UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO ESCUELA DE POSTGRADO PROGRAMA: DOCTORADO EN CIENCIAS BIOLÓGICAS Estado actual de las poblaciones de Dicrodon guttulatum y Dicrodon holmbergi, en el Santuario Histórico Bosque Pómac y Pampa Tizal, 2007 TESIS PARA OPTAR EL GRADO DE DOCTOR EN CIENCIAS BIOLÓGICAS AUTOR: Ms. C. LUIS ENRIQUE POLLACK VELÁSQUEZ ASESOR: Dr. RADIGUD FERNÁNDEZ ROMERO TRUJILLO – PERÚ 2009 Nº de Registro: …….. i AUTORIDADES Dr. Carlos Sabana Gamarra Rector Dr. Juan César Muro Morey Vicerrector Académico Dr. Orlando Velásquez Benites Vicerrector Administrativo Dr. Sebastián Bustamante Edquén Director de la Escuela de Postgrado Dr. Steban Ilich Zerpa Profesor Secretario de la Escuela de Postgrado Dr. Federico González Veintemilla Director de Sección de Postgrado en Ciencias Biológicas i PRESENTACIÓN Señores miembros del Jurado En cumplimiento con las disposiciones establecidas en el Reglamento de Grados y Títulos de la Universidad Nacional de Trujillo, pongo a vuestra consideración el trabajo de tesis titulado: Estado actual de las poblaciones de Dicrodon guttulatum y Dicrodon holmbergi, en el Santuario Histórico Bosque Pómac y Pampa Tizal, 2007, con el propósito de obtener el Grado de Doctor en Ciencias Biológicas. Espero que vuestro criterio idóneo sepa comprender algunas omisiones involuntarias, en tal sentido me someto a su dictamen. Trujillo, agosto de 2009. _________________________________ Ms. C. Luis Enrique Pollack Velásquez ii DEL ASESOR Dr. RADIGUD FERNÁNDEZ ROMERO, suscribe que la presente tesis ha sido ejecutada de acuerdo a lo establecido en el plan de trabajo y con las debidas orientaciones brindadas al tesista. Respecto al informe, éste ha sido revisado y acoge las sugerencias pertinentes. __________________________________ Dr. RADIGUD FERNÁNDEZ ROMERO Asesor iii DEL JURADO DICTAMINADOR Los profesores que suscriben, miembros del Jurado Dictaminador, declaran que la presente tesis ha sido ejecutada en concordancia con las normas vigentes de la Escuela de Postgrado de la Universidad Nacional de Trujillo. Dr. ALFREDO GÓMEZ QUEZADA PRESIDENTE Dr. WILLIAM ZELADA ESTRAVER SECRETARIO Dr. RADIGUD FERNÁNDEZ ROMERO MIEMBRO iv AGRADECIMIENTO Expreso mi sincero agradecimiento a: Dr. Radigud Fernández Romero Dr. Luis Rodríguez Delfín Dr. Ricardo Fujita Alarcón Dra. María Luisa Guevara Gil Dra. Zulita Prieto Lara Dr. Luis Oblitas Quispe Dr. Enrique Martin Alva Mg. Alfredo Martin Alva Mg. Verónica Mendoza Reynoso Mg. Daniel Ore Chávez Mblga. Vanesa Miranda Chacaltana La Oficina General de Promoción de la Investigación (OGPRODEIN- UNT) que financió parte de la presente tesis. v DEDICATORIA A mi Esposa e Hijos. A mi Madre y Hermanos. A la memoria de mi Padre. vi En Biología nada tiene sentido sino se considera bajo el prisma de la evolución. Th. Dobzhanski vii INDICE ITEM Pág. AUTORIDADES i PRESENTACIÓN ii DEL ASOSOR iii DEL JURADO DICTAMINADOR iv AGRADECIMIENTO v DEDICATORIA vi FRASE vii INDICE GENERAL viii INDICE DE CUADROS x INDICE DE FIGURAS xii RESUMEN xiii ABSTRACT xiv I.- INTRODUCCIÓN 1 1.- Marco filosófico 1 2.- Antecedentes 2 3.- Marco teórico 8 3.1. Densidad poblacional 8 3.2. Variables morfométricas 8 3.3. Hábitos alimentarios 9 3.4. Hematología 10 3.5. Cariotipo 10 3.6. Secuenciamiento de los genes 12S rRNA y tRNA-Val 12 3.7. Estado de Conservación 12 II.