Universidade de Brasília Instituto de Ciências Biológicas Departamento de Botânica Propagação in vitro de Jacaranda ulei Bureau & K. Schum. (Bignoniaceae) Wagner dos Santos Fukuda Brasília, DF 2011 Universidade de Brasília Instituto de Ciências Biológicas Departamento de Botânica Propagação in vitro de Jacaranda ulei Bureau & K. Schum. (Bignoniaceae) Wagner dos Santos Fukuda Orientadora: Conceição Eneida dos Santos Silveira Dissertação apresentada ao Departamento de Botânica, Instituto de Ciências Biológicas, Universidade de Brasília, como parte dos requisitos necessários à obtenção do título de Mestre em Botânica Brasília, DF Dezembro de 2011 Membros da banca examinadora: _____________________________________ Dra. Conceição Eneida dos Santos Silveira Departamento de Botânica, UnB Presidente _____________________________________ Dr. Jonny Everson Scherwinski Pereira Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia Membro titular _____________________________________ Dr. Lúcio Flávio de Alencar Figueiredo Departamento de Botânica, UnB Membro titular _____________________________________ Dr. Luiz Alfredo Rodrigues Pereira Departamento de Botânica, UnB Suplente i AGRADECIMENTOS Agradeço aos meus pais, Nelson (in memorian) e Leonor, que sempre me apoiaram em meus projetos. À Professora Dra. Conceição Eneida dos Santos Silveira, pela paciência e inúmeras correções de rumo, por me aceitar como orientando e por transmitir seus conhecimentos valiosos sobre micropropagação. A todos os professores do Programa de Pós-Graduação em Botânica da Universidade de Brasília - UnB, que direta ou indiretamente contribuíram ou influenciaram no meu aprendizado durante o mestrado. Aos colegas, amigos e estagiários do Laboratório de Cultura de Tecidos e do Laboratório de Anatomia Vegetal do Departamento de Botânica da UnB, em especial aos técnicos Elias e Daiane, que por muitos momentos estiveram comigo neste projeto. Ao funcionário Mendes, cuja ajuda foi imprescindível no campo. Ao Sr. Florisvaldo, responsável pela estufa do campus da UnB, pelo cuidado dedicado aos experimentos. Aos colegas de mestrado, pelos inúmeros bons momentos em que compartilhamos conhecimentos e irreverência. Ao CNPq, Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico e a Finatec, Fundação de Empreendimentos Científicos e Tecnológicos pelo financiamento do presente trabalho. A empresa Odds & Actions pela revisão das análises estatísticas. Enfim, a todos aqueles que estiveram e ainda estão comigo nesta jornada de conhecimento: família, professores, colegas, amigos, técnicos, o meu eterno muito obrigado. ii SUMÁRIO ÍNDICE DE TABELAS ............................................................................................. vi ÍNDICE DE FIGURAS ............................................................................................ viii ABREVIAÇÕES ........................................................................................................ x RESUMO.................................................................................................................. xi ABSTRACT ............................................................................................................. xii INTRODUÇÃO ........................................................................................................ 01 REVISÃO BIBLIOGRÁFICA 1. Características das plantas do Cerrado ......................................................................... 04 2. Família Bignoniaceae .................................................................................................... 05 3. Gênero Jacaranda ......................................................................................................... 08 3.1. Aspectos morfológicos ............................................................................................. 11 3.2. Importância econômica ............................................................................................ 12 4. Jacaranda ulei Bureau & K. Schum. .............................................................................. 13 5. Cultura de tecidos .......................................................................................................... 16 5.1. Micropropagação ..................................................................................................... 18 5.1.1. Desinfestação ................................................................................................. 20 5.1.2. Fases da micropropagação ............................................................................. 21 5.1.2.1. Fase de estabelecimento utilizando semente ...................................... 21 5.1.2.2. Fase de multiplicação e subcultivos ..................................................... 22 5.1.2.2.1. Importância das citocininas e auxinas ...................................... 22 5.1.2.2.2. Subcultivos ............................................................................... 24 5.1.2.2.3. Meio de cultura ........................................................................ 25 5.1.2.3. Fase de enraizamento ......................................................................... 26 5.1.2.4. Fases de aclimatização e aclimatação ................................................. 28 OBJETIVOS 1. Objetivo geral ................................................................................................................. 31 2. Objetivos específicos ..................................................................................................... 31 iii MATERIAL E MÉTODOS 1. Coleta do material vegetal ............................................................................................ 32 2. Beneficiamento e desinfestação das sementes ............................................................. 32 3. Fases da micropropagação ............................................................................................ 33 3.1. Fase de estabelecimento: inoculação de sementes ................................................. 33 3.2. Fase de multiplicação .............................................................................................. 34 3.3. Fase de enraizamento ............................................................................................. 35 3.3.1. Experimento 1 - in vitro.................................................................................... 36 3.3.2. Experimento 2 - in vitro.................................................................................... 36 3.3.3. Experimento 3 - ex vitro ................................................................................... 36 3.3.4. Enraizamento durante a fase de multiplicação in vitro ..................................... 37 4. Aclimatização ................................................................................................................. 37 4.1. Aclimatização em estufa .......................................................................................... 38 4.1.1. Plantas enraizadas ex vitro ............................................................................. 38 4.1.2. Plantas enraizadas durante a fase de multiplicação ........................................ 38 4.2. Casa de vegetação .................................................................................................. 38 5. Análise anatômica.......................................................................................................... 39 6. Análise estatística .......................................................................................................... 39 RESULTADOS 1. Desinfestação, germinação e desenvolvimento da planta .............................................. 40 2. Multiplicação e subcultivos ............................................................................................ 43 3. Enraizamento ................................................................................................................. 50 3.1. Experimento 1 - in vitro ............................................................................................ 50 3.2. Experimento 2 - in vitro ............................................................................................ 53 3.3. Experimento 3 - ex vitro ........................................................................................... 53 3.4. Enraizamento durante a fase de multiplicação in vitro .............................................. 57 3.5. Comparação do enraizamento in vitro, ex vitro, e na fase de multiplicação .............. 59 4. Aclimatização ................................................................................................................ 62 4.1. Estufa....................................................................................................................... 62 4.1.1. Brotos enraizados ex vitro ............................................................................... 62 4.1.1. Brotos enraizados durante a fase de multiplicação .......................................... 63 4.2. Casa de vegetação .................................................................................................. 63 iv DISCUSSÃO 1. Fase de estabelecimento ............................................................................................... 66 1.1. Desinfestação .......................................................................................................... 66 1.2. Geminação e morfologia da plântula e da planta jovem ........................................... 67 2. Fase de multiplicação ...................................................................................................