Etudes chimique et biologique de Ficus reflexa Thumb Moraceae UNIVERSITE D’ANTANANARIVO FACULTE DES SCIENCES THESE Pour obtenir le grade DOCTEUR de 3 EME CYCLE Chimie Organique Option: Produits Naturels Présentée par Albertine RASOANAIVO-RAZAFIZANAKA ETUDES CHIMIQUE ET BIOLOGIQUE DE Ficus reflexa Thumb MORACEAE Soutenue publiquement le 04Septembre 2006 devant la commission d’examen Président Marta ANDRIANTSIFERANA Professeur Titulaire Rapporteurs Yvonne RANARIVELO Professeur Titulaire Francis SHODE Professeur Titulaire Examinateurs Amélie RAHARISOLOLALAO Professeur Titulaire Hanta ANDRIAMANANTOANINA Docteur de 3ème Cycle, Chercheur-Enseignant Etudes chimique et biologique de Ficus reflexa Thumb Moraceae DEDICACE Etudes chimique et biologique de Ficus reflexa Thumb Moraceae Je dédie cette thèse A la mémoire - de ma fille à mon mari : François à mes deux garçons : Johary et Ndrianja Aux miens et à tous mes amis Etudes chimique et biologique de Ficus reflexa Thumb Moraceae REMERCIEMENTS Etudes chimique et biologique de Ficus reflexa Thumb Moraceae Je tiens à exprimer ma profonde gratitude à Madame Marta ANDRIANTSIFERANA Professeur Titulaire à l’Université d’Antananarivo Responsable de 3è Cycle de Chimie Organique Option “Produits Naturels” Faculté des Sciences Directeur du Laboratoire de Chimie Organique “Produits Naturels et Biotechnologie” Membre de “American Society of Pharmacognosy (ASP)” Responsable de la Formation Doctorale en Chimie des Produits Naturels Coordonnateur du G D R I : « Biodiversité et développement durable de Madagascar » Coordinateur de Fonds de Solidarité Prioritaire « Molécule d’origine Naturelle en vue de la valorisation de la biodiversité de Madagascar » Vous m’avez fait l’honneur de présider ce jury malgré vos nombreuses occupations. J’apprécie infiniment les conseils et les aides matériels que vous m’avez offerts le long de la préparation de cette thèse et toutes les formations reçues dans ce Département. Je vous prie d’agréer mes sincères remerciements et ma haute considération. Madame Yvonne RANARIVELO Professeur Titulaire à l’Université d’Antananarivo Directeur du Laboratoire de Chimie Organique Substances Marines Responsable de la Formation Doctorale “ Chimie” à la Faculté des Sciences Antananarivo. Malgré vos nombreuses responsabilités, vous avez toujours accepté de me guider avec compétence et abnégation dans les obstacles rencontrés dans ce travail de recherche. Je vous remercie également de m’avoir proposé le sujet et d’avoir été toujours à mes côtés dans les moments difficiles. Je vous prie de trouver ici l’expression de mon respect et de ma profonde reconnaissance. Etudes chimique et biologique de Ficus reflexa Thumb Moraceae Monsieur Francis Oluwole SHODE Associate of Organic Chemistry Lecturer of the University of Kwazulu-Natal, Westville-Campus and at “Howard College”, Durban Campus. In spite of your many responsibilities, you agreed sincerely my visit to your laboratory and guided me with competence. I obtained many experiments in Natural Products during my training in your laboratory. I am grateful to you. Madame Amélie RAHARISOLOLALAO Professeur Titulaire de l’Université d’Antananarivo Directeur du Laboratoire de Chimie des Substances Naturelles et de Biologie. Vous avez bien voulu me faire l’honneur de juger ce travail malgré vos multiples occupations. J’ai toujours trouvé auprès de vous encouragements et soutien. Vos conseils et vos critiques aideront à améliorer ce travail. Veuillez recevoir mes vifs remerciements. Madame Hanta ANDRIAMANANTOANINA Docteur de 3ème cycle Chercheur-Enseignant Maître de recherche Responsable de l’unité d’extraction et d’analyses des Produits Naturels au Laboratoire de Microbiologie et de l’Environnement du Centre National de Recherche sur l’Environnement. Vous avez accepté avec bienveillance de laisser vos nombreuses obligations et de siéger parmi les membres de jury et d’être l’examinateur de cette thèse. Je vous remercie également de votre sincère collaboration tout le long de ces travaux. Vos suggestions et vos remarques seront prises en considération. Veuillez accepter ma profonde reconnaissance. Etudes chimique et biologique de Ficus reflexa Thumb Moraceae Je suis très reconnaissante à Monsieur Le Président de l’Université d’Antananarivo Monsieur le Doyen de la Faculté des Sciences de l’Université d’Antananarivo et toute son équipe Madame Le chef de Département de Chimie Organique à la Faculté Des Sciences de l’Université d’Antananarivo Tous les Enseignants-Chercheurs et personnels de l’Université d’Antananarivo, qui ont assuré ma formation Les Responsables du projet F@des Madame le Directeur de l’Ecole Doctorale Interdisciplinaire de Madagascar (EDIM) et son équipe pour les bourses de recherche qu’ils ont bien voulu m’offrir Le