ELIANE MARIZA DORTAS MAFFEI CARACTERIZAÇÃO CITOGENÉTICA DE ESPÉCIES DE COCCINELLIDAE (COLEOPTERA) OCORRENTES EM VIÇOSA- MINAS GERAIS. Tese apresentada à Universidade Federal de Viçosa, como parte das exigências do Programa de Pós- Graduação em Genética e Melhoramento, para obtenção do título de “Doctor Scientiae”. VIÇOSA MINAS GERAIS - BRASIL 2001 Ao meu esposo Norberto, filhos Lígia e Luciano e à minha mãe Surya. Dedico. Aos meus irmãos, sogra, sobrinhos, tios, primos, e enteados, especialmente Rodrigo. Ofereço. ii AGRADECIMENTOS À Universidade Federal de Viçosa, pela oportunidade de realização deste Programa. À Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais (FAPEMIG), pelo apoio financeiro. A CAPES pela concessão da bolsa. A professora Silvia das Graças Pompolo pela orientação, apoio e ensinamentos. Aos meus conselheiros Professores Lucio Antonio de Oliveira Campos e Jorge Abdala Dergam dos Santos, pelos bons momentos de convivência, pela amizade, pelas valiosas sugestões, contínuos conhecimentos transmitidos e indispensável participação durante o curso. A Maria A. Marin-Morales, Paulo Ruas, Claudete Ruas e Marcelo Guerra pelos conhecimentos transmitidos continuamente, apoio e amizade. Aos amigos do laboratório de Citogenética de Insetos especialmente Cléa Mariano, Paula Soares, Ana Paula, Juvenal e do laboratório de Citogenética Vegetal especialmente Eveline, Lyderson, Cristina, Jane, Bárbara e Juliana pela amizade, incentivo, apoio e pelo alegres momentos que passamos juntos. As amigas Maria Rita Campos, Andréa Raposo e Elaine Gasparino pela amizade, apoio, convívio e bons momentos que passamos juntas. iii A todos os professores que contribuíram de alguma forma para o meu crescimento profissional e humano. Aos funcionários José Francisco e José Estevão pela amizade, colaboração e convívio. iv CONTEÚDO RESUMO........................................................................................................ viii ABSTRACT.................................................................................................... x 1. INTRODUÇÃO GERAL............................................................................ 1 1.1. Considerações Gerais................................................................................ 1 1.2. Subordem Adephaga............................................................................ 3 1.3. Subordem Polyphaga............................................................................ 3 1.4. Determinação sexual em coleópteros................................................... 4 1.4.1. Sistemas ortodoxos aquiasmáticos................................................. 4 1.4.1.1. Pára-quedas simples: Xyp ......................................................... 5 1.4.1.2. Sistema X0................................................................................ 7 1.4.2. Sistemas quiasmáticos.................................................................... 8 1.4.3. Sistemas não-ortodoxos.................................................................. 9 1.5. Importância da citogenética em Coccinellidae.................................... 9 1.6. Objetivos.............................................................................................. 11 REFERÊNCIAS BILBIOGRÁFICAS............................................................ 12 v KARYOTYPIC CHARACTERIZATION BY MITOSIS, MEIOSIS AND C-BANDING OF ERIOPIS CONNEXA MULSANT (COCCINELLIDAE: COLEOPTERA: POLYPHAGA), A PREDATOR OF INSECT PESTS...... 16 ABSTRACT.................................................................................................... 17 INTRODUCTION........................................................................................... 18 MATERIAL AND METHODS...................................................................... 20 RESULTS....................................................................................................... 22 DISCUSSION................................................................................................. 23 REFERENCES................................................................................................ 31 SILVER STAINING OF NUCLEOLAR ORGANIZER REGIONS (NOR) IN SOME SPECIES OF HYMENOPTERA (BEE AND PARASITIC WASP) AND COLEOPTERA (LADY-BETTLE)......................................... 35 Abstract........................................................................................................... 36 Introduction..................................................................................................... 39 Material and Methods..................................................................................... 39 Results............................................................................................................. 