UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO FACULTAD DE CIENCIA E INGENIERÍA EN ALIMENTOS Y BIOTECNOLOGÍA CARRERA DE INGENIERÍA BIOQUÍMICA Extracción, cuantificación y caracterización de compuestos fenólicos extraídos a partir de la Arquitecta (Lasiocephalus ovatus Schltdl.), planta nativa del Cerro Teligote. Trabajo de Titulación, modalidad proyecto de investigación, previa la obtención del Título de Ingeniería Bioquímica, otorgado por la Universidad Técnica de Ambato, a través de la Facultad de Ciencia e Ingeniería en Alimentos y Biotecnología. Trabajo que forma parte del proyecto: Estudio del perfil de polifenoles y encapsulamiento de los extractos de hierbas medicinales usadas en el Ecuador: Proyecto de investigación asociado al proyecto de canje de deuda Ecuador – España llevado a cabo en la Facultad de Ciencia e Ingeniería en Alimentos y Biotecnología. Aprobado por el honorable consejo universitario y financiado por el Centro de Investigaciones de la Universidad Técnica de Ambato. Resolución 0206-CU-P-2018. Autora: Melany Noemi Espinosa Panchi Tutora: PhD. Dayana Cristina Morales Ambato – Ecuador Enero – 2020 APROBACIÓN DEL TUTOR PhD. Dayana Cristina Morales Acosta CERTIFICO: Que el presente trabajo de titulación ha sido prolijamente revisado. Por lo tanto, autorizo la presentación de este Trabajo de Titulación, Modalidad: Proyecto de Investigación, el mismo que responde a las normas establecidas en el Reglamento de Títulos y Grados de la Facultad. Ambato, 11 de diciembre del 2019 PhD. Dayana Cristina Morales Acosta C.I. 180413557-0 TUTORA ii DECLARACIÓN DE AUTENTICIDAD Yo, Melany Noemi Espinosa Panchi, manifiesto que los resultados obtenidos en el presente Proyecto de Investigación, previo a la obtención del título de Ingeniera Bioquímica son absolutamente originales, auténticos y personales, a excepción de las citas bibliográficas. iii APROBACIÓN DE LOS MIEMBROS DEL TRIBUNAL DE GRADO Los suscritos Profesores Calificadores, aprueban el presente Trabajo de Titulación, modalidad Proyecto de Investigación, el mismo que ha sido elaborado de conformidad con las disposiciones emitidas por la Facultad de Ciencia e Ingeniería en Alimentos y Biotecnología de la Universidad Técnica de Ambato. Para constancia firman: Ambato, 10 de enero de 2020 ii DERECHOS DE AUTOR Autorizo a la Universidad Técnica de Ambato, para que haga de este Proyecto de Investigación o parte de él, como un documento disponible para su lectura, consulta y procesos de investigación, según las normas de la Institución. Cedo los derechos en línea patrimoniales de mi Proyecto de Investigación, con fines de difusión pública, además apruebo la reproducción de este proyecto dentro de las regulaciones de la Universidad, siempre y cuando esta reproducción no suponga una ganancia económica y se realice respectando los derechos de autor. iii DEDICATORIA A Dios por ser la luz de esperanza en los momentos más difíciles de mi vida. A las personas que siempre creyeron en mí, principalmente a mi mami Cristina por ser esa amiga incondicional, un apoyo constante y un ejemplo de lucha, ya que gracias a ti he alcanzo a cumplir este sueño, a mis tíos por su confianza. A mis hermanos Cris e Isma por siempre hacerme reír y estar pendientes de mis logros y fracasos siendo siempre un gran apoyo. GRACIAS POR ESTAR CONMIGO . iv AGRADECIMIENTO A la comunidad del Teligote por permitirme explorar su naturaleza, de esta manera poder desarrollar mi trabajo de investigación con Arquitecta (Lasiocephalus ovatus) Al proyecto: Estudio del perfil de polifenoles y encapsulamiento de los extractos de hierbas medicinales usadas en el Ecuador: Proyecto de investigación asociado al proyecto de canje de deuda Ecuador – España llevado a cabo en la Facultad de Ciencia e Ingeniería en Alimentos y Biotecnología. Aprobado por el honorable consejo universitario y financiado por el Centro de Investigaciones de la Universidad Técnica de Ambato. Resolución 0206-CU-P-2018. Al proyecto de canje de deuda Ecuador – España, al laboratorio de análisis instrumental y a los ingenieros Mónica y Mario por permitirme trabajar allí. A la doctora Dayana, por darme la oportunidad de pertenecer a esta investigación, por brindarme su sabiduría y conocimiento, quien con su guía y paciencia me ha permitido cumplir esta meta. A Dianita Muñoz por ser la mejor amiga, compañera y confidente, que siempre me tuvo paciencia y me ayudó cuando más lo necesitaba, te quiero mucho. A André Rosero por ser la persona que me ha prestado su ayuda incondicionalmente en cualquier situación, por su tiempo, su paciencia y su apoyo. Gracias por brindarme tu amistad y espero tenerla siempre. A Ximena Mendoza y a todos los que conformaron el grupo polifenoles, los cuales me han traído muchas risas y nuevas amistades que espero perduren con