Universidade Federal de Minas Gerais Instituto de Ciências Biológicas Programa de Pós-Graduação em Parasitologia Angiostrongylus vasorum (Nematoda: Protostrongylidae): Aspectos do desenvolvimento dos estádios evolutivos em Melanoides tuberculata (Caenogastropoda: Thiaridae), Bradybaena similaris (Stylommatophora: Xanthonychidae) e Sarasinula marginata (Soleolifera: Veronicellidae) Cynthia de Paula Andrade Belo Horizonte - MG 2012 Cynthia de Paula Andrade Angiostrongylus vasorum (Nematoda, Protostrongylidae): Aspectos do desenvolvimento dos estádios evolutivos em Melanoides tuberculata (Caenogastropoda: Thiaridae), Bradybaena similaris (Stylommatophora: Xanthonychidae) e Sarasinula marginata (Soleolifera: Veronicellidae) Dissertação apresentada ao Departamento de Parasitologia do Instituto de Ciências Biológicas da Universidade Federal de Minas Gerais, como parte dos requisitos necessários para a obtenção do grau de Mestre em Parasitologia Área de Concentração: Helmintologia Orientadora: Profª. Drª. Teofânia Heloísa Dutra Amorim Vidigal1 Co-orientador: Prof. Dr. Walter dos Santos Lima2 Colaboradores: Lanuze Rose Mozzer Soares2, Lângia Colli Montresor3 1- Laboratório de Malacologia e Sistemática Molecular, Depto. Zoologia, UFMG 2- Laboratório de Helmintologia Veterinária, Depto. Parasitologia, UFMG, 3- Laboratório de Malacologia, Instituto Oswaldo Cruz - IOC, Fiocruz, RJ. Belo Horizonte – MG 2012 Digo: o real não está na saída nem na chegada: ele se dispõe para a gente é no meio da travessia. Guimarães Rosa AGRADECIMENTOS Agradeço especialmente à minha família, Mamãe, Papai e Claudinha que sempre me apoiaram e incentivaram. Pessoas de importância inestimável em minha vida! Muito obrigada pelo amor incondicional, carinho e paciência! Sem vocês eu nada seria! Admiro e amo vocês! Ao meu namorado, Brener Cunha Carvalho, que além do carinho, cumplicidade e amizade participou ativamente do meu trabalho me ajudando na bancada, inclusive passando finais de semana e noites de carnaval digerindo lesminhas, cuidando de “luluscos” e coletando “Megaloganso ganso gaster”! A sua ajuda, companheirismo, dedicação e paciência foram fundamentais para que eu chegasse até aqui! Muito obrigada por tudo! Amo você com frenesi! À professora Teofânia H.D.A. Vidigal que me aceitou em seu laboratório quando eu ainda estava no primeiro período de graduação. Agradeço por toda a sua dedicação, amizade, puxões de orelha e cafezinhos. Muito obrigada por todos os ensinamentos, “Teo”! Ao professor Walter Lima que aceitou me co-orientar me abrindo as portas de seu laboratório. Professor, obrigada pela atenção, conselhos e incentivo! Aos queridos do Laboratório de Malacologia, principalmente à “Lú” (Luciana Gerhard) pelo ombro amigo, por toda a paciência, carinho, conselhos e por toda a ajuda nos experimentos. Muito obrigada por tudo, querida! Ao “Dani” (Daniel Coscarelli) pelas boas risadas que aliviaram o cansaço do mestrado, e pelas ótimas cantorias, “Índiaaa a sua imagemmm...”. À Lângia Colli Montresor pela atenção e colaboração tão importantes na realização desse trabalho. À “Dalvinha” (Dalva Luz), ao Juliano Michel e à Eloísa Sari pela ajuda e momentos de descontração no laboratório. A todas as pessoas que passaram pelo Laboratório de Malacologia e que deixaram um pouco de si: Ana Teixeira, Luciana Seabra, Karyne Souza, Eliane Silveira, Bárbara Esteves, Lorena Falabella, Lígia Saback, Brunah Schall, Natália Murta, Cláudia Maia, Lúcia Costa, Vítor Domingues, Fabíola Ladeira, Tulaci Bhakti, Daniela Brescia, Mariana Vaz, Bruna Araújo e Fábio Wiggers. Agradeço, com muito carinho, à “Lala” (Lanuze Mozzer) que, além da sua amizade, me ensinou muito sobre A. vasorum e auxiliou na realização desse trabalho. Agradeço também ao “Tutu” (Aytube Coaglio) e à Raquelzinha (Raquel Milagre) pela amizade, boas risadas e lanchinhos da tarde no Laboratório de Helmintologia. Agradeço a todos os professores que me incentivaram ao longo da minha vida acadêmica, principalmente ao professor Alan Lane de Melo por quem tenho um enorme carinho, respeito e admiração. Além disso, o agradeço pelas parcerias bem sucedidas realizadas durante minha jornada. Ao professor Nelson Martins da Escola de Veterinária, UFMG pela colaboração no início do meu mestrado, pela atenção, paciência e carinho que recebi em seu laboratório. Aos queridos amigos “Gabí” (Gabriella Vieira) pela amizade maravilhosa que nasceu durante a graduação e pela ajuda por coletar caracóis em seu jardim! Ao amigo Antônio Mendes pelo carinho, atenção e conselhos tão importantes para mim. Ao Anderson do Carmo pela ótima companhia de bandejão. Ao Samuel Siriani de Oliveira pelo apoio e incentivo para o meu ingresso no mestrado. Ao “Marcão” (Marcos Hanashiro) pelas conversas descontraídas durante os cafés da