40 Discussion....................................................................................................... 41 References....................................................................................................... 44 MORPHOLOGICAL AND CYTOGENETICAL STUDIES ON THE FEMALE AND MALE REPRODUCTIVE TRACTS OF ERIOPIS CONNEXA MULSANT (COLEOPTERA, POLYPHAGA, COCCINELLIDAE)....................................................................................... 47 ABSTRACT.................................................................................................... 48 INTRODUCTION........................................................................................... 49 MATERIAL AND METHODS...................................................................... 51 RESULTS....................................................................................................... 53 DISCUSSION................................................................................................. 55 vi REFERENCES................................................................................................ 64 SEQUENTIAL FISH ANALYSIS WITH RDNA GENES AND AG-NOR BANDING OF THE MELANIC FORM OF OLLA V-NIGRUM (LADY BEETLE)......................................................................................................... 69 ABSTRACT.................................................................................................... 70 INTRODUCTION........................................................................................... 71 MATERIAL AND METHODS...................................................................... 73 RESULTS....................................................................................................... 75 DISCUSSION................................................................................................. 76 REFERENCES................................................................................................ 82 CARACTERIZAÇÃO CARIOTÍPICA, ANÁLISE DA HETEROCROMATINA CONSTITUTIVA E DA REGIÃO ORGANIZADORA DE NUCLÉOLO (FISH RDNA E AG-NOR) EM CYCLONEDA SANGUINEA LINNEU (COLEOPTERA, COCCINELLIDAE) OCORRENTE EM VIÇOSA (MG)............................. 85 RESUMO........................................................................................................ 86 INTRODUÇÃO.............................................................................................. 88 MATERIAL E MÉTODOS............................................................................ 90 RESULTADOS............................................................................................... 93 DISCUSSÃO................................................................................................... 101 REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS............................................................ 105 2. CONCLUSÕES GERAIS........................................................................... 109 vii RESUMO MAFFEI, Eliane Mariza Dortas, Universidade Federal de Viçosa, março de 2001. Caracterização citogenética de espécies de Coccinellidae (Coleoptera) ocorrentes em Viçosa-Minas Gerais. Orientadora: Silvia das Graças Pompolo. Conselheiros: Lucio Antonio de Oliveira Campos e Jorge Abdala Dergam dos Santos. A família Coccinellidae (Coleoptera) apresenta, aproximadamente, 4.000 espécies. Muitas delas têm sido utilizadas com eficiência tanto em programas de manejo de pragas quanto em estudos relacionados com impacto ambiental, causado por plantas transgênicas. As análises citogenéticas, na família Coccinellidae, foram realizadas somente em, aproximadamente, 4,3% das espécies, sendo que a maioria restringiu-se à descrição do número de cromossomos. Neste trabalho, foram realizadas análises citogenéticas em Eriopis connexa, Olla v-nigrum e Cycloneda sanguinea, visando: 1. adaptar a técnica para obtenção de cromossomos em células mitóticas e meióticas; 2. determinar o número e morfologia dos cromossomos metafásicos por coloração convencional; 3. avaliar o comportamento dos cromossomos durante a meiose, descrevendo o sistema de determinação sexual; 4. caracterizar a distribuição da heterocromatina constitutiva utilizando banda-C, banda HSS (Hot Saline Solution), enzimas de restrição (Msp-I e Hae-III) e fluorocromo (CMA3); 5. aplicar metodologia de banda Ag-NOR para localizar a atividade gênica da região organizadora de nucléolo; viii 6. mapear, por meio de FISH, os cromossomos carreadores de genes rDNA. O número cromossômico foi 2n=18+XX para fêmeas e 2n=18+Xy para os machos, em todas as espécies. A única espécie que apresentou um cromossomo B eucromático restrito a fêmeas foi E. connexa. A meiose dos machos revelou a meio-fórmula n=9+Xyp, e o modo de associação dos cromossomos sexuais foram do