted for 17 days. The germinated seeds were immediately incorporated in substrate, in the greenhouse. The obtained plantlets (11 pcs.) were pricked out, and in the autumn of the same year, they were planted in open field. Only 5 plants survived to maturity. They entered the generative phase, observing the following ontogenetic program: seed, seedling, juvenile, immature, virginal, early and middle generative stages. Under the pedoclimatic conditions of the central area of our country, S. etrusca bloomed from the middle of June to the beginning of August. Outside their natural habitat (ex situ), the mature plants of this species are robust, highly branched, they grow about 30 cm tall and 35cm in diameter. The specimens in our collection consist of about 20-30 first-order shoots and about 10 second-order shoots each. The leaves are pinnate, glabrous, with chamomile flavour, alternate, emerald green, 2-3cm long, 0.3-0.4cm in diameter. The number of inflorescences varies from 23 to 38. The diameter of the anthodia – 0.7-1.1cm. The number of flowers in an inflorescence is 80-110. They are 4-6mm long, light yellow, hermaphrodite and autogamous. Angiolini C. (1996) claims that anemochory prevails, but also admits zoochory and hydrochory. Flowering and fruiting last for about 65 days. The plants produce achenes, but they aren’t fertile. The species of Santolina, present in our collection for several years, S. virens L., S. chamaecyparisus, S. insularis (Gennari ex Fiori) Arrigoni, which have previously been tested, also bloom and produce fruits, but the seeds, after repeated testing, do not germinate. So, they are propagated vegetatively, by stem cuttings, in spring or in autumn. The cuttings root easier in September-October. Santolina are valuable ornamental, medicinal and spice plants, they are used in skincare products and as repellents. The Santolina oil has antibacterial and anthelmintic properties, it is used in the treatment of digestive disorders etc. Since they are evergreens, Santolina plants look good year round. They can be grown in containers and used as indoor ornamental plants, preferably on terraces and balconies. In combination with other perennials, they can look impressively, especially if there are contrasting colours and shapes. Santolina plants can be shaped, so, they are suitable for hedges, borders and mixborders. They are drought and heat tolerant and are perfect for rockeries, terraced gardens and alpine gardens.

178 NON VIRAL DIFFERENTIATING CULTIVARS FOR WART POTATO PATHOTYPES IDENTIFICATION

Skoreyko A.M., Shevaga G.M., Gunchak V.M., Andriychuk T.O. Ukrainian Scientific-Research Plant Quarantine Station IPP NAAS, Ucraina е-mail: [email protected]

Wart potato pathogen received the statute of quarantine subject of global importance through it’s high hazard. So it is necessary rapid, reliable and low expensive methods for identification in- time determining disease sources. The biological method is wart potato pathotypes differentiation is identification on cultivar- differential. This method is the most spread. The criteria for cultivars put into the differentiating set is a clear reaction on pathogen defeating and enough number of differentiating material for trials providing. It is necessary to use non-viral differentiating cultivars for wart potato pathotypes differentiating, because the differentiation runs in the field terms in the sources of disease spread. The defeated material by other infection use may come to non-confirmed reaction of differentiating cultivars. So it may give error in diagnostics. The researches were provided on the base of Ukrainian scientific-research plant quarantine station IPP NAAS. The differentiating cultivars of different ripeness group serve as researches material. The meristem culture in combination with thermal therapy serves as source material for treating. The common pathotype (D1) and 4 aggressive pathotypes of disease agents 11-Mizhirrya; 13-Rachiv; 18- Yasinya and 22-Bystrets were indentified in Ukraine. So we need set differential cultivars for these pathotypes. The set of potato differentiating cultivars was treated in 1998 for differentiating and identification. The following cultivars belong to them: Poliska rozheva, Svitanok Kyivsky, Radych, Nezabudka, Prolisok, Beregynya, Kosen-95, Kobza, Spadschyna, Resource, Mizhgirska, Barbara and Bozhedar The present cultivars were developed and regionalized more than 20 years before. These cultivars were decayed. So the new cultivars- differentiators were selected and treated for developing pathotypes differentiating method of disease pathogen differentiating. The potato hybrids and cultivars of the first group belongs to test-assortment of first group. They are defeated by all five pathotypes of wart potato agents, which are spread in Ukraine: : 04 27- 14, 85 145-5, Poliska rozheva. The second group is potato cultivars defeated by four aggressive pathotypes. There are following cultivars: Slovyanka, Teteriv, Zagadka, Serpanok. The third group is defeated cultivars by 11, 13 and 18 aggressive pathotypes: Fantazy, Poran. 22 pathotype is defeated the cultivars: Chervona Ruta and Schedryk. Zabava is defeated by 13,18 and 22 pathotypes. Kalynivska is only defeated by 11 pahtotype. Malynivska is defeated by 13 pathotype. The potato cultivars are non-defeated by any pathotypes belong to fourth group. They are: Bazys, Santarka, Bozhedar. The new Ukrainian breeding potato test assortment was treated during 2013-2017. It allows to identify the existing pathotypes and to determine new wart potato isolates in Ukraine. The cultivars Pirovska, Legenda are belong to second group of potato test-assortment. They are defeated by different pathotypes of wart potato agents (11, 13, 18,22). The cultivar Dyvo belongs to the third group. It is defeated by 22nd pathotype, The cultivar Galzurna belongs to the fourth group. It does not defeated by any disease agent.

179 ASPECTE ACTUALE ALE CERCETĂRII AGRICOLE

Tabără V. Academia de Ştiinţe Agricole şi Silvice "Gheorghe Ionescu-Şişeşti", București, România e-mail: [email protected]

Civilizația umană a viitoarelor secole nu se poate concepe fără hrană, astfel că, pe fondul creșterii populațiilor umane la nivel global, nevoia de hrana se va accentua in condițiile in care resursele cunoscute și utilizate în prezent (fertilitatea solurilor, apă dulce, energia fosilă) vor suferi un declin din ce în ce mai accentuat, riscând să se epuizeze într-un viitor previzibil. Principalul obiectiv al cercetării agricole este acela de a stopa declinul și de a aduce sistemele agricole de producere de hrană, furaje și energie în situația de a satisface cerințele societății viitoare. In ultimele decenii ale secolului XX exploatarea de tip intensiv a fertilității solului a cunoscut evoluții exponențiale ajungându-se, în aproape toate zonele cu agricultură dezvoltată, la pierderea acesteia. Este evident că primul obiectiv al cercetării agricole este acela de a găsi mijloacele de stopare a declinului fertilității solurilor și, pe cât posibil, revenirea la nivelurile de fertilitate din perioada preindustrială. Următorul obiectiv generic de cercetare este definirea modalităților de reducere a impactului schimbărilor climatice pe toate palierele de manifestare a acestora: asigurarea cu apă dulce, temperaturi ambientale, insolație. Asociată primelor două direcții de cercetare apare ca imperios necesară luarea in cultură a noi specii de plante din flora agricolă și sălbatică autohtonă și a altor regiuni agricole, în concordanță cu noua ofertă de mediu generată de schimbările climatice. In aceeași ordine de idei, de-o manieră balansată trebuie stopat declinul biodiversității generale și repunerea / recuperarea pentru circuitul productiv a speciilor de plante agricole abandonate in perioada agriculturii de tip intensiv. Coroborate cu cercetările privind impactul schimbărilor climatice vor trebui consolidate cercetările vizând diminuarea amprentei ecologice a activității agricole concomitent generatoare și fixatoare de dioxid de carbon, responsabil absolut al încălzirii globale prin efectul de seră pe care-l creează. In acest context ameliorarea condițiilor de creștere a animalelor in sensul creării unor condiții de bunăstare, este în același timp obligație morală și nevoie absolută. Nu în ultimul rând sunt nevoile de asigurare a siguranței și securității alimentare consolidate de o anumită autonomie alimentară asociată specificității și tradițiilor naționale și asigurarea securității alimentelor, cu accent pe dezvoltarea alternativelor la proteina de origine animală provenită de la speciile de animale domestice. Cel mai vast domeniu de cercetare a viitorului agriculturii o reprezintă indubitabil garantare calității alimentului care nu poate fi concepută fără materii prime agricole înalt calitative, in obținerea cărora noile cuceriri inovative ale științelor biologice (modificarea genetică a organismelor, recombinarea genomului vegetal și animal, combaterea integrată a bolilor și dăunătorilor) vor deține rolurile de chei de boltă. Adăugând necesitate imperioasă de introducere a tehnologiei informației in gestiunea sistemelor de producție agricolă și de gestiune a pierderilor pe filierele de produs alimentar, avem o imagine a nevoilor de cercetare agricolă integrată și integratoare ca bază de dezvoltare a agriculturii viitorului.

