UNIVERSIDAD NACIONAL DE LA PLATA FACULTAD DE CIENCIAS EXACTAS DEPARTAMENTO DE QUÍMICA Trabajo de Tesis Doctoral “Efectos de herbicidas sobre la diferenciación sexual de Leptodactylus latrans” Tesista Lic. Nadia Carla Bach Directores Alicia E. Ronco Gustavo M. Somoza Codirector Guillermo S. Natale 2018 A mi abuela, ejemplo de amor y fortaleza y principio de todo. A mis padres, por el amor, la libertad y los valores transmitidos...y por hacer siempre todo posible. A mi querida Nina, por su gran sabiduría y por seguir enseñándome más allá de este mundo. “Entonces un extraño agotamiento se extendió por la comarca y todo empezó a cambiar. Algún maleficio se había adueñado del lugar; misteriosas enfermedades destruyeron las aves de corral; los ovinos y las cabras enflaquecieron y murieron. Por todas partes se extendió una sombra de muerte. Los campesinos hablaron de muchos males que aquejaban a sus familias. En la ciudad, los médicos estaban más y más confusos por nuevas afecciones que aparecían entre sus pacientes. Hubo muchas muertes repentinas e inexplicables, no solo entre los adultos, sino entre los niños que, de pronto, eran atacados por el mal mientras jugaban, y morían a las pocas horas. Se produjo una extraña quietud. Los pájaros, por ejemplo... ¿dónde se habían ido? Mucha gente hablaba de ellos, confusa y preocupada. Los corrales estaban vacíos. Las pocas aves que se veían estaban moribundas: temblaban violentamente y no podían volar. Era una primavera sin voces. En las madrugadas que antaño fueron perturbadas por el coro de gorriones, golondrinas, palomos, arrendajos y petirrojos, y otra multitud de gorjeos no se percibía un solo rumor; solamente el silencio se extendía sobre los campos, los bosques y las marismas.” (Rachel Carson 1962, Primavera Silenciosa) Agradecimientos La realización de una tesis doctoral, es un proceso que lleva muchos años de trabajo y durante el cual la vida nos atraviesa y nos puede cambiar por completo, incluso no una, sino varias veces. Esta sección de la Tesis está dedicada a todos aquellos que cambiaron y cambian mi vida cada día, que hicieron de mí la persona que soy, ayudándome a construir, y que de manera directa o indirecta contribuyeron significativamente en la realización de esta Tesis. En primer lugar, quiero agradecer a Dios, por no dejarme nunca sola y por ser ese Gran Apoyo en los momentos más difíciles, y sobre todo por darme tanta Paz. En segundo lugar al CONICET, y a todos los ciudadanos de este país, que hacen posible que los becarios podamos acceder a una educación de excelencia. A mis directores, Nina, Gustavo y Guillermo. A Nina, por haber sido un pilar fundamental para la realización de esta tesis, por tantos consejos, por su preocupación, por su tiempo. Por tirarme siempre para arriba, por no dejarme aflojar, por tanta ayuda, tantas palabras afectuosas, tantas palabras de ánimo. Por creer en mí. Por haber estado siempre presente. Por buscar siempre, siempre, siempre mi beneficio. Por regalarme tardes de té y tostadas con miel. Por compartir sus conocimientos conmigo, de la ciencia, y de la vida. Por haberme enseñado tanto… Nina, me hiciste mucha falta en esta última etapa y me resulta imposible expresar con palabras el gran vacío que sentí con tu partida. Lo difícil que todo se hizo al principio, pero poco a poco, retomar la escritura, revisar mis cuadernos y encontrar tus anotaciones… GRACIAS! mi agradecimiento hacia vos es INMENSO para que te llegue mi abrazo más allá de esta Vida. A Gustavo, por su profesionalismo. Por abrirme las puertas de su laboratorio y por creer en mí. Por enseñarme acerca de la biología molecular. Y por sobre todas las cosas por su gran confianza y libertad. Por dejarme realizar esta tesis, de la manera que yo la hubiera hecho, y por mostrarme, con paciencia, mis errores. Especialmente por su apoyo y ayuda para continuar en este camino de la investigación, sobre todo en esta última etapa. A Guillermo, por tantos años de trabajo. Por abrirme las puertas de su laboratorio, donde inicie mis primeros pasos en la investigación. Por enseñarme acerca de los anfibios. Por compartir sus conocimientos de estadística y ayudarme en cada diseño experimental. Por su tiempo, por su ayuda especialmente durante los monitoreos y experimentos, sobre todo durante el primer año de esta tesis, cuando parecía que este momento no llegaría nunca. A mi familia, En primer lugar a mis padres, Patricia y Antonio, por criarme con amor y libertad de elegir, por enseñarme, sobre todo, el significado de la verdad. Por su ayuda ENORME frente a todas las circunstancias de la vida. Por entender cada una de mis ausencias y llegadas tarde aun en fechas especiales porque “estaba con un ensayo”… por comprender mi inusual horario de trabajo. Por su gran comprensión y alegría en cada