el tiempo. A Daniel quien se desvelaba conmigo acompañándome a terminar mis tareas y siempre me hacía reír para no dormirme, gracias por estar conmigo. v Índice APROBACIÓN DEL TUTOR ---------------------------------------------------------------- ii DECLARACIÓN DE AUTENTICIDAD -------------------------------------------------- iii APROBACIÓN DE LOS MIEMBROS DEL TRIBUNAL DE GRADO -------------- ii DERECHOS DE AUTOR -------------------------------------------------------------------- iii DEDICATORIA ------------------------------------------------------------------------------- iv AGRADECIMIENTO ------------------------------------------------------------------------- v RESUMEN -------------------------------------------------------------------------------------- 1 ABSTRACT ------------------------------------------------------------------------------------- 2 Capítulo I ----------------------------------------------------------------------------------------- 3 1. Marco teórico --------------------------------------------------------------------------------- 3 1.1. Antecedentes Investigativos ----------------------------------------------------------------------- 3 1.1.1. Plantas medicinales ------------------------------------------------------------------------------ 3 1.1.2. Plantas medicinales en el Ecuador ------------------------------------------------------------ 4 1.1.3. Lasiocephalus ------------------------------------------------------------------------------------ 5 1.1.4. Lasiocephalus ovatus ---------------------------------------------------------------------------- 6 1.1.5. Metabolitos secundarios ------------------------------------------------------------------------ 7 1.2. Objetivos -------------------------------------------------------------------------------------------- 12 1.2.1. Objetivo General ------------------------------------------------------------------------------- 12 1.2.2. Objetivo Especifico ---------------------------------------------------------------------------- 12 1.3. Hipótesis -------------------------------------------------------------------------------------------- 13 1.3.1. Hipótesis nula ----------------------------------------------------------------------------------- 13 1.3.2. Hipótesis Alternativa -------------------------------------------------------------------------- 13 1.4. Señalamiento de las Variables ------------------------------------------------------------------- 13 1.4.1. Variable Independientes ---------------------------------------------------------------------- 13 vi 1.4.2. Variables Dependientes ----------------------------------------------------------------------- 14 Capítulo II --------------------------------------------------------------------------------------- 15 2. Metodología --------------------------------------------------------------------------------- 15 2.1. Materiales ------------------------------------------------------------------------------------------- 15 2.1.1. Materiales --------------------------------------------------------------------------------------- 15 2.1.2. Equipos ------------------------------------------------------------------------------------------ 16 2.1.3. Reactivos ---------------------------------------------------------------------------------------- 16 2.2. Métodos --------------------------------------------------------------------------------------------- 17 2.2.1. Material vegetal y Materia prima ----------------------------------------------------------- 17 2.2.2. Preparación del material vegetal ------------------------------------------------------------ 18 2.2.3. Optimización del proceso de extracción de metabolitos secundarios de Arquitecta 18 2.2.4. Cuantificación de compuestos fenólicos --------------------------------------------------- 19 2.2.5. Desgaste del material vegetal ---------------------------------------------------------------- 20 2.2.6. Liofilizado --------------------------------------------------------------------------------------- 20 2.2.7. Caracterización de los extractos ------------------------------------------------------------- 20 2.3. Actividades biológicas ---------------------------------------------------------------------------- 22 2.3.1. Actividad antiinflamatoria -------------------------------------------------------------------- 22 2.3.2. Actividad antioxidante ------------------------------------------------------------------------ 25 Capítulo III -------------------------------------------------------------------------------------- 27 3. Resultados y discusión -------------------------------------------------------------------- 27 3.1. Análisis y discusión de los resultados ---------------------------------------------------------- 27 3.1.1. Determinación de polifenoles