180 ОЦЕНКА ИСХОДНЫХ РОДИТЕЛЬСКИХ ФОРМ ТОМАТА И ГИБРИДНЫХ КОМБИНАЦИЙ В ПЕРВОМ, ВО ВТОРОМ И ТРЕТЬЕМ ПОКОЛЕНИИ ДЛЯ ОДНОРАЗОВОЙ УБОРКИ

Цэпордей Алла, Ботнарь В., Сыромятникова Юлия, Котенко Евгения Институт генетики, физиологии и защиты растений, Кишинэу, Республикa Молдова e-mail: [email protected]

Исследование гетерозисного эффекта гибридов томата в поколениях F1-F3, представляет большой научный и практический интерес. Одним из наиболее удобных способов, позволяющих снизить себестоимость гибридных семян является их размножение и использование для продовольственных целях без проведения гибридизации каждый год. Таким образом исключаются затраты труда при ручном опыление. Размножение гибридных семян во втором и третьем поколений делает их более дешевыми и доступными для выращивания томатов в открытом грунте на больших площадях. Целью наших исследований являлось изучить продолжительности эффекта гетерозиса у гибридных комбинаций детерминантных форм томатов, пригодных для механизированной уборки и определить, до какого поколения можно получить высококачественные плоды на, сохраняя при этом их биологические ценные компоненты. Исследования проводили на экспериментальных полях селекционного севооборота в 2016-2018 гг. Объектами исследований были пять родительских форм, участвующих в гибридизации и три гибридные комбинации: Победитель х Надежда, Амулет х л. 403, Амулет х Прибой, полученных в результате полных диаллельных скрещиваний и их расщепляющиеся популяции во втором и третьем поколении. Наблюдения провели на 50 растений исходных форм, тогда на гибридов F1, F2 и F3 на 80-100 растений. В процессы исследований были взяты гибридные комбинаций, у которых родительские формы имели близкие показатели по морфологическим признакам: срокам созревания, массе плода, дружностью созревания, урожайность, высокие физико-механические свойства и биохимический состав плодов. Экспериментальным материалом в 2016-2018 гг. были 4 сорта, одна линия томата и полученные с их участия три гибрида 108, 91 и 52 которые изучали в первом, втором и третьем поколениях. Гибридные комбинаций томата 108, 91 и 52 в первом, во втором и третьем поколениях, отличаются высокой дружностью завязываемости и созревания плодов в условиях жары и засухи, масса плода свыше 65г, характеризовались овальной удлинённой формы (i = 1,3-1,6, 2-3х камерными с толстым перикарпием 0,7-0,9 см), интенсивной окраски, высокая урожайность и физико-механические свойства плодов. Вегетационный период ”всходы-созревание” в среднем у родительских форм гибрида 91 был в интервале от 115 до 116 дней, в первом, во втором и в третьем поколении признак варьировал 117 дней. Общая урожайность плодов томата у родительских форм гибрида 91 составила 82,0-89,1 т/га, у гибрида в первом поколении – 89,8 т/га, во втором – 77,4 т/га и в третьем – 66,0 т/га, признак значительно уступает родительским формам и гибрида в первом поколении. Определение биохимического состава плодов томата у родительских форм и гибрида 108 в первом, втором и третьем поколении показали, что содержание сухого вещества – 4,2-5,2%; общего сахара – 3,20-3,70%; кислотности – 0,39-0,46%; витамин C – 18,45-24,18 мг/100 и сахарокислотный коэффициент существенно не меняется. Таким образом, с целью удешевления стоимости гибридных семян томатов для возделывания в открытом грунте для промышленной переработки, рекомендуем использование семян у изученных гибридных комбинаций до третьего поколения.