uno de mis logros. Por entender Siempre y no cuestionar Nunca mis decisiones, por hacer todo posible…los amo. En segundo lugar, a mi esposo JuanMa. Gracias por llenar de luz mis días. Por enseñarme a ver las cosas desde otra perspectiva, ser mi sostén y apoyo, siempre. Gracias por compartir tu pasión conmigo, por enseñarme, escucharme y valorarme. Por tus palabras de ánimo, incansables. Gracias por creer en mí. Por tu inmensa generosidad y comprensión. Por todo el amor que me das, y por ponerme siempre en el primer lugar. Gracias por cada uno de tus abrazos, por la fuerza y por tu paciencia sobre todo en estas últimas semanas. Gracias por tantas risas, tanta compañía y tantos colores… A mi queridísima abuela Elena, por el amor y enseñanzas transmitidos a través de los años. Por tanta dedicación y cuidado recibido. Por despertar siempre en mi una gran ternura y sonrisa… y por regalarme tantos recuerdos, sos un verdadero tesoro abu! Y una de las personas de las que más he aprendido. Gracias por ser tan hermosa… A mis hermanos, de menor a mayor, Erik, Ax, Cin, Bladi e Iván. A ellos gracias por su apoyo, por ser siempre una alegría encontrarnos. Por hacer tan divertidas nuestras reuniones familiares. Por las discusiones de sobremesa. Por estar siempre, más allá de la distancia, por hacerme extrañarlos, y por los reencuentros. A mis cuñadas, Lore, Pao Y Mari, por hacer felices a mis hermanos y por quererme y hacer que las quiera como hermanas. Por las charlas “femeninas” y por su gran ayuda siempre que la necesité. A mi cuñado Daniel, por hacer feliz a mi hermana y por las charlas y mates compartidos. Y a todos ellos ¡por darme unos hermosos sobrinos! A mis sobrinos, Mia, Maia, Milo, Juli, Beni, Laure, Santi, Baltha, Igor, Boris, Keki y Anto. Por hacerme jugar y reír, por mostrarme su mundo y por hacerme olvidar de las cuestiones y responsabilidades de la vida adulta. A mi familia política, A mis suegros: Delia y Raúl, por aceptarme y quererme. Por compartir conmigo, estar presentes y pendientes a pesar de la distancia. Por recibirme como una hija más, y hacerme sentir cómoda en cada oportunidad. A mis cuñados y primos políticos: ¡¡¡son muchos!!! No los voy a nombrar a cada uno, a todos ustedes les agradezco enormemente estar siempre presentes. Por las reuniones familiares, las risas y por hacerme sentir una más de la familia. ¡¡¡Gracias!!! A mis amigas de la vida (en orden alfabético, jajaja), Anto, Flor, Mechi, Negra, Romi y Tami. Por la hermosa amistad construida a través de los años, por estar ¡SIEMPRE! en cada uno de mis logros y comprender mis ausencias y mis obligaciones. Por escucharme y aconsejarme a través de los años. Por su curiosidad e interés en cada una de las cosas que emprendo y por tanto amor y tantas cosas compartidas. Por ser cada encuentro, aunque cada vez más esporádicos, una auténtica celebración. ¡Las quiero! A mis amigas de la facu, Bel, Caro y Mari. Por compartir conmigo el gusto por la biología y acompañarme y bancarme durante ¡¡tantos años!! Por ser mi sostén, mis consejeras y mis oídos tantas veces. Por darme su apoyo siempre que lo necesite. Por tantas catarsis, discusiones y consultas estadísticas. Por por aceptarme tal como soy, por tantas risas, tantos recuerdos y por hacer mi vida más feliz. ¡Las quiero! A mis amigas del doctorado, Pato y Leti. Gracias por tantos momentos compartidos, tantas catarsis, cervezas, y charlas. Tantas palabras de ánimo, tantas tristezas y tantas alegrías compartidas. Tantos nervios, historias, viajes…¡¡tanto aguante!! y ahora cada una en un punto distinto del país… ¡Que el trio motoneta no muera nunca, las quiero! A toda la gente del CIMA, en especial a mis compañeros de la Unidad 5, Caro, JuanMa, Sansi y Flor. Gracias por las horas compartidas en el subsuelo. Tantos ensayos, crías de larvas, salidas de campo, congresos y reuniones compartidas. Gracias por hacer más ameno el trabajo codo a codo, con música y mates de por medio. ¡¡Y compartiendo nuestro amor por este bellísimo grupo de vertebrados!!! Un agradecimiento especial a Damián Marino por su colaboración en la medición de las soluciones stock y las soluciones de ensayo utilizadas en esta tesis. A toda la gente del IIB-INTECH-Chascomús, especialmente a la gente de UBP: Han sabido formar un grupo muy lindo y auténtico y espero que nunca pierdan ese espíritu. Gracias por hacerme sentir una más del grupo, por la buena onda y el inmenso compañerismo, por ayudarme desinteresadamente ¡TANTAS VECES! Por las charlas, las risas, los almuerzos, los mates, los abrazos y festejos en cada PCR que salía bien y porque me llevo amigos de esta hermosa interacción! Gracias! A Oswal, Ane, Brian, Pame, Angie, y Christian. ¡Los voy a extrañar! A Cari, por la ayuda INMENSA! por haberme enseñado todo lo que sé acerca de la histología.