1 Evaluación in vitro del efecto alelopático del aceite esencial de Tagetes minuta L. (chincho) sobre la germinación de las semillas de Chenopodium murale L. (cenizo negro) y Cynodon dactylon L. (césped) a nivel de laboratorio Pumisacho Galarza, Andrea Dolores Departamento de Ciencias de la Vida y de la Agricultura Carrera de Ingeniería en Biotecnología Trabajo de titulación, previo a la obtención del título de Ingeniera en Biotecnología Dra. Proaño Tuma, Karina Isabel Ph. D. 5 de marzo de 2021 2 Hoja de resultados de la herramienta Urkund 3 Certificación 4 Responsabilidad de autoría 5 Autorización 6 Dedicatoria A Dios que ha iluminado cada uno de mis pasos, me ha guiado según su Santa Voluntad y me ha sostenido en los momentos difíciles. A mis padres Adriana y Milton, por su apoyo incondicional, su cariño, su paciencia y sus sabios consejos que me han impulsado a seguir. A mi hermana María Isabel, por ser un soporte en mi camino y ayudarme en los momentos difíciles. A mis tíos, por su cariño y sus palabras de aliento que me han ayudado a continuar. Andrea Dolores Pumisacho Galarza 7 Agradecimientos A mis padres, Adriana y Milton, les agradezco por apoyarme en los retos que se presentaron durante la elaboración de la tesis y por darme sus consejos en base a la experiencia que han tenido. Su apoyo moral ha sido muy importante durante toda mi carrera universitaria y me ha impulsado a seguir en cada dificultad que se ha presentado. A la Universidad de las Fuerzas Armadas - ESPE y a mis profesores por educarme y formarme como profesional. Por impartirme nuevos conocimientos en cada uno de los periodos académicos. A mi tutora de tesis, Dra. Karina Proaño, por permitirme ingresar al laboratorio de Biotecnología Vegetal. Le agradezco por su paciencia, apoyo, orientación y por el tiempo que me ha brindado durante la elaboración del presente estudio. A mi cotutora, Dra. Blanca Naranjo, por guiarme en el proceso de la realización de mi tesis. Agradezco su paciencia y el tiempo que otorgó a este trabajo de titulación. A mis compañeros de proyecto de investigación, Paul y Emilia, gracias por su colaboración en la realización de este estudio, A mis amigos, Giss, Domi, Paul, Isra, Jenny y Melani por su apoyo moral durante toda la carrera universitaria. 8 Índice de Contenido Evaluación in vitro del efecto alelopático del aceite esencial de Tagetes minuta L. (chincho) sobre la germinación de las semillas de Chenopodium murale L. (cenizo negro) y Cynodon dactylon L. (césped) a nivel de laboratorio ......................................... 1 Hoja de resultados de la herramienta Urkund .................................................................. 2 Certificación..................................................................................................................... 3 Responsabilidad de autoría ............................................................................................. 4 Autorización..................................................................................................................... 5 Dedicatoria ...................................................................................................................... 6 Agradecimientos .............................................................................................................. 7 Índice de Contenido ......................................................................................................... 8 Índice de Tablas ............................................................................................................ 12 Índice de Figuras ........................................................................................................... 13 Índice de Ecuaciones .................................................................................................... 15 Resumen ....................................................................................................................... 17 Abstract ......................................................................................................................... 18 Capítulo 1: Introducción ................................................................................................. 19 Formulación del Problema ......................................................................................... 19 Justificación del Problema ......................................................................................... 21 Objetivos .................................................................................................................... 22 Objetivo General .................................................................................................... 22 9 Objetivos Específicos ............................................................................................. 22 Marco Teórico ............................................................................................................ 23 Especies del género Tagetes en Ecuador y su utilidad ........................................... 23 Tagetes minuta L. (chincho) ................................................................................... 25 Especies de malezas Chenopodium murale y Cynodon dactylon y su efecto en los cultivos agrícolas .................................................................................................... 26 Efecto alelopático de las plantas ............................................................................ 30 Metabolitos secundarios ......................................................................................... 32 Aceites esenciales .................................................................................................. 35 Métodos de identificación de metabolitos secundarios ........................................... 36 Capítulo 2: Materiales y Métodos .................................................................................. 39 Participantes .............................................................................................................. 39 Localización ............................................................................................................... 39 Duración del Trabajo de Titulación ............................................................................. 39 Diseño experimental .................................................................................................. 39 Recolección del material vegetal ................................................................................ 40 Extracción del aceite esencial de Tagetes minuta L. (chincho) a través de arrastre de vapor .......................................................................................................................... 41 Determinación de los principios activos del aceite esencial de Tagetes minuta L. (chincho) por cromatografía en capa fina ................................................................... 42 10 Ensayo para determinar el efecto alelopático del aceite esencial de Tagetes minuta L. en la germinación de Chenopodium murale L. y Cynodon dactylon L. ....................... 43 Análisis estadístico .................................................................................................... 46 Capítulo 3: Resultados .................................................................................................. 48 Obtención del aceite esencial de Tagetes minuta L. .................................................. 48 Separación del aceite esencial de Tagetes minuta L ................................................. 49 Evaluación del efecto alelopático del aceite esencial de Tagetes minuta L. en la germinación de las semillas de Cynodon dactylon L. y Chenopodium murale L. ........ 50 Análisis de la variable de germinación en las semillas de Chenopodium murale y Cynodon dactylon ................................................................................................... 53 Análisis de la variable longitud de brote en las semillas de Chenopodium murale y Cynodon dactylon ................................................................................................... 58 Determinación del porcentaje del efecto alelopático del aceite esencial de Tagetes minuta en la germinación de Chenopodium murale y Cynodon dactylon ................ 64 Concentración efectiva de la disolución del aceite esencial de Tagetes minuta ...... 66 Capítulo 4: Discusión ..................................................................................................... 70 Extracción del aceite esencial de Tagetes minuta L. .................................................. 70 Cromatografía en capa fina del aceite esencial de Tagetes minuta L. (chincho) ........ 71 Evaluación del efecto alelopático del aceite esencial de Tagetes minuta L. (chincho)72 Capítulo 5: Conclusiones ............................................................................................... 78 Capítulo 6: Recomendaciones ....................................................................................... 80 11 Capítulo 7: Bibliografía .................................................................................................. 81 Capítulo 8: Anexos ...................................................................................................... 107 12 Índice de Tablas Tabla 1 Clasificación taxonómica del género Tagetes ................................................... 23 Tabla 2 Clasificación taxonómica de Chenopodium murale .......................................... 27 Tabla 3 Clasificación