181 PROPRIETĂȚILE FIZICO-MECANICE A FITOMASEI ȘI BIOBRICHETELOR DIN PLANTE PERENE DIN FAMILIA Asteraceae

Ţîţei V.1, Gudîma A.2, Muntean I.3 1Grădina Botanică Națională (Institut) „Alexandru Ciubotaru”, Chişinău, Republica Moldova 2Universitatea Agrară de Stat din Moldova, Chişinău, Republica Moldova 3Institutul de Tehnică Agricolă „MECAGRO”, Chişinău, Republica Moldova e-mail: [email protected] În condițiile Republicii Moldova, dar și la nivel regional, în ultimii ani, biomasa a devenit cea mai importantă sursă de producere a energiei regenerabile. Fitomasa, rezidurile culturilor agricole, silvice și plantele energetice cultivate, reprezintă o oportunitate bună, deoarece acestea pot fi transformate în diferite tipuri de combustibili și energie prin procese termice, fizice și biologice. Producerea biocombustibililor solizi densificați în formă de brichete, reprezintă tipul de combustibil cel mai universal și accesibil pentru utilizare în zonele rurale de către consumatori, oferă oportunități reale pentru crearea de locuri de muncă și diversificarea veniturilor întreprinderilor mici și mijlocii. La moment problema principală constă în identificarea și valorificarea durabilă a surselor de materie primă calitativă și la preț accesibil, crearea infrastructuri pentru procesare, îmbunătățirea eficienței proceselor de producție prin cunoaștere a proprietăților materiei prime și a produsului finit densificat - biobrichete. Familia Asteraceae este una dintre cele mai mari familii de plante cu flori, cuprinzând 1765 genuri și 27.773 specii, răspândite pe tot globul, unile posedă valoare economică alimentară, medicinală, tehnică, furajeră, meliferă, iar altele sunt burueni greu de stârpit. Scopul cercetărilor științifice efectuate a constat în evaluarea proprietăților fizice și mecanice a fitomasei unor plante din familia Asteraceae crescute în condițiile Republicii Moldova, precum și a biocombustibilului solid densificat în formă de brichete (biobrichete) obținut din fitomasa lor. Ca obiect de studiu au servit plantele perene din familia Asteraceae: silfia Silphium perfoliatum L. soiul Vital, topinambur Helianthus tuberosus L. soiul Solar, iarba mare Inula helenium L. soiul Elena, anghinarea Cynara cardunculus L. var.altilis, astra perenă Symphyotrichum novi-belgii (L.) G.L.Nesom și pelin alb Artemisia absinthium L., din colecția de plante energetice și sectorul experimental al Grădinii Botanice. Mostrele pentru cercetarea ritmului de dehidratare și defoliere au fost prelevate la finele vegetației, în perioada octombrie-martie. Fitomasa recoltată a fost măcinată la moara cu ciocane cu trecerea prin sita cu dimensiunile ochiurilor de 10 mm. Conținutul de umiditate a fost determinat prin metoda uscării în etuvă conform SM EN ISO 18134, cenușa - prin calcinarea lentă în în cuptorul electric cu mufă conform SM EN 18122, valoarea calorifică superioară la bomba calorimetrică LAGET MS -10A în conformitate cu SM EN ISO 18125, distribuția dimensională a particulelor la mărunțire și măcinare prin separarea particulelor cu site oscilante în conformitate cu cerințele SM EN ISO 17827, densitatea în vrac a fitomasei macinate și densitatea specifică a biobrichetelor produse conform metodelor acceptate. Densificarea fitomasei în formă de brichete s-a produs la presa hidraulică cu piston BrikStar 50-12. În rezultatul cercetărilor efectuate s-a stabilit că plantele cercetate diferă după ritmul de defoliere și dehidratare la stabilirea temperaturilor negative. Plantele de silfie, iarba mare și astra perenă la recoltare au un grad mai înalt de înfrunzire comparativ cu plantele de topinambur ce se răsfrânge negative asupra proprietăților fizice și mecanice a fitomasei energetice. Printr-un ritm mai accelerat de dehidratare a tulpinelor se evidențiază plantele de astra perenă și pelin alb, fapt ce ar permite recoltarea și procesarea lor în biobrichete mai timpuriu comparativ cu alte specii. Fitomasa macinată de anghinare conține o cantitate considerabilă de particule mai mari de 5mm (41,2%) comparativ cu fitomasa de astra perenă, pelin alb și silfie. La specilor cercetate densitatea în vrac a fitomasei macinate variază de la 107 la 188 kg/m3, conținutul de cenușă variază de la 2,1 la 3,2%, valoarea calorifică brută de la 18,3 la 19,7 MJ /kg. Biobrchetele produse au o densitate specifică de 800-917 kg/m3 cu o încărcătură energetică de 17-18 MJ /kg. Speciile cercetate din familia Asteraceae pot fi utilizate la valorificarea terenurilor degradate și poluate, obținerea fitomasei energetice și asigurarea unui cules mediu-tardiv pentru albini.

182 EVALUAREA PĂIUŞULUI DE LIVADĂ, Festuca pratensis CA FURAJ ȘI SUBSTRAT PENTRU OBȚINEREA BIOMETANULUI

Ţîţei V.1, Blaj Adrian Vasile2, Zevedei Paul Marian2, Marușca T.2, Zevedei Daniela 2, Guțu Ana1 1Grădina Botanică Națională (Institut) „Alexandru Ciubotaru”, Chişinău, Republica Moldova 2 Institutul de Cercetare –Dezvoltare pentru Pajiști, Brașov, România e-mail: [email protected]

Pajiştile sunt un element esenţial al sistemelor de agricultură sustenabilă. În prezent se acordă o importanţă tot mai mare înfiinţării de pajiști semănate, care reprezintă o sursă valoroasă de furaj atât din punct de vedere cantitativ, cât și calitativ, contribuie la protejarea de eroziune a solului și îmbogățirea cu humus, ameliorarea situației ecologice provocată de fenomenul de încălzire globală și deșertificare din regiune. Speciile din genul Festuca, familia Poaceae, sunt frecvente în compoziția floristica a pajistilor naturale și temporare. Festuca pratensis este o specie pratoformantă cu valoare furajeră ridicată, cu un areal extins din regiunea de câmpie până în zona subalpină, întâlnită și în flora spontană din regiune. Păiuşul de livadă este destinat folosirii ca fâneaţă sau mixt, putând fi cultivat în cultură pură sau în amestecuri cu alte specii de graminee şi leguminoase perene de pajişti, cu potenţialul de producţie de 75 t/ha masă verde, 15 t/ha fân și 1000 kg/ha sămânţă. În Catalogul soiurilor de plante a Republicii Moldova nu sunt înregistrate soiuri de păiuş. Scopul cercetărilor științifice efectuate a constat în evaluarea calității biomasei recoltate de păiuş de livadă, Festuca pratensis, ca masă verde, fân și fânaj pentru furajare animalelor, precum și ca substrat pentru obținerea biometanului prin digestie anaerobă și producerea energiei renovabile. În calitate de obiect de studiu a servit soiul Tâmpa de păiuş de livadă creat la Institutul de Cercetare-Dezvoltare pentru Pajiști Brașov, România și cultivat în cultură pură în sectorul experimental al Grădinii Botanice, Chişinău. Mostrele de masă proaspătă pentru evaluare au fost prelevate la prima coasă în anul 3 de vegetație la inițiere formării paniculului, au fost mărunțite și supuse dehidratării în etuvă cu ventilaţie forţată la temperatura de 60°C. Fănul a fost preparat prin dehidratarea direct în câmp a biomasei recoltate, fânajul a fost preparat din masa vegetală ofelită în câmp la umeditatea de 40-45%, marunțită și tasată în recipiente cu iermetizare pe durata de 30zile. Conținutului de p roteina brută (PB), cenuşa brută (CenB), conţinutul de fibre prin tratare cu detergent neutru (NDF), conţinutul de fibre prin tratare cu detergent acid (ADF), conţinutul de lignină sulfurică (ADL) s-a evaluat aplicând metoda spectrofotometriei infraroșu apropiat cu utilizarea echipamentului tehnic PERTEN DA 7200 din dotarea Institutului pentru Pajiști Brașov. Valoarea relativă a furajului (RFV), energia digestibilă (ED), energia metabolozantă (ME), energia netă lactației (NEL), conținutul de celuloză (Cel), hemiceluloză (HC) s-a estimat prin ecuații standardizate, potențialul de producție a biometanului conform Dandikas și col., 2015. În rezultatul cercetărilor efectuate s-a stabilit, că la momentul recoltării soiul Tâmpa de păiuş de livadă, conținea circa 29.8 % subtanțe uscate, iar compoziția biochimică a acestora fiind de 12,0 % PB, 7,9% CenB, 38,1% ADF, 62,2% NDF, 3,8% ADL, 34,3% Cel, 24,1% HC. S-a estimat că furajul masa verde are 59.2% digestibilitatea substanțelor uscate, RFV=89, valoarea energetică a substanțelor uscate 11,73 Mj/kg DE, 9,63 Mj/kg ME și 5,65 Mj/kg NEL. Pe parcursul dehidratării și pastrării fânului și fânajul se constată unile modificări a compoziției biochimice. Astfel, fânul de păiuş de livadă conține 11,3 % PB, 9,1% CenB, 41,8% ADF, 67,3% NDF, 4,3% ADL, 37,5% Cel, 25,5% HC, cu 56,3% digestibilitatea substanțelor uscate și RFV=78, valoarea energetică 11,21 Mj/kg DE, 9,21 Mj/kg ME, 5,22 Mj/kg NEL, iar fânajul - 9,9 % PB, 8,8% CenB, 40,8% ADF, 68,4% NDF, 2,5% ADL, 38,3% Cel, 27,6% HC, cu 57,1% digestibilitatea substanțelor uscate și RFV=78, valoarea energetică 11,36 Mj/kg DE, 9,32 Mj/kg ME și 5,34 Mj/kg NEL. Ca substrat pentru stațiile de producere a biogazului prin digestie anaerobă masa proaspătă recoltă a soiului Tâmpa de păiuş de livadă prezintă un potențial de obținere a biometanuli de 346 L//kg materie organică, iar cel de fân și fânaj - 335 și 364 L//kg materie organică. Soiului Tâmpa de păiuş de livadă prezintă interes agroeconomic și ecologic pentru R. Moldova.

