Rebanho de búfalos leiteiros, FMVZ-USP, campus de Pirassununga, SP Bubalus bubalis bubalis MARIA ZILAH BENETONE Apoptose e proliferação na placenta de búfalas São Paulo 2005 MARIA ZILAH BENETONE Apoptose e proliferação na placenta de búfalas Dissertação apresentada ao Programa de Pós-graduação em Anatomia dos Animais Domésticos e Silvestres da Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia da Universidade de São Paulo para obtenção do título de Mestre em Ciências Departamento: Cirurgia Área de Concentração: Anatomia dos Animais Domésticos e Silvestres Orientadora: Profa Dra Maria Angélica Miglino São Paulo 2005 Autorizo a reprodução parcial ou total desta obra, para fins acadêmicos, desde que citada a fonte. DADOS INTERNACIONAIS DE CATALOGAÇÃO-NA-PUBLICAÇÃO (Biblioteca da Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia da Universidade de São Paulo) T.1616 Benetone, Maria Zilah FMVZ Apoptose e proliferação na placenta de búfalas / Maria Zilah Benetone. -- São Paulo : M. Z. Benetone, 2005. 186 f. : il. Dissertação (mestrado) - Universidade de São Paulo. Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia. Departamento de Cirurgia, 2005. Programa de Pós-graduação: Anatomia dos Animais Domésticos e Silvestres. Área de concentração: Anatomia dos Animais Domésticos e Silvestres. Orientador: Profa. Dra. Maria Angélica Miglino. 1. Apoptose. 2. Placenta. 3. Búfalo. 4. Caspase. 5. Proliferação. I. Título. FOLHA DE AVALIAÇÃO Nome: BENETONE, Maria Zilah Título: Apoptose e proliferação na placenta de búfalas Dissertação apresentada ao Programa de Pós-graduação em Anatomia dos Animais Domésticos e Silvestres da Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia da Universidade de São Paulo para obtenção do título de Mestre em Ciências Data: _____/_____/_____ Banca Examinadora Prof. Dr. ________________________ Instituição: _________________________ Assinatura: _______________________ Julgamento: _________________________ Prof. Dr. ________________________ Instituição: _________________________ Assinatura: ________________________ Julgamento: _________________________ Prof. Dr. ________________________ Instituição: _________________________ Assinatura: ________________________ Julgamento: _________________________ M.Z.Benetone “Pois que aproveitaria ao homem ganhar todo o mundo e perder a sua alma?”- Jesus. (MARCOS, 8:36) M.Z.Benetone À Deus, Senhor de todas as coisas. Salmo 91 “Aquele que habita no esconderijo do Altíssimo, à sombra do Onipotente descansará. Direi do Senhor: Ele é o meu Deus, o meu refúgio, a minha fortaleza, e nele confiarei. Porque ele te livrará do laço do passarinheiro e da peste perniciosa. Ele te cobrirá com as suas penas, e debaixo das suas asas estarás seguro; a sua verdade é escudo e broquel. Não temerás espanto noturno, nem seta que voe de dia, Nem peste que ande na escuridão, nem mortandade que assole ao meio-dia. Mil cairão ao teu lado, e dez mil, à tua direita, mas tu não serás atingido. Somente com os teus olhos olharás e verás a recompensa dos ímpios, Porque tu, ó Senhor, és o meu refúgio! O Altíssimo é a tua habitação. Nenhum mal te sucederá, nem praga alguma chegará à tua tenda. Porque aos seus anjos dará ordem a teu respeito, para te guardarem em todos os teus caminhos. Eles te sustentarão nas suas mãos, para que não tropeces com o teu pé em pedra. Pisarás o leão e a áspide; calcarás aos pés o filho do leão e a serpente. Pois que tão encarecidamente me amou, também eu o livrarei; pô-lo-ei num alto retiro, porque conheceu o meu nome. Ele me invocará e eu lhe responderei; estarei com ele na angústia; livrá-lo-ei e o glorificarei. Dar-lhe-ei abundância de dias e lhe mostrarei a minha salvação.” A Bíblia Sagrada – Velho Testamento M.Z.Benetone Aos amigos do Plano Maior, obrigada de todo o coração por sustentarem a mim e à minha fé. “Não te furtes a transmitir os dons do Evangelho. Se caíste, levanta-te e estende as mãos, construindo o melhor. Se estiveste em erro até ontem, reconsidera o gesto impensado e ajuda aos semelhantes. Se doente, permanece na confiança, encorajando e esclarecendo a quem te ouve a palavra. Se cansado, recompõe as próprias forças na fé, e prossegue amparando sempre. Caluniado, perdoa e esquece o golpe, procurando servir. Menosprezado, não firas ninguém e esforça-te por ser útil. Perseguido, esquece o mal e faze o bem que possas. Insultado, olvida toda ofensa e auxilia sem mágoa. Em meio de todas as fraquezas e vicissitudes que nos rodeiam a alma, estejamos convictos de que possuímos o conhecimento da verdade e a flama do amor, como quem transporta um tesouro em vasos de barro, para que a excelência da virtude resplandeça por luz de Deus e não nossa.” Francisco Cândido Xavier, pelo espírito de Emmanuel M.Z.Benetone Aos meus pais, Victor da Silva Benetone e Nazareth Duarte Benetone, meus maiores exemplos de honestidade, respeito e retidão de caráter, aos quais eu devo tudo o que sou de melhor e todas as minhas conquistas. Obrigada ainda pela dedicação e cuidados redobrados dispensados à Anna, durante todo este longo período. A vocês, todo o meu amor e gratidão eternos. Ao meu companheiro Evandro Augusto Munhoz