FABILE SCHLICKMANN ESTUDOS QUÍMICOS E AVALIAÇÃO DAS ATIVIDADES ANTIMICROBIANA E DIURÉTICA DAS FOLHAS DE Mimosa bimucronata (MARICÁ) E ANTIMICROBIANA DAS CASCAS DO FRUTO DE Mimusops balata (ABRICÓ-DA-PRAIA) Itajaí (SC) 2018 UNIVERSIDADE DO VALE DO ITAJAÍ PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM CIÊNCIAS FARMACÊUTICAS ÁREA DE CONCENTRAÇÃO EM PRODUTOS NATURAIS E SUBSTÂNCIAS SINTÉTICAS BIOATIVAS FABILE SCHLICKMANN ESTUDOS QUÍMICOS E AVALIAÇÃO DAS ATIVIDADES ANTIMICROBIANA E DIURÉTICA DAS FOLHAS DE Mimosa bimucronata (MARICÁ) E ANTIMICROBIANA DAS CASCAS DO FRUTO DE Mimusops balata (ABRICÓ-DA-PRAIA) Tese de Doutorado submetida à Universidade do Vale do Itajaí como parte dos requisitos para a obtenção do grau de Doutor em Ciências Farmacêuticas. Apoio financeiro concedido pela CAPES. Orientador: Prof. Dr. Valdir Cechinel Filho. Itajaí (SC) Dezembro, 2018 Ficha Catalográfica S36e Schlickmann, Fabile, 1989- Estudos químicos e avaliação das atividades antimicrobiana e diurética das folhas de Mimosa bimucronata (maricá) e antimicrobiana das cascas do fruto de Mimusops balata (abricó-da-praia) [Manuscrito] / Fabile Schlickmann. - Itajaí, SC. 2018. 180 f. ; il. ; graf. ; fig. ; tab. Inclui Referências bibliografias (Cópia de computador (Printout(s)). Tese de Doutorado submetida à Universidade do Vale do Itajaí como parte dos requisitos para a obtenção do grau de Doutor em Ciências Farmacêuticas. Apoio financeiro concedido pela CAPES. “Orientador: Prof. Dr. Valdir Cechinel Filho.” 1. Produtos Naturais. 2. Plantas medicinais. 3. Farmacologia. 4. Análise fitoquímica. 5. Antimicrobiana. 6. Diurético. I. Universidade do Vale do Itajaí. II. Título. CDU: 615.32 Bibliotecária Eugenia Berlim Buzzi CRB 14/493. Dedicatória Dedico este trabalho à minha mãe Alivir, que em todo tempo se alegrou com minhas conquistas para alcançar este título; ao meu pai Vicente, vivo em minhas memórias mais especiais; e à minha tia Denize, que com doçura esteve presente pelo tempo que Deus permitiu. Dedico ainda, ao meu avô João de Lorenzi Cancelier, que em sua imensa bondade e sabedoria, auxiliou a comunidade de Angelina/SC com fitoterápicos, nas décadas de 50 e 60. AGRADECIMENTOS À Deus, por me dar a vida, força, determinação e principalmente serenidade para seguir esta trajetória; À minha mãe, sempre presente com seu amor, carinho, dedicação, preocupação e orações para que eu cursasse este caminho com êxito; Aos meus irmãos e irmãs, cunhados e sobrinha pela compreensão e apoio nos momentos difíceis; À minha prima Geisa, à minha madrinha Lourdes e ao meu padrinho Audi, sempre presentes em minha vida, acolhendo-me carinhosamente em nossos encontros; Aos amigos que compartilharam importantes momentos: Nicole e Vika, Beth, Bruna Taufenbach, Thiago Mello, Marcel e Fernanda Stenger; Ao meu amigo e orientador Prof. Dr. Valdir Cechinel Filho, inspiração a ser seguida, pela amizade construída ao longo destes anos, pelos ensinamentos e apoio constante em todos os momentos. Prof. estimado, és o exemplo real da seguinte citação: “A simplicidade é o último degrau da sabedoria” (Khalil Gibran). Minha eterna gratidão por ter cruzado o meu caminho um ser humano de tamanha luz, bondade e sabedoria. Ao Prof. Theodoro Marcel Wagner, ao Funcionário Pedro Pablo Perez Netto (RMN), Prof. Oscar Iza e ao Herbário Barbosa Rodrigues, pela contribuição; À Profa. Dra. Ângela Malheiros pela dedicação e amizade, pela ajuda e atenção na elaboração deste trabalho; À Profa. Dra. Fátima de Campos Buzzi e equipe; À Profa. Dra. Priscila de Souza e equipe; À FURB e Dra. Adrielli Tenfen e equipe; À banca avaliadora, Prof. Dra. Ângela, Prof. Dra. Nara, Dr. Marcel e Dr. Eduardo, pela disposição em avaliar e contribuir com o presente trabalho; Ao Prof. Dr. Clóvis, pelo apoio e à equipe da coordenação do PPGCF/Univali; À secretaria do PPGCF: Juliano e Helenize, sempre solícitos e atenciosos; À secretaria de Educação Navegantes/SC pelo apoio e liberação concedida para cursar este último ano de Doutorado; À CAPES e CNPq pela oportunidade e apoio financeiro; À todos que estiveram envolvidos neste período e que contribuíram de alguma forma. MUITO OBRIGADA! EPÍGRAFE “Alguns homens veem as coisas como são, e dizem ‘Por quê’? Eu sonho com as coisas que nunca foram e digo ‘Por que não?'” (George B. Shaw) “A verdadeira viagem de descobrimento não consiste em procurar novas paisagens, e sim em ter novos olhos”. (Marcel Proust) “Os olhos são a candeia do corpo. Se os seus olhos forem bons, todo o seu corpo será cheio de luz”. (Mateus 6:22 / Bíblia NVI). “Todo saber é vão, exceto quando há trabalho. E todo trabalho é vazio, exceto quando há amor. E quando trabalhais com amor, vós vos unis a vós próprios, e uns aos outros, e a Deus”. (Khalil Gibran) ESTUDOS QUÍMICOS E AVALIAÇÃO DAS ATIVIDADES ANTIMICROBIANA