183 SINTEZA DIRIJATĂ A POLIZAHARIDELOR ACIDE LA CIANOBACTERIA Spirulina platensis ÎN PREZENŢA UNOR COMPUŞI COORDINATIVI AI CU (II) ÎN CALITATE DE FACTOR REGLATOR

Țurcan Olga Institutul de Microbiologie şi Biotehnologie, Chișinău, Republica Moldova e-mail:[email protected]

Actualmente dintre substanţele bioactive preţioase ce le oferă microalgele, polizaharidele atrag o atenţie sporită datorită potenţialelor lor aplicaţii în industria alimentară, cosmetică și cea farmaceutică. În special, polizaharidele sulfatate sunt utilizate în diverse ramuri ale industriei pentru proprietățile lor reologice ca agenți de îngroșare şi de gelifiere. Acestea sunt utilizate şi în medicină datorită diferitelor efecte biologice, cum ar fi: imunomodulatorii, antibacteriene, anticoagulante, antioxidante, anticancerigene, anti-inflamatorii etc. Numeroase cercetări întreprinse de diferiţi autori au demonstrat că polizaharidele extrase din biomasa de spirulină manifestă activitate antivirală vădită, fapt determinat în special de complexul de polizaharide sulfatate - Ca, NaSpirulan. Astfel, devine actuală investigarea posibilităţilor de majorare a conţinutului de polizaharide sulfatate la cultivarea cianobacteriei Spirulina platensis. Scopul investigaţiilor a fost studiul influenţei unor compuşi coordinativi ai Cu(II) asupra sintezei exopolizaharidelor (epz) la cianobacteria Spirulina platensis. În calitate de stimulatori ai sintezei de epz au fost utilizati compușii coordinativi ai Cu(II) cu produşii codensării obţinute din 2-amino-2-metil-1,3-propandiol şi aldehide salicilice substituite: PK-2- C15H18ClCuNO4; PK-5-C11H12Br2ClCuNO3; PK-8-C11H12Br2CuN2O6; PK-10-C13H20CuN2O9 administraţi la mediul de cultivare în concentraţii de 0,005; 0,01 și 0,015 mmol/L. În urma cercetărilor efectuate s-a determinat efectul toxic provocat de compuşii coordinativi testaţi, deoarece şi concentraţiile minime (0,005 mmol/L) administrate au manifestat un efect negativ. Efectul toxic provocat de compuşii coordinativi ai Cu(II) asupra productivităţii spirulinei demonstrează că în urma stresului suportat, probabilitatea eliminării în mediu a unui conţinut sporit de epz este foarte înaltă. Conţinutul de epz acide şi sulfatate al spirulinei a fost determinat în lichidul cultural conform metodei descrise de Ramus în modificaţia noastră. În urma cercetărilor efectuate în acest sens, a fost observat că toţi compuşii coordinativi ai Cu(II) testaţi, duc la majorarea epz acide şi sulfatate, conținutul acestora fiind mai mare odată cu creșterea concentrațiilor de compuși utilizați. Astfel, în mediul cultural al spirulinei după 7 zile de cultivare, toți compușii coordinativi ai Cu (II) utilizați au stimulat sinteza de epz acide, inclusiv sulfatate, înregistrîndu-se valori de 2 ori mai mari de epz acide și de 3 ori mai mari de epz sulfatate decît în martor (20,85 mg/l epz acide , 6,55 mg/l epz sulfatate). Un conţinut maxim de 46,3 mg/l epz acide s- a înregistrat în cazul administrării compusului PK-8 (0,015mmol/l ), iar cazul utilizării compusului PK- 2 s-a oținut un conținut maxim de 22,82 mg/l de epz sulfatate. În concluzie, s-a stabilit că toţi compuşii testaţi ai Cu(II) au un efect de stimulare a sintezei exopolizaharidelor acide inclusiv sulfatate şi acest efect este determinat de concentraţia şi natura compusului utilizat.

184 ROLUL MICROELEMENTELOR ȘI BIOFERTILIZANȚILOR ÎN INDUCEREA REACŢIILOR ADAPTIVE A VIȚEI DE VIE LA STRESUL TERMIC

Veliksar Sofia, Gladei M., Lemanova Natalia, Tudorache Gh. Institutul de Genetică, Fiziologie și Protecție a Plantelor, Chișinău, Republica Moldova e-mail: [email protected]

În ultimii ani în literatura de specialitate sunt reflectate destul de multe date privind rolul elementelor nutritive în manifestarea toleranței la stres și productivității plantelor în condiții nefavorabile de creștere. O atenție deosebită este acordată efectului al microelementelor și biostimulatorilor de creștere. Cu toate acestea, datele experimentale existente nu oferă încă posibilitatea de a dezvălui pe deplin mecanismele de acțiune a acestor inductori de rezistență la stresul de temperatură și indică despre necesitatea studierii ulterioare a relației dintre stresul termic și regimul nutritiv în sistemul de sol – plantă. Scopul cercetărilor prezentate a fost: de relevat modificările conţinutului compușilor cu funcție de protecție (prolină, glucide), pigmenţilor fotosintetici în organeie viţei-de-vie în funcţie de aplicarea fertilizanţilor (Microcom-VA şi a suspensiei bacteriene) şi acţiunea stresului termic. Cercetările au fost efectuate în condiții controlate (butaşii nealtoiţi de viţă de vie cu 3 muguri, înrădăcinați prealabili în soluția nutritivă Murashige and Skoog) și de producere (plante de rod, vârsta plantației – 30 de ani), soiul Codrinschi. Pentru experiență în condiții controlate toți butaşi au fost divizați în 3 variante, fertilizate conform schemei de experiență (martor; Microcom-VA; Microcom-VA 0,5 + suspensia de Ag. radiobacter + B. subtilis. Plantele din fiecare varianta au fost supuse hipotermiei (+4°C), hipertermiei (de +40°C) și stresului dublu: hipotermie, pe urmă hipertermie. Rezultatele obținute în condiții controlate au demonstrat ca acțiunea stresului termic (hipo- și hipertermie) in perioadă de vegetație provoacă schimbări esențiale în conţinutul de prolină, glucide, pigmenţi fotosintetici în frunzele butașilor viței de vie, destinate supraviețuirii plantelor. Fertilizarea plantelor cu complexul de microelemente Microcom-VA și suspensia bacteriana a tulpinilor Ag. radiobacter + B. subtilis contribuie la sporirea conținutului compușilor stres-protectoare în frunzele plantelor supuse stresului. Stresul dublu a provocat acumularea mai intensă a acestor substanțe față de plante supuse numai unui stres (hipo- sau hipertermia), ce a contribuit la supraviețuirea mai bună a butașilor fața de plantele supuse hipertermiei, special în variante fertilizate. În condiții de producere sa constatat că sporirea temperaturii în perioadă de vegetaţie până la +32 - 35°C, care nu se consideră periculoasă pentru vița de vie, contribuie la sporirea nivelului de prolina și zaharide, micșorarea conținutului de clorofilă în frunzele plantelor față de determinări anterioare la temperatura + 22-27 °C. Modificările conținutului compușilor menționate în frunzele plantelor fertilizate comparativ cu martor în general coincid cu datele obținute în condiții controlate și indică despre aportul benefic a fertilizanților aplicate în sporirea toleranței viței de vie la schimbarea temperaturii aerului. Fertilizarea foliară a viţei-de-vie în perioada de vegetație contribuie la sporirea conținutului de apa legată şi compuși cu funcție protectoare - prolină și zaharoide - în corzi și muguri în perioadă de repaus forțat (scăderea temperaturii până la -18 -24°C,) ce denotă despre îmbunătăţirea rezistenţei plantelor la ger în perioada de iernare. S-a stabilit că interschimbabilitatea funcțională a celor doi osmoreglatori - prolină și zaharide - este un mecanism eficient pentru adaptarea fiziologică a plantelor de viță-de-vie supuse stresului termic. Datele obținute denotă despre rolul fertilizanţilor în inducerea reacţiilor adaptive a plantelor și dau posibilitatea de a fundamenta efectul compușilor nutritivi și biofertilizanților asupra sporirii toleranţei complexe a plantelor, manifestate prin ameliorarea productivităţii plantelor.