tarde. “Marinão” (Marina Lamas Pucci) pelo enorme carinho e amizade. Ao Hudson Alves Pinto pela amizade, ensinamentos e pelas colaborações realizadas. Aos colegas do Laboratório de Aracnologia, “Doug” (Guilherme de Azevedo), Ivan Magalhães e Gracielle Braga pelo carinho. Agradeço ao Motel Sunny Day no nome da aluna Rúbia, às técnicas do departamento de Botânica Elenice da Silva e Maria do Socorro e a “Tia Cidinha” de Lavras, por terem aberto as portas de suas casas para que eu pudesse coletar caracóis e lesmas em seus jardins! Aos técnicos, Zenildo Ferreira, Viviane Costa, Valéria Catarina e Jorge Costa Ferreira. Ao professor Marcelo Pelajo-Machado e à Ester Mota do departamento de Patologia, Fiocruz/RJ pela confecção das lâminas histológicas. À Sumara Aparecida e Sibele Abreu, secretárias da Pós-graduação em Parasitologia, pela paciência e pelo carinho que sempre recebi. Aos professores do curso de Pós-graduação em Parasitologia da UFMG, nas pessoas dos seus coordenadores, professora Érika Martins Braga e professor Marcos Horácio Pereira pelos ensinamentos. À FAPEMIG, a instituição de fomento que contribuiu para a realização desse trabalho. Agradeço a todas as pessoas que direta ou indiretamente me ajudaram durante essa árdua, porém prazerosa jornada! Muitíssimo Obrigada!!!! SUMÁRIO LISTA DE ABREVIATURAS E SIGLAS ............................................................... vii LISTA DE FIGURAS .............................................................................................. viii LISTA DE TABELAS................................................................................................. x RESUMO ................................................................................................................. xii ABSTRACT ............................................................................................................ xiv 1 INTRODUÇÃO ...................................................................................................... 16 1.1 Nematódeos do gênero Angiostrongylus .......................................................... 16 1.2 Angiostrongylus vasorum ................................................................................. 18 1.3 Distribuição geográfica de A. vasorum ............................................................. 19 1.4 Angiostrongilose canina .................................................................................. 20 1.5 Ciclo biológico de A. vasorum ......................................................................... 21 1.6 Hospedeiros definitivos de A. vasorum ............................................................ 23 1.7 Hospedeiros intermediários de A. vasorum....................................................... 25 1.8 Sobre os moluscos .......................................................................................... 27 1.8.1 Aspectos gerais ........................................................................................ 27 1.8.2 Moluscos como hospedeiros de helmintos ................................................. 28 1.8.3 Sistema interno de defesa dos moluscos .................................................... 29 1.8.4 Aspectos histológicos de moluscos infectados por helmintos ................... 31 1.8.5 Caracterização dos moluscos utilizados como modelo experimental ........... 32 1.8.5.1 M. tuberculata Ordem: Caenogastropoda Família: Thiaridae ................ 33 1.8.5.2 B. similaris Ordem: Stylommatophora Família: Xanthonychidae .......... 35 1.8.5.3 S. marginata Ordem: Soleolifera Família: Veronicellidae .................... 37 2 JUSTIFICATIVA ................................................................................................ 39 3 OBJETIVOS........................................................................................................ 40 4 MATERIAL E MÉTODOS ................................................................................ 41 4.1 Obtenção de larvas de primeiro estádio (L1) de A. vasorum ............................. 41 4.2 Coleta de moluscos .......................................................................................... 41 4.3 Manutenção dos moluscos em laboratório ....................................................... 42 4.4 Infecção experimental de M. tuberculata, B. similaris e S. marginata com larvas de primeiro estádio (L1) de A. vasorum .............................................................. 44 4.5 Análise de suscetibilidade e dos métodos de recuperação larvar das diferentes espécies de moluscos utilizadas ......................................................................... 45 4.6 Análise histológica de B. similaris, S. marginata e M. tuberculata experimentalmente infectados com L1 de A. vasorum ......................................