UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL FACULTAD DE CIENCIAS NATURALES CARRERA DE BIOLOGÍA Trabajo de titulación previo a obtener el grado académico de Bióloga ACTIVIDAD ANTIBACTERIANA Y ANTIOXIDANTE DE LOS EXTRACTOS DE Hibiscus escobariae Fryxell, Loxopterygium huasango R. Spruce y Croton ferrugineus Kunth AUTOR: VIVIANA CAROLINA VALDEZ MURILLO TUTOR: PhD. EVER MORALES AVENDAÑO GUAYAQUIL-ECUADOR 2019 UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL FACULTAD DE CIENCIAS NATURALES ANEXO 13 CARRERA DE BIOLOGÍA UNIDAD DE TITULACIÓN ACTIVIDAD ANTIBACTERIANA Y ANTIOXIDANTE DE LOS EXTRACTOS DE Hibiscus escobariae Fryxell, Loxopterygium huasango R. Spruce y Croton ferrugineus Kunth Autora: Viviana Valdez Murillo Tutor: PhD. Ever Morales Avendaño RESUMEN En el presente estudio, se realizó el tamizaje fitoquímico, cuantificación de flavonoides y fenoles totales, la evaluación de la actividad antibacteriana contra tres bacterias Gram Positivas (Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Listeria monocytogenes) y tres Gram negativas (Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Vibrio parahaemolyticus) y la evaluación de la actividad antioxidante de los extractos etanólicos obtenidos de hojas de Hibiscus escobariae, Loxopterygium huasango y Croton ferrugineus. Para el análisis de las muestras se realizó el tamizaje fitoquímico por el método de Domínguez, la cuantificación de flavonoides por el método colorimétrico cloruro de aluminio, la cuantificación de fenoles totales por el método Folin-Ciocalteu, actividad antibacteriana por ensayos de difusión por disco y actividad antioxidante mediante la técnica 2,2- Difenil-1-Picrilhidrazilo (DPPH). En el tamizaje fitoquímico los flavonoides y taninos presentaron mayores contenidos, mientras que los alcaloides, quinonas, antraquinonas, esteroides y saponinas estuvieron presentes en menor proporción. El contenido de flavonoides varió de 100,95 ± 1,73 a 995,42 ± 3,16 mg CE / g extracto en H. escobariae y L. huasango y el contenido de fenoles varió de 10,17 ± 0,22 a 314,72 ± 1,91 mg GAE/ g extracto en Croton ferrugineus y L. huasango el cual también obtuvo la mejor actividad antibacteriana frente a las cepas evaluadas con CMI que varían de 2.5 a 5 mg/mL y la mejor actividad antioxidante con IC50 de 0,1 mg/mL y de 0,7 mg/mL para C. ferrugineus con una diferencia significativa p<0.05. Estos resultados son los primeros reportados los que servirán como línea base para estudios posteriores. Palabras claves: antibacteriano, antioxidante, Croton ferrugineus, fenoles, flavonoides, Hibiscus escobariae, Loxopterygium huasango, tamizaje fitoquímico. UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL FACULTAD DE CIENCIAS NATURALES ANEXO 14 CARRERA DE BIOLOGÍA UNIDAD DE TITULACIÓN ANTIBACTERIAL AND ANTIOXIDANT ACTIVITIES OF ETHANOLIC EXTRACTS OF Hibiscus escobariae Fryxell, Loxopterygium huasango R. Spruce and Croton ferrugineus Kunth Author: Viviana Valdez Murillo Advisor: PhD. Ever Morales Avendaño ABSTRACT This study has done phytochemical screening, quantification of flavonoids and total phenols, evaluation of antibacterial activity against three Gram positive bacterias (Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Listeria monocytogenes), three Gram negatives (Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Vibrio parahaemolyticus) and the evaluation antioxidant activity of ethanolic extracts of Hibiscus escobariae, Loxopterygium huasango and Croton ferrugineus. The sample analysis employed phytochemical screening by Dominguez’s method, quantification of flavonoids by the aluminum chloride colorimetric method, quantification of total phenols by the Folin-Ciocalteu method, antibacterial activity by disk diffusion assay and antioxidant activity by DPPH method. In the phytochemical screening, the flavonoids and tannins were higher proportion, while alkaloids, quinones, anthraquinones, steroids and saponins were present in lower proportion. The flavonoid content varied in a range of 100.95 ± 1.73 and 995.42 ± 3.16 mg CE / g extract, in H. escobariae and L. huasango and the total phenol content varied in a range of 10.17 ± 0.22 a 314.72 ± 1.91 mg GAE/ g extract in C. ferrugineus and L. huasango, which also obtained the best antibacterial activity against all the strains evaluated with MIC that varied of 2.5 - 5 mg/mL and also obtained the best antioxidant activity with a IC50 of 0.1 mg/mL and 0.7 mg/mL for Croton ferrugineus with a significant difference p<0.05. These results are the first reported and will serve as a baseline for further studies. Key words: antibacterial, antioxidant, Croton ferrugineus, flavonoids, Hibiscus escobariae, Loxopterygium huasango, phenols, phytochemical screening. © Derechos de Autor Viviana Carolina Valdez Murillo 2019 DEDICATORIA A Dios por haberme permito llegar hasta este momento tan especial e importante en mi vida profesional. A mis padres, hermanos, tíos y abuelos por haberme brindado todo su cariño y apoyo incondicional. A mi papá German que a pesar de la distancia física, sé que está muy orgulloso de mí en estos momentos porque logré lo que el tanto anhelaba. i AGRADECIMIENTOS A Dios porque sin él nada habría sido posible. A mi familia porque siempre han estado conmigo en todo momento importante en mi vida. A los biólogos Shirley, Leonardo, Xavier, Jaime, a mi tutor Ever y a mi amigo Jhon por haberme enseñado con mucha paciencia y permitido elaborar mi trabajo de titulación. ii ÍNDICE DE CONTENIDO INTRODUCCIÓN ............................................................................................... 