Universidade de São Paulo Escola Superior de Agricultura “Luiz de Queiroz” Avaliação do potencial inseticida de Azadirachta indica (Meliaceae) visando ao controle de moscas-das-frutas (Diptera: Tephritidae) Márcio Alves Silva Dissertação apresentada para obtenção do título de Mestre em Ciências. Área de concentração: Entomologia Piracicaba 2010 3 Márcio Alves Silva Engenheiro Agrônomo Avaliação do potencial inseticida de Azadirachta indica (Meliaceae) visando ao controle de moscas-das-frutas (Diptera: Tephritidae) Orientador: Prof. Dr. JOSÉ DJAIR VENDRAMIM Dissertação apresentada para obtenção do título de Mestre em Ciências. Área de concentração: Entomologia Piracicaba 2010 Dados Internacionais de Catalogação na Publicação DIVISÃO DE BIBLIOTECA E DOCUMENTAÇÃO - ESALQ/USP Silva, Márcio Alves Avaliação do potencial inseticida de Azadirachta indica (Meliaceae) visando ao controle de moscas-das-frutas (Diptera: Tephritidae) / Márcio Alves Silva. - - Piracicaba, 2010. 159 p. : il. Dissertação (Mestrado) - - Escola Superior de Agricultura “Luiz de Queiroz”, 2010. Bibliografia. 1. Aleloquímicos 2. Insecta 3. Mosca-das-frutas 4. Resistência de plantas 5. Rutales Título CDD 632.774 S586a “Permitida a cópia total ou parcial deste documento, desde que citada a fonte – O autor” 3 Aos meus pais: José Mendes da Silva e Jacy Alves Natividades da Silva A minha irmã: Márcia Alves Silva Soares Ao meu primo: Delmacio Antunes Alves Por acreditarem em mim incondicionalmente. Agradeço e ofereço. A Gerane Celly Dias Bezerra Silva, pela compreensão, por me incentivar sempre, pelo amor e apoio inenarrável. DEDICO 4 5 AGRADECIMENTOS A Deus, por iluminar e guiar meu caminho. À Dra. Clarice Diniz Alvarenga Corsato, por acreditar no meu potencial e ampliar minha visão de ciência. À Escola Superior de Agricultura “Luiz de Queiroz”, pela oportunidade propiciada. Ao meu orientador, Prof. Dr. José Djair Vendramim, um exemplo de dedicação e profissionalismo, pela sua orientação, atenção, disponibilidade e paciência. Ao Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPQ), pela concessão da bolsa de Mestrado. Aos professores do Programa de Pós-Graduação em Entomologia do Departamento de Entomologia e Acarologia da ESALQ/USP, pelos ensinamentos transmitidos. Ao Prof. Dr. Julio Marcos Melges Walder e à bióloga Maria de Lourdes Zamboni Costa, “Lia”, ambos do Laboratório de Radioentomologia do CENA/USP, pela atenção e presteza no fornecimento das moscas-das-frutas. Ao Prof. Dr. Moacir Forim, do Departamento de Química da UFSCAR, pela colaboração na execução desse trabalho. Ao empresário Roberto, da Empresa Baraúna Indústria e Comércio Ltda, pela atenção e doação das amêndoas e do óleo de nim. À bióloga Solange Aparecida Vieira-Barros e Giuliano Pauli, pelo suporte técnico na liofilização dos extratos. 6 A Thiago Mastrangelo, pelo auxílio no desenvolvimento desse trabalho, nas suas mais variadas interfaces, um grande amigo que eu ganhei em terras paulistas. Aos companheiros da Biofábrica Moscamed Brasil. Aos amigos e colegas do Laboratório de Resistência de Plantas a Insetos e Plantas Inseticidas da ESALQ/USP: Ana Paula Korndorfer, Angelina Marcomini, Cristina Jensen, Eliane Grisoto, Elton Martins, Fátima Rampelotti, Leandro Ribeiro, Maria Auxiliadora Oriani (Cia), Mônica Santos, Paulo Bogorni, Rafael Pitta e Sheila Carvalho, pela amizade e experiências compartilhadas. Ao meu companheiro de laboratório Marcos Lima e sua esposa Cynthia, pela amizade, paciência, auxílo e, sobretudo pela compreensão. Valeu Marcão! Aos companheiros de república: Luzimário, Roque, Anderson, Vinicíus, Renata e “Julia”, pelos momentos de alegria e distração. Aos amigos: Cherre, Gleidyane, Amanda e Jaci, pelos grandes momentos. Na verdade, o mais importante é saber que posso contar com vocês sempre. Às bibliotecárias Eliana Maria Garcia e Silvia Zinsly, pela correção das referências e revisão do trabalho. A todos os funcionários do Departamento de Entomologia e Acarologia, pela amizade e auxílios prestados. A todos os demais colegas do Departamento de Entomologia e Acarologia, pela convivência. A todos vocês, meus sinceros agradecimentos. 7 SUMÁRIO RESUMO.............................................................................................................................. 11 ABSTRACT.......................................................................................................................... 13 LISTA DE FIGURAS........................................................................................................... 15 LISTA DE TABELAS.......................................................................................................... 17 1 INTRODUÇÃO................................................................................................................ 