185 THINK 2050! MISCANTHUS – A FAST GROWING FEEDSTOCK TO MEET THE CHALLENGE OF CLIMATE, AND DELIVER GROWTH TO THE BIO-ECONOMIC OPPORTUNITY IN MOLDOVA

William Cracroft-Eley, Aberystwyth University in the UK, Chairman Terravesta Ltd

The challenges and responsibility for tackling our Greenhouse gas emissions to address Climate Change lies with us all, as citizens of the World. Central to this is the move away from fossil derived products and services. This has been seen as a threat or disadvantage to emerging economies. However, working with IGPPP in Moldova and Aberystwyth University in the UK, Terravesta offers a route to real economic and societal opportunities in Moldova through the deployment of specific Miscanthus hybrids as feedstock supplychains for bio-economic technologies, delivering products and services including; Heat & Power Road fuels and bio-chemicals Compostable plastics Construction materials Phyto-remediation of contaminated soils The challenge for climate change is time, and while trees offer excellent sequestration and biodiversity, only fast growing C4 grasses, such as Miscanthus, can offer those important properties while at the same time offering an annual feedstock to enable us to move rapidly to processes and products that reduce the carbon impact of our day to day activities. The climate in Moldova offers potential for excellent yields from genotypes with the right specific tolerances, while the high level of technical and scientific skills within IGPPP are capable of ensuring that the best selections are made for optimum commercial outcomes within the Black Sea region and beyond. This presentation views the importance of the contribution of science from the commercial perspective, and draws on Terravesta’s experience and world leading expertise in developing truly successful Miscanthus supply-chains into the bio-economy.

186 ВЛИЯНИЕ БИОРЕГУЛЯТОРА REGLALG НА ФОТОСИНТЕТИЧЕСКУЮ АКТИВНОСТЬ ЛИСТЬЕВ САМШИТА (Buxus semipervensis L.) В ЗАВИСИМОСТИ ОТ ИХ ВОЗРАСТА

Здиорук Н. В., Кауш М. В. Институт генетики, физиологии и защиты растений, Кишинэу, Республикa Молдова e-mail:[email protected]

Температура окружающей среды всегда играла ведущую роль в эволюционном процессе растений. Во многих случаях она является фактором, определяющим устойчивость видов к изменениям окружающей среды и формирование их жизнеспособности. Наблюдаемый в настоящее время процесс повышения температур, несомненно, приведет к существенным изменениям как в растительном, так и в животном мире. Однако, вопрос о том, как изменение температуры непосредственно будет отражаться на устойчивости растений и какие из видов окажутся в зоне риска, остается открытым. Поэтому, возникает необходимость разработки новых методов с использованием препаратов, способных уменьшить уровень деструктивных процессов после воздействия неблагоприятных температур. Целью данной работы являлось определение влияния биологического препарата Reglalg на интенсивность восстановительного процесса FS-II и сохранение жизнеспособности листьев самшита вечнозеленого Buxus semipervensis L. в зависимости от их возраста и концентрации препарата. Отобранные листовые пластинки самшита 1-го, 2-го и 3-го года вегетации, одинаковые по размеру и показаниям активности FS-II, непрерывно выдерживали в сосудах с различными концентрациями Reglalg (1/200 и 1/2000) в течение 3, 6, 9 и 12 дней. После этого они были переведены на восстановительный процесс при стандартных условиях длительностью 14 дней. Контролем служили листья, погруженные в воду на тот же период времени. Интенсивность фотосинтетических процессов определяли по изменению квантового выхода фотосистемы – II флуориметром РАМ 2100 (ФРГ). Активность перекись-расщепляющих соединений определяли в динамике времени. Полученные результаты показали, что относительное значение активности FS-II листьев 3-го года в процессе восстановления после 3-х и 6-ти дней непрерывного их выдерживания в водном растворе биорегулятора с концентрацией 1/200 выше, чем у листьев более молодого возраста при тех же условиях. После 12-ти дней выдерживания в растворе активность FS-II значительно падает, при этом, чем моложе возраст листа и чем выше концентрация препарата, тем интенсивнее падение активности фотосистемы. Выдерживание листьев в течение 12 дней в концентрации Reglalg 1/200 оказывается летальным для листьев 1-го года, тогда как 50% листьев 3-го года остаются жизнеспособными. Выявлена положительная корреляция между показаниями активности FS-II и активностью перекись-расщепляющих ферментов, ответственных за устранение последствий стресса. Установлено, чем старше возраст листьев, тем интенсивней их ответная реакция на действие препарата; Реакция FS-II листьев самшита на действие биологически активного препарата Reglalg зависит от концентрации и продолжительности его воздействия; Наибольшая уязвимость фотосинтетической системы листьев наблюдается в конце зимнего – начале весеннего периода вегетации растений.

187 МОРОЗОУСТОЙЧИВОСТЬ ЛИСТЬЕВ САМШИТА ВЕЧНОЗЕЛЕНОГО (Buxus semipervensis L.) В ЗАВИСИМОСТИ ОТ СЕЗОНА ГОДА

Здиорук Н. В. Институт генетики, физиологии и защиты растений, Кишинэу, Республикa Молдова e-mail: [email protected]