Président et tous les personnels de la Présidence de l’Université de Fianarantsoa pour avoir facilité l’obtention des bourses de recherche Les Directeurs RATOVONJANAHARY Roger et RAKOTOSON Emile avec tous les Personnels de l’ENS Le Doyen de la Faculté des Sciences de l’Université de Fianarantsoa Madame Le Professeur Yvonne RANARIVELO et toute l’équipe du Laboratoire de Chimie Organique Substances Marines (LCOSM), pour l’encouragement et la solidarité le long de cette recherche. Je tiens à remercier vivement : L’équipe du Laboratoire : du Centre national de Recherche Pharmaceutique du Centre National de Recherche pour l’Environnement des Produits Naturels (LPN) pour la collaboration étroite et précieuse de Pharmacognosie de Paris V pour la formation que j’ai reçue pendant le séjour de stage en 2004 Etudes chimique et biologique de Ficus reflexa Thumb Moraceae Mes vifs remerciements à : Monsieur Le Docteur RANDRIANARIVELOJOSIA Milijaona, Responsable du Laboratoire : « Unité de Recherche en Paludisme », à l’Institut Pasteur de Madagascar. Monsieur Le Docteur RATSIMBASON Michel, Chercheur au Laboratoire de Pharmacodynamie au Centre National de Recherche Pharmaceutique L’équipe du Laboratoire de Microbiologie et de l’Environnement du CNRE Pour leur aide précieuse dans la réalisation des tests d’activités biologiques. J’exprime ma reconnaissance : A mon mari et mes enfants qui ont enduré les absences et contribué à la réalisation de cette thèse A la famille SHODE qui a accepté de m’héberger et de prendre soin de moi pendant mon séjour à Durban. Aux Scouts de France qui m’ont hébergé pendant mon séjour à Paris. Aux Antilin’i Madagasikara qui ont facilité le contact avec le Laboratoire de Pharmacognosie de Paris V Je présente ma profonde gratitude à tous ceux qui, de près ou de loin, ont contribué à la réalisation de ce travail. JE REMERCIE DIEU POUR TOUT Etudes chimique et biologique de Ficus reflexa Thumb Moraceae ABREVIATIONS FIGURE 1: CARTE DES « BIODIVERSITY HOTSPOTS » [119]...........................................................15 FIGURE 2: CARTE DE LA RÉPARTITION GÉOGRAPHIQUE DU GENRE FICUS........................ 19 FIGURE 3: RÉPARTITION GÉOGRAPHIQUE DE FICUS REFLEXA THUMB À MADAGASCAR. ........................................................................................................................................................................... 32 FIGURE 4: A) AMPLITUDE EN FONCTION DE LA FRÉQUENCE B) AMPLITUDE EN FONCTION DU TEMPS................................................................................................................................36 FIGURE 5: FID DU C DU GROUPE MÉTHYLE DU MÉTHANOL.......................................................37 FIGURE 6: FID............................................................................................................................................... 38 FIGURE 7: PROFIL CHROMATOGRAPHIQUE DU PREMIER MÉLANGE.....................................63 FIGURE 8: SPECTRE RMN 1H DU MÉLANGE LUPÉOL-STIGMAST-4-ÈNE-3-ONE ET LE PRODUIT MINEUR.......................................................................................................................................64 FIGURE 9: SPECTRE DE MASSE DU PRODUIT DÉTECTÉ À 24,879 MIN.......................................66 FIGURE 10: SPECTRE DE MASSEDU LUPÉOL..................................................................................... 66 FIGURE 11: STRUCTURE DU LUPÉOL................................................................................................... 67 FIGURE 12 : SPECTRE DE MASSE DU PRODUIT DÉTECTÉ À 25,625 MIN....................................69 FIGURE 13: SPECTRE DE MASSE DE LA STIGMAST-4-ÈNE-3-ONE...............................................69 FIGURE 14: STRUCTURE DE LA STIGMAST-4-ÈNE-3-ONE.............................................................. 70 FIGURE 15: SPECTRE DE MASSE DU PRODUIT DÉTECTÉ À 24,585 MIN.....................................73 FIGURE 16: SPECTRE DE MASSE DU 9,19-CYCLOLANOST-24-ÈNE-3-OL, (3.BÉTA.)................ 73 FIGURE 17 : STRUCTURE DU 9, 19-CYCLOLANOST-24-EN-3-OL, (3 BÉTA)................................. 74 FIGURE 18: PROFIL CHROMATOGRAPHIQUE DU SECOND MÉLANGE.....................................77 FIGURE 19: SPECTRE 1H NMR DU 2ÈME MÉLANGE.........................................................................78 FIGURE 20: SPECTRE DE MASSE DU PRODUIT À 24,426 MIN......................................................... 79 FIGURE 21: SPECTRE DE MASSE DU D :C -FIEDOOLEAN-8-ÈNE-3ONE...................................... 79 FIGURE 22: STRUCTURE DU D:C-FRIEDOOLEAN-8-ÈNE-3-ONE................................................... 80 FIGURE 23: SPECTRE DE MASSE DU PRODUITÀ 24,103 MIN.........................................................