- MATERIAL Y MÉTODOS 14 2.1. Área de estudio 14 2.2. Material biológico 14 2.3. Metodología 14 viii a) Variables morfométricas 15 b) Densidad de la población 16 c) Amplitud de nicho mediante el uso del microhábitat 16 d) Hábitos alimentarios 17 e) Colecta y análisis de las muestras de heces 17 f) Estimación de la Amplitud del nicho trófico 17 g) Estimación de la Diversidad trófica 18 h) Valores hematológicos 18 i) Cariotipo 19 j) Extracción y secuenciamiento de ADN 20 k) Amplificación del ADN 21 l) Secuenciamiento 22 III.- RESULTADOS 23 3.1. Variabilidad de los caracteres morfométricos 23 3.2. Correlación lineal entre las variables morfométricas 26 3.3. Densidad poblacional 30 3.4. Amplitud de nicho 31 3.5. Valores hematológicos 39 3.6. Cariotipo 42 3.7. Secuenciamiento 46 IV.- DISCUSIÓN 53 V.- CONCLUSIONES 65 VI.- PROPUESTA 66 VII.- REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 68 ANEXOS ix INDICE DE CUADROS Cuadro Contenido Pág. Nº 1 Valores promedio, desviación estándar y coeficiente de variación de los caracteres morfométricos de D. guttulatum y D. holmbergi. 24 2 Valores promedio, desviación estándar y coeficiente de variación de los índices morfométricos de D. guttulatum y D. holmbergi. 25 3 Valores del coeficiente de correlación lineal, superiores a 0.5, entre los caracteres morfométricos de D. guttulatum y D. holmbergi. 26 4 Valores de “t” para probar diferencias de medias, entre los caracteres que tienden a la homogeneidad, por sexo, entre las especies D. guttulatum y D. holmbergi. 27 5 Valores de “t” para probar diferencias de medias, entre los índices morfométricos que tienden a la homogeneidad, por sexo, entre las especies D. guttulatum y D. holmbergi. 28 6 Densidad poblacional de D. guttulatum y D. holmbergi, estimado mediante el Índice de Lincoln en SHB Pómac y Pampa Tizal, (u.m.=500m2), 2007. 31 7 Número de individuos registrados en cada microhábitat utilizados por D. guttulatum en las cuatro estaciones del año y estimación de (B). 32 8 Número de individuos registrados en cada microhábitat utilizados por D. holmbergi en las cuatro estaciones del año y estimación de (B). 33 9 Lista de especies de plantas registradas en bosques de algarrobo de SHB. Pómac, 2007. 34 10 Categoría, frecuencia y porcentaje de alimento presente en las heces de D. guttulatum (n = 50). 35 11 Determinación del índice de Levins estandarizado según el tipo de alimento de D. guttulatum. 36 12 Determinación del Índices de diversidad trófica por el Complemento del Índice de Simpson, según el tipo de alimento de D. guttulatum. 36 x 13 Lista de especies de plantas registradas en bosques de algarrobo de Pampa Tizal (Chao), 2007. 37 14 Categoría, frecuencia y porcentaje de alimento presente en las heces (n=50) de D. holmbergi (Chao). 37 15 Determinación del Índice de Levins estandarizado según el tipo de alimento de D. holmbergi (Chao). 38 16 Determinación del Índice de Diversidad Trófica por el Complemento del Índice de Simpson, según el tipo de alimento de D. holmbergi (Chao). 39 17 Parámetros hematológicos y recuento de leucocitos en ejemplares hembras y machos de D. guttulatum. 40 18 Dimensiones promedio en micras y desviación estándar del citoplasma y núcleo de los eritrocitos de D. guttulatum. 42 19 Coeficiente de correlación entre el citoplasma y el núcleo de D. guttulatum. 