Температурный режим - один из решающих факторов, влияющих на процессы роста и развития растений, и, как правило, всегда приводит к изменению процессов жизнедеятельности растений. О характере и глубине этих изменений можно судить по интенсивности фотосинтеза. Большой интерес в данном аспекте представляют вечнозеленые многолетние растения, которые подвергаются температурным изменениям в течение года. Цель исследований состояла в изучении влияния сезонных изменений температуры на устойчивость листьев самшита вечнозеленого (Buxus semipervensis L.) к холодовому стрессу. Устойчивость к отрицательным температурам оценивали по падению и восстановлению эффективности фотосинтеза после воздействия на листья самшита холодовым шоком разными температурами и продолжительностью инкубации. Для исследований были отобраны листья Buxus semipervensis L. двухлетнего возраста, собранные в зимний и летний периоды года. Листья помещали в холодильную установку и выдерживали при 0°С в течение 16 часов, после чего каждый вариант отдельно подвергали воздействию отрицательных температур при -5, -10, -15, -20, -25 и -30°С в течение 8 часов. Далее листья помещали в термостат и выдерживали при температуре +22-+24°С и освещении от люминисцентных ламп с фотопериодом 16 часов – свет, 8 – темнота. Активность фотосинтетических процессов определяли в течение последующих 10 дней по изменению квантового выхода фотосистемы II - флуориметром РАМ 2100 (ФРГ). Полученные результаты показали, что при температуре -5°С жизнеспособными остаются 50% листьев, собранных в летний период, а температура -10°С является для них летальной. Тогда как листья, собранные в зимний период и подвергнутые действию температуры -10°С, сохраняют 100 % жизнеспособность, летальной же для них является температура -30°С. Полученные данные свидетельствуют, что устойчивость листьев самшита к морозу возрастает благодаря процессам адаптации в зимнее время. Было показано, что повышение устойчивости к морозу в зимнее время сопряжено с увеличением активности перекись-расщепляющих соединений, увеличением содержания аскорбиновой кислоты и уменьшением концентрации малонового диальдегида в листьях самшита, отобранных для анализа в зимнее время. Величина квантового выхода FS II листьев самшита изменяется в зависимости от сезона вегетации; Наибольшая утойчивость FS II листьев самшита к отрицательным температурам достигается в зимний период вегетации; Активность FS II положительно коррелирует с изменением активности перекись- расщепляющих ферментов, содержанием аскорбиновой кислоты и отрицательно - с накоплением МДА.

188 NEW UKRAINIAN RESISTANT POTATO VARIETIES TO WART Synchytrium endobioticum (SCHILBERSKY) PERCIVAL INTO PRODUCTION

Zelya A.G. 1, Oliynyk T.M. 2, ZelyaG.V. 1 1UkrainianScientific-Research Plant Quarantine Station IPP NAAS, Ucraina 2Institute for Potato Research, Ucraina е-mail: [email protected]

Potato is the most valuable and important agricultural crops for different usage. It grows in many countries in the world. It takes the fourth place after rice, wheat and maize. The area is consisted more than 18 mln ha. The Ukrainian potato’s whole yield is about 330 mln tones. This crop takes the important place in global problem for food support.That is why potato is named the second bread. This plant is the host for many disease pathogens. Wart potato is the most dangerous disease. The internal cellular obligate pathogen Synchytrium endobioticum (Schilbersky) Percival is the agent of this disease. It is put into the list of quarantine pest A2. The wart potato is determined in 39 countries throughout the world according to the data of European and Mediterranean Plant Protection Organization. This disease is damaged potato in 33 European countries. The new aggressive pathotypes are determined in these countries. The improving of new resistant varieties is the most effective way for struggle with wart potato. Ukrainian scientific-research plant quarantine station IPP NAAS works with the selection of new breeded varieties and hybrids of potato on resistance to common and four aggressive wart potato pathotypes during 81 years. The selection of potato forms resistant to wart was provided by laboratory and field trials of researches according to the “Technique of evaluation and choice of potato breeding material resistant to Sychytrium endobioticum (Schilb.) Perc., harmonized with European Union requirements” was provided in 2010-2019. The laboratory and field researches were provided in Chernivtsi, Ivano-Frankivsk and Zakarpattia regions. The following 26 varieties were resistant to common pathotype: Aria,Vzirets, Glazurna, Ivankivska rannya, Kalynivska, Kimmeria, Letana, Malynska bila, Mezhyrichka, Syngaivska, Slovyanka, Promin, Legenda, Predslava, Pikurovska, Sluch, Strumok, Solocha, Poliske Dzerelo, Charunka, Chervona Ruta, Schedryk, Factor, Feya, Chortytsa, Yavir. There were breeding of Institute for potato research NAAS, Pilssya science division Institute for Potato Research NAAS, Institute of Agriculture for Carpathian region NAAS. Specified potato varieties are recommended for the growing in the sources of wart potato common pathotype. The following 10 potato varieties are received resistant mark: Aria, Glazurna, Kimmeria, Kalynivska, Strumok, Solocha, Charunka,Chervona ruta, Schedryk and Chortytsya. They recommended for the growing in the sources of 11(M1) – Mezhgirya aggressive pathotype. The following 8 potato varieties are resistant to 13(R2) - Rachiv pathotype: Aria, Glazurna, Malynska bila, Strumok, Solocha,Charunka, Chervona ruta and Chortytsya. The following 8 samples are determined as resistant to 18 (Ya)Yasynia aggressive pathotype: Glazurna, Kalynivska, Malynska bila, Strumok, Solocha, Charunka, Chervona ruta and Chortytsya. 9 potato samples are determined as resistant to 22 (B)-Bystrytsya aggressive pathotype: Aria, Galzurna, Kimmeria, Kalynivska, Malynska bila, Strumok, Solocha, Schedryk and Chortytsya. The non-defeated potato varieties by pathogens pathotypes are recommended for improving in disease sources. The breeders are recommended these varieties for hybridization and the receiving the resistant progenies.

189 СТИВИН – ПЕРСПЕКТИВНЫЙ БИОЛОГИЧЕСКИЙ РЕГУЛЯТОР РОСТА И РАЗВИТИЯ РАСТЕНИЙ НОВОГО ПОКОЛЕНИЯ

Зимина Татьяна Всероссийский научно-исследовательский институт защиты растений Воронежская обл., Россия e-mail: [email protected]

В ФГБНУ «ВНИИЗР» разработан новый биологический регулятор роста Стивин, в составе которого присутствуют биологически активные вещества, выделенные из плодоэлементов винограда и сахарной свеклы (ресвератрол, аминокислоты, глюканы, гормоны и др.), которые обладают свойствами элиситоров и участвуют в защите клетки от свободных радикалов, индукции пролонгированных иммунных реакций, усилении ростовых процессов. При проведении полевых экспериментов установлено, что на озимой пшенице наибольший эффект препарат показал при применении весной в фазу кущения. Иммунизирующее действие регулятора роста при различном инфекционном фоне по отношению к различным заболеваниям варьировало от 10 до 72 %. Урожайность пшеницы существенно возрастала на 12- 33 %. При обработке ярового ячменя в фазу кущения иммунизирующая активность препарата по отношению к различным заболеваниям в зависимости от инфекционного фона находилась на уровне 15-38 %, продуктивность фотосинтеза при оптимальной норме применения 70 мл/га увеличивалась на 12 %, площади листьев – до 10 %. Максимальное увеличение урожайности составляло 16 %. На сое при обработке семян или вегетирующих растений в оптимальных нормах применения препарата биологическая эффективность Стивина относительно различных заболеваний на листьях составляла 25-31 %. Максимальные прибавки урожая – 21,2 и 16,9 % к контролю были получены при дозировках препарата 50 мл/т и 50 мл/га. На сахарной свекле актуально применение Стивина в качестве антидота при однократной совместной обработке с гербицидами. Антидотный эффект при дозировке 90 мл/га по отношению к использованию одних пестицидов составил 11,4 %. Иммуностимулирующее действие препарата по отношению к заболеваниям листьев через 3 месяца после обработки варьировало от 10 до 60 %. Прибавка урожая была получена в основном за счет достоверно более высокого значения средней массы корнеплода. Установлено, что на картофеле оптимальной нормой применения Стивин является 100 мл/га при обработке вегетирующих растений в фазу начала бутонизации, обеспечивающей повышение урожайности клубней на 13 %. Эффект достигался в основном за счет усиления клубнеобразования. Иммунизирующее действие препарата относительно различных заболеваний варьировало от 5 до 70 %. Выход крахмала при данном регламенте применения увеличивался относительно контроля на 7,2 %. Высокую эффективность Стивин показал на подсолнечнике при обработке как семян, так и вегетирующих растений на фоне протравливания семян фунгицидами. При обработке семян совместно с фунгицидными протравителями в норме применения 120 мл/т повышение продуктивности культуры относительно использования одних фунгицидов увеличилось на 27 %, использовании в период вегетации (160 мл/га) позволило повысить урожайность культуры на 32 % относительно контроля. Масличность семян при этом возросла на 15-20 %. Разработанный препарат после проведения регистрационных испытаний может успешно использоваться как в экологическом земледелии, так и в интенсивных агротехнологиях для увеличения продуктивности различных сельскохозяйственных культур и улучшения качества получаемой продукции.

