Detection of Xanthomonas Fragariae in Symptomless Strawberry Plants by Nested PCR

Detection of Xanthomonas fragariae in symptomless strawberry plants by nested PCR

Moltmann, E.; Zimmermann, C. Landesanstalt für Pflanzenschutz, Reinsburgstraße 107, D-70197 Stuttgart; [email protected]

Xanthomonas fragariae is present in South West Germany since 1994. It causes angular leaf spots, blackening of sepals and occasionally collapse of plants due to ooze formation in the vascular system. Calyx infections can lead to losses of 10 – 20 % in fruit production. In the European Union and many other countries the disease is on the quarantine list. After the first description in the USA in 1959, it spread quickly and is now found in almost every country growing strawberries. The worldwide distribution is mainly due to symptomless infected strawberry plantlets.

Xanthomonas fragariae is a very slow growing bacterium and is easily overgrown by saprophytic bacteria. Therefore, plating is not a suitable method for detecting low numbers of bacteria in symptomless plants. In addition, selective media are not available. Serological assays like immunofluorescence are useful for testing in- vitro-plants, but they are not suitable for field grown plants as crossreactions are common with the available antisera. For these plants nested PCR with primers from Pooler and Zimmermann proved to be a valuable method. The method was successfully applied for testing import plants (frigo- and green plants) and for a survey of strawberry plants from fields for propagation and production in Germany.

Détection de Xanthomonas fragariae sur des plants de fraisiers ne présentant pas de symptômes par nested PCR

Xanthomonas fragariae est présente dans le sud-ouest de l’Allemagne depuis1994. Elle provoque des taches anguleuses sur les feuilles, un noircissement des sépales et occasionnellement un affaissement des plantes du à une formation d’ooze dans le système vasculaire. L’infection des calices peut conduire à des pertes de 10 – 20 % de la production de fruits. Dans l’Union européenne et de nombreux autres pays, la maladie est inscrit sur la liste de quarantaine. Après sa première description aux USA en 1959, elle s’est disséminée rapidement et on la trouve maintenant dans presque tous les pays producteurs de fraises. La répartition mondiale est essentiellement due aux plantules infectées sans symptômes.

Xanthomonas fragariae est une bactérie qui pousse très lentement et est aisément surpassée par des bactéries saprophytes. Par conséquent, l’étalement n’est pas une méthode adéquate pour détecter les faibles nombres de bactéries dans les plants sans symptômes. De plus, aucun milieu sélectif n’est disponible. Des analyses sérologiques comme l’immunofluorescence sont utiles pour tester les plants in-vitro, mais elles ne conviennent pas pour les plants cultivés en plein champ car des réactions croisées sont fréquentes avec les antisérums disponibles. Pour ces plantes, la nested PCR avec des amorces de Pooler et Zimmermann a prouvé son efficacité. La méthode a été appliquée avec succès pour tester des plants à l’importation (plants frigo et « verts ») et pour une prospection sur fraisiers provenant de champs de propagation et de production en Allemagne.