Machado, que segurou minhas mãos nos piores e melhores momentos, com amor, carinho, paciência, dedicação, e fidelidade absolutos. Obrigada por sua imensa generosidade, oferecendo-me toda a ajuda financeira, indispensável para que eu cumprisse esta jornada até o fim, além de ter auxiliado em diversas etapas deste trabalho. Amo você. À minha filha Anna Benetone Machado, o maior presente que a vida me concedeu. Que eu possa ser para você um incentivo a nunca desistir dos seus planos, por maiores sejam as dificuldades. Acredite sempre em Deus; somente Ele tem o poder sobre os homens, e será sempre conforme a Sua vontade. À minha querida professora e amiga Maria das Graças Prianti, pela sua paciência, constância e profissionalismo, conciliando seus inúmeros afazeres por meses a fio com a padronização e o aprimoramento das reações de imunoistoquímica, colaboração esta fundamental para a conclusão deste projeto. Muito obrigada pelas inúmeras vezes em que, mediante minhas dúvidas e dificuldades, esteve ao meu lado ensinando, explicando, realizando junto comigo. Além dos ensinamentos, ofereceu-me apoio fraterno durante todo este longo período, o que demonstra de sua parte muito mais do que dedicação ao aluno, mas antes uma preocupação genuína com o ser humano. M.Z.Benetone AGRADECIMENTOS À Profa. Dra. Maria Angélica Miglino, pela valiosa oportunidade concedida, confiando-me o desenvolvimento de um de seus projetos, pela sua paciência, por seu exemplo de empreendedorismo e pela plena disponibilização dos recursos do laboratório de Histologia de seu Departamento. À Profa. Dra. Hiro Goto, por ter me recebido em seu laboratório como se fosse eu integrante de sua equipe, auxiliando efetivamente na concretização deste trabalho, cedendo reagentes, anticorpos e todo o material necessário, oferecendo sugestões e contribuindo com sua experiência, sempre com muito respeito e cordialidade. Obrigada pela confiança e amizade. À Profa. Dra. Maria Lúcia Zaidan Dagli, que esteve presente desde o início, contribuindo desde o delineamento experimental até as últimas etapas de imunoistoquímica e documentação fotográfica, oferecendo-me generosamente os recursos financeiros e humanos de seu laboratório. Obrigada por sua dedicação e ensinamentos. À Profa. Dra. Arani Nanci Bonfim Mariana por ter me aceitado como sua orientada, ainda que pro tempore, e ter sempre acompanhado de perto a parte experimental e o desenvolvimento da pesquisa, com muito interesse e boa vontade, próprios de sua pessoa. Ao Prof. Dr. Francisco Javier Hernandez Blasquez por ter cedido seu laboratório, instrumentos e materiais sempre que solicitados. Agradeço muitíssimo todas as vezes em que bati à sua porta em busca de soluções e fui extremamente bem recebida e atendida pronta e plenamente. Ao Prof. Dr. José Ângelo Lauletta Lindoso por ter-nos cedido de maneira tão generosa anticorpos para o nosso experimento. Ao Prof. Dr. José Manoel dos Santos, por ter avaliado cuidadosamente todo o material, definindo o que seria destinado à imunoistoquímica, por suas explicações valiosas e muito didáticas, por sua amizade, e pela sua disponibilidade, apesar dos muitos compromissos. M.Z.Benetone Ao Prof. Dr. Venâncio Avancini Ferreira Alves pela gentileza de me receber em seu laboratório e pelo direcionamento que deu ao nosso projeto, avaliando nossos resultados preliminares e determinando, com enorme responsabilidade, anticorpos a serem utilizados durante o experimento. Ao Prof. Dr. José Luiz Guerra, grande amigo e exemplo profissional desde a graduação, um ser humano excepcional que inúmeras vezes me aconselhou e apontou o caminho. Por seu intermédio aprendi a gostar da pesquisa universitária e conheci vários profissionais de renome, alguns dos quais supra citados. Obrigada pelos ensinamentos, pela honra de ter sua amizade sincera e por ter acreditado em minha honestidade e força de trabalho sempre. Às Profas. Dras. Flávia Thomaz Verechia Pereira e Ana Flávia de Carvalho, por terem cedido gentilmente seu material de pesquisa de mestrado e doutorado, respectivamente, como também anotações pessoais e referências bibliográficas. Ao Prof. Dr. Douglas Antônio Zago e à Profa. Dra. Estela Bevilácqua pelas explicações histo-morfológicas. Conhecê-los foi uma enorme satisfação. À Profa. Dra. Tatiana Carlesso dos Santos, pelas muitas vezes em que me ajudou, sempre com muita disposição e boa vontade, resolvendo problemas burocráticos, como também discutindo resultados preliminares. Ao Prof. Dr. Pedro Primo Bombonato, por ter me convidado gentilmente a participar do programa de pós-graduação da Anatomia, sem quaisquer restrições. À Profa. Dra. Irvênia Luiza de Santis Prada, por ter me ouvido quando precisei, por ter me amparado num momento de medo e incertezas, por ter me mostrado que sempre há um caminho. Obrigada por compartilhar sua luz. À Profa. Dra. Júlia Maria Matera, por demonstrar preocupação com a condução das nossas pesquisas de uma forma ética e responsável e com as dificuldades dos pós-graduandos, procurando sempre fazer o melhor em sua área de atuação e lutando para que seu exemplo seja seguido. Obrigada pelo seu apoio e amizade. M.Z.Benetone Ao Prof. Dr.