21 1.1 Revisão bibliográfica....................................................................................................... 23 1.1.1 Moscas-das-frutas (Diptera: Tephritidae).................................................................... 23 1.1.1.1 Aspectos taxonômicos e biogeográficos................................................................... 23 1.1.1.2 Aspectos bioecológicos de Ceratitis capitata........................................................... 25 1.1.1.3 Aspectos bioecológicos de Anastrepha fraterculus................................................. 29 1.1.1.4 Importância econômica dos tefrítideos no contexto brasileiro................................. 31 1.1.2 O nim (Azadirachta indica).......................................................................................... 34 1.1.2.1 Caracterização da espécie......................................................................................... 34 1.1.2.2 Aspectos químicos.................................................................................................... 36 1.1.2.3 Propriedade inseticida dos derivados do nim sobre insetos fitófagos...................... 43 1.1.3 O nim no contexto do manejo integrado de moscas-das-frutas................................... 46 Referências............................................................................................................................ 52 2 EFEITO DE DERIVADOS DO NIM COMPONDO UMA ISCA E COMO REGULADOR DE CRESCIMENTO DE MOSCAS-DAS-FRUTAS............................ 69 Resumo.................................................................................................................................. 69 Abstract................................................................................................................................. 69 2.1 Introdução........................................................................................................................ 70 2.2 Desenvolvimento............................................................................................................. 72 2.2.1 Material e Métodos....................................................................................................... 72 2.2.1.1 Criação de moscas-das-frutas em condições de laboratório...................................... 72 2.2.1.2 Obtenção e rendimento dos extratos aquosos e orgânicos de diferentes estruturas do nim.................................................................................................................................... 73 2.2.1.3 Determinação da azadiractina nos derivados do nim................................................ 74 2.2.1.4 Padronização de um atrativo alimentar para os bioensaios com adultos de moscas-das-frutas.................................................................................................................. 75 8 2.2.1.5 Estimativa da CL50 de extrato aquoso de amêndoas de nim para adultos de Anastrepha fraterculus e Ceratitis capitata.......................................................................... 77 2.2.1.6 Avaliação da atividade inseticida de derivados do nim em relação a adultos de Anastrepha fraterculus e Ceratitis capitata.......................................................................... 77 2.2.1.7 Estimativa da CL50 de extrato aquoso de amêndoas de nim para imaturos de Anastrepha fraterculus e Ceratitis capitata ......................................................................... 78 2.2.1.8 Avaliação da atividade inseticida de derivados do nim em relação a imaturos de Anastrepha fraterculus e Ceratitis capitata.......................................................................... 79 2.2.1.9 Análise estatística...................................................................................................... 79 2.2.2 Resultados e discussão................................................................................................. 80 2.2.2.1 Rendimento dos extratos aquosos e orgânicos de diferentes estruturas do nim......................................................................................................................................... 80 2.2.2.2 Determinação da azadiractina nos derivados do nim................................................ 82 2.2.2.3 Padronização de um atrativo alimentar para os bioensaios com adultos de moscas-das-frutas.................................................................................................................. 84 2.2.2.4 Estimativa da CL50 de extrato aquoso de amêndoas de nim para adultos de Anastrepha fraterculus e Ceratitis capitata ......................................................................... 85 2.2.2.5 Avaliação da atividade inseticida de derivados