ESTUDO DO SISTEMA HETEROMÓRFICO DE AUTO -INCOMPATIBILIDADE EM UMA POPULAÇÃO DE PSYCHOTRIA NUDA (C HAM . & SCHLECHT .) WAWRA (R UBIACEAE ): MORFOLOGIA FLORAL ; SUCESSO REPRODUTIVO ; ASPECTOS CELULARES E TECIDUAIS; E ANÁLISE DA COMPOSIÇÃO PROTÉICA DE PARTES FLORAIS DENISE ESPELLET KLEIN UNIVERSIDADE ESTADUAL DO NORTE FLUMINENSE DARCY RIBEIRO - UENF CAMPOS DOS GOYTACAZES , RJ NOVEMBRO, 2007 Livros Grátis http://www.livrosgratis.com.br Milhares de livros grátis para download. ESTUDO DO SISTEMA HETEROMÓRFICO DE AUTO -INCOMPATIBILIDADE EM UMA POPULAÇÃO DE PSYCHOTRIA NUDA (C HAM . & SCHLECHT .) WAWRA (R UBIACEAE ): MORFOLOGIA FLORAL ; SUCESSO REPRODUTIVO ; ASPECTOS CELULARES E TECIDUAIS; E ANÁLISE DA COMPOSIÇÃO PROTÉICA DE PARTES FLORAIS DENISE ESPELLET KLEIN “Tese apresentada ao Centro de Biociências e Biotecnologia, da Universidade Estadual do Norte Fluminense Darcy Ribeiro, como parte das exigências para obtenção do título de Doutor em Biociências e Biotecnologia.” UNIVERSIDADE ESTADUAL DO NORTE FLUMINENSE DARCY RIBEIRO - UENF CAMPOS DOS GOYTACAZES , RJ NOVEMBRO , 2007 I ESTUDO DO SISTEMA HETEROMÓRFICO DE AUTO -INCOMPATIBILIDADE EM UMA POPULAÇÃO DE PSYCHOTRIA NUDA (C HAM . & SCHLECHT .) WAWRA (R UBIACEAE ): MORFOLOGIA FLORAL ; SUCESSO REPRODUTIVO ; ASPECTOS CELULARES E TECIDUAIS; E ANÁLISE DA COMPOSIÇÃO PROTÉICA DE PARTES FLORAIS DENISE ESPELLET KLEIN “Tese apresentada ao Centro de Biociências e Biotecnologia, da Universidade Estadual do Norte Fluminense Darcy Ribeiro, como parte das exigências para obtenção do título de Doutor em Biociências e Biotecnologia.” Aprovada em 26 de novembro de 2007 Comissão Examinadora: __________________________________________________________________ Prof. Flavio Costa Miguens (Doutor em Ciências Biológicas) – UENF __________________________________________________________________ Prof. Jorge Ernesto de Araujo Mariath (Doutor em Ciências Biológicas) – UFRGS __________________________________________________________________ Prof. Maria Cristina Gaglianone (Doutora em Entomologia) – UENF __________________________________________________________________ Prof. Leandro Freitas (Doutor em Biologia Vegetal) – JBRJ – Co-orientador __________________________________________________________________ Prof. Maura Da Cunha (Doutora em Ciências Biológicas) – UENF - Orientadora II A quatro pessoas maravilhosas: Ao meu pai, um exemplo de vida e um cúmplice no amor ao estudo da vida. À minha mãe, cujo incentivo e crença nas minhas capacidades são tão importantes para mim. À minha irmã, uma eterna fonte de inspiração e amizade. À Maura Da Cunha, que tem sido não só uma orientadora, mas também uma grande amiga com personalidade e força admiráveis. III Agradecimentos À minha orientadora, Dra. Maura Da Cunha, pela orientação, cumplicidade, confiança e incentivo. Ao co-orientador Dr. Leandro Freitas (IPJBRJ) pelo interesse, incentivo, pelas interessantes discussões e orientações sobre a reprodução em plantas. À colaboradora Dra. Valdirene M. Gomes (LFBM) pelo apoio em todos os momentos, discussão, auxílio e ensinamentos para as análises bioquímicas. À colaboradora Dra. Orthrud Monika Barth (UFRJ/IB) pelo aprendizado em palinologia e por ter aberto o seu laboratório para mim. Ao colaborador Prof. Carlos H. Klein (FIOCRUZ/ENSP) pelos ensinamentos e auxílio valoroso no desenvolvimento das análises estatísticas. Ao colaborador Dr. Sebastião José da Silva Neto (JBRJ) pela identificação de espécies e auxílio no entendimento da família Rubiaceae. Ao colaborador Dr. Renato DaMatta (LBCT) pela indispensável ajuda na manipulação e interpretação da microscopia confocal. Às professoras Dra. Ângela Pierre, Dra. Kátia Valevski S. Fernandes e Dra. Maria Cristina Gaglianone, pelos conselhos e discussão durante a defesa de projeto de doutorado. À Dra. Claudia Franca Barros (JBRJ) pelos valorosos conselhos, durante quase toda a minha vida acadêmica e por sempre manter as portas abertas. Aos responsáveis pelos laboratórios LBCT, LFBM e LQFPP da UENF; LBE do JBRJ; Laboratório Herta Meyer e Laboratório de Palinologia da UFRJ por propiciarem as condições necessárias para o desenvolvimento desse trabalho. Ao Programa Mata Atlântica (JBRJ) que me ofereceu suporte para realização desta tarefa. À curadoria do arboreto do Jardim Botânico do Rio de Janeiro, pela permissão da realização desse trabalho na área do Jardim Botânico do Rio de Janeiro. À curadoria dos herbários do JBRJ e da UENF e aos funcionários que auxiliaram a pesquisa nesses dois locais. À Dra. Telma N. S. Pereira (LMGV/ UENF), pela permissão do uso do microscópio de fluorescência. Ao Dr. Cláudio A. Retamal (LBCT) e ao MSc. Joseph A. M. Evaristo pelo auxílio no entendimento de dados da eletroforese. Ao Dr. Flavio C. Miguens pelos ensinamentos e auxílio nos microscópios eletrônicos. À