42 20 Características morfométricas de los macrocromosomas de D. holmbergi. 44 21 Características morfométricas de los macrocromosomas de D. guttulatum. 46 22 Composición nucleotídica de del fragmento 12S rARN de D. guttulatum y D. holmbergi. Leyenda: POM: S.H.B. Pómac; ZRQ: Pampa Tizal. 51 xi INDICE DE FIGURAS Figura Nº Contenido Pág. 1 Similaridad de las especies D. guttulatum y D. holmbergi, en base los caracteres morfométricos. 29 2 Similaridad de las especies D. guttulatum y D. holmbergi, en base los índices morfométricos. 30 3 Uso del recurso microhábitat según las estaciones del año por D. guttulatum. 32 4 Uso del recurso microhábitat según las estaciones del año por D. holmbergi. 33 5 Categoría de alimento, frecuencia y porcentaje presente en heces de D. guttulatum. 35 6 Categoría de alimento, frecuencia y porcentaje presente en heces de D. holmbergi. 38 7 Placa metafásica de D. holmbergi (1000 aumentos). 43 8 Cariotipo de D. holmbergi (2n = 46). 43 9 Placa metafásica de los cromosomas de D. guttulatum (1000 aumentos). 45 10 Cariotipo de D. guttulatum (2n = 56). 45 11 ADN extraído de tejido muscular de D. guttulatum “cañán”. 47 12 Tamaño del segmento de ADN 1.3kb separado en gel de agarosa de D. guttulatum (D.g.) y D. holmbergi (D.h.). Marcador de peso molecular (P.M.). 47 13 Alineamiento de las secuencias del gen 12SL rARN mitocondrial (247- 566) de D. guttulatum y D. holmbergi. 49 14 Alineamiento de las secuencias del gen t-ARN-Val. (720-758) de D. guttulatum y D. holmbergi. 50 15 Relaciones filogeneticas de D. holmbergi y D. guttulatum con otras especies, obtenido de Blast Tree View Widge. 52 16 Relaciones filogeneticas de D. guttulatum y D. guttulatum con otras especies, obtenido de Blast Tree View Widge. 53 xii RESUMEN Los Teiidae Dicrodon guttulatum y Dicrodon holmbergi se distribuyen en las Regiones de Bosque Seco Ecuatorial y Desierto Pacífico Tropical entre los paralelos 03º56’ y 13º11’ de LS y 76°09’ y 81°21’ LN. En el norte de Perú se encuentran los bosques de algarrobo, entre ellos el Santuario Histórico Bosque de Pómac y Pampa Tizal; en ellos se realizaron muestreos sistemáticos al azar y utilizando mallas de carrizo para la captura de los ejemplares. El objetivo fue determinar el estado actual de las especies en perspectiva de un uso para el desarrollo sustentable de las comunidades aledañas al bosque; así mismo el de revalorizar a estas especies en un sentido ético, estético, social y económico, por estar involucradas con el sustento económico y la tradición gastronómica popular. El análisis se basó en el patrón de distribución de escamas supraoculares, índices morfométricos, valores hematológicos, caracterización por cariotipo, secuenciamiento de los genes 12S rARN y tARN-Val, hábitos alimentarios, uso del recurso microhábitat y tamaño poblacional. Las escamas supraoculares de D. guttulatum y D. holmbergi se encuentran rodeadas por dos hileras de escamas pequeñas, en la primera lo hace en forma incompleta, mientras que en la segunda de forma completa. Para D. guttulatum se determinó 350 individuos por hectárea y 2n = 56 cromosomas, y para D. holmbergi 214 individuos por hectáreas y 2n = 46 cromosomas. D. guttulatum es generalistas y D. holmbergi es especialista, se alimentan de foliolos e inflorescencias tiernos de algarrobo; pétalos y frutos pequeños de plantas arbustivas.