UNIVERSIDADE FEDERAL DE PERNAMBUCO CENTRO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS PÓS-GRADUAÇÃO EM CIÊNCIAS BIOLÓGICAS AVALIAÇÃO DO EFEITO BIOINSETICIDA DE LINHAGENS DE Isaria farinosa E DOS EXTRATOS NATURAIS DE Caesalpinia ferrea SOBRE Dactylopius opuntiae (HEMIPTERA: DACTYLOPIIDAE) PRAGA DA PALMA FORRAGEIRA (Opuntia ficus-indica) EM PERNAMBUCO RECIFE/2013 UNIVERSIDADE FEDERAL DE PERNAMBUCO CENTRO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS PÓS-GRADUAÇÃO EM CIÊNCIAS BIOLÓGICAS ROSINEIDE DA SILVA LOPES AVALIAÇÃO DO EFEITO BIOINSETICIDA DE LINHAGENS DE Isaria farinosa E DOS EXTRATOS NATURAIS DE Caesalpinia ferrea SOBRE Dactylopius opuntiae (HEMIPTERA: DACTYLOPIIDAE) PRAGA DA PALMA FORRAGEIRA (Opuntia ficus-indica) EM PERNAMBUCO Tese apresentada ao Programa de Pós- Graduação em Ciências Biológicas, da Universidade Federal de Pernambuco (UFPE) como parte dos requisitos para obtenção do título de Doutor em Ciências Biológicas. Orientadora: Profa. Dra. Vera Lúcia de Menezes Lima Coorientadora: Profa. Dra. Elza Áurea de Luna Alves Lima Colaboradores: Profa. Dra. Maria Tereza dos Santos Correia Dr. Antonio Félix da Costa RECIFE/2013 Elaine Barroso CRB 1728 Lopes, Rosineide da Silva Avaliação do efeito bioinseticida de linhagens de Isaria farinosa e dos extratos naturais de Caesalpinia ferrea sobre Dactylopius opuntiae (Hemiptera: Dactylopiidae) praga da forrageira (Opuntia ficus-indica) em Pernambuco/ Rosineide da Silva Lopes – Recife: O Autor, 2013. 274 folhas: il., fig., tab. Orientadora: Vera Lúcia de Menezes Lima Coorientadora: Elza Áurea de Luna Alves Lima e Antonio Félix da Costa Tese (doutorado) – Universidade Federal de Pernambuco. Centro de Ciências Biológicas, Ciências Biológicas, 2013. Inclui bibliografia e anexo 1. Pragas - controle biológico 2. Inseticidas 3. Cacto I. Lima, Vera Lúcia de Menezes (orientadora) II. Costa, Antonio Félix da (coorientador) III. Título 628.97 CDD (22.ed.) UFPE/CCB-2015-77 Avaliação do efeito bioinseticida de linhagens de Isaria farinosa e dos extratos naturais de Caesalpinia ferrea sobre Dactylopius opuntiae (Hemiptera: Dactylopiidae) praga da palma forrageira (Opuntia ficus-indica) em Pernambuco ROSINEIDE DA SILVA LOPES Recebeu menção APROVADA BANCA EXAMINADORA Profa. Dra. Vera Lúcia de Menezes Lima – Depto. de Bioquímica – UFPE Profa. Dra. Elza Áurea de Luna Alves Lima – Deptº de Micologia – UFPE Profa. Dra. Auristela Correia de Albuquerque- Depto. de Biologia – UFRPE Dr. Antonio Félix da Costa – Instituto Agronômico de Pernambuco – IPA Profa. Dra. Maria Tereza dos Santos Correia – Depto. de Bioquímica – UFPE Recife, 31 de julho de 2013. “E a PAZ de DEUS, que excede todo o entedimento, guardará os vossos corações e os vossos sentimentos em CRISTO JESUS”. Filipenses 3.7 Ao meu Esposo José Robson Portela Lopes Pelo carinho, amor e paciência. OFEREÇO Ao meus pais Terezinha Mª Rosa da Silva e Severino Raimundo da Silva. Pelo grande amor, dedicação e apoio constante, minha eterna e sincera gratidão. DEDICO AGRADECIMENTOS A Deus, pelo seu infinito amor, bondade e misericórdia; Em especial, aos meus pais (Severino Raimundo da Silva e Terezinha Maria Rosa da Silva) pelo amor, força e carinho e, acima de tudo, pela educação cristã e pela oportunidade de ser uma pessoa digna e responsável. Agradeço a Deus por ter me concedido o privilégio de tê-los como pais; Ao meu esposo José Robson Portela Lopes, pelo amor, paciência e compreensão, que tanto me ajudaram, não apenas durante a conclusão deste trabalho de Tese, mas ao longo do meu curso de Mestrado; Aos meus irmãos Ronaldo e Maria Aparecida, pela amizade concedida. Também aos meus sobrinhos Danyelle, Rafaela, Raiane, Daniel, Raissa e Rafael por me fazerem sorrir nos momentos mais difíceis; À minha orientadora, Professora Dra. Vera Lúcia de Menezes Lima por ter aceitado me orientar, meu eterno agradecimento. Nunca esquecerei os conhecimentos valiosos e, acima de tudo, a paciência, amizade e apoio constantes que me ajudaram a concluir mais uma etapa da minha vida; À minha coorientadora, Professora Dra. Elza Áurea de Luna Alves Lima pelo grande incentivo, valiosos ensinamentos e exemplo de profissionalismo, os quais contribuíram para minha formação acadêmica. Além disso, agradeço todo o carinho, amizade e compreensão concedidos durante os anos que passei sob sua orientação, os quais me ajudaram a realizar esta pesquisa; Ao Dr. Antonio Félix da Costa, por ter me aceitado em seu grupo de pesquisa e de ter acreditado que eu seria capaz, com responsabilidade e comprometimento, de realizar um bom trabalho. Também pelo exemplo de profissional e de perseverança no qual me espelhei no momento de maiores dificuldades. Agradeço a Deus a valiosa oportunidade de tê-lo conhecido; À amiga Dra. Luciana Gonçalves de Oliveira, pelo companheirismo, pela amizade