190 INDEX DE AUTOR

Aldea Fl. 147 Ciarmiello L. 8 Guțul T. 35 Andriychuk T. 179 Ciobanu R. 13 Hoaghia A. 129, 130 Andronic L. 22 Ciorchină N. 32, 33, 44 Honcharov Yu. 17 Annunziata M. 8 Cojocaru A. 112 Ionița O. 155 Antoci L. 7 Colţun M. 34 Iordosopol E. 71, 91 Badașco S. 94, 115 Corcimaru S. 35 Iurea D. 112 Bahsiev A. 9, 21 Coreţcaia I. 101 Jalbă S. 41, 53 Bakulina A. 23 Corlateanu L. 150 Jelev N. 55, 94, 115 Balashova I. 158 Coropceanu Ed. 127 Jelezneac E. 96 Balaur N. 16 Coşalîc C. 102 Jelezneac T. 95, 157 Balmuş Z. 139 Cotelea L. 151, 152 Kanash E. 12 Banciu C. 24, 48 Cotenco E. 61 Khlebnikov V. 158 Baranova N. 95, 157 Cozma V. 35 Kocherina N. 12 Batco M. 71 Cozmic R. 172 Kolesnicova L. 47 Batîr L. 25, 35, 64 Cristea N. 166 Kordulyan Yu. 125 Bejan N. 82 Cristman D. 135 Koval E. 42 Beșliu A. 26 Cutcovschi-Muștuc A. 34, Kuznetsova E. 43 Bivol I. 11 36, 45 Kyryk M. 104 Bîrsa M. 60 Cuţitaru D. 37 Leah N. 97 Blaj A. 183 Cuzmina E. 32 Leah T. 98 Bodale I. 112 Dascaliuc A. 74, 162 Leatamborg S. 174 Börner A. 12, Deaghileva A. 15 Lemanova N. 113, 185 Borozan E. 172 Dica A. 178 Lisnic S. 100, 101 Botnarenco P. 140 Djur S. 56, 57 Lîsii D. 61 Botnari V. 141 Dumbrăveanu V. 56 Lohwasser U. 12 Boubătrîn I. 73 Dunaev A. 43 Lozinschii M. 31, 44, 45 Brînză L. 127 Efremova N. 26, Lungu A. 113 Buceaceaia S. 127 Eliseev S. 71, 79 Lupan A. 161 Budac Al. 148 Elisovețcaia D. 135 Lupaşcu G. 102, 162 Bujoreanu N. 116, 117 Erhan T. 41, 81 Maevschii V. 91 Bulhac I. 127 Feodor G. 71 Makovei M. 163 Burțeva S. 60 Fomicheva A. 43 Malii A. 46 Butnaraş V. 145 Fuggi A. 8 Manole A. 24, 48 Cadar O. 129, 130 Ganea A. 150 Maria Gabriel-Mihai 24, 48 Calalb T. 27, 33 Gaviuc L. 82 Marinescu M. 47 Carauș Vl. 29 Gavriliţa L. 39, 83 Marușca T. 183 Carillo P. 8 Gavzer S. 102, 162 Maticiuc V. 113 Catana R. 24, 147 Ghendov V. 155 Maximova E. 8 Cauș M. 28, 74 Gladei D. 124 Mărîi L. 22, 165 Cazacu A. 112 Gladei M. 185 Meleca A. 113 Călugăru-Spătaru T. 28 Gonceariuc M. 154 Melnyk A. 104 Celac V. 148 Gorban V. 39, 84 Melnyk S. 17 Cepoi L. 56, 57 Gore A. 11, 174 Mereniuc L. 16 Cerbari V. 98 Grajdieru C. 15, 19 Mihalache G. 112 Chesnokov Yu. 12 Grati V. 44 Mihnea N. 21, 166 Chilinciuc Al. 141 Grigorov T. 40 Mihnea V. 24, 48 Chiriac T. 56, 57 Gudîma A. 182 Mirskaya G. 12

Chiseliță O. 35 Gunchak M.V. 86, 179 Miscu V. 56 Chisnicean L. 149 Gușan A. 129, 130 Mitin V. 9, 15, 19 Chiţan R. 30, 31 Guțu A. 183 Mogîlda A. 167

191 Moldovan C. 60 Sîrbu Tatiana 59, 178 Батко М. 108, 132 Moraru Gh. 168 Sîromeatnicov I. 61 Баштовая С. 87 Muntean I. 182 Skoreyko A. 179 Белоусова Г. 10 Munteanu N. 112 Slanina V. 25, 35, 63 Боровская А. 72, 138 Musleh M. 73, 124 Smerea S. 22, 64 Ботнарь В. 69, 181 Nastas T. 39, 96 Smurova N. 158 Боунегру С. 18 Nazarova Y. 23 Sofroni M. 31, 32, 45 Брадовская Н. 142, 143 Neguţa A. 41, 51, 52 Solomiychuk M. 125 Брадовский В. 142, 143 Neguţa E. 51, 52 Stelmashchuk O. 43 Брынза Л. 87 Nicuţă Al. 111 Stingaci A. 128 Будак А. 89, 144 Nikolaya Velcheva 169 Stoleru V. 112 Бужоряну Н. 133 Odobescu V. 41, 53, 81 Stratulat T. 129, 130 Бурцева С. 131 Ogorodnikova S. 42 Sumencov V. 71, 79 Былич Е. 146 Oliynyk T. 189 Şabarov D. 178 Веверицэ Е. 159 Onica E. 33 Șcerbacova T. 113 Власов В. 20 Otroshko S. 17 Șleahtici Vl. 124, 134 Войтка Д. 93, 107 Paica I. 24, 48, 147 Ștefăneț P. 61 Волощук Л. 131 Panimarchuk O. 125 Ștefîrță A. 127 Гаврилица Л. 75

Peres C. 112 Tabăra (Gorceag) M. 65, 68 Гаина Б. 69 Pintea M. 171, 172 Tabără V. 180 Герецкий Р. 20 Pînzaru B. 113, 137 Tahantsova M. 17 Гладей Д. 109 Platovschii N. 115 Tanase A. 35 Горбан В. 75

Plângău E. 56 Tașca I. 56 Горбунова В. 99

Pompuș I. 44 Teliban G. 112 Гордиенко Д. 85

Popa Al. 129, 130 Todiraș Vl. 120 Грати В. 38 Popovici A. 116, 117 Tofan-Dorofeev E. 155 Грэждиеру К. 78