Dra. Kátia Valevski S. Fernandes pela paciência durante uma criteriosa revisão e pela interessante discussão sobre este manuscrito. Aos professores Dr. Flavio C. Miguens, Dr. Jorge E. A. Mariath e Dra. Maria Cristina Gaglianone por aceitarem participar da banca de defesa desta tese e pelo oferecimento de suas visões sobre este trabalho. Às instituições financiadoras CAPES, CNPq, FAPERJ, pelo auxílio financeiro. Ao técnico Ricardo Matheus (Laboratório de Sementes/JBRJ) pela indicação da trilha utilizada e informações sobre essa. IV Aos técnicos do LBCT, em especial Beatriz, Giovana, Márcia Adriana e Noil (LFBM); e do LBE (JBRJ) por todo o auxílio na confecção de soluções, grades, fotografias, no uso dos microscópios, além da boa convivência nos laboratórios. Às técnicas Jucélia (LQFPP) e Érica (LFBM) pelos imprescindíveis auxílios no preparo das amostras para bioquímica de proteínas. Aos amigos e colegas do “grupo da Maura” pois, apesar de todas as confusões que a convivência no cotidiano traz, todos auxiliaram direta ou indiretamente na realização desse trabalho. Emilio, Guilherme e Tarsila, eu aprendi muitas coisas com vocês. Aos amigos e companheiros que toparam ir a campo comigo, fosse por 30 minutos ou um dia inteiro; uma vez só ou várias vezes nesses anos; sob o sol, e até sob chuva. São eles: Ricardo Matheus, Emilio C. Miguel, Gabriela N. de Souza, Carlo A. Zaldini, Carlos H. Klein, Gabriel U. dos Santos, Fernanda B. B. de Hollanda, Alex Barreto, Branca M. O. Medina, Rubem S. Ávila Jr., José R. Vianna, Carlos W. de Oliveira, Rodolfo C. R. Abreu, Nara L. Vasconcellos, Ivone S. M. Gallardo, Rafael Maul C. Costa, Tatiana Fernandes, Fernanda Casares, Mariana Sá Viana, Leandro Freitas, Roberto N. Ramos, Adriana Lobão, Fátima Freitas, Rafael (herbário), Andrea L. Rosa, Valéria C. Marques, Beatriz S. Ferreira, Luisa, Maria Claudia Villicana T., Elisângela M. Almeida. Puxa... Espero não ter esquecido de ninguém. Aos alunos Camilla Alexandrino, Caroline F. Ricardo, Felipe Rosário e Lidiane S. da Rocha pelo grande auxílio nas tarefas do laboratório e por compartilharem o interesse pelo estudo da anatomia do eixo reprodutivo. Aos amigos e colegas de todos os laboratórios nos quais trabalhei, em especial André e Izabela no LFBM e Cíntia no Laboratório de Palinologia, pelos ensinamentos e auxílio na realização de técnicas. Aos colegas Hérika, Neuma e Pedro (LMGV/UENF), aos alunos do Dr. Leandro Freitas e demais alunos do curso “Sistemas de Reprodução em Angiospermas” (ENBT/2003) pelas interessantes discussões sobre técnicas e conceitos da reprodução. Ao Dr. Antonio H. A. de Moraes Neto e Érick Vaz Guimarães por possibilitarem e auxiliarem o uso do Microscópio Eletrônico de Transmissão do LBE – Depto. Ultra Estrutura e Biologia Celular – IOC – Fiocruz. Aos companheiros de tutoria do CEDERJ, pela eterna quebra da rotina e por me agüentarem nesta fase difícil. Aos meus pais e irmã e às famílias Espellet e Klein; sem a colaboração de vocês eu não teria conseguido. A todos os amigos, vocês sempre foram fontes de conselhos, felicidade, confiança e estímulo. V Sumário Índice de figuras, gráficos e tabelas.................................................................. IX Resumo............................................................................................................. XII Abstract............................................................................................................. XIV I. Introdução............................................................................................ 01 II. Objetivos............................................................................................. 11 III.1 Capítulo 1 - Estudo da biologia reprodutiva de Psychotria nuda : morfologia floral; sucesso reprodutivo; deposição de grãos de pólen sobre o estigma; e distribuição das formas florais.................. 12 1.1. Introdução................................................................................... 12 1.2. Objetivos..................................................................................... 15 1.3. Material e métodos..................................................................... 16 1.3.1. Espécie estudada............................................................... 16 1.3.2. Local do estudo.................................................................. 16 1.3.2.1. Localização das populações utilizadas para comparação........................................................... 16 1.3.3. Taxa de ocorrência das formas florais e distribuição de vizinhos......................................................................... 17 1.3.4. Morfometria floral............................................................... 17 1.3.5. Sistema reprodutivo..........................................................