e pelos conhecimentos compartilhados. Obrigada por sua amizade; A Tatiana Maria de Albuquerque, pelo incentivo, ajuda e, em especial, pela amizade desde o tempo de infância; À amiga Dra. Mônica Martins, pela ajuda e disponibilidade nos experimentos com nossos queridos cupins. Obrigada querida; Aos amigos do Laboratório de Controle Biológico do Instituto Agronômico de Pernambuco (IPA), colaboradores constantes: Luciana, Ana Carla, Geize, Agatha, Dandara, Samuel, Pátricia e Rose, pelos bons momentos e pela boa convivência; A todos os meus amigos de sala, pela harmoniosa convivência durante o decorrer do curso; A todos os professores do Curso do Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas, que contribuíram para minha formação acadêmica; Ao pesquisador Venésio Felipe dos Santos, do IPA, pela realização das análises estatísticas e pelas orientações; À Fundação de Amparo à Ciência e Tecnologia do Estado de Pernambuco (FACEPE), ao Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) e ao Banco do Nordeste (BNB), pelo apoio na realização dos trabalhos dessa Tese; À Fundação de Amparo à Ciência e Tecnologia do Estado de Pernambuco (FACEPE) pelo apoio financeiro, concedendo a bolsa de Doutorado; Ao Instituto Agronômico de Pernambuco e ao Departamento de Bioquímica/UFPE pelas facilidades para a realização de todos os experimentos deste trabalho; Aos funcionários do Instituto Agronômico de Pernambuco e do Departamento de Bioquímica/UFPE, em especial Ana Patrícia, Samuel e João pela ajuda e disponibilidade. Obrigada; A todos aqueles que me ajudaram direta ou indiretamente durante a realização deste trabalho. RESUMO A utilização de inseticidas químicos no controle de insetos-praga causa danos ao meio ambiente devido à contaminação do solo, água (lençois freáticos, rios e lagoas), fauna, flora e o próprio homem. Assim, o uso de fungos entomopatogênicos e extratos vegetais são considerados métodos eficientes e seguros, com baixo impacto ambiental. A cochonilha-do-carmim (Dactylopius opuntiae) parasita os cladódios da palma forrageira (Opuntia ficus-indica) causando perdas na produção do vegetal. Nasutitermes corniger é uma espécie de cupim arborícola considerada praga nas áreas urbanas, causando muitos prejuízos econômicos. Em função disso, o trabalho teve por objetivo avaliar a ação de três espécies de Isaria, dos extratos de folhas e vagens de Libidibia ferrea var. ferrea (= Caesalpinia ferrea var. ferrea) e da folha de Agave sisalana sobre D. opuntiae e N. corniger; o efeito dos inseticidas Clorpirifós, Acetamiprid, Thiamethoxan e Lambacyhalothrin sobre a D. opuntiae,. bem como a ação sinergética dos extratos e dos inseticidas sobre o crescimento micelial, esporulação e germinação dos conídios dos fungos. Neste estudo foram realizados bioensaios usando suspensões de 1x108 conídios/mL de linhagens de Isaria farinosa, I. javanica e I. fumosorosea. Foram testados extratos aquoso e metanólico de folhas (EAFLf e EMFLf) e vagens (EAVLf, e EMVLf) de L. ferrea var. ferrea e extratos aquoso e hidroetílico de A. sisalana (EAAs e EHEAs), nas concentrações de 10 mg/mL, 25 mg/mL, 50 mg/mL, 100 mg/mL e 200 mg/mL, bem como os inseticidas nas concentrações mínima, média e máxima recomendadas pelos fabricantes dos produtos. Os resultados demonstraram que os fungos não foram patogênicos sobre ninfas e fêmeas adultas de D. opuntiae, mas afetaram significativamente N. corniger tendo sido observado que a linhagem I. farinosa ESALQ1355 foi a mais eficiente, causando a morte de 4 4 95% dos operários (CL50 6,66x10 conídios/mL) e 85% dos soldados (CL50 6,81x10 conídios/mL) após o 4º dia da aplicação dos tratamentos. Atividade inseticida sobre ambas as espécies de insetos foi obtida com extratos vegetais. Para D. opuntiae o EAFLf foi mais eficiente sobre as fêmeas adultas causando a morte de 97% (CL50 4,60 mg/mL), enquanto o EMVLf promoveu a mortalidade de 82% das ninfas. Adicionalmente, para N. corniger o EAFLf foi o que apresentou maior atividade termicita, causando a morte de 100% dos operários (CL50 6,10 mg/mL) e dos soldados (CL50 14,10mg/mL) após três dias do tratamento. Todos os inseticidas comerciais testados foram eficientes sobre a cochonilha-do-carmim. Os resultados com o Clorpirifós demonstraram ser esse inseticida o mais efetivo, por induzir a morte de 90% dos insetos na concentração mínima. Além do mais, foi observado que os extratos e os inseticidas Acetamiprid e Thiamethoxan foram compatíveis com os fungos, por não haver inibido o crescimento, esporulação e germinação das linhagens fúngicas. A associação entre os extratos e as três linhagens mais eficientes demonstrou que I. farinosa ESALQ1355 foi a mais efetiva no controle dos operários. Por outro lado, a associação dos extratos com todos os inseticidas demonstrou eficiência sobre ninfas e fêmeas