Postolachi O. 35 Tretiacova T. 120 Гуцул Т. 54 Prysiazhniuk L. 17 Trofim M. 36, 68 Дончилэ А. 175

Racu V. 22 Tudorache Gh. 185 Елисеев С. 132

Ralea T. 55, 162 Tumanova L. 15, 19 Елисовецкая Д. 80

Rastimeșina I. 35 Ţîţei V. 182, 183 Здиорук Н.В. 187, 188 Зеленянская Н. 20 Răileanu N. 81 Țurcan O. 60, 184 Romanciuc G. 173 Usatîi A. 26 Зимина Т. 190 Иванова Р. 80 Roșca I. 32 Valuța A. 56 Игнатова З. 78 Rotari I. 56, 57 Veliksar S. 185 Ионова Л. 156 Rotari S. 11, 174 Voineac I. 134, 135 Иордосопол Е. 92 Rotaru Vl. 118 Voineac V. 39, 134, 135 Касай Л. 67 Rudi L. 56, 57 Voloșciuc L. 136, 137 Кауш М. 187 Rudic V. 29, 57 Vornicu Z. 95, 157 Кику Б. 75 Rusakov D. 12 Voronţov V. 16 Кириллов А. 89 Sakali N. 172 William Cracroft-Eley 186 Кисничан Л. 80 Sashco E. 58 Woodrow P. 8 Клименко О. 14 Savranschii D. 120 Zamorzaeva I. 9, 21 Колесникова Л. 76 Schin V. 22 Zavtoni P. 137 Комарова Г. 18 Seregina E. 43 Zdioruk N. 55 Корчмару С. 54 Sfeclă I. 59 Zelya A. 189 Костерин О. 67 Sfeclă V. 177 Zelya G. 189 Котенко Е. 181 Shevaga G. 179 Zevedei D. 183 Кравченко А. 77 Shirokikh Al. 23 Zevedei P. 183 Кузнецова И. 78 Shirokikh I. 23 Абубакирова Р. 6 Кузьмина Э. 38 Siuris A. 62 Александров Е. 69 Куршунжи Д. 153 Sîrbu Tamara 35, 60 Балашова И. 70, 138

192 Леманова Н. 99 Пинчук Е. 70 Титова Н. 133 Лисовская Т. 160 Платовский Н. 114 Тодираш В. 54 Лунгу А. 122 Плачинта В. 108 Феодор Г. 92 Лятамборг С. 159 Присакарь С. 54 Фокина А. 123 Маевский В. 92, 103 Пынзару Б. 122 Харченко В. 138 Маковей М. 164 Раля Т. 88 Харчук О. 87, 88, 89 Маринеску М. 76 Ротарь А. 18 Цыбулько Н. 107 Матичук В. 122 Ротарь В. 67 Цэпордей А. 181 Мащенко Н. 70, 72, 80 Ротарь Е. 18 Чебан А. 153 Мезернюк Т. 105 Ротарь С. 159 Чупрун А. 66 Мельник В. 170 Русу Ю. 119 Шевченко Ю. 138 Михайлов М. 49, 50 Салтанович Т. 175, 176 Широких И. 123 Михайловская Н. 107 Светличенко В. 76 Шишкану Г. 133 Мулюкина Н. 20 Сирота С. 70, 138 Шляхтич В. 109 Мунтян Е. 108 Скурту Г. 133 Шубина В. 10, 131 Муслех М. 109 Станчук Ал. 126 Щербакова Т. 121, 122 Настас Т. 119 Степанов В. 70 Юзефович Е. 93, 107 Негреску М. 90 Суменкова В. 132 Язловецкий И. 90 Николаев А. 110 Сыромятникова Ю. 181 Пелях Е. 170 Тимина О. 66, 67

193 RESEARCH INSTITUTIONS/UNIVERSITIES PARTICIPATING IN THE SYMPOSIUM IN THE REPUBLIC OF MOLDOVA • Institute of Genetics, Physiology and Plant Protection • National Botanical Garden (Institute) “Alexandru Ciubotaru” • Institute of Microbiology and Biotechnology • Institute of Phytotechny "Porumbeni" • Institute of Electronic Engineering and Nanotechnologies "D. Ghiţu" • Institute of Pedology, Agrochemistry and Soil Protection "Nicolae Dimo" • Institute of Agricultural Engineering "MECAGRO" • Research and Practical Institute for Horticulture and Alimentary Technologies • State University "Dimitrie Cantemir" • University of Medicine and Pharmacy "Nicolae Testemiteanu" • Tiraspol State University • Agrarian State University of Moldova • State University, Tiraspol • State Agency for Intellectual Property • The Nistrian Institute of Scientific Research in Agriculture

RESEARCH INSTITUTIONS/UNIVERSITIES PARTICIPATING IN THE SYMPOSIUM ABROAD  Academy of Agricultural and Fores "Gheorghe Ionescu-Şişeşti", Bucharest, Romania  Institute of Biology Bucharest of Romanian Academy, Romania  Research Institute for Analytical Instrumentation subsidiary ICIA, Romania  Institute of Research – Development for Meadows, Brasov, Romania  Institute of Biological Research, Iasi, Romania  Department of Metabolic Networks, Max Planck Institute of Molecular Plant Physiology, Potsdam, Germany,  Leibniz Institute of Plant Genetics and Crop Plant Research, Gatersleben, Germany  Dipartimento di Scienze e Tecnologie Ambientali, Biologiche e Farmaceutiche, Università degli Studi della Campania “Luigi Vanvitelli”, Caserta, Italy  Institute of Plant Genetic Resources – Sadovo, Bulgaria  Agrophysical Research Institute, St. Petersburg, Russia  Federal Agricultural Research Center of the North-East named N.V. Rudnitsky, Russia  Oryol State University named after I.S. Turgenev, Russia  All-Russian Plant Protection Research Institute, Voronezh, Russia  Novosibirsk Institute of Genetics and Cytology, Novosibirsk, Russia  Federal State Budget Office, Federal Scientific Vegetable Center, Moscow, Russia  Vyatsky State University, Russia  Ukrainian scientific-research plant quarantine station Institute of plant protection National Academy of Agrarian Sciences, Ukraine  Ukrainian Scientific-Research Plant Quarantine Station IPP NAAS, Ukraine  Ukrainian Scientific-Research Plant Quarantine Station IPP NAAS  Institute for Potato Research, Ukraine  The National Research Center "Institute of Viticulture and Winemaking. V.E. Tairova,Odessa,Ukraine • Lesia Ukrainka Eastern European National University, Volyn Regional Small Academy of Sciences of Ukraine, Lutsk, Ukraine.  Ukrainian Institute for Plant Variety Examination, Ukraine  Research Institute of Agrarian Business, Ukraine  Institute for Plant Protection of the Nab of Belarus, Priluki, Belarus  Institute of Soil Science and Agrochemistry of the Belarusian State University, Belarus • Aberystwyth University in the UK, Chairman Terravesta Ltd, England • National University of Life and Environmental Sciences of Ukraine, Ukraine • Bukovinian State Medical University, Ukraine • University of Agricultural Sciences and Veterinary Medicine “Ion Ionescu de la Brad”, Faculty of Horticulture, Iasi, Romania, • Integrated Center of Environmental Science Studies in the North East Region (CERNESIM), The “Alexandru Ioan Cuza” University of Iasi, Romania

194