1 CAPÍTULO I ....................................................................................................... 4 1.1 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA ....................................................... 4 1.2 OBJETIVOS .............................................................................................. 6 1.2.1 Objetivo General ................................................................................. 6 1.2.2 Objetivos Específicos .......................................................................... 6 1.3 JUSTIFICACIÓN E IMPORTANCIA .......................................................... 7 1.4 HIPÓTESIS ............................................................................................... 9 CAPÍTULO II .................................................................................................... 10 2.1 ANTECEDENTES ................................................................................... 10 2.2 MARCO TEÓRICO ................................................................................. 14 2.2.1 Hibiscus escobariae .......................................................................... 14 Taxonomía.............................................................................................. 14 Ecología ................................................................................................. 14 Descripción botánica .............................................................................. 15 2.2.2 Loxopterygium huasango .................................................................. 15 Taxonomía.............................................................................................. 15 Ecología ................................................................................................. 15 Descripción botánica .............................................................................. 16 2.3.3 Croton ferrugineus ............................................................................ 16 Taxonomía.............................................................................................. 16 Ecología ................................................................................................. 17 Descripción botánica .............................................................................. 17 2.2.4 Metabolitos secundarios ................................................................... 17 2.2.5 Tamizaje fitoquímico ......................................................................... 19 Alcaloides ............................................................................................... 19 iii Flavonoides ............................................................................................ 20 Taninos ................................................................................................... 21 Quinonas ................................................................................................ 23 Triterpenoides y esteroides .................................................................... 25 Saponinas .............................................................................................. 26 2.2.6 Cuantificación de flavonoides ........................................................... 27 2.2.7 Cuantificación de fenoles .................................................................. 27 2.2.8 Actividad antioxidante ....................................................................... 28 Metabolitos secundarios como agentes antioxidantes ........................... 28 2.2.9 Actividad antibacteriana .................................................................... 29 Metabolitos secundarios como agentes antibacterianos ........................ 30 CAPÍTULO III ................................................................................................... 31 3.1 METODOLOGÍA ..................................................................................... 31 3.1.1 Material biológico .............................................................................. 31 3.1.2 Obtención del extracto .....................................................................