E DIURÉTICA DAS FOLHAS DE Mimosa bimucronata (MARICÁ) E ANTIMICROBIANA DAS CASCAS DO FRUTO DE Mimusops balata (ABRICÓ-DA-PRAIA) FABILE SCHLICKMANN Dezembro, 2018 Orientador: Valdir Cechinel Filho, Doutor. Área de concentração: Produtos Naturais e Substâncias Sintéticas Bioativas. Número de páginas: 180. A utilização de compostos provenientes de plantas no desenvolvimento de fármacos tem sido uma área promissora de investigação química. O objetivo da presente pesquisa foi realizar estudos fitoquímicos e avaliação das atividades antimicrobiana e diurética do extrato metanólico bruto, frações e compostos das folhas de Mimosa bimucronata (maricá) e antimicrobiana do extrato metanólico bruto e frações das cascas do fruto de Mimusops balata (abricó-da-praia). A análise fitoquímica foi realizada com material fresco das plantas escolhidas, em maceração por metanol por sete dias, seguida da partição líquido-líquido com solventes de polaridades distintas afim de se obterem as frações diclorometano e acetato de etila, respectivamente. Tais frações foram submetidas a cromatografia em coluna convencional (CC) com gradiente de polaridade crescente para o isolamento dos constituintes majoritários de cada espécie. Os compostos isolados foram identificados por meio de técnicas de cromatografia gasosa acoplado a detector massas (CG/EM), além de ressonância magnética nuclear (RMN) de 13C e 1H. Em alguns casos foi usada cromatografia em camada delgada (CCD) para confirmação estrutural usando padrões autênticos. Das folhas de M. bimucronata foram identificados o ácido gálico e o galato de metila. Das cascas do fruto de M. balata, foram identificados os ácidos ursólico e oleanólico, ácido rotúndico e composto com características dos ácidos pomólico e cinchólico. A análise antimicrobiana avaliou extratos brutos e frações de M. bimucronata e M. balata contra cepas de bactérias com e sem parede celular, por meio da técnica de microdiluição em caldo; avaliou a atividade antifúngica in vitro dos extratos brutos e frações de M. bimucronata contra Bacillus subtilis; Staphylococcus aureus; Escherichia coli e Candida albicans. Dentre o material avaliado, a fração diclometano das folhas de M. bimucronata (FDCMF) foi a que melhor inibiu as cepas. O extrato metanólico das folhas de M. bimucronata (EMBF) exibiu atividade antimolicute moderada. A fração diclorometano das cascas do fruto de M. balata (FDCMC) foi a única que apresentou atividade antimicrobiana eficaz contra os molicutes. A fração acetato de etila das cascas do fruto de M. balata (FAEF) demonstrou eficácia contra Candida albicans. Foi verificada ainda, a atividade diurética, natriurética e caliurética dos extratos, frações e dos compostos obtidos mais promissores de M. bimucronata em ratos. O EMBF e FAEF exibiram efeito diurético e salurético quando administrados por via oral a ratos. Da mesma forma, o componente majoritário galato de metila (GM) revelou propriedades diuréticas, natriuréticas e caliuréticas em ratos. O ácido gálico (AG) induziu efeitos diuréticos e saluréticos (Na+ e Cl-), sem interferir na excreção de K+, quando administrados por via oral a ratos na dose de 3 mg/kg. Embora várias atividades biológicas já tenham sido descritas para o AG, este é o primeiro estudo que demonstra seu potencial como agente diurético. Palavras-chave: Mimosa bimucronata. Mimusops balata. Análise fitoquímica. Antimicrobiana. Diurético. CHEMICAL STUDIES AND EVALUATION DIURETIC AND ANTIMICROBIAL ACTIVITIES LEAVES OF THE Mimosa bimucronata (MARICÁ) AND ANTIMICROBIAL BARKS FRUITS OF Mimusops balata (ABRICÓ-DA- PRAIA) FABILE SCHLICKMANN December 2018 Advisor: Valdir Cechinel Filho, PhD. Area of concentration: Natural Products and Bioactive Synthetic Substances. Number of pages: 180. The use of plant compounds in drug development has been a promising area for chemical research. The aim of this work was to carry out phytochemical studies and antimicrobial and diuretic evaluation of the crude methanolic extract, fractions and isolated compounds from Mimosa bimucronata (maricá) leaves and antimicrobial of the crude methanolic extract and fractions of Mimusops balata (abricó-da-praia) fruit’s barks. The phytochemical analysis was carried out with fresh plants material, in maceration by methanol for seven days, followed by the liquid-liquid partition with solvents of different polarities to obtain the dichloromethane and ethyl acetate fractions, respectively. These fractions were subjected to conventional chromatography column (CC) with gradient of increasing polarity for the isolation of the major constituents of each species. The isolated compounds were identified using gas chromatography coupled to mass detector (GC-MS), as well as 13C and 1H nuclear magnetic resonance (NMR). In some cases, thin layer chromatography